Albumīns un megalīns, kas jums jāzina

Kontaktpersona:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ⅱ daļa: Albumīna apstrāde nierēs — no agrīniem atklājumiem līdz pašreizējām koncepcijām

Jakubs Gbureks, Boguslavs Konopska un Kšištofs Gols ˛ab

KLIKŠĶINIET ŠEIT, LAI DALĪTIES Ⅰ // KLIKŠĶINIET ŠEIT, LAI DALĪTIES

cistanchevar ārstētnieresslimībauzlabotnieru funkcija

3.3. Cubilin

Cubilintika identificēts kāalbumīnsreceptoru autors Birn et al. 2000. gadā [64]. Autori izolētikubilīnsno žurku nieres sukas apmales membrānām, izmantojot afinitātes hromatogrāfiju ar imobilizētu albumīnu. Viņi arī noteica kompleksa disociācijas konstanti pēc virsmas plazmonu rezonanses (Kd=0.63 uM) un pierādīja, ka inbred suņi ar funkcionālu defektukubilīnsun pelēm ar inhibētumegalīnsekspresija izdala ievērojamu daudzumu albumīna ar urīnu. Turklāt tie arī norādīja uz abu receptoru savstarpējo mijiedarbību albumīna endocitozē.

Cubilinir ekstracelulārs glikoproteīns ar molekulmasu aptuveni 460 kDa. Sākotnēji tas tika identificēts kā teratogēno antivielu antigēns, kas ražots trušiem pēc nieru sukas apmales injekcijas. Sākotnēji pazīstams kā glikoproteīns 280 (gp280), tas atradās proksimālajās nieru kanāliņos un dzeltenuma maisiņa epitēlijā. Tās izpausme tika konstatēta arī ileumā, dzemdē un placentā. Sākotnēji šim proteīnam netika attiecināti ligandi. Vēlāki pētījumi to parādījakubilīnsbija identisks tievajās zarnās esošā faktora-vitamīna B12 (IF-B12) kompleksa receptoram. Tam tika piešķirta receptoru proteīna funkcija [65]. Cilvēkskubilīnsgēns atradās 10p12.{2}}p13 hromosomā. Šis proteīns sastāv no 110 aminoskābju N-gala daļas, kam seko 8 epidermas augšanas faktoram līdzīgi (EGF līdzīgi) domēni un 27 domēni, kas līdzīgi komplementa C1r/C1s, ar epidermas augšanas faktoru saistīta jūras ežu proteīna (Uegf) daļa. ) un kaulu morfogēno proteīnu1 (CUB).Cubilinnav transmembrānas domēna. N-gals ir atbildīgs par olbaltumvielu iegulšanu membrānā. Katrs CUB domēns sastāv no 110 aminoskābju atlikumiem. CUB domēnu struktūra sastāv no diviem slāņiem no piecām pretparalēlām loksnēm, kuras arī savieno -struktūras. Tie veido molekulas konservatīvāko apgabalu un ir atbildīgi par ligandu saistīšanu. Papildusalbumīnsun IF-B12, dzelzi saturošie proteīni (transferrīns, hemoglobīns, mioglobīns), apolipoproteīns Al un D vitamīnu saistošais proteīns var būt saistīti arī 56,59,66,67I. Albumīna saistīšanās ar in vitro ekspresiju analīzekubilīnsfragmenti ļāva identificēt saistošās vietas CUB domēnos 6-8 [68]. Šīs vietas, visticamāk, daļēji pārklājas ar hemoglobīna saistīšanās vietām, kā parādīts konkurences pētījumā, izmantojot HK-2 šūnas (cilvēka nieres proksimālais kanāliņos, pieaugušais vīrietis, iemūžināta papiloma) [69].

Cubilinnav pilnībā neatkarīgs endocītiskais receptors. Lai nodrošinātu pareizu membrānas lokalizāciju un stabilitāti, tai ir jāsadarbojas ar AMN proteīnu. Turklāt šis proteīns ir atbildīgs parkubilīnsinternalizācija. Nesen tika pierādīts, ka FXNPXF secība AMN citoplazmas domēnā ir funkcionāli aktīva un veicina kompleksa sekvestrāciju, mijiedarbojoties ar adaptera proteīniem: invalīdu proteīnu -2 (Dab2) un autosomāli recesīvo holesterīna proteīnu (ARH). CUBAM internalizācija var notikt arī saistībā armegalīns[55,70]. Megalīnsšķiet, ka ir atbildīgs parkubilīnsšūnu membrānas uzturēšana. Vienlaicīga izdalīšanās nokubilīnsno membrānas un tās zudums ar urīnu tika konstatēts pacientam ar Donnai-Barrow/FOAR sindromu (Facio-Oculo-Acustico-Renal Syndrome) šī receptora gēna funkcionālās mutācijas dēļ, kas izraisa tā citoplazmas aizturi [71].

CUBAM galvenā loma cauruļveidaalbumīnsuzņemšana tika pierādīta jaunākajos pētījumos ar pelēm ar nierēm specifisku izsitumukubilīnsunmegalīns, kurā tika novērota mērena tubulārā albumīnūrija [54,72]. Šo novērojumu apstiprināja arī ģenētiskā un fenotipiskā analīze pacientiem ar Imerslunda-Grēsbeka sindromu, ko izraisīja mutācijaskubilīnsvai AMN gēns. Abos gadījumos albumīns un citi ligandikubilīnstika zaudēti urīnā [58].

Interesanti,kubilīnsunmegalīnsir konstatēti arī žurku un cilvēku glomerulos saskaņā ar modeli, kas ir līdzīgs tam, par kuru ziņotsmegalīns. Cubilinatklāja gan virsmas, gan intracelulāro ekspresiju podocītos [73]. Turklāt,kubilīnsmRNS ekspresija tika konstatēta mezangiālajās šūnās, bet amnija neesamība to nozīmējakubilīnsnav pilnībā funkcionāls šajās šūnās. Tomēr,albumīnsendocitoze bija ievērojami traucēta inducējamā stāvoklīmegalīnsknockdown apstākļi stabili transducētās mezangiālās šūnās |74]. Šie atklājumi var būt svarīgi, lai labāk izprastu glomerulu patoloģijas.

cistanche vīriešu priekšrocības

3.4. Megalīns

Megalīnstika identificēts kāalbumīnsreceptoru autori Cui et al. 1996. gadā [75]. Pētījums tika veikts in vivo, injicējot žurku proksimālās kanāliņos ar albumīna šķīdumiem, kas marķēti ar koloidālo zeltu vai 125I joda izotopu. Eksperimentā tika noteikta daudzu savienojumu ietekme uz šo proteīnu cauruļveida uzņemšanu. Ar receptoriem saistītā proteīna (RAP) ievadīšana, samazināts citohroms C un gentamicīns pilnībā inhibēja marķētā albumīna reabsorbciju kanāliņos. Šiem ligandiem ir raksturīga augsta afinitāte pretmegalīns, un to klātbūtne efektīvi kavē albumīna saistīšanos caur šo receptoru. Tas pats attiecās uz EDTA, Ca2 plus jonu helātu, kas arī kavēja uzņemšanu. Tas norādīja, kamegalīnsveicina šī proteīna tubulāro reabsorbciju. Šie secinājumi tika apstiprināti ar afinitātes hromatogrāfiju uz kolonnas ar imobilizētumegalīns.

Megalīnssākotnēji tika atklāts kā antigēns Heymann tipa membrānas nefropātijā un saukts par glikoproteīnu 330 (gp 330). 1994. gadā pēc veiksmīga klonēšanas mēģinājuma tā struktūra bija labāk zināma, un nosaukums tika mainīts uz šobrīd lietoto [76. Cilvēksmegalīnsgēns atradās 2g24-g31 hromosomā.Megalīnsir liels transmembrānu proteīns, kas pieder zema blīvuma lipoproteīnu receptoru saimei. Proksimālajās kanāliņos,megalīnsir atrodams apikālajā membrānā un ar klatrīnu pārklātajās endocītiskajās vezikulās. Šī proteīna molekulmasa ir 600 kDa, un tas sastāv no aptuveni 4600 aminoskābju atlikumiem. Themegalīnsmolekula satur lielu N-gala ekstracelulāro domēnu, vienu transmembrānu domēnu un īsu C-termināla citoplazmas fragmentu. Ekstracelulārajā domēnā ir četras jomas, kas bagātas ar cisteīnu, un tas ir atbildīgs par ligandu saistīšanos. Vairāki secības atkārtojumi, kas ir līdzīgi epidermas augšanas faktoram (EGF) un ar cisteīnu nabadzīgs fragments, kas satur YWTD motīvu, atdala ligandu saistošo reģionu no iegulšanas daļas. Signalizācijas secība ir atbildīga par liganda disociāciju skābā endosomu vidē. Citoplazmas daļa satur trīs NPXY motīvus, kas ierosina albumīna endocitozes procesu, koncentrējot receptorus pārklātajās bedrēs caur invalīdu proteīna-2(Dab2) adaptera proteīnu [77]. Šī adaptera piesaiste savukārt ir atkarīga no fosforilācijas, ko katalizē proteīnkināzes B (Aktl un Akt2) [78, 79].

Megalīnsir arī spēja saistīt daudzas citas olbaltumvielas. Papildus albumīnam, tā ligandi cita starpā ir: apolipoproteīni (B, E, HD), vitamīnu transportēšanas proteīni (A, D, B12), hormoni (angiotenzīns I, epitēlija augšanas faktors, leptīns), fermenti un to inhibitori (lizocīms, plazminogēns). un citi [80]. Albumīna gadījumā receptoru molekulas saistīšanās vietas vēl nav kartētas. Tas arī internalizē CUBAM kompleksu un tā ligandus, tostarp albumīnu. Izveidotie kompleksi tiek internalizēti, veidojoties agrīnām endosomām. Pēc endosomu vides paskābināšanas komplekss disociējas un brīvais receptors tiek reciklēts uz šūnas virsmu caur blīviem apikālajiem kanāliņiem [59,66,67,81].

Ir vērts pieminēt, ka augsts glikozes līmenis regulēmegalīns-mediēta albumīna endocitoze nieru proksimālajās kanāliņu šūnās. Paaugstināts glikozes līmenis plazmā inhibējamegalīnsekspresija un attiecīgi albumīna endocitoze [61].

cistanche vīriešu priekšrocības

3.5. Imūnglobulīna fragmenta jaundzimušo Fc receptors

Nesenie pētījumi par albumīna uzsūkšanos nierēs norāda uz jaundzimušo Fc receptoru (FcRn) svarīgo lomu albumīna atgūšanas procesā no filtrāta un aizsargājot šo proteīnu pret intracelulāru degradāciju. FcRn ir heterodimērs transmembrānas proteīns, kas pēc savas struktūras ir līdzīgs galvenajām histokompatibilitātes kompleksa (MHC) I klases molekulām. Tas ir izplatīts endotēlija un epitēlija šūnās. Tās klātbūtne tika apstiprināta glomerulārajos podocītos un proksimālajos kanāliņos. Tas spēj neatkarīgi saistīt albumīnu un imūnglobulīnus IgG skābā vidē (pH 5-6). Paaugstinot pH vērtību virs 7, no receptora izdalās ligandi [82]. FcRn podocītos atrodas vezikulās, kas pieder skābajam endosomālajam nodalījumam, un ir atbildīgs par imūnglobulīnu un albumīna saistīšanos, kas izgāja caur glomerulāro kapilāru endotēliju filtrācijas telpā. Filtrētās olbaltumvielas absorbē podocīts caur endocitozi un/vai pinocitozi un pēc tam saista ar FcRn pie endosomu skābā pH. Endocītiskās pūslīši, kas piekrauti ar olbaltumvielām, tiek pakļauti transcitozei virzienā uz Bowman kapsulas lūmenu. Paaugstināta pH apstākļos proteīna-receptoru komplekss tiek atdalīts, un neskartais proteīns tiek atbrīvots no šūnas primārajā filtrātā. Šim procesam ir paredzēts aizsargāt šauras filtrācijas spraugas no aizsērēšanas ar lieliem proteīniem [83,84]. Daļa albumīna, kas filtrēta un reabsorbēta proksimālajās kanāliņos, nav pakļauta degradācijai cauruļveida epitēlija lizosomās un, visticamāk, tiek atgūta transcitozes procesā. Šajā teorētiskajā modelī FcRn saistās ar albumīnu, kas izdalās no tā receptoriem, iespējams,megalīns/kubilīnskomplekss skābā endosomu vidē, un pēc tam caur transcitozi tiek novirzīts uz cauruļveida epitēlija šūnu bazālo vietu, kur pH paaugstināšanās rezultātā izdalās intersticiālajos audos [85]. Lai gan, ņemot vērā pašreizējos pētījumu rezultātus, notiek albumīna atgūšana ar transcitozi, iesaistot FcRn proksimālajos kanāliņos, tā ir margināla parādība normālai albumīna homeostāzei organismā [56].

cistanche vīriešu priekšrocības