E vitamīna un etiltiosulfanilāta kompleksās iedarbības antioksidanta iedarbība žurku aknās un nierēs hroma (VI) izraisīta oksidatīvā stresa apstākļos
Mar 25, 2022
Bohdans Kotiks1,*, Ruslana Iskra1, Vira Lubunets2
Abstract:Mūsu pētījuma mērķis bija izpētīt E vitamīna un etiltiosulfanilāta (ETS) kompleksās iedarbības efektivitāti un ieguvumus uz pro/antioksidantu sistēmas stāvokli aknās un.nieresžurkām Cr(VI) izraisīta oksidatīvā stresa apstākļos. Žurkas tika sadalītas 8 grupās.
Grupas saņēma: I (kontrole) - fizioloģiskais šķīdums (150 ul) 7 dienas; II – eļļas šķīdums (1 ml) 14 dienas; III, IV, VII, VIII - K2Cr2O7 (2,5 mg Cr(VI)/kg ķermeņa svara (bw)) 7 (III, IV) un 14 (VII, VIII); V - E vitamīns (20 mg/kg ķermeņa masas) 14 dienas; VI, VII, VIII - E vitamīns kompleksā ar ETS (100 mg/kg ķermeņa masas) 14 dienas. Rezultāti liecina, ka K2Cr2O7 izraisīja Cr (VI) izraisītu oksidatīvo stresu lipīdu peroksidācijas (LP) procesu aktivizēšanas dēļ. Cr(VI) darbība 7 dienas izraisīja antioksidantu aizsardzības sistēmas (AOS) kompensējošu aktivāciju abos audos. Tomēr ilgāku Cr (VI) darbību pavadīja AOS enzīmu aktivitātes un GSH satura samazināšanās. E vitamīna un ETS kompleksā iedarbība samazināja Cr (VI) izraisītā oksidatīvā stresa intensitāti abos žurku audos. Mūsu rezultāti liecina par pozitīvām E vitamīna un ETS antioksidanta īpašībām Cr (VI) toksicitātes apstākļos.
Atslēgvārdi:žurkas; antioksidantu sistēma; oksidatīvais stress; E vitamīns; etiltiosulfanilāts; kālija bihromāts; peroksidācija.
Sazināties:ali.ma@wecistanche.com
Noklikšķiniet, lai ievadītu tvertniurdunierēm
1. Ievads
Aktīva hroma izmantošana rūpnieciskiem un lauksaimniecības nolūkiem izraisīja ievērojamu Cr saturošu savienojumu uzkrāšanos vidē [1-3]. Hroma savienojumi ir viens no visizplatītākajiem piesārņotājiem ūdens un sauszemes ekosistēmās [4-6]. Galvenās nozares, kurās nepieciešams aktīvi izmantot Cr saturošus savienojumus, ir ādas miecēšana, koksnes konservanti, metālu rūpnieciskā metināšana, hromēšana, hromāts un ferohromāta ražošana [1]. Hroms ir dabisks metāls, kas galvenokārt sastopams divās dažādās formās: trīsvērtīgais hroms (Cr(III)) un sešvērtīgais hroms (Cr(VI)). Cr(III) ir pēdējais hroma oksidācijas posms. Trīsvērtīgā hroma forma ir izplatīta visās bioloģiskajās sistēmās, ir termodinamiski stabila, un tai piemīt spēcīgas īpašības koordinācijas savienojumu veidošanai. Sešvērtīgajai formai (Cr(VI)) ir spēcīgas toksiskas un kancerogēnas īpašības, un tā parasti tiek pasniegta kā skābekli saturoši hromātu (CrO42-) un dihromātu (Cr2O72-) savienojumi [1,7]. Cr(VI) savienojumu augstā toksicitāte ir saistīta ar spēju viegli uzsūkties un ātri transportēt šūnās pa sulfātu kanāliem [8,9]. Pēc tam Cr(VI) vairākos posmos pēc iekļūšanas šūnā tiek reducēts līdz Cr(III). Cr(VI) reducēšanās procesā rodas liels skaits reaktīvo skābekļa sugu (ROS) [10,11]. ROS veidošanās aktivizēšana savukārt noved pie oksidatīvā stresa un audu bojājumu attīstības. Cr(VI) reducēšanās procesus pavada arī citotoksicitāte, genotoksicitāte, kancerogenitāte un apoptoze, izmantojot p53 regulējošo gēnu modulāciju [12- 15]. AOS sistēma ir galvenais šķērslis Cr(VI) izraisītā oksidatīvā stresa pretdarbībā [9]. AOS sistēmas fermentatīvie un neenzimātiskie komponenti, piemēram, no GSH un NADPH atkarīgie flavoenzīmi, stimulē un paātrina ļoti toksiskā Cr(VI) reducēšanos līdz daudz mazāk toksiskam Cr(III). Savukārt tādi enzīmi kā SOD, CAT, GP un neenzimātiskais GSH tripeptīds neitralizē daudzus ROS, kas veidojas Cr(VI) reducēšanās laikā [16,17]. Tomēr ilgstošs Cr(VI) izraisīts oksidatīvais stress izraisa AOS sistēmas resursu izsīkšanu un provocē šūnu, audu un oksidatīvo orgānu bojājumus palielināto prooksidantu procesu dēļ [9,18]. Cr(VI) saturoši savienojumi, piemēram, kālija dihromāts (K2Cr2O7) 8 mg/kg ķermeņa svara devā izraisa akūtu hepatotoksicitāti žurkām, jo palielinās nekrotiskie un iekaisuma procesi un AOS sistēmas resursi izsīkst dzīvnieku aknu audos [19] ]. Vienreizēja subkutāna K2Cr2O7 injekcija 10 mg/kg devā arī izraisa Cr(VI) izraisītu oksidatīvo stresu un žurku aknu audu bojājumus, kam seko deģeneratīvas histoarhitektūras izmaiņas un aknu sinusoīdu paplašināšanās. Līdzīga Cr(VI) deva izraisa deģeneratīvas izmaiņas kanāliņu epitēlija šūnās, cistisko kanāliņu paplašināšanos, asinsvadu sastrēgumu, hialīna lējumus un Boumena telpas paplašināšanos.nieresžurkām [14]. K2Cr2O7 izraisīto hepatotoksicitāti un nefrotoksicitāti pavada akūts Cr(VI) izraisīts oksidatīvais stress. Cr(VI) izraisīta toksicitāte īpaši stimulē ROS veidošanos, peroksidācijas procesu hiperaktivāciju, antioksidantu enzīmu aktivitātes kavēšanu, šūnu GSH samazināšanos, kā arī neolbaltumvielu sulfhidrilgrupu izsīkšanu un Cr(VI) uzkrāšanos. aknas unnieresžurkām un pelēm [14,20,21]. Tiek uzskatīts, ka antioksidanta statusa uzturēšana ir svarīgs faktors, lai samazinātu un novērstu Cr(VI) izraisītā oksidatīvā stresa negatīvās sekas [14,22,23]. Cr(VI) neitralizācija tiek veikta, fermentatīvi reducējot līdz Cr(V) un pēc tam pārveidojot Cr saturošos sāļos, piedaloties GR un NADPH. Neenzīmu antioksidanti, piemēram, E vitamīns, askorbīnskābe, N-acetilcisteīns, ķiploku pulveris un GSH, spēj samazināt oksidatīvos bojājumus, ko izraisa K2Cr2O7 [24,25]. E vitamīns tiek uzskatīts par visefektīvāko taukos šķīstošo neenzīmu antioksidantu, kas aizsargā šūnu membrānu no radikāļu izraisītas peroksidācijas, stimulē antioksidantu enzīmu aktivāciju un samazina oksidatīvā stresa intensitāti, ko izraisa smago metālu izraisīta toksicitāte. E vitamīna darbība devā 100 un 125 mg/kg ķermeņa svara attiecīgi 2 un 6 nedēļas samazina K2Cr2O7- izraisīto peroksidācijas procesu līmeni un atjauno GSH saturu un SOD aktivitāti aknās unnieresžurkām [14,19,22]. E vitamīnam devā 125 mg/kg ķermeņa svara piemīt arī antioksidanta un pretiekaisuma īpašības un tas samazina Cr(VI) izraisītas toksicitātes intensitāti aknās unnieresžurkām [22].
Etiltiosulfanilāts pieder pie tiosulfonātu savienojumu klases. Tiosulfonāti ir dabisko bioloģiski aktīvo sēra organisko savienojumu sintētiskie analogi, kas iegūti no ķiplokiem, sīpoliem, brokoļiem un ziedkāpostiem. Tiosulfonāti ir stabilāki nekā to dabiskie analogi, tiem piemīt plašs bioloģisko īpašību klāsts, un tiem raksturīga zema toksicitāte. Daudzi pētnieki pēdējos gados pētīja tiosulfonātu pretvēža, pretiekaisuma, pretsēnīšu, pretmikrobu un imūnmodulējošās īpašības. Tomēr nav pietiekami daudz pētījumu par tiosulfonātu antioksidanta īpašībām. Ir zināms, ka tiosulfonāti spēj modulēt transkripcijas faktorus, kas ir iesaistīti AOS sistēmas gēnu aktivācijā [26,27]. Šo savienojumu antioksidanta iedarbība izpaužas spējā samazināt GSH baseina izsīkuma un tiobarbitūrskābes reaktīvo vielu (TBARS) veidošanās intensitāti žurku aknās oksidatīvā stresa apstākļos [28]. Ir ļoti maz zināms par tiosulfonātu antioksidanta īpašībām smago metālu toksiskās iedarbības rezultātā. Tomēr dabīgajiem sēra organiskajiem savienojumiem bija pozitīva antioksidanta iedarbība pret Cr(VI) izraisīto oksidatīvo stresu [23,29-31]. Mūsu iepriekšējie pētījumi arī liecina, ka etiltiosulfanilātam piemīt antioksidanta īpašības un tas daļēji novērš K2Cr2O7- izraisītā oksidatīvā stresa negatīvās sekas žurku aknu audos [32].
Tāpēc, ņemot vērā E vitamīna, kā arī tiosulfonātu un to dabisko analogu pozitīvās antioksidanta īpašības, mūsu pētījuma mērķis bija izpētīt E vitamīna un etiltiosulfanilāta kompleksās iedarbības efektivitāti un ieguvumus uz pro/antioksidantu sistēmas stāvokli aknās. unnieresžurkām Cr(VI) izraisīta oksidatīvā stresa apstākļos.
2. Materiāli un metodes
Sadaļa «Materiāli un metodes» tika sagatavota pēc analoģijas ar mūsu iepriekšējo publikāciju [32].
2.1. Eksperimentālais dizains.
Savā darbā mēs izmantojām 40 Wistar žurku tēviņus, kas sver 130- 140g. Mēs izveidojām 8 dzīvnieku grupas (5 žurkas katrā grupā): 1 kontroles grupa un 7 eksperimentālās grupas. Visas žurkas tika izmitinātas standarta apstākļos un saņēma standarta barību un dzeramo ūdeni ad libitum.
Neskartas kontroles žurkas I grupā saņēma vienu intraperitoneālu fizioloģiskā šķīduma injekciju (150 µl) vienu reizi dienā 7 dienas. III un IV eksperimentālās grupas dzīvnieki tika intraperitoneāli ārstēti ar K2Cr2O7, kas izšķīdināts 150 µl fizioloģiskā šķīduma (Cr(VI) koncentrācija 2,5 mg/kg ķermeņa svara) attiecīgi 7 un 14 dienas.
II grupa intragastrāli saņēma 1000 µl saulespuķu eļļas šķīduma (preču zīme «Oleina»; DSTU 4492: ISO 14024) vienu reizi dienā 14 dienas un uzreiz pēc tam 7 dienas vienu reizi dienā intraperitoneāli ievadīja fizioloģisko fizioloģisko šķīdumu (150 µl).
V grupa: katru dienu intragastrāli injicēja E vitamīna eļļas šķīdumu devā 20 mg/kg ķermeņa svara 14 dienas un pēc tam uzreiz pēc tam 7 dienas vienu reizi dienā intraperitoneāli ievadīja fizioloģisko fizioloģisko šķīdumu (150 µl).
VI grupa: katru dienu intragastriski injicēja E vitamīna [20 mg/kg ķermeņa svara] un etiltiosulfanilāta (ETS) [100 mg/kg ķermeņa svara] kompleksu eļļas šķīduma 14 dienas un pēc tam tūlīt pēc tam katru dienu intraperitoneāli injicēja 150 µl fizioloģiskā šķīduma 7 dienas.
VII grupa/VIII grupa: saņēma intragastriski kompleksu E vitamīna [20 mg/kg ķermeņa svara] un ETS [100 mg/kg ķermeņa svara] eļļas šķīdumu 14 dienas un pēc tam tūlīt pēc tam saņēma K2Cr2O7 intraperitoneāli katru dienu 2,5 mg devā. Cr(VI)/kg ķermeņa svara dienā 7 dienas/14 dienas.
Visas mūsu darbā veiktās manipulācijas ar dzīvniekiem atbilda Eiropas konvencijas par eksperimentāliem un citiem zinātniskiem mērķiem izmantotu mugurkaulnieku aizsardzību (Strasbūra, 1986) un "Kopīgie ētikas principi eksperimentiem ar dzīvniekiem" (Ukraina, 2001.) noteikumiem. Atļauja veikt pētījumu tika saņemta no Ļvovas Dzīvnieku bioloģijas institūta NAAS Bioētikas komitejas (Protokols Nr. 80).
Darbā tika pētīta tikko sintezētā ETS (etil4- aminobenzoltiosulfonāta) savienojuma kompleksā ar E vitamīnu ietekme uz žurkas ķermeni. ETS tika sintezēts Nacionālās universitātes "Ļvovas Politehnikuma" bioloģiski aktīvo savienojumu tehnoloģijas, farmācijas un biotehnoloģijas nodaļā saskaņā ar protokolu, kas detalizēti aprakstīts rakstā [33, 34].
Pēc dzīvnieku galvas nociršanas, kas notika tiopentāla anestēzijā,nierestika savākti. Visas procedūras ieslēgtasnierestika veiktas 4 grādos. Pētījuma materiāls bija žurku nieru homogenāti, kas sagatavoti uz 0,05 M Tris-HCl buferšķīduma ar pH 7,4 attiecībā 1 g audu un 9 ml buferšķīduma (1:9, svars/tilpums). ) un pēc tam centrifugēja 15 minūtes ar 1000 g. Pēc centrifugēšanas iegūtajos supernatantos tika noteikts GSH saturs, peroksidācijas produktu līmenis un antioksidantu enzīmu aktivitāte.
2.1.1. Dzīvnieku grupas.
Dzīvnieku grupas tika salīdzinātas pēc šādas shēmas (1. attēls). I grupa ir neskarta kontrole attiecībā pret III un IV eksperimentālo grupu, kas nesaņēma eļļas šķīdumu. II grupas kontrole saistībā ar eksperimentālajām V, VI, VII un VIII grupām, kas saņēma eļļas šķīdumu. Mēs reģistrējām III un IV eksperimentālās grupas rādītāju procentuālās izmaiņas (procentos) attiecībā pret I grupu (neskarta kontrole). Mēs arī reģistrējām V, VI, VII un VIII eksperimentālās grupas rādītāju procentuālās izmaiņas attiecībā pret II grupu (eļļas kontrole). Beigu posmā analizējām III/IV eksperimentālo grupu rādītāju procentuālās izmaiņas attiecībā pret I grupu (nebojāta kontrole) un salīdzinājām ar VII/VIII eksperimentālo grupu rādītāju procentuālo izmaiņu attiecībā pret II grupu (eļļas kontrole).
2.2. Apstrāde.
2.1.1. LHP koncentrācija.
LHP (lipīdu hidroperoksīdu) līmeņa mērījumi tika veikti neatbilstoši trihloretiķskābes izraisītu proteīnu izgulsnēšanas un etanola izraisītu lipīdu izgulsnēšanas metodēm.
ieguve [35]. Amonija tiocianāts mijiedarbojas ar lipīdu etanola ekstraktiem un ierosina krāsainu reakciju. Krāsainā produkta absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 480 nm). LHP līmenis (SU/g audu) tika aprēķināts kā starpība starp kontroles un eksperimentālo paraugu.
2.2.2. TBARS koncentrācija.
TBARS (tiobarbitūrskābes reaktīvo vielu) koncentrācijas novērtēšana balstās uz malondialdehīda un tiobarbitūrskābes mijiedarbības principu skābuma un augstas temperatūras apstākļos [35]. Malondialdehīda un tiobarbitūrskābes mijiedarbības rezultāts ir krāsas reakcija. Krāsainā produkta absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 535 nm un λ 580 nm), un TBARS līmenis tika aprēķināts kā nmol MDA/g audu.
2.2.3. Ģimenes ārsta darbība.
GP (glutationa peroksidāzes) fermentatīvās aktivitātes mērīšana tiek veikta GSH klātbūtnē pirms un pēc terciārā butilhidroperoksīda pievienošanas [35]. Novērtējot
GP darbība balstās uz GSH oksidācijas ātruma principu. GSH molekulas SH grupas tiek oksidētas 2-nitrobenzoskābes klātbūtnē. Dinitrofenilanjons veidojas GSH oksidēšanās rezultātā. Krāsainā produkta absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 412 nm), un GP aktivitāte tika aprēķināta nmol GSH/min. × mg proteīna.
2.2.4. GR darbība.
GR (glutationa reduktāzes) fermentatīvās aktivitātes mērījums tika veikts oksidēta glutationa un NADPH klātbūtnē [35]. GR aktivitātes novērtējums balstās uz oksidētā glutationa samazināšanas ātruma principu. Absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 340 nm) 1 minūti 37 grādu temperatūrā. Izzušanas ātruma pazemināšanās ir reakcijas intensitātes rādītājs. GR aktivitāte tika aprēķināta µmol NADPH/min. × mg proteīna.
2.2.5. GSH koncentrācija.
GSH (reducēta glutationa) līmeņa novērtēšana balstās uz dinitrofenilanjonu veidošanās principu (krāsains produkts) pēc 2-nitrobenzoskābes saistīšanās ar GSH molekulas SH grupu [36]. GSH koncentrācijas vērtība ir atkarīga no krāsas reakcijas intensitātes. Krāsainā produkta absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 412 nm), un GSH saturs tika aprēķināts kā mmol GSH/g audu.
2.2.6. SOD darbība.
SOD (superoksīda dismutāzes) fermentatīvās aktivitātes mērījums tika veikts NADH un fenazīna metosulfāta klātbūtnē [36]. SOD aktivitātes novērtējums balstās uz nitrozilā tetrazolija reducēšanas principu. Nitrozilā tetrazolija reducēšanās procesa inhibīcijas intensitāte norāda uz fermentu aktivitātes intensitāti. Absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 540 nm), un SOD aktivitāte tika aprēķināta standarta vienībās uz 1 mg proteīna.
2.2.7. CAT darbība.
CAT (katalāzes) fermentatīvās aktivitātes mērījumi tika veikti molibdēna sāļu klātbūtnē, kas mijiedarbojas ar ūdeņraža peroksīdu [36]. Reakcijas rezultātā izveidojās krāsains produkts. Krāsainā produkta absorbcijas reģistrēšana tika veikta spektrofotometriski (λ 410 nm), un CAT aktivitāte tika aprēķināta mmol / minūtē × 1 mg proteīna.
2.2.8. Olbaltumvielu koncentrācija.
Kopējā proteīna koncentrācija audu homogenātos tika mērīta ar Lowry metodi [37], izmantojot komplektus "Simko LTD" (Ukraina, Ļvova). Visu absorbcijas vērtību mērīšana tika veikta ar spektrofotometru "Unico" 1205 (ASV).
2.3. Statistiskā analīze.
Visi eksperimentālie dati tika statistiski analizēti ar Microsoft Excel programmatūru, izmantojot vienvirziena dispersijas analīzi (ANOVA) un Tukey-Kramer testu. Visas eksperimentālās vērtības tika aprēķinātas kā vidējās vērtības (M) ± standarta kļūda (SEM) un tika uzskatītas par statistiski nozīmīgām pie P <>
3. Rezultāti un diskusijas
Sadaļa «Rezultāti un diskusijas» tika sagatavota pēc analoģijas ar mūsu iepriekšējo publikāciju [32].
3.1. Oksidatīvā stresa marķieri.
Mēs noskaidrojām, ka kālija dihromāta intraperitoneāla ievadīšana 7 un 14 dienas izraisa oksidatīvā stresa marķieru satura palielināšanos žurku tēviņu aknās un nieru audos. K2Cr2O7 iedarbība ar devu 2,5 mg Cr(VI)/kg ķermeņa svara 7 (III grupa) un 14 dienas (IV grupa) izraisīja ievērojamu TBARS satura palielināšanos dzīvnieku aknās, salīdzinot ar I grupu (kontrole). attiecīgi 69 un 75 procenti (1. tabula). TBARS līmenis bija arī ievērojami paaugstināts III un IV eksperimentālās grupas žurku nieru audos, salīdzinot ar kontroli, attiecīgi par 41 un 46 procentiem. Līdzīga Cr(VI) deva izraisīja ievērojamu LHP koncentrācijas pieaugumu III un IV eksperimentālās grupas žurku aknās, salīdzinot ar I grupu, attiecīgi par 112 un 127 procentiem. LHP līmenis tika ievērojami paaugstināts arī žurku nieru audos pēc 7 (III grupa) un 14 dienām (IV grupa) Cr(VI) iedarbības, salīdzinot ar kontroles grupu, attiecīgi par 39 un 56 procentiem.
Peroksidācijas procesa intensitātes palielināšanās žurku aknās un nierēs ir Cr(VI) izraisīta hidroksilgrupu un superoksīda radikāļu ģenerācijas hiperaktivācija. Cr(VI) izraisīta ROS veidošanās izraisa šūnu membrānas lipīdu komponentu struktūras bojājumus un rezultātā provocē TBARS satura palielināšanos [19,20,38]. Cr(VI) reducēšanas starpprodukti nonāk Fentonam līdzīgās reakcijās, mijiedarbojas ar ūdeņraža peroksīdu un ierosina hidroksilradikāļus [19]. Saskaņā ar literatūru Cr(VI) pastiprina superoksīda radikāļu veidošanās intensitāti, aktivizējot NADPH-oksidāzes [39] un ksantīna-ksantīna oksidāzes enzīmu kompleksus [40].
E vitamīna (V grupa) un E vitamīna intragastrāla ievadīšana kompleksā ar ETS (VI grupa) 14 dienu laikā izraisīja ievērojamu TBARS satura samazināšanos dzīvnieku aknās, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 13 un 16 procentiem (tabula). 1). Neliels TBARS līmeņa samazinājums tika reģistrēts arī V un VI eksperimentālās grupas žurku nieru audos, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 5 un 3 procentiem. LHP saturs bija ievērojami samazināts V un VI eksperimentālajā grupā žurku aknās, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 12 un 16 procentiem. Līdzīgu eksperimentālo grupu žurku nieru audos bija arī ievērojams LHP līmeņa samazinājums, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 10 un 8 procentiem.
TBARS saturs žurku aknās saglabājās II grupas rādītāju līmenī pēc 14 dienu kompleksās pirmapstrādes ar E vitamīnu un ETS ar nākamo Cr(VI) aktīnu 7 dienas (VII grupa). Iepriekšējā kompleksā E vitamīna un ETS ietekme, ko radīja nākamā Cr(VI) iedarbība 14 dienas, izraisīja paaugstinātu TBARS līmeni VIII grupas aknu audos, salīdzinot ar II grupu, par 23 procentiem. Tomēr TBARS satura pieaugums VIII grupas dzīvnieku aknu audos (23 procenti), salīdzinot ar II grupu, bija par 52 procentiem mazāks nekā TBARS satura pieaugums IV grupas žurku aknās (75 procenti), salīdzinot ar I grupu. .
TBARS koncentrācija žurku nieru audos palielinājās pēc 14 dienu sarežģītas pirmapstrādes ar E vitamīnu un ETS ar nākamo Cr(VI) iedarbību 7 (VII grupa) un 14 dienas (VIII grupa), salīdzinot ar II grupu par 21 un Attiecīgi 31 procents. Tomēr TBARS satura pieauguma intensitāte VII grupas (21 procents) un VIII (31 procents) žurku nierēs, salīdzinot ar II grupu, bija par 25 un 21 procentiem zemāka nekā TBARS līmeņa pieauguma procentuālais pieaugums grupu nieru homogenātos. III (46 procenti) un IV (52 procenti) salīdzinājumā ar I grupu.
Sarežģīta pirmapstrāde ar E vitamīnu un ETS ar nākamo Cr(VI) aktīnu 7 dienas (VII grupa) un 14 dienas (VIII grupa) izraisīja LHP satura palielināšanos žurku aknu audos, salīdzinot ar II grupu, par 17 un 52 procentiem. , attiecīgi. Tomēr LHP līmeņa pieaugums VII grupas (17 procenti) un VIII (52 procenti) žurku aknās attiecībā pret II grupu bija par 97 un 75 procentiem zemāks nekā LHP satura procentuālais pieaugums III grupas aknu homogenātos (114 procenti). ) un IV (127 procenti), salīdzinot ar I grupu.
LHP koncentrācija VII un VIII grupas dzīvnieku nierēs ir paaugstināta, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 16 un 31%.
Tomēr LHP satura pieaugums VII grupas (16 procenti) un VIII (31 procents) žurku nierēs, salīdzinot ar II grupu, bija par 23 un 25 procentiem mazāks nekā LHP līmeņa pieaugums procentos III grupas nieru audos (39 procenti). ) un IV (56 procenti) attiecībā pret I grupu.
Literatūras dati liecina, ka E vitamīnam raksturīgas efektīvas antioksidanta īpašības, tas inhibē lipīdu peroksidācijas procesus un samazina ROS līmeni in vitro un in vivo [22]. E vitamīna perorāla lietošana mazina Cr(VI) izraisītu hepatotoksicitāti un samazina TBARS saturu žurku aknās [19]. Iemesls peroksidācijas procesu intensitātes samazinājumam žurku aknu audos var būt arī citas grupas sulfāta antioksidanta īpašība, kas ir ETS molekulas strukturālā sastāvdaļa [32,42,43]. Šai funkcionālajai grupai ir īpašības, kas samazina LHP saturu [41]. S-alkiltiosulfonāti, kas ir ETS sintētiskie strukturālie analogi, kavē ksantīna-ksantīna oksidāzes sistēmas aktivitāti un ROS veidošanos [27]. E vitamīns ir svarīga citoplazmas un šūnu membrānas sastāvdaļa. E vitamīna antioksidanta iedarbība novērš lipīdu autooksidācijas ķēdes reakciju aktivizēšanos, pateicoties peroksila un alkoksīda radikāļu neitralizēšanai. Peroksila radikāļi arī ātrāk reaģē ar E vitamīnu nekā ar šūnu membrānas lipīdiem [14].
Tādējādi Cr(VI) toksiskā iedarbība izraisa TBARS un LHP satura paaugstināšanos dzīvnieku aknās un nieru audos. Tomēr līdzšinējā E vitamīna ietekme ar ETS samazina peroksidācijas procesu intensitāti žurku aknās un nierēs Cr(VI) izraisītā oksidatīvā stresa ietekmē.
3.2. Glutationa antioksidantu sistēma.
GP aktivitāte žurku aknu audos, iedarbojoties ar Cr(VI) 7 (III grupa) un 14 dienas (IV grupa), palielinājās, salīdzinot ar I grupu, attiecīgi par 55 un 15 procentiem (tabula). 2).
Kālija dihromāta intraperitoneāla ievadīšana 7 dienas (III grupa) izraisīja šūnu GSH satura palielināšanos žurku aknu audos par 12 procentiem, salīdzinot ar kontroli (I grupa). GSH līmenis neatšķīrās no kontroles vērtībām III grupas dzīvnieku nierēs (K2Cr2O7 14 dienas). Tomēr pēc 14 dienu Cr(VI) iedarbības (IV grupa) žurku aknās un nierēs GSH kopums samazinājās, salīdzinot ar I grupu, attiecīgi par 34 procentiem un 36 procentiem. Savukārt nieru audu augstā jutība pret Cr(VI) izraisītu toksicitāti var būt par iemeslu ģimenes ārsta inaktivācijai IV grupas dzīvnieku nierēs [1, 16].
Autori arī ierosina, ka GP inaktivācijas mehānisms Cr(VI) toksicitātes apstākļos tiek veikts, piesaistot Cr(VI) enzīma aktīvajai vietai un tiešu kofaktoru-metālu pārvietošanu no aktīvās vietas [25].
GR aktivitāte nemainījās III grupas dzīvnieku aknās salīdzinājumā ar kontroli. Taču 14 dienu Cr(VI) iedarbība izraisīja GR aktivitātes samazināšanos žurku aknu audos dzīvniekiem par 17 procentiem, salīdzinot ar I grupu. GR aktivitātes inhibīcija tika novērota arī dzīvnieku nieru audos pēc 7 (III grupa) un 14 (IV grupa) K2Cr2O7 injekcijas dienas, salīdzinot ar I grupu, attiecīgi par 45 un 43 procentiem.
Mēs pieņemam, ka Cr(VI) izraisīts GSH satura samazinājums var būt iemesls GR nomākšanai abos žurku audos [44-46]. GSH molekulas nodrošina tiešu brīvo radikāļu neitralizāciju, spēlē galveno lomu šūnu antioksidantu aizsardzības mehānismos [47] un ir iesaistītas Cr(VI) reducēšanās procesos [19]. Tāpēc GSH satura samazināšanās Cr(VI) skarto žurku aknās varētu būt sekas intensīvai GSH molekulu izmantošanai ROS un brīvo radikāļu neitralizācijas procesos K2Cr2O7- izraisītā oksidatīvā stresa apstākļos.
Literatūras dati apraksta arī tiešo GR aktivitātes inhibīcijas mehānismu, ko izraisa smago metālu specifiskā saistīšanās ar tiola/tiolāta redokspāri un histidīna atlikumu enzīma reducētās formas katalītiskajā centrā. Tad saistītais metāla jons izraisa izmaiņas FAD izoaloksazīna gredzena izliekumā un tā mikrovides hidrofobitātē. Rezultātā tiek kavēta GR fermentatīvā aktivitāte [48].
E vitamīna (V grupa) un E vitamīna ievadīšana kompleksā ar ETS (VI grupa) izraisīja GSH līmeņa paaugstināšanos žurku aknās, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 15 un 21%. Iepriekšējā kompleksā E vitamīna un ETS ietekme, ko radīja nākamā Cr(VI) iedarbība 7 (VII grupa) un 14 dienas (VIII grupa), izraisīja GSH satura palielināšanos aknu audos, salīdzinot ar II grupu, par 21 un 23 procentiem. , attiecīgi.
Nekonstatējām statistiski nozīmīgu atšķirību GSH satura izmaiņās dzīvnieku audos pēc E vitamīna un E vitamīna ievadīšanas kompleksā ar ETS. Mēs novērojām tikai tendenci paaugstināt GSH līmeni dzīvnieku nierēs pēc 14 dienu ilgas ārstēšanas ar E vitamīnu un E vitamīnu kompleksā ar ETS.
Saskaņā ar literatūru E vitamīnam piemīt hepato- un nefroprotektīvas īpašības pret Cr(VI) izraisītu toksicitāti, tas atjauno GSH saturu un atbalsta AOS enzīmu aktivitāti [14, 19]. Autori arī ziņo, ka tiosulfonāti ir atbildīgi par Nrf2- atkarīgo antioksidantu reaģējošo elementu (ARE) aktivāciju, kas izraisa antioksidantu aizsardzības sistēmas enzīmu aktivizēšanu un brīvo radikāļu attīrīšanu. Tiosulfonāta mediētā ARE aktivācija stimulē gēnu, kas kodē -GCS, aktivitāti. Iespējams, ka līdzīgi mehānismi ir iesaistīti GSH satura palielināšanā ETS ietekmē [26]. Literatūras dati arī norāda, ka ARE stimulācija izraisa GR un GS gēnu ekspresiju. Šiem fermentiem ir galvenā loma GSH molekulu sintēzē un reducēšanā [49].
Tiosulfonāta molekulām ir arī spēja pārveidoties par mono-, di- un trisulfīdiem. Iespējams, ka sēru saturoši tiosulfonātu transformācijas produkti var būt iesaistīti jaunu GSH molekulu biosintēzē [29].
Sarežģīta pirmapstrāde ar E vitamīnu un ETS ar nākamo Cr(VI) aktīnu 7 dienas (VII grupa) un 14 dienas (VIII grupa) uzrādīja tikai tendenci atjaunoties GP un GR aktivitātei žurku aknās. Tomēr šajā gadījumā mēs neatradām statistiski nozīmīgu atšķirību.
Jo īpaši E vitamīna iedarbība (V grupa) un kombinācijā ar ETS (VI grupa) 14 dienas izraisīja GP aktivāciju dzīvnieku nieru audos, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 19 un 22 procentiem. Iepriekšējā E vitamīna un ETS kompleksā iedarbība ar nākamo Cr(VI) iedarbību 7 dienas izraisīja GP aktivitātes pieaugumu par 38 procentiem VII grupas žurku nierēs, salīdzinot ar II grupu (2. tabula). Tomēr GP aktivitātes pieaugums VII grupas žurku nierēs (38 procenti), salīdzinot ar II grupu, bija par 47 procentiem zemāks nekā GP procentuālā hiperaktivācija III grupas žurku nieru audos (85 procenti), salīdzinot ar I grupu.
Savukārt žurku nieru audos GP aktivitāte tika nomākta par 16 procentiem pēc iepriekšējās E vitamīna iedarbības kompleksā ar ETS uz 14 dienām ar nākamo Cr(VI) iedarbību 14 dienas (VIII grupa), salīdzinot ar II grupu. Tomēr GP aktivitātes samazināšanās VIII grupas dzīvnieku nieru audos (16 procenti), salīdzinot ar II grupu, bija par 11 procentiem zemāka nekā GP inaktivācijas procents III grupas žurku nierēs (27 procenti), salīdzinot ar I grupu. GR aktivitātes palielināšanās (8 procenti) tika novērota pēc 14 dienu ilgas kompleksas E vitamīna un ETS iedarbības VI grupas dzīvnieku nieru audos, salīdzinot ar II grupu.
Iepriekšējā kompleksā E vitamīna un ETS ietekme ar nākamo Cr(VI) iedarbību 7 (VII grupa) un 14 dienas (VIII grupa) izraisīja GR aktivitātes samazināšanos žurku nierēs, salīdzinot ar II grupu, par 17 un 36 procentiem. attiecīgi.
Tomēr GR aktivitātes samazināšanās intensitāte VII grupas (17 procenti) un VIII (36 procenti) žurku nieru audos attiecībā pret II grupu bija par 28 un 7 procentiem zemāka nekā GR aktivitātes procentuālā inaktivācija III grupas nieru homogenātos. (45 procenti) un IV (43 procenti), salīdzinot ar I grupu.
Mēs izvirzām hipotēzi, ka daļēju GP aktivitātes stabilizāciju un GR nomākšanas intensitātes samazināšanos žurku nierēs Cr (VI) ietekmē izraisīja E vitamīna un ETS kompleksa antioksidanta iedarbība. Iepriekš aprakstīto pētījumu rezultāti liecināja, ka iepriekšējā E vitamīna un ETS iedarbība mazināja Cr(VI) izraisīto LP procesu intensitāti žurku nierēs. Saskaņā ar literatūru, straujš TBARS, LHP un olbaltumvielu peroksidācijas produktu satura pieaugums ir saistīts ar GSH saistīto AOS enzīmu aktivitātes traucējumiem [50]. Iespējams, ka E vitamīna un ETS kompleksā antioksidanta iedarbība stabilizē GP un GR fermentatīvo aktivitāti, samazinot LHP un TBARS saturu dzīvnieku nieru audos.
Tādējādi K2Cr2O7 intraperitoneāla injekcija 7 dienas izraisa nelielu kompensējošu GP aktivāciju un GSH satura palielināšanos žurku aknās. Neliela GP stimulācija tiek novērota arī pēc 14 dienu Cr(VI) iedarbības. Tomēr 14 dienu K2Cr2O7 iedarbība izraisa aknu GSH kopuma izsīkumu un GR aktivitātes kavēšanu. Cr(VI) izraisīta GSH satura samazināšanās tiek novērsta aknu audos, veicot kompleksu intragastrisku E vitamīna un ETS priekšapstrādi. Cr(VI) darbība 7 dienas izraisa GP kompensējošu aktivāciju un GR nomākšanu žurku nierēs. Savukārt 14 dienu K2Cr2O7 iedarbība izraisa GP, GR inaktivāciju un nieru GSH satura samazināšanos. Iepriekšējā E vitamīna un ETS kompleksā ietekme mazina GR inaktivācijas intensitāti un stabilizē GP aktivitāti žurku nieru audos K2Cr2O7-inducētā oksidatīvā stresa apstākļos.
3.3. Antioksidantu enzīmi.
Intraperitoneāla kālija dihromāta injekcija 7 un 14 dienas izraisīja SOD aktivitātes samazināšanos III un IV grupas dzīvnieku aknu audos, salīdzinot ar I grupu, attiecīgi par 17 un 33 procentiem (3. tabula). SOD aktivācija tika novērota pēc 7 dienu ārstēšanas ar Cr(VI) III grupas žurku nieru audos (21 procents), bet 14 dienu Cr(VI) iedarbība izraisīja SOD fermentatīvās aktivitātes nomākšanu IV grupas dzīvnieku nierēs (18 procenti). ), salīdzinot ar I grupu.
CAT aktivitāte palielinājās par 11 procentiem pēc 7 dienu ilgas Cr(VI) iedarbības, bet 14 dienas pēc K2Cr2O7 ievadīšanas CAT aktivitāte samazinājās par 13 procentiem IV grupas žurku aknu audos salīdzinājumā ar I grupu. Cr(VI) ) toksicitāte 7 dienas izraisīja CAT aktivāciju (par 15 procentiem), bet K2Cr2O7 toksicitāte 14 dienas izraisīja CAT fermentatīvās aktivitātes samazināšanos IV grupas dzīvnieku nieru audos, salīdzinot ar I grupu.
Autori ziņo, ka SOD (aknu un nieru) un CAT (aknu) aktivācijas iemesls III grupas žurku audos var būt antioksidanta gēnu pārmērīga ekspresija vai AOS sistēmas kompensācijas mehānismi pret Cr(VI) izraisītu oksidatīvo stresu [51] ,52].
Literatūras datu analīze arī liecina, ka Cr(VI) ir spēcīgs SOD fermentatīvās aktivitātes inhibitors. Iespējams, šie dati var izskaidrot SOD aktivitātes inhibīciju pēc ilgāka toksiskā Cr (VI) aktīna IV grupas žurku audos (Cr (VI) 14 dienas). Cr(VI) toksiskā iedarbība izraisa SOD fermentatīvās aktivitātes inhibīciju un SOD molekulārās struktūras traucējumus peroksidācijas procesu pastiprināšanās dēļ [53]. Smagie metāli, tostarp Cr(VI), spēj inaktivēt AOS enzīmus pēc tiešas saistīšanās ar attiecīgo enzīmu aktīvo vietu [54]. Pēc tam, kad SOD inaktivācija ir apspiesta, dismutācija apstrādā O2- par H2O2. Tā rezultātā Cr(VI) izraisīta O2- veidošanās stimulēšana un O2- izmantošanas procesu kavēšana var būt AOS enzīmu, tostarp CAT, inaktivācijas cēlonis [55].
Jo īpaši E vitamīns (V grupa) un kombinācijā ar ETS (VI grupa) stimulēja CAT aktivitāti dzīvnieku aknu audos, salīdzinot ar I grupu, attiecīgi par 15 un 33 procentiem. Bija arī iespējama CAT aktivācija V un VI eksperimentālās grupas žurku nierēs, salīdzinot ar II grupu, attiecīgi par 23 un 28 procentiem (3. tabula).
Sarežģīta pirmapstrāde ar E vitamīnu un ETS ar nākamo Cr(VI) aktīnu 7 dienas (VII grupa) un 14 dienas (VIII grupa) izraisīja CAT aktivitātes palielināšanos žurku aknu audos, salīdzinot ar II grupu, par 17 un 9 procentiem. attiecīgi. CAT aktivācija tika novērota arī VII grupas žurku nierēs (13 procenti), salīdzinot ar II grupu. Tomēr CAT fermentatīvā aktivitāte VIII grupas dzīvnieku nieru audos saglabājās II grupas rādītāju līmenī.
Literatūras dati liecina, ka E vitamīns novērš SOD, CAT un citu AOS enzīmu enzīmu aktivitātes samazināšanos peļu un žurku audos oksidatīvā stresa apstākļos [56,57]. E vitamīns arī mazina Cr(VI) izraisīto oksidatīvo stresu žurku sēkliniekos, atjaunojot SOD un CAT aktivitāti un samazinot LP procesu intensitāti [58].
Tiosulfonāti ir iesaistīti no Nrf{0}}atkarīgā AOS gēnu stimulācijas aktivācijā [26]. Nrf2 stimulēšana savukārt palielina CAT kodējošo gēnu ekspresiju [59]. Allicīns, viens no dabiskajiem tiosulfonātu analogiem, ir iesaistīts gēnu aktivizēšanā, kas ir atbildīgi par SOD, CAT un Nrf2 ekspresiju [60]. Iespējams, ka iepriekš minētās E vitamīna, tiosulfonātu un to dabisko analogu antioksidanta īpašības var būt iemesls CAT fermentatīvās aktivitātes atjaunošanai Cr (VI) izraisītā oksidatīvā stresa ietekmē.
4. Secinājumi
Ir maz zināms par tiosulfonātu antioksidanta īpašībām. Ir arī pietiekami daudz informācijas, kas apraksta tiosulfonātu aizsargājošās īpašības pret smago metālu izraisītu toksicitāti dzīvnieku organisma audos. Mūsu iepriekšējie pētījumi liecina, ka ETS pirmapstrāde var būt efektīva, lai koriģētu Cr (VI) izraisītu aknu toksicitāti žurku organismiem. Mēs pieņemam, ka turpmāki pētījumi par ETS antioksidanta īpašībām kombinācijā ar antioksidantu savienojumiem un šūnu reducētājiem ir svarīgi, lai labāk izprastu tiosulfonātu lomu smago metālu izraisītā oksidatīvā stresa novēršanas mehānismos.
Iegūto rezultātu vispārinājums liecina, ka K2Cr2O7 darbība izraisa Cr(VI) izraisītu hepatotoksicitāti un nefrotoksicitāti, ko izraisa LP procesu intensifikācija un LHP un TBARS veidošanās paaugstināšanās abos dzīvnieku audos. AOS sistēma ietver kompensācijas mehānismus, lai neitralizētu Cr (VI) izraisīto oksidatīvo stresu. Šos mehānismus pavada SOD, CAT un GP aktivācija nieru audos, kā arī CAT, GP stimulēšana un GSH uzkrāšanās žurku aknās pēc 7 dienu Cr(VI) iedarbības. Tomēr ilgāka Cr (VI) darbība 14 dienas izraisa AOS sistēmas resursu izsīkšanu antioksidantu enzīmu (SOD, CAT, GR, GP) inaktivācijas dēļ un GSH baseina izsīkšanu dzīvnieku aknu un nieru audos. E vitamīna un ETS kompleksam piemīt antioksidanta iedarbība pret Cr(VI) izraisītu toksicitāti. Šī kompleksa intragastriskā pirmapstrāde 14 dienas izpaužas ar Cr(VI) izraisīto LP procesu samazināšanos žurku aknās un nierēs. Iepriekšējā E vitamīna un ETS ietekme arī novērš CAT un GSH izsīkumu aknās, kā arī novērš CAT inaktivācijas intensitāti, stabilizē GP un GR aktivitāti dzīvnieku nieru audos K2Cr2O7-inducētā oksidatīvā stāvoklī. stress. Jo īpaši E vitamīns un kompleksā ar ETS nomāc LHP paaugstināšanos un stimulē CAT abos žurku audos. Šo savienojumu antioksidanta iedarbība izraisa arī GSH uzkrāšanos aknās un nieru GP aktivāciju.
Iegūtie rezultāti liecina, ka E vitamīna un ETS pirmapstrāde daļēji stabilizēja Cr (VI) izraisītus traucējumus antioksidantu aizsardzības sistēmas darbības mehānismos žurku nierēs. Turklāt mūsu pētījuma rezultāti var kļūt par fona, lai radītu efektīvas metodes antioksidantu un prooksidantu stāvokļu novēršanai un korekcijai nierēs, kuras ietekmē Сr(VI) izraisīta oksidatīvā stresa iedarbība.
1 Dzīvnieku bioķīmijas adaptācijas un ontoģenēzes katedra; NAAS Dzīvnieku bioloģijas institūts; Ļvova; Ukraina
2 Bioloģiski aktīvo savienojumu tehnoloģijas katedra; Ļvovas Politehniskās Nacionālās universitātes farmācija un biotehnoloģija; Ukraina
Atsauces
1. Sahāra, HO; Sherif, MS Vīnogu sēklu eļļas uzlabojošā ietekme uz hroma izraisītu nefrotoksicitāti un oksidatīvo stresu žurkām. Slovēnijas veterinārais pētījums Zbornik 2020, 57, 123- 131.
2. Husains, N.; Mahmood, R. Taurīns vājina Cr(VI) izraisītus šūnu un DNS bojājumus: in vitro pētījums, kurā izmanto cilvēka eritrocītus un limfocītus.Amino Acids2020, 52, 35-53.
3. Tian-Guang, Z.; Ja-Lī, Z.; Lei, Li.; Dong-Hai, Z. Nano-selēna antagonistiskā ietekme uz broileru aknu bojājumiem, ko izraisa Cr(VI) saindēšanās AMPK ceļā. International Environmental Science and Pollution Research 2020, 27, 41585-41595.
4. Faraga, AI; El-Sherry, ES Hroma izraisīta hepatotoksicitāte un selēna iespējamā aizsargājošā iedarbība pieaugušiem albīnu žurku tēviņiem: histoloģisks, imūnhistoķīmisks un molekulārs pētījums. Med. J. Cairo Univ 2020, 88, 187- 196.
5. Shih-Chang, F.; Jui-Ming, L.; Kuan-I, L.; Fen-Čens, T.; Kai-Min, F.; Čing-Jao, Y.; Čin-Čuaņs, S.; Hsin-Hung, C.; Ren-Jun, H.; Ya-Wen, C.Cr(VI) inducē no ROS mediētu mitohondriju atkarīgu apoptozi neironu šūnās, aktivizējot Akt/ERK/AMPK signalizācijas ceļu. Toksikoloģija In Vitro 2020, 65, 1- 16.
6. Fedala, A.; Adžrūds, O.; Abid-Essefi, S.; Timoumi, R. Selēna un cinka aizsargājošā iedarbība pret kālija dihromāta izraisītu vairogdziedzera darbības traucējumiem, oksidatīvo stresu un DNS bojājumiem grūtniecēm Wistar žurkām. Environ Sci Pollut Res Int 2021
7. Viņš, X.; Li, P. Virszemes ūdens piesārņojums Vidējā Ķīnas Loesa plato ar īpašu uzmanību pievēršot sešvērtīgajam hromam (Cr6 plus): rašanās, avoti un veselības riski. Ekspozīcija un veselība 2020, 12, 1- 17, https://doi.org/10.1007/s12403-020-00344-x.
8. Čens, YQ; Mērfijs, A.; Saule H.; Costa M. Cr(VI) izraisītas kanceroģenēzes molekulārie un epiģenētiskie mehānismi. Toksikoloģija un lietišķā farmakoloģija, 2019, 377, 1-9,
https://doi.org/10.1016/j.taap.2019.114636.
9. Machado, AB; Kaprara, Dž.F.; Diehl de Franceschi, I.; Liepa, R.; Berlese, DB; Feksa, LR Hroniskas sešvērtīgā hroma iedarbības ūdenī ietekme uz oksidatīvā stresa parametriem Wistar žurkām. Acta Scientiarum Biological Sciences 2019, 41, 1- 10.
10. Fatma, M.; Ragda, A.; Mohamed, M. Rosmarinus officinalis ēteriskās eļļas hepatoprotektīvais potenciāls pret sešvērtīgā hroma izraisītu hematotoksicitāti, bioķīmiskām, histoloģiskām un imūnhistoķīmiskām izmaiņām žurku tēviņiem. Vides zinātne un piesārņojuma pētījumi 2021, 28, 17445–17456.
11. Van, Y.; Vangs, X.; Van, L.; Čens, G.; Džans, M.; Xing, Y.; Džao, X.; Liu, Y.; Liu, J. Mitofagija, ko izraisa mitohondriju funkciju bojājumi cāļu nierēs, kas pakļautas Cr (VI). Bioloģisko mikroelementu izpēte, 2021, 199, 703-711.
12. Džens, X.; Li, S.; Li, J.; Lv, Y.; Vangs, X.; Vu, P.; Yang, Q.; Tangs, Y.; Liu, Y.; Zhang, Z. Sešvērtīgais hroms inducē nieru apoptozi un autofagiju, izjaucot mitohondriju dinamikas līdzsvaru žurkām. Ekotoksikoloģija un vides drošība 2020, 204, 1-9.
13. Jaņs, D.; Yang, Q.; Fu, N.; Li, S.; Han, B.; Liu, Y.; Tangs, Y.; Guo, X.; Lv, Z.; Džans, Z. Sešvērtīgā hroma izraisīta sirds disfunkcija ar Sesn2-mediētu mitohondriju funkcijas un enerģijas piegādes traucējumiem. Chemosphere 2021, 264, 1- 10.
14. Balakrišnans, R.; Satišs Kumars, CS; Rani, MU; Šrikanta, MK; Būbalāns, G.; Reddy, AG. Tokoferola aizsargājošās lomas novērtējums pret brīvo radikāļu izraisītu hepatotoksicitāti un hroma izraisītu nefrotoksicitāti žurkām. Indian Journal of Pharmacology, 2013, 45, 490-495.
15. Džans, Y.; Bjans, H.; Ma, Y.; Sjao, Y.; Xiao, F. Cr(VI) izraisīta pārmērīga mitofagija veicina mitohondriju zudumu un citotoksicitāti L02 hepatocītos. Biochemical Journal 2020, 477, 2607-2619.
16. Saidi, M.; Aouacheri, O.; Saka, S.; Tebubs, I.; Ailene, L. Kurkumas nefronu aizsargājošā ietekme uz oksidatīviem bojājumiem un oksidatīvo stresu žurkām subhroniskas hroma saindēšanās laikā. Int. J. Biosci 2019, 15, 241-250.
17. Li, J.; Džens, X.; Ma, X.; Sju, X.; Du, Y.; Lv, Q.; Li, X.; Vu, Y.; Saule, H.; Jū, L.; Zhang, Z. Melatonīns aizsargā pret hroma (VI) izraisītu sirds bojājumu, aktivizējot AMPK/Nrf2 ceļu. gada žurnāls
Neorganiskā bioķīmija, 2019, 197, 1- 10.
18. Science Direct.
19. Shati, AA E vitamīna uzlabojoša ietekme uz kālija dihromāta izraisītu hepatotoksicitāti žurkām.Journal of King Saud University - Science2014, 6, 181- 189.
20. Khalaf, AA; Hassanen, EI; Ibrahim, MA; Tohamy, AF; Aboseada, MA; Hasan, HM; Zaki, AR
Rosmarīnskābe mazina hroma izraisītus aknu un nieru oksidatīvos bojājumus un DNS bojājumus žurkām. Biochemical and Molecular Toxicology, 2020, 34, 1- 12.