Timiānlaea Hirsuta labvēlīgā ietekme uz aizkuņģa dziedzera saliņas deģenerāciju, nieru fibrozi un aknu bojājumiem

Sanae Abid, Hassane Mekhfifi, Abderrahim Ziyyat, Abdekhaleq Legssyer, Mohammed Aziz un Mohamed Bnouham

Bioresursu, biotehnoloģijas, etnofarmakoloģijas un veselības laboratorija, Bioloģijas katedra, Zinātņu fakultāte,

Universitāte Mohamed Ist, Bd: Mohamed VI, BP: 717, Oujda 60000, Maroka

Kontaktpersonu:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Mērķis. Marokā +ymelaea hirsute (T. hirsute) (Thymelaeacea) ir ārstniecības augs, ko plaši izmanto diabēta ārstēšanai un profilaksei. Šī pētījuma mērķis bija novērtēt Th ūdens ekstrakta (AqTh) un etilacetāta frakcijas (EaTh) vidēja termiņa pretdiabēta iedarbību un izpētīt to iespējamo aizsargājošo ietekmi uz aizkuņģa dziedzera saliņu deģenerāciju, diabētisko nefropātiju un aknu bojājumiem streptozotocīna (STZ) diabētiskām žurkām. Metodes. Eksperimentālo diabētu žurkām izraisīja viena intraperitoneāla injekcija 50 mg/kg STZ. Ārstēšanas perioda laikā (4 nedēļas) 200 mg/kg AqTh un 50 mg/kg EaTh katru dienu iekšķīgi tika ievadīti STZ diabētiskām žurkām. Tika pētīta parametru grupa, tostarp glikozes līmeņa asinīs tukšā dūšā, bioķīmiskie parametri un zarnu α-glikozidāzes inhibīcija. Turklāt aizkuņģa dziedzera histoloģiskais pētījums,niere, aknas, un arī aorta tika realizēta. Rezultātus. Ārstēšanas beigās gan AqTh, gan EaTh bija normalizējuši glikozes līmeni asinīs tukšā dūšā līdz attiecīgi 1,08 un 1,25 g/l. AqTh ir arī samazinājis urīna kreatinīna un HbAc1 līmeni. EaTh uzrādīja inhibējošu aktivitāti pret zarnu trakta-glikozidāzi, savukārt AqTh nebija šīs inhibējošās iedarbības. Turklāt aizkuņģa dziedzera hematoksilīna un eozīna iekrāsošanās parādīja, ka AqTh vai EaTh novērš aizkuņģa dziedzera saliņu šūnu deģenerāciju. Kā tas patsniere, Masson trihroma krāsošana ir parādījusi, ka ir ievērojami novērstsNierufibroze ar AqTh vai EaTh ārstētām diabēta žurkām. No otras puses, aknu hematoksilīna un eozīna krāsošana parādīja, ka AqTh un EaTh novērš aknu bojājumus. Secinājums. Mēs secinām, ka vidēja termiņa AqTh un EaTh ievadīšanai ir nozīmīga antihiperglikēmiska iedarbība STZ-diabēta žurkām, iespējams, izmantojot zarnu α-glikozidāzes inhibīciju un aizsardzību pret aizkuņģa dziedzera saliņu šūnu bojājumiem. Turklāt ārstēšana ar AqTh un EaTh novērš nefropātiju un aknu komplikācijas STZ diabētiskām žurkām.

Cistanche herbavar ārstētnieru fibroze

Ievads

Cukura diabēts ir visbiežāk sastopamā endokrīnā slimība. Šīs slimības sastopamība pieaug satraucošā ātrumā (4-5%) [1]. Neārstēts vai nekontrollēts, no neinsulīna atkarīgs 2. tipa cukura diabēts (DM2) var izraisīt vairākas komplikācijas, piemēram, sirds un asinsvadu slimības un diabētisko nefropātiju, un tas var izraisīt no insulīna atkarīgu 1. tipa cukura diabētu (DM1).

Diabētiskā nefropātija ir viena no svarīgākajām diabēta komplikācijām, un tas ir galvenais iemesls, kāpēc palielinās to pacientu skaits, kuriem ir beigu stadijaNieruslimība(ESRD) [2], kas prasanieredialīze vainieretransplantācija, lai pacients dzīvotu.

Tāpēc diabēta ārstēšana kļūst ļoti svarīga, lai izvairītos no nopietniem vielmaiņas rezultātiem, piemēram, nefropātijas.

Mūsdienās diabēta ārstēšana ietver uztura kontroli, fiziskās aktivitātes, insulīna un / vai hipoglikēmisko zāļu lietošanu, kā arī ārstniecības augu izmantošanu kā papildu alternatīvo medicīnu. Vairāki ārstniecības augi ir parādījuši būtisku antihiperglikēmisku efektu ar minimālām blakusparādībām [3–5], Šī iemesla dēļ Pasaules Veselības organizācija (PVO) ir pievērsusi lielu uzmanību tradicionālo un dabisko zāļu racionālai lietošanai diabēta ārstēšanai [6].

Marokā vairāk nekā 100 ārstniecības augu tiek izmantoti diabēta ārstēšanai un profilaksei [7–10]. Daudzu šo augu ekstraktu un produktu (Ammi visnaga Lam., Globularia alum, Nigella sativa un Olea europaea var.) antihiperglikēmiskā un antidiabēta aktivitāte ir konfiscēta[9].

T. hirsuta ir ārstniecības augs, ko tradicionāli izmanto diabēta profilaksei un ārstēšanai Marokas ziemeļaustrumos [8]. Iepriekšējie farmakoloģiskie pētījumi ir pierādījuši akūtu antihiperglikēmisku iedarbību uz AqTh un EaTh [11–13]. Tomēr šo divu T. hirsuta ekstraktu vidēja termiņa antidiabētiskā iedarbība vēl nav noteikta. Tāpēc šī pētījuma mērķis ir pirmo reizi novērtēt AqTh un EaTh vidēja termiņa pretdiabēta aktivitāti un izpētīt to iespējamo aizsargājošo ietekmi uz aizkuņģa dziedzera saliņu deģenerāciju, diabētisko nefropātiju, aknu steatozi un aortas komplikācijām STZ izraisītām diabēta žurkām.

2. Materiāli un metodes

2.1.Ķīmiskās vielas un reaģenti.

Glikozes autokit tika iegādāts no BioSystems (Spānija). STZ tika iegādāts no SigmaAldrich (Ķīna). Akarboze (Glucor 50) tika iegūta no Bayer Schering Pharma (Kasablanka, Maroka). Saharozi iegādājās no Prolabo (groupe Rhone-Poulenc) (EEK). Pentobarbitāls tika iegūts no CEVA Sante Animale (LaBallasti'ere). Antrons (C14H10O) tika iegādāts no visas Organics. Paraffiffin vasks tika iegādāts no FlukaChemika (Šveice). Eozīns (C20H6Br4Na2O5) tika iegūts no Riedel-de Haen (Seelze), un hematoksilīns tika iegūts no BDH Chemicals Ltd. (Poole England). Fuksīna skābe tika iegādāta no Acros Organics (Ņūdžersija, ASV), fosfomolibdīnskābe tika iegādāta no Sigma-Aldrich (PF, Steinheim), un gaiši zaļš tika iegādāts no Sigma-Aldrich (MO, ASV).

2.2. Dzīvnieki.

Abu dzimumu Wistar žurkas, kas sākotnēji svēra150–250 g (8-9 nedēļas), tika iegūtas no Zinātņu fakultātes Bioloģijas katedras dzīvnieku mājas (Oujda, Maroka). Pētījums ir veikts saskaņā ar "Laboratorijas dzīvnieku aprūpes principiem" [14]. Tie tika uzturēti standarta laboratorijas apstākļos (gaišais/tumšais cikls 12/12 stundas un temperatūra 23 + 2 °C ar 3 žurkām vienā būrī ar piekļuvi pārtikai un ūdenim). Lai savāktu urīnu un noteiktu ūdens un barības uzņemšanu, žurkas tika turētas vielmaiņas būros.

2.3. Diabēta indukcija.

Pēc 14 stundu badošanās žurkām intraperitoneāli injicēja vienu STZ devu (50 mg/kg ķermeņa masas), kas pagatavota svaigā un aukstā nātrija citrāta buferšķīdumā (0,1 M citronskābe un 0,1 M trinātrija citrāta dihidrāts) pie PH4,5, lai izraisītu diabētu [15]. Pēc 1 nedēļas žurkas ar glikozes līmeni asinīs tukšā dūšā no 1,26 līdz 2 g/l tika uzskatītas par 2. tipa cukura diabēta slimniekiem, un tās tika iekļautas pētījumā.

2.4. Augu parauga sagatavošana.

T. hirsuta tika iegādāta no tradicionālā tirgus Oujdā (Austrumu Marokā), un to autentificēja botāniķis Bioloģijas katedrā (Zinātņu fakultāte, Oujda, Maroka), un kupona paraugs (HUMPOM137) tika deponēts Herbārija universitātes Mohameda premjera no Oujdas, Marokā (HUMPO) augu nodaļā.

T. hirsuta gaisa daļas vispirms noslaucīja un mazgāja ar ūdeni un pēc tam žāvēja 40 °C temperatūrā uz nakti cepeškrāsnī. Lai pagatavotu AqTh, 140 g T. hirsuta gaisa daļu tika ievadīti 2 L destilēta ūdens 3 stundas. AqTh ienesīgums bija 4,53%. EaThwas sagatavoja, kā aprakstīts mūsu iepriekšējā pētījumā [13].

2.5. Eksperimentālais dizains.

Žurkas tika nejauši iedalītas piecās grupās (5 vai 6 žurkas katrā grupā): normālas kontroles žurkas (ievadītas tikai ar destilētu ūdeni), diabētiskās kontroles žurkas (ievadītas tikai ar destilētu ūdeni), diabētiskās žurkas, kas ārstētas ar 10 mg/kg BW akarbozes (standarta hipoglikēmiskas zāles), diabētiskās žurkas, kas ārstētas ar 50 mg/kg EaTh, un diabētiskās žurkas, kas ārstētas ar 200 mg/kg BW AqTh. Optimālās devas tika noteiktas, pamatojoties uz mūsu iepriekšējiem pētījumiem [13] un no iepriekšējiem testiem. Visas žurkas tika ārstētas vienu reizi dienā 4 nedēļas. Ķermeņa svars tika reģistrēts katru dienu. Pirms un pēc ārstēšanas tika kontrolēts ūdens un barības patēriņš, kā arī urīna tilpums, un ārstēšanas beigās tika mērīta glikozūrija. Glikozes līmenis tukšā dūšā tika pārbaudīts pirms ārstēšanas (0. nedēļa) un pēc 1, 2, 3 un 4 ārstēšanas nedēļām. α-glikozidāzes inhibīcija in vivo tika pētīta dienu pirms žurku upurēšanas. Pēc 4 nedēļu ārstēšanas visi dzīvnieki pēc 14 stundu badošanās tika anestēzēti par50 mg/kg pentobarbitāla. Pēc tam asinis tika savāktas ar sirds punkciju un nekavējoties centrifugētas 3000 tūrē/min 10 minūtes. *e serums pēc tam tika uzglabāts −20 °C temperatūrā līdz bioķīmiskajai analīzei (kopējais holesterīns un triglicerīdi). Gadaniere, aknas, aorta, sirds un aizkuņģa dziedzeris tika izņemti, izsvērti (niereaknas un sirds), un pēc tam histoloģiskajam pētījumam fiksēts (nieres, aknas, aorta un aizkuņģa dziedzeris) 10% formalīnā. Aknu paraugs tika uzglabāts −20°C temperatūrā glikogēna satura noteikšanai.

cistachepriekšnieru darbība

2.6. Glikozes līmeņa asinīs novērtēšana tukšā dūšā.

Ārstēšanas periodā tukšā dūšā glikēmija tika kvantificēta katru nedēļu. Pēc 14 stundu badošanās asinis tika izņemtas no astes vēnām, vieglā ētera anestēzijā, izmantojot mikrokapilārus. Pēc tam tas tika centrifugēts ar 5000 ×g 10 minūtes, un glikēmija tika novērtēta serumā, izmantojot komerciālu glikozes komplektu (BioSystems, Spānija), pamatojoties uz glikozes oksidāzes peroksidāzes peroksidāzes metodi [16].

2.7. α-glikozidāzes inhibīcija, in vivo pētījums.

Dienu pirms upura žurkas, kurām 14 stundas tika atņemta pārtika, tika izmantotas, lai uzraudzītu α-glikozidāzes inhibīciju in vivo. 30 minūtes pirms perorālās saharozes slodzes (2 g/kg) katrai grupai tika ievadīta deva, kas atbilst tās ārstēšanai. Asinis tika savāktas no astes, vēnas, izmantojot mikrokapilārus, tieši pirms testa devas ievadīšanas (−30 min), tieši pirms saharozes slodzes (0 min) un 30, 60 un 120 minūtes pēc saharozes slodzes. Pēc centrifugēšanas pie 5000 ×g/10 min glikozes līmenis plazmā tika noteikts ar glikozes oksidāzes peroksidāzes metodi [17].

2.8. Aknu glikogēna ekstrakcija un noteikšana.

Nosvērtus aknu audu (0,3–0,5 g) paraugus no visām grupām izmantoja, lai iegūtu glikogēnu saskaņā ar Ong un Khoo[18]. Vispirms aknu paraugus sasmalcināja, homogenizēja ar2 ml 30% kālija hidroksīda (KOH) un vārīja 100°C/30 min temperatūrā. Pēc tam glikogēna nogulsnēšanai maisījumu divas reizes apstrādāja ar 4 ml 95% etanola, un katru reizi maisījumu uzglabāja 4°C/30 min. Pēc centrifugēšanas ar 3000 tūrēm/min/15 min granulveida nogulšņu mazgā ar 8 ml 95% etanola un pēc tam centrifugē ar 3000 tūrēm/min/15 min. Iegūtais glikogēns tika izšķīdināts 1 ml destilēta ūdens. Glikogēna koncentrāciju uzraudzīja, izmantojot antrona reaģentu. Optiskais blīvums tika nolasīts pie 625 nm.

2.9. Bioķīmiskie testi.

Glikozūriju mērīja ar komerciālu Autokit (BioSystems, Spānija), pamatojoties uz glikozes oksidāzes peroksidāzes metodi. Glikozilētais hemoglobīns(HbA1c) tika novērtēts, izmantojot komerciālu komplektu (Cal-tech diagnostika, INC, ASV), un holesterīns tika noteikts, izmantojot komerciālus testu komplektus (SGM- Italia, Roma, Itālija). Triglicerīdi un urīna kreatinīns tika novērtēti, izmantojot komerciālus pārbaudes komplektus (Bio Sud Diagnostic S.R.L, Ricerca, Itālija).

2.10. Histopatoloģija.

Pēc 3 ± 1 dienas fiksācijas periods 10% formalīnā, aizkuņģa dziedzerī,niere, aknas un aortas audus 20 min mazgāja ar destilētu ūdeni. Pēc tam tie tika dehidrēti ar pieaugošu etanola nosaukumu (30% 30 min,70% 30 min, 95% 30 min un 2 ×100% attiecīgi 60 min). Pēc apgaismības soļa toluolā(2 ×120 min) orgānus 90 min iekļāva maisījums parafintoluēns (1V/1V), pēc tam parafīns (2 ×120 min). Visbeidzot, orgāni tika iestrādāti parafīnā pirms sekcijas pie 7 μm (microtome Leitz 1512). Aizkuņģa dziedzera un aknu sekcijas tika iekrāsotas ar hematoksilīnu un eozīnu.Niereun aortas sekcijas tika iekrāsotas ar Masson trihromu, lai parādītu fifibrozi / kolagēnu.

Pirms krāsošanas ar hematoksilīnu un eozīnu sekcijas tika deparafinizētas un inkubētas toluolā (2 × 5 min), pēc tam hidratētas, samazinot etanola nosaukumu (attiecīgi 100%, 95% un70%)) uz 5 minūtēm. Pēc tam hematoksilīna un eozīna krāsošanai pēc 20 minūšu mazgāšanas šūnu kodoli tika iekrāsoti ar iegremdētu hematoksilīna 5 minūtes, kam sekoja 15 minūšu mazgāšana ar ūdeni. Lai iekrāsotu citoplazmu, sekcijas tika iegremdētas 1% eozīnā 5 minūtes, pēc tam mazgātas 2 minūtes. Pēc krāsošanas sekcijas tika dehidrētas ar100% etanolu (2 ×1/2 min) un toluolu (2 × 2 min). Masson trīskrāsainā krāsošana pēc hidratācijas,niere, un aortas sekcijas tika refi fiksētas Bouin šķīdumā 1hour /56 ° C temperatūrā. Pēc tam pēc 10 minūšu mazgāšanas Veigerta dzelzs hematoksilīna sekcijas tika iekrāsotas 2 min. Pēc 10 minūšu skalošanas sekcijas 3 minūtes iegremdēja fuksīna skābē, un pēc 10 minūšu mazgāšanas tās 15 minūtes diferencēja fosfomolibdīnskābes. Lai notraipītu kolagēnu, sekcijas 15 minūtes tika pārnestas tieši uz gaiši zaļu. Pēc2 min diferenciācijas 1% etiķskābes, sekcijas tika dehidrētas caur 95% un 100% etanolu 1 min katra un pēc tam notīrītas toluolā (2 ×1 min) [19–21].

Visbeidzot, sekcijas, kas iekrāsotas uz lamelēm, tika uzstādītas vissvarīgākās. Pēc žāvēšanas mikroskopiskais novērojums tika veikts, izmantojot OlympusTokyo (Japāna) gaismas mikroskopa 40x objektīvo acu sistēmu.

Lai noteiktu zāļu ietekmi uz aizkuņģa dziedzera audiem, tika aprēķināts aizkuņģa dziedzera saliņu šūnu skaits un diametrs. Lai kvantificētu kolagēnunieresekcijas, rezultāti tika vērtēti no nulles līdz trim (0: bez kolagēna, 1: vājš kolagēns, 2:mērens kolagēns un 3: stiprs kolagēns) [22]. Ārstēšanas ietekme uz aortu tika novērtēta, mērot aortas diametru, un aknu bojājumus izskaidroja lipīdu pilienu attīstība.

2.11. Statistiskā analīze.

Visas vērtības tika izteiktas kā vidējās ± SEM. Statistiskā analīze un līdzekļu salīdzinājums tika veikts, izmantojot nesalīdzināmo studentu testu, lai salīdzinātu divu grupu līdzekļus un pārī savienotu studentu testu, lai salīdzinātu divus līdzekļus vienā grupā. Lai noteiktu aizsargājošo zāļu iedarbību uzNieresun aknas, tika izmantots chi-square tests. p vērtības<0.05 were="" considered="">

3. Rezultāti

3.1. Zāļu ārstēšanas ietekme uz glikozes līmeni asinīs tukšā dūšā STZ-

Inducētas diabēta žurkas. Neārstētām diabētiskās kontroles žurkām tika novērots ievērojams glikozes līmeņa paaugstināšanās līmenis asinīs tukšā dūšā, salīdzinot ar normālām kontroles žurkām. Ārstēšana ar 200 mg/kg AqTh samazināja glikozes līmeni asinīs no 1. ievadīšanas nedēļas, un šī ietekme bija nozīmīga 3. datumā(p< 0.001)="" and="" 4th="" week="" (p="">< 0.05)="" compared="" to="" untreated="" diabetic="" rats.="" treatment="" with="" 50="" mg/kg="" eath="" reduced="" hyperglycemia="" from="" the="" 2nd="" week,="" and="" this="" effect="" was="" significant="" (p="">< 0.05)="" in="" the="" 3rd="" and="" 4th="" weeks.="" on="" the="" 2nd,="" 3rd,="" and="" 4thweek,="" ea*="" effect="" was="" statistically="" similar="" to="" that="" of="" 10="" mg/kg="" acarbose="" (figure="">

3.2. Zāļu ietekme uz α-glikozidāzes aktivitāti, in vivo pētījums.

Normālām kontroles žurkām glikozes līmenis asinīs tika paaugstināts līdz 1,48 g/l.30 min pēc saharozes slodzes, un pēc tam tas atgriezās normālā vērtībā pēc 120 minūtēm, savukārt neārstētām diabēta žurkām glikēmija tika palielināta līdz 2,76 g/l pie 30 minūšu saharozes slodzes, lai sasniegtu 2,85 g/l pie 120 min.< 0.05)="" prevented="" the="" hyperglycemia="" induced="" by="" sucrose="" loading="" at="" 30="" and="" 60="" min="" compared="" with="" untreated="" diabetic="" rats.="" in="" the="" 200="" mg/kg="" aqth="" group,="" an="" anti-hyperglycemic="" effect="" was="" shown.="" blood="" glucose="" levels="" reached="" 2.63="" g/l="" and="" 2.70="" g/l="" at="" 30="" and="" 60="" min,="" respectively,="" and="" they="" decreased="" to="" 2.21="" g/l="" at="" 120="" min.="" 10="" mg/kg="" acarbose="" has="" significantly="" (p="">< 0.01)="" prevented="" the="" hyperglycemia="" induced="" by="" sucrose="" loading="" at="" 30,="" 60,="" and="" 120="" min="" compared="" to="" diabetic="" control.="" the="" effect="" of="" acarbose="" was="" statistically="" similar="" to="" eaththeffffect="" (figure="">

3.3. Zāļu iedarbība

Ārstēšana ar bodyweight, pārtiku un ūdens uzņemšanu. Neārstētu diabēta žurku ķermeņa masas pieaugums bija ievērojams (p< 0.05)="" decreased="" compared="" with="" normal="" rats.="" aqth="" has="" signifificantly="" (p="">< 0.05)="" prevented="" bodyweight="" fall="" compared="" with="" untreated="" diabetic="" rats.="" eath-="" and="" acarbose-treated="" rats="" did="" not="" signifificantly="" (p="">0,05) mainīt ķermeņa masas pieaugumu, salīdzinot ar neārstētām diabēta žurkām. Ārstēšanas beigās neārstētu diabēta žurku, AqTh, EaTh un akarbozu grupā ūdens patēriņš nemainījās, salīdzinot ar datiem pirms ārstēšanas, savukārt barības patēriņš bija ievērojami palielināts diabēta žurkām un ar AqTh-, EaTh un akarbozi apstrādātām žurkām (p< 0.05,="" p="">< 0.05,="" p="">< 0.05,="" a="" dp="">< 0.01,="" respectively)="" compared="" to="" before="" drug="" administration="" (table="">

3.4. Zāļu ārstēšanas ietekme uz urīna parametriem.

Pēc 4 nedēļu ārstēšanas perioda ievērojami palielinājās kreatinīna un glikozūrijas līmenis urīnā (p< 0.05="" andp="">< 0.001,="" respectively)="" in="" untreated="" diabetic="" rats="" when="" compared="" to="" normal="" rats.="" oral="" administration="" of="" aqth="" has="" decreased="" signifificantly="" (p="">< 0.05)="" urinary="" creatinine="" compared="" to="" untreated="" diabetic="" rats,="" but="" no="" significant="" difference="" has="" been="" observed="" in="" glycosuria="" when="" compared="" with="" untreated="" diabetic="" rats.="" eath="" treatment="" has="" prevented="" urinary="" creatinine="" increase="" compared="" to="" normal="" rats;="" however,="" eath="" did="" not="" change="" signifificantly="" glycosuria.="" on="" the="" other="" hand,="" the="" aqth="" and="" eath="" effect="" on="" urinary="" creatinine="" and="" glycosuria="" was="" statistically="" similar="" to="" that="" of="" 10="" mg/kg="" acarbose.="" finally,="" there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" urinary="" volume="" when="" comparing="" data="" before="" and="" after="" treatment="" with="" aqth,="" eath,="" or="" acarbose="" (table="">

3.5. Zāļu ārstēšanas ietekme uz bioķīmiskajiem parametriem.

Pēc 4 nedēļu ārstēšanas perioda HbA1c ievērojami palielinājās (p< 0.05),="" in="" untreated="" diabetic="" rats,="" when="" compared="" to="" normal="" rats.="" oral="" administration="" of="" aqth="" has="" prevented="" hba1c="" elevation="" compared="" to="" normal="" rats.="" at="" the="" end="" of="" the="" treatment="" period,="" liver="" glycogen="" quantity="" wassignifificantly="" decreased="" (p="">< 0.05)="" in="" untreated="" diabetic="" rats="" when="" compared="" to="" normal="" rats.="" aq*="" and="" ea*="" treatments="" have="" shown="" no="" significant="" effect="" on="" liver="" glycogen="" compared="" to="" untreated="" diabetic="" rats="" whereas="" acarbose="" treatment="" did="" not="" change="" liver="" glycogen="" quantity="" compared="" to="" normal="" rats.="" finally,="" total="" cholesterol="" and="" triglycerides="" results="" show="" that="" there="" is="" no="" significant="" change="" after="" aqth,="" eath,="" or="" acarbose="" treatment="" compared="" to="" normal="" and="" diabetic="" rats="" (table="">

3.6. Zāļu ārstēšanas ietekme uz orgānu Svaru.

4. tabulā parādītas aknas,niere, un sirds masa ārstēšanas perioda beigās. Rezultāti liecina, kanierenenogurstošām diabētiskām žurkām, salīdzinot ar normālām žurkām, svars ievērojami palielinājās. Ārstēšana ar 200 mg/kg AqTh vai 50 mg/kg EaTh nemainīja aknu, nieru un sirds svaru, salīdzinot ar neārstētām diabēta žurkām, savukārt ar akarbozi ārstēto žurku aknu un sirds masa ir ievērojami palielinājusies, salīdzinot ar neārstētām diabētiskām žurkām.

3.7. Histopatoloģiskie novērojumi

3.7.1. Aizkuņģa dziedzera izmaiņas.

Normālas žurkas aizkuņģa dziedzera saliņu šūnu viegla mikroskopiska novērošana parāda normālu histoloģisko izskatu ar lielu diametru un augstu granulācijas blīvumu (3. attēls). Neārstētām diabētiskām žurkām ievērojams diametra un saliņu šūnu skaita samazinājums(p< 0.001="" and="" p="">< 0.01,="" respectively)="" was="" observed.="" treatments="" with="" 200="" mg/kg="" aqth="" have="" signifificantly="" prevented="" the="" reduction="" of="" diameter="" and="" cell="" number="" of="" langerhans="" islet(p="">< 0.01="" and="" p="">< 0.05,="" respectively).="" at="" the="" same,="" 50="" mg/kg="" eath="" has="" signifificantly="" (p="">< 0.05)="" protected="" diameter="" and="" cell="" number="" against="" reduction.="" treatment="" with="" 10="" mg/kg="" acarbose="" has="" prevented="" signifificantly="" (p="">< 0.05)="" the="" reduction="" of="" the="" islet="" cell="">

3.7.2. Nieru izmaiņas.

Masson krāsojums iezīmējas zilās/zaļās kolagēna šķiedrās, brūnos kodolos, sarkano muskuļu šķiedru citoplazmā un oranžās asins šūnās. Normālā grupā tika novērots minimāls tubulointersticiāls kolagēns(4. attēls). Ievērojams pieaugums (p< 0.01)="" of="" tubulointerstitial="" collagen="" was="" detected="" in="" untreated="" diabetic="" rats.treatment="" with="" 200="" mg/kg="" aqth="" and="" 50="" mg/kg="" eath="" has="" prevented="" signifificantly="" (p="">< 0.001="" and="" p="">< 0.05,="" respectively)the="" tubulointerstitial="" collagen="" compared="" to="" untreated="" diabetic="" rats,="" but="" 10="" mg/kg="" acarbose="" treatment="" did="" not="" changesignifificantly="" (p="">0,05) šis tubulointerstitālais kolagēns. No otras puses, glomerulu kolagēns tika novērots 33,3% normālu žurku. Cukura diabēta žurkām glomerulu kolagēns tika konstatēts visām žurkām (100%). Ārstēšana ar 200 mg/kg AqTh ir ievērojami samazinājusies (p< 0.05)="" glomeruli="" collagen="" to="" 40%,but="" ea*="" and="" acarbose="" did="" not="" (figure="">

3.7.3. Aknu izmaiņas.

Hematoksilīna un eozīna iekrāsoto sekciju pārbaude parādīja, ka normālām žurkām bija normāls histoloģiskais izskats. Neārstētām diabēta žurkām tika novērotas nozīmīgas deģeneratīvas izmaiņas aknu audos. Lipīdu pilieni parādījās visās žurkās (100%). Ārstēšana ar 200 mg/kg AqTh un 50 mg/kg EaTh ir bijusi nozīmīga (p< 0.05)="" attenuated="" this="" effect.="" the="" percentage="" of="" protection="" was="" 60="" and="" 50%,="" respectively.="" however,="" 10="" mg/kg="" acarbose="" treatment="" did="" not="" attenuate="" this="" liver="" damage(figure="">

3.7.4. Aortas izmaiņas.

Viegls mikroskopisks novērojums liecina, ka neārstētām diabētiskām žurkām bija normāls aortas diametrs, salīdzinot ar normālām žurkām. Ārstēšana ar 200 mg/kg AqTh,50 mg/kg EaTh vai 10 mg/kg akarbozes nenozīmēja, ka aortas diametrs ir mainījies salīdzinājumā ar normālām un diabētiskām žurkām (6. attēls).

4. Diskusija

Šajā pētījumā mēs pirmo reizi parādījām T. hirsuta vidēja termiņa ievadīšanas (4 nedēļas) pretdiabēta iedarbību un tās profilaksiNieruun aknu komplikācijas STZ izraisītām diabēta žurkām.

Mūsu rezultāti liecināja, ka vidēja termiņa ārstēšana ar 200 mg/kg AqTh vai 50 mg/kg EaTh ievērojami samazina glikozes līmeni asinīs STZ ārstētām diabēta žurkām, salīdzinot ar STZ neārstētām diabēta žurkām. EaTh ir uzrādījis līdzīgu α-glikozidāzes inhibējošo aktivitāti, salīdzinot ar 10 mg/kg akarbozes, bet AqTh nav inhibējis α-glikozidāzes aktivitāti pēc saharozes slodzes. Šie rezultāti liecina, ka Ea* vidēja termiņa antihiperglikēmiskā iedarbība ir saistīta ar zarnu α-glikozidāzes inhibīciju. Tātad, šis atklājums apstiprina mūsu iepriekšējos rezultātus [13] savukārt Aq* pretdiabēta iedarbība, šķiet, ir saistīta ar citu mehānismu, nevis α-glikozidāzes ceļu. Turklāt mēs esam novērojuši HbAc1 līmeņa pazemināšanos ar Aq* ārstētām diabēta žurkām, savukārt Ea* ārstēšana nemainīja HbAc1 līmeni, salīdzinot ar neārstētām diabēta žurkām. Tas izskaidro, kāpēc α-glikozidāzes inhibitori diabēta ārstēšanā bieži tiek izrakstīti kopā ar citiem pretdiabēta līdzekļiem.

Aizkuņģa dziedzera sekciju histopatoloģiskais pētījums parādīja, ka AqTh un EaTh ievadīšana 4 nedēļas ievērojami palielina langerhans saliņu diametru un šūnu skaitu. Līdzīgi pētījumi bija pierādījuši, ka daudzi augu ekstrakti ievērojami atjaunoja saliņu diametru un β šūnu skaitu diabēta žurkām [23–25].

Līdz ar to ticamais AqTh darbības mehānisms glikozes līmeņa kontrolēšanā asinīs varētu būt insulīna sekrēcijas uzlabošana no aizkuņģa dziedzera β šūnām. Tāpat kā ar citiem iespējamiem mehānismiem, AqTh var sensibilizēt insulīna receptoru insulīnam vai stimulēt Langerhans saliņu cilmes šūnas STZ izraisītu diabēta žurku aizkuņģa dziedzerī [25].

Tāpēc mēs secinām, ka AqTh esošie antihiperglikēmiskie fiphytoķīmiskie savienojumi atšķiras no EaTh savienojumiem.

Daudzi pētījumi pierādīja, ka sekundārajiem metabolītiem, piemēram, flavonoīdiem, tanīniem un terpenoīdiem, ir iespējama inhibējoša ietekme uz alfa-glikozidāzi [26–28]. Iepriekšējā mūsu komandas pētījumā ar polifenolu bagāta T. hirsutahas daļa parādīja spēcīgu pretdiabēta iedarbību diabēta žurkām[29]. Tādējādi EaTh α-glikozidāzes inhibējošā iedarbība, iespējams, ir saistīta ar flavonoīdu klātbūtni.

Ir labi zināms, ka diabēts ir saistīts ar makrovaskulārām un mikrovaskulārām komplikācijām, piemēram, nefropātiju. Statistika parādīja, ka no visiem dialīzes pacientiem diabētiķi 2001. gadā veido 20,6% salīdzinājumā ar 13,1% 1995. gadā un 6,9% 1989. gadā. Dialīzes pacientu mirstības līmenis diabēta slimniekiem diabēta slimniekiem ir nenozīmīgi augstāks nekā nediabētam (241,4/1000, salīdzinot ar 153,99/1000 cilvēkgadiem) [30]. Vidējā dzīvildze 2. tipa diabētam, kas nonāk dialīzē, ir aptuveni 3 gadi [31, 32]. Diabētisko nefropātiju raksturo dažu olbaltumvielu, piemēram, kolagēna, uzkrāšanās glomerulārajā mesangijā un kanālbulointersticiālajā telpā, kas izraisaNierufibroze un tā uzNieruneveiksme [33–35]. Šajā pētījumā mēs esam pierādījuši, ka vidēja termiņa perorāla 200 mg/kg AqTh vai 50 mg/kg EaTh lietošana vidēji ilgā perorālā veidā novērš kreatinīna līmeņa paaugstināšanos urīnā un tubulointersticiālu nieru kolagēnu, salīdzinot ar neārstētām diabētiskām žurkām, kā parādītsnierehistopatoloģiskie rezultāti. Šie atklājumi pierāda, ka AqTh un EaThvaruld aizsargā pret nieru fibrozi, inhibējot ekstracelulārās matricas (ECM) olbaltumvielu uzkrāšanos. Šie rezultāti ir līdzīgi citiem etnofarmaktīviem pētījumiem, kas parādīja, ka ķiploki un sklerolarabirrea uzlabo nieru fibrozes procesu diabētiskās nefropātijas gadījumā [36, 37]. Aizsargājošā iedarbība pret ECM proteīna uzkrāšanos nierēs ir saistīta ar rapamicīna (PKB/mTOR) signālceļa proteīnkināzes B/zīdītāju mērķa inhibīciju [38]. Jaunākie pētījumi parādīja, ka PKB aktivācija izraisa mTORC1 un tā pakārtotā proteīna 70S6K aktivāciju, kas ir kritiskie šūnu augšanas, šūnu proliferācijas un proteīnu sintēzes regulatori [39, 40].

Ietekme uzcistancheUzlabotNieru

Līdz ar to cukura diabēta ārstēšanai ar AqTh un EaTh savienojumiem varētu būt noderīga ietekme uzNierufunkcija diabēta pacientiem

Pierādījumi liecina, ka diabēta žurkām tika novērotas sarežģītas antioksidantu enzīmu aktivitātes izmaiņas [41]. Šīs izmaiņas izraisa audu bojājumus, un tām ir svarīga loma diabēta komplikāciju patoģenēzē. Šajā pētījumā aknu histopatoloģiskie rezultāti liecina, ka neārstētām diabēta žurkām attīstās aknu steatoze, ko raksturo lipīdu pilieni. Citi pētījumi atklāja, ka aknas tika nekrotizētas STZ izraisītām diabēta žurkām [42]. STZ tiek uzskatīts par klasisku diabēta indukcijas modeli, jo tas izraisa toksicitāti aizkuņģa dziedzera β šūnām un šūnu nāvi [43], kas izraisa hipoinsulinēmiju un hiperglikēmiju. Insulīnam ir svarīga vielmaiņas loma kā lipolīzes slāpējam taukaudos [44]. Tādējādi diabēta hipoinsulinēmija izraisa palielinātu brīvo taukskābju (FFA) izdalīšanos asinsritē [45] un skābju pieplūdumu aknās. Intrahepātiska triglicerīdu uzkrāšanās notiek, kad lipīdu pieplūdums aknās pārsniedz aknu spēju eksportēt triglicerīdus asinsritē [45], kas izraisa aknu steatozes kā diabēta komplikācijas attīstību [46].

Šajā pētījumā histopatoloģiskie dati liecina, ka vidēja termiņa perorāla 200 mg/kg AqTh vai 50 mg/kg EaTh iekšķīga lietošana ievērojami aizsargā aknas steatozes apstākļos, samazinot lipīdu pilienu uzkrāšanos. Par līdzīgām atradēm ziņoja Elīza u.c. [47]kur Costus speciosus samazināja aknu darbības traucējumus. Turklāt citi pētījumi parādīja, ka Camellia oleifera seedameliorates aknu steatozi, regulējot FFA [48], un kurkumīns samazina steatohepatītu un lipīdu nogulsnēšanos, jo tas ir antioksidants un iedarbojas pret pretiekaisuma un brīvo radikāļu scavenger Lomās [49]. Tomēr ārstēšanai ar akarbozi nebija šīs aknu aizsargājošās pieklājības. Tas apstiprina šo zāļu blakusparādību uz aknām [50].

Turklāt T. hirsuta satur sterīnus, kumarīnus, terpēnus, tanīnus, alifātisko spirtu, laktonu, alkānus un alkanonus [51]. Interesanti, ka AqTh un EaTh anti-hiperglikēmiska un antidiabēta iedarbība varētu būt saistīta ar šo fitoķīmisko vielu vai citu nezināmu savienojumu klātbūtni.

5. Secinājumi

Visbeidzot, mūsu pētījums ir parādījis, ka AqTh un EaTh of T. hirsuta vidēja termiņa ievadīšanai bija potenciāls samazināt glikozes līmeni asinīs STZ izraisītām diabēta žurkām. EaTh antihiperglikēmisko iedarbību daļēji var izskaidrot ar zarnu α-glikozidāzes aktivitātes inhibīciju. Un AqTh antihiperglikēmisko aktivitāti var attiecināt uz insulīna sekrēcijas stimulēšanu no aizkuņģa dziedzera saliņu šūnām. Turklāt AqTh un EaTh ir parādījuši būtisku preventīvu ietekmi pretNierufibrozes un aknu steatozes komplikācijas. Tādējādi šie atklājumi liecina, ka AqTh un EaTh varētu uzskatīt par efektīvu perorālu pretdiabēta ārstēšanu. Pašlaik mūsu pētījumi ir vērsti uz EaTh un AqTh aktīvo savienojumu izolāciju un identificēšanu, kas ir atbildīgi par T antidiabēta iedarbību. hirsuta.

Saīsinājumi

AqTh: +ymelaea hirsuta ūdens ekstrakts

DM1: 1. tipa cukura diabēts

DM2: 2. tipa cukura diabēts

EaTh: +ymelaea hirsuta etilacetāta frakcija

ECM: ekstracelulārā matrica

ESRD: Beigu posmsNieruslimība

FFA: Brīvā taukskābe

mTOR: Rapamicīna zīdītāju mērķis

PKB: proteīnkināze B

STZ: Streptozotocīns

T. hirsuta: +ymelaea hirsuta

UMPO: Herbārija universitātes Mohameda premjers

Oujda, Maroka

PVO: Pasaules Veselības organizācija.

Datu pieejamība

Dati, kas izmantoti, lai pamatotu šī pētījuma secinājumus, ir pieejami pēc autoru pieprasījuma.

Interešu konflikti

Autori paziņo, ka interešu konfliktu nav.

Apliecinājumi

Autori vēlas izteikt atzinību Ramdaoui Karim un Badraoui Mustapha par viņu tehnisko palīdzību.

cistanche bienfaitspriekšniere

No: " Timiānlaea hirsuta labvēlīgā ietekme uz aizkuņģa dziedzera saliņas deģenerāciju, nieru fibrozi un aknu bojājumiem" Sanae Abid

---Zinātniskais pasaules žurnāls