Izmaiņas feniletanoīdu glikozīdu līmeņos, antioksidantu aktivitātē un citās kvalitātes īpašībās Cistanche Deserticola šķēlēs, apstrādājot ar tvaiku

Cistanche deserticola Y. C. MA(Orobanchaceae), ko parasti sauc par "Tuksneša žeņšeņu", Ķīnā un Japānā jau sen izmanto kā toniku. Mīkstos stublājus sagriež šķēlēs, lai ārstētu dažādas slimības, tostarp impotenci, sieviešu neauglību, aukstuma sajūtu jostasvietā un ceļgalos un geriatrisku aizcietējumu. Pēdējos gados vairāki pētījumi ir atklājuši tā efektivitāti eksperimentālos modeļos, kas saistīti ar neiroloģiskiem traucējumiem, īpaši Alcheimera slimību un Parkinsona slimību.Veselīgās pārtikas tirgus arvien vairāk interesējas par šo noderīgo dabisko uztura bagātinātāju. Vīns un tēja, kas izgatavota no sulīgiem kātiem, ir populāri veselīgi pārtikas produkti, kas mazina nogurumu un uzlabo mācīšanos un atmiņu.C. deserticolair bagātīgs feniletanoīdu glikozīdu, polisaharīdu un šķīstošo cukuru avots, kam galvenokārt piemīt antioksidants,neiroprotektīvs,hepatoprotektīvs,imunitāti stiprinoša,caurejas līdzeklis,un pretnovecošanās ietekmi, starp kurām antioksidatīvā aktivitāte tiek uzskatīta par citu farmakoloģisko darbību pamatā. Ehinakozīds un akteozīds ir reprezentatīvi marķieri Cistanches Herba kvalitātes kontrolei Ķīnas farmakopejā (2015. gada izdevums), ņemot vērā to dominējošo daudzumu, ģints specifiku un ievērojamas bioaktivitātes. Atšķaidīto etanolā šķīstošo ekstraktu noteikšana ir ietverta arī Cistanches Herba kvalitātes kontrolē. Ir ziņots, ka Cistanosīds A, izoakteozīds un 2'-acetilakteozīds ir arī daudzC. deserticola. 

DABĪGS CISTANŠES EKSTRAKTS PRETNOGURUMA BAIGĀTĀJS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Pieaugošaispieprasījums pēc C. deserticola ir ievērojami veicinājis tās audzēšanu. C. deserticola pieder pie daudzgadīgiem parazītu augiem, kas galvenokārt aug sausos vai daļēji sausos apgabalos Ķīnas ziemeļrietumos. Tūlīt pēc ražas novākšanas šie ļoti saldie, smagie neapstrādātie stublāji ir jāizžāvē, lai novērstu barības vielu satura zudumu un bojāšanos. Svaigi kāti parasti satur 75–85% ūdens, un ūdens līmenis ir jāsamazina zem 10%, lai tie saglabātos. Lielākajā daļā Cistanche audzēšanas reģionu veselus svaigus stublājus izvieto atklātos laukos uz aptuveni 2 mēnešiem sākotnējās žāvēšanas procesā. Pēc tam žāvēto materiālu transportē uz rūpnīcām, iemērc ūdenī, sagriež šķēlēs un vēlreiz žāvē. Šķēles apstrādes kavēšanās var būt slikti izglītotu vai slikti aprīkotu lauksaimnieku rezultāts. Tomēr galvenā problēma ir zināšanu un tehnoloģiju trūkums, lai nodrošinātu efektīvu ražošanas procesu.

Augsta termiskā apstrāde ir plaši izmantota dārzeņiem un augļiem, un tā var kavēt mikrobu augšanu un pagarināt glabāšanas laiku. Tomēr tas var arī izraisīt izmaiņas izskatā un uzturvielu sastāvā. Ir pierādīts, ka pēc tvaicēšanas ārstniecības augos palielinās noteiktas bioaktīvas sastāvdaļas un farmakoloģiskās aktivitātes, piemēram, antioksidantu aktivitāte. Tādējādi C. deserticola tvaicēšana var uzlabot vairākus ieguvumus veselībai. Ir ziņots, ka tvaicēšana vai blanšēšana svaigi sagrieztai C. deserticola palielinaehinakozīds un akteozīds.19,20) Tomēr nav veikta detalizēta izpēte, lai salīdzinātu svaigi grieztas C. deserticola bioaktīvo savienojumu izmaiņas un antioksidantu aktivitāti tvaicēšanas procesā. Tāpēc šī pētījuma mērķis bija izpētīt tvaicēšanas laika (1, 3, 5, 7 min) ietekmi uz feniletanoīdu glikozīdu, polisaharīdu, šķīstošo cukuru, atšķaidītu etanolā šķīstošo ekstraktu daudzumu, svara zudumu un antioksidantu īpašībām. C. deserticola šķēlēs, salīdzinot ar trim citām grupām (svaigas, tieši kaltētas krāsnī, blanšētas).

Eksperimentāls

Ķimikālijas

Analītiskās kvalitātes ķīmiskās vielas: metanols, etanols, D-glikoze, sērskābe, kālija hidrogēnfosfāts un kālija dihidrogēnfosfāta monohidrāts tika iegūti no Pekinas ķīmijas rūpnīcas (Pekina, Ķīna). Skudrskābe un fenols tika iegādāti no Sinopharm Chemical Reagent Co. (Šanhaja, Ķīna). HPLC kvalitātes metanols tika iegādāts no Fisher Scientific (Toronto, Kanāda). Dejonizētais ūdens tika iegūts, izmantojot Milli-Q sistēmu (Millipore Corp., Bedforda, MA, ASV). 2,2-difenil-1-pikrilhidrazils (DPPH) tika nodrošināts no Alfa Aesar (Ward Hill, MA, ASV) un 2,2′-azobis(2-aminopropāna) dihidrohlorīds (AAPH) ) autors Adamas-beta (Šanhaja, Ķīna). 6-Metoksi-2,5,7,8- tetrametilhromāns-2-karbonskābe (Trolokss), 2,6-di-tercbutil-p-krezols (BHT) , un fluoresceīns (nātrija sāls) (FL) tika iegūts no TCI (Tokija, Japāna), un kopējās antioksidantu jaudas (T-AOC) testa komplekts no Nanjing Jiancheng Bioinženierijas institūta (Nanjing, Ķīna). Akteozīda (111530-200706) un ehinakozīda (111670-200503) standarti tika iegādāti no Nacionālā pārtikas un zāļu kontroles institūta (Pekina, Ķīna). Standarti priekš2′-acetilakteozīds, cistanozīdu A un izoakteozīdu kā dāvanu pasniedza Dr. Žiguo Ma. Katra atsauces savienojuma tīrība tika noteikta vairāk nekā 98%, normalizējot pīķa laukumu, ko noteica HPLC-diodes matricas detektors (DAD).

Materiālu apstrāde un svara zaudēšanas noteikšana

Paraugi tika ievākti 2{{10}}14. gada pavasarī Ningsijas Cistanču herbas plantācijā (106.08 grādi Z, 38,24 grādi E, 1124,2 m). ) Ķīnā, un to identificējis viens no mums (prof. Jun Chen). Vaučera paraugs tika deponēts Ķīnas Medicīnas zinātņu akadēmijas Pekinas Savienības Medicīnas koledžas Ārstniecības augu attīstības institūtā. Apmēram 3 kg C. deserticola stublāju nejauši tika savākti un noskaloti ar tīru ūdeni. Ziedkopu daļas tika noņemtas ar keramikas nazi, pēc tam kāti tika sagriezti 3 mm šķēlēs. Katra 100 g šķēle tika mērīta pēc svara (W0) kā atkārtojums. Tika novērtētas septiņas eksperimentālas apstrādes ar trim atkārtojumiem katrā ārstēšanā. Tvaicēšanai četras šķēles tika ievietotas 93 grādu ūdens tvaikos uz 1, 3, 5 vai 7 minūtēm. Blanšēšanai vienu procedūru ievietoja 96 grādu ūdenī uz 5 minūtēm. Svaigas un tieši krāsnī žāvētas šķēles bija pārējās divas apstrādes metodes, par kurām ziņots šajā eksperimentā. Apstrādātās šķēles nosvēra (W1) un žāvēja cepeškrāsnī 60 grādu temperatūrā. Pēc tam žāvētās šķēles tika atkārtoti nosvērtas (W2), samaltas un sasmalcinātas (65 siets). Paraugu pulveri līdz analīzes dienai tika uzglabāti vakuuma maisos -20 grādu temperatūrā. Svara zudums tika aprēķināts šādi: svara zudums pēc augstas termiskās apstrādes (%)=[(W0−W1)/W0]×100, svara zudums pēc žāvēšanas krāsnī (%)=[(W0) −W2)/W0] × 100, kur W0 ir sākotnējais svars, un W1 un W2 ir svars, kas izmērīts attiecīgi pēc augstas termiskās apstrādes un žāvēšanas krāsnī.

Feniletanoīdu glikozīdi un antioksidantu īpašības

Paraugu ekstrakcija

{{0}}.5-g pulverveida paraugs tika ekstrahēts ar 25 ml 60% metanola-ūdens šķīdumu ar KQ-250DE ultraskaņu (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Jiangsu, China) pie 40 kHz, 200 W un 40 grādiem 30 minūtes. Pēc ekstrakcijas apstrādātos paraugus centrifugēja 10 minūtes pie 4600 × g (TD5; Hunan Herexi Instrument & Equipment Co., Hunan, Ķīna). Supernatants tika filtrēts caur 045-µm poru izmēru filtru turpmākajām analīzēm.

Feniletanoīdu glikozīdu noteikšana

ehinakozīda, cistanozīda A noteikšana,akteozīds, izoakteozīds un 2′-acetilakteozīdsno C. deserticola paraugiem tika veikta, kā aprakstījis Ma et al.21) ar dažām modifikācijām. Analīze tika veikta, izmantojot 2695–2996 HPLC instrumentu (Waters Corp., Milford, MA, ASV) ar ultravioletā starojuma absorbciju uzraudzīta pie 330 nm. Atdalīšana tika veikta ar Merck Purospher® Star RP-C18 kolonnu (250 mm × 4,6 mm, 5 µm), kas darbojās 30 grādu leņķī. Kustīgā fāze ar plūsmas ātrumu 1 ml/min sastāvēja no šķīdinātāja A (metanols) un šķīdinātāja B (0,1 % skudrskābes ūdens, v/v). Gradienta eluēšana tika veikta šādi: 28% A ({{30}}–10 min), 28–38% A (10–30 min), 38% A (30– 45 min), un injekcijas tilpums bija 10 µL. Jauktu šķīdumu, kas satur piecus atsauces standartus, pagatavoja, izšķīdinot atsauces standartus 60% metanolā līdz galīgajai koncentrācijai 0,20 mg/ml ehinakozīdam, 0,21 mg/ml akteozīdam, 0,20 mg/ml 2′-acetilakteozīdam, 0,05 mg/ml. ml cistanozīdam A un 0,05 mg/ml izoakteozīdam. Pēc tam šķīdumu atšķaida līdz septiņām dažādām koncentrācijām, lai izveidotu kalibrēšanas līknes. Paraugu feniletanoīdu glikozīdu koncentrācija tika izteikta g/kg svaiga svara (FW).

DABĪGS CISTANŠES EKSTRAKTS UZLABO ATMIŅU UZTURBA BAGĀTĀJS PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Skābekļa radikālas absorbcijas spējas (ORAC) noteikšana

ORAC tests tika veikts, kā aprakstījis Huang et al.22) ar dažām modifikācijām. Sintētiskais antioksidants BHT tika izmantots kā pozitīva kontrole. Īsumā, 25 µL atšķaidītu parauga ekstraktu un 160 µL FL tika sajaukti 96-iedobes mikroplatē. Maisījumu inkubēja 37 grādu temperatūrā 15 minūtes pirms 20 µL AAPH pievienošanas. Fluorescence tika uzraudzīta, izmantojot 485 nm (ierosme) un 520 nm (emisija) ar 3- min intervālu 72 minūtes, izmantojot Fluoroskan Ascent FL (Thermo Scientific, Waltham, MA, ASV). Trolox (2,5–50,0 µmol/L) tika izmantots kā atsauces standarts, un rezultāti tika izteikti kā Trolox mikromolos uz svaigas šķēles masu, µmol TE/g FW.

2,2-difenil-1-pikrilhidrazila brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitātes (DPPH) noteikšana

DPPH tests tika veikts, kā aprakstījis Goupy et al.23) ar dažām modifikācijām. Sintētiskais antioksidants BHT tika izmantots kā pozitīva kontrole. Īsumā, 1 ml atšķaidītā parauga ekstrakta tika sajaukts ar 1 ml 0,2 mmol/L DPPH metanola šķīduma. Šķīdumi tika turēti tumsā 25 grādu temperatūrā 90 minūtes, pēc tam tika mērīta absorbcija pie 517 nm. Trolox (4,0–119,5 µmol/L) tika izmantots kā atsauces standarts, un rezultāti tika izteikti kā Trolox mikromolos uz svaigas šķēles masu, µmol TE/g FW.

Dzelzs reducējošo antioksidantu īpašību noteikšana (FRAP)

FRAP tests tika veikts, izmantojot T-AOC testa komplektu saskaņā ar ražotāja norādījumiem.

Šķīstošie cukuri un polisaharīdi

Šķīstošo cukuru paraugu sagatavošana

0.5-g pulverveida paraugs tika ekstrahēts ar 25 ml 80% etanola ūdens šķīduma ar KQ-250DE ultraskaņu pie 40 kHz, 150 W un 80 grādiem 30 minūtes. Pirmais ekstrakcijas šķīdums tika filtrēts un pārnests uz 50-ml mērkolbu. Nogulsnes tika atkārtoti ekstrahētas, un filtrāts tika apvienots ar pirmo ekstrakcijas šķīdumu 50-mL mērkolbā un piepildīts līdz zīmei ar 80% etanola ūdens šķīdumu.

Pēc tam 1 ml šī šķīduma tika pipeti ievietots 10- ml stikla mēģenē, lai verdoša ūdens vannā iztvaicētu etanolu. Tika pievienots destilēts ūdens (5 ml), lai izšķīdinātu atlikumu, pēc tam to pārnesa 100- ml mērkolbā un līdz atzīmei piepildīja ar destilētu ūdeni. Visbeidzot, 2 ml šī atšķaidītā šķīduma tika izmantoti šķīstošo cukuru noteikšanai.

Polisaharīdu paraugu sagatavošana

Šķīstošo cukuru ekstrahēšanas nogulsnes tika žāvētas gaisā un ekstrahētas ar 25 ml destilēta ūdens ar KQ- 250DE ultraskaņu 40 kHz, 150 W un 80 grādu temperatūrā 30 minūtes. Pirmais ekstrakcijas šķīdums tika filtrēts un pārnests uz 50- ml mērkolbu. Nogulsnes tika atkārtoti ekstrahētas, filtrāts tika apvienots ar pirmo ekstrakcijas šķīdumu 50- ml mērkolbā un līdz zīmei piepildīts ar destilētu ūdeni. Pēc tam 5-mL šī šķīduma tika pipeti ievietots 50-mL mērkolbā un līdz zīmei piepildīts ar destilētu ūdeni. Visbeidzot, 2 ml šī atšķaidītā šķīduma tika izmantoti polisaharīdu noteikšanai.

Šķīstošo cukuru un polisaharīdu noteikšana

Šķīstošo cukuru un polisaharīdu noteikšana tika veikta, izmantojot fenola sērskābes metodi, kā aprakstījis Vans et al.24) 2 ml parauga šķīduma pievienoja vienu mililitru 6% fenola šķīduma un labi samaisa. Pēc tam ātri pievienoja 5 ml koncentrētas sērskābes un krata 5 minūtes. Maisījumu 15 minūtes pārnesa uz verdoša ūdens vannu un ātri atdzesēja līdz istabas temperatūrai ultravioletā starojuma noteikšanai. Ultravioletā starojuma absorbcija tika uzraudzīta pie 490 nm UV2550 spektrofotometrā (Shimadzu Co., Kioto, Japāna). Destilēts ūdens tika izmantots kā tukšs. Standarta bezūdens D-glikoze tika precīzi nosvērta un izšķīdināta destilētā ūdenī līdz galīgajai koncentrācijai 0, 10 mg / ml. Pēc tam 1, 2, 3, 4, 5, 6 un 7 ml izejas šķīduma tika pipeti septiņās 10- ml mērkolbās un līdz zīmei piepildīja ar destilētu ūdeni. Pēc tam tika izmantotas septiņas dažādas standarta šķīdumu koncentrācijas, lai izveidotu kalibrēšanas līknes.

Atšķaidīti etanolā šķīstošie ekstrakti

Paraugi (40 g) tika precīzi nosvērti, lai noteiktu to atšķaidītos etanolā šķīstošos ekstraktus saskaņā ar Ķīnas farmakopejā (2015. gada izdevums) aprakstīto metodi.25) Pulverveida paraugs tika nosvērts (W3) un ekstrahēts ar 100 ml 50% etanola ūdens šķīduma 250- ml koniskajā kolbā, laiku pa laikam sakratot 6 stundas un ļaujot nostāvēties 18 stundas. Ekstraktīvais šķīdums tika filtrēts un 20 ml filtrāta tika iztvaicēts līdz sausumam, žāvēts 105 grādos 3 stundas un atdzesēts eksikatorā (silikagelā) 30 minūtes. Visbeidzot, summa tika precīzi nosvērta (W4). Atšķaidītā etanolā šķīstošā ekstrakta saturs tika izteikts kā parauga g/kg FW. Atšķaidīti etanolā šķīstošie ekstrakti tika aprēķināti šādi: atšķaidīti etanolā šķīstošie ekstrakti (g/kg FW)=[(W4×5)/W3]×(100−W5)×10, kur W3 ir sākotnējais svars , W4 ir svars, kas izmērīts pēc ekstrakcijas, un W5 ir svara zudums pēc žāvēšanas krāsnī (%).

Statistiskā analīze

Lai noskaidrotu atšķirības starp ārstēšanas grupām, tika izmantota vienvirziena ANOVA, izmantojot SPSS 13.0 (SPSS Inc., Čikāga, IL, ASV). Atšķirības tika novērtētas, izmantojot Dankana testu ar nozīmīguma robežu 0,05. Dati tika izteikti kā standarta novirze (SD) (n=3).

Rezultāti un diskusija

Svara zudums

C. deserticola šķēlīšu svars tieši nosaka to komerciālo vērtību ārstniecības augu tirgū. Kā parādīts 1. tabulā, C. deserticola svara zudums tika analizēts pēc augstas termiskās apstrādes un žāvēšanas krāsnī. Zemāks svara zuduma līmenis tika konstatēts, ja šķēles tika tieši žāvētas krāsnī, nevis tvaicētas vai blanšētas. Blanšētajiem paraugiem bija visaugstākais svara zuduma līmenis. Tvaicētiem paraugiem bija lielāks svara zuduma līmenis ar ilgāku tvaicēšanas laiku. Septiņas tvaicēšanas minūtes, kas ir ilgākais laiks, lai svaigi sagrieztas šķēles saglabātu formu, bija ievērojami (p<0.05) higher levels of weight loss after oven-drying than 5 min of steaming. Since phenylethanoid glycosides had been detected in the hot water (data not shown), it suggested that blanching/steaming promoted more water-soluble compounds to be dissolved in the hot water. Concerning weight loss after high-heat exposure, samples steamed for 1 minute exhibited extremely low weight loss. Therefore, 1 min of steaming was too short to make the Cistanche tissue brittle, so it was less able to release bioactive compounds (such as phenylethanoid glycosides) during the subsequent extraction procedure, compared with samples that had been steamed longer.

Feniletanoloīdu glikozīdi

Ehinakozīda, cistanozīda A, akteozīda, izoakteozīda un 2′-acetilakteozīda līmeņi C. deserticola šķēlēs, kas apstrādātas ar dažādām metodēm, ir parādīti 1. attēlā. Paraugi, kas tika tvaicēti 7 minūtes, saturēja 2,16 g/kg Ehinakozīda un {{6} },29 g/kg FW cistanīda A, kas ir attiecīgi –140 un –6 reizes lielāks, salīdzinot ar svaigām šķēlītēm. Feniletanoīdu glikozīdu saturs strauji pieauga, kad svaigos paraugus apstrādāja ar lielu karstumu un žāvēšanu, īpašiakteozīds, izoakteozīds un 2′-acetilakteozīds,kamēr tie netika atklāti svaigos paraugos. Viens no iespējamiem iemesliem varētu būt feniletanoīdu glikozīdu noārdīšanās ar peroksidāzes un -glikozidāzes palīdzību. Šie fermenti tiktu inaktivēti paraugos, kas žāvēti augstā temperatūrā un samazinātā ūdens daudzumā, kā rezultātā ekstraktos tiktu saglabāts augsts feniletanoīdu glikozīdu līmenis. Turklāt feniletanoīdu glikozīdi ir fenola savienojumi, kas tiktu sintezēti svaigos augos, reaģējot uz augstas temperatūras un mitruma zuduma radīto stresu.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA UZLABO NIERU FUNKCIJU PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Tika ziņots, ka gan svaigi sagrieztas C. deserticola tvaicēšana, gan blanšēšana uzlabo ehinakozīda un akteozīda saturu.19,20) Tomēr šajā pētījumā blanšēšana deva ievērojamu (p.<0.05) lower concentration of acteoside and cistanoside A than drying directly. Regarding the total concentration of the five phenylethanoid glycosides, the blanched samples were still lower than the directly oven-dried ones (1.73, 2.35 g/kg FW, respectively). Slices steamed for 5 and 7 min contained significantly (p<0.05) higher amounts of acteoside, isoacteoside, and 2′-acetylacteoside than directly oven-dried samples. In general, the highest levels of phenylethanoid glycosides were found in the steamed samples, suggesting that the above-mentioned pharmacological activities produced by feniletanoīdu glikozīdiC. deserticola šķēles var uzlabot, apstrādājot tvaicējot.

Turklāt mēs noskaidrojām, ka tvaicēšanas laiks bija izšķirošs, lai noteiktu feniletanoīdu glikozīdu saturu. Ehinakozīdam, cistanozīdam A, akteozīdam un izoakteozīdam bija līdzīga pieauguma tendence tvaicēšanas procesa laikā, kas strauji palielinājās (pēc 1, 3 minūtēm) un sasniedza maksimālo līmeni pēc 7 minūtēm. Četros iepriekšminētajos feniletanoīdu glikozīdos netika novērotas būtiskas izmaiņas tvaicēšanas procesā no 3 līdz 7 minūtēm. Gluži pretēji, 2′-acetilakteozīds ievērojami palielinājās<0.05) with processing time. Notably, the levels of phenylethanoid glycosides in slices steamed for 1 min were significantly (p<0.05) lower than in directly oven-dried slices, except isoacteoside. Therefore, 1 min steaming of 3-mm fresh-cut C. deserticola was not long enough to inactivate the above-mentioned enzymes. Higher total levels of the five phenylethanoid glycosides were observed when the slices were steamed for 5 and 7 min (3.20, 3.52 g/kg FW, respectively) rather than directly oven drying. Steaming from 5 to 7 min more effectively promoted the extraction of phenylethanoid glycosides from C. deserticola, leading to a higher level of phenylethanoid glycosides in the extracts.

1. attēls. Ehinakozīda (A), Cistanosīda A (B), akteozīda (C), izoakteozīda (D) un 2′-acetilakteozīda (E) koncentrācija (g/kg FW) Cistanche deserticola šķēlēs saskaņā ar dažādām apstrādes metodēm Dažādi burti (a–e) apzīmē statistiski nozīmīgas atšķirības starp ārstēšanu (Dunkana tests, lpp<0.05, n=3).

Antioksidantu darbība

Šķēlīšu antioksidanta īpašības, kas noteiktas ar ORAC, DPPH un FRAP, ir parādītas 2. attēlā. Kā jau bija paredzēts, ORAC vērtības uzrādīja lielu variāciju starp paraugiem, sākot no 13,34 µmol TE/g FW svaigos paraugos līdz. 108,62 µmol TE/g FW pie 7 minūšu tvaicēšanas. Tvaicēšanas procesa laikā ORAC vērtība palielinājās 4-kārtīgi no 1 līdz 7 tvaicēšanas minūtēm. Līdzīgas tendences tika novērotas gan DPPH, gan FRAP testos, parādot strauju pieaugumu tvaicēšanas apstrādes laikā. Lai gan ar tvaiku apstrādātajiem paraugiem sākotnēji bija zemākas antioksidantu vērtības (pēc 1 minūtes), tie uzrādīja daudz labāku antioksidantu kapacitātes saglabāšanu procesa laikā. Blanšēšanas gadījumā netika novērotas būtiskas atšķirības antioksidantu īpašībās, salīdzinot ar tiešu žāvēšanu krāsnī.

2. attēls. Skābekļa radikāļu absorbcijas spējas (ORAC) (A), 2,2-difenil-1-pikrilhidrazila brīvo radikāļu absorbcijas aktivitātes (DPPH) (B) līmeņi (µmol TE/g FW) un Dzelzs reducējošā antioksidanta īpašība (FRAP) (C) Cistanche deserticola šķēlēs saskaņā ar dažādām apstrādes metodēm Dažādi burti (a–f) apzīmē statistiski nozīmīgas atšķirības starp apstrādi (Dunkana tests, p.<0.05, n=3).

Iepriekš nav ziņots par ORAC antioksidantu aktivitāti C. deserticola neapstrādātos kātos vai šķēlēs. Tomēr C. deserticola neapstrādātu stublāju etanola ekstrakti tika izmērīti DPPH un FRAP testos28), uzrādot augstu antioksidanta aktivitāti, kas ir nedaudz zemāka par 2(3)-t-butil-4-hidroksianizolu (BHA) un augstāks par BHT. Turklāt no C. deserticola izolētajiem feniletanoīdu glikozīdiem bija spēcīgas DPPH attīrīšanas aktivitātes, kas ir nedaudz zemākas par askorbīnskābi29) un augstākas nekā -tokoferols.2) C. deserticola var būt potenciāls dabisko antioksidantu avots, jo izolētajiem tīrajiem savienojumiem piemīt antioksidanta īpašības. no C. deserticola bija augstāki nekā daži sintētiskie antioksidanti. Kā parādīts 2. tabulā, BHT bija ievērojami (lpp<0.05) higher antioxidant properties than C. deserticola slices steamed for 7 min. Therefore, there is still a big gap between C. deserticola slices and synthetic antioxidants of equal quality.

DPPH testā tiek izmantoti gan ūdeņraža atoma pārneses (HAT), gan viena elektrona pārneses (SET) mehānismi, savukārt ORAC un FRAP testos tiek ievēroti attiecīgi HAT un SET reakciju principi.30) Šajā pētījumā antioksidantu kapacitātes vispārējās tendences. novērtēti ar trim pārbaudēm, bija ļoti līdzīgi. Tādējādi mēs apstiprinājām, ka kaltētās C. deserticola šķēlēs (tvaicētas, tieši žāvētas krāsnī un blanšētas) bija ievērojami (p<0.05) higher levels of antioxidant activity than fresh ones. Furthermore, steaming for 5 and 7 min significantly (p<0.05) enhanced levels of antioxidant activity compared with direct oven drying and blanching. Overall, our results showed that steaming fresh-cut C. deserticola slices was effective in preserving phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity.

Šķīstošie cukuri, polisaharīdi un atšķaidīti etanolā šķīstošie ekstrakti

As shown in Fig. 3, levels of soluble sugars and polysaccharides exhibited the following descending order: fresh>directly oven-dried>steamed>blanšēts. Blanšētās šķēlēs bija ļoti zems šķīstošo cukuru, polisaharīdu un atšķaidītā etanolā šķīstošā ekstrakta līmenis, correspolabi ar savu lielo svara zudumu. Svaigiem paraugiem bija ievērojams (lpp<0.05) higher content of soluble sugars (62.89 g/kg FW) and polysaccharides (17.36 g/kg FW) than the other samples, suggesting that heat treatment (oven drying, steaming, blanching) on fresh-cut samples would reduce the extraction of soluble sugars and polysaccharides. Heat treatment inhibited the hydrolysis of phenylethanoid glycosides to release the glucose, rhamnose, and so on. Moreover, heat treatment, used as an abiotic stress factors on fresh slices, gave rise to the synthesis of several phenylpropanoid compounds including phenylethanoid glycosides.27) Particularly, sugars contained in the slices were dissolved in the hot water to different extents by steaming or blanching. Thus, it is not surprising to see that the content of soluble sugars decreased by 23.88% in steaming and by 60.82% in blanching, while the content of polysaccharides decreased by 41.33% in steaming and by 53.83% in blanching, compared with fresh slices. It has been reported that the steaming process can increase reducing sugars and acidic polysaccharides in Ginseng Radix et Rhizoma,18) and mono sugars, including galactose and glucose, in Rehmanniae Radix.17) However, the whole dried crude drugs studied in the above-mentioned literature were quite different from the fresh-cut slices used in the present study.

3. attēls. Cistanche deserticola šķēlēs šķīstošo cukuru (A), polisaharīdu (B) un atšķaidītu etanolā šķīstošo ekstraktu (C) koncentrācija (g/kg FW) atbilstoši dažādām apstrādes metodēm Statistiski apzīmē dažādus burtus (a–e). būtiskas atšķirības starp ārstēšanu (Dunkana tests, lpp<0.05, n=3).

Tieši krāsnī kaltētās šķēlēs bija visaugstākais atšķaidītu etanolā šķīstošo ekstraktu saturs (89,26 g/kg FW), savukārt blanšētajās šķēlēs bija vismazākais (47,60 g/kg FW). Lai gan visas apstrādātās C. deserticola šķēles atbilda Ķīnas farmakopejas (2015. gada izdevums) standartam, lai tās varētu kvalificēt kā Cistanches Herba, blanšētās šķēles sniegtu mazāku labumu veselībai nekā tieši krāsnī žāvēti paraugi, jo ievērojami zaudētu atšķaidītu etanolā šķīstošo saturu. ekstrakti. Attiecībā uz tvaicēšanas procesu šķīstošo cukuru tendence bija ļoti līdzīga tendencei, kas novērota atšķaidītiem etanolā šķīstošiem ekstraktiem, pakāpeniski samazinoties, bez būtiskām izmaiņām no 3 līdz 7 minūtēm. Polisaharīdu koncentrācija svārstījās ar nelielu pieaugumu visā tvaicēšanas periodā. Proti, 7 minūšu tvaicēšana uzrādīja labu polisaharīdu saglabāšanos, bet lielu šķīstošo cukuru zudumu, savukārt 5 minūšu tvaicēšana uzrādīja apgriezti, salīdzinot ar tiešu žāvēšanu krāsnī.

Secinājums

Mēs pirmo reizi esam ziņojuši par tvaicēšanas ietekmi uz bioaktīvajiem savienojumiem un antioksidantu aktivitāti svaigi grieztā C. deserticola, un esam snieguši svarīgu informāciju, lai izstrādātu efektīvus procesus C. deserticola stublāju apstrādei pēc ražas novākšanas. Svaigas šķēles uzrādīja vissliktāko efektivitāti feniletanoīdu glikozīdu un antioksidantu savienojumu ekstrakcijā, atklājot, ka šīm vielām bija nosliece uz enzīmu noārdīšanos. Turpretim tvaicētos paraugos bija visaugstākais feniletanoīdu glikozīdu un antioksidantu aktivitāšu līmenis. Lai gan blanšēšana nedaudz palielināja akteozīda, izoakteozīda un 2′-acetilakteozīda saturu salīdzinājumā ar tiešu žāvēšanu krāsnī, svara, šķīstošo cukuru, polisaharīdu un atšķaidītu etanolā šķīstošo ekstraktu vērtības krasi samazinājās. Tvaicēšanas procesā feniletanoīdu glikozīdu un polisaharīdu līmenis laika gaitā nedaudz palielinājās. Ievērojami tvaicējot 5 un 7 minūtes (lpp<0.05) enhanced total levels of the five phenylethanoid glycosides than directly oven drying. However, the longer the steaming process, the greater the decrease in weight, soluble sugars, and dilute ethanol-soluble extracts. No significant decrease in soluble sugars was observed when slices were steamed from 1 to 5 min compared with directly oven-dried samples. The steaming time had a consistent effect on the antioxidant properties, with a significant increase evaluated by the DPPH, ORAC, and FRAP assays. It was concluded that C. deserticola slices can be successfully treated with 5 to 7 min of steaming to improve the phenylethanoid glycoside levels and antioxidant activity while preserving the amounts of soluble sugari, polisaharīdi un atšķaidīti etanolā šķīstošie ekstrakti.

Cistanche TUBULOSA ANTI-FATIGUE ANTI-OXIDANT PHGS75% ECH 30% ACT 12%