Diamīnoksidāzes izslēgšanas pelēm nav paaugstinātas jutības pret perorāli vai subkutāni ievadītu histamīnu

Abstrakts

1. Mērķis

Novērtēt endogēnās diamīnoksidāzes (DAO) ieguldījumu eksogēnā histamīna inaktivācijā, atrast peles celmu ar paaugstinātu histamīna jutību un pārbaudīt rhDAO efektivitāti histamīna izaicinājuma modelī.

2. Metodes

Diamīnoksidāzes nokautas (KO) pelēm tika ievadīts perorāli un subkutāni histamīns kombinācijā ar -adrenerģisko blokatoru propranololu, ar diviem histamīna-N-metiltransferāzes (HNMT) inhibitoriem metoprēnu un takrīnu, ar folijskābi, lai atdarinātu akūtu nieru bojājumu, un ārstētas. ar rekombinanto cilvēka DAO. Ķermeņa pamatne tika mērīta, izmantojot subkutāni implantētu mikroshēmu, un histamīna līmenis plazmā tika kvantificēts, izmantojot homogēnu laika izšķirtspējas fluorescences testu.

3. Rezultāti

Ķermeņa pamattemperatūra un histamīna līmenis plazmā būtiski neatšķīrās savvaļas tipa (WT) un DAO KO pelēm pēc perorālas un subkutānas histamīna iedarbības ar un bez akūtu nieru bojājumu vai HNMT inhibitoru ievadīšanas. Ārstēšana ar cilvēka rekombinanto DAO samazināja vidējo laukumu zem līknes (AUC) ķermeņa temperatūras zudumam par 63 procentiem (p=0,002) un klīnisko rādītāju par 88 procentiem (p<0.001). The AUC of the histamine concentration was reduced by 81%.

4. Secinājumi

Eksogēnā histamīna inaktivāciju neizraisa fermentatīvā degradācija un nieru filtrācija. Ārstēšana ar rekombinanto cilvēka DAO spēcīgi samazināja histamīna izraisīto ķermeņa temperatūras zudumu un histamīna koncentrāciju un novērsa smagu klīnisku simptomu attīstību.

Atslēgvārdi

Amīnoksidāze (varu saturoša) · Histamīna N-metiltransferāze · Akūts nieru bojājums · Metabolisms · Takrīns · Metoprīns · Ķermeņa temperatūra

Noklikšķiniet šeit, lai iegādātos Cistanche papildinājumu

Ievads

Vairāk nekā 95 procenti no visa cilvēka histamīna tiek uzglabāti tuklo šūnās un bazofīlos. Tas pats, visticamāk, attiecas uz daudziem zīdītājiem. Cilvēkiem tuklo šūnu blīvums ir vislielākais kuņģa-zarnu traktā, ādā un plaušās [1], un līdz ar to šiem orgāniem ir histamīna izraisīti simptomi slimību gadījumā, kas skaidri saistītas ar tuklo šūnu aktivāciju. Histamīna vietējā intersticiālā koncentrācija pēc akūtas degranulācijas var sasniegt 10–1000 µMs [2, 3, skatiet tiešsaistes resursus]. Cilvēkiem, līdzīgi kā suņiem un cūkām, normāla histamīna koncentrācija plazmā ir zem 1 ng/ml (9 nM), un simptomi sāk attīstīties pie dažiem nanogramiem uz mililitru [4–7]. Nozīmīgu hipotensiju ar paaugstinātu sirdsdarbības ātrumu var izmērīt no 5 ng/ml, un, kad līmenis paaugstinās virs 10 ng/ml, bronhu spazmas, sirds aritmijas, smaga hipotensija un koronāro spazmu attīstība var izraisīt dzīvībai bīstamu vairāku sistēmu disfunkciju [8, 9]. Histamīns ir iesaistīts ne tikai vazodilatācijā, asinsvadu caurlaidības palielināšanā, hipoksijā un asinsvadu tūskas attīstībā, bet arī parāda pro-iekaisuma iesaistīšanos, kas ietekmē adaptīvo imūnsistēmu, piesaistot, nobriedot un aktivizējot imūnās efektoru šūnas. Turklāt tam ir nozīme iedzimtajā imūnsistēmā, mijiedarbojoties ar dendritiskajām šūnām, dabiskām killer šūnām un granulocītiem [10, 11].

Sākotnējā histamīna koncentrācija pelēm un žurkām ir no 20 līdz 100 ng/ml, mērot, izmantojot uzticamas metodes, un tāpēc ir daudzkārt augstāka nekā cilvēkiem [6, 7]. Nav skaidrs, vai šim augstajam histamīna līmenim ir kāda fizioloģiska nozīme. Grauzēji ir bēdīgi izturīgi pret histamīnu ar letālām devām 50 procentiem (LD50) dažādiem peļu celmiem attiecīgi 3000–4000 un 400–500 mg/kg pēc perorālas un intravenozas ievadīšanas [12, 13]. Maksimālā histamīna koncentrācija plazmā pēc 400 mg/kg bolus ievadīšanas 20 g smagai pelei būtu aptuveni 8 mg/ml, pieņemot, ka plazmas tilpums ir 1 ml. Kad anafilakse cilvēkiem tika izraisīta ar kontrolētu lapsenes dzēlienu, histamīna koncentrācija 140 ng/ml bija saistīta ar smagu, dzīvībai bīstamu hipotensiju [14]. Kā histamīns tiek metabolizēts un inaktivēts?

Histamīnam ir vidēji 13% saistīšanās ar plazmas olbaltumvielām, un tas brīvi filtrējas nierēs [15]. Glomerulārās filtrācijas ātrums (GFR) teorētiski var veicināt aptuveni 15–20 procentus no 3–4 minūšu pussabrukšanas perioda veseliem brīvprātīgajiem [5, skatiet tiešsaistes resursus]. Pie normālas GFR 100 ml/min un plazmas tilpuma 3000 ml histamīna pusperiods būtu 20 minūtes. Pelēm normāls GFR 10 µl/min/g radītu histamīna pusperiodu 3 minūtes [16, skatiet tiešsaistes resursus]. Tomēr histamīnam ir augsts ekstrakcijas ātrums nierēs, pārsniedzot ātrumu, kas balstīts uz GFR, un šī ekstrakcija ir saistīta ar uzņemšanu un reabsorbciju proksimālajās kanāliņu šūnās, izmantojot organisko katjonu transporteri 2 (OCT2), kam seko fermentatīvā inaktivācija [17, sk. zemāk]. Cilvēkiem mazāk nekā 1% no injicētā radioaktīvā histamīna tika konstatēts urīnā pirmo 6 stundu laikā [18]. Zemo histamīna izdalīšanās ātrumu cilvēkiem, kas novērots arī suņiem un kaķiem, ir apstiprinājuši citi [19]. Pelēm un žurku audiem vairāk nekā 50 procenti injicētās radioaktivitātes tiek konstatēti nierēs un mazāk nekā 2 procenti kā histamīns 30 minūtes pēc intravenozas ievadīšanas [20]. Nieres bija arī orgāns ar visaugstāko radioaktivitāti pēc lielas histamīna devas ievadīšanas žurkām [21]. OCT2 transportētājs ir ļoti izteikts cilvēku un grauzēju nierēs, un tas var būt atbildīgs gan par histamīna ekstrakciju no plazmas nodalījuma, gan par histamīna reabsorbciju primārajā urīna filtrātā proksimālajās kanāliņu šūnās [22, skatīt zemāk].

Vēl viena iespēja inaktivēt histamīnu būtu ātra ekstracelulārā histamīna transportēšana no intersticiālā šķidruma pēc atbrīvošanās no tuklo šūnām vai plazmas uz citiem nodalījumiem, kas atrodas prom no endotēlija šūnām. Tas var kavēt smagas hipotensijas un asinsvadu noplūdes indukciju, ko izraisa endotēlija slāpekļa oksīda sintāzes (NOS) signalizācija un saistīšanās ar histamīna receptoriem [23–25]. Tomēr nav pieejami in vivo dati par dzīvniekiem, kas pētītu histamīna transportēšanas ātrumu no sistēmiskās cirkulācijas endotēlija vai parenhīmas šūnās. Vairākos in vitro pētījumos histamīns tiek transportēts divvirzienu veidā, izmantojot zemas afinitātes, lielas ietilpības OCT2 un OCT3 [22, 26, 27]. Histamīns ir lielisks substrāts žurku OCT2 un OCT3 transportētājam, uzrādot augstāku transporta efektivitāti salīdzinājumā ar līdzvērtīgiem cilvēka OCT proteīniem [26].

Herba Cistanche

Ja pelēm izmanto zemas radioaktīvā histamīna koncentrācijas, šķiet, ka galvenais inaktivācijas ceļš ir metilēšana ar histamīna-N-metiltransferāzes (HNMT) starpniecību. Izaicinot peles ar lielākām histamīna devām, metabolisms tiek novirzīts uz imidazola etiķskābi (IMAA) un ribosīda konjugātiem, un tiek atklāts tikai neliels daudzums metilētu atvasinājumu [28–30]. Pieckārtīgi palielinātā sākotnējā histamīna koncentrācija serumā HNMT nokautajām pelēm apstiprina šos datus [31]. Imidazoletiķskābi ģenerē histamīna oksidācijas ceļā ar diamīnoksidāzi (DAO), izdalot imidazola acetaldehīdu, kas pārvēršas par IMAA un ribosīda atvasinājumiem, galvenokārt aknās. Šķiet, ka histamīna oksidācijai caur DAO ir lielāka loma histamīna katabolismā pēc perorālas iedarbības pelēm, kas nav pārsteidzoši, ņemot vērā, ka pelēm DAO ekspresija ir augsta tikai kuņģa-zarnu traktā [30]. Kad cilvēkiem tiek veikta perorāla histamīna iedarbība, oksidatīvā deaminācija, izmantojot DAO, ir dominējošais kataboliskais ceļš ar IMAA kā galveno urīna metabolītu [18].

Diamīnoksidāze ir varu saturoša amīnoksidāze un viens no diviem fermentiem, kas spēj inaktivēt histamīnu [32]. Atsevišķos audos, galvenokārt tievajās zarnās un nieres proksimālajās kanāliņu šūnās, DAO atrodas slikti definētās intracelulārās granulārās struktūrās un ekstracelulāri saistīts ar heparāna sulfāta proteoglikāniem, turpretim HNMT atrodas tikai citoplazmā [33, 34]. HNMT ekspresija ir plaši izplatīta visā organismā, augstāks līmenis ir atrodams centrālajā nervu sistēmā, urīnpūslī, sirdī, nierēs, aknās, plaušās un taukaudos.

Pēc DAO inhibīcijas, izmantojot aminoguanidīnu, aitām pēc perorālas histamīna iedarbības bija plaši histamīna toksicitātes klīniskie simptomi, salīdzinot ar kontrolēm bez aminoguanidīna iepriekšējas apstrādes [35]. Līdzīgs eksperiments ar cūkām izraisīja smagu saslimstību un mirstību dzīvniekiem, kas iepriekš tika ārstēti ar aminoguanidīnu un pēc tam tika inficēti ar perorālu histamīnu [36]. Vidējā histamīna koncentrācija plazmā palielinājās 20- reizes cūkām ar DAO inhibīciju. Žurku ārstēšana ar aminoguanidīnu, kam sekoja perorāla histamīna iedarbība, palielināja urīna IMAA un samazināja histamīna koncentrāciju aptuveni piecas reizes [37]. Šie dati norādīja, ka DAO ir izšķiroša loma eksogēnā perorāli ievadītā histamīna noārdīšanā.

Pelēm ārstēšana ar aminoguanidīnu spēcīgi palielināja histamīna koncentrāciju zarnās pēc intravenozas histamīna iedarbības [30]. Tomēr aminoguanidīns nav specifisks DAO inhibitors, bet bloķē arī visus trīs NOS enzīmus un, šķiet, bloķē asins histamīna transportēšanu audos [38, 39]. Burimamīda, histamīna receptoru 2 antagonista, ievadīšana uzrādīja kaitīgu ietekmi ar palielinātu mirstību asinsrites šoka modelī žurkām. Tomēr tajā pašā laikā tika publicēts, ka burimamīds ir spēcīgs DAO inhibitors [40, 41]. Suņiem burimamīds izraisīja 17-kārtīgu vidējo histamīna koncentrāciju plazmā un spēcīgu vidējā arteriālā spiediena pazemināšanos [42]. Tika uzskatīts, ka efekts ir saistīts ar iespējamo tuklo šūnu aktivāciju.

Līdzīgi tika pētīta HNMT loma, izmantojot metilhistamīnu kā HNMT inhibitoru, bet metilhistamīns ir arī lielisks DAO substrāts [43]. Amodiahīns un hinakrīns ir spēcīgi HNMT inhibitori [44–46], bet arī inhibē DAO ar inhibējošo koncentrāciju 50 procenti (IC50) aptuveni 500 nM [47, nepublicēti dati]. Tāpēc dati, kas iegūti, izmantojot inhibitorus, kurus bieži lieto augstās koncentrācijās, ir jāinterpretē piesardzīgi, jo ir iespējama zināma un nezināma blakusefekta ietekme un var būtiski izkropļot in vivo pētījumu fizioloģisko nozīmi.

Metabolisma pētījumi varētu sniegt zināmas norādes par abu enzīmu nozīmi histamīna noārdīšanā, bet histamīna katabolismu var atdalīt no fizioloģiskajiem vai patofizioloģiskajiem efektiem. Nodalījuma histamīna koncentrācija var būt kritiska, un metabolisms var būt lejup pa straumi.

Tāpēc mēs nolēmām izmantot DAO knock-out (KO) peli, lai izpētītu DAO lomu eksogēnā histamīna noārdīšanā. Otrs galvenais mērķis bija izstrādāt peles modeli ar paaugstinātu histamīna jutību, lai mēs varētu labāk izpētīt histamīna lomu dažādos ģenētiskos mutantu celmos un pārbaudīt rekombinantā cilvēka DAO efektivitāti histamīna izaicinājuma modelī.

Cistanche kapsulas

Materiāls un metodes

Dzīvnieku modeļi

Eksperimenti tika veikti, izmantojot 10–18- nedēļu vecas C57BL6/J Aoc1tm1b(EUCOMM)Hmgu (DAO) KO peles un savvaļas tipa (WT) metiena biedrus. Heterozigotus embrijus nodrošināja Eiropas Peļu mutantu arhīvs Minhenē, Vācijā, un tos implantēja pseidogrūtnieces C57BL6/N pelēm. Heterozigotas C57BL6/J pēcnācēju peles tika apstiprinātas, izmantojot PCR (skatiet tiešsaistes resursus), un tās tālāk tika izmantotas DAO KO peles audzēšanai Vīnes Medicīnas universitātes Biomedicīnas pētījumu nodaļā saskaņā ar dzīvnieku protokolu GZ 66.009/{ {14}}WF/V/3b/2016. Visi eksperimenti ar dzīvniekiem tika veikti saskaņā ar protokolu GZ 66.009/0258- V/3b/2019. Eksperimentālos protokolus apstiprināja Austrijas Izglītības, zinātnes un pētniecības ministrija. Dzīvnieki tika turēti 12:12 h dienas-nakts ciklā 22 grādos ar ūdeni un pārtiku ad libitum. Neinvazīviem temperatūras mērījumiem transponderis (IPTT-300, BioMedic Data Systems Inc., ASV) tika implantēts subkutāni 2 nedēļas pirms eksperimenta, izmantojot īsu izoflurāna anestēziju. Transponderis mēra temperatūru trīs reizes vienas sekundes laikā, un šo mērījumu vidējo vērtību reģistrē no būra ārpuses, izmantojot lasītāju. Pēc tam šo vidējo vērtību izmanto turpmākiem aprēķiniem. Šos subkutānos transponderus izmanto, lai izvairītos no pārmērīgas manipulācijas ar dzīvniekiem un lai novērstu traumas, ko izraisa atkārtota taisnās zarnas temperatūras zondes ievietošana [48]. Ir pierādīts, ka vairākām dzīvnieku sugām, tostarp grauzējiem, histamīna ievadīšana pazemina ķermeņa temperatūru un tiek uzskatīta par vismodernāko histamīna iedarbības rādītāju [49, 50]. Novērošanas periodā klīniskos simptomus novērtēja pieredzējis veterinārārsts saskaņā ar publicēto paaugstinātas jutības rādītāju [51]. Rezultāts svārstījās no 0 (bez simptomu) līdz 1 (galvas un deguna berzēšana un skrāpēšana), 2 (samazināta aktivitāte ar palielinātu elpošanas ātrumu un/vai samazinātu aktivitāti, pietūkums ap muti un acīm), 3 (apgrūtināta elpošana, cianoze ap asti un mute, sēkšana) un 4 (nav aktivitātes pēc spiedziena vai trīces un krampjiem). 5 punkti apzīmēja nāvi. Visi izaicinājumu eksperimenti tika sākti no pulksten 9:00 līdz 11:00, lai izvairītos no no dienas laika atkarīgām variācijām [52].

Vispārēja eksperimentālā iestatīšana

Visas vielas tika uzklātas 5 ml/kg tilpumā. Propranolols (P0884, Sigma-Aldrich, Austrija) tika izšķīdināts fizioloģiskā šķīdumā un ievadīts intraperitoneāli (ip) koncentrācijā 2 mg/kg 20 minūtes pirms histamīna iedarbības, lai palielinātu jutību pret histamīnu [53]. Histamīna dihidrohlorīds (H7250, Sigma-Aldrich, Austrija) tika izšķīdināts divreiz destilētā (dd) H2O un tālāk atšķaidīts fizioloģiskā šķīdumā. Visas norādītās histamīna koncentrācijas attiecas uz histamīna bāzi (111,15 daltoni).

1. Histamīna perorāla un subkutāna ievadīšana

Kopā peles tika badotas 60 minūtes. Pēc 40 minūšu badošanās tika ievadīts propranolols un pēc 20 minūtēm histamīns koncentrācijā 30 mg/kg per os (po), izmantojot orālo zondi. Subkutānas (sc) iedarbības modeļa gadījumā peles saņēma histamīnu 50 mg/kg koncentrācijā bez propranolola vai 5 mg/kg ar propranololu. Lai noteiktu histamīna koncentrāciju plazmā, peļu apakškopa tika anestēzēta dažādos laika punktos pēc histamīna iedarbības, izmantojot 10 mg/kg ksilazīna un 100 mg/kg ketamīna. Citrāta plazma tika savākta no anestēzētām pelēm, izmantojot sirds punkciju. Vienā laika punktā un genotipā tika izmantota viena līdz piecas peles.

2. Vienlaicīga histamīna-N-metiltransferāzes (HNMT) inhibīcija

Metoprīns (M338835, Toronto Research Chemicals, Kanāda) tika izšķīdināts 10% pienskābē (L1875, Sigma-Aldrich, Austrija), tālāk atšķaidīts fizioloģiskā šķīdumā un ievadīts ip 3 mg/kg 1 stundu pirms provokācijas ar 5 mg/kg histamīna. Takrīns (A79922, Sigma-Aldrich, Austrija) tika izšķīdināts ddH2O, tālāk atšķaidīts fizioloģiskā šķīdumā, un pēc tam 10 mg/kg tika uzklāts ip 1 stundu pirms 25 mg/kg histamīna sc un 2 mg/kg propranolola. Koncentrācija 2 mg/kg Tacrine ip tika lietota kombinācijā ar 30 mg/kg histamīna po kombinācijā ar 2 mg/kg propranololu.

Standartizēta Cistanche

3. Akūta nieru bojājuma (AKI) indukcija pirms histamīna iedarbības

Folic acid (F7876, Sigma-Aldrich, Austria) was reconstituted in ddH2O, further diluted in saline, and applied i.p. at a concentration of 100 mg/kg 48 h before challenge with 5 mg/kg s.c. histamine and 2 mg/kg propranolol. The degree of acute kidney injury was estimated using plasma creatinine values. As a cut-off for inclusion, a creatinine value of at least threefold above the mean baseline value was used as described [54]. Baseline plasma creatinine concentrations of 0.11 and 0.17 mg/dl were measured in two mice and therefore an inclusion cut-off of>Tika izvēlēts 42 mg/dl. Citrāta plazma, kas iegūta ar sirds punkciju, tika izmantota kreatinīna mērīšanai, izmantojot Cobas analizatoru (analizators Cobas C311, Roche, Šveice). Lai noteiktu histamīna koncentrāciju plazmā dažādos laika punktos sc histamīna iedarbības laikā ar propranololu akūtu nieru bojājumu gadījumā, divas līdz četras peles vienā laika punktā tika anestēzētas, un citrāta plazma tika savākta ar sirds punkciju.

4. DAO glābšana pēc histamīna ievadīšanas

Rekombinants cilvēka (rh)DAO ar mutētu heparīnu saistošu motīvu (aprakstīts Gludovacz et al. [55]) tika ievadīts intravenozi (iv) koncentrācijā 4 mg/kg 40 minūtes pirms 2 mg/kg propranolola un 60 min. min pirms provokācijas ar 5 mg/kg sc histamīna.

Lai noteiktu histamīna un DAO koncentrāciju plazmā, peles tika ārstētas ar 4 mg/kg DAO vai buferšķīdumu iv 60 minūtes pirms iedarbības ar 5 mg/kg sc histamīna kombinācijā ar 2 mg/kg propranololu. Peles tika anestēzijas dažādos laika punktos. Citrāta plazma tika savākta, izmantojot sirds punkciju no divām līdz trim pelēm vienā laika punktā. Asinis tika savāktas 3, 8% nātrija citrātā, un viena daļa tika nekavējoties sajaukta ar diminazēna aceturātu (D7770, Sigma-Aldrich, Austrija), kā rezultātā galīgā koncentrācija bija 10 µM, lai inhibētu histamīna noārdīšanos ar rhDAO.

Gēnu ekspresijas analīze

Audu paraugi tika sasaldēti šķidrā slāpeklī, un kopējā RNS tika iegūta, izmantojot FavorPrep Tissue Total RNA Kit (FATRK001, Favorgen, Taivāna) pēc audu homogenizācijas, izmantojot lizēšanas caurules (Lysing Matrix E, MP Biomedicals, Vācija). uz Precellys 24 (Bertin Instruments, Francija). Reversā transkripcija tika veikta, izmantojot OneScript Plus cDNS sintēzes komplektu (G236, ABM Good, Kanāda). Kvantitatīvajai PCR tika izmantots BrightGreen Express 2× Mastermix (MasterMix-EL, ABM Good, Kanāda). Eksonu aptverošie primeri DAO, HNMT un histidīna dekarboksilāzes (HDC) tika izstrādāti, izmantojot Primer3 programmatūru (tiešsaistes resursu 1. tabula). Normalizācijai tika izmantots mājturības gēns RPLP0 [56].

Rietumi blot

Western blot analīzei sasaldēti audu paraugi tika lizēti 20 mM K-fosfāta buferšķīdumā (pH 7,2), izmantojot lizēšanas caurules (Lysing Matrix E tubes, MP Biomedicals, Vācija) uz Precellys 24 (Bertin Instruments, Francija). . Kopējā proteīna koncentrācija tika noteikta, izmantojot QuantiPro BCA Assay Kit (QPBCA-1KT, Sigma, Austrija). Poliakrilamīda gēla elektroforēzei 40 µg kopējā proteīna un 40 ng rekombinantā peles DAO (nodrošina EG, Dabas resursu un dzīvības zinātņu universitāte, Vīne, Austrija, izmantojot [57] aprakstītās metodes) tika atdalīti, izmantojot 12 procentu Tris-glicīna gēlu ( 4561043, Bio-Rad, ASV). DAO noteikšanai tika izmantota monoklonālā ABP1 antiviela (sc-515908, Santakrusa, ASV) koncentrācijā 0,4 µg/ml, bet monoklonālā GAPDH antiviela (2118, Cell Signal Technology, ASV) tika izmantota kā ielāde. kontrole ar atšķaidījumu 1:2000. Monoklonālā anti-peles IgG-HRP antiviela (A2554, Sigma Aldrich, Austrija) un anti-trušu IgG-HRP antiviela (A0545, Sigma Aldrich, Austrija) tika izmantotas kā noteikšanas antivielas atšķaidījumā 1:40 000. Attēli tika iegūti, izmantojot Clarity Max Western ECL substrātu (1705062, BioRad, ASV) ChemiDoc attēlveidošanas sistēmā (17001401, Bio-Rad, ASV).

Cistanche tubulosa

DAO aktivitātes mērīšana

Dažādu audu homogenātu diamīnoksidāzes aktivitāte un metoprēna un takrīna inhibīcija tika mērīta, kā aprakstīts [58]. Saldēti audu paraugi tika lizēti 20 mM K-fosfāta buferšķīdumā (pH 7,2), izmantojot lizēšanas mēģenes uz Precellys 24. Kopējā proteīna koncentrācija tika noteikta, izmantojot QuantiPro BCA Assay Kit, un 500 µg dažādu audu kopējo proteīna ekstraktu inkubēja 120 minūtes ar ortoaminobenzaldehīds (oABA) un ddH2O vai 200 µM kadaverīns (CAD). Delta-1-piperidīns, CAD autociklizācijas produkts pēc deaminācijas ar DAO, kondensējas ar oABA, veidojot fluoroforu, ko var izmērīt pie EX440/30 un EM620/40 nm. Lai noteiktu DAO inhibīciju, rhDAO tika iepriekš inkubēts ar metoprēnu un takrīnu dažādās koncentrācijās 30 minūtes un mērīts, kā aprakstīts iepriekš.

DAO aktivitātes noteikšanai audu homogenāti ar proteīna koncentrāciju 200 µg/ml tika sajaukti ar HRP (galīgā koncentrācija 1,2 µg/ml, P6782, Sigma-Aldrich, Austrija) un aminoguanidīnu (galīgā koncentrācija 10 µM, 396494, Sigma-Aldrich). , Austrija) vai K-fosfāta buferšķīdumu (pH 7,2) un inkubēja 15 minūtes 37 grādu temperatūrā. Tika pievienots Amplex red™ (galīgā koncentrācija 100 µM, A12222, Thermo Scientific, ASV), un reakcijas tika uzsāktas, pievienojot 200 µM putrescīna galīgo koncentrāciju (51799, Sigma-Aldrich, Austrija). Kā negatīva kontrole tika izmantots kālija fosfāta buferšķīdums (pH 7,2). Paraugus inkubēja 37 grādu temperatūrā un mērīja ik pēc 10 minūtēm 120 minūtes, izmantojot EX550 un EM590 nm. DAO specifiskais signāls tika aprēķināts, no paraugiem ar K-fosfāta buferšķīdumu atņemot paraugus ar aminoguanidīnu, spēcīgu un neatgriezenisku DAO inhibitoru.

Plazmas DAO aktivitātes mērījumiem pelēm, kas saņēma iv Rhoda, tika izmantots hibrīda tests, izmantojot monoklonālo antivielu no hibridomas šūnu līnijas klona anti-DAO 8/119, ko nodrošināja prof. Quaroni (Kornelas Universitāte, Ithaka, NY), un Amplex red™. Augsti proteīnus saistošas ​​melnās fluorescences plāksnes (475 515, Thermo Scientific Nunc, Dānija) tika pārklātas ar 100 µl 5 µg/ml anti-DAO 8/119 50 mM karbonāta-bikarbonāta buferšķīdumā ( C3041, Sigma-Aldrich, Austrija), inkubēja nakti 4 grādu temperatūrā un pēc tam bloķēja ar 120 µl 1% BSA (A4503, Sigma-Aldrich, Austrija) 50 minūtes istabas temperatūrā. Pēc 100 µl plazmas paraugu un standartu bloķēšanas pievienoja iepriekš PBS atšķaidītus 1:10 un inkubēja 1 stundu istabas temperatūrā. Pēc tam tika pievienoti 90 µl mārrutku peroksidāzes (galīgā koncentrācija 1,2 µg/ml) un Amplex red™ (galīgā koncentrācija 100 µM) PBS ar 0,1 procentu BSA, un reakcijas tika sāktas, pievienojot 10 µl putrescīna (galīgā koncentrācija 200 µM) vai PBS. Fluorescence tika mērīta 37 grādos ik pēc 5 minūtēm 120 minūtes, izmantojot EX550 un EM590 nm. Mazgāšanas šķīdums bija 0,1% Tween-20 (P1379, Sigma-Aldrich, Austrija) PBS. Peles plazmā tika sagatavota standarta līkne 3–30 ng / ml rhDAO. Visi mērījumi tika veikti divos eksemplāros.

Histamīna mērījumi

Citrāta plazma, kas satur 10 µM diminazena-aceturātu (D7770, Sigma-Aldrich, Austrija), tika izmantota histamīna koncentrācijas mērīšanai, izmantojot histamīna homogēnās laika izšķirtspējas fluorescences (HTRF) dinamisko komplektu (62HTMDPET, Cisbio, Francija). Komplekts tika lietots saskaņā ar ražotāja sniegtajiem norādījumiem. Kvantitatīvai noteikšanai tika izmantota histamīna standarta līkne C57Bl/6J peļu apvienotajā plazmā. Visas histamīna koncentrācijas attiecas uz histamīna bāzi, un visi mērījumi tika veikti divos eksemplāros.

Statistiskā analīze

Statistiskās analīzes tika veiktas, izmantojot GraphPad Prism versiju 8.4.0. (GraphPad Software Inc. Sandjego). Statistiskā nozīme DAO aktivitātes atšķirībām audu homogenātos tika aprēķināta, izmantojot atkārtotu mērījumu ANOVA ar Geisera-Greenhouse korekciju. Laukums zem līknēm (AUC) no atsevišķiem ķermeņa temperatūras mērījumiem un klīniskajiem rādītājiem eksperimenta laikā tika salīdzināts, izmantojot divpusējus, nesapārotus t-testus bez Velča korekcijas. Plazmas histamīna koncentrācijas starp grupām tika salīdzinātas ar divvirzienu ANOVA. Lai salīdzinātu histamīna koncentrāciju plazmā pēc subkutānas iedarbības starp pelēm ar dažādiem genotipiem, ar vai bez akūtu nieru bojājumu un kas saņēma DAO vai buferšķīdumu, dati tika grupēti intervālos, lai ņemtu vērā trūkstošās vērtības atsevišķās apakšgrupās (genotipi: 5, 1{{). 14}}, 20, 30, 40, 45, 60 min; akūts nieru bojājums: 0, 10–15, 20–30, 40–45 un 60 min; DAO: 0, 10, 30 un 45 min). Divpusējs, nesapārots t-tests tika izmantots, lai pārbaudītu kreatinīna koncentrācijas atšķirības plazmā no pelēm, kas tika ārstētas ar 100 mg/kg folijskābes un bez tās. Statistiskais nozīmīgums tika definēts kā p<0.05 in all tests.

Cistanche ekstrakts

Secinājums

DAO KO peles būtībā nebija atšķiramas no WT pelēm, izmantojot eksogēnu perorālo un subkutāno histamīna izaicinājumu. HNMT iesaistīšanās histamīna inaktivācijā, kas izraisa simptomu samazināšanos, labākajā gadījumā ir mērena, taču farmakoloģiskās inhibīcijas rezultātus var uzskatīt par provizoriskiem. Dati, kuros izmantota HNMT inhibīcija ar metoprēnu, liecināja par endogēnā DAO iesaistīšanos histamīna inaktivācijā. Nieres ir iesaistītas histamīna ātrā ekstrakcijā no asinsrites, bet septiņas reizes paaugstinātās 509 diamīnoksidāzes nokautas peles nav paaugstinātas jutības pret perorālu vai subkutāni ievadīšanu... 1 3 histamīna koncentrācijas neizraisīja pārspīlētu fenotipu, ko mēra, izmantojot centrālo temperatūru. zudums kā fenotipisks rādījums. Rekombinantā cilvēka vai peles DAO izmantošana var atbalstīt vai palīdzēt noraidīt histamīna iesaistīšanos dažādos dzīvnieku modeļos ar aizdomām par tuklo šūnu degranulāciju, ko pavada ātra un masīva histamīna izdalīšanās, vai ar pastiprinātu histidīna dekarboksilāzes enzīma indukciju, kam seko svaigi sintezēta enzīma atbrīvošanās. histamīns stundu laikā. Patiesas dubultās KO peles audzēšana ar neaktīvām DAO un HNMT gēna kopijām, ja tā ir dzīvotspējīga, varētu būt vērts izpētīt. Atsevišķām DAO vai HNMT KO pelēm nav acīmredzamu fenotipu. [nepublicēti dati, 31] Tāpat, pārbaudot divu galveno histamīna transportētāju, OCT2 un OCT3, iesaistīšanos histamīna izraisītās fenotipiskās pārmaiņās, mēs varētu labāk izprast mehānismus, kas izraisa histamīna izraisītu simptomu attīstību grauzējiem un līdz ar to potenciāli arī cilvēkiem. Neraugoties uz ievērojamiem pētniecības centieniem vairāk nekā 100 gadus kopš tā atklāšanas, mums joprojām ir jādara zināms ceļš, pirms mēs iegūstam patiesu izpratni par histamīna katabolismu.

Atsauces

1. Boehm T, Ristl R, Joseph S u.c. Metabolomu un lipidomu traucējumi smaga tuklo šūnu aktivācijas notikuma laikā pacientam ar indolentu sistēmisku mastocitozi. J Allergy Clin Immunol. 2021. gads. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.03.043. 2. Packard KA, Khan MM. Histamīna ietekme uz Th1/Th

2 citokīnu līdzsvars. Int Immunopharmacol. 2003; 3:909–20. https://doi.org/ 10.1016/S1567-5769(02)00235-7.

3. Hesterberg R, Sattler J, Lorenz W u.c. Histamīna saturs, diamīnoksidāzes aktivitāte un histamīna metiltransferāzes aktivitāte cilvēka audos: fakts vai izdomājums? Aģentu darbības. 1984; 14:325–34. https://doi.org/10.1007/BF01973821.

4. Dyer J, Warren K, Merlin S u.c. Plazmas histamīna mērīšana: uzlabotas metodes apraksts un normālās vērtības. J Allergy Clin Immunol. 1982;70:82–7. https://doi.org/10.1016/ 0091-6749(82)90233-0.

5. Pollock I, Murdoch RD, Lessof MH. Plazmas histamīns un klīniskā tolerance pret ievadīto histamīnu normāliem, atopiskiem un nātrenes pacientiem. Aģentu darbības. 1991;32:359–65. https://doi.org/10. 1007/BF01980899.

6. Liu J, Wang L, Hu W u.c. UHPLC–MS/MS metodes izstrāde plazmas histamīna noteikšanai dažādām zīdītāju sugām. J Chromatogr B. 2014;971:35–42. https://doi.org/10.1016/j.jchromb.2014.08.043.

7. Xu Y, Kang T, Dou D u.c. Dzīvnieku modeļa novērtējums un optimizācija anafilaktoīdai reakcijai, ko izraisa injekcijas. Asian Pac J Allergy Immunol. 2015;33:330–8. https://doi.org/ 10.12932/AP0619.33.4.2015.

8. Maintz L, Novak N. Histamīna un histamīna nepanesamība. Esmu J Clin Nutr. 2007;85:1185–96. https://doi.org/10.1093/ajcn/85.5. 1185.

9. Ginsburg R, Bristow MR, Kantrowitz N u.c. Klīniskās koronāro artēriju spazmas histamīna provokācija: ietekme uz varianta stenokardijas patoģenēzi. Am Heart J. 1981;102:819–22. https://doi.org/10.1016/0002-8703(81) 90030-2.

10. O'Mahony L, Akdis M, Akdis CA. Imūnās atbildes reakcijas un iekaisuma regulēšana ar histamīna un histamīna receptoriem. J Allergy Clin Immunol. 2011; 128:1153–62. https://doi. org/10.1016/j.jaci.2011.06.051.

11. Thurmond RL, Gelfand EW, Dunford PJ. Histamīna H1 un H4 receptoru loma alerģiskā iekaisumā: jaunu antihistamīna līdzekļu meklēšana. Nat Rev Drug Discov. 2008;7:41–53. https://doi.org/10.1038/nrd2465.

12. Pericin C, Thomann P. Kliohinola, histamīna un hloroforma akūtās toksicitātes salīdzinājums dažādos peļu celmos. In: Chambers PL, Günzel P, redaktori. Toksiskas iedarbības mehānisms uz dažiem mērķa orgāniem. Berlīne: Springer; 1979. lpp. 371–3.

13. Lamanna C, Ross HE. Nāvējošās toksiskās devas saistība ar peles ķermeņa svaru. Toxicol Appl Pharmacol. 1968;13:307–15. https://doi.org/10.1016/0041-008X(68)90104-X.

14. Van der Linden P, Hack C, Poortman J u.c. Kukaiņu dzēliena problēma 138 pacientiem: saistība starp anafilakses klīnisko smagumu un tuklo šūnu aktivāciju. J Allergy Clin Immunol. 1992;90:110–8. https://doi.org/10.1016/S0091-6749(06) 80017-5.

15. Williams WR, Shale DJ. Vazoaktīvo mediatoru pārvietošana no plazmas olbaltumvielām in vitro: iespējamais mehānisms pseidoalerģiskām reakcijām pret neiromuskulārām bloķējošām zālēm. Br J Anaesth. 1992;69:508–10. https://doi.org/10.1093/bja/69.5.508.

16. Sasaki Y, Iwama R, Sato T u.c. Glomerulārās filtrācijas ātruma novērtējums pie samaņas esošām pelēm, izmantojot vienkāršotu vienādojumu. Physiol Rep. 2014;2:e12135. https://doi.org/10.14814/phy2.12135.

17. Helander CG, Lindell SE, Westling H. C14- iezīmētā histamīna izvadīšana no cilvēka asinīm caur nierēm. Scand J Clin Lab Investig. 1965. https://doi.org/10.1080/00365516509083360.

18. Sjaastad O, Sjaastad ÖV. Perorāli ievadīta l4C-histamīna katabolisms cilvēkam. Acta Pharmacol Toxicol. 1974;34:33–45. https://doi.org/10.1111/j.{9}}.1974.tb02011.x.

19. Schayer RW. Histamīna metabolisms dažādās sugās. Br J Pharm Chemoth. 1956;11:472–3. https://doi.org/10.1111/j. 1476-5381.1956.tb00020.x.

20. Snyder SH, Axelord J, Bauer H. C14-histamīna liktenis dzīvnieku audos. J Pharmacol Exp Ther. 1964;144:373–9.

21. Roza B, Brauna JSL. Intravenozi injicētā histamīna sadalījums un izzušanas ātrums žurkām. Am J Physiol. 1938;124:412–20. https://doi.org/10.1152/ajplegacy.1938.124.2. 412.

22. Koepsell H, Lips K, Volk C. Polyspecifc organisko katjonu transportieri: struktūra, funkcija, fizioloģiskās lomas un biofarmaceitiskās sekas. Pharm Res. 2007; 24:1227–51. https://doi.org/ 10.1007/s11095-007-9254-z.

23. Lantoine F, Iouzalen L, Devynck MA, et al. Slāpekļa oksīda ražošanai cilvēka endotēlija šūnās, ko stimulē histamīns, nepieciešams Ca2 plus pieplūdums. Biochem. 1998;330:695–9. https://doi.org/10.1042/ bj3300695.

24. Mikelis CM, Simaan M, Ando K u.c. RhoA un ROCK mediē histamīna izraisītu asinsvadu noplūdi un anafilaktisku šoku. Nat Commun. 2015; 6:6725. https://doi.org/10.1038/ncomms7725.

25. Ashina K, Tsubosaka Y, Nakamura T u.c. Histamīns inducē asinsvadu hiperpermeabilitāti, palielinot asins plūsmu un endotēlija barjeras traucējumus in vivo. PLoS ONE. 2015;10:e0132367. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0132367.

26. Schömig E, Lazar A, Gründemann D. Extraneuronāls monoamīna transportētājs un organisko katjonu transportieri 1 un 2: transporta efektivitātes pārskats. In: Sitte HH, Freissmuth M, redaktori. Neirotransmiteru transportētāji. Berlīne: Springer; 2006. lpp. 151–80.

27. Ohtsu H. Progress alerģiju signālu pētījumos uz tuklo šūnām: histamīna loma imunoloģiskajās un sirds un asinsvadu slimībās un histamīna transportēšanas sistēma šūnā. J Pharmacol Sci. 2008; 106:347–53. https://doi.org/10.1254/jphs.FM0070294.

28. Karjala SA, Turnquest B, Schayer RW. Radioaktīvā histamīna metabolīti urīnā. J Biol Chem. 1956;219:9–12. https://doi. org/10.1016/S0021-9258(18)65762-X.

29. Schayer RW. Histamīna fizioloģisko daudzumu katabolisms in vivo. Physiol Rev. 1959;39:116–26. https://doi.org/10.1152/ physrev.1959.39.1.116.

30. Reilly MA, Schayer RW. In vivo pētījumi par histamīna katabolismu un tā inhibīciju. Br J Pharmacol. 1970;38:478–89. https://doi. org/10.1111/j.{7}}.1970.tb10590.x.

31. Naganuma F, Nakamura T, Yoshikawa T u.c. Histamīna N-metiltransferāze regulē agresiju un miega un nomoda ciklu. Sci Rep. 2017;7:15899. https://doi.org/10.1038/s41598-017-16019-8.

32. McGrath AP, Hilmer KM, Collyer CA u.c. Cilvēka diamīnoksidāzes struktūra un inhibīcija. Bioķīmija. 2009;48:9810–22. https://doi.org/10.1021/bi9014192.

33. Švelbergers HG. Zīdītāju diamīnoksidāzes audu un subcelulārās lokalizācijas analīze ar konfokālās lāzera skenēšanas fluorescences mikroskopiju. Infamm Res. 1998;47:60–1. https://doi.org/ 10.1007/s000110050273.

34. Nishibori M, Tahara A, Sawada K u.c. Histamīna N-metiltransferāzes neironu un asinsvadu lokalizācija liellopu centrālajā nervu sistēmā. Eur J Neurosci. 2000;12:415–24. https://doi.org/ 10.1046/j.1460-9568.2000.00914.x.

35. Sjaastad ÖV. Aminoguanidīns pastiprina aitu jutību pret perorāli ievadītu histamīnu. Aminoguanidīna ietekme uz endogēnā histamīna izdalīšanos ar urīnu. Exp Physiol. 1967;52:319–30. https://doi.org/10.1113/expphysiol.1967.sp001 918.

36. Sattler J, Häfner D, Kloter HJ u.c. Pārtikas izraisīti histamīni kā epidemioloģiska problēma: histamīna līmeņa paaugstināšanās plazmā un hemodinamiskās izmaiņas pēc perorālas histamīna ievadīšanas un diamīnoksidāzes (DAO) blokādes. Aģentu darbības. 1988;23:361–5. https://doi.org/10.1007/BF02142588.

37. Bowman MA, Simell OG, Peck AB u.c. Aminoguanidīna ievadīšanas farmakokinētika un ietekme uz diabēta biežumu diabēta pelēm bez aptaukošanās. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279:790–4.

38. Matejovic M, Krouzecky A, Martinkova V u.c. Selektīva inducējama slāpekļa oksīda sintāzes inhibīcija ilgstošas ​​​​hiperdinamiskas cūku bakterēmijas laikā. Šoks. 2004; 21:458–65. https://doi. org/10.1097/00024382-200405000-00010.

39. Alderton WK, Cooper CE, Knowles RG. Slāpekļa oksīda sintāzes: struktūra, funkcija un inhibīcija. Biochem J. 2001;357:593–615. https://doi.org/10.1042/bj3570593.

40. Altura BM, Halevy S. Histamīna H1- un H2-receptoru antagonistu labvēlīgā un kaitīgā iedarbība asinsrites šoka gadījumā. PNAS. 1978;75:2941–4. https://doi.org/10.1073/pnas.75.6.2941.

41. Thomas LL, Bochner BS, Lihtenšteina LM. Cilvēka polimorfonukleāro leikocītu izraisītas histamināzes aktivitātes inhibīcija ar H-2 antagonistiem. Biochem Pharmacol. 1978;27:2562–5. https:// doi.org/10.1016/0006-2952(78)90327-1.

42. Thermann M, Lorenz W, Schmal A u.c. H1-un H2-receptoru antagonistu ietekme uz asinsrites sistēmu un histamīna koncentrāciju endogēnā plazmā suņiem. Aģentu darbības. 1977;7:97–101. https://doi.org/10.1007/BF01964888.

43. Elmore BO, Bollinger JA, Dooley DM. Cilvēka nieru diamīnoksidāze: heteroloģiskā ekspresija, attīrīšana un raksturojums. J Biol Inorg Chem. 2002; 7:565–79. https://doi.org/10. 1007/s00775-001-0331-1.

44. Duch DS, Bowers SW, Nichol CA. Smadzeņu histamīna līmeņa paaugstināšanās ar histamīna N-metiltransferāzes diaminopirimidīna inhibitoriem. Biochem Pharmacol. 1978;27:1507–9. https://doi. org/10.1016/0006-2952(78)90109-0.

45. Horton JR, Sawada K, Nishibori M u.c. Strukturālais pamats histamīna N-metiltransferāzes inhibēšanai ar dažādām zālēm. J Mol Biol. 2005;353:334–44. https://doi.org/10.1016/j.jmb.2005. 08.040.

46. ​​Horton JR, Sawada K, Nishibori M u.c. Divas cilvēka histamīna metiltransferāzes polimorfās formas: strukturālie, termiskie un kinētiskie salīdzinājumi. Struktūra. 2001; 9:837–49. https://doi.org/10.1016/S0969-2126(01)00643-8.

47. Duch DS, Bacchi CJ, Edelstein MP u.c. Histamīna metabolisma inhibitori in vitro un in vivo: korelācijas ar antitripanosomu aktivitāti. Biochem Pharmacol. 1984;33:1547–53. https:// doi.org/10.1016/0006-2952(84)90426-X.

48. Hox V, Desai A, Bandara G u.c. Estrogēns palielina anafilakses smagumu peļu mātītēm, uzlabojot endotēlija slāpekļa oksīda sintāzes ekspresiju un slāpekļa oksīda veidošanos. J Allergy Clin Immunol. 2015;135:729-736.e5. https://doi.org/ 10.1016/j.jaci.2014.11.003.

49. Packman EW, Rossi GV, Harrisson JWE. Histamīna un antihistamīna līdzekļu ietekme uz ķermeņa temperatūru. J Pharm Pharmacol. 1953;5:301–10. https://doi.org/10.1111/j.2042-7158.1953.tb139 90.x.

50. Morris SC, Perkins C, Potter C u.c. IgE mediētas anafilakses zāļu inhibīcijas optimizēšana pelēm. J Allergy Clin Immunol. 2021; 149:671–84. https://doi.org/10.1016/j.jaci.2021.06.022.

51. Li XM, Serebrisky D, Lee SY u.c. Zemesriekstu anafilakses peles modelis: T- un B-šūnu reakcijas uz galveno zemesriekstu alergēnu atdarina cilvēka reakcijas. J Allergy Clin Immunol. 2000;106:150–8. https://doi.org/10.1067/mai.2000.107395.

52. Hasegawa A, Watanabe M, Osada H u.c. Glikokortikoīdu ietekme uz IgE, histamīna un trombocītu aktivējošā faktora izraisītas sistēmiskās anafilakses variācijām, kas atkarīgas no dienas laika, dažādos peļu celmos. Biochem Biophys Res Commun. 2018;495:2184–8. https://doi.org/10.1016/j.bbrc.2017.12.099.

53. Fishel CW, Szentivanyi A, Talmage DW. Peļu sensibilizācija un desensibilizācija pret histamīnu un serotonīnu ar neirohumoriem. J Immunol. 1962;89:8–18.

54. Stallons LJ, Whitaker RM, Schnellmann RG. Nomākta mitohondriju bioģenēze folijskābes izraisītā akūtā nieru bojājumā un agrīnā fibrozē. Toxicol Lett. 2014;224:326–32. https://doi. org/10.1016/j.toxlet.2013.11.014.

55. Gludovacz E, Schuetzenberger K, Resch M, et al. Cilvēka diamīnoksidāzes heparīnu saistošo motīvu mutācijas ļauj izstrādāt pirmo klasē histamīnu noārdošu biofarmaceitisko līdzekli. Elife. 2021;10:e68542. https://doi.org/10.7554/eLife. 68542.

56. Eissa N, Kermarrec L, Hussein H u.c. Atsauces gēnu piemērotība ziņojuma RNS normalizēšanai peles 2,4-dinitrobenzolsulfonskābes (DNBS) izraisītā kolīta gadījumā, izmantojot kvantitatīvu reāllaika PCR. Sci Rep. 2017;7:42427. https://doi.org/10. 1038/srep42427.

57. Gludovacz E, Maresch D, Bonta M u.c. Ķīnas kāmju olnīcu (CHO) šūnās ražotās rekombinantās cilvēka diamīnoksidāzes (rhDAO) raksturojums. J Biotechnol. 2016; 227:120–30. https://doi.org/10.1016/j.jbiotec.2016.04.002.

58. Boehm T, Karer M, Gludovacz E u.c. Vienkārša, jutīga un specifiska diamīnoksidāzes aktivitātes kvantitatīva noteikšana sarežģītās matricās, izmantojot jaunatklātus fluoroforus, kas iegūti no dabīgiem substrātiem. Infamm Res. 2020; 69:937–50. https://doi.org/10. 1007/s00011-020-01359-5.

59. Matsumura Y, Tan EM, Vaughan JH. Paaugstināta jutība pret histamīnu un sistēmiska anafilakse pelēm ar farmakoloģisko beta-adrenerģisko blokādi: aizsardzība ar nukleotīdiem. J Allergy Clin Immunol. 1976;58:387–94. https://doi.org/10.1016/0091- 6749(76)90119-6.

60. Hunter AJ, Murray TK, Jones JA u.c. Tetrahidroaminoakridīna holīnerģiskā farmakoloģija in vivo un in vitro. Br J Pharmacol. 1989; 98:79–86. https://doi.org/10.1111/j.{7}}. 1989.tb16865.x.

61. Rabe M, Schaefer F. Nieru slimību netransgēnu peles modeļi. Nefrons. 2016; 133:53–61. https://doi.org/10.1159/00044 5171.

62. Miyamoto Y, Nakano S, Kaneko M u.c. Jauna sintētiskā proteāzes inhibitora klīniskais novērtējums atklātā sirds ķirurģijā. Ietekme uz serotonīna un histamīna izdalīšanos plazmā un asins saglabāšanu. ASAIO. 1992;38:M395-8. https://doi.org/10.1097/00002480- 199207000-00063.

63. Rasu onkoloģija — precīzā onkoloģija. https://www.raceoncology. com/. Skatīts 2021. gada 23. novembrī

64. Myers JW, Fon Hof DD, Kuhn JG u.c. Anafilaktoīdas reakcijas, kas saistītas ar bisantrēna infūzijām. Jaunas pētnieciskās zāles. 1983;1:85–8. https://doi.org/10.1007/BF00180195.

65. Reilly MA, Schayer RW. Turpmāki pētījumi par histamīna katabolismu in vivo. Br J Pharmacol. 1971;43:349–58.

66. Malinski T, Taha Z, Grunfeld S, et al. Slāpekļa oksīda difūzija aortas sienā, ko in situ uzrauga ar porfirīniskajiem mikrosensoriem. Biochem Biophys Res Commun. 1993;193:1076–82. https://doi. org/10.1006/bbrc.1993.1735.

67. Ginsburg M, Wajda I, Waelsch H. Transglutamināzes un histamīna iekļaušana in vivo. Biochem Pharmacol. 1963;12:251–64. https://doi.org/10.1016/0006-2952(63)90148-5.

68. Vowinckel J, Stahlberg S, Paulmann N u.c. Glutamīna atlikumu histaminilēšana ir jauna pēctranslācijas modifikācija, kas saistīta ar G-proteīna signalizāciju. FEBS Lett. 2012;586:3819–24. https://doi.org/10.1016/j.febslet.2012.09.027.

69. McNally W, Roth M, Young R u.c. Kvantitatīva visa ķermeņa autoradiogrāfiska takrīna audu sadalījuma noteikšana žurkām pēc intravenozas vai perorālas devas. Pharm Res. 1989; 6:924–32. https://doi.org/10.1023/A:1015933210803.

70. Kamings P, Reiners PB, Vincents SR. Žurku smadzeņu histamīna-N-metiltransferāzes inhibīcija ar 9-amino-1,2,3,4-tetrahidroakridīnu (THA). Biochem Pharmacol. 1990;40:1345–50. https://doi.org/10. 1016/0006-2952(90)90402-7.

71. Cavallito JC, Nichol CA, Brenckman WD u.c. Lipīdos šķīstošie dihidrofolāta reduktāzes inhibitori. I. Pirimetamīna, metoprēna un etorfīna kinētika, sadalījums audos un metabolisma apjoms žurkām, suņiem un cilvēkiem. Drug Metab Dispos. 1978; 6:329–37.

72. Nishibori M, Oishi R, Itoh Y u.c. 9-Amino-1, 2, 3, 4-Tetrahidroakridīns ir spēcīgs histamīna N-metiltransferāzes inhibitors. Jpn J Pharmacol. 1991;55:539–46. https://doi.org/10.1254/jjp.55. 539.

73. Hough LB, Khandelwal JK, Green JP. Smadzeņu histamīna metabolisma kavēšana ar metoprēnu. Biochem Pharmacol. 1986;35:307–10. https://doi.org/10.1016/0006-2952(86)90530-7.

74. Kaneko H, Koshi S, Hiraoka T u.c. Nieru postišēmiskā reperfūzijas bojājuma kavēšana ar diamīnoksidāzi. Biochim Biophys Acta. 1998;1407:193–9. https://doi.org/10.1016/S0925- 4439(98)00039-8.

75. Koshi S, Inoue M, Obayashi H u.c. Tievās zarnas pēcišēmiskā reperfūzijas bojājuma kavēšana ar diamīnoksidāzi. Biochim Biophys Acta. 1991;1075:231–6. https://doi.org/10.1016/ 0304-4165(91)90271-H.

Matiass Kārs1 · Marlēna Redžere-Reša1 · Terēza Haidere2 · Karīna Petroči1 · Elizabete Gludovača3 · Nikola Borta3 · Bernds Džilma1 · Tomass Bēms1

1 Klīniskās farmakoloģijas nodaļa, Medicīnas universitāte Vīnē, Waehringer Guertel 18-20, 1090 Vīne, Austrija

2 Neirofizioloģijas nodaļa, Smadzeņu pētniecības centrs, Vīnes Medicīnas universitāte, Vīne, Austrija

3 Dabas resursu un dzīvības zinātņu universitātes Biotehnoloģijas nodaļa, Vīne, Austrija