Ehinozīdu inhibējošā darbība uzlabo atmiņas deficītu.

Abstrakts

Daudzas bioloģiskās aktivitātesehinozīds ir ziņots. Šajā pētījumā ehinozīda atmiņu uzlabojošā aktivitāte. Ēterisko eļļu bija paredzēts novērtēt laboratorijas žurkām, kas apstrādātas ar skopolamīnu. Eļļas sastāvs tika noteikts ar GC-MS/GC-FID sistēmu. Žurku atmiņas spējas tika pārbaudītas ar Y formas labirintu un radiālo roku labirintu. Tika veikta arī acetilholīnesterāzes fermentu aktivitātes un molekulārās dokstacijas analīze. Pavisam ehinozīdā ir identificēti 44 dažādi savienojumi. Ehinozīds uzlaboja dzīvnieku spontānās maiņas veiktspēju Y-labirinta testā. Turklāt ehinozīds ievērojami uzlaboja darba atmiņu un atsauces atmiņu skopolamīna žurkām radiālās rokas labirinta testā. Tam ir arī in vitro acetilholīnesterāzes inhibitora aktivitāte. Tajā pašā laikā molekulārās dokstacijas metodes atklāja, ka daži eļļas savienojumi teorētiski var mijiedarboties ar acetilholīnesterāzi. Ehinozīds uzlaboja skopolamīna izraisīto telpisko atmiņu žurkām. Ehinozīda neiroprotektīvā iedarbība var būt saistīta ar antiholīnesterāzes aktivitāti. Tāpēc ehinozīdu varētu izmantot kā papildu terapiju, lai uzlabotu atmiņu Alcheimera slimības un ar to saistīto traucējumu gadījumā. Starp viņiem,cistanche satur daudz ehinozīda.

Atslēgas vārdi:Cistanche; Atmiņa; Ehinozīds; Skopolamīns.

1. Ievads

Alcheimera slimību (AD), kas ir visizplatītākais demences veids, raksturo smagi kognitīvi traucējumi, ko izraisa neironu smadzeņu bojājumi. Paredzams, ka līdz 2050. gadam ar Alcheimera slimību slimojošo cilvēku skaits visā pasaulē sasniegs 135 miljonus, izraisot neapmierinātību, jo tā ir slimība, kuru nevar izārstēt. Šīs slimības galvenā patoloģiskā iezīme ir amiloīda plāksnīšu uzkrāšanās smadzenēs un neirofibrilāru samezglojumu veidošanās. Pacientiem ar AD ir novēroti arī daudzi citi apstākļi, piemēram, oksidatīvais stress un iekaisums. Galvenie slimības cēloņi nav zināmi. Tomēr Alcheimera slimība nepārprotami ir neilgtspējīga slimība; Tāpēc pacienta nāve ir neizbēgama. Līdz šim ir izstrādātas daudzas terapeitiskās stratēģijas AD ārstēšanai; Tomēr slimības progresēšanu nevar apturēt. Turklāt AD ir slimība, kas ļoti ietekmē ģimenes locekļus, kuriem var būt arī garīgas problēmas.

Kognitīvie traucējumi, tostarp atmiņas zudums, ir ievērojams slimības klīniskais simptoms. No otras puses, AD uzvedības simptomi tiek novēroti aptuveni 75-90 procentiem pacientu ar AD. Tāpēc nopietni jāapsver arī nekognitīvie simptomi. Apātija, patoloģiska motora aktivitāte, trauksme, depresija un trauksme ir AD pacientu biežākie simptomi.

Skopolamīns ir muskarīna receptoru antagonists. Ir pierādīts, ka skopolamīns izraisa izziņas problēmas, tostarp atmiņas zudumu, dzīvniekiem un cilvēkiem. Tāpēc skopolamīna izraisīti demences dzīvnieku modeļi ir izmantoti, lai pārbaudītu zāles, kurām varētu būt neiroprotektīvas īpašības.

Attēls: Cistanche ekstrakts

Pašlaik pieejamajām anti-AD zālēm ir dažādas blakusparādības. Tāpēc ir steidzami nepieciešami jauni zāļu veidi, kuru pamatā ir dabiskas vielas vai produkti, kuriem ir neiroprotektīvas īpašības un kuriem nav acīmredzamu blakusparādību. Tostarp biologs Japānā pagājušajā gadsimtā sāka pētīt cistanche terapeitisko iedarbību uz AD.

Acetilholīns (ACh) ir tipisks neirotransmiters. No otras puses, acetilholīnesterāze (AChE) traucē ACHE darbību holīnerģiskajā neirotransmisijā. AD ārstēšanai ir izmantotas antiacetilholīnesterāzes zāles. Ir pārbaudītas daudzu savienojumu AChE inhibējošās aktivitātes. Lai ietaupītu laiku un naudu, molekulārās dokstacijas pētījumi tiek plaši iekļauti zāļu atklāšanas procesā. Docking pētījumi tiek izmantoti, lai novērtētu, vai divas molekulas mijiedarbojas un veido stabilu kompleksu. Šajā gadījumā molekulāro dokstaciju var izmantot arī, lai prognozētu pareizu molekulu orientāciju kompleksā.

Cistanche ir arī ārstniecības augs, pateicoties tā daudzajām bioloģiskajām aktivitātēm, tostarp pretnoguruma, pretaudzēju, gludas zarnu kustības, nieres tonizējošo, aknu aizsardzības un sedatīvo īpašību dēļ. Vietēji Turcijā dažas šķirnes izmanto arī kā zāļu tējas nieru slimību ārstēšanai.

Attēls: Cistanches priekšrocības

2. Materiāli un metodes

2.1. Augu izejvielu un ekstraktu destilācija

Šajā pētījumā izmantotā augu suga bija cistanche tubulosa. Augu materiāls tika novākts Hotanā, Siņdzjanā. Efektīvais ehinozīda ekstrakts tika iegūts ar virkni fizikāli ķīmisku ekstrakcijas.

2.2. Gāzu hromatogrāfijas (GC-FID) analīze

Ehinozīdu raksturoja GC-FID / GC-MS sistēma. GC-FID analīzei tika izmantota HP Agilent 5973N GC-MS sistēma un 689{8}} GC. Sistēma ir aprīkota ar liesmas jonizācijas detektoru (FID). Sistēmas nosacījumi ir šādi: sistēmā izmantotā nesējgāze ir hēlijs; Hromatogrāfija tika veikta ar HP-5 MS kolonnu ar 3{{10}} m × 0,25 mm id un membrānas biezumu 0,25 μm. Eļļu atšķaida 100 reizes 2in n-heksānā; 1,0 μL eļļas tika ievadīts nesadalošā veidā. Inžektora temperatūra bija 250 grādi un plūsmas ātrums bija 1,3 ml/min. Analīzes process bija šāds: GC krāsns temperatūra tika uzturēta 70 grādos 2 minūtes un pēc tam pakāpeniski tika paaugstināta līdz 150 grādiem ar ātrumu 10 grādi / min. Pēc tam temperatūra saglabājās nemainīga 150 grādos 15 minūtes, pēc tam atkal paaugstinājās līdz 240 grādiem ar ātrumu 5 grādi / min. Gaistošās eļļas sastāva procentuālo daudzumu iegūst no GC-FID pīķa bez korekcijas koeficienta.

2.3. Gāzu hromatogrāfijas (GC-MS) analīze

Tā pati kolonna tika izmantota GC-MS analīzei. GC-FID un GC-MS nosacījumi ir vienādi. Aiztures indekss (RI) ir balstīts uz n-alkāniem (C8-40). MS ir 70 eV ar masu diapazonu 35-425. Savienojumi tika identificēti, salīdzinot RI un masas spektrometriju no divām bibliotēkām (Wiley 7 un Nist 98).

2.4. Dzīvnieki un eksperimentālās grupas

Šajā pētījumā tika izmantotas 28 Wistar žurku mātītes (250-300 g). Ūdens un barība visiem dzīvniekiem tiek nodrošināta bez maksas telpā, kas kontrolē temperatūru un gaismu (22 grādi, 12-stundu cikls). Pret dzīvniekiem izturējās ar maigumu un cieņu pret dzīvnieku labturības principiem. Firat Universitātes vietējā ētikas komiteja apstiprināja pētījumu. Eksperimenta dzīvnieki tika sadalīti 4 grupās ar 7 dzīvniekiem katrā grupā. Kontroles grupai tika injicēts 0,9 procenti parastā fizioloģiskā šķīduma. 2. Tikai ar ehinozīdu ārstēti dzīvnieki saņēma 1,5 mg/kg Sco 0,9% normālā fizioloģiskā šķīdumā kā negatīvu kontroli. 3. Ar ehinozīdu ārstētiem dzīvniekiem injicēja 1 procentu N. nuda ssp. 4. Ar ehinozīdiem apstrādātie dzīvnieki saņēma 3 procentus N. nuda ssp. Kodola ēteriskā eļļa (Sco plus NPT3 procenti).

2.5. Inhalatori un medikamenti

Ārstēt ar N. nuda ssp. Inhalācijas tiek veiktas organiskā stikla kamerā (50 x 40 x 28 cm). Vispirms atšķaidiet gaistošo eļļu ar Tween 20 (1 procents) un pakļaujiet to žurkām (200 ul). Ektosīda ekstrakti tika ievadīti, izmantojot elektronisko karburatoru (Oregon Scientific WS113). Eksperimentālie dzīvnieki tika pakļauti ehinozīda tvaikiem 21 dienu (15 minūtes dienā) dienā. Eksperimentu kopas beigās atbilstoši nomazgājiet telpu ar etanolu (10 procenti). Skopolamīna hidrobromīds tika izšķīdināts 0,9% NaCl un intraperitoneāli tika injicēts ehinozīds (1,5 mg / kg). Uzvedības testi tika veikti žurkām 30 minūtes pēc injekcijas.

2.6. Y-labirinta tests

Šajā pētījumā y labirinta tests tika izmantots, lai novērtētu īstermiņa atmiņu. Y formas labirintam ir trīs rokas un centrālā zona. Rokas nosaucām par A, B un C (35 cm garas un 10 cm platas) un iestatījām labirintu 25 cm augstumā. Eksperimenta sākumā katra žurka tika novietota centrālajā zonā, kas vērsta pret roku A, lai katra žurka būtu orientēta vienādi. Žurkas var brīvi pārvietoties pa labirintu astoņas minūtes. Tajā pašā laikā tika rūpīgi reģistrēta roka, kurā žurka iekļuva. Tā nebūtu ieeja, ja tās rokās nebūtu četri peles nagi. Pēc 8 minūtēm žurkas tika apstrādātas, izņemtas no labirinta, notīrītas ar etanolu (10 procenti) un sagatavotas nākamajam dzīvniekam. Kad žurka kustina visas trīs rokas pēc kārtas (ABC vai ACB vai CAB utt.), tas tiek uzskatīts par pareizu pārmaiņu. Spontānas maiņas procentuālo daļu aprēķina šādi: (pareizo pārmaiņu skaits/kopējais ierakstu skaits mīnus 2)x100.

Attēls: Cistanche iedarbība ārstē Alcheimera slimību

3. Rezultāti

3.1. Ehinozīda ķīmiskais sastāvs

Atklāšanai tika izmantota GC-ms/GC-FID sistēma. Analīze parādīja, ka 44 savienojumi veido 90,1 procentus no kopējā ehinozīda. Analīze parādīja, ka lielākā daļa eļļas sastāvēja no 4a-, 7a- un 7a- -neginolaktona (50,0 procenti).

3.2. Mainīga uzvedība y labirinta uzdevumā

N. Nuda ssp. Šajā uzdevumā spontānas maiņas procentuālais daudzums uzrādīja būtisku atšķirību starp grupām. Y-labirinta uzdevumā eholadīna lietošana samazināja spontānu pārmaiņu procentuālo daudzumu salīdzinājumā ar kontroles grupu, kā paredzēts (p< 0.005). Sco vs Sco+NPT 1% (p< 0.05) and Sco vs. Sco+NPT 3% (p< 0.05) was obtained by Tukey postmortem test. Management of two doses of N. nuda SSPS. Echinoside significantly increased the anisodamine-induced spontaneous alternation rate in rats.

4. Diskusija

Augi nodrošina plašu avotu klāstu jaunu zāļu ražošanai dažādu slimību ārstēšanai. Ehinozīds ir sarežģīts sekundārs metabolīts, ko augi sintezē augu produktos. Ehinozīdam ir dažādas bioloģiskas aktivitātes, tostarp antioksidanta un antiholīnesterāzes iedarbība. Tomēr unikālās ķīmiskās vielas cistancē viegli ietekmē vides vai citi faktori; Tāpēc šī situācija var ierobežot eksperimentālo rezultātu pārbaudi.

Ehinozīdu ieelpošana arī samazināja AChE aktivitāti ar skopolamīnu ārstētiem hipokampiem. Turklāt molekulārās dokstacijas analīze parādīja, ka savienojumiem Cistanche bija labs dokstacijas sadalījums. Tika parādīta savienojumu, piemēram, perhidrofarnicilacetona un trans-cis-eolaktona, mijiedarbība ar AChE enzīmu. Tāpēc ehinozīda atmiņu uzlabojošā iedarbība var būt saistīta ar holīnesterāzes inhibējošām īpašībām.

Noklikšķiniet šeit, lai uzlabotu atmiņu

5. Secinājums

Šajā pētījumā ehinozīds uzlaboja atmiņu ar skopolamīnu ārstētām žurkām. Ehinozīdam ir arī inhibējoša iedarbība uz acetilholīnesterāzi. Tāpēc cistanche ir atmiņu uzlabojoša darbība. Ehinozīds var būt saistīts ar antiholīnesterāzes aktivitāti. Ehinozīdu var lietot, lai ārstētu neiroloģiskus traucējumus, piemēram, Alcheimera slimību.

Atsauces

1.Aršads, M.; Ullah, MI; Afzals, M.; Halids, S.; Raza, ABM (2019). Augu ekstraktu novērtējums citrusaugļu lapu mīnrakstu, Phyllocnistis citrella (Lepidoptera: Gracillariidae) ārstēšanai. Kuveitas zinātnes žurnāls,46

(1): 58–67.

2.Baranauskienė, R.; Bendžiuvienė, V.; Ragažinskienė, O.; Rimantas, P. (2019).Piecu Lietuvā kultivēto Nepeta sugu ēterisko eļļu sastāvs un to bioaktivitātes, toksicitātes un hidrodestilācijas atlieku antioksidanta potenciāla novērtējums. Pārtikas un ķīmiskā toksikoloģija,129: 269–280.

3.Bermans, HM; Vestbruks, Dž.; Fens, Z.; Džililends, G.; Bhat, TNun citi. (2000). Olbaltumvielu datu banka. Nukleīnskābju izpēte,28 (1): 235–242.

4.Boltona, EE; Van, Y.; Tīsena, PA; Braients, SH (2008). PubChem: integrēta mazo molekulu un bioloģisko aktivitāšu platforma. Gada pārskati skaitļošanas ķīmijā,4: 217–241.

5.Čans, HL; Li, H.; Lui, LM (2016).Hipokampu virsmu kvazikonformālās statistiskās formas analīze Alcheimera slimības analīzei. Neiro skaitļošana,175: 177–187.

6.Cheung, J.; Gerijs, EN; Šiomi, K.; Rosenberry, TL (2013). Cilvēka acetilholīnesterāzes struktūras, kas saistītas ar dihidrotanšinonu I un territrēmu B, parāda perifērās vietas elastību. ACS Medicīniskās ķīmijas vēstules,4 (11): 1091–1096.

7.Formisano, C.; Rigano, D.; Senatore, F. (2011). Nepeta sugu ķīmiskās sastāvdaļas un bioloģiskās aktivitātes. Ķīmija un bioloģiskā daudzveidība,8 (10): 1783– 1818.

8.Ghumatkar, PJ; Patils, SP; Džeins, PD; Tambe, RM; Sathaye, S. (2015). Floretīna nootropā, neiroprotektīvā un neirotrofiskā iedarbība skopolamīna izraisītā amnēzijā pelēm. Farmakoloģija, bioķīmija un uzvedība,135: 182–91.

9.Gormess, A.; Bozari, S.; Janmis, D.; Guļuce, M.; Agars, G.un citi. (2013) No Nepeta nuda iegūtās ēteriskās eļļas antibakteriāla iedarbība un ķīmiskais sastāvs pret fitopatogēnām baktērijām. Ēterisko eļļu pētījumu žurnāls,25 (2): 149–153.

10.Gradinariu, V.; Čioanka, O.; Hritcu, L.; Žila, E.; Trifans, A.un citi. (2014). Ocimum sanctum un Ocimum basilicum gaistošo eļļu salīdzinošā efektivitāte pret amiloīda beta (1-42) izraisītu trauksmi un depresiju laboratorijas žurkām. Phytochem Rev,14: 567–575.

11.Gilers, B.; Manavs, E.; Uğurlu, E. (2015).Ārstniecības augi, ko izmanto tradicionālie dziednieki Bozüyük (Bilecik-Turcija). Etnofarmakoloģijas žurnāls,173: 39–47.

12.Guo, C.; Šens, Dž.; Mengs, Z.; Jans, X.; Li, F. (2016). Poligalacskābes neiroprotektīvā iedarbība uz skopolamīna izraisītu atmiņas deficītu pelēm. Fitomedicīna: Starptautiskais fitoterapijas un fitofarmakoloģijas žurnāls,23 (2): 149–55.