Ehinakozīda ietekme uz smadzeņu išēmijas žurkām

Abstrakts: Mērķis Izpētīt ietekmiEhinozīds(ECH) par monoamīna neirotransmiteriem striatuma ekstracelulārajā šķidrumā žurkām ar fokālu smadzeņu išēmiju un izpētīt iespējamo ECH neiroprotektīvās iedarbības mehānismu uz smadzenēm. Metodes SD žurkas tika nejauši sadalītas kontroles grupā, modeļa grupā, ECH lielas un zemas devas grupās un ligustrazīna (CXQ) grupā. Žurkām katrā grupā intraperitoneāli tika ievadītas atbilstošas ​​zāles vai fizioloģiskais šķīdums vienu reizi dienā 7 dienas. Trešajā ievadīšanas dienā zondes uzmava tika iestrādāta smadzeņu striatumā. Stundu pēc pēdējās ievadīšanas tika izveidots fokālās cerebrālās išēmijas (MCAO) žurku modelis. Pēc modeļa izgatavošanas nekavējoties tika veikta mikrodialīze. Dializāts tika ievadīts augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfijas-elektroķīmiskajā detektorā (HPLC-ECD), lai noteiktu norepinefrīna (NE), dopamīna (DA), 5-hidroksitriptamīna (5-HT), 3 saturu. ,4-dihidroksifeniletiķskābe (DOPAC), homovanilskābe (HVA), 5-hidroksiindola etiķskābe (HIAA) katras grupas striatuma ekstracelulārajā šķidrumā. Rezultāti Salīdzinot ar kontroles grupu, NE, DA un 5-HT līmenis modeļu grupā palielinājās, kā arī palielinājās skābie metabolīti DOPAC, HVA un HIAA. Salīdzinot ar modeļu grupu, sešu vielu saturs ECH (30, 15 mg · kg - 1 · d - 1) un CXQ grupās lielo un mazo devu grupās samazinājās. Secinājums ECH neiroprotektīvā iedarbība var būt saistīta ar monoamīna neirotransmiteru palielināšanos pēc smadzeņu išēmijas.

Cistanche pulveris

Atslēgas vārdi: Ehinozīds; Smadzeņu išēmija; Striatums; HPLC-ECD; Monoamīna neirotransmiteri un metabolīti

ehinaceozīds(ECH) ir efektīva feniletanoīdu glikozīdu sastāvdaļa, kas izolēti un attīrīti noCistanche deserticola, īpaša rūpnīca Siņdzjanā. Pētījumi liecina, ka ECH ir neiroprotektīva iedarbība, piemēram, antioksidācija [1-2], nervu aizsardzība [3-4], pretnovecošanās [5], kā arī mācīšanās un atmiņas uzlabošana [6-8]. Chen Hong et al. apstiprināja, ka ECH ir aizsargājoša iedarbība uz DA neironiem Parkinsona slimības gadījumā [9]. Monoamīna neirotransmiteri ir sava veida svarīgas vielas, kas regulē ķermeņa fizioloģiskās aktivitātes.Saturs audos var atspoguļot neirotransmitera biosintēzes, atbrīvošanās, uzņemšanas un inaktivācijas procesus [10-11]. Pašlaik nav atbilstoša ziņojuma par ECH ietekmi uz monoamīna raidītājiem žurku smadzenēs ar smadzeņu išēmiju. Šajā pētījumā tika pētīta ECH ietekme uz monoamīna neirotransmiteru saturu žurkām ar smadzeņu išēmiju striatuma ekstracelulārajā šķidrumā, izmantojot smadzeņu mikrodialīzes tehnoloģiju, un sākotnēji tika izpētīts iespējamais ECH mehānisms uz smadzeņu neiroprotekciju.

Cistanche tubulosa ekstrakta pulveris

1.Materiāls

1.1. Izmēģinājuma dzīvnieki

SD žurkas, ♂, ķermeņa masa 250–300 g (iegādāta Sjiņdzjanas eksperimentālo dzīvnieku centrā, licences numurs: 2009-0053).

1.2. Zāles un reaģenti

ECH ir ziedojis profesors Tu Pengfei, Pekinas Universitātes Farmācijas skola (tīrība virs 95%); Norepinefrīns (NE), dopamīns (DA), 5-hidroksitriptamīns (5-HT), 3,4-dihidroksifeniletiķskābe (DOPAC), homovanilskābe (HVA)

5-hidroksiindola etiķskābe (HIAA) ir Sigma; Tetrametilpirazīna hidrohlorīds injekcijām (CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); Cinka fosfāta cements (Shanghai Medical Instruments Co., Ltd. produkts, kas sastāv no šķidruma un pulvera, kas sajaukts ar laiku); Nātrija 1-alkilsulfāts (DIKMA); Citronskābes hidrāts (Tianjin Jinke Fine Chemical Research Institute); Trīnātrija citrāts (Acros); dinātrija etilēndiamīna tetraetiķskābe (JTTakerChemicalco); Metanols (DIKMA); Acetonitrils (DIKMA); Smadzeņu mikrodialīzes perfūzijas šķidrums ir savienojuma nātrija hlorīda injekcija (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); Viss izmantotais ūdens ir atkārtoti tvaicēts ūdens.

1.3 Instruments

Amerikāņu BAS4100 žurku smadzeņu stereotaktiskais aparāts; CMA/12 zonde un zondes uzmava; CMA/120 pie samaņas esošu dzīvnieku ierīce; CMA/402 mikrosūknis; CMA/150 zemas temperatūras paraugu automātiskais savācējs. Esa 5600A infūzijas sūknis; Esa 5600A infūzijas sūknis; Esa 542 automātiskā parauga injekcijas ierīce; Esa's CoulArray elektroķīmiskais detektors; Stikla oglekļa darba elektrods un Ag/AgCl atsauces elektrods; C18 kolonna (DIKMA, ODS5 μm, 150mm × 4,6mm); CoulArraywin hromatogrāfijas darbstacija (Esa uzņēmums); Vortex maisītājs (QL-861 tips); Darbvirsmas skābuma testeris (HANNA-211); Galddatora ātrgaitas centrifūga (XYJ-2 tips).

2.Metode

Cistanche papildinājums netālu no manis — Impierādīt atmiņu

Noklikšķiniet šeit, lai skatītu Cistanche Improve Memory produktus

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1. Dzīvnieku grupēšana un administrēšana

Trīsdesmit žurkas tika nejauši sadalītas piecās grupās: ① Kontroles grupa: 1 ml · kg-1 · d-1 parastais sāls šķīdums; ② Modeļu grupa: parastais fizioloģiskais šķīdums 1ml · kg-1 · d-1; ③ Modelis+ligustrazīns (CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ Model+ECH lielas un mazas devas grupas (ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; Visi dzīvnieki katrā grupā tika injicēti intraperitoneāli 7 dienas.

2.2 Modelēšanas metode un mikrodialīze

Katra žurka tika aprakta ar kanulu trešajā ievadīšanas dienā: žurkas tika anestēzētas ar 10% hlorālhidrātu (3,5 ml · kg-1), fiksētas uz BAS4100 smadzeņu stereotaksiskā aparāta un zondes katetrs tika implantēts kreisajā striatumā (koordinātas AP: +0.2mm; ML: - 3.0mm; DV: - 3.5mm) saistībā ar Džordža Paksinosa "Žurkas smadzeņu stereotaktisko karti". Pēc pēdējās ievadīšanas žurkas tika anestēzētas 1 stundu vēlāk, un žurkām tika izveidots fokālās cerebrālās išēmijas modelis (MCAO modelis), izmantojot Yang Zanzhang [12] uzlaboto Longa šuvju metodi. Zivju aukla kontroles grupā tika ievietota tikai 10 mm, un pārējās darbības bija tādas pašas kā operācijas grupā. Pēc modelēšanas ievietojiet mikrodialīzes zondi apzinātas un brīvas kustības stāvoklī un izmantojiet Ringera šķīdumu līdz μ Smadzeņu mikrodialīze tika savākta 4 grādos un dializāta caurule tika savākta 20 minūtēs. Pēc katras dializāta mēģenes savākšanas tā nekavējoties jāuzglabā - 20 grādu ledusskapī un pēc dialīzes jāpārnes uz - 70 grādu ledusskapi. Pirms lietošanas tika mērīts zondes atgūšanas ātrums, ko izmantoja, lai pārveidotu monoamīna neirotransmiteru koncentrāciju dializātā.

ko dara cistanche tubulosa — uzlabo atmiņu

2.3. HPLC-ECD analīze

Kustīgās fāzes konfigurācija: kustīgā fāze satur 829 ml 0,15 mol · L-1 citronskābes-nātrija citrāta buferšķīduma litrā; 0.1mol · L-1 dinātrija EDTA 1ml; Metanols 15{11}}ml; Nātrija {{10}}alkilsulfāts 0.283g. Iestatiet mobilās fāzes plūsmas ātrumu kā 0,7 ml · min-1 un kolonnas krāsns temperatūru kā 28 grādus. Elektroķīmiskā detektora darba spriegums ir 200mV, 400mV un 600 mV, attiecīgi ar 2, 3 un 4 kanāliem; Pastiprinājums ir 2nA. Injekcijas tilpums ir 25 μl. Standarta līkni zīmē ar 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 mg · L-1 gradienta jauktu standartšķīdumu.

2.4. Statistiskā apstrāde

Eksperimentālie dati ir izteikti x laukā ± s, un atkārtoto mērījumu dati tiek analizēti, izmantojot SPSS13.{1}} statistikas programmatūru.

Attēlā 1-6 ir attēlotas izmaiņas NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA un 5-HT līmeņos žurkas striatuma ekstracelulārajā šķidrumā. No attēla redzams, ka pēc smadzeņu išēmijas striatuma ekstracelulārajā šķidrumā esošajiem monoamīna neirotransmiteriem ir vielmaiņas traucējumi, un katra neirotransmitera saturs ir palielinājies. Noteiktā diapazonā pieaugums ir acīmredzamāks, pagarinot išēmijas laiku. 90 minūšu išēmijas laikā DA un NE koncentrācija striatuma ekstracelulārajā šķidrumā vairāk nekā trīs reizes pārsniedza kontroles grupas līmeni. NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA un 5-HT līmenis kontroles grupā samazinājās no augsta uz zemu, kas var būt saistīts ar īslaicīgu kreisās smadzeņu išēmiju pēc kreisās kopējās miega artērijas nosiešanas. un bojājumiem, kas radušies, ievietojot zondi. No izmaiņu līknes ECH un CXQ var samazināt DA, DOPAC, HIAA, HVA un 5-HT maksimālo koncentrāciju pēc smadzeņu išēmijas, un CXQ un lielas devas ECH ir acīmredzamākas. Katra neirotransmitera laika gaitas līknes nobīde uz leju norāda, ka ECH var kavēt neirotransmiteru un to metabolītu palielināšanos žurkām ar smadzeņu išēmiju smadzenēs.

                                                                           Ehinozīda ietekme uz DA ekstracelulāro līmeni žurku striatumā

Ehinozīda ietekme uz DOPAC ekstracelulāro līmeni žurku striatumā 4. attēls. Ehinozīda ietekme uz HIVV ekstracelulāro līmeni žurku striatumā

Ehinozīda ietekme uz ekstracelulāro HVA līmeni žurku striatumā 6. attēls Ehinozīda ietekme uz žurku 5-HT instriatuma ekstracelulāro līmeni

4.Diskusija

Supermens cistanchegaršaugs— Improve atmiņa

【Jautājiet vairāk】 E-pasts:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Smadzeņu išēmijas izraisīto smadzeņu traumu mehānisms ir sarežģīts. Smadzeņu išēmijas gadījumā monoamīna neirotransmiteri smadzenēs ir traucēti, un ievērojami samazinās NE, DA un 5-HT saturs. Jo smagāka ir smadzeņu išēmija, jo mazāks ir NE, DA un 5-HT saturs smadzeņu audos [13]. Intracerebrālās mikrodialīzes metode pierādīja, ka monoamīna neirotransmiteru saturs ekstracelulārajā šķidrumā palielinājās cerebrālās išēmijas laikā, saglabājās visu išēmisko periodu un vēl vairāk palielinājās, pagarinoties išēmiskajam laikam. Eksperimenta rezultāti atbilda ziņojumam [14].Ehinozīdsir efektīva feniletanoīdu glikozīdu sastāvdaļa, kas izolēta un attīrīta no Cistanche deserticola, īpaša auga Siņdzjanā. Tam ir daudz neiroprotektīvu efektu, piemēram, pret novecošanos, uzlabo mācīšanos un atmiņu, kā arī pret neironu apoptozi.. Šajā pētījumā tika izmantota vietējā uzlabotā smadzeņu mikrodialīze apvienojumā ar HPLC-ECD noteikšanas tehnoloģiju, lai provizoriski izpētītuEhinozīdsuz monoamīna neirotransmiteriem un to metabolītiem eksperimentālo žurku ar smadzeņu išēmiju striatuma ekstracelulārajā šķidrumā. Rezultāti parādīja, ka ECH var samazināt smadzeņu išēmijas izraisīto monoamīna neirotransmiteru pieaugumu striatuma ekstracelulārajā šķidrumā, un tam ir labāka ietekme uz smadzeņu išēmisko audu bojājumu uzlabošanos.