Cistanche Deserticola ietekme uz akūtu plaušu traumu žurkām ar sepsi

Kontakti: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 e-pasts:audrey.hu@wecistanche.com

[Anotācija]Mērķis: IzpētītCistanche deserticolapar akūtuplaušu traumas(ALI) žurkām ar sepsi. Metodes: Sepses modelis tika izgatavots ar cecal ligāciju un punkciju. Tika veikti histopatoloģiskie izmeklējumi un izmērīti ALI bioloģiskie marķieri. Rezultāti: Zem gaismas mikroskopa sāls grupā bija tūskaplaušu starptelpa, liels skaits eritrocītu un neitrofilu, kā arī plazmas olbaltumvielu alveolārajos dobumos. GadaPlaušuattiecīgi ievērojami palielinājās mitrais /sausais svars, neitrofilo leikocītu biežums un olbaltumvielu saturs plaušu alveolārās skalošanas šķidrumā plaušu asinsvadu caurlaidībā un plaušu alveolārā caurlaidībā un MDA, SOD, kā arī MPO. Grupā arCistanche deserticolaārstēšana, šie ALI rādītāji bija ievērojami zemāki nekā grupā ar fizioloģisko šķīdumu.

Secinājums:Cistanche deserticolaļoti ietekmē ALI žurkām ar sepsi. Terapeitiskais mehānisms, iespējams, ir neitrofilu un oksidatīvo brīvo radikāļu inhibīcija.

【Atslēgas vārdi】Sepse; Akūts plaušu bojājums; Cistanche deserticola

Sepse ir klīniska ārkārtas un kritiska slimība, un efektīvu ārstēšanas zāļu meklēšana vienmēr ir bijusi liela problēma klīniskajos un fundamentālajos pētījumos. Tradicionālā ķīniešu medicīnas sepses patoģenēze ir taisnīguma trūkums un ļaunuma pārpilnība. Uzbrūkošā terapija organisma ļaunajai labklājībai ir viens no efektīvajiem ārstēšanas pasākumiem.Cistancheir tradicionāla tonizējoša ķīniešu medicīna. Farmakoloģiskie pētījumi ir apstiprinājuši, ka tam ir aizsargājošas funkcijas, piemēram, šūnu DNS sintēzes ātruma uzlabošana un pretošanās bezskābekļa radikāļiem. Autors eksperimentāli novēroCistanche par plaušu problēmas bojājumiemsepses gadījumā, lai nodrošinātu efektīvu sepses ārstēšanas izpēti.

Cistanche Echinacoside ārstē plaušu slimību

1 Materiāls un metodes

1. 1DzīvnieksVeselība 40 vīriešu 5D žurkas, kas sver 200 ~ 250 g, ko nodrošināja Huazhong Zinātnes un tehnoloģijas universitātes Eksperimentālo dzīvnieku centrs, kvalitātes pārbaudes numurs: TJLA - 2008 - 1670 tika nejauši sadalīti 3 grupās: 8 normāla sāls grupa, Ig / ML baklažānu pastas grupā bija 12 žurkas un 5g / mlCistanchegrupa. Izmēģinājumu dzīvniekiem tika dotas atbilstošās zāles, regulāri gavējot 15 dienas, divas reizes dienā (Cistanchedeserticola ekstraktu nodrošināja šīs slimnīcas tradicionālā ķīniešu medicīnas sagatavošanas telpa), un 200 mg/kg deva tika izmantota izmēģinājuma dzīvniekiem saskaņā ar literatūras metodi U] 12 minūtes pēc cecal ligācijas un perforācijas. Paraugu savākšana.

1.2Žurku plaušu histoloģiskā izmeklēšana.Paņemiet nelielu daudzumu dzīvnieka kreisās daivasPlaušuno katras grupas piestipriniet to ar 10% formaldehīdu, parafīnu iestrādājiet sekciju un HE traipus, novērojiet ar parastu optisko mikroskopu, un, pamatojoties uz to, ņemietPlaušuproblēma, lai padarītu 1mm3 25 Tas tika fiksēts% glutaraldehīda šķīdumā, pēc tam fiksēts 1% tetroksīda šķīdumā, dehidrēts ar etanolu un acetonu, iestrādāts Epon 81, sagatavotas īpaši plānas sekcijas, iekrāsotas ar urāna-svinu un novērotas ar transmisijas elektronu mikroskopu.

1.3Žurku plaušu problēmas mitrās/sausās masas attiecības noteikšana, šūnu skaita attiecības noteikšana alveolārajā skalošanas šķidrumā un olbaltumvielu saturs Svara attiecība.Vēl vienai žurku grupai pēc torakotomijas tika veikta alveolāra skalošana, un skalošanas šķidrums mikroskopā tika pakļauts šūnu skaitam un šūnu klasifikācijai. Coomassie izcili zilo metodi izmanto, lai noteiktu olbaltumvielu saturu un aprēķinātuPlaušucaurlaidības indekss (alveolārās skalošanas šķidruma proteīns/plazmas proteīns, LPI).

1.4Plaušu asinsvadu caurlaidības (PVP) izmaiņas žurkāmSaskaņā ar metodi, kas tika ieviesta ar Zhou et al. (2), pēc ievadīšanas katras grupas dzīvniekiem tika veikta cecal ligācija un perforācija, un augšstilba vēnu injekcija 50 mg/kg lantāna tika izmantota, lai atvērtu krūtis un noņemtu plaušas. Noņemiet apkārtējās problēmas, iemērcietPlaušasformamīda šķīdumā (formamīda daudzums ir 20mg/100g ķermeņa masas), inkubēts 45-50T inkubatorā 72h, pagaidiet, līdz visi problemātisko pigmentu ir izskaloti, izņemiet problēmas, centrifugējiet un paņemiet centrifugātu, Izmantojiet ultravioleto spektrofotometru, lai veiktu kolorimetriju pie 620nm, un aprēķiniet etanola saturu saskaņā ar standarta līkni, lai noteiktu PVP izmaiņas.

1.5Malondialdehīda (MDA) noteikšana žurku plaušu problēmas gadījumāLAI noteiktu MDA aktivitāti, tika izmantota tiobarbitūrskābes (TBA) metode. Pievieno 4mL 1,67mol/L sērskābi. 0,541% fosfonskābes līdz 50 ml analizējamam paraugam, labi samaisa, centrifugē 3000r/min 10min un vēlreiz apstrādā nokrišņus, kā norādīts iepriekš, tad pievieno 1mL divkārt destilētu ūdeni, 1 ml TBA šķīduma, 95% bezūdens vannu 60 minūtes, ekstrakciju ar 5 ml n-butanola, tetra etoksipropānu standartā, galīgo lnmola/L koncentrāciju, fluorescences spektrofotometru pie 532nm, lai izmērītu absorbciju.

1.6Superoksīda dismutāzes (SOD) noteikšana žurku plaušu problēmu gadījumāSaskaņā ar metodi literatūrā [4] SOD aktivitāti noteica ar Huangpuyin oksidāzes metodi (komplekts iegādāts no Nanjing Jiancheng Bioloģiskās inženierijas institūta).

1.7Mieloperoksidāzes (MPO) noteikšana žurkāmPlaušuproblēma.Ņemiet plaušu problēmu, lai pēc iespējas vairāk mazgātu atlikušās asinis izotoniskā sāls šķīdumā, un ievietojiet to fosfātu buferšķīdumā, kas satur 0,5% cetil trimetilbromīda (PH6. 0) Izgatavojiet 5% homogenāta un darbojieties saskaņā ar komplekta instrukcijām.

1.8Statistikas metodesIzmantojiet SPSS statistikas programmatūru un mēriet datus (x±s) formā, izmantojot t-testu un X2 testu.

Cistanche

2 rezultāti

2.1. Mitrās/sausnas svara attiecības salīdzinājumsPlaušuproblēmas, šūnu skaita attiecība un olbaltumvielu saturs alveolārajā skalošanas šķidrumā katrā grupā ir parādīti 1. tabulā. GadaPlaušumitrā/sausā svara attiecība sālsūdens grupā bija ievērojami augstāka nekāCistanchegrupa (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistanchegrupa bija ievērojami zemāka nekā sālsūdens grupā (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

1. tabula Plaušu problēmas mitrās/sausās masas attiecības un šūnu skaita attiecības un olbaltumvielu satura salīdzinājums žurku alveolārajā skalošanas šķidrumā katrā grupā (X ± S)

Salīdzinot ar parasto sālsūdens grupu, P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2. Žurku plaušu problēmu morfoloģisko izmaiņu salīdzinājums katrā grupā. Vispārīgs novērojums:Plaušassālsūdens grupā bija ievērojami palielināts un tumši sarkans, ar dažādu sastrēgumu un tūskas pakāpi uz virsmas, kā arī lielu skaitu plaušu infarktu malā; plaušasCistanchegrupa bija gaiši sarkana ar virsmu Viegls sastrēgums un tūska, bez acīmredzama plaušu infarkta. Gaismas mikroskopa novērošana parādīja, ka sāls grupā bija alveolāri un plaušu intersticiāli sastrēgumi un tūska, liels skaits difūzo neitrofilo leikocītu infiltrācijas alveolārajā dobumā, daži abscesu veidojumi un dažādas atelektāzes, nekrozes un kompensējošās emfizēmas pakāpes. , Trombs un līdzīga caurspīdīga membrānas veidošanās. Iepriekš minētie cistanche grupas bojājumi bija ievērojami samazināti. Sāls grupā alveolārās epitēlija šūnas uzbrieda, lamelāri asinsķermenīši acīmredzami iztukšojās, veidojās lieli vakuoli, kapilāru endotēlija šūnas bija pietūkušas, endotēlija šūnas tika nepārtraukti ievainotas, starpšūnu telpa paplašinājās, kapilāri un alveolārās pagraba membrānas bija vaļīgas un paplašinātas. Neregulāra sabiezēšana, nevienmērīgs biezums. Cistanche grupā alveolārās epitēlija šūnas nebija pietūkušas, samazinājās lamelārā asinsķermenīšu iztukšošanās, izveidoto vakuolu skaits bija mazs, savienojums starp kapilārajām endotēlija šūnām bija tuvu normālam, un pagraba membrāna bija nedaudz vaļīga un neregulāri sabiezēta. Salīdzinot ar Ig/niL cistanche grupu, 5g/ml cistanche grupā bija mazāks plaušu problēmu morfoloģisko izmaiņu diapazons, un plaušu bojājuma pakāpe bija vieglāka.

2.3. Žurku LPI un PVP salīdzinājums katrā grupā ir parādīts 2. tabulā. Sālsūdens grupas LPI un PVP bija ievērojami augstāki nekā Cistanche grupas LPI un PVP (PV0,05 vai 0,01). Cistanche grupas LPI un PVP bija zemāki, kam bija ievērojama devas un iedarbības attiecība.

2.4 MDA darbības salīdzinājums. VELĒNA. MPOPlaušužurku problēmas katrā grupā ir parādītas 3. tabulā. MDA satursPlaušusālsūdens grupas problēma bija ievērojami augstāka nekāCistanchegrupā, savukārt SOD aktivitāte un MPO aktivitāte Cistanche grupas plaušu problēmā bija ievērojami palielināta (F<0.05 or="">

3 Diskusija

Vairākkārtēja orgānu mazspēja ir neatgriezeniskā stāvokļa un augstā mirstības līmeņa pamatcēlonis sepses vēlīnā stadijā (5). Orgānu funkcijas aizsardzībai ir liela nozīme, lai samazinātu augsto sepses klīnisko mirstību. Plaušas ir pirmais orgāns ar vairāku orgānu mazspēju. 1/3 pacientu ar sepsi mirst no akūta plaušu bojājuma (ALI) un akūta respiratorā distresa sindroma (ARDS). Ali galvenais patofizioloģiskais mehānisms ir daudzu neitrofilo leikocītu uzkrāšanās plaušu problēmā un Tas aktivizē un pielīp asinsvadu endotēlija šūnām. Tajā pašā laikā palielinās samazinātas koenzīma II oksidāzes koncentrācija, kas pārnes atsevišķus elektronus, izraisot elpošanas pārrāvumus, radot lielu daudzumu skābekļa brīvo radikāļu un izraisot šūnu membrānu un membrānas struktūru bojājumus un funkcijas, izmantojot spēcīgu oksidāciju. Šķēršļi [6]. Lipīdu peroksīds atspoguļo skābekļa brīvo radikāļu maiņu problēmā un ir tieši saistīts ar plaušu traumas pakāpi (7). Organisma fermentatīvajā un ne-fermentatīvajā pretradikālās oksidācijas sistēmā SOD aktivitāte uztur labu korelāciju ar problēmas bojājuma pakāpi (7). Salīdzinot ar fizioloģiskā fizioloģiskā šķīduma grupu, Cistanche grupas MDA un SOD aktivitātes uzrādīja statistiski nozīmīgas atšķirības. Cistanche funkcijas ir imūnās funkcijas, kas uzlabo imūno funkciju, pretnovecošanās un uzlabo šūnu DNS sintēzes ātrumu. Eksperimentālie rezultāti parādīja, ka ievērojami samazinājās Cistanche grupas plaušu koeficients, PLT, alveolārās skalošanas šķidruma neitrofilo leikocītu attiecība un plaušu asinsvadu caurlaidība, samazinājās plaušu problēmas MDA aktivitāte, ievērojami palielinājās SOD un samazinājās MPO aktivitāte. Tajā pašā laikā morfoloģiskie novērojumi parādīja, ka plaušu problēmas bojājuma pakāpe ir ievērojami samazināta, neitrofilo leikocītu infiltrācija tika samazināta, un 5g/ml Cistanche grupā bija mazāk plaušu traumu nekā Ig/ml Cistanche grupā, un bija laba devas un efekta attiecība. Tas liek domāt, ka Cistanche ir būtiska aizsargājoša iedarbība uz ALI. Mehānisms var būt: (1) Inhibē iekaisuma šūnu migrācijuPlaušas, samazina skābekļa brīvos radikāļus, ko rada neitrofilie leikocīti un citas aktivētās šūnas, lai bioplēve būtu aizsargāta; (2) Veicināt nukleīnskābju un olbaltumvielu sintēzi un aizsargāt pret plaušu bojājumu iedarbību; (3) Uzlabot fagocītu imūno funkciju un samazinātPlaušuproblēmas bojājumi, ko izraisa endotoksīns. Eksperimentālie rezultāti nodrošina eksperimentālu pamatu akūta plaušu bojājuma ārstēšanai klīniskās sepses gadījumā, stiprinot ķermeni un stiprinot trūkumu.

Atsauces

[1] Džins Huimings. Sepses modelis pēc cecal ligācijas un perforācijas [J]. Ķīniešu patofizioloģijas žurnāls "990, 6 (2): 126 ~ 127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA u.c. Trombocītu aktivizējošā faktora loma pankreatīta izraisītā akūtā plaušu traumā žurkām [J]. Am J Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. Mūsdienu medicīnas eksperimentālās metodes [M]. Pekina: Tautas medicīnas izdevniecība, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Mūsdienu klīniskās bioķīmiskās laboratorijas zinātne [M]. Pekina: Tautas militārā medicīnas prese, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Šoka pētījumi [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008: 345.

[6] Xanthous CA, Zāle JB. Samsel RW. Endotoksīns cilvēka slimībā, 2. daļa Anti-endotoksīnu teoriju bioloģisks efekts un klīniskais novērtējums[J]