Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta ietekme uz peļu ar zarnu trakta traucējumiem zarnu mikrobiotu

Xiaowei Bao, Dongwen Bai, Xiaolu Liu, Ying Wang, Lanjun Zeng, Chenye Wei un Weiquan Jin

Pārtikas zinātnes un farmācijas koledža, Sjiņdzjanas Lauksaimniecības universitāte, Urumči 830052, Ķīna

Sarakste jāadresē Xiaowei Bao; xiaoweibao0723@xjau.edu.cn

Saņemts 2021. gada 29. aprīlī; Pieņemts 2021. gada 30. jūnijā; Publicēts 2021. gada 14. jūlijā

Šis ir brīvpiekļuves raksts, kas tiek izplatīts saskaņā ar Creative Commons Attribution License, kas atļauj neierobežotu izmantošanu, izplatīšanu un reproducēšanu jebkurā datu nesējā, ja oriģinālais darbs ir pareizi citēts.

Kontaktpersona:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Abstrakts

Zarnu mikrobiotas traucējumi ir saistīti ar daudzām slimībām. Ūdens ekstrakts noCistanchetubulosaIr ziņots, ka (CT), tradicionālajai ķīniešu augu formulai, ir nozīme cilvēka zarnu aizsardzībā. Tomēr maz ir zināms par tā ietekmi uz zarnu mikrobiotu. Šis pētījums tika veikts, lai noteiktu, vaiCistancheTubulosaūdens ekstrakts var modulēt zarnu mikrobiomu pelēm ar zarnu traucējumiem. Mēs noskaidrojām, ka bojāto zarnu morfoloģiju, ko izraisīja ārstēšana ar cefiksīmu, var izglābt, izmantojotCistancheTubulosaūdens ekstrakts. Mikrobu daudzveidības salīdzinājums starp pelēm, kas ārstētas ar Cistanche Tubulosa ekstraktu, un kontroles pelēm arī norādīja, ka traucējumus modeļu grupu mikrobiomu kopienā var atjaunot, ārstējot ar augstu un vidēju koncentrāciju.CistancheTubulosaūdens ekstrakts. Ārstēšana ar cefiksīmu izraisīja ievērojamu pienskābes baktēriju skaita samazināšanos; tomēr papildinājumsCistancheTubulosaūdens ekstrakts atjaunoja šo pienskābes baktēriju augšanu. Turklāt,CistancheTubulosaūdens ekstrakts spēja mazināt dramatiskās izmaiņas zarnu mikrobioma vielmaiņas ceļos, ko izraisīja cefiksīms. Šie atklājumi sniedza ieskatu par Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta labvēlīgo ietekmi uz zarnu mikrobiotu, kā arī sniedza svarīgu atsauci saistītu zāļu izstrādei nākotnē.

Cistanchetubulosair daudz efektu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

1. Ievads

Zarnu mikroorganismi galvenokārt kolonizē zarnu lūmenu un gļotādas slāni un savstarpēji sadarbojas ar saimniekorganismu, izmantojot materiālu un enerģijas apmaiņu, transformāciju un citus procesus [1]. *ey ir signalizācijas centri, kas integrē vides ziņojumus, piemēram, diētu, ar ģenētiskiem un imūniem signāliem, tādējādi ietekmējot saimnieka vielmaiņu, imunitāti, nervu sistēmu un reakciju uz infekcijām [2]. Parasti pastāv dinamisks līdzsvars starp zarnu floru un saimniekiem; tomēr zarnu disbioze var izraisīt izmaiņas veselības/slimību līdzsvarā, imūnsistēmas traucējumus un daudzas slimības [3]. Saimniekam ir pieņemamas mērenas izmaiņas zarnu mikrobiotā; tomēr tas joprojām var nodrošināt iespējas pastiprināt izmaiņas citos pastiprinošos faktoros, piemēram, bakteriofāgos, bakteriocīnos un oksidatīvajā stresā [4].

Iepriekšējie pētījumi ir parādījuši, ka tradicionālās ķīniešu augu formulas Cistanche tubulosa (CT) etanola ekstrakts var regulēt zarnu mikrobu sastāvu žurkām [5], un Cistanche Tubulosa kopējie glikozīdi koriģēja nesakārtoto zarnu mikrobiotu [6]. Cistanche sugas, kas galvenokārt parazitē uz Tamarix sugu saknēm, tiek sauktas arī par "tuksneša žeņšeņu", un toniku, kas sastāv no Cistanche deserticola (CD) un Cistanche tubulosa (CT) kātiem, izmanto kā augu izcelsmes līdzekli [7 ]. Tika konstatēts, ka Cistanche Tubulosa feniletanola glikozīdu (PHG) galvenie ķīmiskie komponenti, kas ir antioksidanti [8, 9], uzlabo reproduktīvo disfunkciju [10], nomāc aknu zvaigžņu šūnu aktivāciju, bloķē signalizācijas ceļu vadīšanu TGF{{6. }}/SMAD [11] un novērš liellopu seruma albumīna izraisītu aknu fibrozi žurkām [12]. Starp vairāk nekā 100 Cistanche Tubulosa sastāvdaļām polisaharīds ir arī viena no svarīgākajām vielām ar bagātīgu saturu [13, 14]. Iepriekšējie pētījumi ir pierādījuši, ka C. deserticola polisaharīdi inducē melanoģenēzi melanocītos, samazina oksidatīvo stresu[15], mazina kognitīvo disfunkciju, regulējot antioksidantu un pretiekaisuma procesus žurkām [16], aizsargā PC12 šūnas pret OGD/RP izraisītiem bojājumiem [17]. , uzlabo ehinakozīda uzsūkšanos in vivo un ietekmē zarnu mikrobiotu [18].

Probiotikas ir dzīvi, nepatogēni mikroorganismi, kuriem ir labvēlīga ietekme uz veselību un tie nodrošina mikrobu līdzsvaru kuņģa-zarnu traktā, ja tos ievada atbilstošā daudzumā [19]. *ey var uzlabot nespecifiskas šūnu imūnās atbildes reakcijas, ko raksturo makrofāgu, dabisko killer (NK) šūnu aktivizēšana un antigēnu specifiskums toksiskiem T limfocītiem un dažādu citokīnu izdalīšanās celmam raksturīgā un no devas atkarīgā veidā [20 ]. Probiotiskie celmi uzlabo zarnu epitēlija īpašības, izmantojot TJ modulāciju, un ir pierādīts, ka specifiski probiotiskie celmi regulē mucīna ekspresiju, tādējādi ietekmējot gļotu slāņa īpašības un netieši regulējot zarnu imūnsistēmu [21]. Pienskābes baktēriju (LAB) un Bifidobacterium celmi ir galvenās probiotikas, kas ir izmantotas daudzās jomās [22–26]. Viņiem ir daudz ieguvumu veselībai, un to antioksidantu spēja ir svarīgs faktors ar veselību saistītajās funkcijās[27]. Probiotikas var helātus veidot metālu jonus, lai neļautu tiem katalizēt oksidēšanos [28, 29]; tie var arī palielināt antioksidantu enzīmu ekspresiju [30, 31], ražot dažādus metabolītus ar antioksidantu aktivitāti [32, 33], mediēt antioksidantu signālu ceļus [34–36] un regulēt fermentus, kas ražo reaktīvās skābekļa sugas (ROS) un zarnu mikroorganismu reakcija uz oksidatīvo stresu[37].

cistanche zieds

Nesenais pētījums parādīja, ka Cistanche Deserticola polisaharīdi var stimulēt dažu pienskābes baktēriju augšanu, kas varētu būt labvēlīga cilvēku veselībai [38]. Tomēr polisaharīdu saturs Cistanche Deserticola atšķiras no Cistanche Tubulosa [7, 39], un šī atšķirība var izraisīt atšķirīgu ietekmi uz zarnu mikroorganismiem. Turklāt, lai gan Cistanche Deserticola polisaharīdi var samazināt oksidatīvo stresu, aktivizējot NRF2/HO-1 ceļu [15], viena polisaharīda iedarbība var atšķirties no vairāku kompozīciju kopējās iedarbības Cistanche Tubulosa. Tādējādi ir nepieciešams precīzi definēt Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu ietekmi uz zarnu mikroorganismiem. Turklāt PHG var arī pretoties oksidatīvajam stresam [40] un nomākt lipopolisaharīdu izraisītas iekaisuma reakcijas, aktivizējot Keap1/Nrf2/HO-1 ceļu [41]. Tāpēc Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta iedarbības noteikšana ir ļoti vērtīga. Turklāt dažu Cistanche Deserticola ūdens ekstrakta sastāvdaļu ietekme uz oksidatīvo stresu un zarnu floru liecina, ka izturība pret oksidatīvo stresu var būt saistīta ar zarnu floras izmaiņām.

Lai aizpildītu nepilnības zināšanās par iepriekš minētajām tēmām, mēs pētījām Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta ietekmi uz zarnu mikrobiotu pelēm ar zarnu floras traucējumiem. Šie rezultāti sniegs vērtīgu informāciju par iespējamiem mehānismiem, ar kuru palīdzību Cistanche Tubulosa maina zarnu floru un piešķir zarnu rezistenci pret oksidatīvo stresu.

2. Materiāli un metodes

2.1. Eksperimentālie dzīvnieki.

Pavisam no Sjiņdzjanas Medicīnas universitātes Eksperimentālo dzīvnieku centra tika iegādātas 18 SPF klases vīriešu kārtas C57BL/6J peles, kuru svars bija 18–22 g, ar licences numuru SCXK (jauna) 2018-0003. Tie tika izmitināti būros standartizētos apstākļos: 12 stundu gaismas/tumsas fotoperiods, 23 ± 2 grādu temperatūra un 55 ± 5 procenti mitrums. * dzīvnieki tika baroti ar komerciālu barību (51 procenti bezslāpekļa ekstrakta, 25 procenti kopproteīna, 4,6 procenti koptauku, 6,5 procenti koppelnu, 4,2 procenti kopšķiedras un 8,9 procenti mitruma) un krāna ūdeni. . * Dzīvnieki tika ārstēti saskaņā ar ieteikumiem, kas aprakstīti Nacionālo veselības institūtu laboratorijas dzīvnieku kopšanas un lietošanas rokasgrāmatā.

2.2. Ūdens ekstrakta ekstrakcija.

Žāvētas šķēles C. tubulosa, ko nodrošina Hotan Dichen PharmaceuticalBiotechnology Co., Ltd., tika samaltas pulverī un tika atlasītas granulas ar daļiņu izmēru no 20 līdz 40. Ekstrakcijas apstākļi bija šādi: cietās un šķidruma attiecība 1:19, temperatūra 80 grādi, mikroviļņu laiks 6 minūtes, ultraskaņas laiks 16 minūtes, mikroviļņu jauda 400 W un ultraskaņas jauda 400 W. Ūdens ekstrakta galveno komponentu saturs tika noteikts ar HPLC (Agilent 1260 Infinity II, Kalifornija, ASV). Īsāk sakot, ehinakozīda (0,2 mg/ml) un akteozīda (0,2 mg/ml) standartvielas tika izšķīdinātas 50% metanolā, lai kalpotu par standartvielas šķīdumu. Pēc tam 1 g CT ūdens ekstrakta tika izšķīdināts 100 ml 50 procentu metanola un atstāts 30 minūtes. Ekstrakta šķīdumu apstrādāja ar ultraskaņu pie 250 W un 35 kHz 10 minūtes un pēc tam centrifugēja ar ātrumu 12, 000 apgr./min. Supernatants tika infiltrēts ar 0, 45 μm mikroporainu filtra membrānu. Standartvielas šķīdumu un filtrātu pēc tam noteica ar HPLC šādos apstākļos: oktadecilsilānam piesaistīts silikagels kā pildviela, metanols kā kustīgā fāze A un 0,1% skudrskābe kā kustīgā fāze B. Kolonnas temperatūra tika iestatīta uz 30 °C. grādu, noteikšanas viļņa garums tika iestatīts kā 330 nm, un injekcijas tilpums bija 10 μL.

2.3. Eksperimenti.

Pēc vienas nedēļas adaptācijas 18 peles tika nejauši sadalītas sešās grupās: A (normāla ar vidējo devu Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta), B (normāla bez Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta), C (modelis bez ūdens ekstrakta), D (modelis ar lielas devas Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta pievienošanu), E (modelis ar vidējas devas Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta pievienošanu) un F (modelis ar pievienotu mazas devas Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu). Grupas tika apstrādātas šādi: parastā grupa tika piesūcināta ar parasto sāls šķīdumu, modeļa grupa tika piesūcināta ar cefiksīmu (30 mg/kg, Shiyao Group OuyiPharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, Ķīna) un parasto fizioloģisko šķīdumu. -devu grupa tika piesūcināta ar cefiksīmu un 221,14 mg/kg Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta, vidējās devas grupa tika piesūcināta ar cefiksīmu un 165,54 mg/kg ūdens ekstrakta, un mazo devu grupa tika piesūcināta ar cefiksīmu un 110,57 mg/kg ūdens ekstrakta. A grupa tika piesūcināta ar 165,54 mg/kg ūdens ekstrakta, un cefiksīms netika pievienots. Cefiksīms tika ievadīts katru dienu pulksten 12:00, bet citas vielas tika ievadītas katru dienu pulksten 15:00. Eksperimentu laikā C, D, E un F grupas tika turētas zarnu traucējumu modeļa stāvoklī. *Efekālijas tika savāktas ik pēc septiņām dienām uz sterila darbināma galda un uzglabātas -20 grādu temperatūrā.

2.4. Peļu resnās zarnas histopatoloģiskais novērojums.

Eksperimenta beigās peles tika nogalinātas ar dzemdes kakla dislokāciju, un to resnās zarnas saturs tika savākts uz sterila darbināma galda un uzglabāts -80 grādu temperatūrā; tajā pašā laikā resnās zarnas audu paraugi tika fiksēti 10 procentu neitrālā formalīnā. Pēc tam paraugi tika dehidrēti, izmantojot etanola gradienta koncentrāciju, hialinizēti, izmantojot ksilolu, iestrādāti parafīnā, sadalīti un iekrāsoti ar hematoksilīna-eozīnu. Morfoloģiskās izmaiņas resnās zarnas gļotādā tika novērotas un salīdzinātas, izmantojot optisko mikroskopu. Tika izmērīts villu garums un kripta dziļums resnajā zarnā, un tika aprēķināta villu garuma attiecība pret kripta dziļumu (V/C vērtība) (51).

2.5. DNS ieguve un bibliotēkas izveide. DNS tika ekstrahēta no fekālijām, izmantojot EZNA®Soil DNS komplektu (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, ASV) saskaņā ar ražotāja protokolu. DNS kvalitāte tika noteikta, izmantojot fluorometru (QuantiFluor™-ST, Promega Corporation, ASV). Pārī savienotie praimeri 16s rDNS V3-V4 reģionā tika izstrādāti, lai pastiprinātu šo reģionu un ražotu 466 bp DNS fragmentus. *e priekšējais primer bija 341F (-5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3-), bet reversais primers bija 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-). Katrs PCR tilpums bija 25 μL, kas satur 2, 5 μL 10 × PCR buferšķīduma, 2 μL dNTP, 1 μL katra primera un 20–30 ng veidnes DNS. *lv, indeksētie adapteri tika pievienoti amplikonu galiem, lai ģenerētu secības bibliotēkas. Bibliotēkas tika validētas, izmantojot QuantiFluor™ fluorometru, un kvantitatīvi noteiktas līdz 10 nmol.

akteozīds cistancē var stiprināt imūnsistēmu

2.6. 16s rRNS gēnu sekvencēšana un mikrobu kopienas analīze.

Illumina platforma (Illumina MiSeq) tika izmantota, lai iegūtu 2 × 250 bp pāra gala datus. Operatīvās taksonomiskās vienības (OTU) tika iegūtas, izmantojot Uparse programmatūru, izmantojot standarta klasterizāciju ar 97 procentu līdzību. LAP klasifikatora naivais Bayesian assignment algoritms tika izmantots, lai saskaņotu OTU ar Greengene datu bāzes versiju 13.5 un veiktu sugu anotāciju. Zarnu mikrobiotas alfa daudzveidība tika aprēķināta, izmantojot Šenona un Simpsona indeksus, un atšķirības starp grupām tika analizētas ar lineāro diskriminācijas analīzi Effect Size (LEfSe). Beta daudzveidība tika analizēta, izmantojot Brady-Curtis atšķirību galveno koordinātu analīzi (PCoA). PICRUSt2 tika izmantots, lai novērtētu zarnu mikrobioma mikrobu vielmaiņas spēju [42].

2.7. Statistisko datu analīze.

Vienvirziena ANOVA tika izmantots SPSS 20, un eksperimentālie dati tika izteikti kā X ± S; X norāda vidējo vērtību, bet S norāda standarta novirzi.

3. Rezultāti

3.1. Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta ietekme uz resnās zarnas morfoloģiju.

Reprezentatīvie savienojumi (ehinakozīds un akteozīds) un to koncentrācijas Cistanche Tubulosa ekstraktā tika apstiprināti ar HPLC (S1 attēls). Lai noteiktu ūdens ekstrakta ietekmi uz zarnām, mēs pētījām resnās zarnas bārkstiņu garumu un padziļinājumu dziļumu pēc apstrādes ar Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu. Resnās zarnas bārkstiņas normālā un lielas devas grupā (A, B un D) bija garākas un līdzīgas pirkstiem, turpretim resnās zarnas bārkstiņas modelī un mazo devu grupās (C un F) bija īsas un resnās zarnas gali bārkstiņas bija salauztas (1. attēls). Attiecīgi lielas devas Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakts ievērojami palielināja resnās zarnas bārkstiņu garumu un samazināja padziļinājuma dziļumu pelēm ar zarnu trakta traucējumiem, salīdzinot ar pelēm modeļu grupā (P < 0.01).="" turpretim="" padziļinājuma="" dziļums="" lielas="" devas="" grupā="" un="" parastajā="" grupā="" būtiski="" neatšķīrās="" (p=""> 0, 05) (S1 tabula). Šie rezultāti liecināja, ka liela Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta deva var uzlabot morfoloģiju resnās zarnas iekšienē pelēm ar zarnu traucējumiem.

3.2. Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta ietekme uz zarnu mikrobiotas daudzveidību.

Mēs veicām 16s rRNS gēnu sekvencēšanu, lai izpētītu iespējamo morfoloģisko izmaiņu cēloni resnās zarnas iekšienē un izpētītu zarnu mikrobiotas izmaiņas pēc apstrādes ar CT ūdens ekstraktu. No neapstrādātajiem datiem tika iegūti vidēji 100 553 efektīvi tagi, sākot no 77 734 līdz 125 144 (S2 tabula). Šie tagi tika sagrupēti 4932 OTU (S3 tabula). Pēc tam mēs analizējām zarnu mikrobiotas daudzveidību, pamatojoties uz Theseus. Šenona un Simpsona indeksi neuzrādīja atšķirību starp A grupu (normāli ar Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu) un B grupu (normālu bez CT ūdens ekstrakta) (2. attēls (a)). *ir norādīts, ka pelēm bez cefiksīma apstrādes CT ūdens ekstraktam, iespējams, nebija papildu labvēlīgas vai kaitīgas ietekmes uz zarnu mikrobiotas daudzveidību. Tomēr daudzveidība modeļu grupā (C) uzrādīja samazināšanās tendenci, salīdzinot ar normālām grupām. * Pelēm, kas tika ārstētas ar lielu un vidēju CT ūdens ekstraktu devu, bija daudzveidības atjaunošanās pazīmes, turpretim pelēm, kuras tika ārstētas ar zemas devas CT ūdens ekstraktu, šāda parādība netika novērota (2. attēls (a)). Tikmēr PCoA atklāja, ka parastajām grupām (A un B) un zarnu trakta traucējumu grupām, kas tika ievadītas lielas devas (D) un vidējas devas (E) CTūdens ekstraktiem, parasti bija īsāki attālumi starp paraugiem nekā modeļu grupā un zemas devas CTūdens ekstrakta piedevu grupa (F) (2. attēls (b)). Šie rezultāti liecināja, ka CT ūdens ekstrakts varētu palīdzēt uzlabot zarnu mikrobiotas daudzveidību pelēm ar zarnu traucējumiem.

3.3. Izmaiņas zarnu mikrobiotas sastāvā, kas apstrādāta ar Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu.

Mikrobiotas sastāva profili tika salīdzināti dažādās grupās. Patvēruma līmenī proteobaktēriju relatīvais daudzums modeļa grupā bija augstāks nekā citās grupās (3. attēls (a)). Proteobaktēriju skaita palielināšanās liecināja, ka cefiksīms mainīja modeļu peļu mikrobiomu un ka CT ūdens ekstrakts varētu dot labumu zarnu mikrobiotai, jo palielināta proteobaktēriju izplatība ir nesakārtotas zarnu floras marķieris [43–45]. Turklāt ģints līmenī Lactobacillus relatīvais daudzums modeļa grupā samazinājās, salīdzinot ar normālu un lielu devu grupām; tomēr tas palielinājās salīdzinājumā ar vidējo un zemo devu grupu (3. b) attēls). Šie rezultāti norādīja, ka lielas devas CTaqueous ekstrakts var veicināt dažu Lactobacillus ģints baktēriju augšanu.

Atšķirīgā mikrobiota starp pētītajām grupām tika tālāk noteikta saskaņā ar LEfSe analīzi. Šī analīze parādīja, ka pēc apstrādes ar cefiksīmu ievērojami palielinājās Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales un Chloroflflexi relatīvais daudzums, bet lactobacillus, Eubacterium{0}}nodatum{1}}grupas relatīvais daudzums. cardiales un Christensenellaceae_R-7_grupa ievērojami samazinājās, salīdzinot ar normālā grupā (4. attēls (a)). Pārsteidzoši, kad modeļu grupa tika papildināta ar lielas devas CT ūdens ekstraktu, Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, Eubacterium no datum grupas un Pedobacter relatīvais daudzums ievērojami palielinājās, salīdzinot ar modeļu grupā. Tikmēr Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 un Candidatus Stoquefifichus relatīvais daudzums ievērojami samazinājās, salīdzinot ar modeļu grupā (4. attēls (b).

3.4. Zarnu mikrobiotas funkcijas, kas saistītas ar apstrādi ar Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu.

Mēs izmantojām PICRUSt2 programmatūru, lai prognozētu zarnu mikrobiotas vielmaiņas ceļus, un parastā grupa tika izmantota kā atsauce, lai analizētu izmaiņas citās grupās. Apstrādājot ar cefiksīmu, palielinājās etilbenzola sadalīšanās relatīvais daudzums, sideroforu grupas neribosomālo peptīdu biosintēze un ksenobiotiku metabolisms pa citohroma P450 ceļiem; pēc apstrādes ar augstas un vidējas devas Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktiem to relatīvais daudzums atgriezās normālā līmenī. Tikmēr ciānskābes metabolisma ceļa relatīvais daudzums cefiksīma terapijas laikā samazinājās; tomēr tas palielinājās pēc apstrādes ar lielas devas CT ūdens ekstraktu. Turklāt kopumā izmaiņas dažādos metabolītu ceļos pēc ārstēšanas ar cefiksīmu bija nozīmīgas, salīdzinot ar izmaiņām parastajā grupā; tomēr Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta pievienošana spēja novērst pārmērīgas izmaiņas (5. attēls).

4. Diskusija

Resnās zarnas morfoloģiju var mainīt augšana, gremošana un uzsūkšanās, imūnregulācija un zarnu bojājumu labošana [46–50]. V/C attiecība var vispusīgi atspoguļot zarnu trakta gremošanas stāvokli un ir tieši proporcionāla zarnu trakta gremošanas un absorbcijas spējai [51, 52]. Šajā pētījumā villi un recesusbiopsija un statistikas dati parādīja, ka lielas devas ūdens ekstrakts var daļēji uzlabot bojāto morfoloģiju resnās zarnas iekšienē. Lai izpētītu, kā ūdens ekstrakts maina zarnu morfoloģiju un ietekmē zarnu mikrobiotu, mēs strādājām atpakaļ no izmaiņām zarnu florā. Mēs noskaidrojām, ka proteobaktēriju, nesakārtotas zarnu floras centrmezgla marķiera, relatīvais daudzums palielinājās, ārstējot ar cefiksīmu, salīdzinot ar to bez cefiksīma.*Citu centrmezglu marķieru, Bacteroidetes un Firmicutes, relatīvajam daudzumam nebija būtisku izmaiņu, lai gan šīs antioksidanta aktivitātes in vitro [56] un var veicināt dažu pienskābes baktēriju augšanu, kas varētu labvēlīgi ietekmēt saimniekorganisma veselību [43]. Paralēli Muribaculaceae ir probiotiski organismi, kas saistīti ar ilgmūžību [57]. Tie liecināja, ka mehānisms, ar kuru CT ūdens ekstrakts uzlabo zarnu mikrobiotu, var būt probiotisko organismu augšanas veicināšana vai aizsardzība. Vēl viena baktērija, kas ir vērts atzīmēt, bija baktērija YE57. Lai gan lielas devas CTaqueous ekstrakts veicināja baktērijas YE57 relatīvo pārpilnību šajā pētījumā (4. attēls), iepriekšējos pētījumos ir konstatēts, ka tās daudzums normālā zarnā bija lielāks nekā zarnās, kas apstrādātas ar augstas koncentrācijas zāļu tējas atlikumiem. 58] un ka tā daudzums tika samazināts pēc iejaukšanās ar Bacillus licheniformis kombinācijā ar XOS (ksilooligosaharīdiem) [59]. Tādējādi šīs baktērijas loma zarnu mikrobiotā ir pelnījusi turpmāku izpēti. Turklāt salīdzinoši nelielais paraugu skaits šajā pētījumā var izraisīt kļūdaini pozitīvu un viltus negatīvu rezultātu, un turpmākais pētījums par lielākiem paraugiem tiek ieteikts, lai apstiprinātu identificētos baktēriju marķierus.

Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakta sastāvs varētu būt nozīmīgs, lai tas ietekmētu peļu ar zarnu trakta traucējumiem zarnu mikrobiotas sastāvu un funkcionālajām izmaiņām. PHG ir bieži sastopami aktīvie komponenti, kas atrodami Cistanche Deserticola un Cistacnche Tubulosa, un ehinakozīds tika identificēts kā galvenais Cistache PNG. Tubulosa [60]. Pēdējās desmitgadēs ehinakozīdam piemīt daudzas farmakoloģiskas aktivitātes, piemēram, pretnovecošanās un neiroprotektīva iedarbība, sirds funkcijas uzlabošana, hiperlipidēmijas un hiperglikēmijas samazināšana, kā arī aptaukošanās izraisīta diabēta un metaboliskā sindroma profilakse [53, 61–65] . Faktiski mēs atklājām izmaiņas zarnu mikrobiotas vielmaiņas ceļos.*e cefiksīma apstrāde noveda pie baktēriju bagātināšanas, kas saistītas ar etilbenzola sadalīšanos un sideroforu grupas neribosomālo peptīdu biosintēzi, savukārt ārstēšana ar lielu un vidēju Cistanche devu Tubulosa ūdens ekstrakts varētu mazināt šīs izmaiņas, norādot, ka šis ekstrakts regulēja ar šīm funkcijām saistīto baktēriju kopienu. Turklāt palielināta baktēriju bagātināšana, kas saistīta ar ciānaminoskābes metabolisma ceļu, apstrādājot ar lielas devas ūdens ekstraktu, un tā samazinātā bagātināšanās modeļu pelēm norādīja, ka Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakts var veicināt ciānaminoskābes metabolismu. * Izmaiņas attiecīgajos metabolītos var nodrošināt šim ūdens ekstraktam farmakoloģiskas aktivitātes.

cistanche augs

Lai gan mehānisms, ar kuru Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakts maina zarnu mikrobiotas sastāvu un funkciju, ir sarežģīts, ir dažas norādes, kas ļauj spekulēt par iespējamo mehānismu. Ir ziņots, ka gan pienskābes baktērijas, gan Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakti var antagonizēt oksidatīvo stresu. Oksidatīvais stress, kas rodas iekaisuma laikā, ir izplatīts faktors, kas saasina zarnu darbības traucējumus, spēcīgi samazinot zarnu mikrobu daudzveidību un veicinot specifisku baktēriju pieaugumu (4). Gluži pretēji, reaktīvās skābekļa sugas veicina arī baktēriju grupu selektīvu augšanu, izmantojot nitrātu un tetrationātu elpošanu. [66–68]; piemēram, Enterobacteriaceae dzimtas baktērijas var strauji augt zarnu floras sastāva izmaiņu rezultātā oksidatīvos apstākļos iekaisuma laikā [69, 70]. Lielākajai daļai dzīvo organismu attīsta enzīmu aizsardzību, neenzimātisku antioksidantu aizsardzību un labošanas mehānismus, lai attīrītu skābekļa radikāļus [71]. Tomēr šīs dabiskās antioksidantu sistēmas parasti nav pietiekamas, lai novērstu oksidatīvos bojājumus dzīvos organismos. Vairāki papildu sintētiskie antioksidanti, tostarp butilēts hidroksianizols un butilēts hidroksitoluols, ir plaši izmantoti, lai samazinātu oksidēšanos, taču to drošība ir apšaubīta [72, 73]. Tāpēc pētnieki ir pievērsušies drošāku un dabiskāku antioksidantu atrašanai, kas iegūti no dabā sastopamām vielām. Tā kā gan polisaharīdi, gan pienskābes baktērijas spēj novērst oksidatīvo stresu, precīza Cistanche Tubulosa ūdens ekstraktu antioksidanta mehānisma noteikšanai uz zarnu mikrobiotu ir nepieciešama turpmāka izmeklēšana nākotnē.

Noslēgumā mēs noskaidrojām, ka Cistanche Tubulosa ūdens ekstrakts spēja uzlabot zarnu mikrobiotu pelēm ar zarnu traucējumiem, veicinot daudzveidību, regulējot vielmaiņas izmaiņas un pārveidojot zarnu mikrobiotas struktūru, un šie rezultāti var sniegt atsauci uz attīstību. saistītajām narkotikām nākotnē.

Datu pieejamība

Operatīvo taksonomisko vienību statistika starp visiem parauga datiem, kas izmantoti, lai pamatotu šī pētījuma secinājumus, ir iekļauta papildu informācijas failos, un 16s rRNS sekvencēšanas dati, kas izmantoti šī pētījuma secinājumu atbalstam, tiks publicēti pēc publicēšanas.

Interešu konflikti

Autori paziņo, ka viņiem nav interešu konfliktu.

Pateicības

Šis pētījums tika finansiāli atbalstīts ar Ķīnas Nacionālā dabaszinātņu fonda dotācijām (81860766).

Papildu materiāli

Attēls S1: HPLC noteikšana Cistanche tubulosa ūdens ekstraktam. a ) ehinakozīda un akteozīda maksimums atsauces materiālā parādās 5, 066 minūtēs un 9, 988 minūtēs atsevišķi. (b) *Ehinakozīda un akteozīda maksimums ūdens ekstraktā parādās pēc 5,097 min un 10,076 min atsevišķi, un koncentrācijas ir 236 mg/g un 12,7 mg/g atsevišķi. S1 tabula: resnās zarnas bārkstiņu garums un padziļinājumu dziļums. S2 tabula. Statistiskā informācija par 16S rRNS sekvencēšanas datiem. S3 tabula: katras izlases operatīvo taksonomisko vienību statistika. (papildu materiāls).

Atsauces

[1] A. Heintz-Butchart un P. Wilmes, "Cilvēka zarnu mikrobioms: funkcijas nozīme", Trends in Microbiology, sēj. 26, Nr. 7, 563.–574. lpp., 2018. gads.

[2] CA Thaiss, N. Zmora, M. Levy un E. Elinav, "The microbiome and innate immunity", Nature, sēj. 535, Nr. 7610, 65.–74. lpp., 2016. gads.

[3] G. Quaranta, M. Sanguinetti un L. Masucci, "Fekālo mikrobiotas transplantācija: potenciāls līdzeklis cilvēka sieviešu reproduktīvo trakta slimību ārstēšanai", Frontiers in Immunology, sēj. 10. lpp. 2653, 2019.

[4] GA Weiss un T. Hennet, "Zarnu disbiozes mehānismi un sekas", Cellular and Molecular Life Sciences, sēj. 74, Nr. 16, 2959.–2977. lpp., 2017. gads.

[5] Y. Li, Y. Peng, P. Ma et al., "Cistanche tubulosa ekstrakta antidepresantiem līdzīga ietekme uz hronisku neparedzamu stresu žurkām, atjaunojot zarnu mikrobiotas homeostāzi", Frontiers in Pharmacology, sēj. 9. lpp. 967, 2018.

[6] L. Fan, Y. Peng, J. Wang, P. Ma, L. Zhao un X. Li, "Totalglikozīdi no Cistanche tubulosa kātiem atvieglo depresijai līdzīgu uzvedību: fitoķīmisko vielu un zarnu mikrobiotas divvirzienu mijiedarbība, "Fitomedicīna, sēj. 83,panta ID 153471, 2021. gads.

[7] Y. Li, Y. Peng, M. Wang, P. Tu un X. Li, "Cistanche herba ūdens ekstrakta metabolisms cilvēka kuņģa-zarnu traktā invitro: vielmaiņas profila noskaidrošana, pamatojoties uz visaptverošu metabolītu identifikāciju kuņģa sulā, zarnu sula, cilvēka zarnu baktērijas un zarnu mikrosomas," Journal of Agricultural and Food Chemistry, vol. 65, Nr. 34, 7447.–7456. lpp., 2017. gads.

[8] H. Wang, Y. Sun, W.-C. Ye et al., "Antioksidatīvie feniletanoīdi un fenola glikozīdi no Picrorhiza Scrophularia floras", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, sēj. 52, Nr. 5, 615.–617. lpp., 2004. gads.

[9] S.-L. Dži, K.-K. Cao, X.-X. Zhao et al., "Feniletanoīdu glikozīdu antioksidanta aktivitāte uz glutamāta izraisītu neirotoksicitāti", Bioscience, Biotechnology and Biochemistry, sēj. 83, Nr. 11, 2016.–2026., 2019. lpp.

[10] Q. Wang, J. Dong, W. Lu et al., "Feniletanola glikozīdi no Cistanche tubulosa uzlaboja reproduktīvo disfunkciju, regulējot sēklinieku steroīdus, izmantojot CYP450-3 -HSDpathway", Journal of Ethnopharmacology, sēj. 251, pants ID112500, 2020.

[11] S.-P. Jūs, L. Ma, J. Džao, S.-L. Džans un T. Liu, "Cistanche tubulosa feniletanola glikozīdi nomāc aknu zvaigžņu šūnu aktivāciju un bloķē signalizācijas ceļu vadīšanu TGF- 1/smad kā potenciālus pretaknu fibrozes līdzekļus," Molecules, sēj. 21, Nr. 1. lpp. 102, 2016.

[12] S.-P. Jūs, J. Žao, L. Ma, M. Tudima, S.-L. Zhang un T. Liu, "Cistanche tubulosa feniletanoīdu glikozīdu profilaktiskā ietekme uz liellopu seruma albumīna izraisītu aknu fibrozi žurkām", DARU Farmācijas zinātņu žurnāls, sēj. 23, Nr. 1. lpp. 52, 2015. gads.

[13] T. Morikawa, H. Xie, Y. Pan, et al., "Bioloģiski aktīvo dabisko produktu apskats no tuksneša auga Cistanche tubulosa", Chemical and Pharmaceutical Bulletin, sēj. 67, Nr. 7, 675.–689. lpp., 2019. gads.

[14] J. Li, J. Li, A. Aspire et al., "Cistanche tubulosa feniletanola glikozīdi inhibē B16-F10 šūnu augšanu gan in vitro, gan in vivo, inducējot apoptozi caur mitohondriju atkarīgs ceļš," Vēža žurnāls, sēj. 7, Nr. 13, 1877.–1887. lpp., 2016. gads.

[15] Y. Hu, J. Huang, Y. Li et al., "Cistanche deserticola polisaharīds inducē melanoģenēzi melanocītos un samazina oksidatīvo stresu, aktivizējot NRF2/HO-1 ceļu", Journal of Cellular and Molecular Medicine, sēj. 24, Nr. 7, 4023.–4035. lpp., 2020. gads.

[16] S. Peng, P. Li, P. Liu u.c., "Cistanches atvieglo sevoflurāna izraisītu kognitīvo disfunkciju, regulējot no PPAR c atkarīgo antioksidantu un pretiekaisuma līdzekli žurkām", Journal of Cellular and Molecular Medicine, sēj. 24, Nr. 2, 1345.–1359. lpp., 2020. gads.

[17] Y. Liu, H. Wang, M. Yang et al., "Cistanche deserticola polisaharīdi aizsargā PC12 šūnas pret OGD/RP izraisītiem bojājumiem", Biomedicine & Pharmacotherapy, sēj. 99, 671.–680.lpp., 2018. gads.

[18] Z. Fu, L. Han, P. Zhang et al., "Cistanche polisaharīdi uzlabo ehinakozīda uzsūkšanos in vivo un ietekmē zarnu mikrobiotu", International Journal of Biological Macromolecules, sēj. 149, 732.–740. lpp., 2020. gads.

[19] NT Williams, "Probiotics", American Journal of Health-System Pharmacy, sēj. 67, Nr. 6, 449.–458. lpp., 2010. gads.

[20] R. Ashraf un NP Shah, "Imūnās sistēmas stimulēšana ar probiotiskiem mikroorganismiem", Critical Reviews in Food Science and Nutrition, sēj. 54, Nr. 7, 938.–956. lpp., 2014. gads.

[21] G. La Fata, P. Weber un MH Mohajeri, "Probiotics and the gut immune system: indirectregulation", Probiotics and antimicrobial Proteins, vol. 10, nē. 1, 2018. gada 11.–21. lpp.

[22] MA Zocco, LZ dal Verme, F. Cremonini, et al., "Efficacy of lactobacillus GG in supporting remisiju of ulcerative collitis", Alimentary Pharmacology and 8erapeutics, sēj. 23, Nr. 11, 1567.–1574. lpp., 2006. gads.

[23] MJ Saez-Lara, C. Gomez-Llorente, J. Plaza-Diaz un A. Gil "*e probiotisko pienskābes baktēriju un bifidobaktēriju loma iekaisīgu zarnu slimību un citu saistītu slimību profilaksē un ārstēšanā: sistemātisks randomizētu cilvēku klīnisko pētījumu pārskats," BioMed Research International, sēj. 2015, raksta ID 505878, 15 lpp., 2015. gads.

[24] MAO Dawood, S. Koshio, M. Ishikawa u.c., "Lactobacillus rhamnosus un/un lactococcus lactis uztura papildināšanas ietekme uz sarkano jūras brekšu augšanu, zarnu mikrobiotu un imūnreakciju, Pagrus major", Fish. & ShellfishImmunology, sēj. 49, 275.–285. lpp., 2016. gads.

[25] A. Sivan, L. Corrales, N. Hubert, et al., "Commensal bifidobacterium veicina pretvēža imunitāti un atvieglo anti-PD-L1 efektivitāti", Science, sēj. 350, Nr. 6264, 1084–1089, 2015. lpp.

[26] PJ Whorwell, L. Altringer, J. Morel u.c., "Iekapsulēta probiotiskā Bifidobacterium infant efektivitāte ir 35624 sievietēm ar kairinātu zarnu sindromu", 8e American Journal of Gastroenterology, sēj. 101, Nr. 7, 1581.–1590. lpp., 2006. gads.

[27] Y. Wang, Y. Wu, Y. Wang et al., "Probiotisko baktēriju antioksidanta īpašības", Nutrients, sēj. 9, Nr. 5. lpp. 521, 2017.

[28] JMC Gutteridžs, R. Ričmonds un B. Hallivels, "Dzelzs katalizētas hidroksilradikāļu veidošanās no superoksīda un lipīdu peroksidācijas inhibīcija ar desferrioksamīnu", Biochemical Journal, s. 184, Nr. 2, 469.–472. lpp., 1979. gads.

[29] E. Deriu, JZ Liu, M. Pezeshki, et al., "Probiotiskās baktērijas samazina salmonellas Typhimurium zarnu kolonizāciju, konkurējot par dzelzi", Cell Host & Microbe, sēj. 14, Nr. 1, 2013. gada 26.–37. lpp.

[30] T. Kullisaar, M. Zilmer, M. Mikelsaar, et al., "Two antioxidative lactobacilli strains as permissioning probiotics", International Journal of Food Microbiology, vol. 72, Nr. 3, 215.–224. lpp., 2002. gads.

[31] JG LeBlanc, S. del Carmen, A. Miyoshi u.c., "Superoksīda dismutāzes un katalāzes ražošanas pienskābes baktēriju izmantošana TNBS inducētās Krona slimības gadījumā pelēm", Journal of Biotechnology, sēj. 151, Nr. 3, 287.–293. lpp., 2011. gads.

[32] M. Rossi, A. Amaretti un S. Raimondi, "Folate production by probioticbacteria", Nutrients, sēj. 3, nē. 1, 2011. gada 118.–134. lpp.

[33] A. Pompeja, L. Cordisco, A. Amaretti u.c., "Folātus ražojošo bifidobaktēriju ievadīšana uzlabo folātu statusu Wistar žurkām", 8e Journal of Nutrition, sēj. 137, Nr. 12, 2742.–2746. lpp., 2007. gads.

[34] L.-X. Wang, K. Liu, DW Gao un JK Hao, "Divu Lactobacillus Plantarum celmu aizsardzības efekti hiperlipidēmiskām pelēm", World Journal of Gastroenterology, sēj. 19, Nr. 20, 3150.–3156. lpp., 2013. gads.

[35] EO Petrof, K. Kojima, MJ Ropeleski, et al., "Probiotikas inhibē kodolfaktoru-κB un inducē siltuma šoka proteīnus resnās zarnas epitēlija šūnās, izmantojot proteasomu inhibīciju", Gastroenterology, sēj. 127, Nr. 5, 1474.–1487. lpp., 2004. gads.

[36] A. Seth, F. Yan, DB Polk un RK Rao, "Probiotikas uzlabo ūdeņraža peroksīda izraisīto epitēlija barjeras traucējumus ar PKC un MAP kināzes atkarīgu mehānismu", American Journal of Physiology-Gastrointestinal and aknu Physiology , sēj. 294, Nr. 4, G1060–G1069, 2008. lpp.

[37] M. G'omezGuzm´an, M. Toral, M. Romero u.c., "Probiotiku Lactobacillus celmu antihipertensīvā ietekme spontāni hipertensīvām žurkām", Molecular Nutrition & FoodResearch, sēj. 59, Nr. 11, 2326.–2336. lpp., 2015. gads.

[38] H. Zengs, L. Huans, L. Džou, P. Vans, X. Čens un K. Ding, "Galaktoglikāns, kas izolēts no Cistanchedeserticola YC Ma. un tā bioaktivitāte pret zarnu baktēriju celmiem," Carbohydrate Polymers, vol. 223, raksta ID 115038, 2019. gads.

[39] S. Zheng, X. Jiang, L. Wu, Z. Wang un L. Huang, "Cistanche herba ķīmiskā un ģenētiskā diskriminācija, pamatojoties uz UPC-QTOF/MS un DNS svītrkodiem", PLoS One, sēj. 9, Nr. 5, raksta ID e98061, 2014. gads.

[40] M. Li, T. Xu, F. Zhou et al., "Četru feniletanoīdu glikozīdu neiroprotektīvā ietekme uz H2O2-inducētu apoptozi uz PC12 šūnām, izmantojot Nrf2/ARE ceļu", Starptautiskais molekulāro zinātņu žurnāls , sēj. 19, Nr. 4. lpp. 1135, 2018.

[41] A. Wu, Z. Yang, Y. Huang et al., "Dabīgie feniletanoīdu glikozīdi, kas izolēti no Callicarpa kwangtungensis, nomāca lipopolisaharīdu izraisītu iekaisuma reakciju, aktivizējot Keap1/Nrf2/HO258 ceļu RAW 264. makrofāgu šūna," Journal of Ethnopharmacology, vol. 258, panta ID 112857, 2020. gads.

[42] GM Douglas, VJ Maffffei, JR Zaneveld u.c., "PICRUSt2 for prognoze of metagenome functions", Nature Biotechnology, sēj. 38, Nr. 6, 685.–688. lpp., 2020. gads.

[43] H.-L. Li, L. Lu, X.-S. Wang et al., "Zarnu mikrobiotas un iekaisuma citokīnu/kemokīnu profilu izmaiņas 5-fluoruracila izraisītā zarnu mukozīta gadījumā", Frontiers in Cellular and infekcijas Microbiology, sēj. 7. lpp. 455, 2017.

[44] M. Pammi, J. Cope, PI Tarr et al., "Zarnu disbioze priekšlaicīgi dzimušiem zīdaiņiem pirms nekrotizējoša enterokolīta: sistemātisks pārskats un metaanalīze", Microbiome, sēj. 5, nē. 1, lpp. 2017. gada 31. gads.

[45] N.-R. Shin, TW When un J.-W. Bae, "Proteobaktērijas: disbiozes mikrobu paraksts zarnu mikrobiotā", Trends in Biotechnology, sēj. 33, Nr. 9, 496.–503. lpp., 2015. gads.

[46] M. de Oliveira Belem, CP Cirilo, AP de Santi-Rampazzoet al., "Zarnu morfoloģijas korekcijas, ko izraisa uztura ierobežojumi, uzlabo uztura stāvokli žurku novecošanas procesā", Experimental Gerontology, sēj. 69, 85.–93.lpp., 2015. gads.

[47] B. Potsic, N. Holliday, P. Lewis, D. Samuelson, V. Demarko un J. Neu, "Glutamīna papildināšana un atņemšana: ietekme uz mākslīgi audzētu žurku tievo zarnu morfoloģiju", Pediatric Research, sēj. 52, Nr. 3, 430.–436. lpp., 2002. gads.

[48] ​​JL Daniels, RJ Bloomer, M. van der Merwe, SL Davis, KK Buddington un RK Buddington, "Zarnu adaptācijas dažādu diētu kombinācijai ar un bez izturības vingrinājumiem", Starptautiskās sporta uztura biedrības žurnāls, sēj. 13, Nr. 1. lpp. 2016. gada 35. gads.

[49] L. Muñoz, MJ Borrero, M. ´Ubeda et al., "Disbiozes izraisīta zarnu imūnsistēmas disregulācija veicina barjeras traucējumus un baktēriju pārvietošanos žurkām ar cirozi", Hepatology, sēj. 70, Nr. 3, 925.–938. lpp., 2019. gads.

[50] X. Li, Y. Wu, Z. Xu et al., "Effects of hetiao Jianping novārījums uz zarnu bojājumu un labošanu žurkām ar antibiotikām saistītu caureju", Medical Science Monitor, sēj. 26, pants IDe921745, 2020. gads.

[51] Y. Xie, F. Ding, W. Di et al., "Diēta ar augstu tauku saturu ietekmi uz zarnu cilmes šūnām un epitēlija barjeras funkciju pusmūža peļu mātītēm", Molecular Medicine Reports, sēj. 21, Nr. 3, 1133.–1144. lpp., 2020. gads.

[52] BL Bivolarski un EG Vachkova, "Morfoloģiskie un funkcionālie notikumi, kas saistīti ar atšķiršanu trušiem", Journal of Animal Physiology and Animal Nutrition, sēj. 98, Nr. 1, 2014. gada 9.–18.lpp.

[53] H. Šimoda, J. Tanaka, Y. Takahara, K. Takemoto, S.-J. Shan un M.‑H. Su, "*e Cistanchetubulosa ekstrakta, ķīniešu tradicionālās neapstrādātas zāles, hipoholesterinēmiskā iedarbība pelēm", 8e American Journal of Chinese Medicine, vol. 37, Nr. 6, 1125.–1138. lpp., 2009. gads.

[54] RE Ley, PJ Turnbaugh, S. Klein un JI Gordon, "Cilvēka zarnu mikrobi, kas saistīti ar aptaukošanos", Nature, sēj. 444, Nr. 7122, 1022-1023. lpp., 2006. gads.

[55] J.-Y. Kim, YM Kwon, I.-S. Kim et al., "Brūno jūraszāļu laminaria japonica papildināšanas ietekme uz IgG, triglicerīdu un holesterīna koncentrāciju serumā un zarnu mikrobiotas sastāvu žurkām", Frontiers in Nutrition, sēj. 5. lpp. 2018. gada 23. gads.

[56] W. Zhang, J. Huang, W. Wang et al., "Polisaharīdu ekstrakcija, attīrīšana, raksturošana un antioksidantu aktivitātes no Cistanche tubulosa", International Journal of BiologicalMacromolecules, sēj. 93, 448.–458. lpp., 2016. gads.

[57] M. Sibai, E. Altuntas, B. Yildırım, G. ¨Ozt¨urk, S. Yıldırım un T. Demircan, "Mikrobioms un ilgmūžība: liels ar ilgmūžību saistītu Muribaculaceae pārpilnība ilgstoši dzīvojošā grauzēja Spalax leucodon zarnās", OMICS: A Journal of IntegrativeBiology, sēj. 24, Nr. 10, 592.–601. lpp., 2020. gads.

[58] Y. Xie, Z. Chen, D. Wang u.c., "Raudzētu zāļu tējas atlikumu ietekme uz Holšteinas teļu zarnu mikrobiotas īpašībām karstuma stresa apstākļos", Frontiers in Microbiology, sēj. 11. lpp. 1014. gads, 2020. gads.

[59] Y. Li, M. Liu, H. Liu u.c., "Apvienotās Bacillus licheniformis zhengchangsheng un xylooligosaccharides perorālie piedevas uzlabo tauku satura diētas izraisītu aptaukošanos un modulē zarnu mikrobiotu žurkām", BioMed Research International, vol. . 2020, raksta ID 9067821, 17 lpp., 2020. gads.

[60] Y. Jiang un P.-F. Tu, "Cistanche sugu ķīmisko sastāvdaļu analīze", Journal of Chromatography A, sēj. 1216, Nr. 11, 1970.–1979., 2009. lpp.

[61] F. Li, Y. Yang, P. Zhu et al., "Ehinakozīds veicina kaulu atjaunošanos, palielinot OPG/RANKL attiecību MC3T3-E1 šūnās," Fitoterapia, sēj. 83, Nr. 8, 1443.–1450. lpp., 2012. gads.

[62] F. Tang, Y. Hao, X. Zhang un J. Qin, "Ehinakozīda ietekme uz nieru fibrozi, inhibējot TGF- 1/Smads signālu ceļu diabētiskās nefropātijas DB/DB peles modelī ”, Drug Design, Development and 8erapy, vol. 11, 2813.–2826. lpp., 2017. gads.

[63] W.-T. Sjons, L. Gu, K. Vans, H.-X. Sun un X. Liu, "Cistanche tubulosa antihiperglikēmiskā un hipolipidēmiskā iedarbība 2. tipa diabēta DB/DB pelēm", Journal of Ethnopharmacology, vol. 150, Nr. 3, 935.–945. lpp., 2013. gads.

[64] X.-x. Bao, H.-h. Ma, H. Ding, W.-w. Li un M. Zhu, "Ķīnas augu izcelsmes zāļu formulas sākotnējā optimizācija, pamatojoties uz neiroprotektīvo iedarbību rotenona izraisītas Parkinsona slimības žurku modelī", Journal of IntegrativeMedicine, sēj. 16, Nr. 4, 290.–296. lpp., 2018. gads.

[65] Y. Chen, Y.-Q. Li, J.-Y. Fang, P. Li un F. Li, "Osteoporozes vienlaicīga eksperimentālā modeļa izveide kopā ar Alcheimera slimību žurkām un ehinakozīda un akteozīda divējāda iedarbība no Cistanche tubulosa", Journal of Ethnopharmacology, vol. 257, panta ID 112834, 2020. gads.

[66] M. Hensels, AP Hinslijs, T. Nikolauss, G. Zāerss un B. C. Berks, "*e ģenētiskais pamats tetrationāta elpošanai Salmonella Typhimurium", Molecular Microbiology, sēj. 32, Nr. 2, 275.–287. lpp., 1999. gads.

[67] SE Winter, P. Thiennimitr, MG Winter, et al., "Zarnu iekaisums nodrošina elpceļu elektronu akceptoru salmonellui", Nature, sēj. 467, Nr. 7314, 426.–429. lpp., 2010. gads.

[68] SE Winter, MG Winter, MN Xavier, et al., "No saimniekorganisma iegūtais nitrāts veicina E. coli augšanu iekaisušajās zarnās", Science, sēj. 339, Nr. 6120, 708.–711. lpp., 2013. gads.

[69] C. Lupp, ML Robertson, ME Wickham, et al., "Saimnieka izraisīts iekaisums izjauc zarnu mikrobiotu un veicina Enterobacteriaceae pārmērīgu augšanu", Cell Host &Microbe, sēj. 2, nē. 2, 2007. gada 119.–129. lpp.

[70] B. Stecher, R. Robbiani, AW Walker et al., "Salmonellaenterica serovar Typhimurium izmanto iekaisumu, lai konkurētu ar zarnu mikrobiotu", PLoS Biology, sēj. 5, nē. 10, e244–2189, 2007. lpp.

[71] V. Mišra, K. Šahs, N. Mokaše, R. Čavans, H. Jadavs un Dž. Prajapati, "Probiotikas kā potenciālie antioksidanti: sistemātisks pārskats", Lauksaimniecības un pārtikas ķīmijas žurnāls, sēj. 63, Nr. 14, 3615.–3626. lpp., 2015. gads.

[72] JMP Mart´ın, PF Freire, L. Daimiel, et al., "Antioksidants butilētais hidroksianizols pastiprina propilparabēna toksisko iedarbību kultivētās zīdītāju šūnās", Food and Chemical Toxicology, sēj. 72, 195.–203. lpp., 2014. gads.

[73] RS Lanigan un TA Yamarik, "Galīgais ziņojums par BHT drošības novērtējumu", International Journal of Toxicology, sēj. 21, Nr. 2, 2002. gada 19.–94. lpp.