Ganoderma Lucidum ūdens ekstrakts, kas inducē PHGPx, lai inhibētu membrānas lipīdu hidroperoksīdus un regulētu oksidatīvo stresu, pamatojoties uz vienas šūnas dzīvnieka transkriptu

Lūdzu sazinietiesoscar.xiao@wecistanche.comlai iegūtu vairāk informācijas

Šajā eksperimentā kā eksperimentālais materiāls tika izmantots Tetrahymena thermophila. T. thermophila ir brīvi dzīvojošs ciliāts, kas plaši eksistē globālajās ūdens ekosistēmās un pēc struktūras un funkcionālās sarežģītības ir līdzīgs metazoa šūnām5. Ribozinnela6 un telomerazela7 atklāšana Tetrahymenā deva būtisku stimulu pretnovecošanās mehānismu izpētē, kas tika apbalvota ar divām Nobela prēmijām8. Īsā augšanas cikla, vieglās kultūras un skaidrā ģenētiskā fona dēļ T. termofīls varētu nodrošināt duālus pētījumus in vivo un in vitro vienā eksperimentālā projektā. T. thermophila ir veiksmīgi izmantota zāļu skrīningā un farmakoloģiskajos mehānismos20. Vēl svarīgāk ir tas, ka ir atklāta informācija par T. thermophila glutationa peroksidāzes saimes molekulāro attīstību9-2. Informācijas profils T.Cistanče Čingishhansthermophila GPX gēnus var iegūt no Tetrahymena Functional Genomics Database (TetraFGD) (http://tfgd.ihb.ac.cn/) un TGD (http://ww. ciliate.org)22. Desmit no divpadsmit iespējamajiem GPX Tetrahymena genoma salīdzinošajā datubāzē ir identificēti kā fosfolipīdu hidroperoksīda glutationa peroksidāze (PHGPx). PHP, no selēna atkarīgs GPX, var īpaši samazināt fosfolipīdu hidroperoksīdu, lai aizsargātu lecitīna liposomas un bioplēves no oksidatīviem bojājumiem23.PHGPxin T. thermophila vidējā molekulmasa ir aptuveni 21,7 kDa22, kas ir līdzīga molekulmasai (20-22 kDa) PHGPx monomēra proteīna, kas aprakstīts zīdītājiem24. Turklāt liels skaits ziņojumu parādīja, ka Tthermophila GPX ekspresija bija kvantitatīvi atšķirīga un atkarīga no stresa avota (oksidanta, apoptozes induktora vai metāla)2122 un ekspozīcijas laika20-24

Lūdzu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

Salīdzinot G.lucidum ūdens ekstrakta un galveno monomēru ietekmi uz augšanas līkni un T. thermophila maksimālo blīvumu, šajā pētījumā tika iegūts labākais G. lucidum ekstrakts pret novecošanos. G. lucidum pretnovecošanās mehānisms, īpaši GPX saimes darbības veida noteikšana, tika pētīts molekulārā, šūnu un individuālā līmenī. Paredzams, ka šī pētījuma rezultāti veicinās G. lucidum produktu klīnisko pielietojumu.

materiāli un metodes

Ganoderma lucidum ūdens ekstrakts un monomēri. Atsaucoties uz Cuong ziņojumu, 20 g žāvētas G. lucidum (Changbai Mountain Senbao specializētais veikals, Jilin) ​​tika samalts un ekstrahēts 1000 ml ddHO. Ūdens ekstrakts tika savākts, centrifugējot, koncentrēts līdz 100 ml ar vakuuma žāvēšanu un uzglabāts -20 grādos līdz lietošanai.

G. lucidum polisaharīds, Ganoderskābe A, Ganoderal A un G. lucidum ergosterols tika iegādāti no Chengdu Must Biotechnology Co.,Ltd. Šie trīs standarti tika izšķīdināti metanolā saskaņā ar vienotu dizainu un pievienoti SPP barotnei. Šūnu kultūra un ārstēšana ar zālēm. Tetrahymenathermophila (SB210) nodrošināja Ķīnas Zinātņu akadēmijas Hidrobioloģijas institūts Uhaņā, IPR Ķīnā. T. thermophila tika kultivēta 28 grādu inkubatorā. SPP barotne saturēja 2 procentus (w/v) proteozes peptonu, 0,1 procentus rauga ekstrakta (oksoīda), 0,2 procentus glikozes un 0,003 procentus sekvestrēna. Saskaņā ar vienoto dizainu (papildu tabulas S1 un S2), G. lucidum ūdens ekstrakts, G. barotnei tika pievienots lucidum polisaharīds, ganoderskābe A, ganoderāls A un G. lucidum ergosterols. Kontroles grupa tika aizstāta ar tādu pašu tilpumu divreiz destilēta ūdens ar 3 paralēliem paraugiem katrā grupā. Pēc ieiešanas logaritmiskajā fāzē paraugi tika ņemti ik pēc 2 stundām līdz lejupslīdes fāzei. T. thermophila blīvums tika skaitīts ar asins šūnu skaitīšanas paneli, un tika noteikta sakarība starp T. thermophila blīvumu un laiku.

Transkripcijas analīze. Eksperiments tika veikts ar 24-iedobes plāksni, un katra iedobe sastāvēja no 900 μL SPP. Eksperimentālajā grupā tika pievienots 100 μL 200 mg/ml G. lucidum ūdens ekstrakta. Tā vietā kontroles grupa tika apstrādāta ar 100 μL ddH O. Katrā grupā tika noteikti trīs paralēli paraugi.cistanche dzīves pagarināšanaKontroles grupa un eksperimentālā grupa atradās logaritmiskajā fāzē (20 h), un lejupslīdes fāze (27 h) tika savākta transkriptomiskajai analīzei. Katra grupa tika bioloģiski dublēta, un visi paraugi tika pakļauti visa transkripta mikroarray testam (Biomarker Technologies, Pekina, Ķīna). Gēnu ekspresijas profils tika noteikts ar Affymetrix 3'IVT ekspresijas masīvu. Lai samazinātu vērtību gēnu ekspresijas ietekmi, kā skrīninga kritēriji tika izmantoti RPKM, kas ir lielāks par vai vienāds ar 5 un FC (Fold Change) Lielāks vai vienāds ar 2. diferencēti izteikti gēni (DEG) KOBAS tika izmantots, lai realizētu GeneOntology (GO) un Kioto gēnu un genomu enciklopēdijas (KEGG) ceļa analīzi. Bagātināšanas ceļš tika noteikts pēc koriģētās P-adj vērtības, kas ir mazāka par vai vienāda ar 0,05. Transkripta rezultāti tika pārbaudīti, izmantojot kvantitatīvo reversās transkripcijas PCR (RT-qPCR) (metodi skatīt Papildu failā). Pēc tam, pamatojoties uz STRING datubāzi, tika izveidots proteīna-olbaltumvielu mijiedarbības (PPI) tīkls, un centrālais gēns tika pārbaudīts, izmantojot CytoHubla, lai identificētu centrālo mezglu Cytoscape programmatūrā.

Sudraba krāsošanas un transmisijas elektronu mikroskopijas (TEM) novērošana. Sudraba krāsošanas procedūra tika veikta pēc Foisnera metodes26. thermophila tika novērota zem eļļas mikroskopa. T. thermophila ultrastruktūru novēroja TEM. Šūnas, kas apstrādātas ar G.lucidum ūdens ekstraktu, un kontroles grupu savāca, centrifugējot ar ātrumu 600 x g 2 minūtes. Šūnas tika pievienotas 2,5% glutaraldehīda un 8 stundas tika turētas 4 grādu temperatūrā. Paraugi tika mazgāti ar PBS (pH 7,5) trīs reizes, centrifugēti pie 3000xg 5 minūtes un pēc tam fiksēti ar 1% osmija tetraoksīdu (4 stundas). Pēc tam dehidratācija tika veikta, izmantojot gradienta acetonu no 15 procentiem līdz 100 procentiem. Pēc tam šūnas tika iestrādātas Embed 812 (TAAB) zemas viskozitātes sveķos. Pēc sacietēšanas īpaši plānas sekcijas (60-80 nm) tika izgrieztas ar īpaši plānu griezēju. Ultrastruktūra tika novērota ar transmisijas elektronu mikroskopu (JEOL JEM-1010, Japāna).

Šūnu bojājumu noteikšana. Intracelulārā lROS tika noteikta ar jutīgu fluorescējošu zondi 2',7'-dihlordihidrofluoresceīna diacetātu (DCFH-DA)27. Malondialdehīda (MDA) aktivitāte tika noteikta, izmantojot Nanjing Jiancheng Bioinženierijas institūta (Nanjing, Jiangsu, Ķīna) nodrošinātos komerciālos komplektus. Metode, lai noteiktu spēju likvidēt hidroksilradikāļus (·OH), tika aprakstīta Takemura28. G. lucidum ūdens ekstrakta spēja likvidēt OH brīvo radikāļu tika izteikta kā eksperimentālās grupas optiskais blīvums mīnus kontroles grupas optiskais blīvums.

Cistanche var novērst novecošanos

PHGPx aktivitāte. Nikotīnamīda adenīna dinukleotīda fosfāta (NADPH)/NADP* attiecība un glutationa/glutationa disulfīda (GSH/GSSG) attiecība tika noteikta, izmantojot NADP*/NADPH kvantifikācijas komplektu (S0179, Beyotime), GSH/GSSG testa komplektu (S0053). testi tika veikti saskaņā ar ražotāja protokolu.

Rezultāti

G.lucidum ūdens ekstrakta un G.lucidum monomēru ietekme uz T. ther-mochila augšanu. Tāpat kā iepriekšējie pētījumi7, G. lucidum polisaharīds bija galvenā G. lucidum ūdens ekstrakta sastāvdaļa šajā eksperimentā saskaņā ar spektrofotometra identifikāciju (papildu attēls S1). G. lucidum ūdens ekstrakta aktīvās vielas tika analizētas arī ar GC-MS. G. lucidum ūdens ekstrakta kopējā jonu diagramma parādīja, ka ūdens ekstraktā bija ll komponenti (Papildu attēls S2). Starp G.lucidum ūdens ekstrakta savienojumiem (papildu tabulas S3 un S4), G. lucidum acid A, Ganoderal A un G. lucidum ergosterol tika atlasīti atbilstoši to aiztures laikam un atbilstības pakāpei.

Lai salīdzinātu G. lucidum ūdens ekstrakta un šo galveno monomēru ietekmi uz T. thermophila augšanu, T. thermophila barotnei tika pievienots G. lucidum ūdens ekstrakts un G. lucidum monomēru šķīdums. Rezultāti parādīti 1. attēlā. Kontroles grupas maksimālais blīvums bija 6×104 šūnas/mL 24 h. G. lucidum ūdens ekstrakta grupas šūnu blīvums no 12 līdz 20 stundām bija gandrīz tāds pats kā kontroles grupai, bet no 20 līdz 25 stundām tas bija ievērojami lielāks nekā kontroles grupas šūnu blīvums.cistanche nzVienlaikus logaritmiskā fāze tika pagarināta par 1 stundu, maksimālais blīvums bija 1,15 × 105 šūnas / ml. Lai gan G. lucidum polisaharīda grupas maksimālais blīvums bija par 9,7 × 104 šūnām/ml augstāks nekā kontroles grupai, tas bija mazāks nekā G. lucidum ūdens ekstrakta grupai. G. lucidum skābes A, Ganoderal A un G. lucidum ergosterola maksimālais blīvums nepārsniedza kontroles grupas blīvumu, kas liecināja, ka šo monomēru spirtā izšķīdinātās vielas neveicina T. thermophila augšanu. Var secināt, ka G.lucidum ūdens ekstrakts, kas satur dažādas aktīvās vielas, var veicināt T. thermophila augšanu vairāk nekā tā monomēri.

G. lucidum ūdens ekstrakta pretnovecošanās iedarbība. Palielinoties kultivēšanas laikam, ROS gaismas intensitāte lejupslīdes fāzē (2.b att.) bija augstāka nekā logaritmiskajā fāzē (2.a att.). Pēc G. lucidum ūdens ekstrakta pievienošanas, lai gan lejupslīdes fāzes fluorescences intensitāte (2.d attēls) joprojām bija uzlabota, salīdzinot ar logaritmiskās fāzes intensitāti (2.c att.), tā bija ievērojami zemāka nekā kontroles grupai. MDA saturs kontroles grupā arī bija augstāks lejupslīdes fāzē nekā logaritmiskajā fāzē (2.e att.). Tikmēr OH attīrīšanas spēja pagrimuma fāzē bija zemāka nekā logaritmiskajā fāzē (2.e attēls). Līdzsvars starp oksidāciju un reducēšanu tika zaudēts, un ķermenis noveco. Pēc G. lucidum ūdens ekstrakta pievienošanas MDA saturs bija zemāks nekā kontroles grupā (kreisajā kolonnā 2.e attēlā), un OH daudzums, ko iztvaiko šūnas logaritmiskajā fāzē un krituma fāzē, bija lielāks nekā OH daudzums kontroles grupa (labā kolonna 2.e attēlā). T[termofilas augšanu var salīdzināt ar daudzšūnu organismu novecošanās procesu, pateicoties tā šūnu bojājumiem. Uzkrājoties ROS un MDA, tika kavēta augšana un samazināts T. thermophila blīvums. G. lucidum ūdens ekstrakta pievienošana varētu uzturēt T. thermophila redoksu līdzsvaru un panākt pretnovecošanas efektu.

Diferenciāli ekspresētu gēnu analīze un pārbaude ar RT-qPCR. Salīdzinot ar kontroles grupu, 11 519 gēnu ekspresija T. thermophila logaritmiskajā fāzē būtiski mainījās pēc G. lucidum ūdens ekstrakta pievienošanas SPP. Tostarp 6201 gēns tika regulēts augstāk un 5318 gēni tika regulēti zemāk.cistanche dzimumlocekļa izmērsSamazinājuma fāzē būtiski mainījās 8772 gēnu ekspresija, tostarp 4721 gēns tika regulēts augšup un 4051 gēns tika pazemināts. Iepriekšējos pētījumos mūsu laboratorijā,

G.lucidum pretnovecošanās iedarbība uz Stylonychia tika atspoguļota antioksidantu indeksā, tāpēc no DEG nejauši tika atlasīti 10 gēni (papildu tabula S5), kas saistīti ar antioksidantiem, un RNS-seq datu precizitāte tika pārbaudīta ar RT- qPCR. Šo 10 gēnu ekspresijas modeļi logaritmiskajā fāzē un samazināšanās fāzē atbilda RNS-seq datu tendencei (papildu attēls S3). Rezultāts norādīja, ka RNS-seq dati bija ticami un tos var izmantot turpmākai analīzei.

GO bagātināšanas un KEGG ceļu analīzes. DEG logaritmiskajā fāzē bija iesaistīti 14 bioloģiskos procesos (BP) ar 6 veidu molekulārajām funkcijām (MF), un tie pastāvēja visos šūnu komponentos (CC) (3.a attēls). DEG lejupslīdes fāzē bija iesaistīti 12 BP ar 4 veidu MF, un tie pastāvēja 12 CC. Visvairāk iesaistītais BP abās fāzēs bija vielmaiņas process, MF saistījās un CC bija membrāna. No vielmaiņas procesa, saistīšanās un membrānas, augšupregulētie gēni veidoja 70 procentus logaritmiskajā fāzē (3.b att.) un 75 procentus lejupslīdes fāzē (3.c att.). Šie rezultāti liecina, ka G. lucidum ūdens ekstrakts var veicināt šūnu membrānas integritātes saglabāšanu abās fāzēs.

Tika veikta KEGG ceļa bagātināšanas analīze, lai turpinātu analizēt DEG starp abām fāzēm. Logaritmiskajā fāzē tika koncentrēti 94 ceļi, starp kuriem 68 procenti no kopējiem gēniem bija iesaistīti metabolismā. Samazināšanās fāzē tika bagātināts 91 ceļš, starp kuriem metabolisms joprojām bija lielākais ceļš, kas veidoja 68 procentus. 20 populārākie ceļi logaritmiskajā fāzē (3. d att.) un lejupslīdes fāzē (3. e att.) tika izmantoti, lai izveidotu burbuļu diagrammu, un tie parādīja, ka neatkarīgi no iesaistīto gēnu nozīmīguma vai skaita G ietekme.cistanche pulverislucidum ūdens ekstrakts galvenokārt koncentrējās uz glutationa metabolisma ceļu. Logaritmiskajā fāzē šajā ceļā tika bagātināti 38 atšķirīgi izteikti gēni, kas veido 45 procentus. Samazināšanās fāzē šajā ceļā tika bagātināti 43 atšķirīgi izteikti gēni, kas veido 50 procentus .

DEG proteīnu un olbaltumvielu mijiedarbības (PPI) tīkli. DEG noskaidrošana glutationa metabolisma ceļā un ieskats to mijiedarbībā ar citiem proteīniem palīdzēs tālāk izpētīt G. lucidum ūdens ekstrakta iespējamo regulēšanas mehānismu. Gan logaritmiskajai fāzei (4.a attēls), gan lejupslīdes fāzei (4.b attēls) bija vissvarīgākā ietekme uz GPX1, GPX2, GPX7 un GPX11. Izmantojot TetraFGD datu bāzes vaicājumu, šie GPX fermenti piederēja PHGPx (papildu tabula S6). Tāpēc antioksidantu enzīmiem, īpaši PHGPx, ir svarīga loma T. thermophila augšanas veicināšanā, inducējot G. lucidum ūdens ekstraktu.

GPS darbības un funkciju pārbaude. PHGPx aktivitāte attiecas uz NADPH absorbcijas samazināšanās ātrumu2". NADPH/NADP* vērtība kontroles grupas lejupslīdes fāzē bija zemāka nekā logaritmiskajā fāzē (5.a att.). Rezultāts liecināja, ka PHGPx aktivitāte samazinājās, palielinoties kultivēšanas laikam.Pēc G. lucidum ūdens ekstrakta pievienošanas NADPH/NADP plus vērtība krituma fāzē joprojām bija zemāka nekā logaritmiskajā fāzē, bet augstāka par abām kontroles grupas fāzēm. G.lucidum ūdens ekstrakts varētu veicināt PHGPx aktivitāti.

PHP var īpaši katalizēt fosfolipīdu hidroperoksīda reducēšanu ar reducētu glutationu (GSH), lai toksisko lipīdu peroksīdu (PL-PUFA-OOH) efektīvi pārvērstu par netoksiskām polinepiesātinātajām taukskābēm (PL-PUFA-OH)30. GSH/GSSH attiecības izmaiņas var atspoguļot PL-PUFA-OOH un PL-PUFA-OH izmaiņas PHGPx aktivitātes samazināšanās dēļ (5.a att.), GSH/GSSH attiecība kontroles grupā arī samazinājās līdz ar kultivēšanas laika palielināšanās (5.b att.). Tomēr pēc G.lucidum ūdens ekstrakta pievienošanas GSH/GSSH attiecība tika palielināta logaritmiskajā fāzē un samazināšanās fāzē. Intracelulārais toksiskais PL-PUFA-OOH eksperimentālajā grupā tika pārveidots par netoksisku PL-PUFA-OH, kas bija vairāk nekā kontroles grupā. Mikroskopiskās morfoloģijas un ultrastruktūras novērošana. G. Luci-dum ūdens ekstrakta aizsargājošā iedarbība uz membrānu tika vizualizēta ar amonjaka sudraba krāsošanu un TEM. Salīdzinot kontroles grupas logaritmisko fāzi (6.a att.) un kontroles grupas lejupslīdes fāzi (6.c att.), tika konstatēts, ka T. thermophila šūnu morfoloģija ir nopietni deformēta, pagarinot kultivēšanas laiku, un kodols bija izplūdis, norādot, ka šūnas, šķiet, ir novecojušas. Tomēr G.lucidum ūdens ekstrakta grupā šūnu morfoloģija un integritāte bija labi aizsargāta logaritmiskajā fāzē (6.e attēls) un lejupslīdes fāzē (6.g attēls). TEM novēroja ultrastrukturālas izmaiņas šūnās. Mitohondriju grēda un kontūra bija izplūdusi lejupslīdes fāzē (6.d att.), salīdzinot ar logaritmisko fāzi (6.b att.) kontroles grupā. Mitohondriju sabrukšana palielinājās, pagarinot kultivēšanas laiku. G. lucidum ūdens ekstrakta pievienošana uzlaboja mitohondriju morfoloģiju logaritmiskajā fāzē (6.f att.) un lejupslīdes fāzē (6.h att.). G. lucidum ūdens ekstrakts garantēja mitohondriju darbību, kas ir cieši saistīta ar membrānas integritāti. Jāņem vērā, ka logaritmiskajā fāzē eksperimentālās grupas mitohondrijiem bija morfoloģiskas izmaiņas (6.f, h att.), taču membrānas integritāte netika ietekmēta.

Diskusija

G.lucidum ekstraktu izmantošanai ir sena vēsture gan tradicionālajā ķīniešu medicīnā, gan Austrumāzijā. Liels skaits pētījumu ir pierādījuši to efektivitāti. Iepriekšējie ziņojumi atklāja, ka G.lucidum ūdens ekstrakts satur ne tikai G. lucidum polisaharīdus, bet arī Glucidum triterpenoīdus. Saskaņā ar iepriekšējiem ziņojumiem ganodermas skābe, ganodermas aldehīds un ganodermas ergosterols ir galvenās G. lucidum triterpene 3 sastāvdaļas. Tiem ir dažādas šūnu atjaunošanas funkcijas (1. tabula). Ganoderma lucidum ūdens ekstrakts satur dažādas aktīvās vielas, integrējot pārējo četru aktīvo vielu funkcijas, kas spēj ne tikai pretoties oksidācijai, bet arī saglabāt membrānas integritāti. Šajā pētījumā

G. lucidum ūdens ekstrakta augšanas veicināšana uz T. thermophila apstiprināja šo iekļaušanas saistību. Analizējot G. lucidum ūdens ekstraktu ar kopējās jonu plūsmas hromatogrāfiju (papildu att. S2), varēja konstatēt, ka dažādu aktīvo vielu šķīšanas laiks bija atšķirīgs. Tādējādi G. lucidum ūdens ekstrakts kļūst par sarežģītu organisku šķīdinātāju, pagarinot viršanas laiku. Mēs domājam, ka G.lucidum ūdens ekstrakta aktīvās vielas var darboties dažādos laikos, radot sinerģiju. Tam vajadzētu būt turpmākam pētījumam nākotnē.

T. thermophila transkripta analīzē tika pētīta G. lucidum ūdens ekstrakta ietekme uz gēnu ekspresiju augšanas laikā. Pēc apstrādes ar G. lucidum ūdens ekstraktu PHGPx izrādījās galvenā ietekme uz šūnu blīvumu un ģenerēšanas laiku. Šis rezultāts apstiprināja, ka G.lucidum ūdens ekstrakts iedarbojās uz selēna atkarīgo GPX saimes tipu. PHP ir daudzfunkcionāls selenoproteīns, kas plaši izplatīts organismā un var ne tikai piedalīties antioksidantu reakcijās, bet arī tieši samazināt membrānas lipīdus, lai aizsargātu membrānas sistēmas integritāti40. Salīdzinot ar citiem GPX, PHGPx ir mazāks tilpums un lielāka hidrofobitāte. Daudzi ziņojumi ir pierādījuši, ka PHGPx pārmērīga ekspresija šūnās var pretoties šūnu reakcijai uz endogēniem (piemēram, novecojošiem) fl un eksogēniem (piemēram, vides) peroksidācijas bojājumiem 2-45.PHP ir vienīgais enzīms, kas var tieši samazināt PL-PUFA- OOH membrānu attiecīgajos hidroksilsavienojumos, tādējādi ļaujot pārtraukt peroksidāciju un aizsargājot bioloģisko membrānu no peroksidācijas bojājumiem4647. PL-PUFA-OOH satura palielināšanās bija iemesls šūnu membrānas bojājumiem kontroles grupā pagrimuma fāzē, kas kļuva par apburto ciklu un paātrināja šūnu novecošanos. Šajā pētījumā tika noskaidrots ROS un MDA saturs. T.thermophila (2. att.) kontroles grupā palielinājās, palielinoties kultivēšanas laikam. Morfoloģiskā novērojuma rezultātā membrāna bija nopietna deformācija lejupslīdes fāzē. Tomēr, pievienojot G. lucidun ūdens ekstraktu, PHGPx ekspresija tika regulēta. Tādējādi PL-PUFA-OOH uz membrānas tika pārveidots par netoksisku PL-PUFA-OH, un membrānas struktūras stabilitāte tiek uzlabota gan logaritmiskajā fāzē, gan lejupslīdes fāzē. Pēc membrānas novērojumiem ar amonjaka sudraba krāsošanu un TEM, varēja secināt, ka G.lucidum ūdens ekstrakts augšanas procesā iekļuva šūnas membrānā. Šī atjaunojošā iedarbība uz šūnu membrānu var izraisīt G. lucidum ūdens ekstrakta aktīvās vielas iekļūšanu citoplazmā un aizsargāt kodola un mitohondriju membrānas struktūru, lai veicinātu T. thermophila metabolismu un panāktu pretnovecošanās efektu. Kā liecina lKEGG bagātināšanas rezultāti, vielmaiņas ceļos ir koncentrēts liels skaits atšķirīgu gēnu. Šie rezultāti norādīja, ka G. lucidum ūdens ekstrakts bija labvēlīgs glutationa metabolismam un toksisko peroksīdu izvadīšanai, ko rada šūnu novecošanās.

Kopumā G. lucidum ūdens ekstrakts veicināja no selēna atkarīgā enzīma PHGPx ekspresiju GPX saimē. PHGPx aktivitātes pastiprināšanās var ne tikai samazināt oksidatīvā stresa reakciju in vivo, bet arī specifiski un efektīvi samazināt lipīdu nogulsnēšanos bioloģiskajā membrānā un saglabāt membrānas integritāti (7. att.). Līdz ar to G. lucidum ūdens ekstraktā esošās aktīvās vielas caur neskarto membrānu iekļūst šūnās un veicina to vielmaiņu. Tas radīja labvēlīgu ciklu, lai sasniegtu pretnovecošanās efektu.

Šis raksts ir izvilkts no Scientifc Reports|(2022) 12:3139|https://doi.org/10.1038/s41598-022-06985-z