Cistanche glikozīdi uzlabo mācīšanos un atmiņu asinsvadu demences žurku modelī

vairāk information:ali.ma@wecistanche.com

J. ČEN1,2, S.-N. ZHOU1, Y.-M. ZHANG2, Y.-L. FENG2, S. WANG2

1Neiroloģijas departaments, Šaņdunas universitātes Qilu slimnīca, Dzjana, Ķīna. - Smadzeņu zinātnes pētniecības institūts, Šaņdunas universitāte, Šaņduna, P.R. Ķīna

2Neiroloģijas departaments, Iekšējā Mongolijas autonomā reģiona tautas slimnīca, P.R. Ķīna

Jin Chen un Yan-Mei Zhang sniedza vienādu ieguldījumu šajā pētījumā

Abstrakts.– MĒRĶIS:Cistanche glikozīdi(GC) iegūst no Xin JiangCistanche, ko plaši izmanto kā ķīniešu garšaugu. Šī pētījuma mērķis ir novērtēt GC ietekmi uz asinsvadu demenci (VD).

MATERIĀLI UN METODES: VD modelis tika izveidots ar divpusējās parastās miega artērijas ligatūru pieaugušām Wistar žurkām, kuras katru dienu saņēma i. p. sāls šķīduma, GC (10 mg/kg ķermeņa masas/d, t.i.p.) vai oksiraketama (450 mg/kg ķermeņa masas/d, t.i.p.) ievadīšanu 14 dienas. Morisa ūdens labirinta tests novērtēja žurku kognitīvo veiktspēju. Hipokamps tika sadalīts un pakļauts proteomikai un imūnhistoķīmiskai analīzei. REZULTĀTI: GC grupai bija ievērojami zemāks evakuācijas latentums nekā VD grupai četras un piecas dienas pēc operācijas. Tie neuzrādīja būtiskas atšķirības, salīdzinot ar placebo darbināto grupu un oksiraketāma kontroles grupu. Hipokampā 21 proteīna plankums GC grupā uzrādīja atšķirīgus ekspresijas līmeņus, salīdzinot ar VD grupu. Tas ietvēra četrus proteīnus, kuriem bija būtiska atšķirība: trīs augšupregulēti proteīni tioredoksīnam līdzīgs proteīns 1, divkāršs specifiskums mitogēna aktivēta proteīnkināzes kināze 1 un ar dihidropiridīnu saistīts proteīns 2 (CRMP-2) un viens lejupvērsts olbaltumvielu glutationa sintetāze. Imūnhistoķīmijas analīze parādīja, ka P-tau proteīna līmenis VD modeļa grupā bija ievērojami augstāks nekā placebo operētajā grupā (p< 0.05).="" after="" gc="" treatment,="" p-tau="" protein="" level="" in="" vd="" model="" rats="" showed="" a="" significant="" decrease="" compared="" with="" the="" vd="" group="" treated="" with="" saline="" (p="">< 0.05).="" conclusions:="" the="" gc="" plays="" a="" critical="" role="" in="" protecting="" the="" hippocampal="" neurons="" in="" the="" vd,="" by="" decreasing="" p-tau="" phosphorylation="" and="" increasing="" the="" crmp-2="" expression="" level.="" pharma-="" ecological="" manipulation="" of="" gc="" offers="" a="" new="" opportunity="" for="" vd="">

Atslēgas vārdi:

Asinsvadu demence, cistanche glikozīdi, proteomika, P-tau, ar dihidropirimidāzi saistīts proteīns 2.

Noklikšķiniet uz Cistanche un cistanche deserticola ma, lai uzlabotu atmiņu

Ievads

Asinsvadu demence (VD) ir otrā vadošā senila demence, un to galvenokārt izraisa išēmiska cerebrovaskulāra slimība. VD izraisa neviendabīgus kognitīvos traucējumus, un ir nepieciešamas jaunas efektīvas terapeitiskās zāles, kas ārstē vai novērš VD progresēšanu1. Tomēr joprojām nav efektīva ķīniešu auga, lai pierādītu smadzeņu išēmijas izraisītus kognitīvos traucējumus.

Cistanche (GC) glikozīdi ir plaši izmantoti kā augs ar neiroprotektīvu iedarbību. Her- ba Cistanches Ekstrakts uzlabomācīšanās un atmiņapelēm, veicinot neironu šūnu diferenciāciju, neirīta augšanu un sinapses veidošanos2. Cistanche glikozīdi var novērst apoptozi smadzenīšu granulu neironos un izraisīt anti-apoptozes efektu, inhibējot kaspāzes-3 un kaspāzes-83 aktivāciju. Echinacoside, kas ir galvenā Herba Cistanches aktīvā sastāvdaļa, ir pietiekams, lai aizsargātu neironu šūnas no rotenona žūrijā, aktivizējot Trk signalizāciju4. Tomēr mehānismi, ar kuriem GC uzlabo kognitīvos traucējumus VD, joprojām lielā mērā nav zināmi.

Tau proteīns ir neironu mikrotubulu saistīts proteīns, kas stabilizē neironu mikrotubulas. Tau proteīna (P-tau) fosforilācija ietekmē tā spēju mijiedarboties ar mikrotubulām un im- paktu sinaptisko transmisiju. Neirofibrilāro jucekļu (NFT) uzkrāšanās sastāv no P-tau proteīna un ir viena no galvenajām Alcheimera slimības (AD)5 īpašībām. Ir labi zināms, ka VD un AD ir divas visbiežāk sastopamās demences slimības. Viņiem ir kopīga korelācija ar asinsvadu riska faktoriem, piemēram, hipertensiju, cukura diabētu un hiperholesterinēmiju. Tāpēc P-tau var būt iesaistīts arī VD.

Mēs novērtējām GC ietekmi uzmācīšanās-atmiņas funkcijaVD žurku modelī un veica proteomiku un imūnhistoķīmisko analīzi VD žurku hipokampam, lai sniegtu ieskatu GC neiroprotektīvajā iedarbībā. Mūsu rezultāti parādīja, ka GCuzlabota mācīšanās un atmiņaVD žurkām un mainīja proteīnu, piemēram, P-tau, līmeni VD žurkām.

Materiāli un metodes

Dzīvniekiem

Sešus mēnešus vecus Wistar žurku tēviņus (svars 230- 270 g) nodrošināja eksperimentālais dzīvnieku centrs Hubei provincē, Ķīnā. Visas eksperimentālās dzīvnieku procedūras tika veiktas saskaņā ar dzīvnieku aprūpes vadlīnijām un vietējiem ētikas noteikumiem Uhaņas Nr. 1 slimnīcā, Ķīnā. Ētikas apstiprinājuma numurs ir 00014834. Dzīvnieki tika izmitināti atsevišķi grupās pa 4 katrā būrī 25°C temperatūrā ar 12 stundu gaismas/12 stundu tumšo ciklu un brīvu piekļuvi pārtikai un ūdenim. Dzīvniekus (n=45) pēc nejaušības principa iedalīja četrās grupās: parauggrupā (n=12), grupā, kas darbojās ar placebo (n=11), GC grupā (n=12) un ar oksiracetāmu apstrādātā kontroles grupā (n=10).

Divpusējā kopējā miega artēriju ligācija (2-VO)

Dziļā anestēzijā ar 10% hlora hidrātu (Tianjin Damao Ķīmisko reaģentu rūpnīcas reaģentu fabrikas reaģents, Tjaņdzjiņa, Ķīna) (350 mg/kg ķermeņa masas),

i. p.), divpusējās parastās miega artērijas (CCA) tika rūpīgi atdalītas no apkārtējiem audiem un pēc tam cieši savienotas ar šuvēm. Pēc tam āda tika rekonstruēta, un žurkas pēc tam tika uzturētas istabas temperatūrā un atgrieztas mājas būrī līdz atdzīvināšanai. Šamas operētām kontroles žurkām tika veikta tāda pati ķirurģiska procedūra bez CCA ligācijas. VD žurkas tika ārstētas ar GC (10 mg/kg ķermeņa masas/d, t.i., p.) vai oksiraketāmu (450 mg/kg ķermeņa masas/d, t.i.p.) tūlīt pēc operācijas 14 dienas pēc kārtas. Modeļa grupai tika injicēts tāds pats normāla sāls šķīduma tilpums.

Morisa ūdens labirinta tests

MWM tests tika veikts saskaņā ar iepriekš aprakstīto metodi7. Testēšanas laukums sastāvēja no apļveida baseina, kas piepildīts ar ūdeni (25 ± 1 °C), kas bija necaurspīdīgs ar pienu tā, ka žurkas nevarēja redzēt zemūdens platformu 1 cm zem ūdens virsmas. Baseins tika sadalīts četros kvadrantos (apzīmēts ar I, II, III un IV zonu), un platforma tika iegremdēta II zonā. Vizuālās norādes tika novietotas uz testēšanas telpas sienas. Dzīvnieki tika ievietoti ūdenī vienā no četriem sākuma kvadranta punktiem, kas izmēģinājumu laikā bija nejauši atšķirīgs. Žurkām tika dotas 2 minūtes, lai atrastu platformu un sēdētu uz tās 15 s. Žurkas, kurām neizdevās atrast atrašanās vietu noteiktā laikā, tika maigi vadītas uz platformu un tika al- pazeminātas, lai paliktu uz tās 15 s. Tika izmantota automātiska izsekošanas sistēma, lai reģistrētu peldēšanas ceļu, latentumu, peldēšanas attālumu un laiku katrā zonā. Visas žurkas tika upurētas divas nedēļas pēc MWM testa turpmākai analīzei.

Olbaltumvielu ekstrakcija

Dziļajā anestēzijā ar 10% hlora hidrātu visas žurkas, kurām tika veikts MWM tests, tika de-pitētas. Hipokampu audi tika ātri novākti uz ledus un pēc tam nekavējoties sasaldēti šķidrā slāpeklī. Visi audi tika homogenizēti zem šķidrā slāpekļa, izmantojot javu un piestu, un savākti līzes buferšķīdumā (7 M urīnviela, 2 M tiourea, 2% CHAPS, 20 mM Tris). Nešķīstošās daļiņas tika atdalītas centrifugējot pie 12 000 apgr./min 20 min 4°C temperatūrā. Paraugos esošās piesārņotās nukleīnskābes izjauca periodiskas skaņas svārstības 5 min. Centrifugāti tika savākti pēc centrifugēšanas tādā pašā stāvoklī, kā aprakstīts iepriekš. Olbaltumvielu koncentrācija centrifugātos tika mērīta ar Bredforda testu, un centrifugāti tika uzglabāti 80 °C temperatūrā.

Divdimensiju gēla elektroforēze

Olbaltumvielu alikvotās daļas (120 μg) tika noregulētas ar rehidratācijas buferšķīdumu (7 M urīnviela, 2 M tiourīnvielas, 4% CHAPS, 1% wt/vol DTT, 0,5% IPG buferšķīduma un bromfenola zilās krāsas pēdas) 350 μL tilpumā. Izoelektriskā fokusēšana (IEF) tika veikta IPG sloksnēs (pH 4-7, izmērs 22 cm) pie 300 V 12 min, 700 V 18 min, 1500 V 1,5h, 9900 V 3 h, 9990 V 6,5 h un pēc tam 600 V 20 h ettan IPGphor II sistēmā (GE ETTAN IPGPHOR3). Pēc IEF programmas sloksnes tika līdzsvarotas IPG līdzsvarošanas buferšķīdumā I (6 M urīnviela, 2% SDS, 30% glicerīns, 0,375M Tris, pH 8,8, 20 mg/ml DTT un bromfenola zilās krāsas pēdas) un pēc tam alkilētas (25 mg/ml jodoacetamīda DTT vietā līdzsvara buferšķīdumā) 15 min. 2-DE tika veikta ar 12,5% SDS poliakrilamīda gēliem (24 cm×19,5 cm×1,0 mm) ar 0,5% agarozes blīvējuma līmi, izmantojot Ettan DALT Six elektroforēzes sistēmu (GE ETTAN DALTsix, PA, ASV). Elektroforēze tika veikta 2 W temperatūrā 45 min, kam sekoja atdalīšana 17 W temperatūrā četras stundas, līdz bromfenola zilais gandrīz sasniedza gēlu dibenu. Olbaltumvielu plankumi tika vizualizēti, izmantojot sudraba krāsošanu (Tianjin Damao Ķīmisko reaģentu fabrika) analītiskajos želejās. 2-DE paplāksne veidojas trijos eksemplāros un no trim neatkarīgām olbaltumvielu ekstrakcijām katrai grupai.

Preparatīvs gēla elektroforēze

Olbaltumvielu paraugi (600 μg) no četrām žurku grupām tika pakļauti 2-DE, ievērojot iepriekš aprakstīto metodi. Olbaltumvielu plankumi tika vizualizēti, izmantojot Coomassie izcili zilo krāsojumu (Tianjin Damao Ķīmisko reaģentu rūpnīca) preparatīvos gēlos.

Attēlu iegūšana un analīze

Gēla attēli tika uzņemti 2-DE attēlu skenēšanas sistēmā (UMAX Powerlook1100, VT, ASV) un analizēti ar Image Master 2D Platinum 5.0 programmatūru (GE, PA, ASV). Olbaltumvielu plankumi tika atklāti automātiski un pēc tam rediģēti manuāli, lai noņemtu svītras, plankumus un artefaktus.

Matricas atbalstīta lāzera desorbcijas jonizācija-lidojuma laiks-lidojuma masspektrometrija (MALDI-TOF-MS)

Peptīdu masas pirkstu nospiedumu noņemšanai un turpmākai analīzei želejas tika sagrieztas šķēlēs, un Koomasijas iekrāsotie plankumi tika attīrīti un mazgāti ar 100 mM amonija bikarbonātu un acetonitrilu, samazināti ar DTT 60 ° C temperatūrā 40 minūtes un pēc tam IAA 30 minūtes alkilēti tumsā. Gels tika iekļauts 50 μL 12 ng/μl modificēta tripsīna šķīdumā 50 mM amonija bikarbonātā (pH 8,6) 37°C nakts laikā. Peptīdi tika ekstrahēti no gēla aizbāžņa ar 1% skudrskābi/2% acetonitrilu un koncentrēti, izmantojot C-18 Zip-Tips. Digests tika pamanīts (četri replikāti) uz MALDI mērķa, par matricu izmantojot a-ciano 4-hidroksi cinnamīnskābi (2 mg/ml 50% acetonitrilā, 0,1% TFA, kas satur desmit mM amonija fosfātu). Spektri tika iegādāti uz 4700 MALDI TOF/TOF masspektrometra (Applied Biosystems, NY, USA) un analizēti GPS Explorer TM (Applied Biosystems) programmatūrā.

Imūnhistoķīmija

Koronālā hipokampa sekcijas tika fiksētas 4% paraformaldehīda veidā, pirms tās tika iestrādātas parafīnā un pēc tam sagrieztas 4 μm biezās daļās. Aizbraukšanas pabeigtās koronālās hipokampu sekcijas tika apstrādātas, lai remdētu endogēno peroksidāzes aktivitāti, izmantojot 3% H2O2 fosfātu buferšķīdumā. Nespecifiskas imūnreakcijas tika bloķētas istabas temperatūrā 15 minūtes. Pēc tam sekcijas tika inkubētas ar P-tau antivielu un sekundāro antivielu istabas temperatūrā 30 minūtes un tika vizualizētas pēc 3,3'-diaminobenzidīna tetrahidrohlorīda (Dako, Tokija, Japāna) reakcijas. Attēli tika uzņemti, izmantojot gaismas mikroskopu (Olympus, Tokija, Japāna), un apstrādāti, izmantojot Photoshop programmatūru (versija 7.0, Adobe, San Jose, CA, USA).

Statistiskā analīze

Kvantitatīvie dati tika izteikti kā līdzekļi, ± SD. Divvirzienu dispersijas analīze (ANOVA) tika veikta, izmantojot SPSS 10.0 analīzes programmatūru (SPSS Inc., Chicago, IL, USA). p< 0.05="" was="" considered="">

Rezultātus

GC veicina mācīšanos un atmiņu VD žurkām

Lai novērtētu GC ietekmi uz VD žurku modeļa kognitīvo funkciju, mēs veicām MWM testu. MWM testā GC grupa uzrādīja ievērojami zemāku evakuācijas latentumu nekā VD grupa 4 un 5 dienas pēc operācijas, bet neuzrādīja būtiskas atšķirības, salīdzinot ar placebo operēto grupu un oksiraketāma kontroles grupu (I tabula). Šie dati liecina, ka GC veicina mācīšanos un atmiņu VD žurkām. GC maina VD žurku hipokampu proteomikos profilus.

Veicot žurku hipokampu proteomikas analīzi, mēs atklājām, ka 21 proteīna plankums GC grupā uzrādīja atšķirīgus ekspresijas līmeņus, salīdzinot ar VD grupu. Starp tiem četri proteīni uzrādīja būtisku atšķirību GC žurku hipokampā (II tabula): ieskaitot trīs regulētus proteīnus tioredoksīnam līdzīgs proteīns 1 (TXNL 1), divkāršā specifiskuma mitogēna aktivētā proteīnkināzes kināze 1 (MAPKK 1) un ar dihidropirimidāzi saistīto proteīnu 2 (DPYSL2); un viena lejupejoša proteīna glutationa sintetāze (GCL). DpySL2 tipiskie divdimensiju gēla elektroforēzes (2-DE) pro- faili tika parādīti 1. attēlā.

GC modulē P-tau līmeni VD žurku hipokampā

Ar imūnhistoķīmijas analīzi mēs atklājām, ka P-tau proteīna līmenis VD modeļa grupā bija ievērojami augstāks nekā placebo vadītajā grupā (p< 0.05).="" after="" the="" gc="" treatment,="" p-tau="" protein="" level="" in="" vd="" model="" rats="" showed="" a="" significant="" decrease="" compared="" with="" the="" vd="" group="" treated="" with="" saline="" (p="">< 0.05)="" but="" showed="" no="" significant="" difference="" compared="" with="" the="" oxiracetam="" control="" group="" (figure="">

Diskusija

VD ir saistīts ar atmiņas un kognitīvās darbības traucējumiem, ko galvenokārt izraisa cerebrovaskulāras slimības8,9,10,11. Divu trauku oklūzijas (2VO) modelis ir vienkāršs un stabils un atzīts par smadzeņu išēmijas standarta modeli. Šajā pētījumā mēs izmantojām 2VO modeli, lai izveidotu VD dzīvnieku modeli. Ar MWM testu mēs atklājām, ka VD grupai bija samazinātas kognitīvās spējas, salīdzinot ar placebo vadīto grupu, apstiprinot, ka mēs veiksmīgi izveidojām VD modeli. Pamatojoties uz šo modeli, mēs atklājām, ka GC ārstēšana līdzīgā mērā uzlaboja VD žurku telpiskās kognitīvās spējas ar oksiracetāmu, pozitīvu kontroli. Šie dati liecina, ka GC varētu veicināt telpisko mācīšanos un atmiņas traucējumus VD.

Lai izpētītu mehānismu, ar kura palīdzību GC iedarbojas uz neiroprotektīvu iedarbību uz VD, mēs izmantojām proteomiku pieeju, lai pārbaudītu atšķirīgi izteiktus proteīnus VD žurku hipokampā. Mēs atklājām, ka vairāki proteīni, kas saistīti ar enerģijas metabolismu, olbaltumvielu locīšanu, signalizācijas ceļu un citoskeletu, parādīja atšķirīgas izpausmes VD žurku hipokampā, kas tika ārstēti ar GC, salīdzinot ar tiem, kas ārstēti ar sāls šķīdumu kā kontroli.

Viens no diferenciāli izteiktajiem proteīniem ir DPYSL2, kas pazīstams arī kā collapsin atbildes mediatora proteīns-2 (CRMP-2), kas ir bagātināts ar augošo aksonu distālo daļu primārajos hipokampālajos neironos un ir izšķirošs aksona diferenciācijai un neironu izaugumam12,13. Turklāt CRMP-2 veicina mikrotubulu montāžu un mediē Ras signalizāciju, lai uzlabotu vairāku aksonu veidošanos un neironu polaritāti14,15. Šajā pētījumā CRMP-2 olbaltumvielu ekspresijas līmenis GC grupā tika palielināts par 2,28 reizēm, salīdzinot ar VD grupu, kas liecina par svarīgu CRMP-2 lomu neironu tīkla veidošanās un neironu polaritātes uzturēšanas potenciālajos remonta mehānismos VD.

Turklāt šajā pētījumā mēs atklājām augstāku P-tau VD modeļa grupā, bet zemāku P- tau ekspresiju pēc GC ārstēšanas. Tau proteīnam ir galvenā loma neironu morfoģenēzē. Dažās patoloģiskās situācijās P-tau proteīns var radīt aberantus agregātus, kas ir toksiski neironiem, ietekmējot mitohondriju funkciju15. Iepriekšējie pētījumi liecina, ka GC var uzlabot mitohondriju enerģijas metabolismu ar pretoksidācijas funkciju16,17,18. Interesanti, ka CRMP-2 fosforilācija ir raksturota arī kā neirofibrilāru tangles sastāvdaļa AD.

Secinājumi

CRMP2 ad pacientu smadzenēs parasti fosforilē ar ciklinatkarīgs proteīnkināze-5 (Cdk5) un glikogēna sintāze kināze-3 (GSK3 ), tām pašām kināzēm, kas fosforilē tau proteīnu, lai radītu NFT19,20. Ir vajadzīgi turpmāki pētījumi, lai pārbaudītu, vai GC regulē P-tau un CRMP2 ekspresiju lev- el VD, regulējot Cdk5 un GSK3 aktivitāti21,22,23. Kopumā mūsu dati liecina, ka GC ir izšķiroša loma, lai aizsargātu VD hipokampālos neironus, samazinot P-tau fosforilāciju un palielinot CRMP-2 ekspresijas līmeni. GC farmakoloģiskā manipulācija piedāvā jaunu iespēju terapijas attīstībai pret VD.

Apliecinājumi

Šo pētījumu atbalstīja Īpašais taishan zinātnieku fonds un Nacionālais dabaszinātņu fonds (30960520).

Interešu konflikts

Autori paziņo, ka interešu konfliktu nav.

Atsauces

1)GORELICK PB, PANTONI L. Asinsvadu kognitīvo traucējumu attīstība. Insults 2013; 44: 307-308.

2)CHOI JG, MOON M, JEONG HU, KIM MC, KIM SY, OH MS. Cistanches Herba uzlabo mācīšanos un atmiņu, izraisot nervu augšanas faktorus. Behav Brain Res 2011; 216: 652-658.

3)TIAN XF, PU XP. Cistanches salsa fenilethanoīdu glikozīdi inhibē apoptozi, ko izraisa 1- metil-4-fenilpiridīnija jonu inducētais neironos. J Ethnopharmacol 2005; 97: 59-63.

4)ZHU M, LU C, LI W. Pārejoša ehinokozīda iedarbība ir pietiekama, lai aktivizētu Trk signalizāciju un aizsargātu neironu šūnas no rotenona. J Neurochem 2013; 124: 571-580.

5)MEDINA M, AVILA J. Jaunas perspektīvas par tau lomu Alcheimera slimībā. Ietekme uz terapiju. Biochem Pharmacol 2014; 88: 540-547.

6)NING M, ZHANG Z, CHEN Z, ZHAO T, ZHANG D, ZHOU D, LI W, LIU Y, YANG Y, LI S, HE L. Ģenētiskie pierādījumi, ka asinsvadu demence ir saistīta ar Alcheimera slimību: ģenētiska asociācija be-tween tau polimorfisms un asinsvadu demence Ķīnas populācijā. Vecuma novecošana 2011; 40: 125-128.

7)CAIN DP, BOON F. Detalizēta uzvedības analīze re- teļa gaļa gan uzdevumu stratēģijas, gan telpiskās atmiņas traucējumi žurkām, ņemot vērā divpusējo smadzeņu vidējās artērijas insultu. Brain Res 2003; 972: 64-74.

8)ZHONG G, WANG Y, ZHANG Y, GUO JJ, ZHAO Y. Smēķēšana ir saistīta ar paaugstinātu demences risku: perspektīvo kohortas pētījumu metaanalīze ar potenciālās ietekmes modifikatoru izpēti. PLos One 2015; 10: e0118333.

9)NETO E, ALLEN EA, AURLIEN H, NORDBY H, EICHELE T. EEG spektrālās īpašības diskriminē Alcheimera slimību un asinsvadu demenci. Front Neurol 2015; 6: 25.

10)CALABRÒ RS, DE LUCA R, LEO A, BALLETTA T, MARRA A, BRAMANTI P. Lokomat apmācība asinsvadu demences gadījumā: motora uzlabošana un ne tikai! Novecošana Clin Exp Res 2015, 12. marts.

11)UTKAN T, YAZIR Y, KARSON A, BAYRAMGÜRLER D. Etanercepts uzlabo kognitīvo veiktspēju un palielina eNOS un BDNF ekspresiju eksperimentālās asinsvadu demences laikā streptozotocīna izraisīta diabēta gadījumā. Curr Neurovasc Res 2015. gada 11. marts.

12)ZHOU LS, ZHAO GL, LIU Q, JIANG SC, WANG Y, ZHANG DM. Apklusinošs collapsin atbildes mediators proteīns-2 pārprogrammē makrofāgu fenotipu un uzlabo infarkta dzīšanu eksperimentālā miokarda infarkta modelī. J Inflamm (Lond) 2015; 12: 11.

13)WILSON SM, KI YEON S, YANG XF, PARK KD, KHANNA R. GSK3ß un CDK5 fosforilācijas kolapsīna atbildes mediatora proteīna 2 (CRMP2) diferenciālā regulēšana pēc traumatiskas smadzeņu traumas. Front Cell Neurosci 2014; 8: 135.

14)LIM NK, HUNG LW, PANG TY, MCLEAN CA, LIDDELL JR, HILTON JB, LI QX, WHITE AR, HANNAN AJ, CROUCH PJ. Lokalizētas izmaiņas glikogēna sintāzes kināzes-3 un kolapsīna atbildes mediatora proteīnā-2 Hantingtona slimības skartajās smadzenēs. Hum Mol Genet 2014; 23: 4051-4063.

15)BRUSTOVETSKY T, PELLMAN JJ, YANG XF, KHANNA R, BRUSTOVETSKY N. Collapsin atbildes mediatora proteīns 2 (CRMP2) mijiedarbojas ar N-metil-D-aspartāta (NMDA) receptoru un Na+/Ca2+ ex-changer un regulē to funkcionālo aktivitāti. J Biol Chem 2014; 289: 7470-7482.

16)DONG B, YUAN X, ZHAO Q, FENG Q, LIU B, GUO Y, ZHAO B. Ultraskaņas atbalstīta feniletanoīdo glikozīdu divfāžu ekstrakcija no Cistanche deserticola Y. C. Ma kātiem. J Sep Sci 2015 Jan 21. [Epub pirms drukāšanas].

17)HU GS, JIA JM, KIM DH. Tirozīna un fenilalanīna barošanas ietekme uz feniletānoīdo glikozīdu uzkrāšanos Cistanche deserticola šūnu suspensijas kultūrā. Chin J Nat Med 2014; 12: 367-372.

18)DONG S, GAO R, YANG Y, GUO M, NI J, ZHAO L. Vienlaicīga feniletāno glicozīdu un aglikonu noteikšana ar kapilārās zonas elektroforēzi ar darbojošos bufera modifikatoru. Anālā bioķīmija 2014; 449: 158-163.

19)XIONG WT, GU L, WANG C, SUN HX, LIU X. Cistanche tubulosa anti-hiperglikēmiskā un hipolipidēmiskā iedarbība 2. tipa diabēta db/db pelēm. J Ethnopharmacol 2013; 150: 935-945.

20)LIU B, OUYANG J, YUAN X, WANG L, ZHAO B. Fenilethanoīdu glikozīdu adsorbcijas īpašības un preparatīvā atdalīšana no Cistanche deserticola, izmantojot makroporainus sveķus. J Chro- motors B Analyt Technol Biomed Life Sci 2013; 937: 84-90.

21)CALDERÓN-RIVERA A, SANDOVAL A, GONZÁLEZ-RAMÍREZ R, GONZÁLEZ-BILLAULT C, FELIX R. Neu- ronal cav3.1 kanālu regulēšana ar ciklīna atkarīgu kināzi 5 (cdk5). PLos One 2015; 10: e0119134.

22)CASTRO-ALVAREZ JF, URIBE-ARIAS A, CARDONA-GÓMEZ GP. Ciklinatkarīgs Kināzes 5 mērķēšana novērš b-amiloīda agregāciju, kas ietver glikogēna sintāzi kināzi 3b un fosfatāzes. J Neurosci Res 2015, 24. febr. [Epub pirms drukāšanas].

23)ROUGET R, SHARMA G, LEBLANC AC. Ciklīna atkarīgā kināze 5 Ģimenes prionu proteīnu mutantu fosforilācija saasina pārvēršanos amiloīda struktūrā. J Biol Chem 2015; 290: 5759- 5771.