Hiperozīds vājina iekaisumu HT22 šūnās, izmantojot augšupregulējošu SIRT1 aktivitātēm Wnt / β-katenīna un skaņas ezis ceļi 2. daļa

Lūdzu, sazinieties aroscar.xiao@wecistanche.complašāka informācija

3. Rezultāti

3.1. Hiperozīds atviegloja apoptozi un iekaisumu LPS izraisītajās HT22 šūnās. HT22 šūnu dzīvotspēja tika noteikta, izmantojot MTT testu. Rezultāts parādīja, ka hiperozīdam bija maza ietekme uz HT22 šūnu dzīvotspēju (1. att. a)). Salīdzinot ar neapstrādātām šūnām, LPS (1 μg/ml) ārstēšana ievērojami samazināja HT22 šūnu dzīvotspēju (1. att. b). Pamatojoties uz MTT rezultātiem, mēs izvēlamies 20μM hiperozīdu, lai novērtētu aizsargājošo iedarbību uz HT22 šūnām. HT22 šūnu apoptotiskā olbaltumvielu ekspresija tika konstatēta, izmantojot rietumu blotēšanu; rezultāti parādīja, ka ārstēšana ar 20 μM hiperozīdu ievērojami uzlaboja antiapoptotisko Bcl-2 ekspresiju un samazināja proapoptotisko Bax un kaspāzes-3 ekspresiju(1. att. c)). Vienlaikus 20 uM hiperozīdu ārstēšana būtiski inhibēja LPS izraisītu HT22 šūnu apoptozi (1. att. d). Tāpat ārstēšana ar 20 μM hiperozīdu nomāca LPS izraisītu I-1β, IL-6, IL-8 un TNF-α ražošanu(1.e attēls). Šie rezultāti liecināja, ka hiperozīds atviegloja apoptozi un iekaisumu LPS izraisītajās HT22 šūnās.

Lūdzu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

3.2. Hiperozīds atvieglo oksidatīvo stresu un neirotrofiskā faktora samazināšanos LPS izraisītajās HT22 šūnās.

HT22 šūnu oksidatīvais stress palielinājās, un pēc LPS apstrādes samazinājās neirotrofisko faktoru ražošana. Tālāk mēs pētījām hiperozīda ietekmi uz oksidatīvo stresu un neirotrofiskajiem faktoriem LPS izraisītajās HT22 šūnās. Rezultāti parādīja, ka ārstēšana ar 20 μM hiperozīdu ievērojami palielināja SOD, GSH, CAT un neirotrofisko faktoru BDNF, TrkB, NGF līmeni un samazināja ROS un MDA līmeni (2. a) un 2. attēls (b) attēls). Šie rezultāti liecināja, ka hiperozīds atviegloja LPS izraisīto oksidatīvo stresu un neirotrofisko faktoru samazināšanos HT22 šūnās.

3.3.Hiperozīds inhibē LPS izraisītu HT22 šūnu apoptozi un iekaisumu, izmantojot SIRT1.

SIRT1 atviegloja nervu bojājumus; lai noskaidrotu, vai hiperozīds var uzlabot apoptozi un iekaisumu LPS izraisītā LPS, iedarbojoties uz SIRT1, šūnu ārstēšanai tika izmantoti SITRI inhibitori (nikotīnamīds (NAM)). Rietumu blotēšana parādīja, ka SITR1 ekspresija samazinājās LPS izraisītajās šūnās; vienlaikus, salīdzinot ar LPS indukciju, hiperozīdu ārstēšana regulēja SITR1 ekspresijas līmeni. Turklāt ārstēšana ar NAM samazināja SIRT1 ekspresiju HT22 šūnās, salīdzinot ar šūnu ārstēšanu ar LPS+hiperozīdu (3. att. a). Tāpat NAM ārstēšana samazināja Bcl-2 ekspresiju un uzlaboja Bax izteiksmi

3. ATTĒLS:Hiperozīds inhibē LPS izraisītu HT22 šūnu apoptozi un iekaisumu caur SIRT1.

SIRT šūnu ekspresiju mērīja ar rietumu blotēšanu (a). Bcl-2, Bax un kaspāzes-3 ekspresiju HT22 šūnās mērīja ar rietumu blotēšanu(b). HT22 šūnu apoptozes ātrumu mērīja ar plūsmas citometrijas testu (c). IL-1β, IL-6, IL-8 un TNF-α mRNS līmenis HT22 šūnās tika mērīts ar art-PCR(d).* tika uzskatīts par nozīmīgu salīdzinājumā ar kontroli (P<0.05);# was="" considered="" significant="" compared="" to="" lps="" ("p="">< 0.05);="" v="" was="" considered="" significant="" compared="" to="" lps+hyp=""><0.05). and="" caspase-3="" in="" ht22="" cells="" compared="" with="" the="" treatment="" of="" cells="" with="" lps+hyperoside="" treatment(figure="" 3(b)).simulta-neously,="" nam="" treatment="" significantly="" increased="" apoptosis="" of="" ht22="" cells(figure="" 3(c)).="" in="" addition,="" nam="" treatment="" increased="" the="" expression="" of="" il-1,il-6,="" il-8,and="" tnf-α,="" compared="" with="" the="" treatment="" of="" cells="" with="">

FIGuRE 4:Hiperozīds inhibē LPS izraisītu HT22 šūnu oksidatīvo stresu un neirotrofiskā faktora reducēšanu caur SIRT1. SOD, GSH, CAT, ROS un MDA līmenis tika mērīts ar atbilstošiem pārbaudes komplektiem(a). BDNF, TrkB un NGF ekspresija HT22 šūnās tika mērīta ar rietumu blotēšanu (b).* tika uzskatīta par nozīmīgu, salīdzinot ar kontroli (*P<0.05);# was="" considered="" significant="" compared="" to="" lps=""><0.05);v was="" considered="" significant="" compared="" to="" lps+hyp=""><>

ārstēšana(3. att. d)). Šie rezultāti liecināja, ka hipero-puse inhibē LPS izraisītu HT22 šūnu apoptozi un iekaisumu, regulējot SIRT1.

Cistanche var uzlabot imunitāti

3.4.Hiperozīds inhibē LPS izraisītu HT22 šūnu oksidatīvo stresu un neirotrofiskā faktora samazināšanu caur SIRT1.

Mēs pētījām SIRTl ietekmi uz oksidatīvo stresu un neirotrofiskajiem faktoriem LPS izraisītajās HT22 šūnās. Rezultāti parādīja, ka ĀRSTĒŠANA AR NAM samazināja SOD, GSH, CAT un neirotrofisko faktoru BDNF un NGF līmeni un palielināja ROS un MDA līmeni HT22 šūnās, komunicējot ar šūnu ārstēšanu ar LPS+ hiperozīdu ārstēšanu(4.a) un 4.b attēls). Šie rezultāti liecināja, ka hiperozīds inhibē oksidatīvo stresu un neirotrofiskā faktora samazināšanos LPS izraisītajās HT22 šūnās, regulējot SIRT.

Cistanche var uzlabot imunitāti

3.5.Hyperoside aktivizē Wnt/β-Catenin un Sonic Hedgehog Pathways, paaugstinot SIRT1 regulēšanu.

Lai noskaidrotu, vai SIRT1 atvieglo HT22 bojājumus, izmantojot Wnt/β-katenīna un skaņas ezis ceļus, mēs mērījām signalizācijas molekulu ekspresijas līmeņus Wnt/β-katenīna un skaņas ezis ceļos. Rezultāti parādīja, ka LPS ievērojami samazināja Wntl,β-katenīna, Shh un Patch ekspresijas līmeni;ārstēšana ar hiperozīdu ievērojami palielināja Wntl,β-katenīna, Shh un plākstera ekspresijas līmeni; turklāt NAM ārstēšana samazināja Wntl, β-katenīna, Shh un plākstera ekspresijas līmeni. Turklāt HT22 šūnās, salīdzinot ar AR NAM apstrādātām šūnām, Wnt/β-katenīna agonists(LiCl) un skaņas ezis agonists(SAg) inhibēja NAM inhibējošo iedarbību(5.a) un 5.b attēls). Šie rezultāti liecināja, ka hiperozīds aktivizē Wnt/β-katenīna un skaņas ezis ceļus, paaugstinot SIRT1 regulēšanu.

5. ATTĒLS: Hiperozīds aktivizē Wnt /β-katenīna un skaņas ezis ceļus, paaugstinot REGULĒŠANU SIRT1. Wntl un β-katenīna ekspresiju HT22 šūnās noteica ar rietumu blotēšanu (a). Shh un plākstera ekspresija HT22 šūnās tika mērīta ar rietumu blotēšanu (b),*tika uzskatīta par nozīmīgu, salīdzinot ar kontroli(*P<0.05);# was="" considered="" significant="" compared="" to=""><0.05); v="" was="" considered="" significant="" compared="" to=""><0.05);& was="" considered="" significant="" compared="" to="" lps+hyp+licl="" or="" lps+hyp+sag=""><>

Šis raksts ir iegūts no Hindawi neironu plastiskuma sējuma 2021, Article ID 8706400, 10 lappuses https://doi.org/10.1155/2021/8706400