Zarnu baktēriju konsorciju ievadīšana in vivo replikē urolitīna A un B metabotipus žurkas modelī, kas neražo urolitīnuⅠ

Gadu desmitiem ellagitanīnu (ET) un ellagīnskābes (EA) patēriņš ir saistīts ar daudzām bioloģiskām iedarbībām, tostarp antioksidantu, pretvēža, pretiekaisuma, antibakteriālu un pret HIV replikācijas aktivitātēm.1 Tomēr ET un EA absorbcija un biopieejamība ir ļoti slikti.Iepriekšējie pētījumi ar cilvēkiem atklāja, ka EA un EA-O-glikuronīda izdalīšanās ar urīnu ir mazāka par 1% no uzņemtā.2,3 Tomēr, lai gan ET un EA uzsūkšanās ir zema, resnās zarnas mikrobiota tos tālāk metabolizē par urolitīniem. (Uros), kas vismaz daļēji ir atbildīgi par ET un (vai) EA bagātas pārtikas labvēlīgo ietekmi.1,4

Noklikšķiniet uz caurejas līdzeklis

Pirmkārt, EA izdalās ET estera saišu hidrolīzes rezultātā enzīms, kas pazīstams kā ellagitannase.5 EA tiek tālāk noārdīts, veidojot 6H-dibenzo[b,d]pirāna-6-vienu atvasinājumu, ko sauc par Urosu. Šī reakciju kaskāde sākas ar laktona gredzena šķelšanos ar laktonāzes enzīmu, kā rezultātā rodas luteīnskābi, kas pēc tam tiek dekarboksilēta par pentahidroksi-Uro (Uro-M5). Secīgā dehidroksilēšana pārvērš to par tetrahidroksi-Uros (Uro-D, Uro-E un Uro-M6) un trihidroksi-Uros (Uro-C, UroM7 un Uro-G), lai beidzot iegūtu dihidroksi-Uro (Uro-A un isoUro-A) un monohidroksi-Uro (Uro-B), pēdējo parasti nosaka. kad tiek ražots arī izoUro-A.1

Uro vielmaiņas profilu plašās atšķirības, kas konstatētas cilvēkiem pēc ar ET bagātu pārtikas produktu ēšanas, norāda uz atšķirībām resnās zarnas mikrobiotā, kas ir atbildīga par ET degradāciju.6–8 Daudzās iespējamās mijiedarbības starp resnās zarnas baktērijām un saimniekorganismu varētu izskaidrot atšķirīgos uztura (poli) vielmaiņas likteņus. )fenoli.6,9 Šī divvirzienu mijiedarbība starp zarnu mikrobiotu un (poli)fenoliem ir pamudinājusi zinātnieku kopienu grupēt populāciju, pamatojoties uz tometaboliskais fenotips (metāla tips), lai izskaidrotu atšķirības polifenolu iedarbībā.10,11 Precīzāk, saskaņā ar ET un EA metabolismu indivīdus var stratificēt urometabotipos (UM), kas saistīti ar zarnu mikrobioma sastāvu un funkcionalitāti.7,8,12

Rietumu un Austrumu populācijās ir aprakstīti trīs cilvēku UM (UM-A, UM-B un UM-0), kas saistīti ar trim dažādiem Uro ražošanas profiliem.13–15 rada vairākus starpposma Uros, bet tikai urolitīnu A (Uro-A), galveno absorbēto Uro šajā UM, mikrobu kataboliskā ceļa beigās. B metabotipa (UM-B) indivīdi ražo dažus starpposma Uros un trīs galīgos Uros, ti, urolītu B (Uro-B), urolītu A (IsoUro-A) un Uro-A, kas ir galvenie absorbētie Uros UM-B. Tāpēc starpposma Uros varētu darboties galvenokārt zarnās, bet pēdējiem var būt lokāla un sistēmiska iedarbība.6 Turpretim indivīdi ar metāla tipu 0 (UM-0) nevar radīt šos galīgos Uros (tikai Līdz šim ir konstatēts prekursors Urolitīns-M5, kas zarnās netiek absorbēts).

Uroprofilu atšķirības ir novērotas starp UM un gar resnajām zarnām, parādot dominējošo Uro veidošanos distālās resnās zarnas reģionā.16–19 Jāatzīmē, ka UM-0 procents veseliem brīvprātīgajiem Spānijā un Ķīnijā ir aptuveni 10%, un tas varētu būt pat lielāks ASV populācija.13–15 Ir konstatēts, ka baktēriju ģints Gordonibacter un Ellagibacter spēj metabolizēt EA dažos Uros.20–23Tomēr tika konstatēts, ka daži starpprodukti (piemēram, Uro-D, Uro-E, Uro- M7 un Uro-G) un galīgie Uros (Uro-A un Uro-B) netiek ražoti šo baktēriju tīrkultūrās, kas nozīmē, ka citām baktērijām ir jāpabeidz Uros komplekts, kas konfigurē gan UM-A, gan UM-B. . Nesen tika identificēti zarnu baktēriju konsorciji, kas iesaistīti EA metabolismā, lai iegūtu uroproducējošus metabotipus (UM-A un UM-B) in vitro.24

Baktēriju konsorciji, kas satur Gordonibacter plus Enterocloster ģints un Ellagibacter plus Enterocloster, in vitro ražoja attiecīgi ar UM-A un UM-B saistītos urolitīnus.25 Tomēr šo baktēriju konsorciju spēja replicēt cilvēka Uro profilus, kas saistīti ar UM-A un UM-B in vivo. joprojām nav zināms. Turklāt šo Uro veidojošo baktēriju kā jaunu probiotiku lietošanas drošums joprojām nav skaidrs, jo tas iepriekš nav pārbaudīts ar dzīvniekiem vai cilvēkiem. Šajā pētījumā iepriekšminēto baktēriju konsorcijiem tika novērtēta to spēja kolonizēt Uro neražojošo (UM-0-līdzīgo) žurku zarnas un pārvērst tās par uroproducentiem, kas atdarina attiecīgi UM-A un UM-B. Tika novērtēta arī šo baktēriju konsorciju drošība. Turklāt tika izstrādātas divas jaunas reāllaika kvantitatīvās PCR (qPCR) procedūras, lai noteiktu un kvantitatīvi noteiktu Ellagibacter un Enterocloster fekāliju paraugos.

materiāli un metodes

Ķīmiskās vielas un reaģenti

Uros ķīmiski sintezēja un attīrīja VillapharmaResearch SL (Parque Tecnológico de Fuente Álamo, Mursija, Spānija). EA tika iegādāts no Sigma-Aldrich (St Louis, MO, ASV). Fosfāta buferšķīdums (PBS) tika iegūts no FisherScientific (ASV), savukārt metanols, etanols un skudrskābe tika iegūti no Panreac Química (Barselona, ​​Spānija). Šķidruma hromatogrāfijas masas spektrometrijas (LC-MS) šķīdinātāji tika iegādāti no JT Baker (Deventera, Nīderlande). Visā pētījumā tika izmantots UltrapureMillipore ūdens (Bedforda, MA, ASV). Visas ķīmiskās vielas un reaģenti bija analītiskas kvalitātes.

Baktēriju konsorciju sagatavošana

Gordonibacter urolithinfaciens DSM 27213T, Ellagibacter isourolithinifaciens DSM 104140T un Enterocloster pieskrūvēts CEBASS4A9, tās visas izolētas un identificētas mūsu laboratorijā (CEBAS-CSIC, Spānija), tika anaerobiski anaerobiski kultivētas. -Chalgren anaerobās barotnes (WAM, Oxoid) caurules 37 grādu temperatūrā 48 stundas Concept 400 anaerobajā kamerā (BakerRuskin Technologies Ltd, Bridgend, South Wales, UK) un atkārtoti suspendētas PBS, kas papildināts ar 10% glicerīnu un 0,05% L-cisteīna hidrohlorīdu (P-cisteīna hidrohlorīds). Quimica, Barselona, ​​Spānija). Pēc anaerobās inkubācijas tika sagatavoti konsorciji.24,25 Īsi sakot, "baktēriju konsorcijs A" saturēja G. urolithinfaciens un E. bolteae celmi; "baktēriju konsorcijsB" saturēja E. isourolithinifaciens un E. bolteae kultūras; un "kontroles kokteilis" satur sterilu PBS ar 10% glicerīna un 0,05% L-cisteīna hidrohlorīda. Pirms ievadīšanas visi kokteiļi tika sadalīti 3,5 ml alikvotās daļās un turēti -80 grādu temperatūrā.

Dzīvnieki, diētas un eksperimentālais dizains

Eksperimentālo protokolu (atsauce 624/2020) apstiprināja vietējā valdība, Spānijas Nacionālās pētniecības padomes Bioētikas komiteja (Madride, Spānija) un Dzīvnieku eksperimentu ētikas komiteja no Mursijas Universitātes (Spānija). Eksperimenti tika veikti saskaņā ar Eiropas Savienības ieteikumiem attiecībā uz eksperimentiem ar dzīvniekiem (Eiropas Parlamenta un Padomes Direktīva 2010/63/ES par zinātniskiem mērķiem izmantojamu dzīvnieku aizsardzību). Wistar žurkas (n=18; 9 mātītes un 9 tēviņi), kas sver 240 ± 31 g, tika iegūtas no Envigo (Barselona, ​​Spānija). Šis žurku modelis tika izvēlēts, pamatojoties uz tā nespēju ražot Uros, kas tika novērots mūsu provizoriskajos pētījumos, kuros tika pārbaudīti fekāliju paraugi no dažādiem žurku modeļiem. Trīs grupas (A, B un C) tika izveidotas, nejauši iedalot 6 dzīvniekus katrā (3 žurku mātītes un 3 tēviņi). ) pa grupu (1. att.).

Katra žurku grupa tika izmitināta divos dažādos būros, kas sadalīti pēc dzimuma, telpā ar kontrolētu temperatūru (22 ± 2 grādi) ar 55 ± 10% relatīvo mitrumu un kontrolētu gaismas-tumsas ciklu (12 stundas). Žurkas saņēma standarta čau diētu (Teklad, Barselona, ​​Spānija), kas satur (%/100 g svaiga svara) 14,3% olbaltumvielu (kukurūzas lipekļa milti), 48% ogļhidrātu (kviešu milti, malti kvieši, malta kukurūza) un 4% tauku (sojas eļļa). ), 2,9 kcal g-1 enerģijas blīvums un 4,1% kopšķiedras, kas papildināta ar EA pulveri. Tīrība ir lielāka vai vienāda ar 95% (3,6 mg uz 100 g čavas). EA tika homogēni sajaukts ar maltu standarta barību, atkārtoti granulēts un liofilizēts. Ar EA bagātinātā diēta tika uzglabāta prom no mitruma un gaismas. EA deva, kas piešķirtažurkām uzturā bija aptuveni 0,72 mg uz žurku dienā (EA1× diēta), kas ir ekvivalenta deva cilvēkam 41 mg dienā – 1,26 Visas grupas tika barotas ar EA 1× diētu un krāna ūdeni ad libitum visā eksperimenta laikā ( 5 nedēļas). Tā kā fekāliju paraugos konstatētais EA pirmajā nedēļā bija zems, nākamajās dienās tika pievienots papildu EA. 3. nedēļā dzīvniekiem ar zondi tika ievadīta papildu deva 1,5 mgEA dienā uz vienu žurku dienā, kas izšķīdināta ūdenī (kopējā=EA 3 × diēta), kas tika dota tikai 1 nedēļu. Visbeidzot, 4. nedēļā EA 1× diētai pievienoja ≈5 g valriekstu uz vienu žurku dienā (cits EA avots), un to uzturēja līdz pētījuma beigām, lai novērtētu pārtikas matricu saturošās EA ietekmi uz baktēriju spēju. ražot Uros. Katru dienu tika mērīts svars, pārtika un patērētā ūdens daudzums. Zarnu baktēriju konsorciji tika iekšķīgi ievadīti ar zondi. A grupa saņēma 500 µL baktēriju kokteiļa A, B grupa saņēma 500 µL baktēriju kokteiļa B, un grupa C (kontrole) saņēma 500 µL PBS. Mutes zonde tika veikta ik pēc 2 dienām pirmo divu nedēļu laikā un katru dienu nākamo 2 nedēļu laikā. Pagājušajā nedēļā (no 28. līdz 32. dienai) dzīvnieki turpināja ar to pašu diētu, kas papildināta ar EA un valriekstiem, bet bez perorālas baktēriju ievadīšanas. Pētījuma beigās dzīvnieki tika nogalināti, izmantojot CO2 kameru.

Paraugu ņemšanas procedūras

Pētījuma laikā tika savākti fekāliju paraugi Uro analīzei, izmantojot UPLC-ESI-QTOF-MS/MS, un zarnu mikrobiotu ar 16S rRNSgēna sekvencēšanu un qPCR. Asinis tika ekstrahētas dažādos laika punktos (sākotnējā stāvoklī, 28. dienā un pētījuma beigās) hematoloģiskajām un seruma bioķīmiskajām analīzēm. Asins paraugi tika iegūti no astes vēnas (≈500 µL) un savākti heparīnu saturošās mēģenēs sākotnējā līmenī un 28. un 32. dienā (1. att.). Plazmas atdalīšana tika veikta nekavējoties, centrifugējot pie 3000 g 10 minūtes 4 grādu temperatūrā un sasaldēta - –. 80 grādi līdz turpmākai serobioķīmisko mainīgo noteikšanai. Aknas, nieres un liesa tika savāktas, nosvērtas un pārbaudītas, lai atklātu jebkādas morfoloģiskās atšķirības upurēšanas laikā.

Primeru un zondes projektēšana un optimizēšana Ellagibacter un Enterocloster kvantitatīvai noteikšanai ar qPCR

Ellagibacter isourolithinifaciens DSM 104140T un E. pieskrūvēto CEBAS S4A9 16S rRNS gēnu sekvences tika iegūtas no GenBank datu bāzes (EMBL datubāze). Sekvences tika saskaņotas ar filoģenētiski tuvu baktēriju, kas ģenerēja Molekulārās evolūcijas ģenētikas analīzes programmatūru (MEGA 11), un tika pārbaudītas konservētu un mainīgu secību apgabalos, lai izstrādātu primerus un zondi, lai noteiktu un kvantitatīvi noteiktu Ellagibacter un Enterocloster (1. Primersand zonde tika izstrādāta un apstiprināta, attiecīgi izmantojot Primer Questand Oligo Analyzer rīkus (Integrated DNATechnologies, Inc., Beļģija). TaqMan zonde 5′ un 3′ galos tika marķēta ar 6-karboksifluoresceīna grupu. (6FAM) un kazenes dzesētāju (BBQ). qPCR tika veikta, izmantojot ABI 7500 secību noteikšanas sistēmu. Katra primera un zondes galīgā koncentrācija bija 300 un 375 nM Ellagibacter un 200 un 500 nM Enterocloster. Ellagibacter un DNS amplifikācijai tika veikts parasts qPCR protokolsEnteroklosters, attiecīgi. Ellagibakteramplifikācijas pieauguma profils bija 1 cikls 95 grādos 5 minūtes, kam sekoja 45 cikli 95 grādos 15 s, 50 grādi 40 s un 72 grādos 31 s. Visbeidzot tika pievienots 1 cikls 72 grādos 5 minūtes. . Enteroklostera pastiprināšanas profils bija 1 cikls 95 grādu leņķī 5 minūtes, kam sekoja 40 cikli pa 95 grādiem 15 s, 65 grādi 40 s un 72 grādi 31 s. Visbeidzot tika pievienots 1 cikls 72 grādu temperatūrā 5 minūtes.

Fekāliju DNS ekstrakcija un zarnu mikrobu analīzes

DNS ekstrakcija no fekāliju paraugiem tika veikta ar NucleoSpin® audu DNS attīrīšanas komplektu (Macherey-Nagel, Vācija), saskaņā ar ražotāja norādījumiem ar dažām modifikācijām. DNS kvantitatīvi noteica ar fluorimetru (Qubit3.0 — ThermoFisher Scientific™, Apvienotā Karaliste), un tīrību noteica pēc absorbcijas attiecības pie viļņa garuma 260/280 nm (A260/A280) (NanoDrop-ThermoFisher Scientific™, UK). ). Zarnu mikrobiotas sastāvs tika noteikts, sekvencējot 16S rRNS gēna V3 un V4 mainīgos reģionus saskaņā ar Illumina protokoliem (Illumina Inc., Sandjego, CA, ASV) ar nolasīšanas garumu 2 × 300 bp pāra gala palaišana (MiSeqReagent Kit v3 , Illumina Inc.). Metagenomiskā sekvencēšana tika veikta uz MiSeq-Illumina platformas (FISABIO sekvencēšanas pakalpojums, Spānija). Datu apstrāde, himēru secību noņemšana, secību saskaņošana un 16S rRNS gēnu sekvenču klasterizācija tika veikta, kā aprakstīts citur, lai iegūtu taksonomisko klasifikāciju.8,27 Gordonibacter DNS amplifikācija tika panākta ABI 7500 qPCR sistēmā, kā aprakstīts iepriekš.19,28 Enterocloster un Ellagi. Šajā pētījumā izstrādātie specifiskie primeri un zondes tika izmantoti, ievērojot iepriekš aprakstīto qPCR protokolu. Kvantitatīvās noteikšanai tika izmantotas Gordonibacter, Enterocloster un Ellagibacter genoma DNS standarta līknes. Visi fekāliju paraugi tika analizēti trīs eksemplāros.

Urolitīnu ekstrakcija, noteikšana un kvantitatīva noteikšana fekāliju paraugos

Fekāliju paraugi ({{0}},2–0,5 g) tika ekstrahēti proporcijā 1:10 ar MeOH/H2O šķīdumu (8{{). 20}/20), paskābināts ar 0,1% HCl un homogenizēts, 2 minūtes vorteksā un 10 minūtes kratot istabas temperatūrā ar ātrumu 1500 apgr./min. Suspensiju centrifugēja pie 14 000g pie 4 grādiem 10 minūtes, un supernatantu filtrēja caur 0,22 µm PVDF membrānas filtru (Millipore Corp., Bedford, MA) un atšķaida 3x ar MeOH (0,1% skudrskābi). ) pirms injekcijas UPLC-ESI-QTOF-MS sistēmā. UPLC sistēma (Agilent 1290Infinity), kas savienota ar kvadrupola lidojuma laika (QTOF) LC/MS sistēmu (6550 Accurate-Mass) (Agilent Technologies, Waldbronn, Vācija), tika izmantota, lai analizētu fekāliju metabolītus, izmantojot gradienta eluēšanas metodi, kā iepriekš. .29,30 Īsumā, atdalīšana tika veikta aPoroshell 120 EC-C18 apgrieztās fāzes kolonnā, kā kustīgās fāzes izmantojot ūdeni un acetonitrilu, kas abi paskābināti ar 0,1% skudrskābi. Plūsmas ātrums bija 0,4 ml min-1, un injekcijas tilpums bija 5 µL. Datu apstrādei tika izmantota programmatūra MassHunter Qualitative Analysis (versija B.10, Agilent Technologies, Waldbronn, Vācija). Visi metabolīti tika identificēti, tieši salīdzinot ar standartiem, un apstiprināti ar to molekulmasu. Kalibrēšanas līknes tika iegūtas EA un dažādiem Uros ar labu linearitāti (R2 > 0,99).

Hematoloģija un klīniskā ķīmija

Hematoloģiskie mainīgie tika noteikti heparinizētās asinīs, izmantojot automatizētu hematoloģisko analizatoru ar īpašu programmatūru žurku asins paraugiem (AVDIA 120, Siemens, Minhene, Vācija). Analizētie mainīgie lielumi bija vidējais korpuskulārais tilpums (MCV), vidējais korpuskulārais hemoglobīna līmenis (MCH), vidējā korpuskulārā hemoglobīna koncentrācija (MCHC), eritrocītu sadalījums (RDW), vidējais trombocītu tilpums (MPV), trombocītu līmenis (PCT), trombocītu sadalījuma platums (PDW). , vidējais trombocītu komponents (MPC), vidējā trombocītu masa (MPM), trombocītu skaits (PLT), retikulocītu hemoglobīna saturs (CHr) un vidējais retikulocītu korpuskulārais tilpums (MCVr). Plazmas bioķīmiskie mainīgie lielumi, kalcijs (Ca) un fosfors (P) tika analizēti, izmantojot ķīmijas un toksikoloģijas analizatoru Olympus AU400 (Beckman Coulter, Kalifornija, ASV). Bioķīmiskie mainīgie bija kopējie proteīni (PROT), albumīns (ALBU), globulīns (GLOB), kreatinīns (CREA), glikoze (GLUC), holesterīns (CHOL), triglicerīdi (TRIGL), sārmainā fosfatāze (ALP), gamma-glutamiltranspeptidāze ( GGT), aspartāta aminotransferāze (AST) un alanīna aminotransferāze (ALT). Visbeidzot, tiroksīna (T4) līmenis tika analizēts, izmantojot IMMULITE® 1000 imūntesta sistēmu (Siemens).

Statistiskā analīze

Dati ir izteikti kā vidējā ± standarta novirze (SD). Statistiskā analīze tika veikta ar SPSS programmatūras versiju 27.0 (SPSS Inc., Čikāga, IL, ASV), un atšķirības ar p < 0.05 tika uzskatīti par statistiski nozīmīgiem. Datu normalitāte tika novērtēta ar Shapiro-Wilk testu. Salīdzinājumi starp dažādām ārstēšanas grupām tika veikti, izmantojot atkārtoti izmērītu dispersijas analīzi (RM ANOVA) ar Tukey vai Dunnett T3 post hoc testu atkarībā no tā, vai dati atbilst attiecīgi normālam vai nenormālam sadalījumam. Atšķirības starp vīriešiem un sievietēm tika pētītas, izmantojot pāra Stjudenta t-testu vai Vilkoksona paraksta ranga testu, kad dati bija attiecīgi normāli vai neparasti sadalīti. Lai noteiktu atšķirīgās baktēriju pazīmes starp grupām, tika izmantots hī kvadrāta lineārās diskriminējošās analīzes efekts (LEfSe). Pīrsona korelācija tika izmantota, lai analizētu iespējamās saiknes starp mainīgajiem lielumiem normāli sadalītos datos, savukārt Spīrmena korelācija tika izmantota datos, kas nav normāli sadalīti. Datu diagrammas tika veiktas, izmantojot Sigma Plot 14.5 (Systat Software, Sanhosē, CA, ASV).

Dabiskas augu izcelsmes zāles aizcietējuma mazināšanai - Cistanche

Cistanche ir parazitāro augu ģints, kas pieder Orobanchaceae ģimenei. Šie augi ir pazīstami ar savām ārstnieciskajām īpašībām un ir izmantoti tradicionālajā ķīniešu medicīnā (TCM) gadsimtiem ilgi. Cistanche sugas pārsvarā sastopamas Ķīnas, Mongolijas un citu Vidusāzijas daļu sausajos un tuksnešainajos reģionos. Cistanche augiem raksturīgi to gaļīgie, dzeltenīgie stublāji, un tie ir ļoti novērtēti to potenciālo ieguvumu veselībai dēļ. Tiek uzskatīts, ka TCM gadījumā Cistanche piemīt tonizējošas īpašības, un to parasti izmanto, lai barotu nieres, uzlabotu vitalitāti un atbalstītu seksuālo funkciju. To izmanto arī, lai risinātu novecošanas, noguruma un vispārējās labklājības problēmas. Lai gan Cistanche ir sena lietošanas vēsture tradicionālajā medicīnā, zinātniskie pētījumi par tā efektivitāti un drošību turpinās un ir ierobežoti. Tomēr tas satur dažādus bioaktīvus savienojumus, piemēram, feniletanoīdu glikozīdus, iridoīdus, lignānus un polisaharīdus, kas var veicināt tā ārstniecisko iedarbību.

Večistančecistanche pulveris, cistanche tabletes, cistanche kapsulas,un citi produkti tiek izstrādāti, izmantojottuksnesiscistanchekā izejvielas, kas visas labi iedarbojas uz aizcietējumu mazināšanu. Konkrētais mehānisms ir šāds: tiek uzskatīts, ka Cistanche var potenciāli atvieglot aizcietējumus, pamatojoties uz tā tradicionālo lietošanu un noteiktiem savienojumiem, ko tas satur. Lai gan zinātniskie pētījumi par Cistanche ietekmi uz aizcietējumiem ir ierobežoti, tiek uzskatīts, ka tam ir vairāki mehānismi, kas var veicināt tā potenciālu mazināt aizcietējumus. Caureju veicinoša iedarbība:Cistanchejau sen tiek izmantots tradicionālajā ķīniešu medicīnā kā līdzeklis pret aizcietējumiem. Tiek uzskatīts, ka tai ir viegla caureju veicinoša iedarbība, kas var palīdzēt veicināt zarnu kustību un izraisīt aizcietējumus. Šo efektu var attiecināt uz dažādiem Cistanche savienojumiem, piemēram, feniletanoīdu glikozīdiem un polisaharīdiem. Zarnu mitrināšana: Pamatojoties uz tradicionālo lietošanu, tiek uzskatīts, ka Cistanche piemīt mitrinošas īpašības, īpaši vērstas uz zarnām. Zarnu mitrināšanas un eļļošanas veicināšana var palīdzēt mīkstināt instrumentus un atvieglot pārvietošanos, tādējādi mazinot aizcietējumus. Pretiekaisuma iedarbība: aizcietējums dažkārt var būt saistīts ar iekaisumu gremošanas traktā. Cistanche satur noteiktus savienojumus, tostarp feniletanoīdu glikozīdus un lignānus, kuriem tiek uzskatīts, ka tiem piemīt pretiekaisuma īpašības. Samazinot iekaisumu zarnās, tas var palīdzēt uzlabot zarnu kustības regularitāti un mazināt aizcietējumus.