Feniletilspirta glikozidīna cistanche intervences pētījumi par perimenopauzes sindroma dzīvnieku modeli Ⅲ

2. eksperiments

Ietekme noCistanche feniletanola glikozīdsuz pelesperimenopauzemodelis Materiāli un metodes

Eksperimentālie materiāli

1.1. Izmēģinājuma dzīvnieki

SPF kategorijas peles, Kunmingas sugas, mātītes, 20-25g, nodrošina Uhaņas Bioloģisko produktu institūts. Sertifikāta numurs: 42000400000611; Laboratorijas sertifikāta numurs SYXK (Yu) 2010-001. 1.2. Eksperimentālās zāles

Cistanche deserticola feniletanola glikozīds tika pagatavots pēc 1.eksperimenta metodes, un saturs sasniedza 66,47%. Gengnian'an kapsula, sastāvdaļas: Rehmannia glutinosa, Rehmannia glutinosa, Alisma, Ophiopogon japonicus, Scrophulariaceae, peoniju miza, Poria cocos, perlamutra, curculigo, Schisandra chinensis, magnetīts, Polygonum wflorheum, vineating, multiflora multifloratum, . Funkcijas un indikācijas: baro iņ un pakļauj jaņ, mazina nepatikšanas un nomierina prātu. Lieto pret menopauzes karstuma viļņiem un svīšanu, reiboni, troksni ausīs, aizkaitināmību un bezmiegu. Specifikācijas: 0,3 g vienā kapsulā. Lietošana un dozēšana: Iekšķīgi, 3 kapsulas vienā reizē, 3 reizes dienā. Ražotājs: Shanxi Tianxing Pharmaceutical Co., Ltd. Ražošanas partijas numurs: 121104. Apstiprinājuma numurs: Nacionālais zāļu apstiprinājuma Nr. Z14021848.

Sojas izoflavonu un E vitamīna mīkstās kapsulas, sastāvdaļu saraksts: sojas izoflavonu pulveris, E vitamīns, saulespuķu eļļa, želatīns, glicerīns, ūdens, tartrazīns, titāna dioksīds. Ikoniskas sastāvdaļas un saturs: katrs 100 g satur 55,2 mg sojas izoflavonu (aprēķināts kā genisteīns) un 608,5 mg E vitamīna. Veselības funkcijas: palielināt kaulu blīvumu. Lietošanas instrukcija un deva: Lietojiet 1 kapsulu 2 reizes dienā, uzdzerot siltu ūdeni. Specifikācijas: 500mg × 100 kapsulas. Ražotājs: Weihai Ziguang Biotechnology Development Co., Ltd. Ražošanas partijas numurs: 13070302. Apstiprinājuma numurs: National Food Health G20080032.

1. rezultāts Ietekme uz autonomām aktivitātēm peles perimenopauzes modelī

Peļu autonomās aktivitātes testa rezultāti katrā eksperimentālajā grupā ir parādīti 2. tabulā un 2. attēlā.

1.3. Eksperimentālie reaģenti

Nātrija karboksimetilceluloze, Tianjin Hengxing Chemical Reagent Manufacturing Co., Ltd., partijas numurs: 20120418; penicilīna nātrijs injekcijām, North China Pharmaceutical Co., Ltd., specifikācija: 4 miljoni vienību, ražošanas partijas numurs: c1206807; formaldehīda šķīdums (analītiskā kvalitāte), Yantai City Shuangshuang Chemical Co., Ltd., ražošanas partijas numurs: 20130902; 0,9% nātrija hlorīda injekcija, Chenxin Pharmaceutical Co., Ltd.; specifikācija: 250ml, ražošanas partijas numurs: 1301265303;

Hlorhidrāts, Tianjin Guangfu Fine Chemical Research Institute, partijas numurs 20120827; peles E2 ELISA noteikšanas komplekts, R&D uzņēmums, partijas numurs: 20131001A; peles T ELISA noteikšanas komplekts, R&D uzņēmums, partijas numurs: 20131001A; peles LH ELISA noteikšanas testa komplekts, R&D uzņēmums, partijas numurs: 20131001A;

Peles FSH ELISA noteikšanas komplekts, R&D uzņēmums, partijas numurs: 20131001A. 1.4. Eksperimentālie instrumenti

Elektroniskie svari, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., modelis: JY601; elektroniskie analītiskie svari, Ohaus (Shanghai) Company, modelis: AR1140/C; ātrdarbīga galda centrifūga, Šanhajas Antingas zinātnisko instrumentu rūpnīca, modelis: TGL-168; Elektriskā termostata ūdens vanna, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., modelis: HWS12; Peles autonomās aktivitātes testeris, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., modelis: ZZ-6; Peles tumšuma novēršanas mērītājs, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., modelis: BA-200; ātrgaitas atdzesēta centrifūga, HKUST Innovation Co., Ltd. Zhongjia filiāle, modelis: KDC-160HR; regulējama pipete, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Mikroplašu lasītājs, American BIO-RAD Company, modelis: 680;

Elektriskais mikroskops, Japānas kompānija OLYMPUS, modelis: BX61

CIK ILGS PIEŅEM, LAI CISTANČE STRĀDĀS?

2 Eksperimentālās metodes

2.1. Modelēšana un zāļu pārvalde

Modelēšanas metode: ņemiet 100 Kunmingas peļu mātītes, kas sver 23-25g, nejauši atlasiet 12 peles kā tukšo grupu un veiciet fiktīvu operāciju, un pārējās peles izmanto, lai izveidotu menopauzes modeļus. . Pēc svēršanas peles tika anestēzētas, intraperitoneāli ievadot 10% hlorālhidrāta (0,03 ml/10 g) un fiksētas vēdera stāvoklī. Pēc tam mati tika nogriezti no peles aizmugures zem pēdējās ribas vidusauss līnijas krustpunktā un apmēram 1 cm attālumā no mugurkaula ārpuses, pēc tam dezinficēti un nogriezti. Ādas un muguras muskuļi ir atvērti apmēram 05-1cm, un griezuma laukā ir redzama pienbalta spīdīga tauku masa, un tajā ir iestrādāta olnīca. Ar mazām pincetēm maigi satveriet tauku masu un izvelciet to no iegriezuma, atdaliet tauku masu, un jūs redzēsiet plānu, neregulāru, dzeltensarkanu olnīcu grupu. Griežot, vispirms ar tieviem pavedieniem sasien olvadus (arī taukus) zem olnīcām un pēc tam izņem olnīcas. Pēc operācijas dzemdes ragus ieliek atpakaļ vēdera dobumā, sašuj muskuļus un ādu, tāpat izņem abas olnīcas. Pēc operācijas dzīvnieki tika rūpīgi audzēti un 3 dienas pēc kārtas intramuskulāri injicēja penicilīnu 200,000 u/kg (katrs 0,1 ml), lai novērstu infekciju. Katrai pelei tika veikta maksts uztriepes pārbaude 5 dienas pēc operācijas, vienu reizi dienā 5 dienas pēc kārtas, lai noteiktu, vai olnīcas ir pilnībā izņemtas. Peles, kurām uztriepe uzrādīja estrus reakciju, tika izmestas, un 72 pilnībā kastrētas peles tika nejauši un vienmērīgi sadalītas 6 grupās eksperimentāliem nolūkiem, proti, modeļa grupā,Gengniang'an kapsulu grupa, sojas izoflavona mīksto kapsulu grupa, un liela grupa. , vidējās un mazās devāsCistanche feniletanola glikozīdsgrupai. Pagatavošanas metode: {{0}},5% CMC Sagatavošanas metode: Nosver 4g karboksimetilcelulozes nātrija un sajauc to ar destilētu ūdeni, lai iegūtu 800ml. Cistanche feniletanola glikozīdu grupas lielas, vidējas un mazas devas bija attiecīgi 20{{30}}mg/kg, 100mg/kg un 50mg/kg (ievadīšanas tilpums 0,1 ml/ 10 g). Pagatavošanas metode: Nosveriet attiecīgi 2000mg, 1000mg un 500mg Cistanche feniletanoīda glikozīda, izšķīdiniet to ar nelielu daudzumu 0,5% CMC, pēc tam noregulējiet tilpumu uz 100 ml, labi samaisiet, un viss. Gengniangan kapsulas (675 mg/kg, sajauktas ar destilētu ūdeni līdz 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g, kas atbilst 15 reizes lielākai par klīnisko devu); sagatavošanas metode: paņemiet 9 Gengniangan kapsulas, vispirms izmantojiet nelielu daudzumu 0,5% CMC Dissolve, pēc tam noregulējiet tilpumu līdz 40 ml un labi samaisiet, lai iegūtu Gengnianan kapsulas suspensijas devu (675 mg/kg). Sojas pupu izoflavona E vitamīna mīkstā kapsula (250mg/kg, izmantojiet destilētu ūdeni, lai pagatavotu 25mg/ml, 0,1ml/10g, kas atbilst 15 reizes lielākai par klīnisko devu); pagatavošanas metode: paņemiet 2 sojas pupu izoflavona kapsulas, vispirms izmantojiet nelielu daudzumu 0,5 Izšķīdiniet %CMC, pēc tam noregulējiet tilpumu līdz 40 ml un labi samaisiet, lai iegūtu sojas izoflavona kapsulas suspensijas devu (250 mg/kg).

Uzglabāšanas veids: atdzesēt, lietošanas laikā turēt siltu.

Ievadīšanas metode: katras grupas dzīvniekiem tika ievadītas atbilstošas ​​zāles 10. dienā pēc operācijas. Gengnian'an kapsulu grupai perorāli ievadīja Gengniang'an kapsulu suspensiju 675 mg·kg-1, un sojas izoflavona mīksto kapsulu grupai iekšķīgi ievadīja 250 mg·kg-1 sojas izoflavona mīksto kapsulu suspensiju, un liela, vidēja unnelielas Cistanche benzola devastika ievadīti. Etanola glikozīda grupai perorāli tika ievadītas lielas, vidējas un mazas Cistanche feniletanoīda glikozīda devas 200mg·kg-1, 10mg·kg-1, 50mg·kg{ {5}}, attiecīgi 0,1 ml/10 g. Tukšajai grupai un modeļa grupai vienu reizi dienā 21 dienu pēc kārtas ievadīja tādu pašu 0, 5% CMC šķīduma tilpumu.

Peles FSH ELISA noteikšanas komplekts, R&D uzņēmums, partijas numurs: 20131001A. 1.4. Eksperimentālie instrumenti

Elektroniskie svari, Shanghai Minqiao Medical Instrument Co., Ltd., modelis: JY601; elektroniskie analītiskie svari, Ohaus (Shanghai) Company, modelis: AR1140/C; ātrdarbīga galda centrifūga, Šanhajas Antingas zinātnisko instrumentu rūpnīca, modelis: TGL-168 ; Elektriskā termostata ūdens vanna, Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., modelis: HWS12; Peles autonomās aktivitātes testeris, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., modelis: ZZ-6; Peles tumšuma novēršanas mērītājs, Chengdu Taimeng Technology Co., Ltd., modelis: BA-200; ātrgaitas atdzesēta centrifūga, HKUST Innovation Co., Ltd. Zhongjia filiāle, modelis: KDC-160HR; regulējama pipete, Shanghai Leibo Analytical Instrument Co., Ltd.;

Mikroplašu lasītājs, American BIO-RAD Company, modelis: 680;

Elektriskais mikroskops, Japānas kompānija OLYMPUS, modelis: BX61

2 Eksperimentālās metodes

2.1. Modelēšana un zāļu ievadīšana

Modelēšanas metode: ņemiet 100 Kunmingas peļu mātītes, kas sver 23-25g, nejauši atlasiet 12 peles kā tukšo grupu un veiciet fiktīvu operāciju, un pārējās peles izmanto, lai izveidotu menopauzes modeļus. . Pēc svēršanas peles tika anestēzētas, intraperitoneāli ievadot 10% hlorālhidrāta (0,03 ml/10 g) un fiksētas vēdera stāvoklī. Pēc tam mati tika nogriezti no peles aizmugures zem pēdējās ribas vidusauss līnijas krustpunktā un apmēram 1 cm attālumā no mugurkaula ārpuses, pēc tam dezinficēti un nogriezti. Ādas un muguras muskuļi ir atvērti apmēram 05-1cm, un griezuma laukā ir redzama pienbalta spīdīga tauku masa, un tajā ir iestrādāta olnīca. Ar mazām pincetēm maigi satveriet tauku masu un izvelciet to no iegriezuma, atdaliet tauku masu, un jūs redzēsiet plānu, neregulāru, dzeltensarkanu olnīcu grupu. Griežot, vispirms ar tieviem pavedieniem sasien olvadus (arī taukus) zem olnīcām un pēc tam izņem olnīcas. Pēc operācijas dzemdes ragus ieliek atpakaļ vēdera dobumā, sašuj muskuļus un ādu, tāpat izņem abas olnīcas. Pēc operācijas dzīvnieki tika rūpīgi audzēti un 3 dienas pēc kārtas intramuskulāri injicēja penicilīnu 200,000 u/kg (katrs 0,1 ml), lai novērstu infekciju. Katrai pelei tika veikta maksts uztriepes pārbaude 5 dienas pēc operācijas, vienu reizi dienā 5 dienas pēc kārtas, lai noteiktu, vai olnīcas ir pilnībā izņemtas. Peles, kurām uztriepe uzrādīja estrus reakciju, tika izmestas, un 72 pilnībā kastrētas peles tika nejauši un vienmērīgi sadalītas 6 grupās eksperimentālos nolūkos, proti, modeļu grupā, Gengniang'an kapsulu grupā, sojas izoflavona mīksto kapsulu grupā un lielajā grupā. , vidējās un mazās devāsCistanche feniletanola glikozīdsgrupai. Sagatavošanas metode: 0.5% CMC Sagatavošanas metode: Nosver 4g karboksimetilcelulozes nātrija un sajauc to ar destilētu ūdeni, lai iegūtu 800 ml. Lielu, vidēju un mazu devu devasCistanche feniletanola glikozīdsgrupā bija attiecīgi 200mg/kg, 10{{20}}mg/kg un 50mg/kg (ievadīšanas tilpums 0,1 ml/10 g). Pagatavošanas metode: Nosveriet attiecīgi 2000mg, 1000mg un 500mg Cistanche feniletanoīda glikozīda, izšķīdiniet to ar nelielu daudzumu 0,5% CMC, pēc tam noregulējiet tilpumu uz 100 ml, labi samaisiet, un viss. Gengniangan kapsulas (675 mg/kg, sajauktas ar destilētu ūdeni līdz 67,5 mg/ml, 0,1 ml/10 g, kas atbilst 15 reizes lielākai par klīnisko devu); sagatavošanas metode: paņemiet 9 Gengniangan kapsulas, vispirms izmantojiet nelielu daudzumu 0,5% CMC Dissolve, pēc tam noregulējiet tilpumu līdz 40 ml un labi samaisiet, lai iegūtu Gengnianan kapsulas suspensijas devu (675 mg/kg). Sojas pupu izoflavona E vitamīna mīkstā kapsula (250mg/kg, izmantojiet destilētu ūdeni, lai pagatavotu 25mg/ml, 0,1ml/10g, kas atbilst 15 reizes lielākai par klīnisko devu); pagatavošanas metode: paņemiet 2 sojas pupu izoflavona kapsulas, vispirms izmantojiet nelielu daudzumu 0,5 Izšķīdiniet %CMC, pēc tam noregulējiet tilpumu līdz 40 ml un labi samaisiet, lai iegūtu sojas izoflavona kapsulas suspensijas devu (250 mg/kg).

Uzglabāšanas veids: atdzesēt, lietošanas laikā turēt siltu.

Ievadīšanas metode: katras grupas dzīvniekiem tika dotas atbilstošas ​​zāles 10dienā pēc operācijas. Gengnian'an kapsulu grupai iekšķīgi ievadīja Gengniang'an kapsulu suspensiju 675 mg·kg-1, un sojas izoflavona mīksto kapsulu grupai iekšķīgi ievadīja 250 mg·kg-1 sojas izoflavonu. mīksto kapsulu suspensiju, un tika ievadītas lielas, vidējas un mazas Cistanche benzola devas. Etanola glikozīda grupai perorāli tika ievadītas lielas, vidējas un mazas Cistanche feniletanoīda glikozīda devas attiecīgi 200 mg·kg-1, 10 mg·kg-1, 50 mg·kg-1, 0,1 ml/10 g. Tukšajai grupai un modeļa grupai vienu reizi dienā 21 dienu pēc kārtas ievadīja tādu pašu 0, 5% CMC šķīduma tilpumu.

2.2. Novērošanas elementi un noteikšanas metodes

Peļu spontāno aktivitāšu skaits katrā grupā 5 minūšu laikā tika mērīts 18. ievadīšanas dienā. Peļu latentums, kas pirmo reizi ienāca tumšajā telpā, un elektriskās strāvas triecienu skaits, kas saņemti 5 minūšu laikā pēc ieiešanas tumšajā telpā, tika mērīti 19. līdz 20. ievadīšanas dienā. 2 stundas pēc pēdējās devas (12 stundas bez ēdiena vai ūdens) peles tika nosvērtas, tām izņemti acs āboli, paņemtas asinis, atdalīts serums un noteikts E2, T, LH un FSH saturs serumā. izmērīts; pēc tam peles tika upurētas ar dzemdes kakla izmežģījumu un sadalītas. , izņemiet aizkrūts dziedzeri, liesu un dzemdes audus, nosveriet to mitro svaru un aprēķiniet orgānu indeksu (orgāna indekss=orgāna mitrā masa mg/peles svara g), un pēc tam izņemiet hipofīzi; fiksē aizkrūts dziedzeri, liesu, dzemdi un hipofīzi uz 10% formalīna šķīdumā, kas iestrādāts parafīnā, sadalīts, iekrāsots ar HE, un katras grupas audu morfoloģiskās izmaiņas tika novērotas gaismas mikroskopā.

2.2.1. Neatkarīgo darbību skaita pārbaude

Peles katrā grupā tika ievietotas brīvprātīgās darbības aparātā, vispirms 1 minūti pielāgotas videi, un pēc tam tika mērīts brīvprātīgo aktivitāšu skaits 5 minūšu laikā.

2.2.2. Tumsas izvairīšanās tests

Ievietojiet peles katrā grupā testa kastē ar astēm pret mazo atveri tumšajā telpā un veiciet apmācību. Pēc 24 stundām atkārtoti tika mērīts to peļu latentuma periods, kuras pirmo reizi ienāca tumšajā telpā, un elektrošoku skaits, kas saņemti 5 minūšu laikā pēc ieiešanas tumšajā telpā.

2.2.3. Komplekta noteikšanas metode

Iegūstiet seruma paraugus: izmantojiet mēģenes, kas nesatur pirogēnus un endotoksīnus. Operācijas laikā izvairieties no jebkādas šūnu stimulācijas. Pēc asiņu savākšanas centrifugējiet tās ar ātrumu 3000 apgr./min 10 minūtes, lai ātri un uzmanīgi atdalītu serumu un sarkanās asins šūnas. Peles estradiola (E2) ELISA noteikšanas komplekta testa metode: izņemiet vajadzīgās sloksnes no alumīnija folijas maisiņa, kas 20 minūtes ir bijis līdzsvarots istabas temperatūrā, un ievietojiet atlikušās sloksnes pašaizzīmogošā maisiņā un novietojiet tās atpakaļ uz 4 grādiem. . Iestatiet standarta iedobes un paraugu iedobes un katrā standarta iedobē pievienojiet 50 μL dažādu koncentrāciju standartu. Vispirms parauga iedobē pievienojiet 10 μL pārbaudāmā parauga un pēc tam pievienojiet 40 μL parauga šķīdinātāja (tas ir, paraugu atšķaida 5 reizes); nepievienojiet to tukšajai akai. Izņemot tukšo iedobi, katrai standarta iedobes un parauga iedobes iedobei pievieno 100 μL ar mārrutku peroksidāzi iezīmētas noteikšanas antivielas un noslēdz reakcijas iedobi ar blīvplēvi. Inkubējiet 37 grādu ūdens vannā vai inkubatorā 60 minūtes. Izmetiet šķidrumu, nosusiniet uz absorbējoša papīra, piepildiet katru iedobi ar mazgāšanas šķīdumu un ļaujiet nostāvēties 1 minūti. Nokratiet mazgāšanas šķidrumu, nosusiniet uz absorbējoša papīra un atkārtojiet plāksnes mazgāšanu 5 reizes. Vispirms katrai iedobei pievieno 50 μL no substrāta A un B un inkubē 37 grādu temperatūrā tumsā 15 minūtes. Izņemiet fermentu plāksni, pievienojiet 50 μL apturēšanas šķīduma katrā iedobē un 15 minūšu laikā izmēra katras iedobes absorbcijas vērtību (OD vērtību) pie viļņa garuma 450 nm. Atbilstoši standarta produkta koncentrācijai un atbilstošajai OD vērtībai uzzīmējiet standarta produkta regresijas līkni un aprēķiniet katra parauga koncentrācijas vērtību saskaņā ar līknes vienādojumu. Galīgā koncentrācija ir faktiskā izmērītā koncentrācija, kas reizināta ar atšķaidījuma koeficientu. Tostarp standarta produktu (S0-S5) koncentrācijas ir 0, 4, 8, 16, 32 un 64 pmol/L. Peles (Peles) testosterona (T) ELISA noteikšanas komplekta standarta (S0-55) koncentrācijas ir 0, 50, 100, 200, 400 un 800 pg/ml;

Peles (Peles) luteinizējošā hormona (LH) ELISA noteikšanas komplekta standarta (S{{0}}) koncentrācijas ir 0, 0,5, 1, 2, 4, 8 mIU/mL;

Peles (Peles) folikulus stimulējošā hormona (FSH) ELISA noteikšanas komplekta standarta (S0-55) koncentrācijas ir 0, 5, 10, 20, 40 un 80 mIU/ml.

2.3. Statistiskās apstrādes metodes

Datu analīzei datu statistiskajai apstrādei tika izmantota medicīniskās statistikas pakotne SPSS17.{1}}. Mērījumu dati tika izteikti kā vidējā ± standartnovirze (-x±s). Grupu salīdzināšanai tika izmantota vienvirziena dispersijas analīze. Lai pārbaudītu dispersiju viendabīgumu, tika izmantota LSD metode. , Games-Howell tests tika izmantots nevienmērīgām novirzēm, un Ridit tests tika izmantots pakāpes datiem.

3. attēls Cistanche feniletanola glikozīda ietekme uz tumsas izvairīšanās eksperimenta latento periodu peles perimenopauzes modelī

4. attēls Cistanche feniletanola glikozīda ietekme uz elektriskās strāvas triecienu skaitu perimenopauzes peles modeļa izvairīšanās no tumsas eksperimentā. No 3. tabulas un 3. līdz 4. attēliem var redzēt, ka, salīdzinot ar tukšo grupu, inkubācijas periods un peļu elektriskās strāvas triecienu skaits modeļa grupā ir ievērojami samazināts ( P<0.01), reflecting the decline in memory in the mouse perimenopausal model. Compared with the model group, Gengnianan, soybean isoflavones, and large and medium doses of Cistanche phenylethanoid glycosides could significantly increase the latency of the dark avoidance test in mice, reduce the number of electric shocks (P<0.01), and improve the memory of mice.

3 Ietekme uz orgānu indeksu peles perimenopauzes modelī

Peļu aizkrūts dziedzera, liesas un dzemdes indeksi katrā eksperimentālajā grupā ir parādīti 4. tabulā un 5. attēlā.

Kā redzams 4. tabulā un 5. attēlā, salīdzinot ar tukšo grupu, peļu dzemdes indekss modeļu grupā bija ievērojami zemāks (P<0.01), indicating that removal of the ovaries caused uterine atrophy in the perimenopausal model mice, and removal of the ovaries resulted in insufficient estrogen secretion. Causes immune organ atrophy in perimenopausal mice. Compared with the model group, soy isoflavones, Gengnianan, large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the thymus, spleen and uterine index (P<0.01), and low dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly improve the perimenopausal model. Mouse uterine index (P<0.05). 4 Effects on serum sex hormone levels in mouse perimenopausal model

E2, T, FSH un LH saturs peļu serumā katrā grupā. Skatiet 5.-6. tabulu un 6.-9. attēlus. No 5-6 tabulām un 6-9 attēliem var redzēt, ka salīdzinājumā ar tukšo grupu E2 un T līmenis peļu serumā modeļu grupā bija ievērojami pazeminājies (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P<0.01). , indicating that removal of ovaries leads to disorders of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche phenylethanol glycoside, Gengniangan, and soybean isoflavones can significantly increase the levels of perimenopausal mice. E2 and T levels in the serum of the early-stage model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in the serum. Low-dose Cistanche phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels.

4 Ietekme uz dzimumhormonu līmeni serumā peļu perimenopauzes modelī

E2, T, FSH un LH saturs peļu serumā katrā grupā. Skatiet 5.-6. tabulu un 6.-9. attēlus.

No 5-6 tabulām un 6-9 attēliem var redzēt, ka salīdzinājumā ar tukšo grupu E2 un T līmenis peļu serumā modeļu grupā bija ievērojami pazeminājies (P<0.01), and the levels of LH and FSH were significantly increased (P< 0.01), indicating that removal of ovaries leads to disorder of sex hormone levels in the serum of perimenopausal model mice, and the perimenopausal mouse model was successfully replicated. Compared with the model group, each administration group can significantly reduce the elevated LH level in serum (P<0.01); large and medium doses of Cistanche deserticola phenylethanol glycoside, Gengniannian, and soybean isoflavones can significantly reduce the level of LH in mice. E2 and T levels in serum of perimenopausal model (P<0.01) and reduced elevated FSH and LH levels in serum. Low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly increase serum E2 levels and reduce serum FSH levels (P<0.05); low-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside has a tendency to increase serum T levels. 5. Effects on organ tissue morphology in perimenopausal model mice

Peļu dzemdes, aizkrūts dziedzera, liesas un hipofīzes patoloģisko un histoloģisko novērojumu rezultāti katrā eksperimentālajā grupā ir šādi. Patoloģiskās fotogrāfijas ir parādītas 1. pielikumā perimenopauzes peļu patoloģiskajām fotogrāfijām.

5.1. Ietekme uz perimenopauzes modeļa peļu dzemdes audu morfoloģiju

Atbilstoši dažādām izmaiņu pakāpēm peļu endometrijā, dziedzeros un miometrijā katrā eksperimentu grupā tika izmantoti daļēji kvantitatīvie standarti, lai sadalītu patoloģisko audu morfoloģiju četros līmeņos. Tika izmērītas peļu dzemdes katrā eksperimentu grupā. Novērojumu rezultāti ir parādīti 7. tabulā. 7. tabula Cistanche deserticola feniletanola glikozīda ietekme uz dzemdes patoloģiskām izmaiņām perimenopauzes modeļa pelēm Vienība: tikai

"-" Endometrija epitēlija šūnas, dziedzeri, miometrijs un serozs ir normāli; "+" endometrija epitēlija šūnas un dziedzeri ir atrofēti, un miometrijs un serozs ir normāli; "++" endometrija epitēlijs Šūnas un dziedzeri ir daļēji atrofēti, muskuļu slānis ir nedaudz atrofēts, un serozs ir normāls; "+++" endometrija epitēlija šūnas un dziedzeri ir ievērojami atrofēti, un seroze ir normāla.

Pēc Ridit testa no iepriekšējās tabulas var redzēt, ka, salīdzinot ar tukšo grupu, peļu dzemdē modeļu grupā bija ievērojami patoloģiski audu bojājumi (P<0.01). Compared with the model group, soy isoflavone vitamin E soft capsules, Gengnianan capsules, and high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly improve the uterine pathological tissue lesions of mice (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can Significantly improved uterine pathological tissue lesions in mice (P<0.05). 5.2 Effect on thymus and spleen tissue morphology in mouse perimenopausal model

Izmantojiet mikrometru, lai izmērītu katras peles aizkrūts dziedzera garozas biezāko un šaurāko daļu biezumu katrā eksperimentālajā grupā, lai iegūtu vidējo; izmantojiet mikrometru, lai novietotu bāzes līniju uz liesas mezgla, un izmēriet abus biezumus ar centrālo artēriju kā centru. Tika aprēķināts liesas mezgliņu biezums abās pusēs un aprēķināts vidējais rādītājs; rezultāti parādīti 8. tabulā un 10. attēlā.

8. tabula Cistanche deserticola feniletanola glikozīda ietekme uz aizkrūts dziedzera un liesas patoloģiskām izmaiņām perimenopauzes modeļa pelēm (-x±s)

Kā redzams no 8. tabulas un 10. attēla, salīdzinot ar tukšo grupu, aizkrūts dziedzera garozas biezums un liesas mezgliņu apjoms modeļa grupā bija ievērojami samazināts (P<0.01), indicating that the thymus and spleen volumes atrophied after the perimenopausal model was created in mice. Compared with the model group, high-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.01), and medium-dose Cistanche deserticola phenylethanoid glycoside can significantly thicken the thymic cortex (P<0.05). Each medication group could significantly increase the volume of splenic nodules. 5.3 Effect on pituitary tissue morphology in mouse perimenopausal model

Liela palielinājuma redzes lauks aptver 10000 μm platību

2. Izmēriet bazofīlo šūnu un hipofīzes priekšējās daļas šūnu skaitu mikrotaisnstūra rāmī. Rezultāti ir parādīti 9. tabulā un 11.–12. attēlā.

No 9. tabulas un attēliem 11-12 var redzēt, ka, salīdzinot ar tukšo grupu, bazofīlo šūnu un hipofīzes priekšējās daļas šūnu skaits modeļu grupā bija ievērojami samazināts (P<0.01), indicating that after the perimenopausal model was created in mice, secretion of The cellular source of gonadotropins is reduced. Compared with the model group, each medication group could significantly increase the number of pituitary basophil cells (P<0.01). Except for the low-dose Cistanche deserticola phenylethanol glycoside group, all other medication groups could significantly increase the number of anterior pituitary cells (P<0.01). P<0.01).