Ekstrakta izdalīšana no mīkstā koraļļu simbiotiskā mikroorganisma Salinispora Arenicola, kam piemīt citoaizsargājošs un pretnovecošanās efekts 2. daļa

3.3. Mušu apstrāde ar ekstraktu SA223-S2BM izraisa šūnu proteostatisko moduļu aktivitāti

Ņemot vērā novēroto SA223-S2BM ekstrakta bioaktivitāti šūnu pārbaudēs, mēs centāmies izpētīt tā in vivo ietekmi uz proteostatisko moduļu aktivitāti modelī D. melanogaster un īpaši w1118 Drosophila mušas. w1118 ir transgēns Drosophila celms, kam ir nulles mutācija baltajā gēnā, kas ir būtisks gēns acu pigmentācijas ceļam, un to bieži izmanto kā atbilstošu kontroli, jo tam ir izogēns fons ērtām ģenētiskām transformācijām. Mēs noskaidrojām, ka ekstrakts neietekmēja mušu maksimālo dzīves ilgumu vai veselības ilgumu pie koncentrācijas 1 µg/mL, savukārt tas nedaudz samazināja mušu vidējo mūža ilgumu pie koncentrācijas 10 µg/mL (4A1, A2 attēls).

Cistanche glikozīds var arī palielināt SOD aktivitāti sirds un aknu audos un būtiski samazināt lipofuscīna un MDA saturu katrā audā, efektīvi attīrot dažādus reaktīvos skābekļa radikāļus (OH-, H2O₂ utt.) un aizsargājot no izraisītiem DNS bojājumiem. ar OH-radikāļiem. Cistanche feniletanoīda glikozīdiem ir spēcīga brīvo radikāļu attīrīšanas spēja, augstāka reducējošā spēja nekā C vitamīnam, tie uzlabo SOD aktivitāti spermas suspensijā, samazina MDA saturu un zināmā mērā aizsargā spermas membrānas darbību. Cistanche polisaharīdi var uzlabot SOD un GSH-Px aktivitāti eksperimentāli novecojošu D-galaktozes izraisītu peļu eritrocītos un plaušu audos, kā arī samazināt MDA un kolagēna saturu plaušās un plazmā, kā arī palielināt elastīna saturu. laba attīrošā iedarbība uz DPPH, pagarina hipoksijas laiku novecojošām pelēm, uzlabo SOD aktivitāti serumā un aizkavē plaušu fizioloģisko deģenerāciju eksperimentāli novecojošām pelēm Ar šūnu morfoloģisko deģenerāciju eksperimenti ir parādījuši, ka Cistanche ir labas antioksidanta spējas un tas var būt zāles ādas novecošanās slimību profilaksei un ārstēšanai. Tajā pašā laikā ehinakozīdam Cistančā ir ievērojama spēja attīrīt DPPH brīvos radikāļus un novērst reaktīvās skābekļa sugas un novērst brīvo radikāļu izraisītu kolagēna noārdīšanos, kā arī tam ir laba iedarbība uz timīna brīvo radikāļu anjonu bojājumiem.

Noklikšķiniet uz Vai Cistanche darbojas kā antioksidants

【Lai iegūtu plašāku informāciju:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】

Tomēr un saskaņā ar mūsu atklājumiem cilvēka šūnu līnijās ekstrakta ievadīšana jaunām w1118 Drosophila mušām palielināja proteasomu himotripsīnam līdzīgo (4.B attēls), kā arī lizosomu katepsīnu (4.C attēls) enzīmu aktivitātes. Turklāt, kā parādīts 4.D attēlā, ekstraktam bija tendence samazināt mušu audu ROS līmeni.

3.4. Ekstraktam SA223-S2BM piemīt antimelanogēnas un anti-elastāzes īpašības

Tirozināze un elastāze ir galvenie enzīmi, kas ir saistīti ar ādas novecošanos, un to inhibitoriem ir liela nozīme kosmētikas nozarē. Tādējādi mēs pārbaudījām, vai ekstrakts SA223-S2BM ietekmē šo enzīmu aktivitāti, izmantojot in vitro spektrofotometriskās pārbaudes. Interesanti, ka mēs noskaidrojām, ka ekstraktam bija ievērojamas anti-melanogēnas īpašības, jo tam bija no devas atkarīga tirozināzes inhibīcija, kas ir līdzīga komerciāli pieejamajam tirozināzes inhibitoram Kojic acid (5.A attēls). Mēs arī novērojām, ka ekstraktam bija anti-elastāzes aktivitāte, salīdzinot ar zināmo elastāzes inhibitoru, proti, melastatīnu (ko ražo aktinomicīti) (5.B attēls).

3.5. Cilvēka šūnu inkubācija ar ekstraktu SA223-S2BM aktivizē antioksidantu reakciju un aizsargā šūnas no oksidatīvā un genotoksiskā stresa

Pēc tam mēs pētījām ekstrakta SA223-S2BM ietekmi uz šūnu antioksidantu moduļiem. Mēs novērojām, ka īslaicīga (24 h) BJ un HaCaT šūnu inkubācija ar ekstraktu izraisīja NRF2 transkripcijas mērķu, kas attiecīgi nosaukti par NQO1 un TXNRD1 gēniem, regulēšanu (koncentrācijā 10 µg/mL) (6.A attēls). Turklāt, veicot imunoblotēšanas analīzi, mēs novērojām NQO1 proteīna ekspresijas līmeņa paaugstināšanos BJ šūnās no devas atkarīgā veidā un HaCaT šūnās 10 µg/ml koncentrācijā pēc 24 stundu ilgas ekspozīcijas ar ekstraktu (6.B attēls).

Turklāt mēs centāmies pārbaudīt, vai ekstrakts ietekmē šūnu ROS līmeni. Šūnas tika apstrādātas ar ekstraktu 24 stundas, un intracelulārais ROS līmenis tika novērtēts ar fluorometriju. Kā parādīts 6C1 un C2 attēlā, ekstrakts ievērojami samazināja ROS līmeni gan BJ fibroblastos, gan HaCaT keratinocītos.

Pēc tam mēs izpētījām, vai ekstraktam SA223-S2BM varētu būt citoprotektīva loma pret oksidatīvā stresa izraisītu toksicitāti. Tādējādi BJ fibroblasti un HaCaT keratinocīti tika inkubēti kopā ar dažādām ekstrakta un oksidējošā aģenta H2O2 koncentrācijām, un dzīvotspējas rādītāji tika mērīti pēc 24 vai 48 h inkubācijas. H2O2 ir labi pazīstams ar savu citotoksisko iedarbību [51] un tāpēc tika izmantots kā pozitīva kontrole. Pēc 24 stundu ilgas BJ šūnu inkubācijas mēs novērojām, ka ekstraktam (koncentrācijā 1 µg/mL) bija tendence aizsargāt šūnas no H2O2 (100 µM) izraisītās toksicitātes; līdzīgs konstatējums tika konstatēts pēc šūnu kopapstrādes ar 200 µM H2O2 un ekstraktu (1 un 5 µg/mL) (7.A attēls). Pamatojumam mēs atklājām, ka ekstrakts lielā mērā izglāba HaCaT šūnas no oksidatīvā stresa izraisītās toksicitātes, ko izraisīja abas pētītās H2O2 koncentrācijas (100 un 200 µM), pēc 24 stundām (7B1. attēls) un 48 h inkubācijas (7.B2. attēls). .

Turklāt mēs novērojām, ka HaCaT keratinocītu apstrāde ar ekstraktu 24 stundas 10 µg/mL koncentrācijā izraisīja 53BP1 proteīna ekspresijas līmeņa pazemināšanos, kā arī p53 fosforilācijas līmeni Ser15 atkarībā no devas (attēls 7C1); abas olbaltumvielas ir DNS bojājumu un genotoksiskā stresa marķieri [52,53]. Ekstrakta aizsargājošo iedarbību pret genotoksisko stresu apstiprināja arī imunoblotēšanas analīzes pēc HaCaT šūnu inkubācijas ar ķīmijterapijas līdzekli doksorubicīnu (DXR). Konkrēti, mēs atzīmējām, ka HaCaT šūnu inkubācija ar SA223-S2BM ekstraktu un 2 µM DXR izraisīja DXR izraisītā H2A.X nomākšanu, palielinot fosforilācijas līmeni no devas atkarīgā veidā (7.C2. attēls).

4. Diskusija

Novecošana ir process, kas saistīts ar bojājumu uzkrāšanos un funkcionalitātes zudumu, kas rodas molekulārā, šūnu, audu un organisma līmenī, kas ir saistīts ar paaugstinātu neaizsargātību pret slimībām un nāvi [14]. Šūnu novecošanās ir pastāvīga un neatgriezeniska šūnu cikla apstāšanās stāvoklis, reaģējot uz dažādiem kaitīgiem stimuliem, un, cita starpā, to raksturo unikālas sekrēcijas pazīmes, makromolekulārie bojājumi un izmainīts metabolisms [54,55]. Novecojošās šūnas uzkrājas līdz ar vecumu, veicinot ar vecumu saistītu patoloģiju attīstību [56,57].

Ir labi zināms, ka PN komponentu aktivizēšana var palēnināt novecošanās progresēšanas ātrumu, norādot, ka šie moduļi var būt potenciāli terapeitiski mērķi pret novecošanos un ar vecumu saistītām patoloģijām [58, 59]. Pašreizējā pētījumā mēs pārbaudījām uz šūnām balstītus un in vivo modeļus SA223-S2BM ekstrakta ietekmei uz proteostāzes moduļiem un antioksidantu reakcijām (skatiet grafisko kopsavilkumu). Šis ekstrakts ir izolēts no mīksta koraļļu simbiotiskā mikroorganisma, proti, S. arenicola, kas ir obligāts jūras aktinomicīts, kas pieder Micromonosporaceae ģimenei [60]. Mēs atklājām, ka SA223-S2BM ekstrakts aktivizē proteostatiskos moduļus gan cilvēka šūnās, gan Drosophila mušās.

Turklāt SA223-S2BM ekstrakts izraisīja antioksidantu moduļu ekspresiju, samazināja intracelulāro oksidatīvo slodzi ādas fibroblastos un iemūžinātajos keratinocītos, kā arī nodrošināja aizsardzību pret oksidatīvo un genotoksisko stresu. Šūnu novecošanos un in vivo novecošanos raksturo paaugstināts oksidatīvais stress, palielināta genoma un proteomu nestabilitāte, kā arī samazināta šūnu remonta mehānismu un proteolītisko ceļu aktivitāte [14]. Tāpēc šo ekstraktu varētu izmantot kā avotu tādu molekulu identificēšanai, kurām ir potenciālas citoprotektīvas un/vai pretnovecošanās īpašības.

Vairāki pētījumi ir parādījuši, ka gan veselības ilgumu, gan dzīves ilgumu var attiecīgi uzlabot un pagarināt, izmantojot ģenētiskas, uztura un/vai farmakoloģiskas iejaukšanās [1]. Patiešām, kaloriju ierobežojums paaugstina izturību pret oksidatīvo stresu, samazina makromolekulāros bojājumus un palielina dzīves ilgumu dažādos modeļu organismos [61]. Tomēr, tā kā ģenētisku iejaukšanos vai kaloriju ierobežojumu nevar piemērot cilvēkiem, daudzi pētījumi ir veltīti NP (ekstraktu vai izolētu savienojumu) identificēšanai, kas potenciāli var palielināt veselību un/vai dzīves ilgumu. Ir ziņots, ka dažādiem NP, kas ir izolēti no dažādiem avotiem, piemēram, augiem, jūras organismiem un mikroorganismiem, ir konstatēts, ka tiem ir pretnovecošanās iedarbība gan in vitro, gan in vivo [1,62].

Līdz šim ir pierādīts, ka daudziem jūras NP ir plašs bioaktivitātes klāsts, piemēram, pretaudzēju, antiproliferatīvu, fotoaizsargājošu vai antibiotiku. Tāpēc dažu pēdējo gadu laikā narkotiku atklāšana no jūras NP ir ieguvusi vietu [63]. Patiešām, vairākas jūras izcelsmes zāles jau ir nonākušas tirgū vai atrodas klīniskajos pētījumos [31]. Ir pētīts ļoti maz jūras NP, lai noteiktu to potenciālu modulēt PN tīkla galvenās sastāvdaļas, un tika konstatēts, ka daži tieši aktivizē UPP un iedarbojas pret novecošanos. Piemēram, astaksantīns ir ksantofila karotinoīds, kas atrodas jūras organismos, piemēram, makroaļģēs, mikroaļģēs un vēžveidīgajos, un ir pazīstams ar savu antioksidantu aktivitāti gan in vitro, gan in vivo, bet tika konstatēts, ka tam piemīt pretnovecošanās īpašības, jo tas pagarinās. dzīves ilgums C. elegans un D. melanogaster [64].

Tirozināze un elastāze ir divi galvenie enzīmi, kas iesaistīti ādas pasliktināšanās procesā, un tāpēc to aktivitātes kavēšana ir daudzsološa aizsardzības metode pret ādas novecošanos [65]. Vairāki no augiem iegūti NP, piemēram, kurkumīns, jau ir pētīti un atzīti par efektīviem šo enzīmu aktivitātes inhibitoriem [66]. Šeit mēs atklājām, ka ekstrakts SA223-S2BM efektīvi inhibēja tirozināzes un elastāzes enzīmu aktivitāti. Tāpēc šo ekstraktu var izmantot kosmētikas līdzekļu izolēšanai; atbalstam liels skaits no jūras iegūto molekulu jau tiek izmantotas kosmētikas rūpniecībā, pateicoties to aktivitātei pret tirozināzi un elastāzi [67, 68].

Tā kā pieejamo NP skaits, kas iedarbojas pret novecošanos, ir diezgan mazs [1], ir jāturpina pētīt mazāk izpētītas ekosistēmas, piemēram, jūras ekosistēma. Jūras vide ir unikāls resurss, kas ietver milzīgu bioloģisko daudzveidību [30]. Tās skarbie ķīmiskie un fizikālie apstākļi ir svarīgi virzītājspēki, lai ražotu plašu bioaktīvo NP klāstu ar strukturāli unikālām iezīmēm, kas kalpo kā daudzsološi veidņi, lai iedvesmotu zāļu izstrādi pret dažādām slimībām [31, 32]. Tas ir redzams mūsu nesenajā metagenomiskajā analīzē, kurā tika pētīta jūras sūkļa Scopalina hapalia mikrobu daudzveidība, un rezultāti atklāja šo mikroorganismu potenciālu ražot bioaktīvus savienojumus pret ar vecumu saistītiem molekulāriem mērķiem un tādējādi tiem piemīt pretnovecošanās īpašības. [36]. Tomēr jūras narkotiku atklāšanai ir jārisina dažas lielas problēmas, piemēram, struktūras noteikšana un piegādes problēmas [31].

Jūras ekosistēmu palielināto potenciālu nodrošināt bioaktīvus NP apstiprina arī iepriekš veikta bioaktīvo produktu izolācija no S. arenicola. Visinteresantākais no tiem ir salinosporamīds A (Marizomibs), spēcīgs proteasomu inhibitors, kas iekļuva I fāzes klīniskajos pētījumos multiplās mielomas ārstēšanai tikai trīs gadus pēc tā atklāšanas [31,69,70]. Turklāt no S. arenicola ir izdalīta arī antibiotika Arenimicīns, kas izraisa citotoksicitāti cilvēka adenokarcinomas šūnās [71], kā arī saliketāls A un saliniketāls B, kas inhibē ornitīna dekarboksilāzi, kas ir pretvēža mērķis [72].

5. Secinājumi

Neskatoties uz šiem iepriecinošajiem atklājumiem, SA223-S2BM ekstrakta bioaktīvās molekulas joprojām nav zināmas, un tāpēc ir nepieciešama turpmāka izmeklēšana. Turpmākie pētījumi atklās šī ekstrakta ķīmisko sastāvu un bioaktīvos savienojumus, kas ir atbildīgi par ekstrakta īpašībām, kas parādīti šajā pētījumā. Tāpēc mēs iesakām SA223-S2BM ekstraktu (iegūts no jūras mezofotisko koraļļu ekosistēmas aktinomicīta) kā iespējamu efektīvu citoaizsardzības mehānismu aktivatoru, kas veicina veselīgu novecošanos.

Papildu materiāli: Tīmekļa vietnē var lejupielādēt šādu papildinformāciju, S1 attēls: Tirozināzes un elastāzes inhibīcijas aktivitātes novērtējums in vitro. (A) ( procenti ) Tirozināzes inhibīcijas aktivitāte ar SA223-S2BAE ekstraktu koncentrācijā 150 µg/mL. (B) ( procenti ) SA223-S2LAE ekstrakta elastāzes inhibīcijas aktivitāte koncentrācijā 100 µg/mL. (A) kā pozitīvu kontroli izmantoja kojskābi (2 µg/ml). (B) kā pozitīvu kontroli izmantoja melastatīnu (0,5 µg/ml). Bāri, ± SD (n lielāks vai vienāds ar 2); *, p < 0,05. S2 attēls. Pilni bloti un olbaltumvielu ekspresijas līmeņu kvantitatīvā analīze (imūnbloti parādīti 2. attēlā). S3 attēls. Pilni bloti un olbaltumvielu ekspresijas līmeņu kvantitatīvā analīze (imūnbloti parādīti 3. attēlā). Attēls S4: Pilni bloti un olbaltumvielu ekspresijas līmeņu kvantitatīvā analīze (imūnbloti parādīti 3. attēlā). S5 attēls. Pilna blota analīze un olbaltumvielu ekspresijas līmeņu kvantitatīvā analīze (imūnbloti parādīti 6. attēlā). S6 attēls. Pilni bloti un olbaltumvielu ekspresijas līmeņu kvantitatīvā analīze (7. attēlā parādīti imūnbloti). S1 tabula: mūža ilguma eksperimentu kopsavilkums. S2 tabula: analizēto gēnu pilnie nosaukumi.

Autora ieguldījums:IPT konceptualizācija, plānošana un pētījuma uzraudzība; XPL, ADS, E.-DP un MSM veica šūnu un Drosophila testus un interpretēja datus; GLG, PL, YB un JO veica koraļļu savākšanu, filoģenēzes analīzi, celmu izolāciju/identifikāciju un ekstraktu ražošanu; XPL, ADS, E.-DP, MSM un IPT rakstīja un rediģēja manuskriptu. Visi autori ir izlasījuši un piekrituši publicētajai manuskripta versijai.

Finansējums: Šis darbs ir daļēji atbalstīts no ES dotācijas TASCMAR (EU-H2020/634674).

Institucionālās pārbaudes padomes paziņojums:Nav piemērojams.

Informētas piekrišanas paziņojums:Nav piemērojams.

Paziņojums par datu pieejamību:Dati ir pieejami no Korespondētā autora pēc pamatota pieprasījuma.

Pateicības: Pateicamies visiem TASCMAR dalībniekiem par lielisko sadarbību. Mēs arī pateicamies Eilatas starpuniversitāšu jūras zinātņu institūtam (IUI) par Sam Rothberg R/V izmantošanu un tā apkalpes locekļu profesionālo palīdzību. Mēs esam parādā EcoOcean darbiniekiem par ROV ekspluatāciju. Mēs pateicamies M. Veisam un R. Libermanam par palīdzību lauka darbos.

Interešu konflikti:Autori paziņo, ka nav interešu konflikta.

Atsauces

1. Argiropulu, A.; Aligiannis, N.; Trougakos, IP; Skaltsounis, A.-L. Dabiski savienojumi ar pretnovecošanās aktivitāti. Nat. Prod. Rep. 2013, 30, 1412–1437. [CrossRef]

2. Riera, CE; Merkwirth, C.; De Magalhaes-Filho, CD; Dilins, A. Signalizācijas tīkli, kas nosaka dzīves ilgumu. Annu. Rev. Biochem. 2016, 85, 35–64. [CrossRef] [PubMed]

3. Pāns, H.; Finkel, T. Galvenie proteīni un ceļi, kas regulē dzīves ilgumu. J. Biol. Chem. 2017, 292, 6452–6460. [CrossRef] [PubMed]

4. Trougakos, IP; Sesti, F.; Tsakiri, E.; Gorgoulis, VG Neenzimātiskas pēctranslācijas proteīnu modifikācijas un proteostāzes tīkla atcelšana kanceroģenēzē. J. Proteoms. 2013, 92, 274–298. [CrossRef]

5. Niforu, K.; Cheimonidou, C.; Trougakos, IP Molekulārie šaperoni un proteostāzes regulēšana redoksu nelīdzsvarotības laikā. Redox Biol. 2014, 2, 323.–332. [CrossRef] [PubMed]

6. Tsakiri, EN; Trougakos, IP Apbrīnojamā ubikvitīna-proteasomu sistēma: strukturālie komponenti un ietekme uz novecošanu. Int. Rev. Cell Mol. Biol. 2015, 314., 171.–237. [CrossRef] [PubMed]

7. Sala, AJ; Bots, LC; Morimoto, RI Proteostāzes veidošana šūnu, audu un organisma līmenī. J. Cell Biol. 2017., 216., 1231.–1241. [CrossRef] [PubMed]

8. Kaušiks, S.; Cuervo, AM Proteostāze un novecošana. Nat. Med. 2015, 21, 1406–1415. [CrossRef]

9. Klaips, CL; Jayaraj, GG; Hartl, FU Šūnu proteostāzes ceļi novecošanā un slimībās. J. Cell Biol. 2017, 217, 51–63. [CrossRef]

10. Labbadia, J.; Morimoto, RI Proteostāzes bioloģija novecošanā un slimībās. Annu. Rev. Biochem. 2015, 84, 435–464. [CrossRef]

11. Balčins, D.; Heijers-Hārtls, M.; Hartl, FU Olbaltumvielu locīšanas un kvalitātes kontroles in vivo aspekti. Zinātne 2016, 353, aac4354. [CrossRef] [PubMed]

12. Hips, MS; Kasturi, P.; Hartl, FU Proteostāzes tīkls un tā novecošanas samazināšanās. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2019, 20, 421–435. [CrossRef] [PubMed]

13. Sridhar, S.; Botbols, Y.; Macian, F.; Cuervo, AM Autofagija un slimības: vienmēr ir divas problēmas puses. J. Pathols. 2011, 226, 255–273. [CrossRef] [PubMed]

14. Lopess-Otins, C.; Blasko, MA; Irbe, L.; Serrano, M.; Kroemers, G. Novecošanās pazīmes. Šūna 2013, 153, 1194–1217. [CrossRef] [PubMed]

15. Balčs, MĒS; Morimoto, RI; Dilins, A.; Kellija, JW. Proteostāzes pielāgošana slimību intervencei. Zinātne 2008, 319, 916–919. [CrossRef]

16. Powers, ET; Morimoto, RI; Dilins, A.; Kellija, Dž. Balch, WE Proteostāzes deficīta slimību bioloģiskās un ķīmiskās pieejas. Annu. Rev. Biochem. 2009, 78, 959–991. [CrossRef]

17. Kalamini, B.; Morimoto, RI Olbaltumvielu homeostāze kā terapeitiskais mērķis proteīna konformācijas slimībām. Curr. Tops. Med. Chem. 2013, 12, 2623–2640. [CrossRef] [PubMed]

18. Sklirou, AD; Papananju, E.‑D.; Fokialakis, N.; Trougakos, IP Vēža ķīmijas profilakse, aktivizējot proteostatiskos moduļus. Cancer Lett. 2018, 413., 110.–121. [CrossRef]

19. Džans, S.; Duan, E. Cīņa pret ādas novecošanos: ceļš no sola līdz gultai. Šūnu transplantācija. 2018, 27, 729–738. [CrossRef]

20. Jasins, ZAM; Ibrahims, F.; Rašids, NN; Razifs, MFM; Jusofs, R.; Yasin, FIZAM Dažu augu ekstraktu kā ādas pretnovecošanās resursa nozīme: pārskats. Curr. Pharm. Biotehnoloģija. 2018, 18, 864–876. [CrossRef]

21. Bae-Harboe, YSC; Park, HY Tyrosinase: centrālais regulējošais proteīns ādas pigmentācijai. J. Izmeklēt. Dermatol. 2012, 132, 2678–2680. [CrossRef]

22. Pillajārs, T.; Manikams, M.; Namasivayam, V. Ādas balināšanas līdzekļi: tirozināzes inhibitoru zāļu ķīmijas perspektīva. J. Enzym. Inhib. Med. Chem. 2017, 32, 403–425. [CrossRef] [PubMed]

23. Qu, Y.; Žans, Q.; Du, S.; Dings, Y.; Fangs, B.; Du, V.; Vu, Q.; Jū, H.; Li, L.; Huang, W. Uz katalīzi balstīta specifiska tirozināzes noteikšana un inhibīcija un to pielietošana. J. Pharm. Anal. 2020, 10, 414–425. [CrossRef]

24. Decorte, BL Nepietiekami izpētītas dabisko produktu iespējas narkotiku atklāšanā. J. Med. Chem. 2016, 59, 9295–9304. [CrossRef] [PubMed]

25. Beutler, JA Natural Products as a Foundation for Drug Discovery. Curr. Protok. Pharmacol. 2019, 86, 1.11.9.–21.11.9. [CrossRef]

26. Yang, C.; Džans, V.; Dongs, X.; Fu, C.; Juaņs, Dž.; Sju, M.; Liangs, Z.; Qiu, C.; Xu, C. Dabisks produkta risinājums novecošanai un ar novecošanu saistītām slimībām. Pharmacol. Tur. 2020, 216, 107673. [CrossRef] [PubMed]

27. Rodrigess, T.; Rēkers, D.; Šneiders, P.; Šneiders, G. Paļaujoties uz dabīgiem produktiem zāļu dizainā. Nat. Chem. 2016, 8, 531–541. [CrossRef] [PubMed]

28. Blunts, Dž. Kerola, AR; Copp, BR; Deiviss, RA; Keyzers, RA; Prinsep, MR Marine dabīgie produkti. Nat. Prod. Rep. 2018, 35, 8–53. [CrossRef]

29. Christensen, S. Dabīgie produkti, kas mainīja sabiedrību. Biomedicines 2021, 9, 472. [CrossRef]

30. Montasers, R.; Luesch, H. Jūras dabiskie produkti: jauns narkotiku vilnis? Future Med. Chem. 2011, 3, 1475–1489. [CrossRef]

31. Liang, X.; Luo, D.; Luesch, H. Jūras dabisko produktu terapeitiskā potenciāla izpēte. Pharmacol. Res. 2019, 147, 104373. [CrossRef]

32. Dziedāja, VT; Dat, TTH; Vinh, LB; Cuong, LCV; Oanh, PTT; Ha, H.; Kims, YH; Ā, HLT; Yang, SY Coral un ar koraļļiem saistīti mikroorganismi: produktīvs potenciāli bioaktīvu dabisko produktu avots. Mar. Drugs 2019, 17, 468. [CrossRef] [PubMed]

34. Tamura, K.; Nei, M. Nukleotīdu aizvietojumu skaita novērtējums mitohondriju DNS kontroles reģionā cilvēkiem un šimpanzēm. Mol. Biol. Evol. 1993, 10, 512–526. [CrossRef]

34. Kumar, S.; Štečers, G.; Li, M.; Knjazs, C.; Tamura, K. MEGA X: Molekulārās evolūcijas ģenētikas analīze dažādās skaitļošanas platformās. Mol. Biol. Evol. 2018, 35, 1547–1549. [CrossRef]

35. Le Gofs, G.; Adelīns, E.; Kortiāls, S.; Servijs, C.; Ouazzani, J. Cietās fāzes ekstrakcijas pielietojums ar agaru balstītai fermentācijai. Bioprocess Biosyst. Inž. 2012, 36, 1285–1290. [CrossRef]

36. Hasans, CS; Fouillaud, M.; Le Gofs, G.; Sklirū, AD; Bojers, JB; Trougakos, IP; Džerabeks, M.; Bignon, J.; De Voogd, NJ; Ouazzani, J.; un citi. Mikroorganismi, kas saistīti ar jūras sūkli Scopalina Chapala: Bioaktīvu molekulu rezervuārs, lai palēninātu novecošanās procesu. Mikroorganismi 2020, 8, 1262. [CrossRef] [PubMed]

37. Kamposa, PE; Herbete, G.; Čendo, C.; Klerks, P.; Tintiljē, F.; de Voogd, NJ; Papananju, E.‑D.; Trougakos, IP; Džerabeks, M.; Bignon, J.; un citi. Jauni garās ķēdes ļoti skābekli saturoši poliacetilēni no Majotas jūras sūkļa Haliclona sp. Mar. Drugs 2020, 18, 350. [CrossRef] [PubMed]

38. Nikou, T.; Liaki, V.; Statopuls, P.; Sklirū, AD; Tsakiri, EN; Jakšics, T.; Bonna, G.; Trougakos, IP; Halabalaki, M.; Skaltsounis, LA EVOO polifenolu salīdzinājums un oleokantāla un oleosveķu veselīgu novecošanos veicinošo īpašību izpēte. Food Chem. Toksikols. 2019, 125., 403.–412. [CrossRef]

39. Tsakiri, EN; Sikiotis, ģimenes ārsts; Papassideri, IS; Gorgoulis, VG; Bohmans, D.; Trougakos, IP Proteasomu funkcionalitātes diferenciālā regulēšana Drosophila reproduktīvajos un somatiskajos audos novecošanās vai oksidatīvā stresa laikā. FASEB J. 2013, 27, 2407–2420. [CrossRef] [PubMed]

40. Gūmeni, S.; Evangelakou, Z.; Tsakiri, E.; Skorāno, L.; Trougakos, IP Proteostatisko un metastātisko moduļu funkcionālā elektroinstalācija nodrošina pārejošu organisma izdzīvošanu nelīdzsvarotas mitohondriju dinamikas laikā. Redox Biol. 2019, 24, 101219. [CrossRef] [PubMed]

41. Ransijs, C.; Vaza, C.; Lombès, A.; Bouillaud, F. H2O2 izmantošana oksidatīvā stresa izraisīšanai, katalāzes problēma. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 9149. [CrossRef]

42. Sklirū, AD; Gaboriaud-Kolar, N.; Papassideri, I.; Skaltsounis, AL; Trougakos, IP 6-bromo-indirubīna-30 -oksīms (6BIO), glikogēna sintāzes kināzes-3 inhibitors, aktivizē citoprotektīvos šūnu moduļus un nomāc šūnu novecošanās izraisītos biomolekulāros bojājumus cilvēka fibroblastos. Sci. Rep. 2017, 7, 11713. [CrossRef]

43. Sklirou, AD; Ralli, M.; Domingess, M.; Papassideri, I.; Skaltsounis, A.-L.; Trougakos, IP heksapeptīds-11 ir jauns proteostāzes tīkla modulators cilvēka diploīdos fibroblastos. Redox Biol. 2015, 5, 205–215. [CrossRef]

44. Rasbends, WS ImageJ US; 1,48 v/Java 1.6.0-20 (32-bits); Nacionālie veselības institūti: Bethesda, MD, ASV, 2014. gads.

45. Papananju, E.‑D.; Terposs, E.; Kastrītis, E.; Papassideri, IS; Tsitsilonis, OE; Dimopuls, MA; Trougakos, IP Molekulārā reakcija uz terapeitiskiem proteasomu inhibitoriem multiplās mielomas pacientiem ir atkarīga no donora, šūnu tipa un zālēm. Oncotarget 2018, 9, 17797–17809. [CrossRef]

46. ​​Tsakiri, EN; Gumeni, S.; Vougas, K.; Pendins, D.; Papassideri, I.; Daga, A.; Gorgulis, V.; Juhászs, G.; Skorāno, L.; Trougakos, IP Proteasomu disfunkcija izraisa pārmērīgu proteomu nestabilitāti un metastāžu zudumu, ko var mazināt, uzlabojot mitohondriju saplūšanu vai autofagiju. Autofagija 2019, 15, 1757–1773. [CrossRef] [PubMed]

47. Tsakiri, EN; Gaboriaud-Kolar, N.; Iliaki, KK; Tchoumtchoua, J.; Papananju, E.‑D.; Chatzigeorgiou, S.; Talasa, KD; Mikros, E.; Halabalaki, M.; Skaltsounis, AL; un citi. Indirubīna atvasinājums 6-bromoindirubīns-30 -oksīms aktivizē proteostatiskos moduļus, pārprogrammē šūnu bioenerģētiskos ceļus un iedarbojas pret novecošanos. Antioksīds. Redoksa signāls. 2017, 27, 1027–1047. [CrossRef]

48. Sarkars, S.; Ravikumars, B.; Floto, RA; Rubinšteins, DC Rapamicīns un no mTOR neatkarīgi autofagijas induktori uzlabo poliglutamīna paplašinātā huntingtīna un ar to saistīto proteīnopātijas toksicitāti. Šūnu nāves atšķirība. 2009, 16, 46–56. [CrossRef] [PubMed]

49. Benajahu, Y. Indo-Klusā okeāna oktokorāļi. Mezofotisko koraļļu ekosistēmās; Loya, Y., Puglise, K., Bridge, T., Eds.; Pasaules koraļļu rifi; Springer: Cham, Šveice, 2019; 12.sējums, 709.–728.lpp.

50. Millán-Aguiñaga, N.; Čavarrija, KL; Ugalde, JA; Letzel, A.-C.; Rouzs, G.; Jensens, PR filogenomiskais ieskats salinisporas (baktērijas, aktinobaktērijas) sugu apzīmējumos. Sci. Rep. 2017, 7, 3564. [CrossRef]

51. Kruševskis, M.; Szumiel, I. Ūdeņraža peroksīda citotoksiskā un mutagēnā iedarbība peles L5178Y apakšlīnijās. Acta Biochim. Pol. 1993, 40, 42–45. [CrossRef]

53. Campisi, J.; d'Adda di Fagagna, F. Šūnu novecošanās: Kad sliktas lietas notiek ar labām šūnām. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2007, 8, 729–740. [CrossRef] [PubMed]

53. Ašrafs, R.; Hamidullah, HM; Pandijs, P.; Mahešvari, M.; Singh, LR; Siddiki, MQ; Konvars, R.; Sašidhara, KV; Sarkar, J. Kumarīna-halkona hibrīds izraisa DNS bojājumus ar nelielu rievu saistīšanu un stabilizē p53, izmantojot pēctranslācijas modifikācijas. Sci. Rep. 2017, 7, 45287. [CrossRef]

54. Ernandess-Segura, A.; Nehme, J.; Demaria, M. Šūnu novecošanās pazīmes. Trends Cell Biol. 2018, 28, 436–453. [CrossRef]

56. Gorguls, V.; Adams, PD; Alimonti, A.; Benets, DC; Bišofs, O.; Bīskaps, C.; Campisi, J.; Kolado, M.; Evangelou, K.; Ferbeirs, G.; un citi. Šūnu novecošanās: ceļa noteikšana uz priekšu. Šūna 2019, 179, 813–827. [CrossRef]

57. Bielak-Zmijevska, A.; Mosieniak, G. Šūnu novecošanās novecošanā, ar vecumu saistītās slimības un ilgmūžība. Curr. Vasc. Pharmacol. 2013, 12, 698–706. [CrossRef]

57. Di Miko, R.; Križanovskis, V.; Beikers, D.; D'Adda Di Fagagna, F. Šūnu novecošanās novecošanā: no mehānismiem līdz terapeitiskām iespējām. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2021, 22, 75–95. [CrossRef]

58. Teilors, R.; Dilins, A. Novecošana kā proteostāzes sabrukuma notikums. Cold Spring Harb. Perspektīva. Biol. 2011, 3, a004440. [CrossRef]

59. Morimoto, RI; Cuervo, AM proteostāze un novecošanās proteoms veselībā un slimībās. J. Gerontols. Ser. A Vāra. Sci. Med. Sci. 2014, 69, S33–S38. [CrossRef]

60. Maldonado, LA; Fenical, W.; Jensens, PR; Kaufmana, Kalifornija; Mincer, TJ; Ward, AC; Bull, AT; Goodfellow, M. Salinispora arenicola gen. nov., sp. nov. un Salinispora tropica sp. nov., obligātie jūras aktinomicīti, kas pieder Micromono-Cyperaceae ģimenei. Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2005, 55, 1759–1766. [CrossRef]

61. Fontana, L.; Irbe, L.; Longo, VD Uztura ierobežojumi, augšanas faktori un novecošana: no rauga līdz cilvēkiem. Zinātne 2010, 328, 321–326. [CrossRef]

63. Vedels, S.; Manola, M.; Kavinato, M.; Trougakos, IP; Jansen-Dürr, P. Proteīna kvalitātes kontroles mehānismu noteikšana ar dabīgiem produktiem, lai veicinātu veselīgu novecošanos. Molecules 2018, 23, 1219. [CrossRef]

63. Molinskis, TF; Dalisajs, DS; Līvens, SL; Saludes, JP Zāļu izstrāde no jūras dabas produktiem. Nat. Drug Discov. 2008, 8, 69–85. [CrossRef]

64. Vasilopulu, M.; Joanū, E.; Russis, V.; Chondrogianni, N. Ubikvitīna-proteasomu sistēmas modulācija ar jūras dabīgiem produktiem. Redox Biol. 2021, 41, 101897. [CrossRef] [PubMed]

65. Rojers, M.; Prado, M.; Garsija-Peress, ME; Diufs, PN; Stevanovic, T. Kanādas meža sugu polifenola mizas ekstraktu uztura, nutrikosmētikas un kosmētiskā potenciāla izpēte. PharmaNutrition 2013, 1, 158–167. [CrossRef]

67. Tundis, R.; Loico, MR; Bonesi, M.; Menichini, F. Dabisko savienojumu iespējamā loma pret ādas novecošanos. Curr. Med. Chem. 2015, 22, 1515–1538. [CrossRef] [PubMed]

67. Mārtiņš, A.; Vieira, H.; Gaspars, H.; Santos, S. Jūras dabīgie produkti farmācijas un kosmētikas nozarē: Padomi panākumiem. Mar. Drugs 2014, 12, 1066–1101. [CrossRef]

68. Corinaldesi, C.; Barons, G.; Marselīni, F.; Dell'Anno, A.; Danovaro, R. Jūras mikrobu izcelsmes molekulas un to iespējamā izmantošana kosmētiskajos un kosmētikas produktos. Mar. Drugs 2017, 15, 118. [CrossRef]

69. Felings, RH; Bjūkenana, GO; Mincer, TJ; Kaufmana, Kalifornija; Jensens, PR; Fenical, W. Salinosporamide A: ļoti citotoksisks proteasomu inhibitors no jauna mikrobu avota, jaunās Salinospora ģints jūras baktērijas. Angew. Chem. Int. Ed. 2003, 42, 355–357. [CrossRef]

70. Niewerth, D.; Jansens, G.; Rītofs, LFV; van Mērlū, Dž.; Kale, AJ; Mūrs, BS; Asarafs, YG; Anderls, JL; Cvēgmans, S.; Kaspers, GJL; un citi. Antileikēmiskā aktivitāte un zāļu rezistences mehānisms pret jūras Salinispora tropica proteasomu inhibitoru salinosporamīdu A (marizomibs). Mol. Pharmacol. 2014, 86, 12.–19. [CrossRef] [PubMed]

71. Asolkar, RN; Kērklenda, TN; Jensens, PR; Fenical, W. Arenimycin, antibiotika, kas ir efektīva pret rifampīnu un meticilīnu rezistentu Staphylococcus aureus no jūras aktinomicīta Salinispora arenicola. J. Antibiots. 2010, 63, 37–39. [CrossRef]

72. Viljamsa, PG; Asolkar, RN; Kondratjuks, T.; Pecuto, JM; Jensens, PR; Fenical, W. Saliniketals A un B, Bicyclic Polyketides no Marine Actinomycete Salinispora arenicola. J. Nat. Prod. 2006, 70, 83–88. [CrossRef]

【Lai iegūtu plašāku informāciju:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:8613632399501】