Loka MRNS ekspresijas modeļi žurku smadzenēs pēc divkāršas uz bailēm un atlīdzību balstītas sociāli iegūtas informācijas atsaukšanas (2)

Loka tiešo un sociāli iegūto baiļu asociāciju atsaukšanā.

Mūsu spēju interpretēt mūsu atklājumus par mūsu žurkām, kuras piedzīvoja tiešās mācīšanās rezultātā iegūto baiļu atsaukšanu, ievērojami veicina tas, cik labi ir raksturota sistēma, kas ir baiļu mācīšanās un atcerēšanās pamatā. Vairākas mūsu pārbaudītās jomas ir saistītas ar baiļu vai izzušanas mācīšanos (no kurām mēs uzskatām, ka tās ir uzsāktas demonstrācijās, jo FCbP laikā tām tika veikta nepastiprināta CS prezentācija), īpaši ACC, PLC un ILC30–32. ,37. Lai gan ir pieejams nedaudz mazāks pētījumu kopums par sociālo baiļu neironu mehānismiem, piedāvātie sociālo baiļu mācīšanās modeļi liecina, ka līdzīgas sistēmas ir sociālo un tiešo baiļu mācīšanās pamatā28. Mūsu atklājumi neliecina par vispārēju ACC, PLC vai ILC lomu nedz sociāli iegūtas baiļu asociācijas, nedz tieši iegūtas baiļu asociācijas atsaukšanā (lai gan skatīt arī "Diskusija" par dzimumu atšķirībām PLC darbībā). Tomēr, kā aprakstīts iepriekšējā sadaļā, tas, iespējams, tikai norāda, ka Arc šajā gadījumā nav uzticams aktivitātes rādītājs. Šo apgabalu pārbaude pēc baiļu iegūšanas, iespējams, pastāstītu citu stāstu. Stingri, skaidri pētījumi par loka darbību pēc baiļu atsaukšanas ir ierobežoti, ir daži pagātnes pētījumi, no kuriem var balstīties. Chia un Otto35 atklāja, ka žurkām, kas izraisīja bailes, bija ievērojami augstāka loka proteīna ekspresija gan muguras, gan vēdera hipokampā, salīdzinot ar beznosacījuma kontroli. Jo īpaši šajā eksperimentā loka kvantitatīvi tika noteikts ar Western Blot analīzi homogenizētajam vēdera un muguras hipokampam, tāpēc precīza hipokampu aktivitātes lokalizācija nebija pieejama. Šie atklājumi, iespējams, norāda, ka, tāpat kā STFP, loka transkripcija var tikt inducēta noteiktos hipokampa apgabalos 48-h atgādinājuma laika punktā, lai radītu baiļu atmiņu. Mūsu nulles rezultāti, iespējams, ir saistīti ar novērotāju neveiksmīgu atsaukšanu, jo atšķirībā no iepriekšējiem pētījumiem mūsu laboratorijā12–14,26 mēs neredzējām lielāku CS sasalšanu novērotājiem, salīdzinot ar kontrolēm. Nav skaidrs, vai tas ir saistīts ar novērotāju neveiksmīgu atsaukšanu vai mūsu vienotās CS atsaukšanas procedūru un vadības ierīču iepriekšēju pakļaušanu CS.

Ko dara cistanche - atmiņas uzlabošana

Ventrālās orbitofrontālās garozas iespējamā loma sociāli iegūtās informācijas atsaukšanā.

Ievērojamā pētījumā Lesburguères et al.24. spēja pierādīt, ka, lai gan muguras hipokampu (dHPC) aktivitāte bija nepieciešama iegūtā STFP iegūšanai un īslaicīgai atsaukšanai, STFP atmiņa galu galā tika izlādēta uz OFC ilgstošai uzglabāšanai. Turklāt Lesburguères et al. spēja pierādīt, ka neironu marķēšana orbitofrontālajā garozā STFP iegūšanas laikā ir nepieciešama, lai ilgstoši uzglabātu sociāli transmisīvās pārtikas preferences, un ka iejaukšanās OFC aktivitātē pēc iegūšanas pasliktina atmiņas atsaukšanu 30 dienas pēc iegūšanas (lai gan skatiet arī 38). Šie atklājumi liecina par saziņu starp dHPC un OFC pirmajās dienās vai nedēļās pēc STFP iegādes un notiekošās OFC reorganizācijas šajā laika posmā, lai nodrošinātu STFP atmiņas ilgtermiņa glabāšanu. Lai gan vispārēju atšķirību trūkums ventrālajā vai sānu OFC loka izteiksmē starp demonstratoriem, kontrolēm un novērotājiem šajā pētījumā varētu apstrīdēt šo interpretāciju, mēs atklājām būtisku negatīvu korelāciju starp mūsu apvienoto vispārējās sociālās mācīšanās veiktspējas rādītāju un divloku ekspresējošām šūnām. GOS sastāvā. Turklāt šī korelācija netika novērota starp līdzīgu metriku, kas izveidota demonstrantiem, pamatojoties uz izvēles testa veiktspēju, un iesaldēšanu CS. Tā kā paļaušanos uz sociāli iegūto informāciju var uzskatīt par izvēli starp potenciāli neuzticamu sociālo informāciju un briesmām, ko rada mācīšanās tiešā pieredzē, šī acīmredzamā balss kavējošā loma sociāli iegūtās informācijas izpausmē var būt saistīta ar OFC plašāko lomu vērtībā. - balstīta lēmumu pieņemšana39–42.

Cistanche deserticola eksperiments

Dzimuma atšķirības loka transkripcijā.

vairāki statistiski un metodoloģiski iemesli. Pirmkārt, mūsu dažkārt zemais izlases lielums mātītēm ar grupas lielumu dzimuma/stāvokļa kombinācijām diapazonā no n=2 līdz n=9 pēc žurku noņemšanas bez pietiekami daudz dzīvotspējīgām sekcijām (lai gan īpaši, n<5 was only present for female Controls in the vOFC and lOFC and female Demonstrators and Observers in the lOFC, see Table S5 for specific group sizes). Additionally, our lack of entirely undisturbed controls means that we have no way to determine whether these sex differences are the result of baseline or task-specific differences in Arc mRNA production. Finally, because the pre-in situ PFA wash was not introduced until all female sections had been processed, this difference in tissue processing might have affected the overall stain. That said, if this were the case, we might expect to see a broader and more consistent effect of sex across regions and types of Arc expression (nuclear, cytoplasmic, and dual). As it is, 18 regions/cellular areas of Arc expression combinations are examined, and only 10 display a significant overall effect of sex. Furthermore, this effect is not uniform in its direction, with males displaying greater overall Arc expression in 5 cases and females displaying greater expression in the other 5. Regardless, we feel that our findings here should serve only to inform possible future research into sex differences in Arc expression. As it is, the limitation of the current study would make drawing definitive conclusions regarding sex effects on Arc expression inappropriate. This should be kept in mind in reading the following discussion.

Lai gan ir maz pētīta dzimumu atšķirības loka izteiksmē, ir daži atklājumi, kas liecina, ka žurku mātītes atsevišķos muguras hipokampa reģionos izsaka lielāku loku pēc atkārtotas iedarbības salīdzinoši bagātinātā vidē43, lai gan ir novērota arī tendence pretējā virzienā. novērots žurkām, kas pārbaudītas bez iepriekšējas uzvedības iejaukšanās43. Mūsu atklājumi var norādīt, ka loka transkripcijas dzimuma atšķirības pastāv pēc noteiktiem vispārīgiem uzvedības uzdevumiem vai pieredzes. ACC CG1 reģionā mēs atklājām, ka vīriešiem kopumā bija vairāk šūnu abos laika punktos, iespējams, tāpēc, ka vīriešu ACC ir augstāka sākotnējā Arctranscription vai palielināta transkripcija pēc konteksta izmaiņām/atkārtotas iedarbības (mājas būris → STFP testēšanas telpa → kondicionēšanas kamera), jo ir daži pierādījumi, kaut arī ierobežoti, par ACC lomu kontekstuālo atmiņu ilgtermiņa atsaukšanā44. Žurku tēviņiem ILC bija arī lielāks kodolu un dubultloku skaits. To var izskaidrot ar ILC lomu izzušanā un baiļu kavēšanā 31, 45, 46 un novērotajiem traucējumiem iemācīto baiļu kavēšanā un izzušanā sievietēm 47–49. Ja tas tā ir, rodas jautājums, kāpēc netika novērotas vispārējas atšķirības starp mūsu kontroles, novērotāja un demonstrācijas žurkām, ja loka ekspresiju izraisīja CS izraisīta infralimbiskā aktivitāte.

Sievietēm bija augstāks loka izteiksmes līmenis visos skaitļos vCA3. Kodolu skaita atšķirības, iespējams, varētu būt lielākas aktivācijas rezultāts pēc CS iedarbības vai atkārtotas pakļaušanas kondicionēšanas kamerai mātītēm, savukārt augstāks citoplazmas loka ekspresijas līmenis vCA3 pēc ēšanas uzdevuma var norādīt uz dzimuma atšķirībām Arc loma vCA3 vai nu "pazīstama" ēdiena atpazīšanā (pat novērotājiem smarža būtu pazīstama viņu iepriekšējas mijiedarbības ar Demonstratoru dēļ) vai atalgojuma/vispārīgi pilnveidojoši procesi. Šī sieviete arī uzrādīja ievērojami augstāku dubulto marķējumu vCA3, lai gan šī ietekme bija neliela, varētu arī norādīt uz vispārēju vCA3 loka transkripcijas pieaugumu sievietēm. Žurku mātītēm bija arī augstāka kodolloka transkripcija vOFC un augstāki divējādi loka mRNS līmeņi lOFC, lai gan šos rezultātus ir grūtāk interpretēt, jo bija mazs kontroles žurku mātīšu skaits, kuru smadzeņu audi bija pietiekami neskarti, lai noteiktu OFC skaitu. (n=2 un 3 attiecīgi sānu un ventrālai OFC). Dati no pieejamajām kontroles žurkām norāda uz iespējamu dzimuma izraisītu OFC loka mRNS ražošanas pieaugumu, taču ir tikpat iespējams, ka šis efekts nepastāvētu ar lielāku n. Jo īpaši daži iepriekšējie pētījumi ir norādījuši uz OFC strukturālām atšķirībām un funkcionālām atšķirībām OFC izraisītā uzvedībā starp grauzēju mātītēm un tēviņiem50–52.

Cistanche ekstrakta pulveris

Iespējams, mūsu interesantākās dzimuma atšķirības loka mRNS tika atklātas PLC. Sveiki, tēviņiem kopumā bija lielāks šūnu skaits, kas ekspresē Arc citoplazmā un gan citoplazmā, gan kodolā (divējāda ekspresija), nekā mātītēm. Mēs arī noskaidrojām, ka, lai gan vīrieši demonstrantiem un novērotājiem neuzrādīja loka transkripcijas palielināšanos salīdzinājumā ar kontrolelementiem baiļu atgādināšanas laika punktā, demonstrantēm bija ievērojami augstāka kodolloka transkripcija nekā kontroles grupām, savukārt novērotājas sievietes bija pa vidu starp abiem. Šo dzimuma efektu var izraisīt iepriekš minētie trūkumi, kas novēroti iemācīto baiļu kavēšanā un izzušanā, kas novēroti sievietēm vecumā no 47 līdz 49 gadiem, jo ​​iepriekšējie pētījumi liecina, ka PLC ir kritiski iesaistīts baiļu uzvedības stimulēšanā45, 53, 54. Turklāt vairāki pētījumi ir saistīti ar atšķirībām PLC signalizācijā un struktūrā kā potenciālos virzītājspēkus šiem dzimumam raksturīgiem traucējumiem baiļu kavēšanā un izzušanā55–58. Lai gan mēs nekonstatējām būtiskas atšķirības sieviešu un vīriešu sasalšanas uzvedībā attiecībā pret signālu, loka mRNS regulēšana, reaģējot uz nepastiprinātām bailēm saistītu CS īpaši sieviešu demonstrantēm, var liecināt par atšķirīgu neironu pārstrukturēšanu PLC, kas galu galā varētu izraisīt dzimumu atšķirības baiļu izpausmēs.

Secinājumi

Lai gan šī pētījuma atklājumi nepaplašina mūsu izpratni par smadzeņu mehānismiem, kas saistīti ar sociāli iegūto atmiņu atgūšanu tik daudz, kā mēs cerējām, mūsu rezultāti sniedz zināmu potenciālu ieskatu par dzimuma atšķirībām loka izteiksmē, kā arī lomu (vai tā trūkums) ar Arc ilgtermiņa atmiņas atsaukšanā. Mūsu atklājumi liecina, ka vismaz prefrontālajā garozā un vCA3 smadzeņu darbības ierosināšana, atsaucot atmiņā sociāli iegūto informāciju, šķiet, nav pietiekama, lai palielinātu loka izteiksmi salīdzinājumā ar tām, ko izraisa tikai testēšanas procedūra. Tomēr šīs atziņas derīgumu noteikti apšauba mūsu uzvedības testu nepārliecinošie rezultāti, jo šī efekta trūkums var būt vainojams sociāli iegūtās informācijas slikta saglabāšanā. Mēs domājam, ka tas varētu būt tāpēc, ka, pirms sistēmas konsolidācijas notiek atsaukšana, tiek aktivizēta minimāla neironu pārstrukturēšana. Joprojām ir nepieciešami turpmāki pētījumi par Arc proteīna lomu sociālās mācīšanās atsaukšanas procesos, ņemot vērā, ka mūsu uzvedības rezultāti neliecina par sociālo mācīšanos Observer žurkām. Turpmākie pētījumi, kas pēta pārklāšanos neironu mehānismos, kas regulē dažādas sociālās mācīšanās formas, varētu gūt labumu arī no dzīvnieku iekļaušanas iegūšanas procedūrās un dzīvnieku, kam tiek veiktas attālinātas atsaukšanas procedūras, jo šie laika punkti, visticamāk, izraisīs plastiskuma izmaiņas un tādējādi izmaiņas loka izteiksmē. .

Cistanche papildinājums netālu no manis — Atmiņas uzlabošana

Noklikšķiniet šeit, lai skatītu Cistanche Improve Memory produktus

【Jautājiet vairāk】 E-pasts:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Metodes

Priekšmeti. Subjekti bija Sprague-Dawley žurku tēviņi un mātītes, kas audzētas Teksasas Universitātes Dzīvnieku resursu centrā Ostinā. Septiņi vaislas pāri radīja 1. kohortas subjektus (n=27 mātītes, n=36 tēviņi), un astoņi vaislas pāri radīja 2. kohortas subjektus (n=27 tēviņu, nav mātīšu). Sieviešu audzētājas bija Sprague-Dawley žurkas (no 215 līdz 260 g ierašanās brīdī), kas iegūtas no Charles-Rivers (Vilmingtona, MA, ASV), savukārt tēviņi bija Sprague-Dawley žurkas (no 230 līdz 300 g ierašanās brīdī), kas iegūtas no Harlan (tagad). Envigo) (Hjūstona, Teksasa, ASV). Visas žurkas tika izmitinātas kopā ar pretējā dzimuma būra palīgu, līdz mātītei bija skaidras grūtniecības pazīmes, un tad mātītes tika izmitinātas atsevišķi. Kucēni tika atšķirti no viena dzimuma brāļu un māsu triādēm 21. pēcdzemdību dienā (P21), lai palīdzētu nodrošināt sociālo baiļu mācīšanos26. Rezerves mazuļus atradināja triādēs vai diādēs ar nesaistītām žurkām un izmantoja citos eksperimentos Teksasas Universitātē Ostinā. Citos eksperimentos tika izmantoti mātīšu mazuļi no mūsu otrā kohortas metiena. Kucēniem tika ļauts nobriest ar minimāliem traucējumiem, izņemot parastās lopkopības procedūras (piemēram, būru maiņa), līdz sākās pieradināšanas procedūras (mātīšu triādes) vai dominējošā stāvokļa novērtēšanas procedūras (vīriņu triādes) (dominances procedūras un rezultāti, kas sīkāk aprakstīti papildu materiālos). 1. kohortas žurkas sāka procedūras no P106 līdz P112 dienu vecumam, bet 2. grupas žurkām - no P99 līdz P118 dienu vecumam. Visi subjekti tika turēti 12-h apgrieztā tumšā un gaišā ciklā ar izslēgtu gaismu pulksten 15.00. Visas eksperimentālās procedūras tika pabeigtas subjektu tumšā cikla laikā sarkanā gaismā. Visas šī eksperimenta daļas tika veiktas saskaņā ar Nacionālo veselības institūtu rokasgrāmatu par eksperimentālo dzīvnieku kopšanu un izmantošanu, un tās apstiprināja Teksasas Universitātes Ostinas Dzīvnieku kopšanas un lietošanas komiteja.

Aparāti un stimuli. Bailes kondicionēšana. Visas baiļu kondicionēšanas un baiļu kondicionēšanas starpniekservera procedūras tika veiktas standarta kondicionēšanas kamerās (30,48 cm × 25,4 cm × 30,48 cm), kas bija izgatavotas no caurspīdīgām organiskā stikla sienām priekšā un aizmugurē, divām tērauda sienām sānos un organiskā stikla griestiem ar caurums centrā. Kameras grīdas segums bija nerūsējošā tērauda stieņu rinda, kas savienota ar trieciena ģeneratoru (Coulbourn Instruments, Allentown, PA). Visas kameras tika ievietotas akustiskās izolācijas kastēs (Coulbourn Instruments) un apgaismotas ar iekšējo sarkano gaismu. Uzvedību reģistrēja ar slēgtas ķēdes kamerām (Panasonic™ WV-BP334), kas uzstādītas virs kondicionēšanas kamerām, un objektīvs tika ievietots caur caurumu organiskā stikla griestos. Kameras tika pilnībā noslaucītas ar 70% spirta šķīdumu starp katru subjektu. Visi stimuli tika kontrolēti, izmantojot programmatūru Freeze Frame (Coulbourn Instruments). CS bija 20 akmens (5 kHz, 80 dB) un procedūrās ar vairākām CS prezentācijām mainīgs starpizmēģinājumu intervāls (ITI) vidēji 180 s. Beznosacījuma stimuls (US) bija 1 mA trieciens, kura ilgums bija 500 ms un kas beidzās vienlaikus ar kondicionēto stimulu.

Pārtikas izvēles sociālā pārnešana. Visas STFP procedūras notika telpā, kas atrodas blakus telpai, kurā bija kondicionēšanas kameras. Jaunas diētas tika izveidotas, sajaucot 100 g pulvera 5LL2 Purina grauzēju barības ar 1 g McCormick malta kanēļa (diēta Cin) vai 2 g Hershey kakao pulvera (diēta Co). Vienkāršā diēta, kas tika dota visām žurkām barības ierobežojuma periodā un kontroles žurkām eksperimentālo procedūru beigu dienā, bija bezpiedevu pulverveida 5LL2 Purina grauzēju barības. Visi pulverveida čau ēdieni — gan pārtikas ierobežošanas, gan eksperimentālo procedūru laikā — tika pasniegti piekarināmās pārtikas krūzēs, kas tika izgatavotas no 4 uncēm. stikla burkas un 12-izmēra tērauda vads. Pārtikas krūzes tika izskalotas un pēc tam noslaucītas ar 70% etanola šķīdumu, pirms tās rūpīgi nomazgātas ar ziepēm un ūdeni starp katru lietošanas reizi. Visas STFP eksperimentālo procedūru pabeigšanas fāzes notika standarta žurku būros (26, 7 cm × 48, 3 cm × 20, 3 cm), un katra žurka saņēma jaunu būru. Mijiedarbības fāze (STFP iegūšanas fāze) notika lielā plastmasas tvertnē (50,5 cm × 39,4 cm × 37,5 cm) ar koka skaidu grīdas segumu, kas tika nomainīta starp katru grupu. Starp katru sesiju plastmasas tvertnes tika rūpīgi noslaucītas ar Windex.

Eksperimentālā dizaina un sociālās mācīšanās procedūru apskats.

(Grafisku pārskatu skatiet 2. att.).

Visām žurkām tika ierobežota barība piecas dienas, un tās tika pieradinātas pie apstrādes un telpas, kurā notiks STFP procedūras, četras dienas tieši pirms eksperimentālo procedūru pirmās dienas. Lai gan pieradināšanas procedūras beidzās pirms eksperimentālo procedūru pirmās dienas, pārtikas ierobežošana turpinājās līdz eksperimenta beigām. Viena žurka no katras triādes tika piešķirta vienam no trim nosacījumiem: Demonstrator, Observer vai Control. 2. kohortas vīriešu triādes tika novērtētas attiecībā uz dominējošo stāvokli, un visām bija skaidra hierarhija, un tās tika piešķirtas tā, ka dominējošā žurka bija demonstrētājs, bet padotais bija novērotājs, lai veicinātu baiļu pārnešanu sabiedrībā13. Atsevišķas triādes tika tālāk nejauši sadalītas grupās, kurās demonstrētājs un novērotājs saņemtu izvēles testu STFP atsaukšanas laikā (izvēle), un grupās, kurās viņi saņemtu tikai demonstrēto pārtiku (Cin).

Eksperimentālās procedūras 1. dienā žurkas, kurām bija noteikts Demonstrator stāvoklis, tika pārvietotas uz baiļu kondicionēšanas kamerām un ļāva tām pierast 10 minūtes, pirms tās tika pakļautas 3 CS, kas vienlaikus beidzās ar sāpīgu šoku (skatiet sadaļu "Aparāti un stimuli" specifika). Pēc baiļu kondicionēšanas procedūrām demdemonstranti tika pārvietoti atpakaļ uz sākotnējo mājas būru. Eksperimentālo procedūru 2. dienā, 24 stundas pēc baiļu kondicionēšanas, demonstranti tika atgriezti kondicionēšanas kamerās ar viņu būra palīgu, kas tika piešķirts Observer stāvoklim, un viņiem tika veikta FCbP procedūra (2. attēls). Tūlīt pēc FCbP procedūras novērotājas žurkas tika atgrieztas savā mājas būrī, savukārt demonstranti tika pārvietoti uz blakus telpu un viņiem tika dota 1 stunda, lai patērētu ar kanēli aromatizētu pulverveida čau. Kad bija pagājusi stunda, novērotāji tika pārvietoti uz mijiedarbības tvertni ar demonstrantiem un ļāva ar viņiem mijiedarboties 30 minūtes, lai ļautu iegūt sociāli izplatītu ēdienu izvēli. Iepriekšējie mūsu laboratorijas pētījumi ir apstiprinājuši, ka šie laika punkti ir pietiekami STFP pārraidei33. Pēc tam novērotāja žurkas tika atgrieztas savā mājas būrī, bet demonstrācijas žurkas tika pārvietotas uz vienu novietni, lai novērstu turpmāku STFP pārraidi uz novērotāju vai kontroli. Eksperimentālo procedūru 3. dienā kontroles žurkas tika pārvietotas tikai uz kondicionēšanas kamerām, un pēc 10 minūšu pieradināšanas pie kameras tika uzrādītas trīs 20 s CS bez pavadošā šoka. Tas tika darīts atsevišķā dienā, lai samazinātu iespējamību, ka kamerā joprojām atrodas trauksmes feromoni, kurus, kā zināms, izdala žurkas, reaģējot uz apdraudošiem stimuliem un kas ietekmē konkrēto mācīšanos59.

Eksperimenta beigu dienā, 4. dienā, tika uzsākta gan sociāli pārnēsātās pārtikas izvēles, gan baiļu kondicionēšanas/baiļu kondicionēšanas atmiņu atsaukšana. Visiem novērotājiem un demonstrantiem no triādēm, kurām bija piešķirts izvēles nosacījums, tika dota 10 min ad libitum piekļuve gan kanēļa, gan kakao diētai, savukārt novērotājiem un demonstrantiem no triādēm, kas tika piešķirtas Cin stāvoklim, tika dota 10 min ad libitum piekļuve kanēļa diētai. tikai. Visās triādēs kontroles žurkām tika dota 10 minūšu ad libitum piekļuve vienkāršam pulverveida gaļai. Tūlīt pēc tam žurkas tika atgrieztas savā mājas būrī un atstātas netraucētas uz 10-minūti, pirms tās tika pārvietotas atpakaļ uz laboratorijas telpu un ievietotas kondicionēšanas kamerās. Pēc tam visām žurkām tika dots 3-minūtes pieradināšanas periods kamerā, pirms tām tika uzrādīta viena 20 s CS. 5 minūtes pēc CS beigām visas žurkas tika eitanizētas, injicējot pentobarbitāla un fenitoīna šķīdumu (Euthasol; Virbac Animal Health) un perfūzijas. Viņu smadzenes vēlāk tika apstrādātas Arc mRNS ekspresijai. Ņemot vērā mūsu termināļa procedūras laika gaitu un zināmo Arc mRNS28 migrācijas laika grafiku, Arc mRNS citoplazmas ekspresijas palielināšanās būtu saistīta ar STFP atsaukšanas procedūrām, savukārt kodola ekspresija būtu saistīta ar FC / FCbP atsaukšanas procedūrām, šūnām, kurām ir dubulta aktivācija. ir aktivizēti abos laika periodos (sk. 1. attēlu; arī skatiet sadaļu "Audu analīze", lai iegūtu sīkāku informāciju par audu apstrādi un apstrādi).

Tuksneša dzīvo cistanche

Procedūras.

Pieradums un pārtikas ierobežojumi. Visa pieradināšana notika tieši pirms eksperimentālo procedūru pirmās dienas. Pieradināšana sastāvēja no tā, ka katrs žurku būris tika pārvietots uz telpu, kurā notika visas STFP eksperimentālās procedūras, un ļāva tiem pierast pie telpas 15 minūtes. Šajā periodā katru žurku paņēma un apstrādāja eksperimentētājs, kas 2 minūtes darbojās, lai pieradinātu viņu un šo indivīdu rīkoties. Visas pieradināšanas procedūras notika tumšā telpā sarkanā gaismā, un visas žurkas saņēma 4 dienu pieradināšanu. Pārtikas ierobežošana sākās dienu pirms pieradināšanas sākuma un turpinājās līdz eksperimenta beigām. Uztura ierobežošanas sākumā pārtikas granulas, ko visi subjekti bija ēduši, tika izņemtas no būra. Pēc tam visiem būriem katru dienu tika nodrošināta ad libitum piekļuve piekarinātai burkai, kas bija pilna ar vienkāršu, pulverveida Purina 5LL2 diētu savā mājas būrī uz 1 stundu. Žurkas tika svērtas katru dienu, sākot no pārtikas ierobežošanas sākuma līdz eksperimenta beigām, lai nodrošinātu neparastu svara zudumu.

Uzvedības vērtēšana.

Visa šī eksperimenta uzvedības vērtēšana tika pabeigta, izmantojot uzvedības novērošanas pētījumu interaktīvo programmatūru (BORIS)60.

Baidieties no sociālo kontaktu vērtēšanas, izmantojot starpniekserveri. Iepriekšējie mūsu laboratorijas pētījumi liecina, ka pastāv cieša saikne starp baiļu apjomu, ko novērotāji izpaudās ilgtermiņa atmiņas pārbaudē, un laiku, kas pavadīts, mijiedarbojoties ar demonstratoru CS laikā vīriešiem13 un pēc CS sievietēm14,26. Tādējādi video ar starpnieka baiļu kondicionēšanas sociālās iegūšanas fāzi tika novērtēti par sociālo mijiedarbību starp Novērotāju un Demonstratoru katrā 20- s periodā CS prezentācijas laikā un 20- periodā tūlīt pēc katras CS prezentācija, lai nodrošinātu sekundāru baiļu iegūšanas indeksu. Sociālais kontakts tika vērtēts, kad novērotāja un demonstratora žurkas sazinājās citādi, nevis garāmejot signāla periodā (CS kontakta laikā) vai 20 s pēc CS (pēc CS kontakta). Tika aprēķināta katra punktu skaitīšanas perioda procentuālā daļa, kas pavadīta saskarē ar demonstratoru. Dati par kontakta procentuālo attiecību vīriešiem norādes periodā un dati par kontakta procentuālo attiecību tūlīt pēc mātītēm tika apkopoti un apvienoti vienā "attiecīgā kontakta" mērī, ko izmantot visās galīgajās statistikas analīzēs.

Izvēles pārbaudes punktu vērtēšana. Videoklipi ar izvēles testu, lai atsauktu uz sociāli pārnēsātu pārtikas produktu izvēli, tika novērtēti pēc laika, ko konkrētā žurka pavadīja, mijiedarbojoties ar pārtikas krūzi, pamatojoties uz to, vai tajā bija demonstrēta/jau patērēta diēta (diēta Cin) vai romāns. diēta (diēta Co). Tas tika darīts kā potenciāls sekundārs pārtikas izvēles mērs, jo mēs paredzējām, ka izvēles tests bija neparasti īss (10 minūtes) nepieciešamības dēļ, iespējams, nevarēsim noteikt preferences, pamatojoties tikai uz apēsto daudzumu. Mijiedarbība ar pārtikas krūzi tika vērtēta ikreiz, kad žurka bija fiziski saskarē ar krūzi un aktīvi neatkāpās no tās (ti, priekšējās ķepas saskaras ar burku, galva atrodas burkā, uzkāpa burkas augšpusē vai aktīvi ēda). no burkas). Statistiskai analīzei mēs aprēķinājām laika procentus, kas pavadīts, mijiedarbojoties ar krūzīti ar noteiktu diētu, pamatojoties uz kopējo laiku, kas pavadīts, mijiedarbojoties ar kādu no krūzēm (piem., diētai Cin, laika procentuālais daudzums= TimeDiet Cin/ (TimeDiet). Co plus TimeDiet Cin)). Pilna 10-min izvēles testa sesija tika novērtēta visām žurkām, kurām tas tika veikts.

Audu analīze.

Lai samazinātu mRNS noārdīšanos ar ribonukleāzi (RNase), visas smadzeņu sagatavošanas un apstrādes laikā izmantotās iekārtas un virsmas tika regulāri dezinficētas ar RNase AWAY™ (Termo Scientity; Waltham, MA, ASV) vai RNAseZap™ (Ambion; Grand Island, NY). , ASV).

Smadzeņu sagatavošana. Tūlīt pēc eitanāzijas subjekti tika intrakardiāli perfūzēti, izmantojot 4 procentu paraformaldehīda (PFA) šķīdumu. Pēc tam smadzenes tika noņemtas un iegremdētas 4% PFA, lai nodrošinātu pēcfiksāciju 24–48 stundas. Kad pēcfiksācija bija pabeigta, krioaizsardzībai smadzenes tika pārnestas uz 30% saharozes šķīdumu fosfātu buferšķīdumā. Kad smadzenes bija nogrimušas flakona apakšā, liecinot par pietiekamu saharozes uzņemšanu krioaizsardzībai, tās tika ātri sasaldētas sausā ledus pulverī un pārvietotas uz –80 grādu saldētavu uzglabāšanai līdz sadalīšanai. Pēc tam smadzenes tika sadalītas koronāli uz slīdoša mikrotoma 30 µm biezumā sešās sērijās (tāpēc nākamās sekcijas vienā sērijā bija 180 µm attālumā viena no otras) un nekavējoties tika uzstādītas un ļāva nožūt, pirms tās ievietoja vakuuma kamerā ar mitruma sūkļiem, kur tās atradās. atstāj pilnībā nožūt 24 stundas. Tika sadalītas un apstrādātas tikai hipokampu sekcijas (aptuveni –3,2 līdz –5,2 no bregmas) vai prefrontālie reģioni (aptuveni plus 3,7 līdz plus 1,4 no bregmas), kas satur interesējošās zonas. Uzmontētās sekcijas tika ievietotas noslēgtā RNāzes nesaturošā priekšmetstikliņu kastē un uzglabātas –80 grādu temperatūrā līdz apstrādei.

Audu apstrāde. Visas procedūras tika pārveidotas no protokoliem, kas izmantoti Lee et al.61 un Petrovich et al.62. Pirms audu apstrādes tika izveidota Arc mRNS cRNS zonde, sākot ar plazmīdu, kas satur Arc transkripta pilna garuma cDNS (~3{4}} kbp). Lai izveidotu zondi, DNS vispirms tika sagriezta, sajaucot plazmīdu ar 10 × sagremošanas buferi (NEBufer; Biolabs; Ipswich, MA, ASV), 10 × EcoRI restrikcijas enzīmu (Biolabs) un attīrītu ūdeni, kas nesatur nukleāzes. inkubēts 37 grādu temperatūrā 2 stundas. Pareiza DNS sagriešana tika pārbaudīta, izmantojot elektroforēzi, pēc tam DNS nakti attīrīja etanolā. Pēc attīrīšanas DNS granula tika izgriezta centrifūgā, mazgāta EtOH, pilnībā žāvēta un atkārtoti suspendēta TE buferšķīdumā. Lai pārbaudītu, vai DNS ir pareizi linearizēta, aprēķinātu loka koncentrāciju un pārbaudītu, vai tajā nav piesārņotāju, DNS paraugs tika pārbaudīts ar spektrofotometriju (Nanodrop Lite; Thermo Scientific, Waltham, MA, ASV). Digoksigenīna (DIG) marķētā zonde tika transkribēta, apvienojot linearizēto DNS ar RNāzes nesaturošu ūdeni, 10 × transkripcijas buferi (Ambion), RNSāzes bloku (Ambion), DIG RNS marķēšanas maisījumu (Roche Applied Science; Indianapolisa, IN, ASV) un T7 RNS polimerāzi (Ambion) pirms šķīduma inkubācijas 37 grādu temperatūrā 2 stundas. Visbeidzot, zonde tika atšķaidīta ūdenī bez nukleāzes un attīrīta mini Quick-Spin kolonnā (Roche).

Kad cRNS zonde bija konstruēta, priekšmetstikliņus, kuros bija audi no žurku tēviņiem, iegremdēja uz 40 min 4% PFA šķīdumā, lai palielinātu audu integritāti in situ apstrādes laikā. Žurku mātīšu audi tika apstrādāti bez šīs PFA mazgāšanas. Pēc tam priekšmetstikliņus mazgā un inkubēja proteināzes K (PK) buferšķīdumā 37 grādos, pirms tos apstrādāja ar 0,5% etiķskābes anhidrīda / 1,5% trietanolamīna šķīdumu, kas satur ledus etiķskābi, lai nodrošinātu caurlaidību. Pēc tam priekšmetstikliņus mazgā fizioloģiskā šķīduma-nātrija citrāta (SSC) buferšķīdumā, pirms tos dehidrēja, iegremdējot augošā etanola koncentrācijā, un žāvēja gaisā. Visbeidzot, katrs priekšmetstikls tika pārklāts ar 300 µL hibridizācijas bufera, kas satur rauga tRNS (Invitrogen; Carlsbad, CA, ASV), laša spermas DNS (Ambion), ditiotreitolu (Sigma; Sentluisa, MO, ASV) un cRNS zondi. (1:100). Pēc tam katrs priekšmetstiklis tika pārklāts ar vāku un aizzīmogots ap malām ar DPX mountant (Electron Microscopy Sciences; Hatfield, PA, ASV), pirms inkubēja hibridizācijas šķīdumā 20 stundas 60 grādu temperatūrā. Konkrēti, pārklājošais stikls pasargāja audus no jebkāda tieša kontakta ar DPX stiprinājumu, tāpēc vēlāka sacietējušā DPX noņemšana neradīja audu bojājumus.

Kad hibridizācija bija pabeigta, pārklājošie stikli tika rūpīgi noņemti un priekšmetstikliņi tika inkubēti 4xSSC buferšķīdumā, kas sajaukts ar nātrija tiosulfātu (ST), 60 grādu temperatūrā pirms apstrādes ar etilēndiamīntetraetiķskābes šķīdumu, lai inhibētu RNS aktivitāti 37 ° C temperatūrā. Pēc tam priekšmetstikliņi tika mazgāti dilstošā SSC šķīduma koncentrācijā, kas atkal sajaukta ar ST 60 grādu temperatūrā. Pēc tam audus nomazgāja mazgāšanas līdzekļa šķīdumā (Tween20), pirms tos iekrāsoja ar PerkinElmer TSA fluoresceīna sistēmu (NEL701001KT; PerkinElmer, Waltham, MA, ASV). Priekšmetstikliņi tika ievietoti mitrā kamerā un apstrādāti ar bloķējošu buferi, kam sekoja anti-DIG-HRP konjugāts 2 stundas. Pēc tam priekšmetstikliņus īsi nomazgāja mazgāšanas līdzekļa šķīdumā, pirms tos ievietoja atpakaļ tumšā mitrā kamerā un pārklāja ar šķīdumu, kas satur fluoresceīna tiramīda reaģentu (FITC), un ļāva nostāvēties 30 minūtes. Visbeidzot priekšmetstikliņus nomazgāja, ļāva nožūt un pārklāja ar fiksācijas līdzekli, kas satur kodola traipu 4′,6-diamidino-2-fenilinodols (DAPI) (Vectashield; Vector Lab, Burlingame, CA, ASV). . Priekšmetstikliņi līdz attēlveidošanai tika glabāti tumsā –20 grādu temperatūrā.

Attēlveidošana. Visa attēlveidošana tika pabeigta, izmantojot Axio Scope A1 mikroskopu (Zeiss; Tornwood, NY, ASV). Interesējošie reģioni tika identificēti, izmantojot DAPI krāsošanu, izmantojot 10 × objektu ar Paxinos un Watson smadzeņu atlanta63 palīdzību, un pēc tam tika attēloti zem 40 × objekta (faktiskais palielinājums ~ 900 ×). Attēli tika uzņemti gan DAPI, gan FITC traipiem un vēlāk tika iekrāsoti un automātiski apvienoti, izmantojot pielāgotu makro ImageJ programmatūrā ar FIJI (NIH, Bethesda, MD). Sakarā ar audu degradāciju, kas notika visā in situ, ne visas sekcijas vai potenciāli interesējošās zonas bija dzīvotspējīgas. Tādējādi attēlus nevarēja droši salikt z formātā, un tā vietā tie tika uzņemti vienā plaknē. Tika attēloti un saskaitīti šādi reģioni: prelimbiskā garoza (plus 3,72 līdz plus 2,52 no bregmas), infralimbiskā garoza (plus 3,52 līdz plus 2,2 no bregmas), sānu (plus 3,72 līdz plus 3,2 no bregmas) un ventrālā (plus 3,72). līdz plus 3,0 no bregmas) orbitofrontālās garozas, priekšējās cingulārās garozas CG1 reģions (plus 3,72 līdz plus 2,52 no bregmas) un ventrālā hipokampa CA3 reģions (no -4,3 līdz -4,8 no bregmas) (S6. att.). Lai arī amigdalārie kodoli bija īpaši ieinteresēti to vispāratzītās lomas dēļ baiļu apguvē, iepriekš minētie audu bojājumi šajā jomā bija īpaši smagi. Tādējādi mēs nevarējām iegūt pietiekami lielu paraugu, lai iekļautu šo reģionu (lai žurku iekļautu noteiktā apgabala statistiskajā analīzē, bija nepieciešami vismaz 6 dzīvotspējīgi attēli/reģions).

Skaitīšana tika pabeigta pa reģioniem, un visiem attēlu failiem tika piešķirts nejaušs ciparu kods, lai eksperimentētājs, kurš skaitīšanas laikā pabeidza skaitīšanu, nebūtu redzams no jebkādām detaļām par attēlu. Visi šūnu skaitļi tika veikti ImageJ ar FIJI pakotni un tika veikti, izmantojot šūnu skaitīšanas rīku. Šūnas tika skaitītas kodola un citoplazmas loka mRNS ekspresijai atsevišķi, un šūnas, kurām bija pārklājoša ekspresija, tika skaitītas kā divkāršas ekspresijas. Galīgais kodolloku ekspresējošo un citoplazmas loku ekspresējošo šūnu skaits ietvēra tikai tās šūnas, kas ekspresē tikai šajā reģionā (ti, neietvēra divējādi ekspresējošās šūnas). Tika veikts pilns DAPI iekrāsoto šūnu skaits, un tika aprēķināts šūnu procentuālais daudzums, kas uzrāda ekspresiju katrā konkrētajā apgabalā, kam sekoja vidējais šūnu procentuālais daudzums, kas uzrādīja katru aktivācijas veidu atsevišķām žurkām. Lai novērstu to, ka žurku rādītājiem ar lielāku attēlu skaitu ir nesamērīga ietekme uz mūsu statistiku un lai novērstu izlases lieluma palielināšanos, mūsu galīgajā analīzē tika izmantoti tikai šie vidējie rādītāji.

Statistiskās analīzes pārskats. Visas statistiskās analīzes tika pabeigtas, izmantojot R kodēšanas programmatūru. Pilns kods ir brīvi pieejams apskatei mūsu datu krātuvē vietnē https://dataverse.tdl.org/dataverse/MonflsFearMemoryLab. Ja vien nav norādīts citādi, robežvērtība, lai testu uzskatītu par statistiski nozīmīgu, tika iestatīta uz p<0.05. All of our Arc results, unless otherwise mentioned, were tested for significance using a series of two-way ANOVAs (type 2) containing sex and condition as between-subject variables (Sex and Condition) with an individual ANOVAs run for each area of expression (nucleus, cytoplasm, and dual). Similarly, a series of one-way ANOVAs were run with a combined variable containing the food task (diet Cin only or Choice test for Demonstrators and Observers; plain chow only for all Controls) for each area of expression. Sex was not included as a secondary variable as the relatively low number of female rats made sample sizes too small for certain condition/food task combinations. When ANOVA assumptions were violated, data were transformed using either a log(y+1) function or by taking the inverse square root. As these transforms did not always succeed in bringing ANOVAs in line with assumptions, Kruskal-Wallace tests were performed on datasets where transforms were not effective. Pairwise t-tests were performed for posthoc analyses against a Bonferroni-corrected alpha value when ANOVAs indicated a significant effect of condition (α=0.017) or a significant sex and condition interaction (α=0.008; conditions tested against each other within each sex-only) with between-group effect sizes calculated using Cohen's d. To provide a better gauge of variability for our smaller group sizes, the MSError obtained from our ANOVA was used in the denominator of post hoc t-tests. Effect sizes for ANOVAs were calculated using the standard partial η2 formula and for Kruskal-Wallace tests using the formula η2 H =(H − k+1)/(n – k). For simplicity of data presentation, unless the addition of the food task grouping variable resulted in a significant effect or unless a significant contribution of sex was detected all data were presented graphically split up by area of expression and overall experimental condition only. Any rats that had fewer than 6 viable images counted in a given brain region were excluded from the analysis for that area.

Divfaktoru korelācijas tika aprēķinātas novērotāju un demonstratoru žurkām, lai novērtētu iespējamās attiecības starp uzvedības rādītājiem un loka šūnu skaitu ekspresijai, kas notiek atbilstošos laika punktos (piemēram, citoplazmas loka skaits procentos no apēsta kanēļa). Pīrsona korelācijas koeficienti tika izmantoti, ja ar Grubbs testu nevienā datu kopā netika konstatētas novirzes. Ja tika konstatētas novirzes, tā vietā tika izmantots Spīrmena korelācijas koeficients. Lai novērtētu, vai ir saikne starp sociālo mācīšanos un loku divkāršās izteiksmes šūnās pakalpojumā Observers, vispārējā sociālās mācīšanās metrika, kas turpmāk tiek saukta par sociālās mācīšanās metriku (SLM), tika aprēķināta, izmantojot standartizēto punktu vidējo vērtību ( z-score) procentos no kopējā apēsta, kas bija demonstrētais ēdiens, un laika procentuālo daļu, kas pavadīts saskarē ar demonstratoru FCbP sociālās mācīšanās fāzē CS prezentācijas laikā (vīriešiem) vai pēc CS prezentācijas (sievietēm). Proti, procentuālā sasalšana pēdējā dienā netika izmantota Observer žurkām, jo ​​mūsu rezultāti un mūsu pēcpārbaudes eksperimenta rezultāti (sk. Papildu materiālus) liecināja, ka mūsu uzvedības testēšanas procedūras apstākļi izraisīja zināmu sasalšanas uzvedību pat Kontroles žurkas — vismaz tēviņiem —, un tādējādi tās varētu nebūt labākais sociāli iegūto baiļu reakcijas stipruma mērītājs. Tādējādi, ņemot vērā mūsu pagātnes atklājumus, ka mijiedarbība ar demonstratoru CS laikā vai pēc tās (atkarībā no dzimuma) ļoti paredzēja vēlāku sastingšanu līdz zīmei12–14, mijiedarbība ar demonstratoru dzimumam atbilstošā laika punktā tika pārbaudīta, lai noteiktu korelāciju pret kodolloka aktivitāti. nevis sastingt pēdējā dienā Observer žurkām. Demonstrētājiem līdzīga metrika tika aprēķināta, pamatojoties uz standartizētu sasalšanu līdz pēdējai dienai un kopējo apēsto procentuālo daudzumu, kas atbilst pazīstamajam uzturam (Diet Cin), un tika pārbaudīts pret dubultloku aktivitāti. Lai labotu vairākus testus, kas veikti katrā uzvedības datu kopā (6 katram smadzeņu reģionam), korelāciju kritiskā p vērtība tika koriģēta uz 0.0083.

Atsauces

1. Dawson, G., Meltzof, AN, Osterling, J., Rinaldi, J. & Brown, E. Bērni ar autismu nespēj orientēties uz dabiski sastopamiem sociālajiem stimuliem. J. Autism Dev. Traucējumi. 28, 479–485 (1998).

2. Zeeland, AAS-V., Dapretto, M., Ghahremani, DG, Poldrack, RA & Bookheimer, SY. Atlīdzības apstrāde autismā. Autism Res.

3, 53–67 (2010). 3. Chevallier, C., Kohls, G., Troiani, V., Brodkin, ES & Schultz, RT Te autisma sociālās motivācijas teorija. Tendences Cogn. Sci. 16, 231–239 (2012).

4. Öst, L.‑G. Fobiju iegūšanas veidi un uzvedības ārstēšanas rezultāti. Behav. Res. Ter. 23, 683–689 (1985).

5. Ollendick, TH & King, NJ Bērnības baiļu izcelsme: Rahmana baiļu iegūšanas teorijas novērtējums. Behav. Res. Ter. 29, 117–123 (1991).

6. Merckelbach, H., Arntz, A. & de Jong, P. Conditioning experiences in zirnekļa fobijas. Behav. Res. Ter. 29, 333–335 (1991).

7. Jeon, D. et al. Novērošanas baiļu mācīšanās ietver bojātu sāpju sistēmu un Cav1.2 Ca2 plus kanālus ACC. Nat. Neirosci. 13, 482–488 (2010).

8. Yusufshaq, S. & Rosenkranz, JA Sociālā izolācija pēc atšķiršanas pasliktina novērošanas baiļu kondicionēšanu. Behav. Brain Res. 242, 142–149 (2013).

9. Kavaliers, M., Choleris, E. & Colwell, DD Mācīšanās no citiem, lai tiktu galā ar mušu kodumiem: Sociāla mācīšanās par baiļu izraisītu kondicionētu analgēziju un aktīvu izvairīšanos. Behav. Neirosci. 115, 661–674 (2001).

10. Kavaliers, M., Colwell, DD & Choleris, E. Mācīšanās baidīties un tikt galā ar dabisku stresa faktoru: Individuāli un sociāli iegūts kortikosterons un izvairīšanās reakcija uz mušu kodumiem. Horm. Behav. 43, 99–107 (2003).

11. Kavaliers, M., Colwell, DD & Choleris, E. Radniecība, pazīstamība un sociālais statuss modulē sociālo mācīšanos par "mikroplēsoņām" (kožām mušas) briežu pelēm. Behav. Ecol. Sociobiol. 58, 60–71 (2005).

12. Bruchey, AK, Jones, CE & Monfls, M.-H. Baiļu kondicionēšana, izmantojot starpniekserveri: baiļu sociālā pārnešana atmiņas izgūšanas laikā. Behav. Brain Res. 214, 80–84 (2010).

13. Džounss, CE & Monfls, M.-H. Dominēšanas statuss paredz sociālo baiļu pārnešanu laboratorijas žurkām. Anim. Cogn. 19, 1051–1069 (2016).

14. Agee, LA, Jones, CE & Monfls, M.-H. Pazīšanas / radniecības atšķirīgā ietekme baiļu asociāciju sociālajā pārnešanā un ēdiena izvēlē žurkām. Anim. Cogn. 22, 1013–1026 (2019).

15. Mitchell, CJ, Heyes, CM, Gardner, MR & Dawson, GR Divvirzienu kontroles procedūras ierobežojumi imitācijas izmeklēšanai žurkām: smakas norādes uz manipulācijas. QJ Exp. Psih. B 52, 193–202 (1999).

16. Galef, BG & Wigmore, SW Informācijas nodošana par pārtikas produktiem no attāluma: “informācijas centra” hipotēzes laboratoriskā izmeklēšana. Anim. Behav. 31, 748–758 (1983).

17. Galef, BG, Mason, JR, Preti, G. & Bean, NJ Oglekļa disulfīds: semioķīmiska mediācijas sociāli izraisīta uztura izvēle žurkām. Fiziol. Behav. 42, 119–124 (1988).

18. Galef, BG Gadījuma izpēte uzvedības analīzē, sintēzē un uzmanības pievēršanā detaļām: Sociālā mācīšanās par pārtikas izvēlēm. Behav. Brain Res. 231, 266–271 (2012).

19. Posadas-Andrews, A. & Roper, TJ. Barības preferenču sociālā pārnešana pieaugušām žurkām. Anim. Behav. 31, 265–271 (1983).

20. Countryman, RA, Orlowski, JD, Brightwell, JJ, Oskowitz, AZ & Colombo, PJ CREB fosforilācija un c-Fos ekspresija žurku hipokampā, iegūstot un atgādinot par sociāli pārnēsātu pārtikas izvēli. Hippocampus 15, 56–67 (2005).

21. Boix-Trelis, N., Vale-Martínez, A., Guillazo-Blanch, G., Costa-Miserachs, D. & Martí-Nicolovius, M. Nucleus basalis magnocellularis stimulācijas ietekme uz sociāli pārnēsātu pārtiku un c. -Fos izteiksme. Uzziniet. Atm. 13, 783–793 (2006).

22. Ross, RS & Eichenbaum, H. Hipokampu un kortikālās aktivācijas dinamika netelpiskās atmiņas konsolidācijas laikā. J. Neurosci. 26, 4852–4859 (2006).

23. Smith, CA, Countryman, RA, Sahuque, LL & Colombo, PJ Fos ekspresijas laika gaitas žurku hipokampā un neokorteksā pēc sociāli transmisīvas pārtikas izvēles iegūšanas un atsaukšanas. Neirobiol. Uzziniet. Atm. 88, 65–74 (2007).

24. Lesburguères, E. et al. Agrīna kortikālo tīklu marķēšana ir nepieciešama ilgstošas ​​asociatīvās atmiņas veidošanai. Science 331, 924–928 (2011).

25. Knapska, E. et al. Emocionālās informācijas pārsūtīšana starp subjektiem izraisa īpašus amigdalas aktivācijas modeļus. Proc. Natl. Akad. Sci. 103, 3858–3862 (2006).

26. Jones, CE, Riha, PD, Gore, AC & Monfls, M.-H. Pavlovijas baiļu pārnešana sociālajā jomā: baiļu kondicionēšanas starpniekserveris radniecīgām žurku mātītēm. Anim. Cogn. 17, 827–834 (2014). 27. Twining, RC, Vantrease, JE, Love, S., Padival, M. & Rosenkranz, JA Intra-amygdala ķēde īpaši regulē sociālo baiļu mācīšanos. Nat. Neirosci. 20, 459–469 (2017).

28. Olsson, A., Knapska, E. & Lindström, B. Te neural and computational systems of Social learning. Nat. Rev. Neurosci. 21, 197–212 (2020).

29. Guzowski, JF, McNaughton, BL, Barnes, CA & Worley, PF Videi specifiska tūlītēja agrīna gēna Arc ekspresija hipokampu neironu ansambļos. Nat. Neirosci. 2, 1120–1124 (1999).

30. Kim, JJ & Jung, MW Neironu ķēdes un mehānismi, kas iesaistīti Pavlovijas baiļu kondicionēšanā: kritisks pārskats. Neirosci. Biobehav. Rev. 30, 188–202 (2006).

31. Laurent, V. & Westbrook, RF Infralimbiskā, bet ne prelimbiskā garozas inaktivācija pasliktina baiļu izzušanas konsolidāciju un atgūšanu. Uzziniet. Atm. 16, 520–529 (2009).

32. Tovote, P., Fadok, JP & Lüthi, A. Neironu ķēdes bailēm un trauksmei. Nat. Rev. Neurosci. 16, 317–331 (2015).

33. Agee, LA & Monfls, M.-H. Demonstratora uzticamības un pēdējās demonstrācijas nesenuma ietekme uz sociāli transmisīvas pārtikas izvēles iegūšanu. R. Soc. Atvērt Sci. 5, 172391 (2018).

34. Nikolaienko, O., Patil, S., Eriksen, MS & Bramham, CR Arc proteīns: elastīgs centrs sinaptiskajai plastikai un izziņai. Semin. Šūnu izstrādātājs Biol. 77, 33–42 (2018).

35. Chia, C. & Otto, T. Hipokampa loka (Arg3.1) ekspresiju izraisa atmiņas atsaukšana, un tā ir nepieciešama atmiņas atjaunošanai trace bail kondicionēšanā. Neirobiol. Uzziniet. Atm. 106, 48–55 (2013).

36. Pilarzyk, K. et al. Fosfodiesterāzes 11A4 funkcijas zudums liecina, ka nesenās un attālās ilgtermiņa atmiņas var tikt atvienotas. Curr. Biol. 29, 2307-2321.e5 (2019).

37. Džonss, CE Te Asociatīvo baiļu sociālā pārnešana grauzējiem — individuālās atšķirības baiļu kondicionēšanā ar proxy sēj. 17 (Pavasaris, 2021).

38. Smith, CA, East, BS & Colombo, PJ Orbitofrontālā garoza nav nepieciešama, lai iegūtu vai attāli atsauktu sociāli pārnēsātās pārtikas preferences. Behav. Brain Res. 208, 243–249 (2010).

39. Rudebeck, PH, Walton, ME, Smyth, AN, Bannerman, DM & Rushworth, MFS Atsevišķi neironu ceļi apstrādā dažādas lēmumu pieņemšanas izmaksas. Nat. Neirosci. 9, 1161–1168 (2006).

40. Rolls, ET & Grabenhorst, F. Te orbitofrontal cortex un ne tikai: no afekta līdz lēmumu pieņemšanai. Prog. Neirobiol. 86, 216–244 (2008).

41. Wallis, JD. Starpsugu pētījumi par orbitofrontālo garozu un uz vērtībām balstītu lēmumu pieņemšanu. Nat. Neirosci. 15, 13–19 (2012).

42. Izquierdo, A. Funkcionālā neviendabība žurku orbitofrontālajā garozā atalgojuma mācībās un lēmumu pieņemšanā. J. Neurosci. 37, 10529–10540 (2017).

43. Randesi, M. et al. Dzimuma atšķirības pēc hroniska stresa ar opioīdu, ar stresu un neiroplastiskumu saistīto gēnu ekspresijā žurku hipokampā. Neirobiol. Stress 8, 33–41 (2018).

44. Maren, S., Phan, KL & Liberzon, I. Te kontekstuālās smadzenes: ietekme uz baiļu kondicionēšanu, izzušanu un psihopatoloģiju. Nat. Rev. Neurosci. 14, 417–428 (2013).

45. Vidal-Gonzalez, I., Vidal-Gonzalez, B., Rauch, SL & Quirk, GJ Mikrostimulācija atklāj pretēju prelimbiskās un infralimbiskās garozas ietekmi uz nosacīto baiļu izpausmi. Uzziniet. Atm. 13, 728–733 (2006).

46. ​​Sierra-Mercado, D., Padilla-Coreano, N. & Quirk, GJ. Prelimbic un infralimbic cortices, ventrālā hipokampa un bazolaterālās amigdalas atdalāmās lomas nosacīto baiļu izpausmē un izzušanā. Neuropsychopharmacology 36, 529–538 (2011).

47. Baran, SE, Armstrong, CE, Niren, DC, Hanna, JJ & Conrad, CD Hronisks stress un dzimumu atšķirības saistībā ar baiļu kondicionēšanas un izzušanas atsaukšanu. Neirobiol. Uzziniet. Atm. 91, 323–332 (2009).

48. Greiner, EM, Müller, I., Norris, MR, Ng, KH & Sangha, S. Dzimuma atšķirības baiļu regulēšanā un atlīdzības meklēšanas uzvedībā baiļu-drošības-atlīdzības diskriminācijas uzdevumā. Behav. Brain Res. 368, 111903 (2019).

49. Day, HLL & Stevenson, CW Te neirobioloģiskais pamats dzimumu atšķirībām iemācītās bailēs un to kavēšanā. Eiro. J. Neurosci. 52, 2466–2486 (2020).

50. van Haselts, FN et al. Individuālās atšķirības mātes aprūpē agrīnā dzīves posmā korelē ar lēmumu pieņemšanu vēlākā dzīvē un c-fos ekspresiju žurku prefrontālajos apakšreģionos. PLoS ONE 7, e37820 (2012).

51. Bayless, DW & Daniel, JM. Dzimuma atšķirības ar mielīnu saistīto proteīnu līmeņos un projekciju blīvumā starp orbitālo frontālo garozu un pieaugušo žurku muguras striatumu: Ietekme uz inhibējošo kontroli. Neuroscience 300, 286–296 (2015).

52. Orsini, CA & Setlow, B. Dzimumu atšķirības lēmumu pieņemšanas dzīvnieku modeļos. J. Neurosci. Res. 95, 260–269 (2017).

53. Corcoran, KA & Quirk, GJ Aktivitāte prelimbiskajā garozā ir nepieciešama, lai izpaustos apgūtā, bet ne iedzimtā. Bailes. J. Neurosci. 27, 840–844 (2007).

54. Burgos-Robles, A., Vidal-Gonzalez, I. & Quirk, GJ. Ilgstošas ​​kondicionētas reakcijas prelimbiskajos prefrontālajos neironos ir saistītas ar baiļu izpausmi un izzušanas neveiksmi. J. Neurosci. 29, 8474–8482 (2009).

55. Fenton, GE et al. Noturīga prelimbiskā garozas aktivitāte veicina uzlabotu iemācīto baiļu izpausmi sievietēm. Uzziniet. Atm. 21, 55–60 (2014).

56. Fenton, GE, Halliday, DM, Mason, R., Bredy, TW & Stevenson, CW. Dzimuma atšķirības apgūto baiļu izteiksmē un izzušanā ietver izmainītas gamma svārstības mediālajā prefrontālajā garozā. Neirobiol. Uzziniet. Atm. 135, 66–72 (2016).

57. Kirry, AJ et al. Hipofīzes adenilāta ciklāzes aktivējošā polipeptīda (PACAP) signalizācija prefrontālajā garozā modulē baiļu mācīšanos, bet ne telpisko darba atmiņu žurku mātītēm. Neuropharmacology 133, 145–154 (2018).

58. Day, HLL, Suwansawang, S., Halliday, DM & Stevenson, CW Dzimuma atšķirības dzirdes baiļu diskriminācijā ir saistītas ar izmainītu mediālo prefrontālās garozas funkciju. Sci. Rep. 10, 6300 (2020).

59. Kikusui, T., Takigami, S., Takeuchi, Y. & Mori, Y. Trauksmes feromons uzlabo stresa izraisītu hipertermiju žurkām. Fiziol. Behav. 72, 45–50 (2001).

60. Friard, O. & Gamba, M. BORIS: bezmaksas, daudzpusīga atvērtā pirmkoda notikumu reģistrēšanas programmatūra video/audio kodēšanai un tiešraides novērojumiem. Metodes Ecol. Evol. 7, 1325–1330 (2016). 61. Lee, HJ, Haberman, RP, Roquet, RF & Monfls, M.-H. Izzušana un atgūšana, kā arī nosacīto baiļu izzušana atšķirīgi aktivizē mediālo prefrontālo garozu un amigdalu žurkām. Priekšpuse. Behav. Neirosci. 9, 1–10 (2016).

62. Petrovich, GD, Holland, PC & Gallagher, M. Amygdalar un prefrontālie ceļi uz sānu hipotalāmu tiek aktivizēti ar apgūtu signālu, kas stimulē ēšanu. J. Neurosci. 25, 8295–8302 (2005).

63. Paxinos, G. & Watson, C. Te Rat Brain in Stereotaxic Coordinates: Hard Cover. (Elsevier, 2006).