Dendrobium Loddigesii Rolfe fenola sastāvdaļas ar antioksidatīvajām, tirozināzi inhibējošām un pretnovecošanās aktivitātēm

Apr 07, 2023

Abstrakts

Dendrobium loddigesii pulverveida stublāju ūdens etanola ekstrakti radīja trīs jaunus fenolus, tostarp trīs -7-O-etil-9-O-(4-hidroksifenil)propionil-diacilglicerīnu (1), (R){{ 7}},5,4'-trihidroksi-3,3', -trimetoksibibenzils (2) un (S)-5,5′,7-trihidroksi-3',4′ -dimetoksifavanons (3) kopā ar vienpadsmit zināmiem analogiem. To struktūras tika noteiktas ar plašu spektroskopisko analīzi. Lai identificētu dabiskos antioksidantus, balinošos un pretnovecošanās līdzekļus, tika novērtēta šo fenolu spēja attīrīt 1,2-difenil-2-pikrilhidrazila (DPPH) radikāli, to spēja inhibēt tirozināzes veidošanos un viņu spējas stimulēt kolagēna ražošanu, izmantojot cilvēka dermas fibroblastu-pieaugušo (HDFa) testu. Tika konstatēts, ka savienojumiem 1, 4–8, 13 un 14 bija nozīmīga DPPH radikāļu attīrīšanas aktivitāte, savienojumam 10 bija tirozināzes inhibējoša aktivitāte (IC50 37.904 ug/mL), un savienojums 9 uzrādīja ievērojamu kolagēna veidošanos ar EC50 vērtība ir 3,182 ug/ml. Šie rezultāti liecina, ka D. loddigesii fenola sastāvdaļas var būt antioksidantu, ādas balināšanas un/vai pretnovecošanās līdzekļu kandidāti.

Saskaņā ar attiecīgiem pētījumiem,cistancheir izplatītsgaršaugskas ir pazīstams kā "brīnumzāle, kas pagarina dzīvi". Tās galvenā sastāvdaļa ircistanozīds, kam ir dažādi efekti, piemēram,antioksidants, pretiekaisuma, unimūnās funkcijas veicināšana. Mehānisms starp cistanche unādas balināšanaslēpjas antioksidanta iedarbībācistanche glikozīdi. Melanīns cilvēka ādā veidojas, oksidējotiestirozīnskatalizē tirozināze, un oksidācijas reakcijā ir nepieciešama skābekļa līdzdalība, tāpēc skābekļa brīvie radikāļi organismā kļūst par svarīgu faktoru, kas ietekmē melanīna veidošanos. Cistanche satur cistanozīdu, kas ir antioksidants un var samazināt brīvo radikāļu veidošanos organismā, tādējādikavē melanīna ražošanu.

cistanche supplement review

Noklikšķiniet uz Cistanche Tubulosa papildinājums

Vairāk informācijas:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Grafiskais abstrakts

cistanche nedir

AtslēgvārdiDendrobium loddigesii · Fenola sastāvdaļas · Antioksidants · Tirozināzes inhibitors · Pretnovecošanās

1. Ievads

Dendrobium (Orchidaceae) ģintī ir aptuveni 1500 sugu visā pasaulē, no kurām aptuveni 80 sugas aug Ķīnā [1]. Vairāku šīs ģints augu stublāji ir pazīstami kā "Shi-Hu", kas jau tūkstošiem gadu ir izmantoti gan kā tradicionālā ķīniešu medicīna, gan kā tautas līdzekļi hroniska atrofiska gastrīta, ādas novecošanās, drudža, sirds un asinsvadu slimību un toniks ķermeņa šķidrumu ražošanas veicināšanai [2]. Iepriekšējie pētījumi par šo ģints ģints izpēti noveda pie virknes polisaharīdu, fenola savienojumu, alkaloīdu un seskviterpenoīdu [1, 3–5], no kuriem dažiem piemīt dažādas bioaktivitātes, tostarp pretiekaisuma [6], pretmikrobu [2], antioksidanti. [7], pretvēža [8], prettrombocītu agregācijas [9], imūnmodulējoša [10] un pret A gripas aktivitātēm [11].

Dendrobium loddigesii, daudzgadīgs epifītisks augs, ir plaši izplatīts Ķīnas dienvidrietumu apgabalā, piemēram, Guangxi, Guizhou un Yunnan provincēs [12]. Tās kāts ir izmantots tautas medicīnā gastrīta, drudža un reiboņa ārstēšanai [13]. Turpinot strukturāli daudzveidīgu un bioloģiski aktīvu šīs ģints dabisko produktu meklējumus [1, 5, 14–17], tika veikta padziļināta šīs augu sugas farmakoloģiski aktīvo sastāvdaļu izpēte. Rezultātā no D. loddigesii stumbra 80% etanola ekstrakta tika izdalīti trīs jauni fenola savienojumi (1–3), kā arī vienpadsmit zināmi (1. att.). Šeit ir sniegta šo savienojumu izolācija, struktūras izskaidrošana un bioloģiskais novērtējums.

does cistanche work

2 Rezultāti un diskusija

Savienojums 1, kas iegūts kā balta cieta viela, deva C21H26O7 molekulāro formulu, kas noteikta ar (-)-HRESIMS jonu pie m/z 389,1602 [M−H]− (aprēķināts C21H25O7, 389,16{{). 28}}6) ar deviņām nepiesātinājuma pakāpēm. 1H NMR spektrs satur septiņus aromātiskos protonus pie δH 6,85 (1H, d, J=1,7 Hz), 6,75 (1H, d, J=8,0 Hz), 6,68 (1H). , dd, J = 8,0, 1,7 Hz), 7,01 (2H, d, J = 8,5 Hz) un 6,68 (2H, d, J = 8,5 Hz), kas liecina par 1,3,4-triaizvietota benzola gredzena un 1,4-diaizvietota benzola gredzena klātbūtni. Tā 13C KMR spektrs uzrādīja 21 oglekļa rezonansi, tostarp divus metilus (viens metoksi), četrus alifātiskus metilēnus, deviņus metīnus (divi sp3, septiņi sp2) un sešus ceturtdaļas oglekli (vienu karbonilgrupu, piecus olefīnus, tostarp trīs ar skābekli). HMBC korelācijas (2. attēls) H-7/C-1 (δC 131,6), C-2 (δC 111,7), C-6 (δC 121,4), C -8 (δC 74,2) un C-10 (δC 65,3); H-9/C-7 (δC 83,8) un C-8 (δC 74,2); H-10/C-11 (δC 15,6); 3-OMe (δH 3,81)/C-3 (δC 149,1) kopā ar H-7/H-8/H2-9 un H{{ korelācijām 87}}/H3-11 no 1 H–1 H COZY spektra (2. att.) liecināja par 7-O-etilguajacilglicerīna [18] klātbūtni. Ir ziņots, ka J7,8 bija aptuveni 5 Hz eritroizomēram un 7 Hz trim izomēriem šļirču – glicerīnu un diacilglicerīna atvasinājumu gadījumā. Tādējādi savienojums 1 tika uzskatīts par trim izomēriem ar J7,8 (6,5 Hz) [18]. HMBC korelācijas H-7ʹ (δH 2,79, t, J = 7,5 Hz)/C-8ʹ (δC 37,1), C-1ʹ (δC 132,7), C-2ʹ, 6ʹ (δC 130,2) un C-9ʹ (δC-9ʹ) 174,6), H-8ʹ (δH 2,59, t, J = 7,5 Hz)/C-7ʹ (δC 31,0), C-1ʹ un C-9ʹ, kā arī norādītas H-8ʹ/H-7ʹ COZY šķērspīles p-hidroksikumarskābes klātbūtne [19]. Pamatojoties uz iepriekš aprakstītajiem pierādījumiem, tika ierosināts, ka 1 satur 7-O-etilguajacilglicerīna daļu un p-hidroksikumarskābi, izmantojot estera savienojumu. HMBC korelācija no H-9 līdz C-9ʹ liecināja, ka estera saite bija starp C-9 un C-9ʹ. Tādējādi 1 struktūra tika noteikta, kā parādīts attēlā.

(R){{0},5,4ʹ-trihidroksi-3,3ʹ,-trimetoksibibenzils (2) tika iegūts kā balta cieta viela. HRESIMS spektrs 2 uzrādīja kvazimolekulāro jonu maksimumu pie m/z 319,1180 [M−H]− (aprēķināts C17H19O6, 319,1187) ar 8 nepiesātinājuma pakāpēm. 1H NMR spektrs 2 uzrādīja trīs metoksilgrupas pie δH 3,75 (3H, s), 3,7 0 (3H, s) un 3,17 (3H, s); viens skābekli saturošs metīna protons pie δH 4,13 (1H, t, J=6.8 Hz, H-); divi metilēna signāli pie δH 2,73 (1H, dd, J=13,5, 6,9 Hz) un 2,96 (1H, dd, J=13,5, 6,9 Hz); un pieci aromātiskie protoni, kas parādās kā 1,3,4,5-tetraaizvietots aromātiskais gredzens pie δH 6,28 (1H, d, J=1,8 Hz) un 6,34 (1H, d, J{{) 60}},8 Hz) un 1,3,4-triaizvietots aromātiskais gredzens pie δH 6,49 (1H, d, J=2,0 Hz), 6,62 (1H, d, J=8,0 Hz) un 6,52 (1H, dd, J = 8,0, 2,0 Hz). 13CNMR un DEPT spektri 2 uzrādīja trīs oksimetilēnu, vienu metilēnu, vienu skābekli saturošu metīnu un 12 aromātiskus oglekli (pieci ar skābekli). Salīdzinot tās KMR datus (1. tabula) ar dendrokandīna C [20] datiem, tika konstatētas lielas līdzības, izņemot vēl vienas metoksilgrupas klātbūtni, kas atradās C-3ʹ pēc HMBC korelācijām no 3ʹ-OMe un H-5ʹ līdz. C-3ʹ (δC 148,4). Turklāt 3-OMe un H-2/C-3 (δC 149,5) vairākās HMBC mijiedarbības (2. att.); -OMe/C- (δC 86,9) ieteica citas metoksilgrupas attiecīgi C-3 un C-. Absolūtā konfigurācija pie C- tika noteikta kā R, pamatojoties uz negatīvo optisko rotāciju ([훼] 26 D –12,46), līdzīgi kā afilozais D [훼] 20 D –20,3, MeOH) [15]. Attiecīgi 2 struktūra tika noteikta, kā parādīts attēlā.

desert cistanche benefits

(S){{0}},7,5′-trihidroksi-3′,4′-dimetoksifavanons (3) tika iegūts kā dzeltens amorfs pulveris, un tam bija molekulārā C17H16O7 (1{{69} } ūdeņraža deficīta indeksi) saskaņā ar (-)-HRESIMS jonu pie m/z 331,0819 [M – H]− (aprēķināts 331,0823). UV absorbcijas maksimumi pie 206 un 294 nm liecināja par flavanona klātbūtni [21]. 1H KMR spektrs (1. tabula) uzrādīja trīs signālus nearomātiskajā apgabalā pie δH 5,29 (1H, dd, J=12,7, 3,1, H-2), 3,04 (1H, dd, J=17,1, 12,7, H-3ax) un 2,71 (1H, dd, J=17.1, 3,1, H-3 ekv.), četri aromātiskie protoni δH 5,87 (1H, d, J=2,2, H-6), 5,91 (1H, d, J=2,2, H-8), 6,62 (1H, d, J=2,0, H-2ʹ) un 6,61 (1H, d, J=2,0, H-6ʹ), divas metoksilgrupas δH 3,83 (3H, s) un 3,77 (3H, s). 13C KMR un DEPT spektri (1. tabula) satur rezonanses 17 oglekļa atomiem, tostarp diviem metoksigrupiem, vienam metilēnam, vienam metīnam, vienam karbonilogleklim un 12 aromātiskiem oglekļa atomiem. Visaptveroša tā KMR datu analīze liecināja, ka tā plakanā struktūra ir cieši saistīta ar dihidrotricīna [22] struktūru, izņemot to, ka OH-4ʹ un OCH3-5ʹ rezonanses dihidrotricīnā tika transponētas 3. punktā. To apstiprināja HMBC krusteniskā struktūra. virsotnes (2. att.) no H-2ʹ, H-6ʹ un OCH3-4ʹ līdz C-4ʹ (δC 137,7), no H-6ʹ līdz C-5ʹ (δC 151,8). Absolūtā konfigurācija pie C-2 tika postulēta kā S formā, pamatojoties uz negatīvu īpatnējo rotācijas vērtību (– 46,64, MeOH) tās optiskajā rotācijā [23]. Tāpēc savienojuma 3 struktūra tika nepārprotami piešķirta, kā parādīts.

Vienpadsmit zināmie savienojumi tika identificēti kā trepidation 4 [24], meskalīns 5 [25], 4,5,4′-trihidroksi- 3,3′-dimetoksibibenzils 6 [26], 4′,5- dihidroksi-3,3′-dimetoksibibenzils 7 [27], Tristins 8 [28], batāts III 9 [27], 3,5,3′-hidroksibibenzils 10 [29], afilozs C 11 [15], dentiform A 12 [30], dihidrokoniferildihidro-p-kumarāts 13 [31], p-hidroksifeniltransferulāts 14 [32] ar spektroskopisku analīzi un salīdzinot to spektrālos datus ar literatūru.

cistanche and tongkat ali reddit

Fenola savienojumi ir būtiska cilvēka uztura sastāvdaļa un ir pazīstami kā spēcīgi antioksidanti to spēcīgās ķēdes pārraušanas iedarbības dēļ, un tie var tieši veicināt antioksidantu aktivitāti [33]. DPPH radikāļu attīrīšanas tests ir viena no visizplatītākajām un salīdzinoši ātrākajām metodēm, ko izmanto antioksidantu aktivitātes novērtēšanai. Savienojumi, kas var nodot ūdeņraža atomu DPPH radikālim un pēc tam izraisīt DPPH reducētu formu, tiks uzskatīti par potenciāliem antioksidantiem. Visi savienojumi tika novērtēti pēc to DPPH radikāļu attīrīšanas aktivitātēm. Pašreizējie rezultāti (2. tabula) parādīja, ka lielākajai daļai fenola savienojumu (1, 4–8, 13 un 14) bija ievērojamas aktivitātes ar attīrīšanas kapacitāti no 89,411 līdz 94,278 procentiem pie 100 ug/ml.

No otras puses, tirozināze ir varu saturošs enzīms, un tam ir izšķiroša loma melanīna biosintēzes ceļa kontrolēšanā melanocītos [34]. Tāpēc tirozināzes inhibitori kļuva par svarīgu kosmētikas līdzekļu vai zāļu sastāvdaļu hiperpigmentācijai un ādas balināšanas līdzekļu izstrādei. Šajā pētījumā visi izolāti tika novērtēti pēc to tirozināzes inhibējošās aktivitātes (2. Kā pozitīvā kontrole tika izmantota kojskābe, domājams, ka ādas balināšanas līdzeklis. 3,5,3′-hidroksibibenzils (10) atklāja nozīmīgu inhibējošo aktivitāti ar IC50 vērtību 37,904 ug/ml. Afillals C (11) uzrādīja mērenu inhibīciju (IC50, 152,56 ug/ml). Visi atlikušie savienojumi bija neaktīvi koncentrācijās līdz 200 ug/ml. Šajā pētījumā var secināt, ka savienojumi 10 un 11 var būt potenciāls kandidāts ar melanīna biosintēzi saistīto ādas slimību ārstēšanai.

cistanche gnc

Ņemot vērā, ka šo sugu medicīniski izmanto ādas novecošanai, jo kolagēns ir ļoti svarīgs ādas stiprībai un elastībai, un tā noārdīšanās izraisa grumbu veidošanos, kas pavada novecošanos [35]. Tādējādi visi savienojumi tika arī apzināti novērtēti attiecībā uz to ietekmi uz kolagēna ražošanu HDFa. Rezultāti (2. tabula) parādīja, ka savienojums 9 būtiski stimulē HDFa kolagēna ražošanas aktivitāti (EC50 3.182 ug/mL). Savienojumam 6 un 7 bija vājāka aktivitāte, kolagēna ražošanai attiecīgi 33,062 procenti un 29,157 procenti pie 10 ug/ml. Pašreizējie rezultāti ne tikai apstiprināja D. loddigesii etnofarmakoloģisko izmantošanu, bet arī nodrošināja uzticamu struktūras veidni ar kolagēna deficītu saistītu slimību, piemēram, apdegumu un čūlu, attīstībai.

3 Eksperimentāls

3.1. Vispārējās eksperimentālās procedūras

Optiskā rotācija tika iegūta ar JASCO P-1020 digitālo polarimetru (Horiba, Tokija, Japāna). UV spektri tika mērīti, izmantojot Shimadzu UV-2401 PC spektrofotometru (Shimadzu, Kioto, Japāna). IR spektri tika iegūti ar Bruker Tensor 27 infrasarkano spektrofotometru (Bruker Optics GmbH, Etlingena, Vācija) ar KBr granulām. Masas spektri tika veikti ar API QSTAR cīņas laika spektrometru (MDS Sciqaszex, Concord, Ontario, Kanāda) un LCMSIT-TOF (Shimadzu, Kioto, Japāna) spektrometru. KMR spektri tika reģistrēti ar DRX-500 un Av III-600 instrumentiem, izmantojot TMS kā iekšējo standartu (Bruker, Bremerhaven, Vācija). Ķīmiskās nobīdes tika norādītas δ (ppm), atsaucoties uz šķīdinātāja signālu. Kolonnas hromatogrāfija tika veikta uz silikagela (200–300 un 300–400 acs, Qingdao Marine Chemical Inc., Qingdao, Ķīna), Lichroprep RP-18 gēlu (40–63 μm, Merck, Darmštate, Vācija), MCI. gēls CHP-20P (75–150 μm, Mitsubishi Chemical Corp., Tokija, Japāna), Sephadex LH-20 (20–150 μm, Amersham Biosciences, Upsala, Zviedrija) un YMC*GEL ODS -AHG (50 μm, YMC Co. Ltd. Japāna). Frakcijas tika uzraudzītas ar TLC, un plankumi tika vizualizēti ar UV gaismu un apsmidzināti ar 10% H2SO4 EtOH, kam sekoja karsēšana. 1,1-difenil-2-pikrilhidrazils (DPPH), Trolox, sēņu tirozināze, L-dopa un kojskābe tika iegādātas no Sigma (ASV); Transformējošais augšanas faktors beta (TGF-) tika iegūts no Peprotech (ASV); Augšanas barotne DMEM (augsts glikozes saturs ar L-glutīnu), Henka līdzsvarotais sāls šķīdums, liellopu augļa serums tika iegādāti no HyClone (ASV); Prokolagēna peptīda ELISA komplekts tika iegūts no TaKaRa (Japāna). Visas pārējās ķīmiskās vielas un šķīdinātāji bija analītiskas kvalitātes.

cistanche bienfaits

3.2. Augu materiāls

D. loddigesii stublāji tika savākti 2014. gada septembrī no Venšaņas pilsētas, Junaņas provincē, Ķīnas Tautas Republikā, un tos identificēja profesors Hong Yu (Junaņas Universitāte, Kuņminga, Ķīnas Tautas Republika). Vaučera paraugs (Nr. 20 140 829) ir deponēts Ķīnas Zinātņu akadēmijas Ķīnas Zinātņu akadēmijas Kuņmingas Botānikas institūta Valsts galvenajā fitoķīmijas un augu resursu laboratorijā Rietumķīnijā.

3.3. Ekstrakcija un izolācija

D. loddigesii žāvētos un pulverveida stublājus (10,2 kg) istabas temperatūrā ekstrahēja trīs reizes ar 80% etanolu un koncentrēja pazeminātā spiedienā. Pēc tam atlikumu suspendēja ūdenī un sadalīja ar EtOAc, lai iegūtu EtOAc frakciju (22{95}} g), kas tika pakļauta silikagela kolonnas hromatogrāfijai, eluējot ar petrolētera/acetona gradientu (15:1 līdz {). {110}}:1), lai atļautos 22 frakcijas (Fr.1–22). Fr.11 (6 g) tika pakļauts silikagela CC, kas eluēts ar CHCl3/MeOH (300:1), pēc tam sekoja MCI kolonna (MeOH/H2O gradients, 60:40–95:5) un silikagela CC (CHCl3/). MeOH, 200:1), iegūstot 12 (4 mg). Fr.13 (850 mg) tika atdalīts virs MCI kolonnas (MeOH/H2O, 60:40 līdz 95:5), lai iegūtu piecas frakcijas (Fr.13.1–Fr.13.5). Fr.13.4 (150 mg) ar HPLC sagatavošanu (MeOH/H2O, 60:40) ieguva savienojumus 4 (3 mg) un 5 (5 mg). Fr.16 (19 g) tika hromatografēts uz silikagela kolonnas, eluējot ar CHCl3/MeOH (100:1 līdz 20:1), lai iegūtu 6 apakšfrakcijas (Fr.16.1–Fr.16.6). Fr.16.4 (2,3 g) tika uzklāta MCI kolonna, kas eluēta ar MeOH/H2O (50:50–100:0), un pēc tam tālāk frakcionēta Sephadex LH-20 (MeOH/H2O, 90:10) kolonnā. iznākums 7 (716 mg) un 13 (39 mg). Izmantojot tos pašus Fr.16.4 nosacījumus, Fr.16.6 (240 mg) ieguva savienojumu 9 (7 mg). Fr.18 (10 g) tika atdalīts ar silikagelu CC (CHCl3/MeOH, 100:1–20:1), pēc tam izvadīts caur MCI (MeOH/H2O gradients, 50:50–100:0) un Sephadex LH{{ 96}} (MeOH/H2O, 90:10) kolonnas, lai iegūtu 3 (25 mg) un 11 (4 mg). Fr.19 (20 g) tika pakļauts MCI kolonnai, kas eluēta ar MeOH/H2O (30:70–100:0), lai iegūtu septiņas frakcijas (Fr.19.1–Fr.19.7). Fr.19.5 (2,3 g) tika atdalīts ar atkārtotu silikagela kolonnu (CHCl3/MeOH, 30:1), lai iegūtu 8 (15 mg) un 10 (7 mg). Fr.19.6 (4.3 g) tika frakcionēts uz silikagela kolonnas (CHCl3/MeOH, 30:1), lai iegūtu 5 frakcijas (Fr.19.6.1–Fr.19.6.5). Fr.19.6.1 (1,2 g) tika pakļauts silikagela kolonnai (CHCl3/MeOH, 30:1) un pēc attīrīšanas ar HPLC (MeOH/H2O, 45:55), iegūstot 1 (15 mg). Fr.19.6.3 (540 mg) tika uzklāts uz Sephadex LH-20 kolonnas, kas eluēts ar MeOH/H2O (90:10), un pēc tam tālāk attīrīts ar puspreparatīvo HPLC (MeOH/H2O, 45:55). nodrošināt 2 (6 mg) un 6 (5 mg). Fr.20 (12 g) tika uzklāts uz MCI gēla (MeOH/H2O, 30:70–100:0) hromatogrāfijas stadiju un pēc tam tika pakļauts silikagela CC (CHCl3/MeOH, 30:1), lai iegūtu 14 (21). mg).trīs{{0}}O-etil-9-O-(4-hidroksifenil)propionil-diacilglicerīns (1): balta cieta viela; [ ]D 26 – 3,72 (c 0,51, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 203 (4,53), 225 (4,17), 280 (3,66) nm; IR (KBr) νmax 3426, 1727, 1516, 829 cm-1; 1H un 13C KMR (CD3OD), skatīt 1. tabulu; ESIMS m/z 389 [M-H]-, HRESIMS m/z 389,1602 [M-H]- (aprēķināts C21H25O7, 389,1606).

(R)-4,5,4′-trihidroksi-3,3', -trimetoksibibenzils (2): balts amorfs pulveris; [ ]D 26 –12,46 (c 1,07, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 204 (4,59), 286 (3,75) nm; IR (KBr) νmax 3418, 1607, 1517, 1455, 1434, 796 cm-1; 1H un 13C KMR (CD3OD), skatīt 1. tabulu; ESIMS m/z 319 [M-H]-, HRESIMS m/z 319,1180 [M-H]- (aprēķināts C17H19O6, 319,1187).

(2S)-5,7,3ʹ-trihidroksi-6,4,5-trimetoksifavons (3): dzeltens amorfs pulveris; [ ]D 26 – 46,64 (c 0,46, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 206 (4,70), 294 (4,17) nm; IR (KBr) νmax 3335, 2940, 1641, 1514, 1462, 1345, 1434, 1182, 1091, 998, 833 cm-1; 1H un 13C KMR (CD3OD), skatīt 1. tabulu; ESIMS m/z 331 [M-H]-, HRESIMS m/z 331,0819 [M-H]- (aprēķināts C17H15O7, 331,0823).

3.4. DPPH radikālas attīrīšanas aktivitātes tests

Brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitātes tests tika veikts saskaņā ar iepriekšējo metodi [36] ar dažām modifikācijām. Īsumā, 30 μL paraugi (1000 ug/mL, izšķīdināts etanolā) un Trolox (1 mM) tika pievienoti 270 μL DPPH šķīdumam (100 μM, izšķīdināts metanols), attiecīgi. Reakcija norisinājās 1 stundu 37 grādu temperatūrā uz 96-iedobes mikroplates. Pēc tam tika nolasīta absorbcija pie 515 nm, un kopējās radikāļu attapšanas aktivitātes procentuālā daļa tika aprēķināta, izmantojot šādu formulu: inhibīcijas procenti =[(A0−A1)/A0] × 100 procenti, kur A0 ir radikāļu attapšanas aktivitāte. DPPH bez paraugiem (kontroles reakcija) un A1 ir DPPH absorbcija, kas inkubēta ar paraugiem. Visi testi tika veikti trīs eksemplāros, un Trolox tika izmantots kā pozitīvas kontroles līdzeklis.

maca ginseng cistanche

3.5. Sēņu tirozināzes inhibīcijas tests

Tirozināzes aktivitātes inhibīcija tika noteikta spektrofotometriski saskaņā ar iepriekš aprakstīto metodi [36] ar dažām modifikācijām. Īsumā, dažādas testa savienojumu koncentrācijas tika sagatavotas 10% DMSO. Katrs parauga šķīdums (20 μM) tika sajaukts ar L-Dopa (1,25 mM) un atšķaidīts ar 970 μL 0,05 mM nātrija fosfāta buferšķīduma (PBS, pH 6,8) mēģenēs. Reakcija tika uzsākta, pievienojot sēņu tirozināzi (25 U/ml). Reakcijas maisījumu inkubēja 5 minūtes istabas temperatūrā. Dopahroma daudzums maisījumā tika noteikts, mērot katras iedobes absorbciju pie 490 nm. Kojicskābe tika izmantota kā pozitīva kontrole. Tirozināzes inhibējošā procentuālā daļa tika aprēķināta saskaņā ar šādu vienādojumu: Procentuālā inhibīcija=[(A0-A1)/A0] × 100 procenti, kur A0 ir dopahroma absorbcija bez testa savienojumiem (kontroles reakcija) un A1. ir dopahroma absorbcija, kas inkubēta ar testa savienojumiem.

3.6. Kolagēna ražošana ar HDFa testu

HDFa šūnu līnija tika iegūta no Cascade Biologics. HDFa šūnas tika iesētas {{0}}iedobju plāksnēs, kas satur DMEM ar 10% FBS mitrinātā atmosfērā ar 5% CO2 37 grādu temperatūrā. Pēc 24 stundu inkubācijas šūnas tika apstrādātas ar testa paraugiem 72 stundas (37 grādi, 5 procenti CO2). TGF- tika izmantots kā pozitīvā kontrole. Barotne (50 µL) tika savākta no katras iedobes un sasaldēta -80 grādos, līdz tā tika pārbaudīta ar prokolagēna peptīda ELISA komplektu. Prokolagēna koncentrācija tika iegūta, izmērot absorbciju pie 450 nm mikroplašu lasītājā. Izņemiet no šūnām visu barotni un katrai iedobei pievienojiet 100 µL atšķaidīta MTS reaģenta. Reakciju inkubēja 40 minūtes 37 grādu temperatūrā. Absorbcija tika mērīta pie 490 nm ar mikroplašu lasītāju. Paaugstinātā kolagēna I ražošanas procentuālā daļa tika aprēķināta saskaņā ar šādu vienādojumu: šūnu dzīvotspēja (procentos) =(vidējais OD490 paraugs/vidējais OD490 kontrole); kolagēna ražošanas pieaugums procentos=(A1/B/A0 − 1) × 100 procenti . Kur A1 ir absorbcija ar paraugiem, A0 ir absorbcija bez paraugiem (kontroles reakcija), un B ir šūnu dzīvotspēja.

Pateicības Šo projektu finansiāli atbalstīja Junaņas provinces Zinātnes un tehnoloģiju departaments (nr. 2017ZF003-04, 2015HB093 un 2019HA001). Autori ir pateicīgi Rietumķīnas Valsts galvenās fitoķīmijas un augu resursu laboratorijas, Kunmingas Botānikas institūta, Ķīnas Zinātņu akadēmijas analītiskās grupas darbiniekiem par visu spektru mērījumiem.

cistanche portugal

Atbilstība ētikas standartiem

Interešu konfliktsAutori šajā manuskriptā neziņoja par potenciālu interešu konfliktu.

Atvērt piekļuviŠis raksts tiek izplatīts saskaņā ar Creative Commons Attribution 4.0 Starptautiskā licence, kas atļauj neierobežotu izmantošanu, izplatīšanu un reproducēšanu jebkurā datu nesējā, ja vien jūs piešķirat oriģinālam(-iem) autoru(-iem) un avotu. , norādiet saiti uz Creative Commons licenci un norādiet, vai ir veiktas izmaiņas.

Atsauces

1. D. Yang, ZQ Cheng, L. Yang, B. Hou, J. Yang, XN Li, CT Zi, FW Dong, ZH Liu, J. Zhou, ZT Ding, JM Hu, J. Nat. Prod. 81, 227–235 (2018)
2. XM Zhou, CJ Zheng, LS Gan, GY Chen, XP Zhang, XP Song, GN Li, CG Sun, J. Nat. Prod. 79, 1791–1797 (2016)
3. TB He, YP Huang, L. Yang, TT Liu, WY Gong, XJ Wang, J. Sheng, JM Hu, Int. J. Biol. Macromol. 83, 34–41 (2016)
4. Y. Hu, C. Zhang, X. Zhao, Y. Wang, D. Feng, M. Zhang, H. Xie, J. Nat. Prod. 79, 252–256 (2016)
5. WW Fan, FQ Xu, FW Dong, XN Li, Y. Li, YQ Liu, J. Zhou, JM Hu, Nat. Prod. Bioprospekts. 3, 89–92 (2013)
6. Y. Lin, F. Wang, LJ Yang, Z. Chun, JK Bao, GL Zhang, Phytochemistry 95, 242–251 (2013)
7. M. Moreti, L. Kosjani, F. Mesīna, L. Dominiči, M. Viljarīni, M. Kurīni, MC Marcotullio, Food Chem. 140, 660–665 (2013)
8. S. Šaroenrungruangs, P. Čanvorahote, B. Šritularaks, V. Pongrakhananons, Dž. Nats. Prod. 77, 1359–1366 (2014)
9. CC Chen, LG Wu, FN Ko, CM Teng, J. Nat. Prod. 57, 1271–1274 (1994)
10. Y. Deng, M. Li, LX Chen, XQ Chen, JH Lu, J. Zhao, SP Li, Carbohyd. Polim. 180, 238–245 (2018)
11. R. Li, T. Liu, M. Liu, F. Chen, S. Liu, J. Yang, J. Agric. Food Chem. 65, 3665–3674 (2017)
12. Flora Republicae Popularis Sinicae redakcijas komiteja (Academic Press. Beijing 19, 104 (1999))
13. Y. Lu, M. Kuang, GP Hu, RB Wu, J. Wang, L. Liu, YC Lin, Molecules 19, 8544–8555 (2014)
14. C. Zhang, SJ Liu, L. Yang, MY Yuan, JY Li, B. Hou, HM Li, XZ Yang, CC Ding, JM Hu, Fitoterapia 122, 76–79 (2017)
15. D. Yang, LY Liu, ZQ Cheng, FQ Xu, WW Fan, CT Zi, FW Dong, J. Zhou, ZT Ding, JM Hu, Fitoterapia 100, 11–18 (2015)
16. WW Fan, FQ Xu, FW Dong, XN Li, XY Wei, J. Zhou, JM Hu, Tetrahedron Lett. 54, 1928–1930 (2013)
17. FQ Xu, FC Xu, B. Hou, WW Fan, CT Zi, Y. Li, FW Dong, YQ Liu, J. Sheng, ZL Zuo, JM Hu, Bioorg. Med. Chem. Lett. 24, 5268–5273 (2014)
18. CL Chang, LJ Zhang, RY Chen, CC Wu, HC Huang, MC Roy, JP Huang, YC Wu, YH Kuo, Bioorg. Med. Chem. 18, 518–525 (2010)
19. J. Cai, C. Yang, T. Chen, L. Zhao, Nat. Prod. Res. Nat. Prod. Res. 32, 1600–1604 (2018)
20. Y. Li, CL Wang, YJ Wang, SX Guo, JS Yang, XM Chen, PG Xiao, Chem. Pharm. Bullis. 57, 218–219 (2009)
21. CL Chang, GJ Wang, LJ Zhang, WJ Tsai, RY Chen, YC Wu, YH Kuo, Phytochemistry 71, 271–279 (2010)
22. K. Šmejkal, L. Grycová, R. Marek, F. Lemjē, D. Jankovska, H. Forejtnikova, J. Vančo, V. Suchý, J. Nat. Prod. 70, 1244–1248 (2007)
23. D. Slade, D. Ferreira, JPJ Marais, Phytochemistry 66, 2177–2215 (2005)
24. PL Majumder, S. Chatterjee, Phytochemistry 28, 1986–1988 (1989)
25. PL Majumder, RC Sen, Phytochemistry 26, 2121–2124 (1987)
26. B. Sritularak, N. Duangrak, K. Likhitwitayawuid, Z. Naturforsch. C 66, 205–208 (2011)
27. YW Leong, CC Kang, LJ Harrison, AD Powell, Phytochemistry 44, 157–165 (1996)
28. PL Majumder, S. Pal, Phytochemistry 32, 1561–1565 (1993)
29. CF Xie, HQ Yuan, JB Qu, J. Xing, BB Lue, XN Wang, M. Ji, HX Lou, Chem. Bioloģiskā daudzveidība, 6, 1193–1201 (2009)
30. CQ Fan, WM Zhao, GW Qin, Chin. Chem. Lett. 11, 705–706 (2000)
31. Y. Tezuka, Y. Yoshida, T. Kikuchi, GJ Xu, Chem. Pharm. Bullis. 41, 1346–1349 (1993)
32. FMM Darwish, MG Reinecke, Phytochemistry 62, 1179–1184 (2003)
33. O. Demirkiran, T. Sabudak, M. Ozturk, G. Topcu, J. Agric. Food Chem. 61, 12598–12603 (2013)
34. KH Lee, FHA Aziz, A. Syahida, F. Abas, K. Shaari, DA Israf, NH Lajis, Eur. J. Med. Chem. 44, 3195–3200 (2009)
35. HI Choi, HJ Kim, JI Park, EH Shin, DW Kim, SS Kim, Bioorg. Med. Chem. Lett. 19, 2079–2082 (2009)
36. T. Sabudaks, O. Demirkiran, M. Ozturk, G. Topcu, Phytochemistry 96, 305–311 (2013)

Plašāka informācija: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Jums varētu patikt arī