Wenyang Tongbian granulu sagatavošanas tehnoloģija

Abstract:

MērķisNoteikt un optimizēt Wenyang Tongbian granulu sagatavošanas tehnoloģiju.

MetodesTika ekstrahēts ūdens novārījums. Par indeksiem tika izmantots ehinacejas glikozīda saturs monarhzālē un ražas savienojums. L9 (34) ortogonālais tests tika izmantots, lai optimizētu Wenyang Tongbian granulu ekstrakciju. Labākais formēšanas process tika optimizēts, pamatojoties uz granulēšanas grūtībām, formējamību un daļiņu iznākumu. Rezultāti Optimālā ekstrakcija ietvēra 10 ūdens pievienošanu un ekstrakciju 3 reizes, katru reizi 1 stundu. Labākais veidošanās process: palīgmateriāla veids bija dekstrīns, palīgvielu attiecība bija 1∶0,9, un labākais mitrinātājs bija 85% etanols. Secinājums Ekstrakcijas un formēšanas process ir stabils un saprātīgs, vienkāršs un iespējams, ar labu reproducējamību, kas var nodrošināt pamatu Wenyang Tongbian granulu rūpnieciskai ražošanai.

Atslēgvārdi: Wenyang Tongbian granulas; ortogonālais tests; ieguve; molding

JAUNS AUGU SASTĀVS NIERĒMJANG TRŪKUMS

Wecistanche atbalsta dienests

E-pasts:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel.:+86 15292862950

Jang deficīta aizcietējumsir izplatīta gados vecākiem cilvēkiem un sievietēm. Ārstēšanas metodei nevajadzētu būt vienkāršai attīrīšanai. Ar Warming Yang metodi var sasniegt labus rezultātus [1]. Wenyang Tongbian Granules ir slimnīcas preparāts, kas izstrādāts, pamatojoties uz Hubei provinces tradicionālās ķīniešu medicīnas slimnīcas profesora Lina Aizhena klīnisko pieredzi, ārstējot funkcionālu aizcietējumu gados vecākiem cilvēkiem. Tas sastāv no Cistanche deserticola, kanēļa mizas, astragalus un Atractylodes macrocephala. Formulā Cistanche deserticola ir nieres yang tonizējoša un labvēlīga būtība un asinis, un tā ir galvenā zāle, kas sasilda janu; kanēļa mizai ir meridiānu sildīšanas un asinsvadu atbloķēšanas, uguns papildināšanas un jan atbalsta funkcijas; astragalus veic jaņ audzināšanas un cji papildināšanas funkcijas, savelk čūlas un veicina audu reģenerāciju; un Atractylodes macrocephala funkcijas ir liesas stiprināšanas un qi papildināšanas, mitruma žāvēšanas un diurēzes veicināšanas funkcijas.

Pētījumi liecina, ka feniletanola glikozīdi ir galvenās Cistanche deserticola aktīvās sastāvdaļas [2]. Starp tiem ehinakozīds un verbaskozīds ir raksturīgās sastāvdaļas Cistanche deserticola kvalitātes kontrolei, kā norādīts Ķīnas farmakopejā. Liu Xianhong et al. [3] in vivo pētījumos ar cilvēkiem secināja, ka Cistanche deserticola ir piemērota aizcietējuma klīniskai ārstēšanai un var ārstēt gan simptomus, gan galveno cēloni. Galvenās kanēļa mizas ķīmiskās sastāvdaļas ir gaistošās eļļas, polisaharīdi, flavonoīdi utt. Mūsdienu farmakoloģiskie pētījumi ir parādījuši, ka kanēļa mizai ir farmakoloģiska iedarbība, piemēram, vazodilatācija, pretkuņģa čūla un antibakteriāla iedarbība [4]. Astragalus polisaharīdi, flavonoīdi un astragalozīds IV ir galvenās ķīmiskās sastāvdaļas, kurām ir imūnmodulējoša iedarbība [5]. Atractylodes macrocephala stiprina liesu un regulē zarnu floras traucējumus, un to var klīniski izmantot kuņģa-zarnu trakta disfunkcijas ārstēšanai [6]. Oriģinālo recepti galvenokārt izmanto ķīniešu medicīnas novārījumos, taču tai ir trūkumi, piemēram, neērtības novārījumā, lielas devas un neērtības pārnēsāšanā. Lai šo klīniskās pieredzes recepti plaši izmantotu klīniskajā praksē, tā tika izstrādāta granulās. Šajā eksperimentā kā indikatori tika izmantota pastas iznākums un ehinakozīda, galvenās zāles galvenās aktīvās sastāvdaļas saturs, turpināts izmantot tradicionālo ūdens novārīšanas procesu, kā arī izmantota ortogonālā testa metode L9 (34), lai optimizētu pievienotā ūdens daudzumu. , novārīšanas laiks un novārīšanas laiks ekstrakcijas procesā, lai iegūtu vislabāko ekstrakcijas procesu. Vienlaikus tika pētīts granulu formēšanas process, lai noteiktu stabilu un saprātīgu formēšanas procesu, nodrošinot atsauci preparāta izmēģinājuma ražošanai, kvalitātes kontrolei un klīniskai pielietošanai [7-8].

1 Instrumenti un reaģenti

1.1 Instrumenti

Alianse e2695augstas veiktspējas šķidruma hromatogrāfs, 2998 diodes matricas detektors (Waters, ASV), ES225SMDR 1/100, 000 analītiskais svars (Precisa, Šveice), UPT-11-10T īpaši tīra ūdens iekārta (Shenzhen UPT Technology Co., Ltd.), KQ-500VDE divu frekvenču CNC ultraskaņas tīrītājs (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.).

1.2. Izmēģinājuma zāles

Vīna Cistanche šķēles(partijas numurs: 2322050113, ražots Iekšējā Mongolijā), kanēļa šķēles (partijas numurs: 2323020103, ražots Guangxi), astragalus šķēles (partijas numurs: 2323020105, ražots Gansu), Atractylodess macrocephalatchs1,0 ang ) (Hubei Chenmei Chinese Medicine Co., Ltd., visas šķēles kā autentiskas ir identificējis Chen Shuhe, Institūta galvenais farmaceitsTradicionālā ķīniešu medicīnaHubei provinces tradicionālās ķīniešu medicīnas slimnīcas, un ir kvalificēti saskaņā ar 2020. gada izdevumu.ķīniešu FarmakopejaI daļa). Ehinakozīda standartviela(partijas numurs: 111670-201907, tīrība: 91,8%, Ķīnas pārtikas un zāļu inspekcijas pētījumi).

Dekstrīns (sērijas numurs: 230102), kukurūzas ciete (sērijas numurs: 221008) (Henan Zhenghong Pharmaceutical Excipients Co., Ltd.), saharoze (sērijas numurs: TF28221205), mikrokristāliskā celuloze (partijas numurs: TF471211:0) TF463Y230101) (Hunan Jiudian Hongyang Pharmaceutical Co., Ltd.).

2 Metodes un rezultāti

2.1. Ehinakozīdu satura noteikšana

2.1.1. Hromatogrāfiskie apstākļi: kā hromatogrāfijas kolonna tika izmantota Agilent 5 TC-C18 (250 nm × 4,6 mm, 5 μm); kā kustīgā fāze A tika izmantots metanols, kā kustīgā fāze B tika izmantots 0,1% skudrskābes šķīdums, gradienta eluēšana (0-17 min, 26,5%A; 17-20 min, 26,5% → 29,5%A; 20-54 min,

29,5%A, 54-55 min, 29,5% → 26,5%A; 55-60min, 26,5%A); plūsmas ātrums 1.0 mL·min-1; kolonnas temperatūra 30 grādi ; diožu matricas detektors, noteikšanas viļņa garums 330 nm; injekcijas tilpums 10μL; teorētiskajam numura zīmes numuram, kas aprēķināts, pamatojoties uz ehinakozīda maksimumu, nevajadzētu būt mazākam par 3000[9].

2.1.2. Standartšķīduma sagatavošana

Paņemiet atbilstošu ehinakozīda daudzumu, precīzi nosveriet 9,65 mg, ievietojiet to 25 ml mērkolbā, pievienojiet 50%.

metanolu, lai izšķīdinātu un atšķaidītu līdz atzīmei kā standartšķīdumu. Precīzi pipetē 1 ml ehinakozīda izejas šķīduma 25 ml mērkolbā, pievienojiet 50% metanolu, lai atšķaidītu līdz zīmei, labi sakratiet un sagatavojiet standartšķīdumu, kas satur 14,17 ug uz 1 ml [9].

2.1.3. Testa šķīduma sagatavošana

Paņemiet apmēram 0,5 g sausa pastas pulvera, sasmalciniet to pulverī, precīzi nosveriet, ievietojiet brūnā koniskā pudelē ar aizbāzni, precīzi pievienojiet 50 ml 50% metanola, cieši aizveriet to, labi sakratiet, nosver, apstrādā ar ultraskaņu 40 minūtes (jauda 250 W, frekvence 45 kHz), ļauj atdzist, nosver vēlreiz, pievieno 50% metanola, lai kompensētu zaudēto svaru, kārtīgi sakratiet, ļaujiet nostāvēties, paņemiet supernatantu, filtrē un ņem filtrātu.

2.1.4. Negatīvā parauga šķīduma sagatavošana

Ņemiet apmēram 0,5 g sausā pastas pulvera ar formulu bez vīna Cistanche ārstnieciskajiem materiāliem un sagatavojiet negatīvā parauga šķīdumu saskaņā ar 2.1.3. punktā norādīto metodi.

2.1.5. Specifiskuma pārbaude

Precīzi ar pipeti iepilina attiecīgi testa šķīdumu, salīdzināmo šķīdumu un negatīvā parauga šķīdumu un mēra saskaņā ar hromatogrāfijas apstākļiem saskaņā ar "2.1.1.". Reģistrē hromatogrammu. Rezultāti ir parādīti 1. attēlā. Negatīvā paraugā nav traucējumu. Rezultāti liecina, ka metodei ir laba specifika.

1. attēls Wenyang Tongbian granulu specifiskā hromatogramma

2.1.6. Lineāro attiecību izpēte

Paņemiet atbilstošu ehinakozīda daudzumu, precīzi nosveriet to līdz 10,11 mg, ievietojiet to 25 ml mērkolbā, pievienojiet 50% metanolu, lai to atšķaidītu salīdzināmā šķīduma koncentrāciju sērijā, un injicējiet to saskaņā ar hromatogrāfijas nosacījumiem sadaļā "2.1. .1", lai noteiktu ehinakozīda pīķa laukuma vērtību. Uzzīmējiet standarta līkni ar ehinakozīda atsauces injekcijas daudzumu kā horizontālo asi (ug, X) un pīķa laukuma integrālo vērtību kā vertikālo asi (Y), un veiciet lineāro regresiju.

Regresijas vienādojums ir Y=1.294×104X - 4.931×104, r=0.9997. Rezultāti liecina, ka ehinakozīda injekcijas daudzuma maksimālā laukuma integrālā vērtība ir labā lineārā sakarībā starp 1,4850 un 371,2392 ug.

2.1.7. Precizitātes pārbaude

Precīzi aspirējiet 10 μL salīdzināmā šķīduma (masas koncentrācija 37,12 ug·mL–1) zem "2.1.6", injicējiet 6 reizes, pierakstiet attiecīgi ehinakozīda pīķa laukuma vērtību un aprēķiniet RSD vērtību, kas ir 1,1%, norādot ka instrumentam ir laba precizitāte.

2.1.8. Atkārtojamības pārbaude

Paņemiet to pašu sauso pastu, sasmalciniet to pulverī, precīzi nosveriet 6 porcijas, no kurām katra ir apmēram 0,5 g, un ievietojiet tās brūnā koniskā pudelē ar aizbāzni. Izvelciet saskaņā ar 2.1.3. punktā norādīto metodi, nosakiet saturu un aprēķiniet. Rezultāti liecina, ka vidējais ehinakozīda saturs paraugā ir 1,46 mg·g–1, un RSD vērtība ir 2,7%, kas liecina, ka šīs metodes atkārtojamība ir laba.

2.1.9. Stabilitātes pārbaude

Paņemiet to pašu parauga šķīdumu, precīzi paņemiet 10 μL un injicējiet to attiecīgi 0, 2, 4, 8, 12, 18 un 24 stundu laikā. Maksimālā laukuma RSD vērtība ir 0,71%, kas norāda, ka parauga šķīdumam ir laba stabilitāte 24 stundu laikā.

2.1.10. Parauga atkopšanas pārbaude

Precīzi nosveriet 6 vienas un tās pašas testa paraugu partijas porcijas, katra 0,24 g, un ievietojiet tās brūnā koniskā pudelē ar aizbāzni. Saskaņā ar komponentu masas attiecību 1:1 testa paraugā, precīzi pievienojiet 0,9 ml ehinakozīda standartvielas (masas koncentrācija ir 371,24 ug·mL－ 1) zem "2.1.6". sagatavo testa šķīdumu saskaņā ar 2.1.3. punktā minēto metodi, nosaka ehinakozīda hromatogrāfiskās pīķa laukumu un aprēķina saturu. Rezultāti liecina, ka ehinakozīda vidējais atgūšanas rādītājs ir 101,09%, bet RSD vērtība ir 1,6%.

2.2. Eksperimentu plāns un novērtēšanas rādītāji

Kā pētāmie faktori tika izvēlēts pievienotā ūdens daudzums (A), ekstrakcijas laiks (B) un ekstrakciju skaits (D). Trīs faktoru līmeņi tika noteikti saskaņā ar iepriekšējā viena faktora pētījuma rezultātiem, skatīt 1. tabulu. Eksperimentā tika izmantota ortogonālā testa tabula L9 (34), sk. 2. tabulu. Testā tika izmantota pastas iznākums un ehinakozīda saturs. kā novērtējuma indikatorus, lai izpētītu optimālo ūdens ieguves procesu.

1. cilne Ortogonālā testa faktors un līmenis

2.2.1. Ortogonālais tests

Atbilstoši receptes proporcijai nosver 18 porcijas katras ārstnieciskās garšas, katra pa 55 g, un veic ūdens novārījumu ekstrakciju saskaņā ar ortogonālās konstrukcijas shēmu 2. tabulā. Katrai grupai ir 2 paralēlas porcijas. Novārījumu filtrē caur 80-tīkla sietu, filtrātu apvieno, atdzesē, izmēra novārījuma tilpumu, 50 ml precīzi pipetē iztvaicēšanas traukā, kas ir konstanti nosvērts, iztvaicē līdz sausumam. un žāvē pazeminātā spiedienā 60 grādu temperatūrā, lai iegūtu ortogonālu eksperimentālā parauga sauso pastu. Aprēķiniet pastas iznākumu (pastas iznākums=(sausās pastas svars × zāļu šķidruma tilpums) / (50 × novārījuma gabala svars) × 100%). Saskaņā ar hromatogrāfijas apstākļiem saskaņā ar "2.1.1" un "2.1.3" metodi, tika noteikts attiecīgi ehinakozīda ekstrakcijas daudzums 9 ortogonālo testa ekstraktu grupās. Ehinakozīda ekstrakcijas daudzums=sausās pastas svars × ehinakozīda saturs/vīns Cistanche novārījuma gabala svars. Visaptverošs vērtējums=ehinakozīda saturs ÷ maksimālais saturs × 0,5 × 100% + pastas iznākums ÷ maksimālā pastas iznākums × 0,5 × 100% [10]. Rezultāti ir parādīti 2. tabulā.

Kā parādīts 3. tabulā, ņemot vērā pastas iznākumu un ehinakozīda satura visaptverošo punktu skaitu kā novērtēšanas rādītājus, diapazona R vērtība tabulā parāda, ka katra faktora primārā un sekundārā ietekme ir D > B > A; dispersijas analīzes rezultāti liecina, ka D faktors (novārījumu laiki) ir statistiski nozīmīgs (P < 0.05), un ir izvēlēts D3 līmenis; A faktors (ūdens pievienošana) un B faktors (novārīšanas laiks) nav statistiski nozīmīgi (P > 0,05). Ņemot vērā, ka šajā preparātā esošo ārstniecisko materiālu ūdens uzsūkšanās ātrums ir salīdzinoši augsts (155%), un kopā ar tādiem faktoriem kā faktiskās ražošanas vajadzības, optimālie ekstrakcijas apstākļi tiek izvēlēti kā A2B1D3, tas ir, pievienojot 10 reizes ūdeni, novārot. 3 reizes, katru reizi 1 stundu.