Cilvēka ādas šūnu signalizācijas molekulas kā injekciju kosmetoloģijas mērķi

Lūdzu sazinietiesoscar.xiao@wecistanche.comlai iegūtu vairāk informācijas

Ievads:Ādas novecošanās ir dabisks process, kuru nevar apturēt. Tomēr ir daudzi veidi, kā palīdzēt mazināt priekšlaicīgu ādas novecošanos un mazināt jau parādījušās pazīmes. Viens no tiem ir hialuronskābes, aktīvo aminoskābju un peptīdu kombināciju saturošu preparātu subkutāna ievadīšana, nodrošinot pretnovecošanās klīnisko efektu. Šī pētījuma mērķis ir in vitro izpētīt jaunas signālmolekulas ar pretnovecošanās iedarbību un hialuronskābes pildvielu ietekmi uz to ekspresiju.

Metodes:Pētījums tika veikts, izmantojot cilvēka sejas ādas šūnu kultūras: 1) cilvēka sejas ādas keratinocītu un fibroblastu jaukto kultūru un 2) cilvēka sejas ādas keratinocītu kultūru, kas bagātināta ar Merkeles šūnām. Lai identificētu novecošanās marķierus, tika izmantota imūncitoķīmija, konfokālā mikroskopija un Western blot.

Rezultāti:HA-Y un HA-S aktivizēja Klotho ekspresiju cilvēka ādas keratinocītu un Merkeles šūnu jauktās kultūras novecošanas gadījumā. MTH-1 ekspresijas palielināšanās līdz ar kultūru novecošanos liecina par aizsardzības mehānismu aktivizēšanu pret reaktīvām skābekļa sugām, kas uzkrājas novecojot HA-S un HA-Y ietekmē. Pievienojot kultivētajām šūnām gan HA-S, gan HA-Y, tika konstatēts statistiski pamatots melatonīna receptoru 1A un 1B marķieru ekspresijas apgabala pieaugums.

Secinājums:Šis pētījums parādīja, ka pētītajiem pildvielām ir bioloģiska iedarbība, kas liecina par reparatīvo procesu stimulēšanu ādā to kontrolē. Atslēgas vārdi: ādas novecošanās, hialuronskābe, aktīvās aminoskābes, kolagēns, reparatīvie procesi, klots, pulkstenis, Merkeles šūnas

Ievads

Ik gadu tirgū parādās neskaitāmi kosmētikas līdzekļi, taču tikai daži ir radīti, balstoties uz jaunākajiem zinātnes un tehnikas sasniegumiem, izmantojot zināšanas ādas fizioloģijā un bioķīmijā un sarežģītās starpšūnu mijiedarbībās.puritāni c vitamīnsMūsdienu inovatīvās kosmētikas galvenās sastāvdaļas ir augu ekstrakti un sastāvdaļas, kas iegūtas, izmantojot biotehnoloģijas un bioinženierijas metodes, tostarp peptīdus, peptīdu kompleksus, oligo- un polisaharīdus, vitamīnus, fermentus un antioksidantus. Novacutan" medicīnas produktu inovācija sastāv no tehnoloģiskā risinājuma ar nosaukumu HOPAAB (Hyaluronate Optically Pure Amino Acid Bond), hialuronskābes, aktīvo aminoskābju un peptīdu kombinācijas. HOPAAB ir optiski tīru aminoskābju komplekss, kas iebūvēts tīkla struktūrā. hialuronskābes, kas aktivizē signalizācijas molekulu ekspresiju, izraisot izmaiņas vielmaiņā, funkcijās un bojāto šūnu attīstībā.Hialuronskābe ir unikāls biopolimērs ar hidrofilām īpašībām un mitrinošu iedarbību uz ādu.

Lūdzu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

Geriatri paredz, ka līdz 2030. gadam Krievijā tiks pagarināts dzīves ilgums no pašreizējiem 73,5 gadiem līdz 80,1 gadam. Fiziskās pievilcības zudums bieži noved pie pašcieņas un dzīves kvalitātes pazemināšanās, īpaši 35-60 gadu vecumā, un cilvēku grupa ir visvairāk ieinteresēta sava izskata uzlabošanā. HA-Y un HA-S tiek ievadītas dažādām vecuma grupām: kamēr HA-Y var lietot jaunākiem pacientiem no 25 gadu vecuma, lai cīnītos pret tumšajiem lokiem zem acīm un uzlabotu ādas mitrināšanu, HA-S ar dubultu koncentrāciju aminoskābes, cīnās pret grumbām un nodrošina liftinga efektu, un to var lietot pacientiem no 35 līdz 65 gadiem.

HA-Y un HA-S preparātu ietekmes uz dažādiem vides oksidatīvā stresa novecošanās marķieriem (zilās gaismas, UVA/UVB, pilsētas putekļu un IR iedarbības) izpēte tika veikta neatkarīgā laboratorijā Beļģijā (StratiCELL SA). Oksidatīvā stresa pētījumu mērķis ir izcelt iespējamos aizsargājošos efektus, izmantojot dažādus izaicinošus apstākļus divos modeļos, ex vivo cilvēka ādas eksplantātos un normālu cilvēka dermas fibroblastu (NHDF) in vitro monoslāņu kultūrās. Testa produktu aizsargājošā iedarbība tika novērtēta pret ciklobutēna pirimidīna dimēru (CPD) daudzuma palielināšanos ex vivo ādas eksplantu epidermas daļā pēc UVA/UVB starojuma; zilās gaismas ietekme uz gēnu ekspresiju no NHDF fibroblastiem; piesārņojošo vielu (Urban dust, UbD) ietekme uz gēnu ekspresiju NHDFs fibroblastos; un NHDF fibroblastu reaktīvo skābekļa sugu (ROS) ražošanas palielināšanās pēc infrasarkanā-A starojuma. Šīs izpētes laikā atklājas daži interesanti atklājumi, piemēram, labvēlīga ietekme pret zilās gaismas izraisītu HA pildvielu oksidatīvo stresu; DNS bojājumu izraisošā transkripta 3 proteīna (DDIT-3) regulēšana pilsētas putekļu testos utt.

HA pildvielas satur aktīvās sastāvdaļas, kuru klīniski efektīvas ir labi dokumentētas.sistanchePiemēram, brīvās aminoskābes veicina ādas ūdens un olbaltumvielu līdzsvara uzlabošanos, saglabājot ādas elastību. Peptīdiem ir revitalizējošs efekts uz bojātu ādu, savukārt mitrinošu komponentu ievadīšana rada gaidīto mitrinošo efektu, kā rezultātā āda nostiepjas un uzlabojas sejas krāsa.3

Peptīdi ir ievērojams daudzfunkcionālu līdzekļu piemērs, ko plaši izmanto pasaules vadošie kosmētikas ražotāji. Peptīdi ne tikai efektīvi cīnās pret ar vecumu saistītām izmaiņām ādā, bet arī nodrošina aizsardzību pret kaitīgiem faktoriem.

Šī pētījuma mērķis ir izpētīt viena injicējamā HA bāzes produkta (iepakots šļircē kā sterils lietošanai gatavs šķīdums) ietekmi uz signālmolekulu potenciālo geroprotektoru ekspresiju sejas ādas šūnu kultūrās.

Materiāli un metodes

Pētījums tika veikts, izmantojot cilvēka sejas ādas šūnu kultūras:1-cilvēka sejas ādas keratinocītu un fibroblastu jauktu kultūru un 2-cilvēka sejas ādas keratinocītu kultūru, kas bagātināta ar Merkeles šūnām. Otrais modeļa objekts tika izvēlēts tā unikālās apakšpopulācijas dēļ. Merkeles šūnas ir neiroendokrīnas ādas šūnas, kas lokalizētas matu folikulu ārējos slāņos, epidermas spi-nous un bazālajā slāņos, kā arī gļotādās. Merkeles šūnu endokrīnās funkcijas ir saistītas ar dažādiem augšanas faktoriem un tur lokalizētiem neiropeptīdiem. Tā kā Merkeles šūnas satur bombesīnu, vazoaktīvus zarnu polipeptīdus, nervu augšanas faktorus un met-enkefalīnu, tām ir trofiska ietekme uz augošajiem ādas piedēkļiem un nerviem.

cistanche var pret novecošanos

Šūnu kultūras tika iegūtas no pieaugušo ādas paraugiem, kas iegūti apļveida sejas liftinga operāciju laikā (sievietēm, kas dzimušas 1973., 1971. un 1967. gadā). Sanktpēterburgas Bioregulācijas un gerontoloģijas institūta Ētikas komiteja apstiprināja visus pētījuma plāna aspektus, un no visiem dalībniekiem tika saņemta rakstiska piekrišana. Pētījums tika veikts saskaņā ar Helsinku ētikas principu deklarāciju. Lai novērtētu vecuma marķieru izpausmi, kultivēšana tika veikta 2. pasāžā ("jaunās" šūnas) un 6. pasāžā ("vecās" šūnas) jauktai keratinocītu un fibroblastu kultūrai un 1. un 3. pasāžai kultūrai, kas bagātināta ar Merkeles šūnas. Šie kontrolpunkti tika izvēlēti, jo ir grūti uzturēt Merkeles šūnas un keratinocītus kultūrā un to ierobežoto proliferācijas potenciālu.

Hialuronskābes pildviela Y (HA-Y) (2,3 procentu 1,4 MDa nesašūta HA ūdens šķīdums, kas satur arginīnu, valīnu, treonīnu, fenilalanīnu, glicīnu, glutamīnskābi, prolīnu un metionīnu); un hialuronskābes pildviela S (HA-S) (2,3% ūdens šķīdums ar 1,4 MDa nesaistītu HA, kas satur arginīnu, valīnu, treonīnu, fenilalanīnu, glicīnu, glutamīnskābi, prolīnu un metionīnu). Līdzeklis tika ievadīts sākot no 1. pasāžas. Lai noteiktu optimālo koncentrāciju HA pildvielas analīzei, tika veikts sākotnējais devas noteikšanas eksperiments.kas ir cistancheSaskaņā ar šūnu dzīvotspējas mērījumiem 3 procenti HA pildvielas tika izvēlēti no piecām koncentrācijām. Aģents tika ievadīts katrā ejā.

Pētījums ietvēra 3 grupas:

1-kontroles grupa (vidēja=hialuronskābe);2-HA-Y ievadīšana; 3-HA-S administrēšana.

Imūncitoķīmiskā analīze

Imunocitoķīmiskajai izmeklēšanai tika izmantotas šādas primārās monoklonālās antivielas: I tipa kolagēns (1:150, Abcam), elastīns (1:50, Abcam), AP-1(1:200, Sigma), Klotho (1: 250, Abcam), MTH-1 (1:1000, Abcam), melatonīna receptors 1A (1:200, Abcam), melatonīna receptors 1B (1:100, Abcam), pulkstenis (1:100, Abcam). ), citokeratīns 20 (1:150, Dako). Imunofluorescējošajai mikroskopijai tika izmantotas sekundārās antivielas, kas konjugētas ar Alexa Fluor 488 un 647 (1:1000, Abcam). Konfokālā mikroskopija tika veikta, izmantojot Olympus FV 1000 mikroskopu (Japāna).

Tā kā izmeklēšana bija saistīta ar unikālām dermālām Merkel šūnām, lai apstiprinātu šo šūnu subpopulācijas esamību kultūrā, mēs izmantojām īpašu marķieri citokeratīnu-20. Mēs izmantojām dubultās marķēšanas metodi, izmantojot antivielas pret citokeratīnu-20 (zaļā fluorescence) un antivielas pret Klotho (sarkanā fluorescence). Ekspresijas apgabals tika aprēķināts saistībā ar Merkeles šūnām, kas bija imūnpozitīvas pret CK-20 šūnām.

Western Blot analīze

Visas šūnas tika lizētas uz ledus ar subcelulāro proteīna frakcionēto komplektu, kas satur proteāzes inhibitoru kokteili (Thermo Fisher, ASV). Olbaltumvielu lizāti tika atdalīti ar nātrija dodecilsulfāta-poliakrilamīda gēla elektroforēzi (SDS-PAGE) un pārnesti uz nitrocelulozes membrānām (Invitrogen, ASV). ).

Membrāna tiek bloķēta ar komerciālu iBindTM risinājumu komplektu (Invitrogen, ASV) un pēc tam 2 stundas inkubēta ar primārajām un sekundārajām antivielām, izmantojot ierīci iBind (Invitrogen, ASV). Šajā pētījumā tika izmantotas trušu anti-Klotho (1:1000, Abcam), trušu anti-AP-1(1:500, Sigma), trušu anti- -aktīnas (1:5000, Abcam). )un mārrutku peroksidāzes-(HRP-) konjugētā sekundārā antiviela (anti-trušu IgG;1:10000; Invitrogen). Katras joslas intensitāti noteica iBright Analysis Software (Invitrogen).

Eksperimentālo datu statistiskā analīze ietvēra vidējā aritmētiskā, standarta novirzes un ticamības intervālu aprēķināšanu katrai izlasei. Grupu salīdzināšana tika veikta, izmantojot Mann-Whitney U-kritēriju.

Uz HA balstītu pildvielu geroprotektīvo īpašību in vitro izpētes rezultāti

Ar Merkeles šūnām bagātinātu cilvēka ādas kultūru veiktās izmeklēšanas rezultāti

Ar ilgāku kultivēšanas laiku ar CK-20 marķēto šūnu forma 3-8 dienās mainījās no noapaļotas uz plakanāku un dendrītiskāku. 8 dienu laikā pēc kultivēšanas sākuma Merkeles šūnām nebija nekādu apoptozei raksturīgu kodola dezorganizācijas pazīmju.

Morfometriskās analīzes datu statistiskā apstrāde Klotho marķiera ekspresijai kontroles grupā (ar ievadītu hialuronskābi) neuzrādīja nekādas atšķirības starp 1. un 3. fragmentu. Ar HA-S ievadīšanu 1. pasāžā ekspresijas apgabals bija 5,28±0,74 procenti, savukārt 3. pārkāpumā tas gandrīz dubultojās līdz 9,23±0,89 procentiem. Līdzīga aina tika novērota grupā ar HA-Y ievadīšanu, kur Klotho ekspresija ar novecošanos palielinājās 2 reizes. Tādējādi HA-Y un HA-S aktivizēja Klotho ekspresiju cilvēka ādas keratinocītu un Merkeles šūnu jauktās kultūras novecošanas gadījumā.

Vēl viena signalizācijas molekula, kas novērš novecošanos, ir melatonīns (MT).Pretnovecošanās cistancheSvarīga melatonīna iezīme ir tā spēja kontrolēt šūnu dalīšanos. MT kavē šūnu mitozi, aizkavējot dalīšanās metafāzi.

Mēs arī pētījām melatonīna receptoru ekspresiju. Pievienojot kultivētajām šūnām gan HA-S, gan HA-Y, tika konstatēts statistiski pamatots melatonīna receptoru 1A marķiera ekspresijas apgabala pieaugums.

Zemāk ir mikrofotogrāfijas (1. attēls), kas parāda melatonīna receptoru 1A marķiera ekspresiju. Jāatzīmē, ka sarkanā fluorescence tika novērota ne tikai Merkeles šūnās, bet arī keratinocītos, lai gan vairāk tā bija izteikta Merkeles šūnās, kurām bija trofiska iedarbība uz augošajiem ādas piedēkļiem un nerviem.

Datu analīze par melatonīna receptoru 1B relatīvo ekspresijas apgabalu parādīja, ka 1. pasāžā nebija statistiski ticamu atšķirību starp kontroles grupu un HA-Y/HA-S ievadīto grupu, turpretim 3. fragmentā relatīvā atšķirība. receptora MelRIB marķiera ekspresijas laukums palielinājās par 4 procentiem līdz ar cilvēka fibroblastu un keratinocītu jauktās kultūras veiktās izmeklēšanas rezultātiem

Nākamais izmeklēšanas posms bija jauno HA-Y un HA-S medikamentu geroprotektīvo īpašību pārbaude cilvēka fibroblastu un keratinocītu jauktajā kultūrā. Pētījumam tika atlasīti šādi imūnhistoķīmiskie marķieri: elastīns, Klotho, MTH1, AP-1, pulkstenis (dati 1. tabulā).

Lai izpētītu šūnu sintētisko aktivitāti, tika izmantotas antivielas pret elastīnu. Elastīgo šķiedru izmaiņas ir raksturīgākās fotovecojošai ādai.

Normālā stāvoklī (kontroles grupa) ar ādas kultūras novecošanos tika novērota elastīna ekspresijas samazināšanās cilvēka ādas fibroblastos. Grupās ar HA-Y un HA-S ievadīšanu tika novērota līdzīga aina, tomēr elastīna marķiera ekspresija "jaunākām" šūnu kultūrām ar HA-Y un HA-S pārsniedza ekspresiju kontroles paraugos par {{ 4}}.17 un 0.26 reizes, attiecīgi. Tika arī statistiski pamatots elastīna ekspresijas laukuma pieaugums "vecāku" šūnu kultūru paraugiem ar HA-Y un HA-S attiecīgi {{10}},14 un 0,19 reizes, kā salīdzinot ar kontroles paraugiem.

HA-Y un S iedarbība cilvēka ādas fibroblastu un keratinocītu jauktajā kultūrā izraisa šūnu sintētisko aktivitāti, par ko liecina augstāka elastīna ekspresija gan 3., gan 6. pasāžā (2. attēls).

AP{{0}} jeb aktivatorproteīns-1 ir transkripcijas faktors, kas regulē gēnu ekspresiju, reaģējot uz dažādiem stimuliem. Šādi stimuli ir citokīni, augšanas faktori, stress un dažādas baktēriju un vīrusu infekcijas. '6 Šis pētījums parādīja statistiski pamatotu AP-1 vidējā ekspresijas laukuma pieaugumu "vecāku" šūnu kultūru kontroles paraugos, salīdzinot ar "jaunākām" šūnu kultūrām; turpretim eksperimentālajās grupās, kultūrai novecojot, tika novērota AP-1 marķiera ekspresijas samazināšanās par 0,2 reizes HA-Y gadījumā un 0,24 reizes HA-S gadījumā , salīdzinot ar kontroles grupu.

Bija arī statistiski pamatots MTH{{0}} izteiksmes laukuma pieaugums "vecāku" šūnu kultūru paraugiem ar HA-Y un HA-S par 0.1{{12 }} un 0,11 reizes attiecīgi, salīdzinot ar kontroles paraugiem. Augstāka MTH-1 ekspresija "vecākās" kultūrās nodrošina peroksīdu (H2O2). Relatīvā Kloto ekspresijas laukuma analīze cilvēka fibroblastu un keratinocītu jauktajā kultūrā atklāja statistiski ticamu Kloto ekspresijas vidējā laukuma palielināšanos "vecākās" šūnu kultūrās ar HA-Y un HA-S attiecīgi par 0,72 un 0,73 reizēm. , salīdzinot ar kontroles paraugiem. Šie rezultāti tika apstiprināti ar Western blot analīzi. Olbaltumvielu ekspresijai bija tāds pats režīms, kā parādīts 3. attēlā. Augstāka Klotho ekspresija HA-Y un HA-S ietekmē liecina par paaugstinātu izturību pret oksidatīvo stresu, kas ir īpaši svarīgi novecošanās profilaksei un UV iedarbībai. .

Veicot imūncitoķīmisko analīzi, CLOCK marķieris tika vizualizēts fibroblastu citoplazmā. Kontrolparaugos novēroja statistiski pamatotu relatīvā CLOCK ekspresijas laukuma samazināšanos novecojošo fibroblastu šūnu kultūrā, turpretim, ja šūnu kultūrām pievienoja HA-Y un HA-S, atšķirība starp "jaunākām" un "vecākām" kultūrām. izlīdzināts. Tika arī konstatēts, ka, kultivējot fibroblastus barotnē ar HA-Y, relatīvais ekspresijas laukums 6. pasāžā palielinājās par 1,9 reizes, salīdzinot ar kontroles grupu. HA-S bija šāda ietekme uz fibroblastu kultūru: tā ievadīšana palielināja CLOCK izteiksmi 1,5 reizes 3. fragmentā un 2 reizes 6. fragmentā.

Diskusija

Saskaņā ar pētījumu "Viltoti izstrādājumi estētiskajā medicīnā: skats uz ārstu un patērētāju" (2019, veikts ar Merz Russia un BrandMonitor piedalīšanos), eksperti lēš, ka viltotu preču tirdzniecība ir 200 miljoni ASV dolāru. Viltoti izstrādājumi ražotājiem rada ne tikai zaudējumus, bet arī var radīt neatgriezenisku kaitējumu veselībai. Tāpēc ir ļoti svarīgi laist klajā jaunu Krievijas injekciju revitalizatoru, kas pārbaudīts vadošajās Beļģijas un Krievijas laboratorijās.

Zemāk uzskaitītie šajā darbā pētīto marķieru raksturlielumi ietver geroprotektīvo iedarbību, to ietekmi uz ādas homeostāzi un to ekspresijas izmaiņas, ko izraisa HA-Y un HA-S preparāti.

HA pildvielu ievadīšana palielina Klotho proteīna ekspresiju Merkeles šūnu un keratinocītu kultūrā. Tā kā šis proteīns palielina izturību pret oksidatīvo stresu un regulē šūnu ciklu, tā augstāka ekspresija ir labvēlīgs faktors, kas palēnina novecošanās procesu šūnu kultūrā. Klotho ir transmembrānas proteīns; tā pārmērīga ekspresija palielina šūnu kalpošanas laiku. Šī proteīna trūkums nokautām pelēm izraisa to paātrinātu novecošanos.8 Lielākajā daļā darbu, kas apraksta Kloto funkcijas, ir pētīta šī proteīna loma dažādu ar vecumu saistītu nervu, asinsvadu un nefrīta sistēmu patoloģiju nomākšanas mehānismos. Attiecībā uz tā ietekmi uz fibroblastu novecošanos in vitro eksperimenti ir parādījuši, ka DNS bojājuma gadījumā Klotho veicina šūnu novecošanās aizkavēšanu primārajās cilvēka fibroblastu šūnās MRC-5, izmantojot apoptotisko ceļu (p53/{{8). }}atkarīgs). Kloto aktivitātes zudums primārajās fibroblastu šūnās MRC{10}} izraisa priekšlaicīgas novecošanās fenotipu, kas ir atkarīgs no p53 proteīna, kas stimulē turpmāko p-53-atkarīgo CDK faktoru p21. Šis rezultāts norāda uz Kloto iesaistīšanos novecošanas procesa ierobežošanā, izmantojot p53/p{17}}jutīgo ceļu. No iepriekš minētā izriet, ka Klotho ekspresijas aktivācija HA-Y un HA-S ietekmē var aizsargāt šūnas no priekšlaicīgas novecošanas.

Ir pierādīts, ka HA-Y un HA-S pozitīvi ietekmē lA un 1B tipa melatonīna receptoru ekspresiju Merkeles šūnu un keratinocītu kultūrā. HA-Y stimulēja receptoru ekspresiju pret mel-atonīnu 1B novecošanās kultūrā daudz vairāk nekā HA-S. Melatonīns ir spēcīgs antioksidants. Melatonīna tiešā antioksidanta iedarbība tiek realizēta, inaktivējot brīvos radikāļus, kas veidojas šūnu darbības laikā. Turklāt, stimulējot šūnu antioksidantu enzīmu sintēzi, šis hormons aizsargā kodola DNS no brīvo radikāļu oksidēšanās.

Vairāki pētījumi ar laboratorijas dzīvniekiem ir parādījuši, ka melatonīnam ir pretaudzēju, onkostatiska iedarbība. Eksperimentā epifīzes funkcijas aktivizēšana vai melatonīna eksogēna ievadīšana izraisīja mazāku audzēju sastopamības biežumu, savukārt pinealektomijai bija stimulējoša ietekme uz audzēja augšanu. "

Tāpat kā visi citi hormoni, melatonīns iedarbojas caur īpašiem divu veidu receptoriem: melatonīna receptoriem 1A (MelRIA) un melatonīna receptoriem 1B (MelRIB).cistanche benefíciosMelRIA un MelRIB ir atrasti un pilnībā raksturoti tīklenē, suprahiasmatiskajā kodolā, miome-trium, placentā, granulozes un dzeltenā ķermeņa šūnās, imūnās šūnās, kuņģa-zarnu traktā un ādā.

HA-Y un HA-S darbība jauktā cilvēka ādas šūnu kultūrā izraisa šūnu sintētisko aktivitāti, par ko liecina augstāka elastīna ekspresija gan "jaunākās", gan "vecākās" kultūrās, ievadot šīs zāles barotnē. . Elastoze attiecas uz deģeneratīvām izmaiņām dermas audos ar palielinātu elastīna materiāla nogulsnēšanos. Acīmredzama pazīme tam ir elastoze, ti, amorfa elastīna materiāla mezglu parādīšanās. Papildus saules stariem elastīna šķiedras var ietekmēt izmaiņas nervu, endokrīno un imūnsistēmu darbībā un vielmaiņā. Tādējādi sieviešu dzimuma hormoni (estrogēni) palīdz uzturēt ādas tvirtumu un elastību, stimulē kolagēna, elastīna šķiedru un hialuronskābes sintēzi ar fibroblastiem. Pēkšņa estrogēnu līmeņa pazemināšanās sievietēm menopauzes laikā var izraisīt ādas dehidratāciju un grumbu veidošanos. Tajā pašā laikā, novecojot, palielinās pretiekaisuma citokīnu ražošana, kas var izraisīt iekaisuma izmaiņas, kam seko kolagēna, elastīna un citu ādas elementu noārdīšanās.

AP-1 izteiksmes marķieris pieauga līdz ar novecošanu, savukārt HA-Y un HA-S ietekmē tas samazinājās līdz "jaunākas" kultūras līmenim. AP-1 var regulēt šūnu cikla regulatoru, piemēram, ciklīna Dl, ciklīna A, ciklīna E, p53, p21Cipl, pl6Ink4a un p19ARF, ekspresiju un darbību, tādējādi spēlējot svarīgu lomu šūnu proliferācijas procesos.

Ir konstatēts, ka AP-1 ir iesaistīts I tipa kolagēna sintēzes samazināšanās procesos fotonovecošanās laikā. Tas notiek šādi: saules UV starojums ģenerē reaktīvās skābekļa sugas (ROS), kas aktivizē augšanas faktoru un citokīnu receptorus uz ādas fibroblastiem. Aktivizētie receptori stimulē p38 un JNK; MAPK signālu kaskādes locekļus un c-Fos un c-Jun pēc tam apvienojas, veidojot AP-1, kas stimulē matricas metālloproteināzes (MMP) transkripciju (MMP).18 Augstāka MTH{ ekspresija {10}} "vecākās" kultūrās sniedz pierādījumus par aizsardzības mehānismu aktivizēšanu pret reaktīvām skābekļa sugām, kas uzkrājas novecojot HA-S un HA-Y ietekmē.

Pašlaik ir daži pētījumi, kuros tiek pētīts MTH{0}} kā novecošanās marķieris. Tā kā šī fermenta funkcija ir oksidētu purīnu hidrolīze, tas ir tieši iesaistīts novecošanās regulēšanā, izmantojot reaktīvās skābekļa sugas (ROS). Tas attiecas uz lielāko daļu pētījumu par MTH{1}}. Yoshimura un citi ir pierādījuši cilvēka fibroblastu kultūru, ka MTH-1 var atjaunot DNS bojājumus, ko izraisījusi oksidēšanās ar peroksīdu (H2O2).

The Clock marker expression was higher in a mixed culture of fibroblasts and keratinocytes when adding HA-Y to the medium. This marker regulates cell metabolism, being a kind of "intracellular clock" that regulates the activities of the cell.>Šāds pieaugums veicināja gan fibroblastu kultūru, gan visa organisma dzīves pagarināšanos.

Clock un Perl gēnu ekspresija cilvēka ādas šūnās, piemēram, keratinocītos, melanocītos un dermas fibroblastos, apstiprina diennakts ritmu klātbūtni tajās.20 Diennakts ritmi ir dzīvo organismu adaptīvie mehānismi, kas saistīti ar dienas un nakts maiņu. kura galvenais mērķis ir vielmaiņas regulēšana. Pētījumos ir salīdzināti diennakts ritmi dažāda veida ādas šūnās un secināts, ka āda atrodas ne tikai centrālā suprahiasmatiskā kodola pulksteņa ietekmē, bet tai ir arī savi pašregulējoši diennakts ritmi, kas raksturīgi katram šūnu tipam (keratinocītiem, melanocītiem un fibroblasti).2

CLOCK proteīns ir iesaistīts ar šūnu adhēziju saistīto gēnu ICAM-I, VCAM-I un CCL-2 ekspresijas regulēšanā.22 CLOCK proteīna deficīta ietekme uz novecošanos ir pētīta ar pelēm. Diennakts ritma funkcionēšana centrālajā pulkstenī neapstājās, jo CLOCK transkripcijas faktoru varēja aizstāt ar NPAS2, bet perifērajās daļās šāda nomaiņa nav iespējama. Jāuzsver, ka āda ir arī perifērs orgāns.

Secinājumi

Iegūtie rezultāti liecina, ka apstrāde ar hialuronskābes sejas pildvielu ietekmē pretnovecošanās marķieru ekspresiju un līdz ar to tiem ir hepatoprotektīvs efekts. Šūnu kultūras testi uzrāda sintētiskās aktivitātes aktivizēšanos, paaugstinātas ādas šūnu antioksidantu īpašības un aizsardzību pret priekšlaicīgu šūnu novecošanos HA pildvielu (Novacutan®）.R) ietekmē.

Šis raksts ir iegūts no klīniskās, kosmētiskās un izmeklēšanas dermatoloģijas