Tiourīnvielas atvasinājumi

Saskaņā ar attiecīgiem pētījumiem,cistancheir izplatīts augs, kas pazīstams kā "brīnumaugs, kas pagarina mūžu". Tās galvenā sastāvdaļa ircistanozīds, kam ir dažādi efekti, piemēram, antioksidanti, pretiekaisuma un imūnsistēmas funkciju veicināšana. Mehānisms starp cistanche unādabalināšanaatrodasantioksidantscistanche efektsglikozīdi. Melanīns cilvēka ādā rodas tirozīna oksidācijas rezultātā, ko katalizē tirozināze, un oksidācijas reakcijā ir nepieciešama skābekļa līdzdalība, tāpēc skābekļa brīvie radikāļi organismā kļūst par svarīgu faktoru, kas ietekmē melanīna veidošanos.Cistanchesatur cistanozīdu, kas ir antioksidants un var samazināt brīvo radikāļu veidošanos organismā, tādējādi kavējot melanīna ražošanu.

Noklikšķiniet uz Cistanche Tubulosa balināšanai

Vairāk informācijas:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Feniltiourīnviela (PTU) ir viens no pazīstamākajiem tirozināzes inhibitoriem, kas pētīts literatūrā89–91. PTU sēra atoms saistās ar abiem vara joniem tirozināzes aktīvajā vietā un bloķē fermentu aktivitāti. Profesors Jungs u.c. nesen pētīja PTU atvasinājumu SAR uz sēņu tirozināzes92,93. Lai gan PTU atvasinājumu iedarbība galvenokārt tika novērtēta pēc to melanoģenēzes inhibīcijas B16 melanomas šūnās, vēlāk tika apstiprināts, ka tas ir saistīts ar tirozināzes aktivitātes inhibīciju. SAR pētījumos ir uzsvērtas svarīgas strukturālās prasības gan melanoģenēzei, gan tirozināzes inhibīcijai (9. attēls (a)): (i) tieša p-planāras struktūras saistība ar tiourīnvielu (24a–24b), (ii) hidrofobs aizvietotājs para- vai tika pieņemta fenilgredzena metapozīcija (24c–24d), orto-pozīcijas aizvietotājs netika pieļauts (24e), liecina, ka C2-aizvietotais fenils var kavēt tiourīnvielas kompleksu veidošanos ar vara joniem tirozināzes aktīvā vieta. Turklāt (iii) brīvie 3-aminoūdeņraži bija svarīgi tirozināzes inhibīcijā, bet ne B16 šūnu melanoģenēzes inhibīcijā; 1,3-diaizvietotie atvasinājumi uzrādīja lielāku melanoģenēzes inhibīcijas potenciālu (24f). Šie atklājumi liecināja, ka 1,3-diaizvietotie atvasinājumi iedarbojas pa ceļu, kas atšķiras no tirozināzes katalītiskās aktivitātes, lai novērstu melanoģenēzi. 1-feniltiourīnvielas un 1,3-difeniltiourīnvielas molekulārās dokstacijas analīze atklāja, ka tieša plakanā fenila saistība ar tiourīnvielas vienību un brīvo 3-NH2 bija tirozināzes aktivitātes priekšnoteikums (10. attēls).

No otras puses, Crinton et al ziņoja par virkni N-hidroksi-N0 - fenilurīnvielas atvasinājumu, aizstājot sēru ar skābekli un 3-NH2 ar N-hidroksilamīnu PTU91. Rezultāti parādīja, ka ziņotie atvasinājumi bija spēcīgāki, jo īpaši N-hidroksi-N0 -fenilurīnviela (25a) bija 6 reizes spēcīgāka nekā PTU. Turpretim N-hidroksi-N0 -feniltiourīnvielas (25b) atvasinājumi neuzrādīja inhibīciju, kas liecina, ka N-hidroksiurīnvielas helātu veidošanās spēja ir svarīga tirozināzes inhibīcijai (9. attēls (a)).

Papildus sintētiskiem vai dabīgiem avotiem skrīnings ir vēl viena alternatīva stratēģija jaunu inhibitoru atrašanai. Galvenokārt klīniski apstiprināto zāļu skrīnings ir palielinājies daudziem bioloģiskiem mērķiem. Dati, kas saistīti ar esošām zālēm, samazinās laiku un izmaksas, kas saistītas ar intelektuālajām tiesībām jaunu farmaceitisko līdzekļu izstrādei. Šai pieejai ir vairākas priekšrocības; ieskaitot pieejamību, zemākas izmaksas un drošību/panesamību. Feniltiourīnviela jau sen ir pazīstama kā tirozināzes inhibitors89–91,94. Ķīmiskās līdzības analīze, kas veikta ar ligandu virtuālo vai HTS skrīningu, identificēja etionamīdu (26a) un tā analogus (26c–26e), tostarp protionamīdu (26b), kā tirozināzes inhibitorus95 (9. attēls (a)). Etionamīds ir apstiprināts otrās līnijas prettuberkulozes līdzeklis, ko lieto multirezistentas tuberkulozes ārstēšanai. Turpretim izoniazīds, strukturāls analogs un pirmās līnijas prettuberkulozes zāles, bija vājš tirozināzes inhibitors. B16 šūnās inhibitori piridīna-2-karbotioamīds un tiobenzamīds būtiski samazināja melanīna saturu attiecīgi par 44 procentiem un 37 procentiem. Pēc plašas strukturālās analīzes SAR dati liecina, ka karbotioamīds bija galvenais elements jaunu un spēcīgu tirozināzes inhibitoru izstrādē.

Nesenā pētījumā pētnieki ieguva no tiourīnvielas iegūtās zāles klīniskā lietošanā un pētīja to ietekmi uz tirozināzes aktivitātēm, izmantojot enzīmu un šūnu testus96. Tika novērots, ka pretvairogdziedzera līdzekļi metimazols 27a, 97 karbimazols 27b, 97 tiouracils 27c, 97 metiltiouracils 27d97 un propiltiouracils 27e97 inhibēja sēņu tirozināzi (9. attēls (b). Turklāt kinētiskajos pētījumos tiourīnvielu saturošas zāles tika piešķirtas kā nekonkurējoši inhibitori. SAR pētījumos paskaidrots, ka pati tiourīnviela inhibē tirozināzes enzīma aktivitāti atkarībā no koncentrācijas. Tas parāda, ka tiourīnvielas analogu inhibējošajai aktivitātei ir jābūt no sēra un slāpekļa atomiem.

Citā pētījumā jaunu N-aril-N0 -aizvietotu feniltiourīnvielas atvasinājumu klase tika novērtēta attiecībā uz sēņu tirozināzes98 difenolāzes aktivitāti. Rezultāti parādīja dažus 4,5,6,7-tetrahidro- 2-[[(fenilamino)tioksometil]amino]-benzo[b]tiofēna-3-karbonskābes atvasinājumus (28a–28d, ( Attēlā 9 (b))) bija mērena inhibējoša iedarbība uz tirozināzes difenolāzes aktivitāti. Kad 4,5,6,7-tetrahidrobenzo[b]tiofēna-3-karbonskābes karkass tika aizstāts ar 2–(1,3,4-tiadiazol-2-il) tioetiķskābi, tika uzlabota savienojumu (piemēram, 29a–29d, 9. (b) attēls) 98 inhibējošā aktivitāte pret tirozināzi. Īpaši 29d (IC50=6.13 lM) bija spēcīgāka inhibējošā aktivitāte nekā kojskābe (IC50=33.3 lM).

Kopš 1885. gada saharīns, 1,2-benzizotiazols-3-one-1,1-dioksīds ir plaši pazīstams heterociklisks savienojums, ko izmanto kā saldinātāju nātrija sāls veidā. . Turklāt tiek ziņots par daudziem bioloģiskiem mērķiem, un tāpēc to var uzskatīt par priviliģētu sastatni. Nesen tika novērtēta jauna 6-(fenilurenil/tionil) konjugētu saharīna atvasinājumu sērija, lai noteiktu inhibējošo ietekmi uz banānu tirozināzes enzīma99 difenolāzes aktivitāti. Rezultāti parādīja, ka visi savienojumi inhibēja tirozināzes aktivitāti. Tostarp 6–(3-hlorfenilurenil)saharīns 30a (Ki= 5,85 lM) un 6–(3-jodfeniltiourenil)saharīns 30b (Ki=3,95 lM) tika konstatēts, ka tie ir visaktīvākie savienojumi. SAR pētījumi parādīja, ka 6-(feniltiourenil)saharīna atvasinājumiem ir augstāka inhibējošā aktivitāte nekā 6-(fenilurenil)saharīna atvasinājumiem. Elektronus izvelkošajai grupai fenilurenila/tiourenilgredzena 3-pozīcijā palielinājās aktivitāte, jo īpaši halogēnu sērijai bija lielāka inhibējošā aktivitāte.

Tiosemikarbazona tipa inhibitori

Tiosemikarbazoni ieņem vienu no galvenajām tirozināzes inhibitoru klasēm, pateicoties to klasiskajai struktūrvienībai un spējai helatēt vara jonus tirozināzes enzīma aktīvajā vietā. Nesen dažādās pētniecības grupās tika ziņots par milzīgu skaitu tiosemikarbazonu 99–101 kā spēcīgiem tirozināzes inhibitoriem.

SAR pētījumi atklāja, ka tiosemikarbazīda karkass bija galvenā vienība tirozināzes inhibējošās aktivitātes noteikšanai, jo tā spēja efektīvi kompleksēt divus vara jonus tirozināzes aktīvajā vietā. Lai uzlabotu aktivitāti, tika ziņots par virkni 4/3-aminoacetofenonu un atvasinātu tiosemikarbazonu, kas inhibē sēņu tirozināzi102. Bioloģiskā novērtējuma rezultāti liecina, ka acilaminosavienojumi (31a–31g, 11. attēls) uzrādīja spēcīgākus tirozināzes inhibitorus nekā kojskābe (IC50=28,5 lM), un turpretim aminofenols (31 h un 31i) uzrādīja spēcīgākus rezultātus. tirozināzes aktivitātes aktivizēšana. Tika konstatēts, ka savienojums 31d ir visaktīvākais savienojums ar IC50 vērtību 0,291 lM. Pētījumi ar SAR analīzi arī atklāja, ka tiosemikarbazīda grupai bija ļoti svarīga loma tirozināzes inhibīcijā, acilaminogrupas, kas ir ļoti svarīgas tirozināzi inhibējošās aktivitātes pastiprināšanai, un acilamīda aizvietotājs 4-pozīcijā uz fenilgredzena palielināja tirozināzes inhibējošo spēju. Turklāt inhibīcijas mehānisma un kinētikas pētījums atklāja, ka savienojums 31a bija atgriezenisks un nekonkurējošs inhibitors.

Turpinot meklēt spēcīgus savienojumus kā ļoti efektīvus tirozināzes inhibitorus un izprotot tiosemikarbazona savienojumu SAR, tika izstrādāta virkne jaunu {{0}}alkoksi- un 4-aciloksifeniletilēna tiosemikarbazona analogu (32a). –32i, 11. attēls) tika sintezēti un novērtēti attiecībā uz tirozināzes inhibējošo aktivitāti103. Rezultāti parādīja, ka lielākajai daļai inhibitoru bija ievērojama spēja inhibēt tirozināzi ar IC50 vērtību, kas zemāka par 1, 0 lM. Jo īpaši savienojumam 32d bija ievērojama tirozināzes inhibējošā iedarbība, salīdzinot ar citiem šīs sērijas analogiem. SAR pētījumi atklāja, ka tiosemikarbazona daļai bija galvenā loma tirozināzes inhibējošās aktivitātes noteikšanā. Metilēna savienotāja garums starp fenilgredzenu un tiosemikarbazona daļu (32f – g) neietekmēja tirozināzes inhibējošo spēju. Tiokarbonhidrazīda daļas (32 h–32i) ieviešana bija nelabvēlīga tirozināzes inhibējošajai aktivitātei.

Peptīdu tipa inhibitori

Lai atklātu jaunus tirozināzes inhibitorus, pēdējā laikā uzmanība tika pievērsta peptīdu sekvenču izmantošanai tirozināzes inhibīcijai. Ir izpētīti vairāki tirozināzes inhibējoši peptīdi, piemēram, dipeptīdi104, cikliskie peptīdi105, īsās secības oligopeptīdi106 un kojskābes tripeptīdu savienojumi107. Jo īpaši oligopeptīdi ir izrādījušies efektīvi tirozināzes inhibitori. Parādīti divi oligopeptīdi P3, oktapeptīds (Arg-Ala-Asp-ser-Arg-Ala-Asp-Cys) un dekapeptīds P4 (Tyr-Arg-ser-Arg-Lys-Tyr-Ser-Ser-Trp-Tyr). būtiska inhibējoša iedarbība uz sēņu un cilvēka tirozināzi ar IC50 vērtību 123 un 40 lM, salīdzinot ar hidrohinonu. Šie oligopeptīdi neuzrādīja nekādu ietekmi uz melanocītu citotoksicitāti108. Pēc veiksmīgas sastādīšanas lokālā krēmā un labvēlīgiem klīniskiem rezultātiem dekapeptīds P4, kas pazīstams arī kā dekapeptīds-12, tika tirgots kā galvenā aktīvā sastāvdaļa ādu balinošā produktā109.

Nesenā pētījumā Hsiao et al. atklāja, ka dipeptīdiem līdzīgs savienojums (A5) un tripeptīdi RCY un CRY efektīvi inhibē tirozināzes aktivitāti109. Īpaši jaunajam tripeptīdam CRY bija visievērojamākā inhibējošā iedarbība pret sēņu tirozināzi (IC50=6.16 lM). Šis tripeptīds ir spēcīgāks par zināmajiem oligopeptīdiem un salīdzināms ar kojskābes tripeptīdiem. CRY un RCY izmantoja cisteīna atlikuma tiola grupu, lai koordinētu ar Cu joniem tirozināzes aktīvajā vietā, tādējādi uzrādot zemu tirozināzes aktivitāti. Citā pētījumā tika ziņots, ka cisteīnu saturošie dipeptīdi efektīvi kavē tirozināzes aktivitāti110. Autori ierosināja, ka šie cisteīnu saturošie dipeptīdi var tieši bloķēt tirozināzes aktīvo vietu un tādējādi izraisīt spēcīgu inhibīciju. Jo īpaši N-gala cisteīnu saturošie dipeptīdi ievērojami pārspēj C-galu un cisteīnu saturošos dipeptīdus, CE, CS, CY un CW uzrāda salīdzinošu bioaktivitāti, un tirozīnu saturošie dipeptīdi ir substrātam līdzīgi inhibitori. Turklāt šie dipeptīdi neuzrāda būtisku citotoksicitāti melanocītos, un CA un PD samazināja melanīna saturu attiecīgi par 5,6 un 16,5 procentiem pie 100 lM (1. tabula).

Li et al. ziņoja par hidroksipiridinona-L-fenilalanīna konjugātu komplektu (33a un 33b), sākot no kojskābes (12. attēls) 111, lai to inhibētu tirozināzi. Tirozināzes aktivitātes novērtējums atklāja, ka viens no savienojumiem ((S)-(5-(benziloksi)-1-oktil-4-okso{{10}},{{11 }} dihidropiridīna-2-il)metil2-amino-3- fenilpropionāts (33b) uzrādīja IC50 vērtības attiecīgi 12,6 un 4,0 lM mikofenolāta un difenolāzes aktivitātei. Turklāt šie konjugāti bija jaukta tipa inhibitori, kas liecina, ka tie varētu saistīties gan ar brīvo enzīmu, gan enzīmu-substrāta kompleksiem.

Citā pētījumā tika izstrādāti hidroksipiridinona-L-aminoskābju konjugāti un novērtēti to inhibējošā iedarbība uz sēņu tirozināzi112. No pētītajiem savienojumiem tikai diviem savienojumiem bija gan mikofenolāts (34, IC50=1.95 lM; 35, IC50=2.79 lM), gan difenolāzes inhibitors (34, IC50=8.97). lM; 35, IC50=26.20 lM) tirozināzes aktivitāte (12. attēls). Turklāt savienojumi 34 un 35 tika identificēti kā atgriezeniski un jaukta tipa inhibitori.

Dažādi sēņu tirozināzes inhibitori

Nesen ekstrakti un izolēti savienojumi no dabīgiem avotiem ir piesaistījuši lielu uzmanību kā tirozināzes inhibitori un ir pieņemti kā populāri ādas balināšanas līdzekļi113–123. Lai atrastu drošu un efektīvu balināšanas vielu, Chen et al., pārbaudīja vairākus dabiskus augu izcelsmes produktus un izolēja savienojumus 36 un 37 no Gastrodia elata sakneņiem kā sēņu tirozināzes inhibitorus124. Turpmākajos SAR pētījumos ir identificēti analogi 38–40 (13. attēls). Bis(4-hidroksibenzil)sulfīds 36 uzrādīja izcilu inhibējošo spēju pret tirozināzi ar IC50 vērtību 0,5 lM un Ki vērtību 58 nM. Savienojums 37, kas savienots ar ētera savienojumu, uzrāda 713-kārtīgu inhibējošās spējas (IC50=378.11 lM) samazināšanos, kas norāda, ka sēra atoms ir ļoti svarīgs helātu veidošanā ar vara joniem un veicina lielāku tirozināzes aktivitātes inhibīcija. No otras puses, saīsinot oglekļa saiti, kas savieno sēru ar benzola gredzeniem, tiek panākta mērena tirozināzes 38 inhibīcija. Hidroksilgrupas 39 noņemšana noved pie vājas tirozināzes inhibīcijas, norādot, ka svarīgas ir divas hidroksilgrupas. Izmantojot metoksi-aizvietošanu, kas ir 36 analogs, samazina iedarbīgumu līdz IC50 vērtībai 40,02 lM, kas liecina, ka ūdeņraža saites mijiedarbība bija labvēlīgāka nekā hidrofobā mijiedarbība, ko nodrošina metoksīda grupas.

Savienojums 36, kas apstrādāts ar 50 lM, samazināja melanīna saturu cilvēka melanocītu sistēmā par 20 procentiem bez nozīmīgas citotoksicitātes. Turklāt zebrafish in vivo tests atklāj, ka 36 efektīvi samazina melanoģenēzi bez nelabvēlīgas ietekmes. Turklāt akūtās perorālās toksicitātes pētījums apstiprināja, ka savienojumam 36 pelēm nebija pamanāmas citotoksicitātes. Tādējādi savienojums 36 ir potenciāls kandidāts droša un efektīva farmakoloģiskā līdzekļa izstrādei ādas balināšanai. Nesen Ai et al., izmantojot virtuālās skrīninga pieeju, pārbaudīja ķīmisko bibliotēku un identificēja savienojumu 41 kā spēcīgu sēņu tirozināzes inhibitoru125 ar IC50 vērtību 8 lM un radīja 29% ±17,64% melanīna biosintēzes bloķēšanu B16 šūnās. koncentrācijā 0,002 procenti, kas bija vienāda ar 27,5 virpām.

SAR pētījumi, kas tika pārbaudīti ap 41. struktūru, parādīja, ka savienojuma 41 gredzena B aromātiskums šķiet būtisks aktivitātei, jo gredzena B aizstāšana ar cikloheksilgredzenu (savienojums 42b) zaudē melanīna sintēzes inhibējošo aktivitāti B16 šūnās. No otras puses, aizstāšanai gredzena A pozīcijā 4- bija niecīga ietekme uz inhibējošo aktivitāti (42.a–42.d). Šie savienojumi bija atkarīgi no devas un kavēja melanīna sintēzi B16 šūnās. Tomēr turpmāka savienojuma 41 attīstība rada iespējamu formulēšanas problēmu un tiek izslēgta kā kandidāts kosmētikas nolūkos. Turpmākā substrukturālā analīze atklāja, ka savienojums 43 uzrādīja 79% ±5,34% B16 šūnu melanīna biosintēzes inhibīciju koncentrācijā 0,001% (33,6 lM). Šiem diviem savienojumiem 41 un 43 piemīt labas bioķīmiskās īpašības un tie atbilst Lipinska "piecu likumam", un tiem ir būtiska inhibējoša iedarbība uz melanīna sintēzi B16 šūnās. Tika pierādīts, ka šī melanīna sintēzes kavēšana neietekmē šūnu dzīvotspēju, kas vēl vairāk uzsver šo savienojumu iespējamo komerciālo lietderību.

Tika ziņots, ka vanilīns un vanilskābe, kas izolēti no Origanum vulgare, var kalpot par antimelanoģenēzes līdzekļiem126. Pamatojoties uz šo informāciju, ir ziņots, ka virkne vanilīna esteru, kas satur benzoskābi, kanēļskābi un piperazīnu, inhibē tirozināzi127. Rezultāti parādīja, ka savienojumi 44a–44d uzrādīja labu vai izcilu sēņu tirozināzes aktivitātes inhibīciju (14. attēls). Jo īpaši 44b uzrādīja visspēcīgāko inhibējošo aktivitāti ar IC50 vērtību 16, 13 lM. No strukturālā viedokļa aizvietotajiem kanēļskābes esteriem un hidroksilgrupai bija nozīmīga loma tirozināzes inhibīcijā. Kinētiskie pētījumi atklāja, ka savienojums 44b bija jaukta tipa tirozināzes inhibitors ar Ki 13 lM un Ki 0 53 lM un veidoja atgriezenisku enzīmu inhibitoru kompleksu.

Citā pētījumā tika atklāts, ka {{0}}hidroksitirozols 45 (2-HT)128 inhibē sēņu tirozināzi ar IC50 vērtību 13,0 lmol/L, kas bija tikpat spēcīga kā kojskābe (IC{{). 7}},8 lmol/L). Turklāt 2-HT no devas atkarīgi inhibēja tirozināzes aktivitāti (IC50=32.5 lmol/L) B16 melanomas šūnu bezšūnu ekstraktā un a-MSH stimulētu melanīna veidošanos neskartās B16 melanomas šūnās. . Tika ziņots, ka metimazola (2-merkapto-1-metilimidazola) atvasinājumi inhibē sēņu tirozināzi129. 2-Merkaptoimidazols (46a), merkapto-1-metilimidazols (46b) un terc-butil3-metil-2-sulfanilidēns-2,3-dihidro{ {30}}H-imidazola- 1-karboksilāts (46c) būtiski inhibēja tirozināzes aktivitāti, uzrādot IC50 vērtību attiecīgi 4,11 mM un 1,43 mM un 1,45 mM (14. attēls). Kinētiskā analīze liecināja, ka savienojumi 46a un 46b ir konkurētspējīgi tirozināzes inhibitori, savukārt 46c bija nekonkurējošs tirozināzes inhibitors. Turklāt B16 šūnu in vitro analīzē 46a–46c savienojumi spēcīgi inhibēja intracelulāro melanīna ražošanu, neietekmējot citotoksicitāti.

Ir pierādīts, ka virkne triazola Šifa bāzes atvasinājumu inhibē sēņu tirozināzes aktivitāti130. Bioloģiskā novērtējuma rezultāti parādīja, ka tikai trīs savienojumiem 47a–47c ir spēcīga inhibējoša iedarbība ar IC50 vērtībām 12,5, 7,0 un 1,5 lM (14. attēls). Kinētiskā analīze atklāja, ka inhibitori ir atgriezeniski un jaukta tipa. Fluorescences dzēšanas un vara mijiedarbības pētījumi apstiprināja inhibitoru mijiedarbību ar tirozināzi un helātu veidošanās spēju ar vara joniem aktīvajā vietā. No strukturālā viedokļa aizstāšana benzola gredzena 2-pozīcijā uzrādīja augstāku aktivitāti (47c) nekā 3-pozīcija (47b). Par sēņu tirozināzes inhibitoriem tika ziņots par jaunu timola analogu sēriju, kas satur hidroksilētas benzoskābes un kanēļskābes. Kopumā no kanēļskābes iegūtie timola atvasinājumi uzrādīja labāku tirozināzes inhibīciju nekā benzoskābes atvasinājumi, kā piemēru var minēt 48a (IC50 15.20 lM) un 48b (IC50 91,5 lM) salīdzinājumu. .

Nesen tika pētīta no Korejas žeņšeņa (P. ginseng CA Mayer) lapām izolētā pikrionozīda A 49 iedarbība132, un tas ir inhibējis sēņu tirozināzes aktivitāti ar IC50 vērtību 9,8 lM, kas ir aptuveni 6,8 līdz 10- reizes augstāka nekā attiecīgi kojskābe un arbutīns (14. attēls). Melan-Ab šūnās 49 samazināja 17,1 procentu melanīna saturu atkarībā no devas, neizraisot šūnu dzīvotspēju. Turklāt ar Picrionside A apstrādātajām zebrazivīm bija ievērojama inhibējoša iedarbība uz ķermeņa pigmentāciju. Kopumā šie rezultāti liecina, ka pikrionozīds A var būt efektīvs ādas balināšanas līdzeklis133. Veicot Streptomyces bikiniensis melanoģenēzes inhibitoru skrīningu, tika konstatēts, ka S-(-)-10,11-dihidroksifarnēzskābes metilesteris (dhFAME, 50), kukaiņu juvenīlais hormons, ko ražo Beauveria bassiana. CS1029 134 tieši inhibēja tirozināzes aktivitāti. Turklāt 50 ievērojami samazina melanīna saturu, inhibēja šūnu tirozināzes aktivitāti, kā arī cAMP līmeņa intracelulāro uzkrāšanos melan-a šūnās, neizraisot šūnu dzīvotspēju.

Jauna spēcīgu tirozināzes inhibitoru klase tika identificēta, izmantojot uz struktūru balstītu virtuālo skrīninga prognozēšanu135. Sēņu tirozināzes struktūra (PDB ID: 2Y9X) tika izmantota kā veidne molekulārās dinamikas (MD) simulācijai. Sākotnēji tika izveidots 10 000 struktūru ansamblis, izmantojot molekulārās dinamikas simulāciju. Sekojošie skrīningi ieguva 61 labāko molekulu, lai novērtētu sēņu tirozināzes aktivitāti, un selektīvie inhibitori (51a–51e) ir norādīti 14. attēlā. Rezultāti liecina, ka tetrazola un triazola daļas spēja mijiedarboties ar divara katalītisko centru. tirozināze. Jo īpaši visspēcīgākā aktivitāte ir tetrazola savienojumam 51b. Autori atklāja, ka daudzi savienojumi uzrādīja labu melanīna ražošanas samazināšanos B16 melanomas šūnās bez citotoksicitātes. Konkrēti, tiosemikarbazonu saturošs savienojums 51e samazināja melanīna saturu par 55 procentiem. Rezultāti sniedz vērtīgu ieskatu vara enzīmu tipa -3 funkciju modulācijā.

Kaptoprils ([2S]-N-[3-merkapto-2-metilpropionil]-L-prolīns) ir angiotenzīnu konvertējošā enzīma inhibitors136 137, ko plaši izmanto hipertensijas un sirds mazspējas ārstēšanā. Lai identificētu jaunus un efektīvus tirozināzes inhibitorus, tika eksperimentēts ar kaptoprila (52) inhibējošo iedarbību, lai noteiktu tirozināzes inhibējošo aktivitāti. Rezultāts parādīja, ka 52 inhibēja tirozināzes aktivitāti ar IC50 vērtību 590 lg/ml (14. attēls) 138. Turklāt in vitro pētījumos ar B16 šūnām tika konstatēts, ka 52 inhibē tirozināzes aktivitāti139 140 no devas atkarīgā veidā, kas izraisa melanīna veidošanās kavēšanai bez citotoksicitātes.

Cilvēka tirozināzes inhibitori

Lai gan bija pieejams milzīgs skaits tirozināzes inhibitoru un vairāki no tiem ar spēcīgu inhibējošu iedarbību tika apspriesti iepriekš, gandrīz visi inhibitori tika novērtēti pret sēņu tirozināzi. Lai atrastu jaunus inhibitorus pret cilvēka tirozināzi, Yoshimori et al demonstrēja tujaplicīnus (52–54; a, b un c izomērus, 15. attēls) ar to inhibējošo iedarbību gan uz sēņu tirozināzi, gan cilvēka tirozināzi (Tyr), salīdzinot 141. Rezultāti parādīja, ka zīmola c-tujaplicīni (53 un 54) efektīvi inhibēja cilvēka tirozināzes aktivitāti atkarībā no devas ar IC50 vērtībām attiecīgi 8,98 un 1,15 lM. Jo īpaši c-tujaplicīns 54 bija ārkārtīgi pārāks par kojskābi (IC50=17 lM). SAR pētījumi atklāja, ka izopropila atrašanās vieta uz tropolona sastatnēm bija noteicošais faktors tujaplicīnu iedarbībai. Tujaplicīnu iedarbība ir šādā secībā: c > b > a-tujaplicīns.

To understand the inhibitory mechanism, the binding mode of c-thujaplicin was predicted using a homology model of hTYR. It showed the carbonyl and hydroxyl group of the c-thujaplicin chelate with two copper ions at the active site of hTYR. Tropolone scaffolds of thujaplicin form stacking interaction with the imidazole ring of His367 and hydrophobic interaction with isopropyl of Val377. The isopropyl group of thujaplicin forms hydrophobic interaction with Ile368. In addition, the results from comparative studies on the inhibitory effects of the other thujaplicins (a and b) indicated that van der Waals (VdW) clashes of the isopropyl group of a-thujaplicin with Val377 and S380 might reduce the inhibitory activity against hTYR. The main reason for the higher inhibitory activity of c–thujaplicin against hTYR among thujaplicins is considered to be the hydrophobic interaction of the isopropyl group with Ile368. In contrast, in many, the Val377, and Ser380 are replaced with proline (P257) and alanine (A260), respectively, therefore it can be considered that there are little VdW clashes of the isopropyl group of a-thujaplicin with A260 and P257 (Figure 16). This explains why the inhibitory effect of a-thujaplicin against mTYR (IC50=9.53 lM) is more than two orders of magnitude stronger than hTYR (IC50>1000 lM). Attiecīgi tika ierosināts, ka atšķirība starp Ala260 mTYR un Ser380 hTYR dramatiski ietekmē a-tujaplicīna inhibējošo profilu.

Vangs un kolēģi nesen atklāja, ka dabīgajiem produktiem linderanolīdam B (55) un suboksīdam A (56), kas izolēti no Cinnamomum kātiem, ir labas in vitro sēņu tirozināzes inhibīcijas mazās devās (15. attēls) 142. Abi savienojumi parādīja cilvēka keratinocītu, melanocītu un fibroblastu šūnu dzīvotspēja, kas apstrādāta ar dažādu divu savienojumu koncentrācijām. Ārstēšana ar mazu devu (0.01–1,0 lM) neuzrādīja būtisku citotoksicitāti cilvēka ādas šūnām. Pētījumā atklājās, ka abi savienojumi var samazināt cilvēka tirozināzes aktivitātes par 50 procentiem, lietojot 1 lM devu pēc 48-h apstrādes, un efektīvi inhibēja (samazinājums par 40 %) melanīna veidošanos HEMn-MP šūnās. Gan 55, gan 56 uzrādīja ievērojamu inhibējošo potenciālu zebrafish in vivo pigmentācijai pat mazās devās bez novērojamas toksicitātes. Tāpēc šie divi savienojumi ir efektīvi jauni tirozināzes inhibitori, kas uzskatāmi par ādu balinošiem līdzekļiem. Citā pētījumā Kolbe et al. pētīja kojskābes, hidrohinona un arbutīna inhibējošo iedarbību ar citu labi zināmu savienojumu 4-butilrezorcīna (57) klasi uz cilvēka tirozināzi, kā arī MelanoDermTM ādas modeļa kultūras ražošanas kavēšanu143. 1995. gadā 4-butilrezorcīns ieviesa rezorcinola atvasinājumu, kam ir inhibējoša iedarbība gan uz tirozināzi144, gan uz TRP-1145,146. Rezultāti parādīja, ka 4-butilresorcinols izrādījās ļoti efektīvs cilvēka tirozināzes inhibitors ar IC50 vērtību 21 lmol/L un pilnīgu inhibīciju koncentrācijās virs 100 lmol/l. 4-Butilrezorcīnam bija 20 reizes spēcīgāka inhibējošā aktivitāte nekā kojskābei, kuras IC50 bija 500 lmol/l, un maksimālā inhibīcija (89 procenti) tika sasniegta pie 5,6 mmol/L koncentrācijas. Arbutīns un hidrohinons ir slikti cilvēka tirozināzes inhibitori ar IC50 vērtībām milimolāru diapazonā, tas ir, 6500 lmol/L arbutīnam un 4400 lmol/L hidrohinonam. Tomēr neviens no abiem nav pilnībā inhibējis cilvēka tirozināzi.

MelanoDerm ādas modelī arbutīnam bija tikai neliela efektivitāte melanīna ražošanā ar IC5{{30}} vērtību 500 lmol/L, savukārt kojskābe inhibēja ar IC50 400 mol/L. Interesanti, ka hidrohinons inhibēja melanīna ražošanu ar IC50 vērtību zem 40 lmol / l, kas, iespējams, ir saistīts ar dažādiem tirozināzes inhibīcijas mehānismiem. 4-Butilrezorcīns bija visspēcīgākais inhibitors ar IC50 13,5 mol/l. Klīniskajos pētījumos tika apstiprināta 4-butilrezorcīna efektivitāte in vivo. Pacienti ar vecuma plankumiem uz apakšdelma tika ārstēti divas reizes dienā ar diviem vecuma plankumiem ar formulu, kas satur 4-n-butilrezorcīnu (57), 4-heksilresorcinolu (58) un 4-feniletilresorcīnu (59). ). Astoņu nedēļu laikā 4-butilrezorcīns (57) ievērojami samazināja vecuma plankumu parādīšanos, savukārt 4-heksilrezorcīns un 4-feniletilresorcinols uzrādīja ievērojamu ietekmi pēc 12 nedēļām. Otrs pētījums parādīja, ka 4-butilresorcīns bija efektīvāks nekā 4-heksilresorcīns un 4-fenilmetilsorcinols. Rezultātā iegūtie klīniskie rezultāti par hiperpigmentāciju atklāj, ka 4-butilrezorcīns varētu būt vērtīgs aktīvs savienojums pigmentācijas traucējumu ārstēšanai. 4-butilrezorcīns ir izmantots melasmas ārstēšanai. Visā publicētajā literatūrā 4-butilrezorcīna 0,1 procenta krēms uzrādīja ātru efektivitāti, drošību un panesamību, ja to lieto melasmas ārstēšanai147 148. Nesenā pētījumā tika ziņots, ka 4-butilrezorcīna 0,3% krēms ir drošs, efektīvs un labi panesams Indijas pacientiem ar melismu149.

Plašāka informācija: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501