Spinātu metanola ekstrakts mazina tīklenes deģenerāciju diabēta žurkām 2. daļa

Lūdzu sazinietiesoscar.xiao@wecistanche.comlai iegūtu vairāk informācijas

3. Rezultāti

3.1. Spinātu (MME) metanola ekstrakts inhibē liellopu seruma albumīna (BSA) glikāciju in vitro 3.1.1. MVU ietekme uz progresīvu glikācijas galaproduktu (AGE) un fruktozamīna veidošanos

Tika noteikta antiglikācijas iedarbība dažādās MVU koncentrācijās uz BSA. Šis efekts tika novērtēts, kavējot AGE un fruktoamīna veidošanos maisījumos: BSA reducējošos cukurus (glikozi vai fruktozi) un BSA-metilglioksālu (BSA-MGO) pēc četru nedēļu inkubācijas. 1. tabulā parādīti AGE veidošanās rezultāti, kas novērtēti pēc fluorescences.cistanche dzimumlocekļa augšanaBSA samazinošajos cukuros un BSA-MGO maisījumos, kas inkubēti ar SME pie 200 mg/ml (SME-200), AGE līmenis samazinājās, salīdzinot ar pozitīvajām kontrolēm (BSA-glikoze, BSA-fruktoze un BSA- MGO) (lpp<0.05). concentrations="" below="" 20mg/ml="" did="" not="" show="" significant="" differences="" compared="" to="" positive="" controls.="" the="" inhibition="" of="" ages="" formation="" by="" aminoguanidine(ag)="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" was="" higher="" than="" sme-200=""><0.05) and,="" therefore,="" than="" the="" positive="" controls=""><0.01). both="" sme-200="" and="" ag="" decreased="" fructosamine="" concentrations="" compared="" with="" controls=""><0.05).sme-200 compared="" to="" agin="" incubation="" with="" bsa-mgo="" further="" reduced="" the="" level="" of="" fructosamine=""><0.05)(table>

3.1.2. MVU ietekme uz karbonila un reducētā tiola grupu līmeni

Lai noteiktu, vai MVU inhibē BSA oksidāciju, kas saistīta ar karbonilgrupu veidošanos un tiola grupu samazināšanos glikācijas laikā, tika veikti in vitro testi. 1. tabulā parādīti karbonilgrupu līmeņi inkubācijas apstākļos, izmantojot BSA-reducējošo cukuru un BSA-MGO maisījumus. Šajos maisījumos bija apgriezta sakarība starp MVU koncentrāciju un karbonilgrupu līmeni. Konkrēti, MVU-200 izraisīja ievērojamu samazinājumu salīdzinājumā ar pozitīvajām kontrolēm (lpp<0.05). as="" expected,="" ag="" significantly="" inhibited="" the="" formation="" of="" carbonyl="" groups="" in="" the="" bsa-reducing="" sugars="" and="" bsa-mgo="" (p=""><0.01), demonstrating="" its="" inhibitory="" effect="" on="" protein="" carbonylation,="" as="" reported="" [39].="" between="" sme="" and="" ag,="" there="" was="" no="" difference="" in="" carbonylation="">

Lūdzu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

Tiola grupas līmeņu noteikšana BSA tika veikta glikācijas testa laikā. MVU koncentrācijai bija tendence saglabāt tiolu grupas visos maisījumos. MVU{0}} tika konstatēts ievērojams tiolu grupu līmeņa pieaugums BSA samazinošajos cukuros (p<0.05) and="" the="" bsa-mgo=""><0.01) compared="" to="" positive="" controls.="" ag="" induced="" the="" highest="" conservation="" of="" thiol="" groups="" in="" bsa-reducing="" sugars="" and=""><0.05). however,="" in="" the="" incubation="" of="" sme-200="" with="" bsa-mgo,="" thiol="" group="" levels="" are="" higher="" compared="" to="" ag="" (p=""><0.05) (table="">

Iepriekšējā testā pētītās SME koncentrācijas 5, 10 un 25 mg/ml neuzrādīja nozīmīgus AGE, fruktozamīna, karbonilgrupu veidošanās un BSA tiola grupu noplicināšanas līmeņus (dati nav parādīti).

2. papildinājumā ir parādīti iespējamie karbonilgrupas un AGE savienojumi, kas rodas BSA inkubācijas laikā ar reducējošo cukuru. Parādītas arī molekulas, kas rodas BSA reducētās tiola grupas (cys34) transformācijas rezultātā, kas iegūta MGO vai glioksāla inkubācijas rezultātā [40-42].

3.2. MVU pētījumi STZ izraisītu diabēta žurku (STZ) tīklenē

3.2.1. MVU ietekme uz karboksimetillizīna (CML) veidošanos un tā mijiedarbību ar AGEs receptoriem (RAGE) STZ

1. attēlā parādīta SME ietekme uz 400 mg/kg devu uz CML veidošanos, RAGE ekspresiju un CML-RAGE mijiedarbību (CML/RAGE) uz STZ tīkleni. Attēlā 1A ir novērots, ka gan CML, gan RAGE ir sadalīti ganglija šūnu slānī (GCL), iekšējā šūnu slānī (INL) un ārējā kodola slānī (ONL), savukārt CML / RAGE apvienotais galvenokārt tika izplatīts INL.cistanche salsas priekšrocībasAttēlā 1B-D parādīts integrētais optiskais blīvums (OD) CML, RAGE un CML/RAGE dažādos tīklenes slāņos (norādīts kā minimālais līdz maksimālais kastes un ūsu diagrammas). Dati (vidējais ± SD) ir iekļauti A pielikumā (A1 tabula).

1. attēls. Spinātu metanola ekstrakta (SME) ietekme uz karboksimetillizīnu (CML), progresīvu glikācijas galaproduktu (RAGE) receptoru, un CML-RAGE mijiedarbību (CML/RAGE) streptozotocīna izraisītu diabēta žurku tīklenē. STZ). (A) CML, RAGE un CML/RAGE krāsojumu sadalījums ir parādīts normoglikēmisku žurku (NG) STZ tīklenē, kas apstrādātas ar aminoguanidīnu (STZ-AG) un apstrādātas ar SME (STZ-SME). (BD) parāda integrēto optisko blīvumu (IOD, lum/pixel²) kastes un ūsu diagrammā ganglija šūnu slānī (GCL), iekšējā kodola slānī (INL) un ārējā kodola slānī (ONL) katram imūnkrāsojumam. *lpp<0.01 compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to="" stz;="" and=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.n1="PR" =="" photoreceptors.="">cistanche tubulosa dosage reddit1B attēlā parādīts, ka MVU samazināja CML imūno krāsojumu visos trīs tīklenes slāņos, salīdzinot ar STZ (p<0.01). the="" treatment="" with="" ag(stz-ag)presented="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" stz-sme="" in="" cml="" staining="" in="" both="" inl="" and=""><0.05). in="" gcl,="" there="" was="" no="" difference.="" in="" ng,="" cml="" staining="" was="" lower="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" than="" in="" all="" those="" treated="" with="" stz(p≤0.05).="" figure="" 1c,="" and="" d="" show="" that="" stainings="" for="" rage="" and="" cml/rage="" were="" higher="" in="" stzthan="" stz-sme,="" stz-ag,="" and="" ng=""><>

Cistanche var novērst novecošanos

Attiecībā uz RAGE krāsošanu starp STZ-SME un STZ-AG nebija atšķirības starp GCL un INL, turpretim ONL tika novērots STZ-SME pieaugums (p<0.01).stz-sme decreased="" cml/rage="" in="" all="" three="" retinal="" layers="" compared="" to="" stz=""><0.01), whereas="" stz-agin="" gcl="" and="" onlinduced="" a="" more="" significant="" decrease="" than="" sme=""><0.01). in="" inl,="" between="" stz-ag="" and="" stz-sme,="" there="" was="" no="">

3.2.2. MVU antioksidanta iedarbība STZ tīklenē

MVU antioksidanta iedarbība tika novērtēta ar imūno krāsošanu pret NADPH oksidāzi-4 (Nox-4), inducējamo slāpekļa oksīda sintāzes (iNOS) un nitrotirozīna (NT). 2A attēlā parādīts katras imūnās krāsas sadalījums trīs tīklenes slāņos (GCL, INL un ONL). Attēlā 2B-D parādīts pozitīvo šūnu procentuālais daudzums katram marķierim, kas norādīts kā minimums līdz maksimālajam lodziņu un ūsu diagrammai. Dati (vidējais ± SD) ir iekļauti A papildinājumā (A2. tabula). Nox4 krāsošanai (2.B attēls) MVU apstrāde (STZ-SME) samazināja iekrāsoto šūnu procentuālo daudzumu trīs tīklenes slāņos, salīdzinot ar STZ (p<0.05). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" stz-sme="" showed="" a="" lower="" decrease="" for="" nox4="" in="" the="" three="" retinal="" layers="" (p=""><0.05).>iNOS imūnkrāsojums tika izplatīts arī trīs tīklenes skalojumos (2.A attēls). 2.C attēlā STZ-SME samazināja iNOS pozitīvo šūnu procentuālo daudzumu trijos tīklenes slāņos, salīdzinot ar STZ (p<0.01). comparing="" sme="" effect="" with="" ag="" in="" this="" immunostaining,="" stz-ag="" decreased="" significantly="" in="" the="" three="" retinal="" layers=""><0.01). figure="" 2dshows="" the="" percentage="" of="" the="" positive="" cells="" for="" nt="" in="" the="" different="" groups.="" sme="" decreased="" this="" value="" for="" all="" retinal="" layers="" compared="" to=""><0.01). when="" the="" percentage="" between="" sme="" and="" ag="" was="" compared,="" there="" was="" no="" difference="" in="" gcl,="" whereas,="" in="" inl="" and="" onl,="" stz-sme="" had="" a="" lower=""><0.01). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" oxidative="" markers="" than="" the="" stz="" group="" (p="" <="" 0.01).="">cistanche แอ ม เว ย์Tika noteikta arī MVU antioksidanta iedarbība diabēta tīklenē ar malondialdehīda (MDA) veidošanās līmeni. 3. attēlā parādītas MDA koncentrācijas pētītajās grupās. STZ-SME un STZ-AG MDA līmenis (5,1±0.1 un 4,34±1.{{10}}) samazinājās, salīdzinot ar STZ (6,3±0,8;p<0.01). comparing="" stz-sme="" with="" stz-ag,="" the="" levels="" are="" increased="" in=""><0.05).in ng(2.07±0.42),="" the="" levels="" were="" lowest="" compared="" to="" the="" stz="" groups=""><>

2. attēls. MVU antioksidanta iedarbība STZ tīklenē. (A) Reprezentatīvi NADPH oksidāzes 4(Nox-4)(A), inducējamās slāpekļa oksīda sintāzes (iNOS) un nitrotirozīna (NT) imunofluorescences mikrogrāfijas. (BD) parāda lodziņu un ūsu diagrammas pozitīvo šūnu procentuālajai daļai GCL, INL un ONL katram imūnkrāsojumam NG, STZ, STZ-AG un STZ-SME grupās. Kodolus iekrāsoja ar DAPI (zilu).*lpp<0.01 compared="" to="" ng;="" α=""><0.05 compared="" to="" stz,="" and="" β=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="" in="" supplement="" 3,="" dapi="" and="" each="" specific="" antibody="" stain="" are="" shown="" in="" a="" single="" channel="" and="" the="" fused="">

3. attēls. MVU antioksidanta iedarbība diabētiskajā tīklenē, ko nosaka lipīdu peroksidācija. Tika analizēti malondialdehīda (MDA) līmeņi NG, STZ, STZ-AG un STZ-SME grupās. Koncentrācijas ir parādītas kastes un ūsu diagrammā.* lpp< 0.01="" compared="" to="" ng;=""><0.01 compared="" to=""><0.05compared to="">

3.2.3.MVU ietekme uz STZ tīklenes iekaisumu

Tika novērtēti kodola NF-kB p65, asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) un glia fibrilārā skābā proteīna (GFAP) krāsošanas procenti, lai noteiktu, vai MVU ārstēšana STZ mazina tīklenes iekaisumu.

NF-kB kodoliekrāsošanās atradās trīs tīklenes slāņos (GCL, INL un ONL) visās grupās (4.A attēls). STZ-SME uzrādīja mazāku NF-kB iekrāsošanās procentuālo daudzumu, salīdzinot ar STZ un STZ-AG. trīs tīklenes mazgātāji (lpp<0.01)(figure 4b).="" similarly,="" diabetic="" rats="" treated="" with="" ag(stz-ag)showed="" that="" nf-staining="" is="" decreased="" in="" all="" three="" lavers="" of="" the="" retina="" compared="" to="" stz="" (p=""><0.05). the="" ng="" group="" showed="" the="" lowest="" values="" of="" the="" percentage="" of="" nf-kb="" staining="" in="" the="" three="" layers="" of="" the="" retina=""><0.01). the="" data="" (mean±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a(table="" a3).="" retinal="" vegf="" staining="" (figure="" 4a)="" and="" the="" percentage="" of="" positive="" cells="" were="" evaluated="" in="" the="" experimental="" groups="" (figure="" 4c).vegf="" staining="" was="" mainly="" localized="" to="" gcl="" (figure="" 4a).in="" stz,="" the="" percentage="" of="" vegf="" positive="" cells="" is="" increased(42.1="" ±="" 4.42)="" compared="" to=""><><0.01),and><0.01).however, there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" smes="" and="" ag.="" the="" percentage="" of="" vegf="" staining="" in="" the="" ng="" group="" was="" the="" lowest="" of="" all=""><>

4. attēls. MVU ietekme uz STZ tīklenes iekaisumu. (A) Reprezentatīvi attēli ar imūno krāsojumu kodola NF-kB (attēlots ar sarkanām bultiņām), asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF; attēlots ar dzeltenām bultiņām) un glia fibrilāru. skābais proteīns (GFAP; sarkanās un baltās bultiņas norāda attiecīgi maksimālo un minimālo krāsošanas intensitāti) NG, STZ, STZ-AG un STZ-SME grupās. (B, C) Kastes un ūsu diagrammas parāda attiecīgi pozitīvās iekrāsošanās procentuālo daudzumu kodolenerģijas NF-kB (GCL, INL un ONL) un VEGF (GCL). (D) ir parādīts IOD GFAP krāsošanai gar tīkleni.* lpp<0.01 compared="" to=""><0.01 compared="" to="" stz;="" andβ=""><0.01 compared="" to="" stz-ag.magnification="" 200×.="">Tīklenes iekaisumu noteica arī ar GFAP krāsošanu kā astrogliozes marķieri (4.A attēls), un tā sadalījums pa tīklenes slāņiem tika kvantificēts ar IOD (4.D attēls). STZ tīklenē GFAP klātbūtne tika novērota no GCL līdz INL (IOD=3126± 1018), savukārt NG grupā GFAP tika novērota galvenokārt nervu šķiedru slānī (IOD=1160 ±). 561. lpp<0.01). in="" stz-sme,="" gfap="" staining="" was="" decreased="" (iod="2192±752)" compared="" to=""><0.01)and compared="" to="" stz-ag(iod=""><0.0018). however,="" there="" were="" no="" significant="" differences="" between="" stz="" and="">

3.2.4. MVU ietekme uz S100 kalciju saistošā proteīna B (S100B) līmeni STZ tīklenē

S100B proteīns ir saistīts ar tīklenes iekaisumu, ko regulē NF-kB kodolenerģijas internalizācija. Tādējādi, lai izpētītu, vai MVU ietekmē S100Bekspresiju STZ tīklenē, šim proteīnam tika veikta imūnkrāsošana (IOD). Visās grupās S100B krāsojums tika sadalīts no GCL uz ONL (5.A attēls). 5.B attēlā parādīts, ka NG gadījumā S100B krāsojuma IOD bija visaugstākais ONL, salīdzinot ar ārstētajām grupām (p<0.01), but="" was="" lower="" in="" gcl="" and=""><0.01).in sme,="" the="" iod="" of="" s100b="" staining="" was="" decreased="" in="" the="" three="" layers="" compared="" to=""><0.01 for="" all="" layers).="">cik daudz cistanche jāņemMVU S100B krāsojums GCL un INL bija zemāks nekā AG (abi, p<0.01); however,="" in="" onl,="" there="" was="" no="" difference.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" appendix="" a="" (table="">

3.2.5. MVU ietekme uz tīklenes deģenerāciju STZ

MVU aizsargājošā iedarbība uz STZ GCL, INL un ONL tīklenes deģenerāciju tika novērtēta ar termināla dezoksinukleotidiltransferāzes (TdT) mediētā dezoksiuridīna trifosfāta (dUTP) nick-end marķēšanas (TUNEL) testu.

6.A attēlā parādīti reprezentatīvi attēli par apoptozes sadalījumu pētīto grupu (NG, STZ, STZ-AG un STZ-SME) tīklenē. 6.B attēlā parādīts TUNEL krāsojuma TUNEL GCL, INL un ONL IOD diagramma ar kastēm un ūsām. STZ-SME un STZ-AG apoptoze ir ievērojami samazināta visos slāņos, salīdzinot ar STZ (p<0.01). stz-ag="" had="" a="" more="" significant="" decrease="" in="" apoptosis="" compared="" to=""><0.01).in the="" three="" retinal="" layers="" of="" ng,="" the="" tunel="" staining="" is="" lower="" than="" those="" treated="" with="" stz=""><0.01). in="" onl,="" stz-ag="" and="" ng="" did="" not="" show="" significant="" differences.="" the="" data="" (mean="" ±="" sd)="" are="" included="" in="" figure="">

4. Diskusija

Šajā pētījumā ziņots par spinātu metanola ekstrakta (MME) labvēlīgo ietekmi uz tīklenes slāņiem ar cukura diabētu slimām žurkām saistībā ar tā anti-uzlabotajiem glikācijas galaproduktiem (AGE), antioksidantiem un pretiekaisuma īpašībām. Ir pierādīts, ka SME samazina proteīnu glikāciju, samazinot glikozilēto hemoglobīnu, fruktoamīnu un aldozes reduktāzi zebrazivīm ar izraisītu diabētu, kas liecina par antiglikācijas aktivitāti [11]. Mūsu in vitro eksperimenti, izmantojot liellopu seruma albumīnu (BSA), parādīja, ka MVU samazināja AGE, fruktoamīna un karbonilgrupu veidošanos un reducēto tiola grupu samazināšanos BSA, inkubējot ar reducējošiem cukuriem vai metilglioksālu (MGO). Šie rezultāti liecina, ka MVU varētu kavēt proteīnu glikāciju ar antioksidanta mehānismu, kas varētu arī traucēt MGO veidošanos. Ir pierādīts, ka MGO in vitro izraisa karboksimetillizīna (CML) veidošanos uz olbaltumvielām [43]. Ir pierādīts paaugstināts CML līmenis, kas ir starpnieks diabēta komplikāciju gadījumā [44,45].

Tāpēc šajā darbā tika novērtēts, vai MVU ārstēšana novērš CML uzkrāšanos streptozotocīna izraisītu diabētisku žurku (STZ) tīklenē, kas saistīta ar oksidatīvām un pro-iekaisuma reakcijām, ko izraisa iespējamā AGE receptoru (RAGE) aktivācija. Rezultāti parādīja, ka ārstēšana ar MVU samazināja CML iekrāsošanos ganglija šūnu slānī (GCL), iekšējā kodola slānī (INL) un ārējā kodola slānī (ONL). Lai gan MVU bija augstāks CML līmenis INL un ONL nekā aminoguanidīns (AG) un bez GCL atšķirībām, rezultāti liecina, ka MVU ārstēšana varētu kavēt šī AGE veidošanos diabēta tīklenē. Turklāt tika novērots, ka CML palielināšanās diabēta tīklenes slāņos bija paralēla RAGE krāsošanas līmeņa paaugstināšanās.

RAGE regulēšana un AGE uzkrāšanās ir saistīta ar tīklenes bojājumiem. Viena no CML-RAGE mijiedarbības sekām ir reaktīvo skābekļa sugu (ROS) rašanās, kas savukārt izraisa pro-iekaisuma gēnu pārmērīgu ekspresiju [46]. Mūsu rezultātos diabēta tīklenes, kas tika ārstētas ar MVU, uzrādīja CML un RAGE apvienotās (CML / RAGE) samazināšanos, galvenokārt GCL un INL slāņos, kas liecina, ka samazināts CML / RAGE varētu vājināt oksidatīvā stresa ceļu pakārtoto aktivāciju. un iekaisuma reakcijas, kas aprakstītas RAGE aktivācijai [46].

Oksidatīvais stress, ko izraisa AGEs-RAGE, tiek izraisīts, aktivizējot NADPH oksidāzes enzīmus, kas ir superoksīda anjonu ražotāji un ir palielināti diabēta tīklenes šūnās [46, 47]. NADPH oksidāzes, Nox1/Nox4, veicina palielinātu ROS, iekaisumu un tīklenes neovaskularizāciju [48]. Turklāt radītais superoksīds reaģē ar slāpekļa oksīdu (NO), veidojot peroksinitrītu, vēl vienu brīvo radikāli, kas piedalās diabētiskās tīklenes bojājumos [49,50]. Paaugstinātu NO līmeni diabēta tīklenē izraisa inducējamās slāpekļa oksīda sintāzes (iNOS) pastiprinātā aktivitāte, izraisot acelulāro kapilāru blīvuma palielināšanos un tīklenes sabiezēšanu, gliozi un paaugstinātu nitrātu/nitrītu līmeni [51]. Šeit rezultāti liecina, ka MVU ārstēšana samazināja Nox4 imūnkrāsošanu GCL, INL un ONL, salīdzinot ar STZ. Turklāt, salīdzinot ar AG, MVU uzrādīja būtiskāku Nox4 krāsošanas samazināšanos trīs tīklenes slāņos.

Runājot par iNOS iekrāsošanās līmeni, MVU grupā bija mazāks trīs tīklenes skalošanas līmenis nekā STZ. Kad iNOS krāsojumu AG salīdzināja ar STZ, rezultāti uzrādīja būtiskāku samazināšanos nekā MVU GCL, INL un ONL slāņos, parādot, ka AG ir spēcīgs iNOS inhibitors, kā ziņots diabētiskās retinopātijas (DR) gadījumā. 29].

Attiecībā uz 3-nitrotirozīna imūnkrāsošanu MVU samazināja šo marķieri visos trīs slāņos, salīdzinot ar STZ. No otras puses, lipīdu peroksidācija un AGE veidošanās DR ir cieši saistītas [13]. CML veidojas arī polinepiesātināto taukskābju (PUFA)[52] oksidēšanās rezultātā, kas ir daudz sastopamas tīklenē. PUFA oksidācijas reakcijas izraisa reaktīvu karbonilgrupu veidošanos, piemēram, malondialdehīdu (MDA), kas pēc tam reaģē ar cisteīna, histidīna un olbaltumvielu lizīna atlikumiem, radot salīdzinoši stabilus adduktus [53]. Mūsu rezultāti parāda, ka CML iekrāsojas plus slāņosdiabētiskā tīklene samazinājās līdz ar MVU ārstēšanu, kas atbilst lipīdu peroksidācijas samazināšanās.

AGE-RAGE mijiedarbība diabēta tīklenē ir stāvoklis, kas palielina iekaisuma faktoru veidošanos, kas savukārt piedalās tīklenes deģenerācijā. Šī mijiedarbība izraisa kodola NF-kB aktivāciju, kas izraisa pro-iekaisuma faktoru, piemēram, iNOS un asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) pārmērīgu ekspresiju54]. VEGF ir spēcīgs mitogēns aktivators un galvenais angioģenēzes organizētājs DR. Nox4 regulē arī VEGF ekspresiju oksidatīvā stresa un hiperglikēmijas apstākļos [55]. Tādējādi AGE-RAGE mijiedarbības bloķēšana var būt svarīga, lai vājinātu VEGF ekspresiju DR patoģenēzē.

No otras puses, glia fibrilārais skābais proteīns (GFAP) ir proteīns, kas atrodas tīklenes glia šūnās (gangliju šūnās), astrocītos, Millera šūnās un mikroglijās, un tā palielināšanās norāda uz neirālas gliozes veidošanos tīklenē [56]. Tāpēc NF-kB kodola translokācija un VEGF un GFAP pārmērīga ekspresija ir pro-iekaisuma faktori, kas saistīti ar DR patoģenēzi [13]. Šos faktorus savukārt rada AGE veidošanās un AGE-RAGE mijiedarbība [4557,58]. Šeit tika parādīts, ka MVU ārstēšana samazināja CML-RAGE, kas apvienojās diabētiskās tīklenes slāņos, papildus kodola NF-KB, VEGF un gliozes samazinājumam. Šie rezultāti liecina, ka MVU varētu vājināt iekaisuma reakciju, kavējot CML-RAGE mijiedarbību.

Iekaisuma reakcija tika novērtēta arī, krāsojot S100 kalciju saistošo proteīnu B (S100B). S100B ir proteīns, kas palielina oksidatīvo stresu un stimulē iekaisuma reakciju un neirodeģenerāciju DR [58,59]. Rezultāti liecina, ka S100B krāsošana tika sadalīta trīs tīklenes slāņos STZ. Ir ziņots, ka INL ir atrastas Millera glia šūnas [58], kas varētu būt saistītas ar uzņēmību pret gliozi. S100B krāsojums INL tika samazināts ar MVU ārstēšanu, salīdzinot ar STZ un AG, kas liecina, ka MVU šajā slānī kavē iekaisuma reakciju. .

Normoglikēmiskām žurkām S100B līmenis ONL bija augstāks nekā STZ grupās. Iespējams, normoglikēmiskām žurkām S100B līmenis varētu piedalīties ar membrānu saistītā, uz guanilāta ciklāzi balstītā signalizācijas ceļa regulēšanā fotoreceptoros [60]. Diabēta grupās pazemināts S100B līmenis var izraisīt fototransdukcijas zudumu fotoreceptoru šūnā, kas izmanto cGMP kā otro vēstnesi, lai savienotu gaismas absorbciju ar katjonu kanālu vadītspējas izmaiņām plazmas membrānā [61. Tādējādi MVU varētu samazināt S100B proteīna līmeni, pateicoties to antioksidatīvajām īpašībām [62]. Tomēr ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai raksturotu S100B darbību un mijiedarbību dažādos tīklenes slāņos.Cukura diabēta (DM) gadījumā šūnu nāve ir novērota vairāku veidu tīklenes šūnās, piemēram, gangliju šūnās, glia šūnās (Müllera šūnās un astrocītos) un mikroglijās [63]. AGE/RAGE var izraisīt apoptozi tīklenes neironu šūnās, ko izraisa paaugstināts oksidatīvais stress vai pro-iekaisuma citokīnu aktivācija |64]. Šajā pētījumā rezultāti pierāda, ka GCL, INL un ONL apoptozi mazināja MVU.

5. Secinājumi

Šis pētījums parādīja, ka MVU patēriņš uzlaboja diabēta izraisīto patoloģisko profilu streptozotocīna izraisītu diabēta žurku (STZ) tīklenes slāņos. In vitro pētījumā MVU uzrādīja antioksidantu aktivitāti, inhibējot Maillard reakcijas starpproduktus (fruktozamīnu un dikarbonilskābi). savienojumi), novēršot AGE veidošanos un reducēto tiola grupu samazināšanos BSA. Diabēta tīklenē MVU ārstēšana vājināja CML veidošanos, CML-RAGE mijiedarbību un pro-iekaisuma reakciju (VEGF, GFAP, S100B un RAGE) aktivizēšanu. Turklāt MVU izraisīja samazinātus oksidatīvā stresa marķierus (iNOS, Nox4 un NT) un apoptozi. Visbeidzot, rezultāti liecina, ka MVU ir aizsargājoša iedarbība uz STZ tīklenes deģenerāciju.

Šis raksts ir iegūts no Antioxidants 2021, 10, 717. https://doi.org/10.3390/antiox10050717 https://www.mdpi.com/journal/antioxidants