Pētījums par cistanču mehānisma ieguvumiem aknu aizsardzības ārstēšanā

Abstract:Izpētīt aktīvo komponentu mehānismuCistancasHerba aknu fibrozes ārstēšanā no zāļu, slimību un mērķu viedokļa. Cistanches Herba efektīvie komponenti tika savākti, izmantojot tradicionālās ķīniešu medicīnas sistēmas farmakoloģijas datubāzi un analīzes platformu (TCMSP), tradicionālās ķīniešu medicīnas enciklopēdijas datubāzi (ETCM), tradicionālās ķīniešu medicīnas pētījumu visaptverošo datubāzi (TCMID), CNKI datubāzi, PubMed un citas datu bāzes. Aktīvo komponentu mērķa gēniCistanches Herbatika iegūti ar Uniprot datu bāzi, un aknu fibrozes slimības gēni tika savākti GeneCards datubāzē un OMIM datubāzē, aktīvo komponentu mērķi tika krustoti araknu fibrozemērķus, un tika izveidots tradicionālās ķīniešu medicīnas aktīvo komponentu slimību tīkls. Proteīnu mijiedarbības tīkls (PPI) tika izveidots, izmantojot String datu bāzi un programmatūru Cytoscape 3.7.1. GO funkcija un KEGG ceļš tika bagātināti ar DAVID datu bāzi.

Dzīvnieku modelisaknu fibrozetika noteikts, LN, HA, PCIII un Col IV saturs peles aknu audos tika noteikts ar ELISA komplektu, aknu histopatoloģiskās izmaiņas tika novērotas ar HE un Masson krāsošanu, un PI3K un AKT mRNS transkripcija tika noteikta ar reāllaika fluorescenci. kvantitatīvā PCR. Astoņi aktīvie Cistanches Herba komponenti, 157 mērķi un 1 005 mērķi noaknu fibrozetika savākti un pārbaudīti, un 92 mērķi krustojas viens ar otru, iesaistot 5 galvenos signālu ceļus, tostarp vēža signāla ceļu, B hepatīta vīrusa signāla ceļu, PI3K-AKT signāla ceļu, audzēja nekrozes faktora signāla ceļu, proteoglikānu un vēzi. Eksperiments ar dzīvniekiem parādīja, ka, salīdzinot ar modeļa grupu, lielas, vidējas un zemas devas grupas no kopējāfeniletanola glikozīdi, kas satur akteozīdu, no Cistanches Herba (700, 350, 175 mg/kg) var ievērojami samazināt LN, HA, PCIII un Col IV saturu aknu audos pelēm ar aknu fibrozi. Aknu audu patoloģiskais novērojums parādīja, ka kopējaisCistanches Herbs feniletanola glikozīdi Ieguvumi:varētusamazināt aknu bojājumusun uzlabotpretnovecošanās sistēma. Reāllaika fluorescences kvantitatīvā PCR noteikšana parādīja, ka PI3K un AKT mRNS ekspresija modeļa grupas aknu audos bija ievērojami augstāk regulēta, salīdzinot ar parasto grupu. Salīdzinot ar modeļu grupu, PI3K un AKT mRNS ekspresija Cistanches Herba kopējo feniletanola glikozīdu lielo, vidējo un zemo devu grupās ievērojami samazinājās, un tās mehānisms var aizkavēt aknu fibrozes progresēšanu, kavējot PI3K-AKT ceļa aktivāciju. . Kopējie Cistanches Herba feniletanola glikozīdi iedarbojas uzaknu novecošanās novēršana, kas liek pamatu turpmākiem pētījumiem par farmakoloģisko iedarbībuCistanches Herba. 

(noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu par cistanche priekšrocībām)

Atslēgvārdi:Cistanches Herba; tīkla farmakoloģija; molekulārā dokstacija;aknu fibroze;aknu aizsardzība;

Autors:ZHANG Bo-rui1, MA Qian-qian1, WANG Wen-yi1, ZHANG Shi-lei1, LIU Tao1, ZHAO Jun2, MA Long1*

Sabiedrības veselības skola, Sjiņdzjanas Medicīnas universitāte, Urumči 830054, Ķīna; 2Uiguru medicīnas galvenā laboratorija, Sjiņdzjanas Farmācijas pētniecības institūts, Urumči 830004, Ķīna

Aknas ir svarīgs cilvēka ķermeņa gremošanas dziedzeris, un, tiklīdz slimība rodas, tā ietekmēs cilvēka ķermeņa normālu vielmaiņas funkciju. Pētījumi ir parādījuši, ka,svarīgs aknu vēža veidošanās veids ir aknu fibroze.Kad aknas tiek stimulētas, imūnās šūnas izdala lielu skaitu imūnregulācijas faktoru, kas izraisa aknu zvaigžņu šūnu aktivāciju un proliferāciju, liela daudzuma kolagēna sintēzi un liela daudzuma ekstracelulārās matricas nogulsnēšanos aknās, kā rezultātā rodas fibrozes veidošanās. Tāpēc kontrole jebkurā aknu slimības procesa posmā var samazināt aknu slimību bojājumus, un pētījumi par aknu fibrozes ārstēšanu ir ļoti svarīgi.

Pēdējos gados pētījumi liecina, kaCistanchetam ir acīmredzama ārstnieciska iedarbība aknu slimību ārstēšanā un acīmredzamas priekšrocības aknu fibrozes ārstēšanā.

Cistanches Herba, īsts ārstniecisks materiāls Sjiņdzjanā, ir pazīstams kā "tuksneša žeņšeņs" un ir klīniski izmantots tūkstošiem gadu.

Cistanche priekšrocības

Mūsdienu pētījumi ir parādījuši, ka tai ir dažādas bioloģiskas aktivitātes, piemēram,pretnovecošanās, aizsargā aknas, mazina nogurumu, pret osteoporozi, caureju un tā tālāk.Jūs un citi [8] to parādījaCistanchefeniletanoīds var mazināt aknu fibrozes pakāpi. Džans et al[9] atklāja, ka aknu zvaigžņu šūnu aktivāciju un aknu fibrozi var kavētCistanchefeniletanoīdu liposomas. Tomēr farmakoloģiskā iedarbībaCistancheaknu fibrozes ārstēšanā un tās mehānisms joprojām ir neskaidrs un vēl ir jānoskaidro.

Šajā pētījumā tīkla farmakoloģija tika izmantota, lai izveidotu tīkla diagrammu "komponents-slimība-mērķa ceļš" [10], un pēc tam tika izmantota proteīnu mijiedarbības un mērķa bagātināšanas analīze [11], lai prognozētu attiecīgos mērķus un mērķus.Cistancheārstēšanāaknu fibroze. Šis ceļš, izmantojot molekulārās dokstacijas tehnoloģiju un eksperimentus ar dzīvniekiem, nodrošina pamatu aktīvo sastāvdaļu farmakoloģiskajai iedarbībai.Cistancheaknu fibrozes ārstēšanā.

1 Cistanche materiāls un metodes

1.1. Ar Cistanche deserticola aktīvo komponentu mērķu skrīningu

1.1.1. Cistanche ķīmiski aktīvo komponentu skrīnings

Izmantojot "Cistanche" kā meklēšanas vienumu, perorālā biopieejamība (OB), kas ir lielāka vai vienāda ar 30 procentiem, zāļu līdzība (līdzība zālēm) tika pārbaudīta Tradicionālās ķīniešu medicīnas sistēmas farmakoloģijas analīzes platformā (TCMSP). . , DL) Lielāka vai vienāda ar 0,18 kā aktīvās sastāvdaļas un pēc tam apvienota ar Ķīnas medicīnas enciklopēdijas datu bāzi (ETCM), Ķīniešu medicīnas pētījumu visaptverošo datu bāzi (TCMID), CNKI datu bāzi, PubMed datu bāzi, lai papildinātu attiecīgās Cistanche sastāvdaļas.

1.1.2. Cistanche un aknu fibrozes slimības mērķu aktīvās sastāvdaļas

Izmantojot Uniprot datu bāzi, tika pārbaudīti olbaltumvielu mērķi, kas atbilst Cistanche aktīvajiem komponentiem. Pēc tam tika izmantota genoma anotācijas datu bāze un Mendeļa ģenētiskā datu bāze, lai meklētu ar "aknu fibrozi" kā atslēgvārdu, lai datubāzē iegūtu attiecīgos olbaltumvielu mērķus un visbeidzot iegūtu abu kopīgos olbaltumvielu mērķus.

1.1.3. "Cistanche aktīvo komponentu - aknu fibroze - olbaltumvielu mērķi" tīkla izveide un analīze String datu bāze tika izmantota, lai izveidotu "Cistanche aktīvo komponentu - aknu fibrozes - olbaltumvielu mērķu" tīklu vizualizācijai. Katrs mezgls apzīmē gēnu, proteīnu vai aktīvo komponentu, un savienojums starp mezgliem atspoguļo savienojumu starp aktīvo komponentu un saistītajiem mērķiem. Galvenie gēni tīklā tiek analizēti atbilstoši tīkla pakāpei, un beidzot tiek iegūts proteīnu mijiedarbības tīkls. .

1.1.4. GO un KEGG bagātināšanas analīze

Deivida datu bāze importēja Cistanche mērķus aknu fibrozes ārstēšanā, veica GO un KEGG bagātināšanas analīzi un pārbaudīja atbilstoši Count vērtībai.

1.1.5. Molekulārā dokstacija

Iegūstiet Cistanche Cistanche galveno aktīvo komponentu 2D ķīmisko struktūru, izmantojot PubChem datubāzi, atrodiet attiecīgā galvenā mērķa proteīna 3D struktūru PBP datu bāzē, veiciet molekulāro dokošanu, izmantojot programmatūru Autodock, lai iegūtu vietu ar visaugstāko saistīšanas enerģiju, un beidzot vizualizējiet to, izmantojot Pymol programmatūras apstrādi.

1.2. Eksperimenti ar dzīvniekiem Cistanche ieguvumos

1.2.1. Izmēģinājuma dzīvnieki

60 SPF kategorijas Peļu tēviņi, kas sver 18-22 g, tika iegādāti no Sjiņdzjanas Medicīnas universitātes Eksperimentālo dzīvnieku centra. Ražošanas licences numurs ir SCXK (jauns) 2018-0002, lietošanas licences numurs ir SYXK (jauns) 2018-0003 un ētikas apstiprinājuma numurs: IACUC-20210326-10.

1.2.2. Galvenie reaģenti

Cistanche fenetanoīdu glikozīdi (CPhG) (iegādāti no Xinjiang Hetian Dichen Pharmaceutical and Biological Co., Ltd., partijas numurs: 20180502); Compound Biejia Ruangan Tablets (Mongolia Furui Technology Co., Ltd. produkts); peles laminīns (LN), peles hialuronskābe (HA), peles III tipa prokolagēns (PCIII), peles IV tipa kolagēns (Col IV) ELISA komplekts.

(Beijing Jianglai Reagent Co., Ltd., partijas numurs: JL20286-96T, JL2406-96T, JL20169-96T, JL20128-96T); Masson trihroma krāsošanas šķīdums (Zhuhai Besso, partijas numurs: 20210115); Hematoksilīna un eozīna (HE) krāsošanas komplekts (Solebo HE dyedColor Kit G1120); SuperReal Fluorescence Quantitation Master Mix Reagent Color Edition (SYBR Green, Tiangen FP205-02); FastKing RT komplekts (ar gDNase, Tiangen KR116-02); Transzol up (Full Gold ET111-01).

1.2.3. Galvenie instrumenti

HZQ-C pilna mitruma nemainīgas temperatūras kultūras kratītājs (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd.); DK-8D elektriskā apkure nemainīgas temperatūras ūdens vanna (Jiangsu Jinyi Instrument Technology Co., Ltd.); HC-3018R ātrgaitas atdzesēta centrifūga (Anhui Zhongke Zhongjia Science and Technology Co., Ltd.) Instrument Co., Ltd.); Varioskan Flash mikroplašu lasītājs, QuantStudio 6 reāllaika PCR instruments (Thermo Fisher Scientific, ASV); Retsch Augstas caurlaidības audu slīpmašīna MM400; ST5020 daudzfunkcionāla krāsošanas iekārta (Shanghai Leica Trading Co., Ltd.).

1.2.4. Eksperimentālā metode

Dzīvnieki tika nejauši sadalīti normālā kontroles grupā, modeļa grupā, pozitīvās kontroles grupā (840 mg/kg), CPhGs lielas devas grupā (CPhGs-H, 700 mg/kg), vidējas devas grupā (CPhGs-M, 350 mg/kg) , Mazu devu grupa (CPhGs-L, 175 mg/kg);

Pozitīvās kontroles grupai tika dotas Compound Biejia Ruangan tabletes, atsaucoties uz zāļu lietošanas instrukcijām (4 tabletes vienā reizē, 3 reizes dienā; 0,5 g tabletē) un "Funkcionālā eksperimenta pamācību", ko publicēja Tautas militārās medicīnas izdevniecība. Konversija; CPhG lielas, vidējas un mazas devas grupas ir balstītas uz attiecīgo literatūru [17] un pirmseksperimenta rezultātiem, un žurku CPhG lielas, vidējas un mazas devas grupas (500, 250, 125 mg/kg) tiek pārveidotas, pamatojoties uz žurku devām. un peles. Attiecība 1:1,4, pārvēršot lielas, vidējas un mazas CPhG devas grupās (700, 350, 175 mg/kg), 10 peles katrā grupā; parastajai kontroles grupai tika injicēts tāds pats daudzums parastā fizioloģiskā šķīduma, un peles citās grupās tika injicētas Visām pelēm intraperitoneāli injicēja 10% CCl4 olīveļļas šķīdumu (5 ml/kg), divas reizes nedēļā 8 nedēļas, izveidot aknu fibrozes peles modeli; parastajai kontroles grupai un modeļa grupai tika dots destilēts ūdens ar zondi, bet pārējām grupām tika dots destilēts ūdens ar zondi. Visi tika ievadīti ar zondi noteiktā devā 8 nedēļas.

1.2.5. Bioķīmiskā indeksa noteikšana

LN, HA, PCIII un Col IV saturs aknu audu homogenātā tika noteikts ar ELISA metodi ar mikroplašu lasītāju, un komplekta norādījumi tika stingri ievēroti.

1.2.6. Aknu histopatoloģiskā novērošana

Aknu audi tika fiksēti ar 4 procentu paraformaldehīda šķīdumu, dehidrēti etanolā, iestrādāti parafīnā un pēc tam sadalīti un iekrāsoti ar HE un Masson, lai novērotu aknu audu sekcijas.

1.2.7. PI3K un AKT mRNS transkripcijas noteikšana ar reāllaika fluorescences kvantitatīvo PCR

Peles aknu audi tika noņemti un pievienoti ar Transzol up reaģentu, lai iegūtu kopējo peles aknu audu RNS. RT-PCR tika izmantots, lai noteiktu PI3K un AKT mRNS transkripciju peles aknās. Saistītās gēnu sekvences ir parādītas 1. tabulā

1.2.8. Statistikas metodes

Statistiskajai analīzei tika izmantots SPSS 21.0, un dati tika izteikti kā vidējā ± standartnovirze (x ± s);

Vienvirziena ANOVA vidējo grupu salīdzināšanai; pretējā gadījumā tika izmantots rangu summas tests, un testa līmenis bija=0.05.

2 Cistanche Function Experiment rezultāti

2.1. Cistanche aktīvo sastāvdaļu pārbaude

Kopā 75 zināmas sastāvdaļasCistanchetika izsijāti, un kā skrīninga sliekšņi tika noteikti OB lielāks vai vienāds ar 30 procentiem un DL lielāks vai vienāds ar 0,18, un tika iegūti 8 kvalificēti aktīvie komponenti: -sitosterols un arahidonāts. , Suzilaktons (suchilaktons), Liriodendron sveķu B dimetilēteris (jangambins), kvercetīns (kvercetīns), dipikaīns (markīns), verbaskozīds (akteozīds), ehinakozīds (ehinakozīds) , kopā no Uniprot datu bāzes tika iegūtas 157 mērķa bāzes

(skat. 1. attēlu).

1. att. Cistanches Herba aktīvās sastāvdaļas mērķa karte

2.2. Tīkla izveide un "Cistanche deserticola aktīvo komponentu - aknu fibroze - olbaltumvielu mērķi" analīze

The GeneCards and OMIM databases were searched to obtain 1 005 targets related to liver fibrosis, and the 157 potential protein targets of Cistanche deserticola and 1 005 protein targets related to liver fibrosis were deduplicated, and Venn diagrams were drawn ( See Figure 2), import 92 common targets into the String database, and perform visual processing to construct a network of "active components of Cistanche deserticola - liver fibrosis - protein targets" (see Figure 3), in which the core targets are: AKT, ICAM1, MMP9, BCL-2, ADRB2, CASP3, JUN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA, TGFB1, CASP9, etc. degree>50 tika izmantots kā slieksnis, un olbaltumvielu mijiedarbības tīkla diagramma tika uzzīmēta atbilstoši pakāpes un kombinētā rezultāta vērtībai (sk. 4. attēlu).

2. att. Venna diagramma par Cistanches Herba kopējo zāļu slimību mērķi aknu fibrozes ārstēšanā

3. att. Tīkla diagramma par Cistanches Herba "parasto mērķa slimību" aknu fibrozes ārstēšanā

2.2. Tīkla izveide un "Cistanche-aknu fibrozes-proteīna mērķu aktīvo komponentu" analīze.

GeneCards un OMIM datu bāze ieguva 1 005 mērķus, kas saistīti ar aknu fibrozi, dublikēja 157 potenciālos Cistanche deserticola proteīnu mērķus un 1 005 proteīnu mērķus, kas saistīti ar slimības aknu fibrozi, un uzzīmēja Venna diagrammas (sk. 2. attēlu), importēja 92 kopīgus mērķus String datu bāzē un veikt vizuālu apstrādi, lai izveidotu "Cistanche deserticola aktīvo komponentu - aknu fibrozes - olbaltumvielu mērķu" tīklu (sk. 3. attēlu), kuru galvenie mērķi ir: AKT, ICAM1, MMP9 , BCL{ {10}}, ADRB2, CASP3, JUN, PON1, PIK3CG, RXRA, CASP8, PPARG, BAX, NOS3, PRKCA

Piezīme. Mezgla apgabals attēlā apzīmē grādu vērtību, un savienojuma biezums apzīmē kombinētā punkta vērtību.

2.3. GO un KEGG bagātināšanas analīze

Izmantojot David datubāzi, 92 olbaltumvielu mērķi aknu fibrozes ārstēšanā tika importēti datubāzē bagātināšanas analīzei (sk. 5. attēlu). Atlasiet desmit populārākos ierakstus ar šūnu komponentu, bioloģisko procesu un molekulāro funkciju skaitīšanas vērtībām. Tostarp bioloģiskie procesi ietver pozitīvu DNS transkripcijas regulēšanu, negatīvu apoptozes regulēšanu, novecošanos, iekaisuma reakciju, pozitīvu šūnu proliferācijas regulēšanu, apoptozi, signālu pārraidi utt. Molekulārās funkcijas galvenokārt ietver enzīmu, proteīnu, transkripcijas faktoru un tie paši proteīni, DNS saistīšanās, cinka jonu saistīšanās utt.; šūnu komponentos galvenokārt ietilpst kodols, citoplazma, ārpusšūnu vide, plazmas membrāna, šūnu membrāna, mitohondriji utt.

20 populārākie ceļi tika atlasīti, pamatojoties uz David datubāzi un Count vērtību, un ceļu bagātināšanas analīze tika veikta potenciālajiem Cistanche deserticola mērķiem aknu fibrozes ārstēšanā (sk. 6. attēlu). Galvenie iegūtie ceļi ir: PI3K-AKT (skat. 7. attēlu), TNF signalizācijas ceļš, HBV signalizācijas ceļš u.c.

5. attēls. Cistanches Herba potenciālo mērķu GO analīze aknu fibrozes ārstēšanā

6. att. KEGG signāla ceļa bagātināšanas analīze

7. att. Cistanches Herba PI3K-AKT ceļš aknu fibrozes ārstēšanā

2.4. Cistanche aktīvās sastāvdaļas-aknu fibrozes mērķa-ceļu tīkla izveide

Vizuāla apstrāde, lai izveidotu "Cistanche deserticola-aknu fibrozes mērķa ceļa aktīvo komponentu" tīklu (sk. 8. attēlu).

8. att. Cistanches Herba-aknu fibrozes-proteīna mērķa-ceļa aktīvā sastāvdaļa

Piezīme: Sarkans apzīmē aknu fibrozi; Zaļā krāsa ir Cistanches Herba aktīvās sastāvdaļas; Oranžs apzīmē ceļu, zils apzīmē proteīna mērķi, un līnijas segments apzīmē saistību starp Cistanches Herba un aknu fibrozi

2.5. Cistanche aktīvo komponentu molekulārās dokstacijas rezultāti aknu fibrozes ārstēšanā

Divas svarīgākās aktīvās sastāvdaļas noCistanche, Verascoside un Echinacea, ar Autodock programmatūras palīdzību molekulāri tika savienoti ar galvenajiem albumīna mērķiem ICAM1, AKT1 un MMP9. Saistīšanas enerģijas ir parādītas 2. tabulā. Rezultāti tika importēti Pymol programmatūrā vizualizācijai, un molekulārās dokstacijas rezultāti parādīja, ka verbasin un AKT veido ūdeņraža saites pozīcijās ASN-54, TYR-272, un LYS-297; Veido ūdeņraža saiti 10. pozīcijā; Verbasin un MMP9 veido ūdeņraža saiti pie LEU-188, ALA-189, GLU-227, HIS-230, HIS-236, HIS-226 pozīcijas;

Echinacea veido ūdeņraža saites ar AKT pozīcijās GLU-356, HIS-297, ASN-296, ALA-226, LYS-294 un GLU-228 ; ehinakozīds veido ūdeņraža saites ar ICAM1 DA-7, DT-8, DT-11, DT-12 un DC-13 pozīcijās, veido ūdeņraža saites;

Verbasin veido ūdeņraža saites ar MMP9 pozīcijās HIS-230, HIS-236, HIS-226, GLU-227, ALA-189, LEU-188, TYR-248 (skat. 9. attēlu).

2. tabula Saistīšanas enerģija starp galvenajiem aktīvajiem komponentiem un galvenajiem proteīna mērķiem (kJ/mol)

9. att. Molekulārās dokstacijas rezultāti

Piezīme: AF ir akteozīda un AKT, akteozīda un ICAM1, akteozīda unAttiecīgi MMP9, ehinakozīds un AKT, ehinakozīds un ICAM1, un ehinakozīds un MMP9.

2.6. LN, HA, PCIII un Col IV satura atšķirības katrā peļu grupā

Salīdzinot ar parasto grupu, modeļu grupā LN, HA, PCIII un Col IV saturs bija palielināts, un atšķirība bija statistiski nozīmīga (P<0.01). the="" contents="" of="" pciii="" and="" col="" iv="" (p="" <="" 0.01)="" indicated="" that="" cphgs="" had="" an="" anti-hepatic="" fibrosis="" effect="" (see="" table="" 3,="" figure="">

3. tabula LN, HA, PCIII un Col IV satura atšķirības dažādu grupu pelēm (x  ± s, n = 9)

Piezīme: Salīdzinot ar parasto kontroles grupu,#P<0.01; compared="" with="" model="" group,="">**P<>

2.7. Aknu histopatoloģiskā novērošana

HE iekrāsošana (sk. 10. attēlu): normālajā grupā hepatocītu morfoloģija bija normāla, aknu lobulas bija neskartas, un nebija hepatocītu un iekaisuma šūnu deģenerācijas un nekrozes sadalījuma. Portāla zona bija skaidri redzama, un ap centrālo vēnu bija glīti sakārtoti hepatocīti. Modeļa grupai bija acīmredzama hepatocītu punktveida nekroze, proliferācija, tūska, iekaisuma šūnu infiltrācija un liels skaits eozinofīlo granulu. Augstas, vidējas un mazas devas grupas un pozitīvi pāri

Kontroles grupā hepatocītu nekrozes pakāpe bija viegla, un eozinofīlās granulas bija ievērojami samazinātas.

Masona krāsošana (sk. 11. attēlu): normālajai grupai bija pilnīga hepatocītu morfoloģiskā struktūra, un asinsvada sieniņā pēc kolagēna krāsošanas tika novērotas tikai dažas kolagēna šķiedras; modeļu grupā liels skaits pseidolobulu, ko veido zilas šķiedras, apņēma portāla zonu, un tika novērots liels skaits vakuolu. Augstas, vidējas un zemas devas grupas un pozitīvās kontroles grupa varēja ievērojami samazināt aknu fibrozes līmeni aknu audos, un zilās šķiedras ap portāla zonu tika ievērojami samazinātas.

10. attēls. CPhG ietekme uz aknu histopatoloģiskajām izmaiņām pelēm ar CCl4 izraisītu aknu fibrozi

Piezīme: A: Normāls; B: modelis; C: pozitīva kontroles grupa; D: CPhGs-H; E: CPhGs-M; F: CPhGs-L. Tas pats zemāk.

11. att. CPhG ietekme uz kolagēna šķiedru izmaiņām aknu audos pelēm ar aknu fibrozi, ko izraisa CCl4

2.8 PI3K un AKT mRNS ekspresijas noteikšana ar reālā laika fluorescences kvantitatīvo PCR

Salīdzinot ar parasto kontroles grupu, PI3K un AKT mRNS ekspresija peļu aknu audos modeļa grupā bija ievērojami paaugstināta (P<>

Salīdzinot ar modeļa grupu, PI3K un AKT mRNS ekspresija pozitīvās kontroles grupā un lielas, vidējas un zemas Cistanche deserticola fenetilspirta kopējo glikozīdu devas grupās bija ievērojami samazināta (P<0.01) (table="">

4. tabula PI3K un AKT mRNS transkripcija peles aknu audos (x± s, n = 9)

Piezīme: Salīdzinot ar parasto kontroles grupu, #P<0.01; compared="" with="" model="" group,=""><>

3 Diskusija un secinājumi

Aknu fibrozes attīstības process ir sarežģīts, un dažādi citokīni un šūnu ceļi "sazinās" un ietekmē viens otru, veidojot sarežģītu mijiedarbības tīklu. Tāpēc ir grūti strādāt ar viena mērķa un viena kanāla terapiju. Tradicionālajai ķīniešu medicīnai piemīt daudzkomponentu, daudzmērķu un sarežģītas darbības īpašības, lai sistemātiski regulētu cilvēka ķermeni. Cistanche deserticola aizsargā aknas. Cistanche deserticola aktīvās sastāvdaļas tiek iegūtas, izmantojot tradicionālās ķīniešu medicīnas TCMSP datubāzi un citas datu bāzes: Verbasin, ehinakozīds, -sitosterols, arahidonskābe, suzilaktons, Liriodendron Resinol B dimetilēteris, kvercetīns, dipikaīns.

Pētījumi ir parādījuši, ka feniletanoīdu glikozīdi noCistancheir galvenās aktīvās sastāvdaļasCistanche, starp kuriem ehinakozīds un verbaskozīds tiek uzskatīti par galvenajām bioaktīvajām sastāvdaļāmCistanche. Krizantēmas glikozīdu iedarbība ir saistīta araknu problēma

mērķis un pārbaudīts ar molekulāro dokstaciju.

Echinaceaunverbascoside, kā Cistanche galvenās sastāvdaļas, tām ir anti-aknu fibrozes iedarbībaapoptozes regulēšanaaknu zvaigžņu šūnas. ICAM1, AKT un MMP9 var būt ehinakozīda un verbazīna mērķi aknu fibrozes ārstēšanā. Kā šūnu adhēzijas faktors ICAM1 ir bagātīgi izteikts aknu bojājuma gadījumā. Tas var inhibēt aknu fibrozi, kavējot ICAM1 pārmērīgu ekspresiju. attīstību. Serīna/treonīna proteīnkināze (AKT) ir svarīga mērķa kināze lejpus PI3K. Aktivētā AKT tiek aktivizēta tālāk, lai veicinātu aknu zvaigžņu šūnu proliferāciju un paātrinātu aknu fibrozes progresēšanu.

Gluži pretēji, AKT inhibēšana kavēs aknu fibrozes progresēšanu; MMP-9 var noārdīt normālu aknu kolagēna matricu, iznīcināt aknu šūnu iekšējo vidi, veicināt aknu zvaigžņu šūnu aktivāciju, izdalīt lielu daudzumu kolagēna un veicināt aknu fibrozes attīstību. Aknu fibrozes rašanās; šajā eksperimentā CCl4 izmantošana aknu fibrozes peles modeļa izveidošanai ir viena no klasiskajām modelēšanas metodēm. CCl4 tiek ievadīts dzīvnieka ķermenī ar intraperitoneālu injekciju. PCIII un Col IV saturs tika ievērojami palielināts; salīdzinot ar modeļu grupu, CPhG augstas, vidējas un zemas devas grupās būtiski samazināja LN, HA, PCIII un Col IV saturu; HE un Masson testa rezultāti parādīja, ka, salīdzinot ar modeļu grupu, CPhG bija augsts, vidējs un mazas devas grupā hepatocītu nekrozes pakāpe bija viegla, eozinofīlās granulas bija ievērojami samazinātas un zilās šķiedras ap portāla zonu ievērojami samazināts. Iepriekš minētie rezultāti norādīja, ka aknu fibrozes inhibīcija ar Cistanche deserticola kopējiem glikozīdiem var būt saistīta ar ICAM1, AKT un MMP9 mērķiem, un ir jāturpina noteikt saistīto proteīnu ekspresiju.

Aknu fibrozes rašanos izraisa dažādi faktori. Starp tiem PI3K-AKT ceļš ir visaugstāk novērtētais ceļš, kas iegūts, izmantojot ceļa bagātināšanas analīzi. PI3K-AKT signalizācijas ceļš ir iesaistīts šūnu proliferācijas un apoptozes regulēšanā, cilvēka audzēja ģenēzes inducēšanā un HBV gēnā. Tas ir viens no svarīgākajiem ceļiem aknu fibrozes ārstēšanā. PI3K-AKT ceļš var aktivizēt aknu asinsvadu veidošanos, uzlabot asins piegādi, atjaunot ārpusšūnu matricu, regulēt autofagiju, kavēt hepatocītu apoptozi un veicināt hepatocītu proliferāciju, tādējādi izraisot aknu fibrozi.

EchinaceaunRunātisksvar kavēt aknu šūnu proliferāciju un aktivāciju, regulējot attiecīgi ICAM1, AKT un MMP9 mērķus un kopējoAkteozīdsiekšāfeniletilglikozīdinoCistanchevar traucēt aknu šķiedrām, piedaloties enerģijas metabolismā,aknu šūnu proliferācija un apoptoze. Salīdzinot ar parasto grupu, PI3K un AKT mRNS ekspresijas līmeņi modeļu grupas peles aknu audos bija ievērojami paaugstināti; salīdzinot ar modeļa grupu, Cistanche deserticola kopējais feniletanola glikozīdu līmenis bija augsts, vidējs un zems. PI3K un AKT mRNS ekspresijas devas grupā bija ievērojami samazinātas, un mehānisms var kavēt PI3K-AKT ceļa aktivāciju un aizkavēt aknu fibrozes progresēšanu.

Akteozīdstiek saukti arī par ergosterosīdu un verbaskozīdu. Pieder pie fenilpropanoīda glikozīdu savienojumiem. To iegūst no sausiem, mīkstus kātiem ar zvīņainām lapāmCistanche tubulosaYC Ma. Tā ir viena no galvenajām efektīvajām Cistanche ekstrakta sastāvdaļām.

Akteozīdsir savienojumu klase ar spēcīgu bioloģisko aktivitāti, kam ir dažādas fizioloģiskas iedarbības, piemēram, pretiekaisuma, imunitāti uzlabojošas, antianoksijas, brīvo radikāļu attīrīšanas, DNS bāzes labošanas un aknu fibrozes ārstēšanas īpašības.

noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu par Cistanche ieguvumiem aknu novērošanā

Nobeigumā kopāCistanche feniletanola glikozīdivar efektīvi atvieglot CCl4-inducēto aknu fibrozi pelēm, un mehānisms var būt saistīts ar aknu zvaigžņu šūnu proliferāciju un aktivāciju, ko mediē PI3K-AKT signālu ceļš. Izveidojiet pamatu Cistanche farmakoloģiskajai iedarbībai.