No T šūnām iegūtais interleikīns-22 veicina CD155 ekspresiju vēža šūnās, lai nomāktu NK šūnu darbību un veicinātu metastāzes
Oct 10, 2023
KOPSAVILKUMS
Lai gan T šūnas var nodrošināt spēcīgu pretvēža imunitāti, T palīgšūnu (Th) apakškopa, kas ražo interleikīnu-22 (IL-22) krūts un plaušu audzējos, ir saistīta ar bēdīgiem pacienta iznākumiem. Šeit mēs pārbaudījām mehānismus, kā šīs T šūnas veicina slimības. Plaušu un krūts vēža peļu modeļos Il22 konstitucionālā un T šūnām specifiskā dzēšana samazināja metastāzes, neietekmējot primārā audzēja augšanu. IL-22 receptoru dzēšana uz vēža šūnām samazina metastāzes līdz tādai pakāpei, kāda novērota pelēm ar IL-22- deficītu. IL-22 izraisīja augstu CD155 ekspresiju, kas saistījās ar aktivējošo receptoru CD226 uz NK šūnām. Pārmērīga aktivācija izraisīja CD226 daudzuma un funkcionāli traucētu NK šūnu samazināšanos, kas paaugstināja metastātisko slogu. IL-22 signalizācija bija saistīta arī ar CD155 ekspresiju cilvēku datu kopās un ar sliktiem pacientu rezultātiem. Kopumā mūsu atklājumi atklāj imūnsupresīvu ķēdi, ko aktivizē T šūnu IL-22, kas veicina metastāzes plaušās.
Cistanche tubulosa-Antitumor priekšrocības
IEVADS
Galvenā neoplastiskās progresēšanas pazīme un galvenais ar vēzi saistītās mirstības cēlonis ir vēža šūnu spēja izplatīties sekundārajās vietās un veidot metastāzes.1,2 Metastāžu veidošanos var novērst, izmantojot imūno uzraudzību, kas ietver dabisko slepkavu (NK), citotoksisko. , un T helper (Th) 1 šūnas.3,4 Turpretim regulējošās T šūnas (Treg), cirkulējošie monocīti un no Th šūnām iegūtais IL-17A veido imūnsupresīvu mikrovidi, kas ļauj izvairīties no imūnsistēmas un veicina metastāzes. 4–6 Tāpēc ir ļoti svarīgi identificēt signalizācijas kaskādes, kas nosaka pretaudzēju imūnšūnu funkciju.7,8 Interleikīns-22 (IL-22) ir citokīns, ko ražo Th17. un cilvēkiem – arī Th1 apakškopa, kas, kā zināms, veicina vēža šūnu augšanu, veicina migrāciju, aizsargā pret apoptozi, inducē pāreju no epitēlija uz mezenhimālu un uztur ļaundabīgo šūnu cilmes veidošanos.9–13 Tas arī veicina agrīnu kanceroģenēzi, iedarbojoties. uz prekursoru bojājumiem vai nenobriedušām vēža cilmes šūnām.14–18 IL-22-ražojošās šūnas, galvenokārt Th šūnas, bet arī gamma delta (gd) T šūnas, invariantās dabiskās slepkavas T (iNKT) šūnas un iedzimtās limfoīdās šūnas (ILC). ), ir konstatēti primārajos vēža bojājumos.19–24 IL-22 tiek izteikts bioloģiski nozīmīgā līmenī krūts, resnās zarnas, plaušu, kuņģa un hepatocelulārā karcinomas gadījumā.9,11,12,25,26 Lielākajā daļā pētījumu. , tā izpausme ir saistīta ar sliktu prognozi, augstāku slimības stadiju un ātrāku audzēja progresēšanu.13,22–24,27–29 IL-22 darbojas tikai caur IL-22 receptoriem (IL{{40). }}R), kas sastāv no divām apakšvienībām: IL-22RA1 un IL-10RB.30,31 Izdalītā IL-22 darbību modulē inhibitors IL{{47} } saistošais proteīns (IL-22BP, IL-22RA2), IL-22RA1 homologs, ko galvenokārt ražo mieloīdās šūnas.32,33 Līdzsvara stāvokļa apstākļos IL -22 ir būtisks homeostatiskais citokīns epitēlija barjerās, piemēram, zarnās, plaušās un ādā.34,35 Šajās vietās IL-22 veicina aizsardzību, atjaunošanos un atjaunošanos, lai uzturētu barjeras integritāti36, 37 un tā trūkums saasina iekaisuma izraisītu kanceroģenēzi.13,38 Šie dati kopā izceļ plašās, no konteksta atkarīgās IL-22 funkcijas gan fizioloģiskos, gan patoloģiskos apstākļos. Saistoties ar receptoriem, IL-22 izraisa Janus kināzes Jak1 un Tyk2, lai fosforilētos STAT3, STAT1 vai STAT5, bet IL-22 var ierosināt citus pakārtotos ceļus, tostarp mitogēnu aktivēto proteīnkināžu (MAPK) kaskādi. vai PI3K-AktmTOR signalizācija atkarībā no šūnu konteksta.13, 36, 39–44 Šo signalizācijas ceļu daudzveidību atspoguļo daudzi fizioloģiski efekti, kas saistīti ar IL-22 signalizāciju, tostarp iepriekš aprakstītie, kā arī aizsardzība pret genotoksiskiem bojājumiem un antibakteriālo peptīdu, gļotu, pro- un pretiekaisuma citokīnu un kemokīnu indukcijas.36,38,39,45,46 Vēža šūnas inducē IL veidošanos-22 no Th šūnām krūts un plaušu vēža slimniekiem.12,47,48 NLRP3 iekaisuma izraisīta IL-1b izdalīšanās inducē IL-22 veidošanos no T šūnām audzējā, kā arī IL-22+ Th šūnas un NLRP3-IL-1b paraksts ir atrodams krūts un plaušu vēža audzēju paraugos.48,49 Šeit mēs nolēmām definēt mehānismu, kā IL-22 veicina krūts un plaušu vēža progresēšana. Mēs atklājām, ka IL-22 veicina metastāžu izplatīšanos plaušās, atklājot ķēdi, kurā IL-22 mediēja imūnsupresiju metastātiskajā nišā, veicinot CD155 ekspresiju uz vēža šūnām, kas bija saistīta ar samazinātu CD226 ekspresiju. uz NK šūnām un samazinātu interferona-g (IFNg) veidošanos. Klīniskie dati liecina, ka šādu ceļu aktivizēšana ir saistīta ar pacienta rezultātiem.
REZULTĀTI
cistanche piedevas priekšrocības - paaugstina imunitāti
IL-22 ietekmē izplatītās vēža šūnas plaušu un krūts karcinomas singēnu peļu modeļos
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 vai čūla), plaušas bija galvenā metastātiskā vieta mūsu modelī ar neregulārām metastāzēm, kas tika konstatētas citur (nav parādīts). Il22/pelēm uzrādīja samazinātu Line-1 un 4T1 šūnu metastātisku izplatīšanos plaušās, salīdzinot ar savvaļas tipa dzīvniekiem neatkarīgi no primārā audzēja lieluma, izmantojot dažādas metastāžu noteikšanas metodes (1.B, 1.C un S1A attēls). Mēs esam arī novērojuši līdzīgu metastātisku fenotipu krūts vēža ortotopiskā modelī, kur 4T1 šūnas tika implantētas piena dziedzeru tauku spilventiņā (S2B attēls). Visas izmantotās aklās makroskopiskās skaitīšanas, klonogēnās analīzes vai histoloģijas metodes uzrādīja augstu konsekvenci zemākas metastātiskās slodzes noteikšanā Il22/dzīvniekiem (1.B, 1.C un S1C attēls). Tas nozīmē IL-22 galveno lomu metastāžu procesā. Pēc tam mēs piespiedām metastāzes, izmantojot intravenozu vēža šūnu injekciju, kas apiet nepieciešamību pēc audu atdalīšanas un invāzijas (1D attēls). Abu šūnu līniju intravenozas (iv) injekcijas atspoguļoja fenotipu subkutānā modelī. Mēs patiešām varētu apstiprināt zemāku metastātisku slodzi Il22 / pelēm (1E un 1F attēls). Šie rezultāti norāda uz īpašu IL-22 lomu izplatītajās šūnās apritē. Lai noteiktu celmam raksturīgo ietekmi, mēs izmantojām E0771 krūts vēža modeli (1. G attēls).50,51 Intravenoza E0771- GFP šūnu injekcija atklāja metastātiskā slodzes samazināšanos Il22/dzīvniekiem, kas apstiprināti ar plūsmas citometriju (1. H un attēls). S1D). Līdzīgi mēs novērojām mazāku metastātisku slodzi peļu aknās, kad E0771-GFP šūnas tika injicētas intraspleniski (S1E attēls). Ar E0771-GFP injicētām pelēm visa kreisā plauša tika optiski attīrīta pēc iDISCO protokola, lai kvantitatīvi noteiktu metastāzes ar gaismas loksnes mikroskopiju in situ (1. attēls).52 Šeit Il22/pelēm bija samazināta tieksme attīstīties metastāzes. , turpretim vizualizēto metastāžu lielums neatšķīrās, un tiem nebija specifiska to lokalizācijas modeļa (1J attēls). Rezumējot, IL-22 iedarbojās uz izplatītām vēža šūnām, padarot krūts un plaušu vēža metastāzes plaušās.
T šūnas ir būtisks IL-22 avots metastātiskajā nišā plaušās
Mēs iepriekš identificējām CD{0}} T šūnas kā galveno IL-22 avotu primārajos cilvēka plaušu audzējos un bronhoalveolārajos skalošanas paraugos.12,47,48 Lai definētu IL-22 avotu mūsu modeļu plaušās mēs intravenozi injicējām E0771 šūnas Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP reportierdzīvniekiem un kvantitatīvi noteicām IL-22+ šūnas, izmantojot plūsmas citometriju (2A un S2A attēls).53 Populācijas tika definētas kā CD4+, CD{15} , CD }} un dubultnegatīvās (DN) (CD4 , CD8 ) ab T šūnas (CD3+ gdTCR NK1.1 ), gd T šūnas (CD3+ gdTCR+ NK1.1 ) un CD{{ 26}} NK1.1+ un CD3 NK1.1+ šūnas (2.B un S2B attēls). Mēs novērojām CD4+, CD8+ T šūnu un NK1.1+ šūnu skaita palielināšanos, kas ražoja IL-22 ar audzēju injicētu dzīvnieku plaušās ( 2C, S2C un S2D attēli). Šeit CD4+ un CD8+ T šūnas veidoja lielāko daļu IL-22-producējošo šūnu pelēm ar audzējiem (2.C attēls). Turklāt mēs noskaidrojām, ka šādas CD4+ T šūnas ražo IL-22, bet ne IL-17A (2. D attēls). Šīm šūnām bija zema CD44 ekspresija, kas apstiprina to atmiņas fenotipu saskaņā ar mūsu iepriekšējiem novērojumiem (S2E attēls).48 Lai sīkāk izpētītu šos atklājumus dažādos modeļos, mēs izmantojām intracelulāro krāsošanu, lai novērtētu IL-22 veidošanos līnijā{ {56}} sc modelis, kas deva līdzīgus rezultātus, izņemot CD8+ T šūnu IL-22 ražotāju mazāku daļu (S2F–S2I attēli). Varējām arī noteikt, ka IL-22+ šūnas neizpauž IFNg, kas atšķir peles IL-22 ražotājus no Th1 apakškopas (2.G attēls).49 Turklāt precīzai griešanai mēs izmantojām konfokālo mikroskopiju. reportierdzīvnieku plaušu šķēles, lai noskaidrotu to telpisko sadalījumu audzēju injicētu peļu plaušās. Šeit mēs varētu noteikt, ka šādi IL-22 un IL-17A ražotāji lokalizējas gandrīz tikai metastātiskajos perēkļos (2. E attēls). Kā liecina plūsmas citometrija, mēs neatradām korelāciju starp IL-22 un IL-17A produkciju no reportiera šūnām metastātiskajos perēkļos, kas norāda, ka IL-22 un IL-17 tos patiešām ražo divas dažādas šūnu apakškopas. Mēs arī apstiprinājām, ka liela daļa IL-22-ražošo šūnu ir CD4+ T šūnas (2. E attēls). Tā kā šie dati liecināja par T šūnu dominējošo lomu IL-22 ražošanā, mēs izveidojām peli Il22floxCd4cre ar nosacītu Il22 dzēšanu visās nobriedušajās T šūnās (2.F attēls). Il22floxCd4cre pelēm, kas tika inficētas ar E0771-GFP šūnām, bija samazināta tieksme attīstīt metastāzes plaušās, kas atgādina fenotipu, kas novērots globālajā Il22/dzīvniekiem (attēls 2F). Tomēr mēs varētu arī apstiprināt, ka kre-rekombināze CD4 promotora kontrolē pilnībā pārtrauca IL-22 veidošanos ne tikai CD4+, bet arī CD8+ T šūnās, kas izolētas no liesas. Il22floxCd4cre pelēm, un tāpēc šo modeli nevarēja izmantot, lai precīzi noteiktu konkrētu IL-22 avotu (S2J attēls). Lai apstiprinātu Th šūnu lomu kā būtisko IL-22 avotu mūsu modelī, mēs pārnesām savvaļas tipa un Il22/CD4+ T šūnas uz Rag1/II22/ dzīvniekiem, kuri pēc tam saņēma E{{ 104}} GFP šūnas iv (2.G attēls). Šeit mēs varētu apstiprināt, ka IL-22 ražošana ar adoptēti pārnestām CD4+ T šūnām ir pietiekama, lai veicinātu plaušu metastāzes mūsu modelī, taču tā tiek atcelta, ja tiek izmantotas CD4+ T šūnas, kas izolētas no II22/dzīvniekiem. (2.G attēls). Svarīgi, ka metastāžu atšķirības ietekmēja T šūnu transplantācija pēc pārvietošanas (S2K attēls). Noslēgumā mēs identificējām Th šūnas kā pietiekamu IL-22 avotu, kas veicina metastāzes audzēju nesošo peļu plaušās, un pēc tam mēs centāmies identificēt attiecīgo mērķa šūnu.
1. attēls. IL-22-nokauts samazina metastāžu skaitu plaušās, bet neietekmē audzēja augšanu plaušu un krūts karcinomas singēnu peļu modeļos
2. attēls. T šūnas ir galvenais IL-22 avots audzēju nesošo peļu plaušās.
IL-22RA1 ekspresija uz audzēja šūnām ir nepieciešama metastāžu veidošanai
IL-22RA1 ekspresija attiecas tikai uz šūnām, kas nav hematopoētiskas, un kalpo kā ierobežojošs faktors IL-22 signalizācijai. Lai noskaidrotu tā ietekmi uz metastātisko fenotipu, mēs izveidojām stabilu Il22ra1 dzēšanu 4T1 un Line -1 šūnās (3.A attēls). Saskaņā ar mūsu iepriekšējiem atklājumiem 4T1 Il22ra1 šūnu audzēja augšana lielākoties netika ietekmēta salīdzinājumā ar 4T1 kontroles šūnām (3.B attēls). Tomēr pelēm, kurām tika injicētas 4T1 Il22ra1 šūnas sc vai iv, bija mazāk makroskopisku un klonogēnu metastāžu plaušās, salīdzinot ar kontroles 4T1 šūnām (3B un 3C attēls). Lai apstiprinātu, ka šis efekts nav atkarīgs no klona, mēs izveidojām un analizējām trīs Line-1 Il22ra1 klonus un pārbaudījām tos pret trim kontroles kloniem, kas deva līdzīgus rezultātus (3D un 3E attēls). Tas apstiprina, ka vēža šūnas, kas ekspresē IL-22RA1-, ir atbilstošais IL-22 mērķis plaušu metastāžu veicināšanā. Lai izslēgtu metodoloģijas blakusefektus, mēs izmantojām IL-22BP, lai kavētu IL-22 signalizāciju. Mēs izveidojām 4T1 un Line-1 šūnu līnijas, kas konstitutīvi izdalīja IL-22BP (Il22ra2+) (S3A attēls). Injicējot sc, Line-1 Il22ra2+ šūnas pieauga līdzīgi kā kontroles šūnas implantācijas vietā, kā iepriekš bija redzams Il22ra1 modeļos un Il22/pelēm, lai gan pieauga 4T1 Il22ra2+ šūnas. lēnāk (S3B attēls). Šeit 4T1 Il22ra2+ šūnām bija ievērojami samazināts metastāžu skaits, kad tās tika injicētas subkutānā (attēls S3B un S3C). Neskatoties uz lielāku mainīgumu, Line{61}} Il22ra2+ šūnas arī veidoja mazāk metastāžu, ja tās tika injicētas sc vai iv (attēls S3D un S3E). Tādējādi IL-22 neitralizācija, izmantojot IL-22BP, lielā mērā atdarināja fenotipu, kas novērots ar Il22ra1 šūnām un Il22/pelēm, apstiprinot citokīna nozīmi metastātiskajā procesā.
cistanche piedevas priekšrocības - paaugstina imunitāti
IL-22 kontrolē audzēja šūnu augšanu metastātiskas transplantācijas agrīnā stadijā
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) un atsevišķas šūnas uz plaušu audu mm2 (attēls S4B). Mēs nevarējām noteikt atšķirības 12 stundas pēc injekcijas, kas norāda, ka IL-22 var būtiski neietekmēt sēšanu (S4C un S4D attēli). Tomēr 48-h laika punktā GFP+ šūnu un koloniju skaits Il22/peles plaušās samazinājās (S4C un S4D attēli). Tas liecināja par IL{12}} lomu agrīnu metastāžu veicināšanā plaušās. Lai novērtētu proliferācijas ātrumu, mēs vienlaikus injicējām pelēm 5-etinil-20 -deoksiuridīnu (EdU) 4 stundas pirms izmeklēšanas 12, 24, 48 stundas un 7 dienas pēc audzēja injekcijas (attēls S4E). . Līdzīgi kā mikroskopiskā skaitīšana, mēs nekonstatējām atšķirības GFP + šūnu skaitā agrāk nekā 48 stundas pēc injekcijas (S4F – S4G attēli). Turpretī mēs varējām atklāt atšķirības EdU iekļaušanā, kas norāda uz lielāku dalīšanās šūnu daļu tikai 7. dienā pēc injekcijas (S4G attēls). Tādējādi mēs uzskatām, ka atšķirības plaušu audzēju slogā, ko ietekmē IL-22, kas novērotas jau pēc 48 stundām, ir saistītas ar mehānismu, kas nav atkarīgs no proliferācijas.
3. attēls. IL-22RA1 ekspresija uz audzēja šūnām ir nepieciešama metastāžu veidošanai
IL-22 regulē CD155 ekspresiju uz audzēja šūnām un tādējādi veicina metastāzes
Pamatojoties uz mūsu konstatējumiem, ka IL-22 iedarbojas uz IL-22ra1+ vēža šūnām, lai veicinātu metastāzes, mēs veicām lielapjoma RNS sekvencēšanu 4T1 šūnām, kas apstrādātas ar IL-22, lai sīkāk noteiktu. pamatā esošais mehānisms (GEO: GSE202314) (4.A attēls). Mēs atklājām 147 gēnus, kas tika atšķirīgi regulēti. No tiem 133 gēnu ekspresija tika palielināta un 14 gēnu ekspresija samazinājās, ārstējot ar IL-22 (4.B un S5A attēls). Mēs apstiprinājām Pvr (poliovīrusa receptoru, Pvr) kā vienu no visnozīmīgākajiem mērķiem, izmantojot qPCR (attēls S5B). Tas ir ievērojams, jo CD155, Pvr produkts, tiek pārmērīgi ekspresēts dažādos vēža veidos, un tam piemīt audzēju veicinošas īpašības, tostarp metastāzes.54–56 Lai apstiprinātu savus atklājumus, mēs novērtējām CD155 ekspresiju IL-22-stimulētā 4T1, Līnija-1 un E0771 šūnas ar plūsmas citometriju (4.C attēls). Mēs atklājām CD155 ekspresijas palielināšanos visās šūnu līnijās 72 stundu laikā (4.D un 4E attēls), taču šī efekta nebija šūnās, kurās nebija IL-22RA1 (S5C attēls). Pēc tam mēs novērtējām IL-22 ietekmi uz CD155 ekspresiju E0771-GFP šūnās no audzēju nesēju peļu plaušām (4.F attēls). Šeit mēs varējām apstiprināt, ka Il22/pelēm implantētajām šūnām bija zemāka CD155 ekspresija, kas korelēja ar mazāku E0771-GFP šūnu daļu, kas noteikta ar plūsmas citometriju (4.G un 4H attēls). Lai pārbaudītu CD155 lomu metastāzēs, mēs izveidojām Pvr Line-1 un 4T1 šūnu līnijas (4I, S5D un S5G attēls). Lai gan tas maz ietekmēja to spēju augt subkutāni (S5E un S5F attēls), tas atcēla spēju veidot metastāzes plaušās (4J un S5H attēls). Mēs varētu mainīt šo procesu ar konstitutīvu CD155 ekspresiju Pvr šūnās neatkarīgi no IL-22-inducētās regulēšanas (Pvr+).
4. attēls. IL-22 signalizācija palielina CD155 ekspresiju uz audzēja šūnu virsmas un nodrošina rezistenci pret metastāžu kontroli
Šajā gadījumā mēs varētu izraisīt metastāzes Il22 / peles plaušās, uzsverot saikni starp šīm divām molekulām un to lomu kā metastātiskā procesa mediatoriem (4K un S5I attēls).
CD155 uz audzēja šūnām ir saistīts ar samazinātu CD226 ekspresiju uz NK šūnām un samazinātu IFNg veidošanos
CD155 ir būtiska loma vēža šūnu proliferācijā un adhēzijā, cita starpā 54–57. Mēs nekonstatējām trūkumus Line-1 Pvr šūnu proliferācijā in vitro (dati nav parādīti). Svarīgi ir tas, ka CD155 ir šūnu ārējā pro-metastātiskā loma, saistoties ar imūnmodulējošajiem receptoriem CD96, CD226 vai TIGIT uz NK un T šūnu virsmas.54–56,58,59 Lai precīzi noteiktu CD155 saistīšanās partnerus, mēs analizējām. pretvēža reakcijas peļu plaušās, kas satur 4T1-luciferāzes+ šūnas (4T1-Luc) (5.A attēls). Izmantojot in vivo attēlveidošanas sistēmu (IVIS), mēs apstiprinājām, ka savvaļas tipa un Il22 / pelēm audzēja šūnas bija līdzīgas 5. dienā pēc injekcijas, un audzēja slodzes atšķirības palielinājās divu nedēļu laikā (5B un 5C attēls). . Patiešām, NK šūnu, bet ne citu šūnu tipu, IFNg ražošanas defekts parādīja humorālo efektoru mehānismu zudumu (5D, 5E un S6A attēls) un korelēja ar lielāku audzēja slodzi (S6B attēls). Šis efekts vienmēr tika konstatēts Line-1 sc modelī (S6C–S6E attēli). Pārbaudot ar mikroshēmu citometriju, 60 paraugi no 4T1-plaušu metastāzes nesošām pelēm uzrādīja paaugstinātu CD155 ekspresiju metastātiskajos perēkļos WT, bet ne Il22/dzīvniekiem (5.F un S6F attēls). Mēs atklājām lielāku NK šūnu infiltrāciju Il22 / bet ne WT dzīvnieku metastātiskajos perēkļos, kas liecina par augstāku aktivāciju un apstiprina atkarību no NK šūnām kā pretvēža efektora šūnām (attēls 5F). CD226, bet ne TIGIT vai CD96, atšķirīgi ekspresēja NK šūnas un mazākā mērā CD8+ T šūnas savvaļas tipa un Il22/dzīvnieku plaušās (5G un S6G–S6H attēls). CD226 ir līdzreceptors, kas ir būtisks NK un CD8 T šūnu efektoru funkciju aktivizēšanai. Tāpēc mēs nolēmām izpētīt tā patofizioloģisko nozīmi mūsu modelī.61–64
cistanche tubulosa-uzlabo imūnsistēmu
CD226 blokāde atceļ antimetastātisko fenotipu dzīvniekiem ar IL-22- deficītu
Pārmērīga CD155-mediētā signalizācija, kas atrodas audzēja mikrovidē, var izraisīt CD226 internalizāciju un degradāciju efektoršūnās.61,63 Lai noteiktu pārmērīgas CD155 ekspresijas lomu uz CD226 un tai sekojošo pretvēža reakciju, mēs injicējām 4T1 kontroli un Pvr+ šūnas iv Il22/ pelēm, un divas grupas saņēma arī anti-CD226 bloķējošu antivielu (480.1) (6.A attēls). Gan Pvr + šūnas, gan CD226 blokāde varētu līdzīgi veicināt plaušu metastāzes Il22 / pelēm, un šie efekti netika sinerģēti (6.B attēls). Līdzīgi kā mūsu iepriekšējie novērojumi savvaļas tipa dzīvniekiem, tas bija pietiekami, lai inhibētu NK šūnu IFNg ražošanu (6.C attēls). Visbeidzot, mēs atklājām CD226 ekspresijas samazināšanos uz NK šūnām Pvr+-injicētām pelēm, salīdzinot ar kontroles šūnām. Tas korelēja ar šo NK šūnu samazināto spēju ražot IFNg (6.D attēls). Turklāt mēs iztaujājām agonistiskās TIGIT antivielas (IG9) potenciālu inhibēt NK šūnu aktivāciju Il22 / dzīvniekiem un CD96 blokādi (3.3), lai novērstu NK šūnu funkcijas inhibīciju (6E attēls). Ne TIGIT agonists, ne CD96 antagonists nemainīja metastāžu skaitu, salīdzinot ar Il22/dzīvniekiem, kas saņēma attiecīgi kontroles vai Pvr+ 4T1 šūnas (6.F attēls). Aktivizējot TIGIT, tas var kavēt IFNg veidošanos no CD8+ T, bet ne no NK šūnām (6.G attēls). Tādējādi IL-22- CD155 ass izraisa samazinātu CD226 ekspresiju NK šūnās un padara tās inertas audzēja mikrovidē.
CD155 ekspresija papildina IL-22 gēna parakstu krūts un plaušu vēža slimniekiem
Visbeidzot, mēs novērtējām CD155 klīnisko nozīmi IL-22-IL-22RA1 ass kontekstā. Tikai CD155 ekspresija ir saistīta ar nelabvēlīgu prognozi dažādām vēža vienībām.54 Mēs analizējām RNS sekvencēšanas datus no vēža genoma atlanta (TCGA) plaušu adenokarcinomas (TCGA: LUAD, n=504) un HER2- pozitīvi pacientu paraugi no invazīvās krūts karcinomas (TCGA: BRCA, n=110) datu kopām. Mēs koncentrējāmies uz galvenajiem IL-22-saistītajiem gēniem: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB un PVR. Lai stratificētu pacientu grupas, mēs izmantojām aglomeratīvo klasterizāciju, neuzraudzītu klasterizācijas metodi, kā rezultātā izveidojām trīs galvenās kopas (7.A un 7.B attēls). Tas atklāja raksturīgus gēnu ekspresijas modeļus: klasteris 0 (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), 1. klasteris (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) un 2. klasteris. (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (7.C attēls). Šīs kopas bija vienmērīgi sadalītas šajās divās grupās (7.D attēls). 0. klastera un LUAD datu kopas 2. klastera pacientiem bija sliktāka dzīvildze nekā 1. klastera pacientiem (7. E attēls). 1. un 2. klasteru izdzīvošana abās grupās neatšķīrās (7. E attēls). Turklāt mēs aprēķinājām ierobežotos vidējos izdzīvošanas laikus (RMST) klasteriem 0 un 1, lai kvantitatīvi noteiktu paredzamā izdzīvošanas laika atšķirību līdz piecu gadu novērošanai, kā rezultātā LUAD bija 361,18 dienas un BRCA 93,23 dienas (7.F attēls). 0. un 1. klasteriem bija atšķirības patoloģisko slimību stadiju biežumā tajās LUAD, bet ne BRCA grupā (7.G attēls). Svarīgi ir tas, ka šādas izdzīvošanas atšķirības starp klasteriem (IL22RA1hiPVRhi) un 1 (IL22RA1loPVRlo) galvenokārt izriet no pacientiem, kuri diagnosticēti agrīnā (I un II), bet ne progresējošā slimības stadijā (III un IV) (S7A attēls). Lai novērtētu katra gēna ietekmi uz izdzīvošanu, mēs izmantojām Koksa proporcionālo apdraudējumu modeli. Gan IL22RA1 (riska attiecība [HR]=1.23), gan PVR (HR=1.28) ietekmē izdzīvošanu, turpretim IL22RA2 un IL10RB nemainīja apdraudējumu LUAD kohortā (S7B attēls). Turklāt tikai CD226 (p=0.06), bet ne TIGIT vai CD96, varēja ietekmēt izdzīvošanu saskaņā ar mūsu konstatējumiem preklīniskajos modeļos (S7B attēls). Mēs izmantojām CIBERSORTx dekonvolūcijas algoritmu LUAD kohortā, lai novērtētu, vai mūsu klasteru gēnu ekspresijas modeļi ietekmē imūno šūnu infiltrāciju pacientiem.65 Interesanti, ka 1. klasterī ir palielinājies CIBERSORTx vienību skaits aktivētajām NK šūnām, salīdzinot ar klasteriem. 0 un 2 LUAD pacientiem, savukārt miera stāvoklī esošajās NK šūnās vai aktivētās CD4+ atmiņas T šūnās (S7C attēls) nebija atšķirību ar līdzīgu tendenci BRCA kohortā (S7D attēls). Šie klīnisko kohortu rezultāti kopā parāda regulatīvās saiknes nozīmi starp T šūnām iegūto IL-22 un CD155.
5. attēls. CD226 ekspresija ir augstāka uz NK šūnām Il22–/– pelēm
DISKUSIJA
Šajā pētījumā mēs atklājām mehānismu, ar kura palīdzību T šūnas ražo IL-22, lai veicinātu plaušu metastāzes plaušu un krūts vēža peļu modeļos. Mehāniski T šūnas metastātiskajos perēkļos plaušās, galvenokārt CD4+, ražo IL-22, kas signalizē tieši caur savu receptoru, kas ekspresēts vēža šūnās, veicinot pro-metastātiskās molekulas CD155 ekspresiju.{{ 5}},58,59 Neraugoties uz labi pētīto CD155 ekspresiju visā vēža jomā un tās iekšējo un ārējo lomu vēža progresēšanā54, ceļš, kas ir atbildīgs par CD155 regulēšanu ļaundabīgās šūnās, joprojām ir nenotverams.66–68 Mēs pierādījām, ka IL{{ 15}} palielināja CD155 ekspresiju plaušu un krūts vēža šūnu līnijās in vitro un in vivo, savukārt tā konstitutīvā ekspresija ļāva metastāzes Il22 / pelēm, salīdzinot ar kontroles un deficīta šūnām. Paaugstināta CD155 ekspresija audzēja plaušu mikrovidē izraisīja kostimulējošās molekulas CD226 samazināšanos uz NK šūnām, samazinot to lokalizāciju metastāzēs un IFNg veidošanos, kas korelēja ar lielāku audzēja slodzi. Iepriekšējos pētījumos mēs atklājām IL-22-producējošu T šūnu uzkrāšanos nesīkšūnu plaušu karcinomas (NSCLC) pacientu audzēju paraugos.12,48 Mēs esam pierādījuši, ka vēža šūnas izraisa NLRP3- atkarīgo IL-1b sekrēciju, kas inducē šādu IL-22 veidošanos galvenokārt no Th šūnām.18 Jāatzīmē, ka cilvēkiem Th šūnu citokīnu profilu atšķirību dēļ IL{{ 31}} tiek inducēts arī Th1 šūnās. Iespējams, ka tas varētu pasliktināt pretvēža imūnreakciju. Svarīgi, ka šādi Th1 varianti var daļēji izskaidrot vēža hiperprogresiju pēc T šūnu aktivācijas pēc kontrolpunkta blokādes.69 Saskaņā ar mūsu iepriekšējiem novērojumiem mēs apstiprinājām IL-22-ražojošo CD4+ un CD{{38} uzkrāšanos. } T šūnas, bet arī NK1.{40}} šūnas metastātiskajā nišā audzēju injicētu dzīvnieku plaušās. Ir svarīgi atzīmēt, ka mūsu modeļos novērojām celmam raksturīgas atšķirības šādu IL-22-radošo CD8+ T šūnu uzkrāšanā. Tomēr ar IL-22 ražošanas pārtraukšanu nobriedušajās T šūnās bija pietiekami, lai apkopotu ietekmi, ko novērojām dzīvniekiem ar IL-22- deficītu.70 Arī CD4+ T šūnu adoptīvā pārnese Rag / II22 / pelēm bija pietiekami, lai izraisītu metastāzes plaušās, precīzi norādot Th šūnu kā IL avotu -22 vissvarīgāko lomu. Un otrādi, mūsu iepriekšējie atklājumi liecina, ka, neraugoties uz CD8+ T šūnu uzkrāšanos audzēju paraugos, to ieguldījums IL-22 kopumā ir neliels.48 Jebkurā gadījumā šāda CD{53 raksturojums. }} IL-22-ražojošās T šūnas ir būtiskas, lai rūpīgi izvērtētu to pro- vai pretvēža īpašības, jo parādās jauni dati par šo apakšpopulāciju.71,72 Turklāt NK un NKT šūnu galvenā loma audzēja kontrolē ir lielāka par to īpašībām. potenciāls ieguldījums metastāžu veidošanā, izmantojot IL-22, kas tika konstatēts Rag/II22/adoptīvās pārneses eksperimentā, izmantojot dzīvniekus, kuriem nav nobriedušu T šūnu, bet kuriem ir funkcionālas NK šūnas.37 Šo hipotēzi apstiprina arī mūsu atklājumi par metastātisku slimību. perēkļi, kuros NK šūnas tika konstatētas biežāk nekā citotoksiskās T šūnas, izceļot NK šūnas kā būtiskus audzēja kontroles dalībniekus, ja nav IL-22. Ir svarīgi atzīmēt, ka mēs koncentrējāmies uz IL-22 ražotājiem metastātiskajos perēkļos plaušās, bet neņēmām vērā to izcelsmi, klonalitāti vai izplatību asinīs vai limfoīdos orgānos. Turklāt dažādi IL-22 avoti veicina audzēja progresēšanu no konteksta atkarīgā veidā, ko veicina šī citokīna pleiotropā darbība. Līdz ar to līdzīgas šūnas, kas ražo IL-22-dažādos nodalījumos (plaušu pret liesu un limfmezglu), var atšķirīgi ietekmēt audzēju veicinošos fenotipus vai tām nevar būt nekādas funkcijas atkarībā no konteksta, kas būs jāturpina pētīt. Vēža pētījumos vairākkārt ziņots, ka IL-22 ietekmē primāro audzēju attīstību un augšanu un galu galā neoplastisku progresēšanu.26,73–76 Šis jēdziens galvenokārt ir pamatots ar spēju veicināt vēža šūnu migrāciju, invāziju un cilmes veidošanos. in vitro un tādējādi veicināt metastāžu veidošanos.76,77 Svarīgi, ka IL-22 ablācija var atvieglot imūnsupresīvo mikrovidi plaušu karcinomas Kras-mutantu modelī.14 Pašreizējā pētījumā mēs parādījām, ka palielināts metastāžu slogs tieša IL-22 ietekme uz izplatītajām IL-22RA1+ audzēja šūnām, kā rezultātā palielinājās koloniju izaugums. Svarīgi, ka mūsu dati formāli neizslēdz ietekmi uz šūnām, kas nav audzēji. Kā tādu, IL-22 ietekmi uz audzēja šūnu izplatīšanos, ko izraisa endogēni ekspresēta IL-22R raksturīgā darbība, ir plaši izcelta Giannou et al.78.
6. attēls. CD226 signalizācija ir neaizstājama IFNg ražošanai no NK šūnām
Mēs parādījām, ka Pvr ir viens no gēniem ar paaugstinātu ekspresiju vēža šūnās, ārstējot ar IL-22. Šajā kontekstā CD155-deficīta šūnas veidoja dažas metastāzes gan savvaļas tipa, gan Il22/pelēm, un, kas ir svarīgi, CD155 atkārtota ieviešana ļāva mums atjaunot metastātisku fenotipu. CD155 būtiskā loma vēža šūnās ir labi pētīta, un ir zināms, ka tā ietekmē sēšanu, audzēja šūnu proliferāciju un migrāciju.56,57 Tomēr Pvr šūnām mūsu rokās nebija kavēta proliferācija vai migrācija un audzēja šūnu sēšana. Il22 / pelēm netika ietekmēta. Sākotnēji identificēts uz antigēnu prezentējošām šūnām, CD155 kalpo kā ārējs audzēja progresēšanas veicinātājs, kas nomāc NK un T šūnu darbību, saistoties ar CD96 un TIGIT uz to virsmas, un izraisa CD226.56,61–64,79–85Due internalizāciju un pazemināšanu. imūnsupresīvajai funkcijai CD155 vēža un saimniekšūnās iedarbojas uz metastātiskām īpašībām un tiek ierosināts kā kontrolpunkta inhibīcijas blokādes mērķis.61,86 NK šūnas saņem kostimulējošu signālu no antigēnu prezentējošām šūnām caur CD226. 87 Tomēr pārmērīga CD226 stimulēšana audzēja mikrovidē izraisa internalizāciju un degradāciju.63 To parasti neitralizē CD96 un TIGIT, kas saistās ar CD155 ar lielāku afinitāti.58 Interesanti, ka ir zināms, ka 4T1 šūnas izraisa CD226 pazeminātu regulēšanu audzēja infiltrācijā. limfocītus un nomāc IFNg veidošanos.88 Šeit mēs parādījām, ka IL-22 deficīts saglabāja CD226 ekspresiju uz NK un CD8+ T šūnām. Tomēr tikai NK šūnām bija ievērojami augstākas IFNg ražošanas spējas un apgriezti korelēja ar metastātisku slodzi. Interesanti, ka TIGIT signālu aktivizēšana mūsu pētījumā kavēja IFNg veidošanos no CD8+ T, bet ne NK, šūnām un nebija pietiekama, lai palielinātu metastātisko slodzi. Tāpat cits CD155 receptors, CD96, netika ne diferencēti regulēts Il22 / pelēm, ne arī tā inhibīcija nenovērsa metastāzes, norādot, ka CD155 mūsu modelī nenomāc NK šūnas caur CD96. Tas izceļ CD155 un tā dažādo saistošo partneru pretvēža reakciju šūnu tipa specifisko regulēšanu.
Cistanche papildinājuma priekšrocības — kā stiprināt imūnsistēmu
Noklikšķiniet šeit, lai skatītu Cistanche Enhance Immunity produktus
【Jautājiet vairāk】 E-pasts:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Ir noskaidrota CD155 ietekme uz prognozi un tās lomu plaušu, krūts, resnās zarnas un citu vēža veidu patoģenēzē.79–85 Ir daudz pierādījumu par IL-22 un ar to saistīto gēnu prognostisko nozīmi. dažādās vēža vienībās.10,21,27,75,89–91 Tomēr daži pētījumi neliecina par IL-22 ekspresijas ietekmi uz dzīvildzi.12 Lai gan šīs atšķirības varētu būt saistītas ar neviendabīgumu pacientu populācijas, paraugu ņemšanas un ziņošanas problēmas, daudzi no šiem pētījumiem ir vērsti uz vienu gēnu, kas saistīts ar IL-22 signalizāciju. Šeit mēs izmantojām aglomeratīvo klasterizāciju, lai noteiktu IL22RA1, IL22RA2, IL10RB un PVR ekspresijas modeļus LUAD un BRCA grupās TCGA un saistītu tās ar klīniskajiem datiem. Šeit mēs identificējām trīs šo gēnu ekspresijas modeļus: 0. modelis (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), 1. modelis (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) un 2. modelis (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Mēs noskaidrojām, ka augsta IL22RA1 ekspresija sakrīt ar augstu PVR ekspresiju, kas arī izraisīja sliktu kopējo dzīvildzes iznākumu, īpaši pacientiem, kuriem diagnosticēta agrīna (I un II), bet ne progresējoša (III un IV), patoloģiska stadija. šī mehānisma konkrētās stadijas loma. Un otrādi, augsta IL22RA2, kas pazīstama arī kā IL-22BP, ekspresija bija saistīta ar zemāku PVR ekspresiju un labāku dzīvildzi.18,34 Trešais modelis atbilda pilnīgi zemai ekspresijai un pārstāvēja imunoloģiski aukstus audzējus.92 Līdzīgi. CIBERSORTx dekonvolūcija norādīja, ka 1. klasterim, kam raksturīga augsta IL22RA2 ekspresija, ir gēna paraksts aktivizētām, bet ne miera stāvoklī esošām NK šūnām, salīdzinot ar citām kopām. Vairākos NSCLC klīniskajos pētījumos ir pierādīts, ka CD226 ekspresija stratificē pacientus pēc iznākuma.93 Tomēr CD226 pirms un pēctranslācijas regulēšanas divējāda veida dēļ ekspresija ne vienmēr tiek atspoguļota mRNS sekvencēšanas datos.94 Tādējādi pētījumi, kas koncentrējas par CD226 pēctranslācijas regulējumu novērtē tā ekspresiju klīniskajos paraugos, izmantojot antivielu krāsošanu.63 Tomēr, aptaujājot TCGA datu kopu par CD155 saistīšanās partneru saistību ar izdzīvošanu, tikai CD226 bija tendence uz labāku prognozi (log (HR) {{57) }}.24, p=0.06), savukārt TIGIT un CD96 neuzrādīja korelāciju ar izdzīvošanu. Svarīgi, ka audzēja šūnas, kas izstrādātas, lai izdalītu IL-22BP, veidoja mazāk metastāžu, izceļot IL-22 ceļa potenciālu mērķtiecīgai terapeitiskai intervencei. Tas varētu neitralizēt audzēja CD155 pārmērīgu ekspresiju, jo tieša mērķēšana joprojām ir sarežģīta sarežģītā līdzreceptoru tīkla dēļ. Turklāt jāatzīmē, ka IL-22 neitralizācijas ilgtermiņa ietekme uz metastāzēm nav zināma, taču tai var būt tieša ietekme uz T šūnu terapeitisko apsvērumu vai sniegtu pamatojumu IL-22 neitralizācijai, izmantojot antivielas ar labvēlīgs drošības profils, piemēram, fezakinumabs (izmēģinājums NCT01941537) vai konstruēts IL-22 ar struktūru balstītu dizainu.39,95 Rezumējot, mēs identificējām IL-22-inducētu CD155 pārmērīgu ekspresiju audzēja šūnās kā mehānismu, kas labvēlīgi ietekmē metastātisku izaugumu. Šī būtiskā loma prognozēšanā uzsvēra IL-22 kā vēža terapeitiska mērķa potenciālu. Līdz šim IL-22 neitralizācija ir ierosināta galvenokārt kā stratēģija autoimūnu slimību ārstēšanai.31,49 Mūsu dati par IL-22BP kā IL-22 neitralizatoru, kas fenokopēja globālais IL-22 deficīts, kas ir pamatā terapeitiskajam potenciālam, lai mērķētu uz IL-22-IL-22R1 asi, un tas būtu sīkāk jāizpēta preklīniskajos un klīniskajos pētījumos.
ATSAUCES
1. Hanahan, D. un Weinberg, RA (2011). Vēža pazīmes: nākamā paaudze. 144. šūna, 646.–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massage´, J. un Obenauf, AC (2016). Metastātiska kolonizācija ar cirkulējošām audzēja šūnām. Daba 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK un Kroemer, A. (2014). KLRG1(+) dabiskās slepkavas šūnas aizsargā pret plaušu metastātisku slimību, izmantojot imūno uzraudzību. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S. un Pantel, K. (2017). Cirkulējošās un izplatītās audzēja šūnas - imūnās uzraudzības un bēgšanas mehānismi. Nat. Rev. Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA, and Kobold, S. (2021). Interleikīni vēža gadījumā: no bioloģijas līdz terapijai. Nat. Rev. Cancer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ un Pollard, JW (2015). Imūnšūnu metastāžu veicināšana. Nat. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galons, J. un Bruni, D. (2020). Audzēja imunoloģija un audzēja evolūcija: savstarpēji saistītas vēstures. Imunitāte 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page`s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , un citi. (2018). Vienprātības Immunoscore starptautiskā validācija resnās zarnas vēža klasifikācijai: prognostiskais un precizitātes pētījums. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W. un Wei, S. (2017). IL-22 veicina krūts vēža progresēšanu, regulējot HOXB-AS5. Oncotarget 8, 103601–103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S. ., un citi. (2014). IL-22(+)CD4(+) T šūnas veicina kolorektālā vēža cilmes veidošanos, aktivizējot STAT3 transkripcijas faktoru un indukējot metiltransferāzes DOT1L. Imunitāte 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X. un Sun, B. (2011). Interleikīns-22 veicina cilvēka hepatocelulāro karcinomu, aktivizējot STAT3. Hepatoloģija 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ augšējais, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegers, S., et al. (2013). Interleikīns -22 bieži tiek ekspresēts mazo un lielšūnu plaušu vēža gadījumā un veicina pret ķīmijterapiju rezistentu vēža šūnu augšanu. J. Toraks. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K. un Diefenbach, A. (2018). Nozveja-22: interleikīns-22 un vēzis. Eiro. J. Immunol. 48, 15.–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, un citi. (2018). IL22 veicina Kras-mutantu plaušu vēzi, inducējot protumor imūnreakciju un aizsargājot stumbra īpašības. Cancer Immunol. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B un Yin, C. (2019). MiR-486-5p inhibē IL-22-inducēto krūts vēža šūnu epitēlija-mezenhimālo pāreju, nomācot Dock1. J. Cancer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC un Choi, HS (2014). Interleikīns-22 veicina epitēlija šūnu transformāciju un krūts audzēju ģenēzi, izmantojot MAP3K8 aktivāciju. Kanceroģenēze 35, 1352–1361. https://doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S., and Beaman, KD (2020). Interleikīns-22 veicina ļaundabīgu bojājumu attīstību spontāna krūts vēža peļu modelī. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Mērfijs, AJ u.c. (2012). IL-22BP regulē iekaisuma process un modulē audzēja ģenēzi zarnās. Daba 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., un citi. (2020). TGFbeta signalizācija Th17 šūnās veicina IL-22 veidošanos un ar kolītu saistītu resnās zarnas vēzi. Nat. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H. un Bruns, F. (2012). Galvaskausa pamatnes Langerhansa šūnu histiocitoze: vai mazas devas staru terapija ir efektīva? Lieta Rep. Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T. u.c. (2012). Palielināts intratumorāls IL-22-radošais CD4(+) T šūnas un Th22 šūnas korelē ar kuņģa vēža progresēšanu un paredz sliktu pacienta izdzīvošanu. Cancer Immunol. Imunother. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s{11}}.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X. un Zhang, H. (2018). T-helpera 22 šūnu, interleikīna-22 un no mieloīdiem atvasināto supresoru šūnu uzkrāšanās veicina kuņģa vēža progresēšanu gados vecākiem pacientiem. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.{12}}.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA un Mahmoudi, M. (2018). Th22, Th17 un CD4(+) šūnu, kas vienlaikus ražo IL-17/IL-22, analīze dažādās cilvēka resnās zarnas vēža stadijās. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zen, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y. ., un citi. (2020). Intratumorālas IL22-producējošās šūnas definē imunoevazīvu apakštipu muskuļu invazīvu urīnpūšļa vēzi (2017). IL-22BP aizsargājoša funkcija išēmijas reperfūzijas un acetaminofēna izraisīta aknu bojājuma gadījumā. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L. un Sun, B. (2013). IL-22 ir saistīts ar cilvēka resnās zarnas vēža attīstību, aktivizējot STAT3. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J. ., un citi. (2014). Ar vēzi saistītu fibroblastu ražotais IL-22 veicina kuņģa vēža šūnu invāziju, izmantojot STAT3 un ERK signālu pārraidi. Br. J. Cancer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N ., un citi. (2012). Palielināts cirkulējošo Th22 un Th17 šūnu skaits ir saistīts ar audzēja progresēšanu un pacienta izdzīvošanu cilvēka kuņģa vēža gadījumā. Dž.Klins. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringresi, MN, Pini, A. ., un citi. (2016). Intra-tumorālās IFN-gamma producējošās Th22 šūnas korelē ar TNM stadiju un sliktākajiem aizkuņģa dziedzera vēža rezultātiem. Clin. Sci. 130., 247.–258. https://doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B. un Wang, H. (2014). Paaugstināts intratumorālais interleikīna 22 līmenis un interleikīnu 22-ražojošo CD4+ T šūnu biežums korelē ar aizkuņģa dziedzera vēža progresēšanu. Aizkuņģa dziedzeris 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.{10}}.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP un Pestka, S. (2001). Funkcionālā interleikīna-22 (IL-22) receptoru kompleksa identifikācija: IL-10R2 ķēde (IL-10Rbeta) ir abu IL{{7 }} un IL-22 (IL- 10-saistīts T šūnu inducējams faktors, IL-TIF) receptoru kompleksi. J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W. un O'Garra, A. (2019). IL-10 ģimenes citokīni IL-10 un IL- 22: no pamatzinātnēm līdz klīniskai tulkošanai. Imunitāte 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M., et al. (2020). IL22BP veicina limfotoksīna pretvēža iedarbību pret kolorektālajiem audzējiem pelēm un cilvēkiem. Gastroenteroloģija 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP un Pestka, S. (2001). Jauna šķīstoša receptora identificēšana, klonēšana un raksturošana, kas saistās ar IL-22 un neitralizē tā darbību. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM un van den Brink, MRM (2015). Interleikīns-22: imūnbioloģija un patoloģija. Annu. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K. un Sabat, R. (2004). IL-22 palielina audu iedzimto imunitāti. Imunitāte 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W. un Wolk, K. (2014). IL-22-IL-22R1 sistēmas terapeitiskās iespējas. Nat. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S. un Flavell, RA (2008). Iedzimtais un adaptīvais interleikīns-22 aizsargā peles no iekaisīgas zarnu slimības. Imunitāte 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F., et al. (2019). Interleikīns{2}} aizsargā zarnu cilmes šūnas pret genotoksisko stresu. Daba 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM un Garcia, KC (2021). Interleikīna-22 audu aizsardzības funkcijas var atdalīt no iekaisuma veicinošām darbībām, izmantojot uz struktūru balstītu dizainu. Imunitāte 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J. un Renauld, JC (2000). Ar IL-10- saistītā T šūnām atvasināta inducējamā faktora (IL-TIF) klonēšana un raksturojums. Tas ir jauns citokīns, kas strukturāli ir saistīts ar IL-10 un ko inducē IL-9. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ, and Renauld, JC (2002). Interleikīns-22 (IL-22) aktivizē JAK/STAT, ERK, JNK un p38 MAP kināzes ceļus žurku hepatomas šūnu līnijā. Ceļi, kas tiek koplietoti un atšķiras no IL-10. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S. un de Waal Malefyt, R. (2004). Interleikīns-22 aktivizē STAT3 un inducē IL-10 ar resnās zarnas epitēlija šūnām. Int. Imūnfarmakols. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK un Raychaudhuri, SP (2012). IL-22-inducēto šūnu proliferāciju regulē PI3K/Akt/mTOR signalizācijas kaskāde. Citokīns 60, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J., and M€ uhl, H. (2013). IFNalpha pārvērš IL-22 par citokīnu, kas efektīvi aktivizē STAT1 un tā pakārtotos mērķus. Biochem. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ un Ouyang , W. (2008). Interleikīns-22 veicina agrīnu saimnieka aizsardzību pret baktēriju patogēnu piesaisti un izvadīšanu. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A. u.c. (2005). Interleikīns-22, IL-10 apakšgrupas loceklis, izraisa iekaisuma reakcijas resnās zarnas subepitēlija miofibroblastos. Gastroenteroloģija 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL, et al. (2016). Interleikīna -22 līmenis ir paaugstināts skalošanas laikā pacientiem ar plaušu vēzi un citām plaušu slimībām. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., un citi. (2017). Vēža šūnas inducē interleikīna-22 veidošanos no atmiņas CD4(+) T šūnām, izmantojot interleikīnu-1, lai veicinātu audzēja augšanu. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.{11}}.
49. Markota, A., Endres, S. un Kobold, S. (2018). Interleikīna-22 mērķauditorijas atlase vēža terapijā. Hum. Vakcīna. Imunother. 14, 2012.–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E. un Ehrke, MJ (2005). Attālā metastāzes no subkutāni audzētas E0771 medulārās krūts adenokarcinomas. Pretvēža Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K. un Stock, CC (1952). Pētījumi par audzēju spektru. I. Metilbis(2-hloretil)amīna un 3-bis(2-hloretil)aminometil-4-metoksimetil-5-hidroksi{{7} darbības salīdzinājums. }metilpiridīns uz dažādu peļu un žurku audzēju augšanu. Cancer 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P. un Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: vienkārša, ātra metode lielu audu paraugu imunomarķēšanai tilpuma attēlveidošanai. 159. šūna, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E., et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY un Smyth, MJ (2020). CD1 audzēja iekšējās un ārējās imūnās funkcijas
55. Semin. Cancer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A. un Paolini, R. (2020). CD155: daudzfunkcionāla molekula audzēja progresēšanā. Int. J. Mol. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W. un Zhao, C. (2017). CD155, onkoimunoloģiska molekula cilvēka audzējos. Cancer Sci. 108, 1934–1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y. un Imai, T. ( 2008). Vēža šūnu mijiedarbība ar trombocītiem, ko mediē Necl-5/poliovīrusa receptors, pastiprina vēža šūnu metastāzes plaušās. Onkogēns 27, 264-273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM un Smits, MJ (2014). Receptori CD96 un CD226 pretojas viens otram dabisko killer šūnu funkciju regulēšanā. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS un Colonna, M. (2004). Jaunākās iespējas: CD96 (taustāms) veicina NK šūnu mērķa šūnu adhēziju, mijiedarbojoties ar poliovīrusa receptoru (CD155). J. Immunol. 172, 3994–3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E. un Busch, DH (2022). ChipCytometry proteīnu un mRNS marķieru multipleksai noteikšanai cilvēka FFPE audu paraugos. STAR protokols. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Šovins, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., un citi. (2020). IL15 stimulācija ar TIGIT blokādi novērš CD155-mediētu NK-šūnu disfunkciju melanomas gadījumā. Clin. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie´, N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G., et al. (2020). Koaktivējošā receptora CD226 zudums, kas ir atkarīgs no emomas, ierobežo CD8(+) T šūnu pretvēža funkcijas un ierobežo vēža imūnterapijas efektivitāti. Imunitāte 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.006.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., un citi. (2020). CD155 uz audzēja šūnām veicina rezistenci pret imūnterapiju, izraisot aktivējošā receptora CD226 degradāciju CD8(+) T šūnās. Imunitāte 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, un citi. (2020). Audzēja CD155 ekspresija ir saistīta ar rezistenci pret antiPD1 imūnterapiju metastātiskas melanomas gadījumā. Clin. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D. u.c. (2019). Šūnu tipa pārpilnības un ekspresijas noteikšana no lielapjoma audiem ar digitālo citometriju. Nat. Biotehnoloģija. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., un citi. (2009). No ATM-ATR atkarīga DNSM-1 un NKG2D ligandu augšupregulācija uz multiplās mielomas šūnām, ko veic terapeitiski līdzekļi, palielina NK šūnu jutību un ir saistīta ar novecojošu fenotipu. Blood 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood- 2008-08-173914.
