Vingrinājumu izraisīto priekšrocību īslaicīga izturība peļu mātītēm no hipokampa atkarīgajai atmiņai un sinaptiskajai plastiskumam 1. daļa

Abstrakts

Vingrinājumi atvieglo hipokampu neiroģenēzi un neiroplastiskumu, kas savukārt veicina kognitīvo funkciju. Mūsu iepriekšējie pētījumi ir parādījuši, ka peļu tēviņiem brīvprātīgi vingrinājumi nodrošina no pokampa atkarīgu mācīšanos apstākļos, kas parasti ir zemsliekšņa ilgstošas ​​​​atmiņas veidošanai mazkustīgiem dzīvniekiem. Šādu kognitīvo uzlabojumu var saglabāt arī pēc tam, kad slodze ir beigusies, un to var atkārtoti iesaistīt nākamajā zemsliekšņa vingrinājumu sesijā, kas liecina, ka vingrinājumu radītie ieguvumi ir īslaicīgi dinamiski.

Neiroplastiskums attiecas uz neironu spēju nepārtraukti pielāgoties ārējiem stimuliem un iekšējām aktivitātēm. Šai spējai ir izšķiroša nozīme atmiņas veidošanā un saglabāšanā. Tas nozīmē, ka neiroplastiskums ir cieši saistīts ar atmiņu.

Neiroplastiskums rodas, izmantojot sinaptiskos savienojumus starp neironiem. Kad mēs saņemsim jaunu lietu, smadzenēs mainīsies savienojumi starp neironiem, veidojot jaunus sinaptiskus savienojumus. Šim procesam ir nepieciešama atkārtota prakse un atkārtošanās, lai radītu ilgtermiņa un stabilus sinaptiskos savienojumus. Tikai šis ilgtermiņa sinaptiskais savienojums var ietekmēt atmiņu un saglabāt to.

Neiroplastiskums mainās arī līdz ar vecumu un pieredzi. Neiroplastiskums ir ļoti spēcīgs, kad mēs esam jauni, un smadzenes var ļoti ātri izveidot jaunus sinaptiskos savienojumus, kad mēs apgūstam jaunas lietas. Bet, mums novecojot, neiroplastiskums samazinās, kas nozīmē, ka kļūst grūtāk apgūt jaunu informāciju. Tomēr, ja saglabājam pozitīvu attieksmi un vēlmi un ieradumu aktīvi apgūt jaunas lietas, mēs joprojām varam saglabāt noteiktu neiroplastiskuma līmeni. Tas nozīmē, ka mēs varam turpināt mācīties un augt, uzlabojot atmiņu un intelektu.

Rezumējot, neiroplastiskums un atmiņa ir cieši saistītas. Pozitīvas attieksmes saglabāšana un ieradums aktīvi apgūt jaunas zināšanas var palīdzēt mums saglabāt labu neiroplastiskumu, tādējādi uzlabojot atmiņu un intelektu. Mācīsimies neatlaidīgi, saglabāsim pozitīvu attieksmi un pastāvīgi pilnveidosim savas spējas un īpašības. Var redzēt, ka mums jāuzlabo atmiņa. Cistanche deserticola var ievērojami uzlabot atmiņu, jo Cistanche deserticola ir tradicionāls ķīniešu ārstniecības materiāls ar daudziem unikāliem efektiem, no kuriem viens ir atmiņas uzlabošana. Maltās gaļas iedarbīgumu nodrošina dažādas tajā esošās aktīvās sastāvdaļas, tostarp skābe, polisaharīdi, flavonoīdi utt. Šīs sastāvdaļas var dažādos veidos veicināt smadzeņu veselību.

Noklikšķiniet uz zināt 10 veidus, kā uzlabot atmiņu

Sievietēm vēl ir jādefinē, cik lielā mērā vingrinājumu priekšrocības var saglabāt, un mehānismi, kas ir šīs uzturēšanas pamatā. Šeit mēs pārbaudījām vingrinājumu parametrus, kas nepieciešami, lai uzsāktu un uzturētu vingrinājumu priekšrocības sievietēm C57BL/6J pelēm. Izmantojot no hipokampa atkarīgā uzdevuma apakšsliekšņa versiju, ko sauc par objektu atrašanās vietas atmiņas (OLM) uzdevumu, mēs parādām, ka 14. d brīvprātīgie vingrinājumi peļu mātītēm ļauj mācīties zemsliekšņa iegūšanas apstākļos. Pēc sākotnējās slodzes 7 d sēdoša darba aizkave samazina veiktspēju, ko var atkārtoti atvieglot, ja dzīvnieki saņem 2 dienas aktivizējošu vingrinājumu pēc sēdus kavēšanās.

Estrozes cikla novērtējums atklāj pastiprinātu riteņu skriešanas aktivitāti estrus fāzē salīdzinājumā ar diestrus fāzi, savukārt estrus fāze treniņa vai pārbaudes laikā neietekmēja OLM veiktspēju. Izmantojot tos pašus vingrinājumu parametrus, mēs demonstrējam, ka 14. dienu vingrinājums uzlabo ilgstošu potenciāciju ( LTP) hipokampa CA1 reģionā, efekts, kas saglabājas visu šo zobu aizkaves laiku un pēc atkārtotas aktivizēšanas. Iepriekšējie pētījumi ir ierosinājuši vingrinājumu izraisītu BDNF regulēšanu kā mehānismu, kas ir pamatā vingrinājumu izraisītiem ieguvumiem sinaptiskajai plastiskumam un izziņai.

Tomēr mūsu novērtējums par hipokampu Bdnf mRNS ekspresiju pēc atmiņas izgūšanas neatklāj atšķirību starp vingrinājumu apstākļiem un kontroli, kas liecina, ka noturīga Bdnf regulēšana var nebūt nepieciešama, lai saglabātu vingrinājumu radītos ieguvumus. Kopā mūsu dati liecina, ka 14 dienas brīvprātīgas slodzes var izraisīt ilgstošus ieguvumus uz neiroplastiskuma un kognitīvās funkcijas peļu mātītēm, radot pirmos pierādījumus par vingrinājumu izraisīto ieguvumu īslaicīgo izturību mātītēm.

Atslēgvārdi

Vingrošana; Mācīšanās; Sveikippocampus; Sinaptiskā plastiskums; BDNF; Estrous cikls.

1. Ievads

Fizisko vingrinājumu ietekme uz smadzeņu veselības atbalstīšanu un uzturēšanu ir labi dokumentēta. Smadzenēs hipokampam ir izšķiroša nozīme mācībās un atmiņas veidošanā, jo šīs smadzeņu struktūras traucējumi izraisa atmiņas traucējumus (Packard & McGaugh, 1996; Riedel et al., 1999; Scoville & Milner, 1957). Tādējādi novirzes morfoloģiskās un funkcionālās izmaiņas hipokampā ir saistītas ar kognitīviem traucējumiem, kas saistīti ar novecošanu un slimību stāvokļiem (Bettio et al., 2017).

Pētījumi gan ar cilvēkiem (ten Brinkeet al., 2015; Erickson et al., 2011; Pajonk et al., 2010; Teixeira et al., 2018), gan ar dzīvnieku modeļiem (Cooper et al., 2018; Neeper et al., 1996; O'Callaghan et al., 2007; Van Praag, 2008) ir pierādījuši vingrojumu ietekmi uz hipokampa strukturālās un funkcionālās integritātes atbalstīšanu, liekot domāt, ka fiziskā slodze ir efektīva nefarmakoloģiska iejaukšanās kognitīvo traucējumu gadījumā gan fizioloģiskos, gan patoloģiskos apstākļos (Intlekofer). & Cotman, 2013; Lauretta et al., 2021; Liu et al., 2011; Muscari et al., 2010).

Neskatoties uz daudzajiem pētījumiem par vingrinājumu labvēlīgo ietekmi un saikni starp hipokampu un kognitīvo funkciju, maz ir zināms par vingrinājumu radīto ieguvumu laika dinamiku. Tas ir, kāds ir vingrinājumu ilgums, kas nepieciešams, lai palielinātu hipokampu funkciju, un cik ilgi šie ieguvumi saglabājas pēc fiziskās slodzes pārtraukšanas?

Vēl mazāk pētījumu ir mēģinājuši izpētīt molekulāros mehānismus, kas ir pamatā vingrinājumu izraisīto ieguvumu uzturēšanai. Ņemot vērā to, ka vingrojumu shēmas cilvēkiem ir mazāk stingras un konsekventas nekā tās, kas tiek izmantotas pētījumos ar dzīvniekiem (Lee & Skerrett, 2001), ir svarīgi izstrādāt vingrojumu protokolus, kas ir elastīgi un kuriem nav nepieciešama ikdienas vingrošanas rutīna, taču tie var iesaistīties un uzturēt vingrojumu izraisītu kognitīvo spēju. ieguvumi. Pētījumos ar dzīvniekiem ir grūti noteikt minimālo vingrojumu ilgumu, kas nepieciešams, lai uzsāktu un saglabātu vingrošanas priekšrocības, jo pētījumos izmantoto vingrojumu protokoli ir ļoti atšķirīgi (Loprinzi etal., 2019). Tāpēc joprojām ir svarīgi pārbaudīt vingrinājumu slieksni, kas izraisa un uztur kognitīvos ieguvumus, un pamatā esošos mehānismus.

Vingrinājumi veicina neiroplastiskumu, neiroģenēzi un pēc tam mācīšanos un atmiņu, izmantojot mehānismus, kas izraisa smadzeņu izcelsmes neirotrofiskā faktora (BDNF) neirotrofisko darbību hipokampā (Alomari et al., 2013; Cotman et al., 2007; Cotman & Berchtold, D2002; et al., 2011; Triviño-Paredes et al., 2016; Van Prāgs, Christie, u.c., 1999; Van Prāgs, Kempermann, et al., 1999). Gan sieviešu, gan vīriešu kārtas grauzējiem vingrinājumi uzlabo uzvedības veiktspēju dažādos atmiņas uzdevumos, tostarp uz hipokampu balstītos uzdevumos: Morisa ūdens labirints (MWM), objekta atrašanās vietas atmiņa (OLM) un radiālais roku labirints papildus citiem. uz hipokampu balstīti atmiņas uzdevumi, piemēram, kontekstuāla baiļu kondicionēšana, pasīva izvairīšanās un jaunu objektu atpazīšana (Intlekofer et al., 2013; Lambert et al., 2005; O'Callaghan et al., 2007; Van Prāgs, Christie, et al., 1999; Van Prāgs, Kempermans u.c., 1999; Vivars, Poters un Van Prāgs, 2012).

Vīriešu dzimuma grauzēji, mūsu pētījumi un citi ir atklājuši, ka minimālais vingrinājumu ilgums 2 nedēļas ir nepieciešams, lai gūtu labumu no mācīšanās un atmiņas, ko var saglabāt dīkstāves laikā un atkārtoti iesaistīties, atkārtoti ievadot īsu, zemsliekšņa 2d vingrinājumu sesiju (Berchtold et al., 2010; Butler et al., 2019; Intlekofer et al., 2013). Molekulārā līmenī 2 nedēļu ilgas slodzes žurku tēviņiem izraisa hipokampu smadzeņu izcelsmes neirotrofiskā faktora proteīna regulēšanu (Berchtold et al., 2005).

Pēc paaugstināta BDNF līmeņa samazināšanās līdz sākuma līmenim, sekojoša īsa, zemsliekšņa 2d vingrinājumu sesijas atsākšana var no jauna veicināt paaugstinātu hipokampu BDNF līmeni (Berchtold et al., 2005). Tas liecina par vingrojumu izraisītu BDNF augšupregulāciju kā potenciālu mehānismu, kas veicina ilgstošas ​​neironu izmaiņas, lai nodrošinātu zemāku vingrinājumu biežuma stimulu, lai gūtu labumu no šīm adaptācijām un atvieglotu kognitīvos ieguvumus.

BDNF signalizācija veicina no proteīnu sintēzes atkarīgus mehānismus, lai izraisītu hipokampanga termiņa potenciāciju (LTP), kas ir mācīšanās un atmiņas šūnu korelācija (Panja & Braham, 2014; Silva, 2003). Tāpēc ir ierosināts, ka pēc vingrošanas jāpastiprina hipokampu LTP, lai veicinātu mācīšanos ar vingrinājumiem (L. Bettio et al., 2019; Liuet al., 2011). Cik mums zināms, līdz šim nevienā pētījumā nav pētīts, vai LTP uzlabošanās saglabājas pēc treniņa pārtraukšanas jebkuram dzimumam. Vairāki pētījumi ir pierādījuši, ka vingrošana efektīvi uzlabo LTP vingrošanas zonā (Farmer et al., 2004; Van Praag, Christie, et al., 1999; Vasuta et al., 2007), tomēr ir pārsteidzoši maz pētījumu par to, kā vingrošana. modulē sinaptisko plastiskumu CA1 apakšlaukā (Cotman et al., 2007), kas kalpo par visvairāk pētīto hipokampu apgabalu telpiskās atmiņas kontekstā (Patten et al., 2015). Tādējādi joprojām ir jāizpēta saistība starp vingrinājumu un CA1 plastiskumu.

Vairāki pētījumi ir apstiprinājuši hipotēzi, ka vingrinājumu radītie ieguvumi ir īslaicīgi dinamiski (Berchtold et al., 2005, 2010; Butler et al., 2019; YP Kim et al., 2003). Attiecībā uz mātītēm mūsu izpratne par šo procesu ir mazāk pamanāma, jo lielākā daļa darba galvenokārt tika veikta ar tēviņiem. Mācīšanās un atmiņas pētījumi ir snieguši pierādījumus tam, ka līdzīgi uzvedības rezultāti starp dzimumiem var ietvert dažādus neironu mehānismus (Becker & Koob, 2016; Keizer & Wood, 2019; Sase et al., 2019). Neskatoties uz datiem, kas liecina, ka vingrinājumi uzlabo abu dzimumu neiroplastiskumu un izziņu, ir skaidri pierādījumi par vingrinājumu dzimuma specifisko ietekmi un pamatā esošajiem mehānismiem.

Necilvēkiem vingrinājumi uzlabo objektu atrašanās vietas atmiņu vīriešiem, nevis sievietēm (Colemanet al., 2018). Grauzējiem vingrinājumi selektīvi uzlabo viena dzimuma veiktspēju noteiktos atmiņas uzdevumos (Barha et al., 2017). Molekulārā līmenī BDNF sadalījums pa vairākām smadzeņu struktūrām un hipokampa apakšreģioniem ir atšķirīgs starp dzimumiem (Bakos et al., 2009; Franklin & Perrot-Sinal, 2006). Uzkrājošie pierādījumi ir arī uzsvēruši dzimumu atšķirības BDNF funkcijās un mehānismos (Chan & Ye, 2017). Piemēram, reproduktīvais hormons, estrogēns, var regulēt BDNF ekspresiju, izmantojot dažādus mehānismus, no kuriem viens ietver epiģenētiskas modifikācijas BDNF promotorā (Fortress et al. al., 2014; Moreno-Piovano et al., 2014; Chan & Ye, 2017).

HipokampaBDNF proteīna līmeņi estrus ciklā atšķiras ar augstāko ekspresiju, kas novērota estrus un proestrus laikā, kas liecina, ka estrogēna līmeņa svārstības visā estrousciklā mātītēm atšķirīgi ietekmē BDNF ekspresiju (Scharfman et al., 2003). Turklāt estrus cikls var arī modulēt mērķus lejpus BDNF signalizācijas ceļiem hipokampā (Spencer et al., 2008; Spencer-Segal et al., 2011). Vairāku hipokampu funkcijā iesaistīto gēnu ekspresija arī piedzīvo dinamiskas izmaiņas visā estrozes ciklā (Iqbal et al., 2020). Kopā šie dati uzsver nepieciešamību atsevišķi pārbaudīt vingrinājumu radītos ieguvumus sievietēm un vīriešiem.

Tā kā mūsu iepriekšējais pētījums ir noteicis vingrojumu slieksni, kas iesaista un uztur ar vingrinājumiem uzlabotas kognitīvās funkcijas peļu tēviņiem (Butler et al., 2019), mēs izmantojām to pašu vingrinājumu paradigmu, lai pārbaudītu vingrojumu izraisīto ieguvumu temporālo dinamiku peļu mātītēm. Šajā pētījumā mēs parādām, ka peļu mātītēm 14 d brīvprātīga vingrošana nodrošina ilgtermiņa atmiņas veidošanos objekta atrašanās vietas atmiņas (OLM) uzdevuma zemsliekšņa iegūšanas apstākļos. Līdzīgi kā vīriešiem (Butler et al., 2019), sākotnējās slodzes radītie ieguvumi tiek saglabāti, izmantojot 7 dienu mazkustīgu aizkavēšanās periodu, un tos var atkārtoti aktivizēt ar īsu 2 dienu perioda atkārtotu aktivizēšanu, lai nodrošinātu ilgtermiņa atmiņas veidošanos zemsliekšņa iegūšanas apstākļos.

OLM veiktspēju neietekmēja estrus cikla fāzes apmācības vai pārbaudes laikā. Tomēr estrus fāzē tika pastiprināta brīvprātīga braukšana ar riteņiem. Turklāt mēs parādām, ka vingrinājumi uzlabo LTP hipokampa CA1 reģionā sievietēm, un tas saglabājas pat pēc mazkustīga aizkavēšanās perioda, tādējādi radot pirmos pierādījumus par slodzes izraisītas neiroplastiskuma īslaicīgumu sievietēm. Mums par pārsteigumu, hipokampu Bdnf ekspresijas novērtējums pēc atmiņas iegūšanas nedeva nekādu atšķirību starp eksperimentālajām grupām, kas liecina, ka, lai saglabātu vingrinājumu izraisītus kognitīvos ieguvumus, var nebūt nepieciešama pastāvīga BDNF regulēšana.

2. Materiāli un metodes

2.1. Dzīvnieki

Peļu mātītes, 8-nedēļu vecas C57BL/6J (Jackson Laboratory) tika izmitinātas atsevišķi saprotamos apstākļos (20 grādi ± 1 grāds; 70% ± 10% mitrums; 12 h:12 h gaismas un tumsas cikls) un tika nodrošināta reklāma. libitum piekļuvi pārtikai un ūdenim. Visi eksperimenti tika veikti gaismas fāzē. Visus eksperimentus veica Nacionālo veselības institūtu vadlīnijas par dzīvnieku aprūpi un lietošanu, un tos apstiprināja Kalifornijas Universitātes Ērvinas Institucionālā dzīvnieku aprūpes un lietošanas komiteja.

2.2. Vingrojumu ārstēšana

Peles tika sadalītas grupās ({{0}}–0–0: n=8, 14–0–0: n=7, 14–7–0: n=8, 14–7–2; n=8) un atsevišķi ievietoti vingrošanas būros (aprīkoti ar skriešanas riteni) vai sēdošajos būros (standarta būris) ). Vingrinājumu būri ir izgatavoti no 9,3 collas × 13,9 collas × 7,7 collas (garums × platums × augstums) polikarbonāta un aprīkoti ar skriešanas riteni 40 cm apkārtmērā, 12,7 cm diametrā (Lafayette Instruments).

Brīvprātīga riteņu braukšana tika uzraudzīta, izmantojot {{0},110sensoru/skaitītāju, kas pievienots centrālajam interfeisam, kas savienots ar speciālu datoru ar ScurryActivity uzraudzības programmatūru (Lafayette Instruments). Vingrinājumu parametri sastāv no sākotnējā vingrojumu perioda (0 vai 14d), kam seko mazkustīga aizkave (0 vai 7d), kura laikā tika noņemts ritošais ritenis. Pēc šī neaktivitātes perioda dažām pelēm tika nozīmēts saņemt reaktivējošu vingrojumu sesiju, kas sastāvēja no 2D piekļuves skriešanas riteņiem (sk. 1. att.).

2.3. Peles estrus cikla stadijas identificēšana

Estrousa cikla fāzes tika izsekotas un uzraudzītas aptuveni vienā un tajā pašā laikā (~ 10:00) katru dienu, sākot no pirmās riteņa darbības dienas. Gan vizuālais novērtējums, gan vaginālā uztriepe tika veikta reizi dienā, kā aprakstīja McLean et al. (2012) un Ajayi un Akhigbe (2020). Izmantojot pipeti, 5 ul fizioloģiskā šķīduma tika ņemti mitri maksts plankumi.

Lai novērstu pseidogrūtniecības efektus (Adler & Zoloth, 1970), pipetes gals tika rūpīgi novietots tā, lai tas neiekļūtu maksts atverē. Savākšanas šķidrums tika novietots uz stikla priekšmetstikliņa un žāvēts gaisā RT. Kad uztriepe bija pilnībā izžuvusi, priekšmetstikliņi tika iekrāsoti ar 0, 1% kristālvioletu traipu (McLean et al., 2012). Attiecīgi tika veikts citoloģijas novērtējums, lai noteiktu estrus cikla fāzes (sk. 2. E attēlu).

2.4. Subthreshold Object-Location atmiņas (OLM) uzdevums

2.4.1. Aparāts — apakšsliekšņa, 3-minūtes objekta atrašanās vietas atmiņas (OLM) uzdevums tika veikts, izmantojot 4 identisku kameru komplektu. Katra kamera bija izgatavota no baltas plastmasas ar izmēriem 333 mm × 320 mm × 310 mm (garums × platums × augstums), un tajā bija ~ 1 cm dziļas Sani-Chips (PJ Murphy Forest Products). Katras kameras vienā pusē tika pielīmēta vertikāla matēta melno marķējuma sloksne, lai kalpotu kā telpiskās navigācijas zīme. Katrs konteksts tika apgaismots ar blāvi dzeltenu gaismu (~15 lx). Izpētes darbība tika reģistrēta un novērtēta bezsaistē, izmantojot ANY-labirintu izsekošanas programmatūru (Stoelting Co.).

2.4.2. Eksperimentālais dizains — OLM apmācība, testēšana un analīze tika veikta, kā aprakstīja Vogel-Ciernia et al. (2015) ar iegūšanas ilgumu, kas pielāgots 3 minūtēm, ko mēs iepriekš esam pierādījuši kā kodēšanas apakšslieksni, kā rezultātā ir slikta veiktspēja gan īstermiņa, gan ilgtermiņa atmiņā (Butler et al., 2019; Intlekofer et al., 2013; Malvaez et al., 2013; McQuown et al., 2011). Pirms OLM apmācības peles tika apstrādātas un pēc tam pieradinātas pie eksperimentālā konteksta. Peles tika apstrādātas 2 minūtes dienā 4 dienas pēc kārtas, un pēdējās 2 apstrādes dienas pārklājās ar pieradināšanu. Pieradināšana notika 6 dienu laikā, kuru laikā peles tika pakļautas eksperimentālajam kontekstam 5 minūtes dienā. Pieradināšanas sesijas tika analizētas (lai noteiktu nobraukto attālumu un ātrumu), izmantojot ANY-labirinta uzvedības analīzes programmatūru. Samazināta aktivitāte dienās tika izmantota kā veiksmīgas pieradināšanas rādītājs (papildu attēls S1, S2). Neatkarīgi no vingrinājumu režīma skriešanas riteņi tika noņemti naktī pirms OLM treniņa, lai novērstu riteņu skriešanas tūlītējo ietekmi uz uzvedību.

Pēc pieradināšanas peles saņēma 3-minūšu iegūšanas sesiju, kurā divi identiski objekti (100- ml stikla vārglāzes, kas pildītas ar cementu) tika novietoti atšķirīgās vietās (atrašanās vieta A1, augšējā kreisajā pusē, jons A2, augšējā labajā stūrī). Objekti tika novietoti 9 cm attālumā viens no otra, 6 cm attālumā no sānu sienām un 1 cm attālumā no priekšējās sienas. Lai novērtētu ilglaicīgu dzīvi, pelēm tika veikts 5 minūšu tests, 24 h pēc treniņa, kura laikā viens pazīstams objekts (līdzsvarots) tika pārvietots uz jaunu vietu (atrašanās vieta A3, apakšējā vidū), kas novietota 2,5 cm attālumā no apakšējās sienas. Tika pārbaudīta objekta izpēte romānā (vieta A3) pret pazīstamo/fiksēto vietu (A1).

Izpēte tika novērtēta tikai tad, kad peles galva bija vērsta pret objektu un bija 1 cm attālumā vai kad deguns pieskārās objektam. Kopējais izpētes laiks tika reģistrēts (t), un priekšroka jaunajam objektam tika izteikta kā diskriminācijas indekss (DI=( romāns −pazīstams) / (romāns + pazīstams) × 100%). Apmācības sesijām objekts, kas bija paredzēts pārvietošanai testa sesijas laikā, tika izmantots kā jauns objekts, lai varētu tieši salīdzināt apmācības un testēšanas DI.

Peles, kas izpētīja<2 s during testing or training were excluded from the study. Mice that showed a preference for either object during training (DI > ± 20) were also excluded. All habituation, training, test, and scoring were performed by experimenters blinded to the experimental groups. Mice were sacrificed 60 min after the test and the dorsal hippocampi were dissected and stored at −80 °C until processing for RT-qPCR.

For more information:1950477648nn@gmail.com