Diētisko humusvielu ietekme uz šūnu imunitāti un asins īpašībām sivēniem
Oct 16, 2023
Abstrakts: Šī pētījuma mērķis bija noteikt uzturā esošo humusvielu ietekmi uz imūnreakciju un asins profiliem sivēniem. Pavisam 24 krustojuma sivēni (Slovākijas baltie × Landrase; 35 dienas veci; vidējais ķermeņa svars 11,67 kg) tika iedalīti divās uztura grupās ar (eksperimentālā; 5 g · kg–1 ) vai bez (kontrole; 0 g·kg−1 ) dabisko humusvielu piedevas. Šajā pētījumā mēs novērojām ievērojamu CD4+CD8- limfocītu īpatsvara pieaugumu (p < {{10},001) eksperimentālajā grupā. Rezultāti arī liecināja par tendenci palielināties fagocītu aktivitātei un fagocītu absorbcijas spējai, kā arī citu kontrolēto limfocītu apakšpopulāciju (CD3+, CD21+, CD4-D) skaitam. 8+, CD4+CD8+, CD4+CD25+) sivēniem eksperimentālajā grupā, salīdzinot ar kontroles grupu. Papildinājumi ar humusvielām palielināja seruma sārmainās fosfatāzes līmeni, salīdzinot ar kontroles grupu (p < 0,05). Diētiskā ārstēšana būtiski neietekmēja citus kontrolētos asins parametrus. Tajā secināts, ka humusvielu iekļaušana sivēnu uzturā varētu stimulēt šūnu imunitāti, negatīvi neietekmējot hematoloģiskos un bioķīmiskos parametrus.
Atslēgvārdi: humusvielas; fagocitoze; limfocītu; asins bioķīmija; hematoloģija; sivēni

Cistanche papildinājuma priekšrocības — kā stiprināt imūnsistēmu
1. Ievads
Humusvielas (HS) ir nebarojošu dabisko organisko bioaktīvo savienojumu klase, kas veidojas augsnēs [1]. Tās ir svarīgas humusa sastāvdaļas, kuru galvenā funkcija ir barības vielu pārnešana no augsnes uz dzīviem organismiem. HS īpaši ietver humīnskābi, fulvoskābi un humīnu kā to galvenās sastāvdaļas [2]. Šie komponenti ir būtiski augu augšanai [3] un var veicināt augu efektīvu barības vielu izmantošanu [4]. Sakarā ar to, ka Eiropas Savienībā ir aizliegts lietot antibiotikas kā augšanas veicinātājus, ir pieaugusi interese par alternatīvām dzīvnieku audzēšanai paredzētām barības piedevām [5]. Pēdējās divās desmitgadēs ir pieaugusi interese par HS izmantošanu dzīvnieku ēdināšanā [2,6]. Daudzi autori pētījumu laikā novēroja ražošanas parametru uzlabošanos pēc HS pievienošanas barībai. Pēdējos gados ir pierādīts, ka HS, kas pievienota monogastrisku dzīvnieku, piemēram, cūku, mājputnu un trušu, barībai, veicina augšanu [7–10]. Turklāt HS ir izmantots kā imūnstimulējošs, pretcaurejas līdzeklis, pretsāpju līdzeklis un pretmikrobu līdzeklis veterinārajā praksē [11–13]. Bioloģiski aktīvo humusvielu piedevu pievienošana dzīvnieku barībai stimulēja vielmaiņas procesus un barības vielu sagremojamību, kā arī aktivizēja dažu minerālelementu uzsūkšanos [14]. Citi pētījumi atklāja, ka HS palīdz samazināt amonjaka izdalīšanos no kūtsmēsliem un uzlabo asins limfocītu relatīvo skaitu. Iepriekš minētās modifikācijas palīdz uzlabot dzīvnieku imunitāti [2,8,15]. Tomēr, ņemot vērā dažādus HS preparātu avotus un veidus, kā arī to, ka nav vienota standarta patiesas HS iedarbības mērīšanai, to bioloģiskā iedarbība ir atkarīga no specifikācijas. Pamatojoties uz mūsu iepriekšējiem rezultātiem un pieredzi, kas iegūta pētījumos ar mājputniem (broileriem un dējējvistām) par humusvielu ietekmi (attiecīgi 0,8% un 0,5% koncentrācijā) uz imūno stāvokli. un imūnās atbildes reakcijas, mēs nolēmām pārbaudīt šo efektu sivēniem. Mēs novērojām būtisku fagocītu aktivitātes un B šūnu atbildes reakcijas pieaugumu, kā arī ievērojamu CD4+:CD8+ limfocītu attiecības pieaugumu [16,17]. Kopumā par piedevu kā barības piedevu cūkām nav pietiekami daudz ziņots, salīdzinot ar mājputniem, un zinātniskie pētījumi par HS piedevu ietekmi uz cūku uzturu uz imunitāti un vielmaiņu joprojām ir salīdzinoši ierobežoti. Tāpēc šis pētījums kā izmēģinājuma izmēģinājums tika veikts, lai novērtētu 0,5% HS papildināšanas ietekmi uz imūnsistēmas rādītājiem, kā arī bioķīmisko un hematoloģisko mainīgo lielumu sivēniem asinīs.

Cistanche papildinājuma priekšrocības — kā stiprināt imūnsistēmu
Noklikšķiniet šeit, lai skatītu Cistanche Enhance Immunity produktus
【Jautājiet vairāk】 E-pasts:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
2. Materiāli un metodes
2.1. Eksperimentālais dizains
Eksperiments tika veikts saskaņā ar "Eiropas direktīvu par zinātniskiem mērķiem izmantojamu dzīvnieku aizsardzību" [18]. Dzīvnieki tika izmitināti Košicē, Slovākijā, Veterinārmedicīnas universitātes Dzīvnieku barošanas un audzēšanas katedras akreditētos staļļos, ievērojot nepieciešamos zoohigiēnas apstākļus. Eksperimenta laikā vidējā temperatūra stallī bija 20,2 ± 1,5 ◦C, relatīvais mitrums 68,5 ± 4,8%. Izmēģinājumu apstiprināja Košices Veterinārmedicīnas un farmācijas universitātes Ētikas komisija (protokols Nr. EKV/2022-11). Kopā 24 krustojuma (Slovākijas baltā x Landrace) 35-dienu veci sivēni tika sadalīti divās grupās (n=12; 50% tēviņu un 50% mātīšu abās grupās). Pirms eksperimenta sākuma tika reģistrēts sākotnējais vidējais dzīvnieka ķermeņa svars (BW) 11,68 ± 1,35 kg kontroles grupā un 11,65 ± 1,34 kg eksperimentālajā grupā. Pētījumā tika iekļautas šādas eksperimentālās grupas: kontroles grupa un eksperimentālā grupa, kur eksperimentālās grupas uzturs tika papildināts ar 0,5% HS piedevu. Eksperiments ilga 4 nedēļas. Eksperimentā tika izmantotas vienas un tās pašas diētas abām grupām (1. tabula). HS piedevas ieviešana uzturā tika realizēta uz miežu rēķina eksperimentālajā grupā. Cūkas divas reizes dienā baroja ar pilnvērtīgiem barības maisījumiem. Dzeramais ūdens bija pieejams dzīvniekiem ad libitum visā eksperimenta periodā. Kompleksos barības maisījumus eksperimentā atbilstoši uzturvērtības prasībām formulēja Šimeˇcek et al. [19]. Dabiskais HS uztura bagātinātājs (HUMAC® Natur AFM; Humac, Ltd., Košice, Slovākija) tika samalts un fizikāli attīrīts ar leonardītu bez ķīmiskas apstrādes. Saskaņā ar EK Komisijas Regulu 152/2009 [20] tika analizēti kompleksie barības maisījumi attiecībā uz sausnu, kopproteīnu, kopšķiedru, kopējo pelnu, cietes un kopējā fosfora saturu. Kalcija un nātrija līmenis uzturā tika analizēts, izmantojot atomu absorbcijas spektrometra liesmas metodi (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, UK). Pilnvērtīgo barības maisījumu metabolizējamās enerģijas vērtības tika aprēķinātas ar formulu saskaņā ar Šimeˇcek et al. [19].
2.2. Paraugu ņemšana un mērījumi
4. nedēļā, no rīta eksperimenta pēdējā dienā, ar orbitālās sinusa punkciju tika ņemti asins paraugi no visām cūkām atsevišķi abās grupās turpmākai analīzei. Serums tika iegūts centrifugējot (3000 apgr./min 30 minūtes) un līdz analīzei tika uzglabāts -20 ◦ C temperatūrā. Heparinizētas asinis tika izmantotas, lai noteiktu hematoloģiskos parametrus, pārbaudītu fagocītu aktivitāti un identificētu limfocītu apakšpopulācijas.
1. tabula. Cūku barības maisījumu formula un ķīmiskais sastāvs (uz barības bāzes).

2.2.1. Hematoloģiskie un seruma bioķīmiskie parametri
Pilnīga asins aina tika veikta ar automatizētu hematoloģijas analizatoru (scil Vet ABC™ Hematology Analyzer, Vācija). Mūsu pētījumā novērtētie mainīgie bija hematokrīta vērtība (HCT), hemoglobīna koncentrācija (Hb), sarkano asins šūnu skaits (RBC), vidējais ķermeņa tilpums (MCV) un kopējais balto asins šūnu (WBC) skaits. Seruma bioķīmiskie parametri - kopējais proteīns, albumīns, glikoze, urīnviela, triglicerīdi, holesterīns, kreatinīns, aspartātaminotransferāze (AST), sārmainās fosfatāze (ALP) un fosfors tika mērīti, izmantojot pilnībā automātisku brīvpiekļuves galda analizatoru (Ellipse, Itālija). Kalcija koncentrāciju serumā noteica ar liesmas atomu absorbcijas spektrometru (Unicam Solar 939, Camberley, Surrey, UK).
2.2.2. Lipīdu peroksidācijas biomarķieris
Lipīdu peroksidācijas produktu (malondialdehīda līmenis, MDA) koncentrācija serumā tika mērīta kā tiobarbitūrskābes reaktīvās vielas (TBAR) saskaņā ar Costa et al. aprakstīto spektrofotometriskās modifikācijas metodi. [21]. Īsumā, seruma paraugus sajauca ar šķīdumu, kas sastāvēja no trihloretiķskābes (15%; Merck, Darmštate, Vācija), tiobarbitūrskābes (0.38%; Sigma-Aldrich, Sentluisa, MO, ASV) un sālsskābi (0.25 N; Mikrochem, Pezinok, Slovākija) un karsē 30 min verdoša ūdens vannā. Pēc atdzesēšanas ledus ūdenī un centrifugēšanas supernatanta absorbcija tika mērīta pie 535 nm. TBAR koncentrācija tika noteikta pēc standarta līknes, kas sagatavota, izmantojot 1,1,3,3-tetrametoksipropānu (malondialdehīds-bis (dimetilacetāls); Acros Organics, Geel, Beļģija). Rezultāti tika izteikti kā nmol MDA/ml seruma.

cistanche augu paaugstinošā imūnsistēma
2.2.3. Fagocītu aktivitātes pārbaude un limfocītu apakšpopulāciju identifikācija
Lai noteiktu fagocītu aktivitāti un fagocītu absorbcijas spēju, tika izmantots komerciāls Phagotest® tests (Celonic, Minhene, Vācija). Veicot testu, tika ievēroti ražotāja norādījumi. Lai identificētu izvēlētās limfocītu apakšpopulācijas, tika izmantots tiešs imūnkrāsošanas tests. Tika izmantotas divas konjugētu peles anti-cūku monoklonālo antivielu kombinācijas: CD3e/CD21 un CD4/CD8a/CD25 saskaņā ar 2. tabulā norādītajām specifikācijām. Heparinizētas asinis 50 µL apjomā tika inkubētas ar monoklonālajām antivielām 15 minūtes tumsā. laboratorijas temperatūrā. Pēc inkubācijas mēģenēm pievienoja 1 ml BD FACS līzes šķīduma. Mēģenes inkubēja vēl 20 minūtes tumsā laboratorijas temperatūrā un pēc tam centrifugēja (300 × g 5 minūtes). Pēc tam šūnu granulas tika mazgātas un divas reizes centrifugētas ar 1 ml fosfāta buferšķīduma (PBS; MP Biomedicals, Illkirch-Graffenstaden, Francija) ar ātrumu 300 × g 5 minūtes. Visbeidzot, šūnas tika atkārtoti suspendētas 200 µL PBS turpmākai citometriskai analīzei.
2. tabula. Peļu pretcūku monoklonālo antivielu specifikācija un daudzums.

Fagocītu aktivitātes analīze, kā arī limfocītu apakšpopulāciju identificēšana tika veikta ar sešu krāsu BD FACSCantoTM plūsmas citometru (Becton Dickinson Biosciences, Sanhosē, CA, ASV), izmantojot BD FACS DivaTM programmatūru. Analizēto šūnu atrašanās vieta tika noteikta FSC un SSC punktu diagrammās. Granulocīti, monocīti un abas šūnu populācijas kopā tika atlasītas fagocītiskās aktivitātes analīzei. Pamatojoties uz zemo DNS saturu sarkanās fluorescences histogrammā (FL-2), baktēriju agregāti tika izslēgti no turpmākās analīzes. Zaļās fluorescences histogrammā (FL-1) tika noteikts aktīvo fagocītu procentuālais daudzums un vidējā fluorescences intensitāte. Limfocītu apakšpopulāciju identificēšanai tika izmantoti ierobežoti limfocīti (1.a, b attēls). CD3+ limfocīti ir T limfocīti un CD21+ B limfocīti (1.c attēls). CD4+CD8- apakšpopulācija tika novērtēta kā T palīglimfocīti, CD4-CD8+ kā citotoksiskie limfocīti, CD4+CD8+ kā citotoksiskie limfocīti. dubultpozitīvie T limfocīti (1.d attēls) un CD4+CD25+ kā regulējošie T limfocīti (1.e attēls). Limfocītu proporcijas ir izteiktas procentos.
2.3. Statistiskā analīze
Rezultāti tika statistiski novērtēti, izmantojot nepāra t-testu ar statistikas programmatūru GraphPad Prism 8.0. Vērtība p < 0,05 tika uzskatīta par statistiski nozīmīgu. Šajā eksperimentā iegūtie rezultāti tika izteikti kā vidējā ± vidējā standarta kļūda (SEM).

1. attēls. Vārtošanas stratēģija: (a) limfocītu (sarkanā) stāvokļa noteikšana pamata punktu diagrammā (FSC-A pret SSC-A); b) dubletu un aglomerātu noņemšana no analīzes; (c) CD3+ un CD21+ limfocītu reprezentācijas analīze; (d) CD4+ un CD8+ limfocītu attēlojuma analīze; (e) CD4+CD25+ limfocītu attēlojuma noteikšana histogrammā no CD4+ pozitīvām šūnām (apzīmētas ar zaļu krāsu).
3. Rezultāti
3.1. Hematoloģiskie un seruma bioķīmiskie parametri
HS ietekme uz hematoloģisko un bioķīmisko asins profilu ir parādīta 3. tabulā. Noteiktie asins parametri, tostarp sarkano asins šūnu, balto asins šūnu saturs, hemoglobīns, hematokrīts, vidējais asinsķermenīšu tilpums, kopējais proteīns, albumīns, glikoze, urīnviela, triglicerīdi Uztura HS ārstēšana neietekmēja holesterīnu, kreatinīnu, AST, Ca un P. Tomēr uztura bagātināšana ar HS palielināja ALP aktivitāti (p < 0,05).
3. tabula. Humusvielu ietekme uz dažiem hematoloģiskajiem un seruma bioķīmiskajiem parametriem sivēniem

HS pievienošana neietekmēja seruma TBAR līmeni, sekundāros lipīdu peroksidācijas produktus (kas ir svarīgs parametrs, ko izmanto lipīdu peroksidācijas noteikšanā).
3.2. Šūnu imūnreakcija
HS pievienošana sivēnu barībai būtiski neietekmēja aktīvo fagocītu procentuālo daudzumu (4. tabula) un fagocītu absorbcijas spēju (5. tabula). Augstākas šo iedzimto imūnās atbildes parametru vērtības tika konstatētas eksperimentālajā grupā, salīdzinot ar kontroles grupu.
4. tabula. Humusvielu ietekme uz fagocītu aktivitāti sivēnu asinīs, izteikta kā aktīvo fagocītu procents – fagocītiskā aktivitāte

5. tabula. Humusvielu ietekme uz fagocītu absorbcijas spēju, kas izteikta kā vidējā fluorescences intensitāte (MFI).


2. attēls. Turp.

2. attēls. Humusvielu ietekme uz limfocītu procentuālo daudzumu: (a) CD3+; (b) CD21+; (c) CD4+CD8-; (d) CD4-CD8+; (e) CD4+CD8+; (f) CD4+CD{{10}}; un (g) CD4:CD8 limfocītu attiecība sivēnu asinīs. Kolonna, kas apzīmēta ar zvaigznīti, būtiski atšķiras no kontroles (*** p < 0,001).
4. Diskusija
4.1. Šūnu imūnreakcija
Mūsu pētījuma galvenais mērķis bija izsekot, kā humusvielas (HS) ietekmēja dažus dažādus šūnu imunitātes rādītājus. Aktīvo fagocītu procentuālais daudzums un to absorbcijas spēja tika izvēlēti kā indikatori, lai uzraudzītu ietekmi uz iedzimto šūnu imunitāti. Iepriekšējā pētījumā tika konstatēts, ka HS pievienošana broileru barībai ({0}},8%) būtiski palielināja fagocītu aktivitāti, kā arī vidējo fluorescences intensitāti [16]. Turklāt ELnaggar un El-Kelawy [22] novēroja fagocītiskās aktivitātes un fagocītu indeksa palielināšanos pēc humīnskābes pievienošanas uzturam (0.1, 0.2 un 0). 4%) Sacco cāļu. Līdzīgi konstatējumi tika iegūti arī ar dējējvistām [17]. Pašreizējā pētījumā HS papildināšanai sivēniem nebija būtiskas ietekmes uz fagocitozi. Tomēr aktīvo fagocītu procentuālais daudzums, kā arī to absorbcijas spēja bija skaitliski augstāka sivēniem, kas papildināti ar HS, nekā kontroles grupas sivēniem. Pēc Sanmigela un Rondona [23] domām, HS ietekme uz fagocītiem ir atkarīga no laika. Viņi atklāja, ka HS pievienošana dējējvistu barībai (0.1 un 0.2%) palielināja fagocītu indeksu lietošanas 8. un 3. dienā0, taču salīdzināja ar Wang et al. [2], kurš atklāja, ka cūkām, kuru barībai bija pievienots 10% HS, bija lielāks relatīvais limfocītu skaits. Līdzīgi rezultāti tika iegūti mājputniem, kuri tika baroti ar barību, kas papildināta ar 0,15% humātu [24], vai tika papildināta ar 20 mg humīnskābes/kg ķermeņa svara dzeramajā ūdenī [25]. Saskaņā ar Cetin et al. [24], dējējvistu barības papildināšana ar humusa savienojumiem izraisa ievērojamu limfocītu skaita pieaugumu, ko var saistīt ar palielinātu IL-2 veidošanos, kā arī IL{{29} ekspresiju. } receptoru uz limfocītiem. Šķiet, ka humusvielas uzlabo IL-2-radošo šūnu darbību. Tomēr citi autori nenovēroja nekādu būtisku ietekmi uz limfocītu skaitu cūkām, kuras baroja ar humīnskābi papildinātu barību [26], kā arī cāļiem, kuriem dzeramajā ūdenī [27] vai ēdienkartē tika ievadītas humīnskābes [22]. . Mūsu rezultāti ir līdzīgi Mudro ˇnová et al. [16], kurš atklāja, ka CD4 limfocītu procentuālais daudzums ir ievērojami palielināts broileriem, kuri baroti ar HS papildinājumu (0, 8%), salīdzinot ar kontroles grupu. Viņi arī atzīmēja ievērojamu CD8+ limfocītu (T citotoksisko limfocītu) samazināšanos, kā rezultātā tika statistiski augstāka CD4:CD8 attiecība, ko izmanto kā imūnstimulācijas marķieri. No otras puses, dējējvistu barošana ar 0,5% HS uzturu ievērojami palielināja IgM+ limfocītu īpatsvaru, kas pārstāv B limfocītu apakšpopulāciju, un ievērojami samazināja CD3+ limfocītu īpatsvaru, kas veido kopējo T limfocītu skaitu. T helpera un T citotoksisko limfocītu īpatsvars netika ietekmēts [17]. Pamatojoties uz mūsu rezultātiem, kā arī dažādiem pētījumiem, var secināt, ka HS var būt imūnstimulējoša iedarbība, ko var ietekmēt izmantoto humātu sastāvs un daudzums, to ievadīšanas veids, dzīvnieku suga un, saskaņā ar ELnaggar un El. -Kelawy [22], audzējot dzīvniekus dažādos pasaules reģionos, kas atšķiras pēc klimata. HS imūnmodulācija teorētiski var sastāvēt no humātu kompleksu veidošanās ar saharīdiem. Šie kompleksi saistās ar T limfocītu un NK šūnu virsmu un ietekmē to darbību, tostarp citokīnu veidošanos, kas vēl vairāk ietekmē citas imūnsistēmas šūnas [28].

cistanche tubulosa-uzlabo imūnsistēmu
4.2. Hematoloģiskais un seruma bioķīmiskais parametrs
Vēl viens šī pētījuma mērķis bija novērtēt atlasītos hematoloģiskos un bioķīmiskos asins parametrus sivēniem, kuri baroti ar HS papildinātu diētu. Netika konstatētas būtiskas atšķirības izvēlētajos olbaltumvielu, enerģijas un minerālvielu metabolisma mainīgajos lielumos, kā arī hematoloģiskajos rādītājos starp eksperimentālo dzīvnieku grupu ar uztura HS piedevām un kontroles grupu, izņemot ALP aktivitāti pašreizējā pētījumā. Saskaņā ar Doubek et al., mūsu pētījuma bioķīmiskie rādītāji bija atsauces diapazonā visiem sivēniem. [29] un Krafts un Dīrs [30]. Mūsu atklājumi atbilst iepriekšējam Wang et al darbam. [2], kuri pētījuma laikā nekonstatēja būtiskas izmaiņas sarkano un balto asinsķermenīšu skaitā, veicot pētījumu, lai noskaidrotu HS ietekmi uz asins mainīgajiem lielumiem cūkām, kas beidzas. Pēc ārstēšanas ar HS saturošu diētu Herzig et al. [31], kā arī Šamudovská un Demeterová [32] novēroja nenozīmīgi palielinātu ALP aktivitāti cāļiem. Mūsu izmeklēšanā mēs noskaidrojām, ka eksperimentālajai grupai bija ievērojami augstāka ALP aktivitāte nekā kontroles grupai. Tikmēr to vērtības palika cūku ALP līmeņa atsauces diapazonā (2–17 kat·L −1 ) [29,30]. No otras puses, Jad'uttová et al. [33] un Rath et al. [34] novēroja ievērojamu ALP aktivitātes samazināšanos cāļiem pēc barošanas ar HS. Saskaņā ar šo autoru teikto, ALP līmenis asinīs broileriem, kas saņēma HS barības piedevu, samazinājās par 100%. Lai gan ALP aktivitātes samazināšanās vērtības Rath et al. [34] pētījumi statistiski atšķīrās no kontroles, tie neatspoguļoja nekādu HS toksisko ietekmi uz selektīviem orgāniem (muskuļiem, nierēm, sirdi vai aknām). Uztura nodrošinātais HS daudzums var ietekmēt minerālvielu koncentrāciju asinīs. HS ievadīšana koncentrācijā 0,5% neietekmēja kalcija un fosfora līmeni sivēnu asins serumā. Minerālu seruma koncentrācijas samazināšanās iemesls varētu būt HS spēja helātus veidot metālus, ko ietekmē ievērojams karbonskābes sānu ķēžu daudzums [34]. Mūsu pētījumā kalcija un fosfora koncentrācijas sivēnu asinīs netika pazeminātas zem atsauces vērtībām, pievienojot HS eksperimentālās grupas barības maisījumam. MDA ir skābekļa brīvo radikāļu izraisītas lipīdu peroksidācijas produkts, ko var izmantot kā marķieri, lai novērtētu antioksidanta stāvokli un lipīdu peroksidāciju [35]. MDA tika noteikts kā oksidatīvā stresa biomarķieris, mērot tiobarbitūrskābes reaktīvo vielu (TBAR) līmeni asinīs. Oksidatīvā stresa samazināšanos raksturo MDA līmeņa pazemināšanās. Iepriekšējie pētījumi ir parādījuši, ka HS var būt antioksidanta īpašības, kas aizsargā pret dažādiem traucējumiem, kas saistīti ar oksidatīvo stresu, ko parasti izraisa brīvie radikāļi. Piemēram, Wang et al. [15] atklāja, ka uztura bagātinātājs ar nātrija humātu (2000 mg · kg-1 ) var uzlabot atšķirto sivēnu antioksidanta stāvokli. Viņi novēroja ievērojamu MDA satura samazināšanos serumā, kā arī ievērojamu kopējās antioksidantu kapacitātes pieaugumu. Tomēr HS ir dabīgi materiāli ar mainīgu sastāvu, kas var izraisīt dažādu efektivitāti, kas var būt atkarīga arī no to ievadītā daudzuma. Pašreizējā eksperimentā netika novērotas MDA (TBAR) līmeņa izmaiņas serumā sivēniem, kuri tika baroti ar HS, salīdzinot ar kontroles grupu. Mūsu rezultāti atbilst Zhang et al. [36], kurš atklāja, ka nātrija humāta pievienošana dējējvistu barībai (0,1, 0,3 un 0,5%) neietekmēja kopējo antioksidantu spēju serumā un MDA vērtības.

Cistanche papildinājuma priekšrocības — kā stiprināt imūnsistēmu
5. Secinājumi
Pamatojoties uz šajā pētījumā iegūtajiem rezultātiem, var secināt, ka uztura bagātinātājs ar 0,5% humusvielu varētu stimulēt dažas imūnās šūnas sivēniem. Ievērojami palielinājās CD4+CD8- limfocītu īpatsvars asinīs. Papildinājumi ar humusvielām palielināja ALP serumā. Tomēr šīs vērtības joprojām bija atsauces diapazonā. Rezultāti parādīja, ka pat tik zema HS koncentrācija var pozitīvi ietekmēt šūnu imunitāti sivēniem. Ņemot vērā to, ka mūsu izvēlētā humusvielu koncentrācija būtiski ietekmēja tikai dažus šūnu imunitātes rādītājus, būs nepieciešami turpmāki pētījumi, lai izvēlētos atbilstošu koncentrāciju un apstiprinātu imunitāti stimulējošo iedarbību šīs kategorijas dzīvniekiem.
Atsauces
1. Penja-Mendezs, EM; Havels, J.; Patoˇcka, J. Vēl nezināmas struktūras humusvielas-savienojumi: pielietojums lauksaimniecībā, rūpniecībā, vidē un biomedicīnā. J. Appl. Biomed. 2005, 3, 13–24. [CrossRef]
2. Vans, K.; Čens, JJ; Yoo, JS; Kims, HJ; Čo, JH; Kim, IH Papildu humusvielu ietekme uz cūku augšanu, asins īpašībām un gaļas kvalitāti. Dzīvākais. Sci. 2008, 117, 270–274. [CrossRef]
3. Visser, SA Humusvielu ietekme uz augstākajiem dzīvniekiem un cilvēkiem, humusa savienojumu iespējamā izmantošana ārstniecībā. In Proceedings of the International Humic Acid Society Meeting, Sevilja, Spānija, 1988; lpp. 27.
4. Stīvensons, FJ Humusa ķīmija: ģenēze, sastāvs, reakcijas; Wiley-Inter-Science: Ņujorka, NY, ASV, 1994; 34.–41.lpp.
5. Hasans, HMA; Mohameds, MA; Youssef, AW; Hassan, ER Organisko skābju izmantošana, lai aizstātu antibiotiku augšanas veicinātājus, ietekme uz broileru veiktspēju un zarnu mikrofloru. Āzijas-Austrija. J. Anim. Sci. 2010, 23, 1348–1353. [CrossRef]
6. Gāliks, B.; Hrnˇcár, C.; Gašparovičs, M.; Rolineks, M.; Hanušovskis, O.; Jurāčeks, M.; Šimko, M.; Zábranský, L.; Kovacik, A. Humusvielu ietekme uz gaļas kvalitāti fermas fazānu (Phasianus colchicus) nobarošanā. Lauksaimniecība 2023, 13, 295. [CrossRef]
7. Karaoglu, M.; Macit, M.; Esenbuga, N.; Durdags, H.; Turguts, L.; Bilgin, OC Papildu humāta ietekme dažādos līmeņos uz broileru augšanas, kaušanas un liemeņu īpašībām. Int. J. Poults. Sci. 2004, 3, 406–410.
8. Dži, F.; Makglons, Dž. Kim, SW Diētisko humusvielu ietekme uz cūku augšanas spēju, liemeņa īpašībām un amonjaka emisiju. J. Anim. Sci. 2006, 84, 2482–2490. [CrossRef]
9. Lackova, Z.; Zigo, F.; Farkašova, Z.; Ondrašoviˇcová, S. Humusvielu kā organisko piedevu ietekme uz trušu nobarošanas veiktspēju, gaļas kvalitāti un atlasītajiem bioķīmiskiem parametriem. Life 2022, 12, 1016. [CrossRef]
10. Kaevska, M.; Lorencova, A.; Videnska, P.; Sedlar, K.; Provazniks, I.; Trckova, M. Nātrija humāta un cinka oksīda, ko izmanto pēcatšķiršanas caurejas profilaksē, ietekme uz fekāliju mikrobiotas sastāvu atšķirtiem sivēniem. Veterinārs. Med. 2016, 61, 328–336. [CrossRef]
11. Trckova, M.; Matlova, L.; Hudcova, H.; Mārtiņš, F.; Zraly, Z.; Dvorska, L.; Berāns, V.; Pavlik, I. Kūdra kā dzīvnieku barības piedeva: apskats. Veterinārs. Med. -čehu. 2005, 50, 361–377. [CrossRef]
12. Vēbers, TE; van Sambeek, DM; Gablers, NK; Kers, BJ; Moreland, S.; Johals, S.; Edmonds, MS Uztura humusskābes un sviestskābes ietekme uz augšanas veiktspēju un reakciju uz lipopolisaharīdu jaunām cūkām. J. Anim. Sci. 2014, 92, 4172–4179. [CrossRef]
13. Mao, Y. Broileru augšanas veiktspējas, gaļas sastāva, oksidatīvā stāvokļa un imunitātes modulācija ar uztura fulvoskābēm. Poults. Sci. 2019, 98, 4509–4513. [CrossRef] [PubMed]
14. Stepčenko, LM Humuspreparātu loma vielmaiņas procesu vadīšanā lauksaimniecības dzīvnieku bioloģisko produktu veidošanā. In sasniegumi un perspektīvas humusvielu izmantošanai lauksaimniecībā; Lauksaimniecības institūta izdevniecība: Dņepropetrovska, Ukraina, 2008; 70.–74.lpp. (Krieviski)
15. Van, Q.; Ying, J.; Zou, P.; Džou, Y.; Vangs, B.; Jū, D.; Li, V.; Žans, X. Humīnskābes nātrija un cinka oksīda uztura papildināšanas ietekme uz atšķirto sivēniņu augšanas veiktspēju, imūno stāvokli un antioksidantu spēju. Dzīvnieki 2020, 10, 2104. [CrossRef] [PubMed]
16. Mudro Žnova, D.; Karafova, V.; Pešulova, T.; Koškova, J.; Maruščakova, IC; Bartkovskis, M.; Marcinˇcáková, D.; Ševčíkova, Z.; Marcinˇcák, S. Humusvielu ietekme uz zarnu mikrobiotu un broileru imūnreakciju. Pārtikas lauksaimniecības. Immunol. 2020, 31., 137.–149. [CrossRef]
17. Mudro Žnova, D.; Karafova, V.; Semjons, B.; Nad', P.; Koškova, J.; Bartkovskis, M.; Makišs, A.; Buj ˇnák, L.; Nagy, J.; Mojžišova, J.; un citi. Humusvielu uztura bagātinātāju ietekme uz dējējvistu ražošanas parametriem, imūno stāvokli un zarnu mikrobiotu. Lauksaimniecība 2021, 11, 744. [CrossRef]
18. Eiropas Komisija. Eiropas Parlamenta un Padomes 2010. gada 22. septembra Direktīva 2010/63/ES par zinātniskiem mērķiem izmantojamu dzīvnieku aizsardzību. Izslēgts. J. Eur. Savienība 2010, 276, 33.–79.
19. Šimečeks, K.; Zemans, L.; Heger, J. Uzturvielu prasības un cūku barības uzturvērtību tabulas, 3. izd.; Čehijas Lauksaimniecības zinātņu akadēmija: Brno, Čehija, 2000; 125p. (čehu valodā)
20. Eiropas Komisija. Komisijas Regula (EK) Nr. 152/2009 (2009. gada 27. janvāris), ar ko nosaka paraugu ņemšanas un analīzes metodes oficiālai barības kontrolei. Izslēgts. J. Eur. savienība. 2009, 54, 2–54.
21. Kosta, CM; Santosa, RCC; Lima, ES Vienkārša automatizēta procedūra tiola mērīšanai cilvēka seruma paraugos. J. Bras. Patol. Med. Lab. 2006, 42, 345–350. [CrossRef]
22. ELnaggar, AS; El-Kelawy, MI Humīnskābes papildināšanas ietekme uz Sasso vistas produktivitāti, asins sastāvdaļām, imūnreakciju un liemeņa īpašībām. Ēģipte. J. Anim. Prod. 2018, 55, 75–84.
23. Sanmigels, PR; Rondón, BI Papildinājumi ar humusvielām ietekmē iedzimto imunitāti slāņu vistām badošanās fāzē. Rev. MVZ Córdoba 2016, 21, 5198–5210. [CrossRef]
24. Cetins, E.; Guclu, BK; Cetin, N. Uztura humāta un organisko skābju papildināšanas ietekme uz sociālo stresu, ko izraisa liels ganāmpulka blīvums dējējvistām. J. Anim. Veterinārs. Adv. 2011, 10, 2402–2407.
25. Salāhs, H.; Mansurs, E.; Reham, RR; Abd El Hamid, ES Pētījums par humīnskābes ietekmi uz augšanas veiktspēju, imunoloģisko, dažiem asins parametriem un zarnu Clostridium kontroli broileru cāļiem. Zag. Veterinārs. J. 2015, 43, 102–109. [CrossRef]
26. Kims, K.; Bē, I.; Čo, J.; Choi, Y.; Ha, J.; Choi, J. Humīnskābes un melleņu lapu pulvera papildināšanas barībā ietekme uz cūku ražīgumu, asins un gaļas kvalitāti. Food Sci. Anim. Resurss. 2019, 39, 276–285. [CrossRef] [PubMed]
27. Lala, AO; Okvelums, N.; Irekhore, OT; Ogunlade, BA; Adigun, AA; Elegbede, LA; Oyedeji, MM Broilercāļu hematoloģiskie un bioķīmiskie parametri, kas papildināti ar humīnskābi dzeramajā ūdenī. Appl. Trop. Lauksaimniecības. 2016, 21, 74–78.
28. Terratol, LLC Humīnskābes ietekme uz dzīvniekiem un cilvēkiem. Pieejams tiešsaistē: https://fulvic.info/wp-content/uploads/2019 /01/M-Terratrol_Article-1.pdf (apskatīts 2022. gada 10. augustā).
29. Dubeks, J.; Šlosārkova, S.; ˇRehákova, K.; Bouda, J.; Šērs, P.; Piperisova, I.; Tomenendālova, J.; Matalová, E. Pamata bioķīmisko un hematoloģisko atradumu interpretācija dzīvniekiem, 2. izd.; Noviko: Brno, Čehija, 2010; lpp. 102. (čehu valodā)
30. Krafts, V.; Dürr, UM Klinická Laboratorna Diagnostika vo Veterinárnej Medicíne, 1. izd.; Hajko & Hajková: Bratislava, Slovākija, 2001; 1.-380.lpp. (slovāku valodā)
31. Herciga, I.; Navrátilova, M.; Totušeks, J.; Suchý, P.; Vecereks, V.; Blahová, J.; Zralý, Z. Humīnskābes ietekme uz cinka uzkrāšanos vistu broilera audos. Čehs J. Anim. Sci. 2009, 54, 121–127. [CrossRef]
32. Šamudovska, A.; Demeterová, M. Ar dabīgiem humusa savienojumiem un nātrija humātu papildinātas diētas ietekme uz broileru cāļu veiktspēju un izvēlētajiem vielmaiņas mainīgajiem. Acta Vet. Brno 2010, 79, 385–393. [CrossRef]
33. Jad'uttová, I.; Marcinˇcáková, D.; Bartkovskis, M.; Semjons, B.; Harˇcarová, M.; Nagyová, A.; Váczi, P.; Marcinˇcák, S. Uztura humusvielu ietekme uz broileru cāļu nobarošanas spēju, liemeņu ražu, asins bioķīmijas parametriem un kaulu minerālvielu profilu. Acta Vet. Brno 2019, 88, 307–313. [CrossRef]
34. Rath, NC; Huff, MĒS; Huff, GR Humīnskābes ietekme uz broileru cāļiem. Poults. Sci. 2006, 85, 410–414. [CrossRef]
35. Sumida, S.; Tanaka, K.; Kitao, H.; Nakadomo, F. Vingrojumu izraisīta lipīdu peroksidācija un enzīmu noplūde pirms un pēc E vitamīna papildināšanas. Int. J. Biochem. 1989, 21, 835–838. [CrossRef]
36. Džan, AR; Pirzado, SA; Liu, GH; Čens, ZM; Chang, WH; Cai, HY; Breidens, WL; Zheng, AJ Uztura bagātināšana ar nātrija humātu uzlabo olu kvalitāti un dējējvistu imūno funkciju. J. Appl. Anim. Nutr. 2020, 8, 93–99. [CrossRef]






