Lanostāna triterpenoīdi Poria Cocos spēlē labvēlīgu lomu imūnregulācijas darbībā

Lūdzu sazinietiesoscar.xiao@wecistanche.comlai iegūtu vairāk informācijas

Abstract:Poria cocos (Schwein) FA Wolf (sin. Wolfiporia cocos) žāvēts sklerotijs, ko sauc par locīšanu, ir ēdama, saprofītiska sēne, ko parasti izmanto kā toniku un pretnovecošanās līdzekli tradicionālajā ķīniešu medicīnā. To tradicionāli lieto kopā ar citiem tradicionālajiem ķīniešu medikamentiem, lai uzlabotu imunitāti. Šis pētījums parādīja, ka P. cocos ekstraktam (Lipucan⑨), kas satur lanostāna triterpenoīdus, nav imūntoksicitātes un tas uzlabo nespecifisko (iedzimto) imunitāti, aktivizējot dabiskās killer šūnas un veicinot interferona (IFN-y) sekrēciju 1. tipa T-palīgs (Th1) šūnās. imūnā atbilde. Turklāt P. cocos ekstrakts ievērojami samazināja interleikīna (IL-4 un IL-5) sekrēciju ar 2. tipa T-helpera (Th2) šūnu imūnreakciju, kas ir saistīta ar alerģisko reakciju. Attīrītie lanostāna triterpenoīdi vispirms tika identificēti kā P. cocos aktīvās sastāvdaļas ar pastiprinātu nespecifisku imunitāti, veicinot interferona (IFN-) sekrēciju sākotnējā pētījumā. Mūsu atklājumi apstiprina, ka P. cocos ekstraktam ir labvēlīga loma imūnregulācijas aktivitātē.

Atslēgvārdi:Poria kokosi; lanostāna triterpenoīdi; imūntoksicitāte; Th1/Th2: imūnregulācija

1. Ievads

Vīrusu infekcijas, piemēram, elpceļu vīrusi (tostarp gripas vīruss, rinovīruss, adenovīruss un koronavīruss), herpes un cilvēka imūndeficīta vīruss (HIV) nopietni apdraud cilvēka veselību. Šie ļoti lipīgie elpceļu vīrusi inficē pasaules iedzīvotājus, kļūst par pandēmiju un izraisa daudz nāves gadījumu. Šie draudi ir kļuvuši par personas veselības problēmu, kā arī par starptautiskiem ekonomikas, drošības un sociālajiem jautājumiem [1]. Vakcinācija pašlaik ir galvenais līdzeklis gripas vīrusu infekciju izplatības ierobežošanai. Tomēr vīrusa bēdīgi slavenās mutācijas spējas dēļ katru gadu ir jāizstrādā jaunas vakcīnas. Steidzami jāizstrādā efektīvas pretvīrusu zāles vai terapeitiskas pieejas. Diemžēl, lai izstrādātu jaunas zāles, ir nepieciešami daudzi gadi un simtiem miljonu dolāru, bieži vien pārāk vēlu, lai cīnītos ar pēkšņu vīrusu epidēmiju. Jaunākie ziņojumi liecina, ka cilvēki, kas vecāki par 50 gadiem, galvenokārt ir inficēti ar elpceļu vīrusiem [2,3]. Novecošana ir viens no iemesliem, kas cieši saistīts ar imūnsistēmas, tostarp šūnu funkcijas un skaita, defektiem [4-6]. Pašaprūpe ir svarīga pieeja, ko izmanto lielākajā daļā valstu, lai samazinātu personīgos medicīniskos izdevumus un sociālās veselības aprūpes slogu |7,8]. Imunitātes pastiprinātāju izstrāde, lai palielinātu saimniekorganisma rezistenci pret vīrusu infekcijām un uzlabotu saimnieka pielāgošanās spēju, ir svarīga pieeja, kam pēdējā laikā ir pievērsta liela uzmanība [9,10].

Cilvēka ķermeņa pirmā aizsardzības līnija pret patogēniem ietver fizioloģiskas barjeras, piemēram, ādu, zemādas audus un gļotādu. Otrā aizsardzības līnija ir imūnsistēma, ko veido imūnsistēmas orgāni, imūnās šūnas un imūnmolekulas. Imūnsistēmu iedala iedzimtajā imunitātē un adaptīvajā imunitātē [11]. Iedzimtā imūnsistēma ir nespecifiska imūnsistēma. Tas var atšķirt sevi no sevis, bez atkārtotas saskares ar patogēniem, piemēram, baktērijām un vīrusiem. Tā nespecifisko īpašību dēļ tai ir plaša spēja cīnīties ar vairākām infekcijām [12]. Dabiskās slepkavas (NK) šūnas un interferons (IFN) ir iedzimtas imūnsistēmas galvenie pretvīrusu komponenti saimnieka aizsardzībā pret elpceļu vīrusu infekciju [13]. NK šūnas spēj ātri iznīcināt ar vīrusiem inficētas šūnas. Turklāt NK šūnas arī izraisa citas imūnās šūnas, 1. tipa T-helper (Th1) šūnas, atbrīvojot IFN-【14,15】. Interferoniem ir spēja traucēt vīrusu replikāciju, un tos var iedalīt trīs veidos, tostarp interferonos I (IFN-, IFN-). , II （IFN-y） un ⅢI （IFN-λ）【16,17】. Vīrusa replikācija ir svarīgs vīrusa dzīves pamatposms. Šūnām ir būtiska loma aizsardzībā pret vīrusu infekciju [18]. No otras puses. 2. tipa T-palīgs (Th2) šūnas galvenokārt izdala interleikīnus (IL), tostarp IL-4 un IL-5, un veicina B šūnu imūnglobulīna E(IgE) antivielu sekrēciju, lai veicinātu humorālo imunitāti un izraisīt alerģisku reakciju [19].

Lūdzu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

Vīlēšana (kaltētais Poria cocos (Schwein.) FAWolf (sin. Wolfiporia cocos) sklerotijs), plaši pazīstams toniks un pretnovecošanās tradicionālā ķīniešu medicīna, ir plaši izmantots kā nomierinošs un diurētisks līdzeklis vairāk nekā divus tūkstošus gadu. 20]. Ir pierādīts, ka P. cocos piemīt pretiekaisuma, pretaudzēju, antihiperglikēmiskas, sedatīvas un pretnovecošanās funkcijas ar lanostāna triterpenoīdiem, kas identificēti kā aktīvie komponenti [21-30]. Turklāt ir pierādīts, ka P. cocos etilacetāta frakcija un neapstrādāta polisaharīda frakcija uzlabo imunitāti dzīvnieku modeļos, pamatojoties uz seruma hemolīzes satura testu, mononukleāro makrofāgu fagocītisko iedarbību un limfocītu transformācijas līmeni. Saskaņā ar HPLC analīzi lanostāna triterpenoīdi tika uzskatīti par galvenajiem komponentiem etilacetāta frakcijā [31]. Tomēr joprojām nav skaidrs, vai iedzimta un adaptīvā imunitāte ietekmē NK šūnu aktivitāti, IFN, imūnās šūnas vai P.cocos citokīnus un aktīvo savienojumu noskaidrošanu. Šajā pētījumā tika pētīta P. cocos ekstraktu, patentēta lanostāna triterpenoīdu satura konsistences produkta, imūnsistēmas iedarbība, izmantojot dzīvnieku modeļus. Vispirms tika identificētas aktīvās sastāvdaļas.

Cistanche var novērst novecošanos

2. Materiāli un metodes

2.1.Augu materiāli

Žāvētais P. cocos (Schwein.) FAWolf selerocijs tika ekstrahēts, izmantojot 75% etanolu, lai iegūtu P. cocos ekstraktu (Lipucan). Šo ekstraktu ražo Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou Sinphar Group, Ķīna, un to izstrādā Sinphar R&D centrs Taivānā. Ekstrakts satur četrus galvenos lanostāna triterpenoīdus (1. attēls, savienojumi 1-4), kas analizēti, izmantojot ultra-efektivitātes šķidruma hromatogrāfiju (UPLC) [32]. Četru galveno lanostāna triterpenoīdu saturs bija 6,2 procenti. Lai izpētītu ietekmi uz imūnregulācijas aktivitāti, tika izmantota komerciāla kapsula (FL), kas satur 27.0 mg P. cocos ekstrakta.

2.2. Lanostāna triterpenoīdu izolēšana un attīrīšana no P. cocos

Žāvētu P.cocos (10 kg) ekstrahēja trīs reizes, 3 stundas karsējot ar 75% etanola [24]. Koncentrētais ekstrakts tika hromatografēts uz silikagela (70-230 acs), izmantojot arvien polārākus CH2Cl un MeOH maisījumus (CH2Cl:MeOH, 97:3; CH2Cl2:MeOH, 96:4; CH2Cl:MeOH, 90:10, un 100 procentu MeOH). Saskaņā ar plānslāņa hromatogrāfiju (TLC) tālākai atdalīšanai tika savāktas četras frakcijas (Fr.1-Fr.4). Fr.1-Fr.3 tika pakļauti preparatīvai augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfijai (HPLC) (Waters Prep 150 LCsystem, Milford, MA, ASV) uz Waters XBridge RP-18kolonnas (250 mm×). 19 mm, 5 um, Milforda, MA, ASV), izmantojot 80% metanola kā kustīgās fāzes sistēmu. Plūsmas ātrums bija 18 ml/min. Selektīvi tika savākti četri galvenie interešu maksimumi. Frakcijas, kas satur mērķsavienojumus, tika tālāk kondensētas sausumā un radīja tumurozskābi (1) (120,1 mg), polifonskābi C (2) (16,0 mg), 3-epi-dehidromulozskābi (3) (12,1 mg). , un attiecīgi dehidrotumulozīnskābe (4) (6,8 mg). To struktūras tika noskaidrotas ar KMR (kodolmagnētiskās rezonanses) spektroskopijas analīzi un elektroizsmidzināšanas jonizācijas masas spektrometru (ESI-MS) un salīdzinot ar literatūras datiem [32].

2.3. Iepriekšējais pētījums ar dzīvniekiem, izmantojot lanostāna triterpenoīdu savienojumus (1-3) IFN-r analīzes pētījumam

Šim pētījumam attīrīti lanostāna triterpenoīdu savienojumi, tostarp tumulozīnskābe (1), polifonskābe C (2) un 3-epidehidrotumulozskābe (3), tika sagatavoti sākotnējam pētījumam, izmantojot BALB/c (peļu celmu). albīnu pelēm) peļu tēviņi. Pēc 4 dienu perorālas savienojumu 1-3 un sterila destilēta ūdens (kontroles grupa) (1 ml/pelēm) ievadīšanas peles tika nogalinātas piektajā dienā un tika savāktas liesas šūnas. Svaiga liesa tika pārnesta uz kultivēšanas plati, kurā bija 10 ml Roswell Park Memorial Institute (RPMI){8}} barotnes. Pēc tam liesa tika samalta virs smalka sieta, lai atbrīvotu liesas šūnas. Barotnē suspendētās liesas šūnas pēc tam tika pārnestas uz 50 ml konisku centrifūgas mēģeni un centrifugētas ar ātrumu 1300 apgr./min 10 minūtes. Supernatants tika izmests un granula tika atkārtoti suspendēta 1 ml auksto sarkano asins šūnu (RBC) lizējošā buferšķīduma, kas satur EDTA-NH4Cl. Šūnas inkubēja istabas temperatūrā 10 minūtes un pēc tam trīs reizes mazgāja ar barotni, centrifugējot. Pēc tam liesas šūnu suspensija tika kultivēta 24-iedobes plāksnē ar blīvumu 1 × 10 grādu šūnas/ml barotnē, kas satur RPMl 1640, kas papildināta ar 10 procentiem liellopu augļa seruma (FBS), 2 mM L-glutamīna, antibiotikas un 1 ug/ml concanavalin A (ConA) 37 grādu temperatūrā 3 dienas. Tika savākti kultūras liesas šūnu supernatanti. IFN koncentrācijas tika mērītas, izmantojot ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu (ELISA) komplektu (R&D Systems, Mineapolisa, MN, ASV).

2.4.Dzīvnieku modelis un eksperimentu grafiks

BALB/c peļu mātītes tika iegādātas no Taivānas Nacionālās universitātes dzīvnieku centra. Dzīvnieki ir izmitināti atsevišķi vēdināmos būros, kuros nav specifisku patogēnu 22 ± 2 grādu temperatūrā, ar temperatūru un mitrumu 40-60 procentiem ar 12 h/12 ​​h gaismas/tumsas ciklu un brīvu piekļuvi pārtikai un ūdenim. Pēc vienas nedēļas aklimatizācijas peles tika nejauši sagrupētas pēc ķermeņa svara un izmantotas eksperimentiem. Četras dažādas devas, 26 mg/kg (FL200), 52 mg/kg (FL400), 104 mg/kg (FL800), 156 mg/kg (FL1200), tika attiecīgi izšķīdinātas sterilā destilētā. ūdens (0,4 ml) un iekšķīgi piecas dienas pēc kārtas nedēļā 9 nedēļas. Kontroles grupa tika barota ar sterilu destilētu ūdeni (0, 4 ml). Trešajā, piektajā un septītajā nedēļā pelēm intraperitoneāli injicēja ovalbumīnam (OVA) specifisku antigēnu. OVA ir vistas olu baltuma alergēns, kas galvenokārt atrodams olu baltumos. To parasti izmanto, lai izraisītu alerģiju eksperimentālos dzīvnieku modeļos. Liesas šūnas tika savāktas turpmākai izpētei. Pēc 9 nedēļu eksperimentiem peles tika nogalinātas, izmantojot oglekļa dioksīda eitanāziju. Institucionālās dzīvnieku aprūpes un lietošanas komitejas (IACUC) apstiprinājuma numurs šim pētījumam ir A9647.

2.5. Liesas paraugu kolekcija

Tika savākta liesa, tumši sarkans iegarens orgāns peles vēdera augšējā kreisajā pusē. Pēc tam, kad saistaudi tika rūpīgi noņemti, izmantojot mazas šķēres un knaibles, liesas tika ievietotas šūnu barotnē (RPMI 1640 barotne ar 10 procentiem liellopu augļa seruma (HyClone)). Pēc svēršanas liesas paraugi tika samalti, izmantojot tīru un sterilu 5 ml šļirces stūmēju. Liesas šūnu suspensija tika aspirēta jaunā 15 ml centrifūgas mēģenē ar 3 ml sterilu viena iepakojuma plastmasas pilinātāju. Suspendētās šūnas tika savāktas pēc 5 minūšu nokrišņiem. Suspendētās šūnas centrifugēja ar ātrumu 1500 apgr./min 7 minūtes, un supernatants tika izmests, lai iegūtu šūnu paletes. Pēc tam tika pievienots 1 ml RBC līzes buferšķīdums, lai 1 minūti noņemtu sarkanās asins šūnas. Kultivēšanas barotnei ātri pievienoja deviņus ml 10% liellopu augļa seruma, atkārtoja centrifugēšanas soli, un supernatants tika izmests. Lai izvairītos no liesas šūnu integritātes bojājumiem RBClīzes bufera dēļ, paraugu trīs reizes mazgāja ar Hanka līdzsvarotā sāls šķīduma (HBSS) buferšķīdumu. Pēc tam liesas šūnas tika suspendētas ar 10% liellopu augļa seruma barotni analīzei un eksperimentiem.

2.6. Nespecifiskā imūnā atbilde

2.6.1.Liesas šūnu virsmas marķiera analīze

Imūno šūnu analīze tika veikta, izmantojot fluorescējošas monoklonālas antivielas, kas īpaši saistās ar dažāda veida imūnsistēmām, izmantojot fluorescējošu plūsmas citometru. Plūsmas citometrija (Epics XL-MCL Beckman Coulter, Brea, CA, ASV) tiek izmantota, lai aprēķinātu noteiktas imūnās šūnas, piemēram, galveno I tipa histokompatibilitātes kompleksu (MHC I), CD4 plus T šūnu, CD8 plus T šūnu, proporciju. NK šūnas un makrofāgi.

2.6.2. Dabisko killer šūnu aktivitātes analīze

YAC{0}} (šūnu līnija, kas ir jutīga pret NK šūnu aktivitāti) peles limfomas šūnu līnija (ATCC) tika izmantota kā NK šūnu mērķis šajā eksperimentā. Kad BALB/c mātīšu peļu liesas šūnas tika kultivētas kopā ar YAC-1 šūnām vienā traukā, dabiskās slepkavas šūnas iznīcinās YAC-1 šūnas. Pēc 3 h citotoksicitātes reakcijas nogalinātās YAC-1 šūnas tika iekrāsotas ar krāsvielu (LIVE/DEAD Cell-Mediated Cytotoxicity Kit, Molecular Probes, L-7010). Tāpēc plūsmas citometrija tika izmantota, lai noteiktu un analizētu fluorescences intensitāti, izmantojot WinMDI 2.8 programmatūru (Purdue University Cytometry Laboratories, West Lafayette, IN, ASV). Efektoršūnas (E) un mērķa šūnas (T) attiecība ir 100:1 un 200:1 (Efektoršūna ir liesas šūnas un mērķa šūna ir YAC-1 šūnas).

2.6.3. Citokīnu sekrēcija, izmantojot liesas šūnu analīzi

Pēc liesas šūnu stimulēšanas ar ConA (koncentrācija 2,5 ug/mL) 48 stundas, šūnu kultūras supernatants tika savākts un uzglabāts -20 pakāpē citokīnu analīzei, izmantojot OptEIA peles IL-5 ELISA komplektu. Pharmigen, 555236, Franklin Lake, NJ, ASV) un DouSet peles IFN-ELISA komplektu (R&D Systems, DY485, Mineapolis, MN, ASV). Pārklājuma buferšķīdums (pH: 9,6) tika sagatavots, lai saturētu atbilstošu anti-peļu citokīnu antivielu (L-5 un IFN-y) daudzumu uz 96-iedobes plāksnes (Nunc-Immuno plate, MaxiSorp, Thermo). Zinātniskā, Roskilde, Dānija). Pēc stāvēšanas 4C nakti, nesaistītās antivielas tika izskalotas ar fosfātu buferšķīdumu ar Tween20 (PBST) buferšķīdumu, un pēc tam tika pievienots 200 μL uz iedobi bloķējošā bufera (1% BSA PBS). Pēc 2 stundām istabas temperatūrā paraugu noskaloja ar PBST buferšķīdumu un paraugam pievienoja 100 μL uz iedobi šūnu kultūras supernatanta vai rekombinantā citokīna standarta. Pēc 4 grādiem uz nakti paraugs tika izskalots ar PBST buferšķīdumu. Pēc tam tika pievienota atbilstošā saistītā biotīna (biotīna) anti-citokīnu sekundārā antiviela (100 uL/iedobē). Pēc 2 stundām istabas temperatūrā paraugu izskaloja ar PBST buferšķīdumu. Pēc tam tika pievienota avidīna peroksidāze (100 μl/iedobē) (Sigma, Sentluisa, MO, ASV). Pēc 1 stundas istabas temperatūrā pievienoja tetrametilbenzidīna (TMB) (R&D Systems, Mineapolisa, MN, ASV) substrātu 5 minūtes krāsas reakcijai un pēc tam pievienoja 50 μL 2,5% H2SO4, lai apturētu krāsas reakciju. Absorbcija tika mērīta pie 450 nm.

2.7. Ovalbumīna (OVA) izraisītu peļu specifiskā imūnreakcija

BALB/c peļu mātītēm intraperitoneāli injicēja ar OVA kā antigēnu un CFA (Complete Freunda Adjuvant) kā adjuvantu. Liesas šūnu kultūras apstākļi bija tādi paši kā iepriekš. Citokīni (L-4) tika analizēti ar ELISA metodi.

2.8.Statistikas analīzes

Dati tika ziņoti kā vidējie (SD) un analizēti, izmantojot vienvirziena ANOVA. Vērtības tika uzskatītas par statistiski nozīmīgām p<0.05. dunnett's="" test="" was="" used="" to="" identify="" the="" differences="" between="">

3. Rezultāti

3.1. Četru P.cocos lanostāna triterpenoīdu savienojumu 1-4 izolēšana un identifikācija

Žāvētais P.Pretnovecošanās cistanchekokosu (10 kg) trīs reizes ekstrahēja, 3 stundas karsējot ar 75% etanolu. Koncentrētais ekstrakts tika hromatografēts uz silikagela un C18 kolonnas, lai iegūtu četrus galvenos lanostāna triterpenoīdu savienojumus: tumurozskābi (1), polifonskābi C (2), 3-epi-dehidrotumulosskābi (3) un dehidrotumulosskābi (4). ), attiecīgi (1. attēls). To struktūras tika noskaidrotas ar KMR spektroskopiju (S1 tabula) un ESI-MS analīzi (S2, S4, S6 un S8 attēli) un salīdzinājumu ar literatūras datiem [32,33]. 1-4 UPLC hromatogrammas ir parādītas S1, S3, S5 un S7 attēlā.

3.2. Sākotnējais pētījums par BALB/c peļu tēviņiem ar Lanostane Triterpenoid Compounds 1-3

Liesas šūnas, kas izolētas no pelēm, kas apstrādātas ar lanostāna triterpenoīdu savienojumiem (1-3), tika kultivētas piecas dienas vienas klātbūtnē. Tika izmērīts IFN-y daudzums, ko izdala liesas T limfocīti. Pēc tam, kad peles tika barotas ar 2,5 mg/kg/dienā vai lielāku savienojuma devu 1,5 un 10 mg/kg/dienā no 2, un attiecīgi 20 mg/kg/dienā no 3, ConA izdalītais IFN-y. -stimulētās liesas T šūnas tika ievērojami palielinātas (1. un 2. tabula). Sākotnējais pētījums liecina, ka lanostāns 1-3 palielināja IFN-y sekrēciju liesas šūnās, ko stimulē ConA.

3.3. P. cocos ekstrakta drošuma novērtējums no pētījumiem ar dzīvniekiem

3. un 4. tabulā norādīts, ka P. cocos ekstrakts neietekmēja ķermeņa svaru un liesas svaru.cistanche benefícios5. tabulā arī parādīts, ka imūnšūnām, piemēram, kopējām T šūnām, kopējām B šūnām, MHC II (II tipa galvenais histokompatibilitātes komplekss, CD4 plus T šūnas, CD8 plus T šūnas, NK šūnas un makrofāgi P. cocos ekstrakta grupā). nav būtisku atšķirību salīdzinājumā ar kontroles grupu Pamatojoties uz iepriekš minētajiem rezultātiem, jānovērtē, ka P. cocos ekstrakta barošanas eksperimenta laikā nedrīkst būt imūntoksicitātes risks.

3.4. Nespecifisks imūnās atbildes novērtējums

Dabas killer šūnām (NK šūnām) ir galvenā loma nespecifiskajā imunitātē. 6. tabulā parādīts, ka FL400 grupa ievērojami palielināja NK šūnu aktivitāti, salīdzinot ar FL200 grupu. Tā ir P.cocos ekstrakta NK šūnu aktivitātes pastiprinātas iedarbības tendence. Citokīni ir ķīmiskas vielas, tostarp interleikīni (IL) un interferons (IFN), kas regulē imūnreakciju vai šūnu augšanu 【34】. Mēs analizējām IFN (Th1 imūnās atbildes reakcijas) ConA un LPS izraisīto liesas šūnu koncentrāciju un IL-5 (Th2 imūnās atbildes reakcijas) koncentrāciju ConA inducētajās liesas šūnās, kas izolētas no pelēm, kas apstrādātas ar FL200, FL400, FL800, un FL1200 (7. un 8. tabula). FL800 un FL1200 grupas ievērojami stimulēja IFN-y veidošanos peles liesas šūnās ConA klātbūtnē (7. tabula). 7. tabulā arī parādīts, ka IL-5 peles liesas šūnu koncentrācijai, kas izolēta no pelēm, kas ārstētas ar FL200, FL400, FL800 un FL1200, bija ievērojami samazināta iedarbība atkarībā no devas. Turklāt FL400, FL800 un FL1200 grupas arī ievērojami stimulēja IFN veidošanos peļu liesas šūnās LPS klātbūtnē (8. tabula).

4. Diskusija

Cilvēka imūnsistēma ir atbildīga par cīņu pret svešiem patogēniem, lai aizsargātu veselību.puritāni c vitamīnsNepietiekama imunitāte parasti padara organismu uzņēmīgu pret infekcijām un tāpēc tai ir nepieciešama pietiekama imunitāte, taču tai ir nepieciešami arī stingri regulējoši mehānismi, lai izvairītos no pārmērīgiem blakus bojājumiem. Imūnsistēmas līdzsvara uzturēšana ir vissvarīgākais imūnsistēmas uzdevums[35]. Daudzi pierādījumi liecina, ka imūnsistēmas līdzsvars ir cieši saistīts ar Th1/Th2 šūnu reakciju36,37]. Stress un novecošana var izraisīt Th1/Th2 līdzsvara zaudēšanu un noslieci uz Th2, kas var izraisīt infekcijas un alerģiskas slimības [38-40]. Šie efektīvas līdzsvara imunitātes meklējumi ir steidzami nepieciešami. Turklāt ir gandarījums, ka zināšanas, kas iegūtas gadu desmitiem uzkrātos zinātniskos pētījumos par cilvēka imūnsistēmu un tās reakciju uz infekcijas slimībām, palīdz sniegt informāciju par terapeitisko izpēti un attīstību, kā arī tām ir profilaktiskas stratēģijas vīrusu uzliesmojumu izplatībai [41] , A42]. Daudzi iepriekšējie pētījumi par P. cocos farmakoloģisko izpēti ir vērsti uz P. cocos proteīnu [43,44] vai polisaharīdiem [45,46]. Ir vairāki pētījumi par P. cocos lanostāna triterpenoīdu efektivitāti, piemēram, hipoglikēmija [25], pretvēža līdzekļi [24] un sedatīvā funkcija [28].kas ir cistancheIepriekšējie pētījumi ir parādījuši, ka P. cocos etilacetāta frakcija satur galveno komponentu triterpenoīdus un tai ir imunitāti uzlabojoša iedarbība31. Tomēr nav publicēti turpmāki padziļināti pētījumi. Mūsu pētījumā tika novērtēta P. cocos imunitātes funkcija vispāratzītā peļu modelī, ieskaitot attīrīta lanostāna triterpenoīda savienojuma sākotnējo skrīninga pētījumu. Šajā pētījumā mēs parādījām, ka P.cocos ekstraktam (Lipucan), kas satur 6,2 procentus no četriem lanostāna triterpenoīdiem, ir daudz labvēlīga loma imūnregulācijas darbībā.

Iepriekšējā izmeklēšanā tika ziņots, ka cilvēka CD4 plus T-palīgs (Th) šūnas, tostarp Th1 un Th2 apakšgrupas, nosaka to izdalītie citokīni [36]. Th1 šūnas galvenokārt izdala IFN-; Th2 šūnas ražo IL-4, IL-5, inducē antivielu veidošanos un izraisa alerģiskas reakcijas, palielinot B šūnu IgE ražošanu un veicinot tuklo šūnu augšanu un eozinofilu diferenciāciju. Ir labi zināms, ka NK šūnām un IFN ir svarīga loma imūnās aizsardzībā pret vīrusu infekcijām. Iedzimtā imūnsistēma ir ļoti svarīga, lai aizsargātos pret vīrusiem, kas sākotnēji iebruka organismā, un aktivizētu turpmāko adaptīvo imunitāti. NK šūnas tiek klasificētas kā nespecifiska (iedzimta) imunitāte, kas ir atbildīga par vīrusu inficēto šūnu nogalināšanu【14】. IFN inhibē vīrusa dzīves ciklu un novērš vīrusa replikāciju. IFN arī regulē imūnreakciju, aktivizējot nespecifisku šūnu mediētu imunitāti un stimulējot specifisku imunitāti [17]. Pamatojoties uz sākotnējo pētījumu ar dzīvniekiem, galvenie P. cocos ekstrakta lanostāna triterpenoīdu savienojumi, tumulozīnskābe (1), polifonskābe C (2) un 3-epi-dehidrotumulozīnskābe (3) būtiski stimulē IFN sekrēciju. ar liesas šūnām. Aktīvā Poria kokosa ekstrakta komponenta apstiprinājums šajā provizoriskajā pētījumā būs ļoti svarīgs produkta kvalitātes kontrolei un turpmākiem biopieejamības un mehānismu pētījumiem. Turklāt šajā pētījumā mēs parādījām, ka P. cocos ekstrakts būtiski stimulē NK šūnu aktivitāti un IFN sekrēciju bez imūntoksiskām īpašībām. Šie rezultāti parādīja P. cocos ekstrakta un galveno lanostāna triterpenoīdu 1-3 nozīmīgo stimulējošo ietekmi uz imūnreakciju.

Turklāt mūsu atklājumi liecināja, ka P. cocos ekstrakts nomāca Th2 imūnreakciju ar ievērojamu IL-5 inhibīciju (7. tabula) nespecifiskā imūnās atbildes modelī un nozīmīgu IL-4 (9. tabula) inhibīciju. OVA izraisītā specifiskā imūnās atbildes modelī. IL-4 un IL-5 izraisītu alerģisku reakciju.sistancheAlerģijas, ko sauc arī par alerģiskām slimībām, izraisa imūnsistēmas paaugstināta jutība pret apkārtējā vidē esošām vielām, piemēram, alerģisko astmu. Pacienta imūnās atbildes reakcija ir tendence uz Th2. Ja Th1/Th2 organismā var būt līdzsvarots, tam vajadzētu uzlabot alerģijas simptomus. Šis pētījums pierādīja, ka P. cocos ekstrakts var regulēt Th1/Th2 imūnreakciju, var samazināt alerģisko slimību rašanos, un to var attīstīt par potenciālu pretalerģiskas slimības kandidātu.

5. Secinājumi

Šis pētījums ir pirmais, kas demonstrē nespecifisko un specifisko imunitātes regulēšanu P. cocos ekstrakta iedarbībai, kas satur lanostāna triterpenoīdus pelēm. Šīs imūnās atbildes ietver NK šūnu aktivāciju, palielinātu IFN sekrēciju un samazinātu IL-4 un IL-5. Mūsu atklājumi apstiprina, ka P. cocos ekstrakts bez imūntoksicitātes, kas pievienots diētai vai lietots atsevišķi, spēlēs labvēlīgu imūnregulācijas lomu imūndeficīta uzlabošanā un spēju novērst infekcijas un alerģijas reakcijas uzlabošanā. Šis ir pirmais apstiprinājums tam, ka lanostāna triterpenoīdi ir efektīvas sastāvdaļas un tos var izmantot kā kvalitātes kontroles sastāvdaļas, lai saglabātu P. cocos ekstrakta efektivitātes konsistenci.

Šis raksts ir izvilkts no Life 2021, 11, 111. https://doi.org/10.3390/life11020111 https://www.mdpi.com/journal/life