Pētersīļu polifenolu un to antioksidantu spējas palīdzēt depresijas un trauksmes ārstēšanā: in vivo subakūts pētījums

Lai iegūtu vairāk informācijas. kontaktpersonatina.xiang@wecistanche.com

Abstrakts: Depresija un trauksme ir galvenās garīgās veselības problēmas visās pasaules daļās. Šīs slimības ir saistītas ar vairākiem riska faktoriem, tostarp oksidatīvo stresu. Ķīmiska rakstura psihotropās zāles ir pierādījušas vairākas blakusparādības, kas paaugstināja šo slimību ietekmi. Saskaroties ar šo situāciju, dabiski produkti šķiet daudzsološa alternatīva. Šī pētījuma mērķis bija novērtēt Petroselinum sativum anksiolītisko un antidepresīvo iedarbību.polifenoliin vivo, kā arī tā korelējaantioksidants īpašības in vitro.Anksiolītisks līdzeklisekstrakta aktivitāte (50 un 100 mg/kg) tika novērtēta, izmantojot atklātā lauka un gaismas-tumsas kameras testus, savukārt antidepresantu aktivitāte tika novērtēta, izmantojot piespiedu peldēšanas testu. Ekstrakta antioksidanta aktivitāte tika novērtēta ar 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil(DPPH) brīvo radikāļu testu un FRAP (dzelzs samazināšanas spējas) testu. Fenola ekstraktam bija ļoti spēcīga anksiolītiska un antidepresantiem līdzīga iedarbība, īpaši 100 mg/kg devā, samazinot depresīvo uzvedību pelēm (samazināts nekustīguma laiks) un arī anksiolītisko uzvedību (tendenci atklāt centrā un apgaismotās vietās). ) pat labāk nekā paroksetīns un bromazepāms (klasiskās zāles), vienlaikus ar šiem rezultātiem ekstraktam bija arī nozīmīga antioksidanta spēja. Šie provizoriskie rezultāti liecina, ka Petroselinum satioum piemīt anksiolītisks un antidepresants, ko var izmantot kā papildinājumu vai neatkarīgu fitomedicīnu depresijas un trauksmes ārstēšanai.

Atslēgvārdi: Petroselinum sativum; polifenols; anksiolītisks līdzeklis; antidepresantiem līdzīgs; antioksidants; farmakoloģija; augu izcelsmes zāles; dabīgiem produktiem

1. Ievads

Depresija un trauksmes traucējumi jau sen tiek uzskatīti par garīgās veselības problēmām, un tie ir smags slogs jebkurai sabiedrībai, kurā stress ir visuresošs. Pasaules Veselības organizācija (PVO) prognozē, ka līdz 2030. gadam depresija kā potenciāli letāla slimība būs otrais galvenais invaliditātes cēlonis visā pasaulē [1]. Saskaņā ar jaunākajām PVO aplēsēm vairāk nekā 300 miljoni cilvēku visā pasaulē cieš no depresijas, no kuriem vairāk nekā 260 miljoniem ir arī trauksmes traucējumi [2].

Psihisko traucējumu diagnostikas un statistikas rokasgrāmata (DSM-V) definēja, ka smagas depresijas traucējumi ir ne tikai gadījuma rakstura skumjas vai depresijas lēkme, bet gan nomākts garastāvoklis vai intereses vai baudas zudums vismaz divas nedēļas pēc kārtas, kuru epizodes ir bieži atkārtojas [3]. PVO arī definē depresiju kā "dažādus psiholoģiskus un bioloģiskus simptomus, piemēram, vispārēju skumju sajūtu, baudas un intereses zudumu, vainas sajūtu, miega traucējumus (bezmiegs vai miegainību) un apetīti, noguruma sajūtu (psihomotora atpalicība). ), un koncentrēšanās trūkums".Smagākajos gadījumos depresija var izraisīt pat pašnāvību [4].

Trauksme, kā definējusi PVO, ir "nenoteiktu nenovēršamu briesmu sajūta, ko pavada savārgums, uzbudinājums, bezpalīdzība vai pat iznīcība". To var raksturot arī kā paredzamu baiļu stāvokli, ko izraisa potenciālas un nenoteiktas briesmas, lai gan to cēlonis ne vienmēr ir apzināts, pretstatā bailēm, kas rodas, saskaroties ar reālām briesmām. Tomēr šīm divām emocijām ir raksturīgas līdzīgas fizioloģiskas (paaugstināts asinsspiediens, svīšana, tahikardija u.c.) un uzvedības (paaugstināta modrība un izvairīšanās) reakcijas [5].

Depresiju un trauksmi parasti ārstē ar psihotropiem medikamentiem, tostarp antidepresantiem unanksiolītiskie līdzekļi(trankvilizatori), bieži ķīmiski, piemēram, paroksetīns un benzodiazepīni. Tomēr šo medikamentu lietošanai ir noteikti ierobežojumi, un tie var izraisīt nevēlamas blakusparādības. Bromazepāms ir paredzēts trauksmes ārstēšanai. Tomēr tā patēriņam ir vairākas negatīvas blakusparādības, tostarp miegainība, sedācija un atmiņas zudums [6]. Miega grūtības, apetītes zudums, miegainība un seksuāla disfunkcija ir arī tipiskas blakusparādības paroksetīnam, antidepresantam no serotonīna atpakaļsaistes inhibitoru (SSAI) saimes, ko lieto smagu depresijas traucējumu ārstēšanai [7]. Šīs ierobežotās efektivitātes rezultātā tiek augstu novērtēta jaunu, efektīvāku un netoksisku terapeitisku līdzekļu izpēte.

Ārstniecības augi var būt adekvāts jaunu, drošu un efektīvu ārstniecības līdzekļu avots, jo īpaši tāpēc, ka daudziem ir zināms, ka tiem ir mazāk blakusparādību [8]. Iepriekš minētajos traucējumos ir pārbaudīti vairāki ārstniecības augi, un tie deva ļoti patīkamus rezultātus, kas mudināja turpināt pētījumus, lai atklātu papildu augu antidepresantiem līdzīgās un anksiolītiskās īpašības [9].

Petroselinum satioum Hoffm., plaši pazīstams kā "pētersīļi" ("maadnous" arābu valodā), ir Apiaceae ģimenes loceklis. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm un Petroselinum crispum (Mill) Fuss. ir arī sinonīmi vārdam Petroselinum sativum Hoffm.[10. Pētersīļi kā kulinārijas augs, kura izcelsme ir Vidusjūras reģionā, mūsdienās ir kļuvuši par plaši izplatītu garšaugu [11]. P. sativum piemīt virkne labvēlīgu īpašību, tostarpantioksidants, pretsāpju, spazmolītiska, pretdiabēta, imūnmodulējoša un kuņģa-zarnu trakta iedarbība [12]. Šīs dažādās priekšrocības var saistīt ar auga galvenajām sastāvdaļām, piemēram, polifenoliem (apigenīnu, kvercetīnu, luteolīnu un kaempferolu), vitamīniem, karotinoīdiem, kumarīnu un tanīniem [13]. Apiaceae ģimene ietver vairākus augus, kas pazīstami ar savu antidepresantu un anksiolītisko darbību, piemēram, Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] koncentrācijai no 50 līdz 200 mg/kg.

Šajā pētījumā pētersīļu iespējamās antidepresantiem līdzīgās un anksiolītiskās aktivitātespolifenolitika novērtēti pirmo reizi, kopā ar toantioksidanta aktivitāte, lai noteiktu, vai pastāv korelācija.

2. Rezultāti

2.1. Antioksidantu aktivitātes novērtējums

2.1.1.DPPH pārbaude

1. attēlā parādīts antioksidantu aktivitātes procents atkarībā no dažādiem PSPE un BHT līmeņiem. Iegūtie rezultāti atklāj, ka mūsu ekstraktam un BHT ir no koncentrācijas atkarīga antiradikāla aktivitāte. Tas nozīmē, ka DPPH radikāļu inhibīcijas procentuālais daudzums palielinās līdz ar P. sativum un BHT fenola ekstrakta koncentrāciju. BHIT uzrādīja visaugstāko aktivitāti salīdzinājumā ar mūsu ekstraktu. Attiecībā uz 0,5 ug/mL BHT sasniedza maksimālo inhibīcijas procentuālo daudzumu 90 procentu apmērā, kas palika nemainīgs 1 ug/ml koncentrācijai. Tajā pašā koncentrācijā fenola ekstrakts izraisīja maksimālo inhibīciju 58 procentu apmērā

Sintētiskais antioksidants BHT uzrādīja ļoti spēcīgu pretradikālu aktivitāti ar IC50 aptuveni 0,024 ug/mL, kas ir augstāks nekā reģistrēts P sativum fenola ekstraktam (apmēram 0,184 ug/mL). .

2.1.2.FRAP tests

2. attēlā parādītas optiskā blīvuma (OD) izmaiņas atkarībā no dažādām PSPE un BHT (pozitīvās kontroles) koncentrācijām. Var redzēt, ka samazinājuma procenti ir proporcionāli gan ekstrakta, gan BHT koncentrācijai. Pēdējais uzrādīja lielāku samazinājuma procentu, salīdzinot ar ekstraktu.

Lai salīdzinātu P.sativoum (PSPE) polifenola frakcijas efektivitāti ar BHT, mēs noteicām koncentrāciju, kas samazināja par 50 procentiem no FRAP (IC50).

BHT (sintētiskais antioksidants BHT) uzrādīja ļoti spēcīgu antioksidantu aktivitāti ar IC50 aptuveni 0,09 ug/ml, kas ir augstāka nekā P. sativum fenola ekstraktam (apmēram 0,38 ug/ml). ）.

2.2. Antidepresantu aktivitātes piespiedu peldēšanas testa novērtējums

Piespiedu peldēšanas testa dīkstāves atšķirības trīs eksperimenta nedēļu laikā ir parādītas 3. attēlā. Nekustīguma laiks testa laikā bija ievērojami īsāks pelēm, kas ārstētas ar PSPE (PSPE 50 mg/kg (34 s±3,286), PSPE 100 mg/kg (33,8 s± 2,653)), salīdzinot ar kontrolēm (paroksetīns (100,8 s±6,837), transportlīdzeklis (176 s± 6,550).

Šie rezultāti liecina, ka P. sativum fenola ekstrakta antidepresanta iedarbība ir lielāka nekā paroksetīnam.

2.3. Anksiolītiskās aktivitātes novērtējums

2.3.1. Nemierīga uzvedība atklātā laukā

4. attēlā parādītas atšķirības laikā, kas pavadīts atklātā lauka testa centrā trīs nedēļu ilgas ekstrakta apstrādes laikā. Var redzēt, ka peles, kas tika ārstētas ar PSPE (50 un 100 mg/kg), centrālajā zonā pavadīja vairāk laika, salīdzinot ar kontroles grupām. Šis ievērojamais pieaugums ir proporcionāls ne tikai ārstēšanas ilgumam, bet arī ekstrakta koncentrācijai. Optimālā vērtība tika iegūta ar koncentrāciju 100 mg/kg (37,4 s± 1,778, salīdzinot ar 33,4 s± 1,208, lietojot 50 mg/kg devu). Tas norāda uz ananksiolītisksšī auga ietekme.

Trīs nedēļu eksperimenta laikā šķērsoto flīžu skaita atšķirības ir parādītas 5. attēlā. Analīze parādīja ievērojamu to dakstiņu skaita pieaugumu, ko šķērsojušas ar PSPE apstrādātas peles (50 mg/kg (161,2±5,490), 100 mg/kg). kg (173±10,104)), salīdzinot ar bromazepāma 1 mg/kg (115,8± 1,393) un nesēju (147,4±1,568) grupām. Šie rezultāti liecina par lielāku FPPS anksiolītisko efektu pat nekā bromazepāmam ar 1 mg/kg.

2.3.2. Satraukta uzvedība gaišajā-tumsā

6. attēlā parādīti izgaismotajā kamerā pavadītā laika izmaiņu rezultāti pētījuma periodā. Rezultāti liecina, ka pelēm, kas ārstētas ar PSPE, laika gaitā pakāpeniski palielinās apgaismotajā kamerā pavadītais laiks. Šis pieaugums ir īpaši pamanāms 21. dienā. Šajā testā ar bromazepāmu un PSPE ārstētās peles pavadīja ievērojami vairāk laika apgaismotā nodalījumā (bromazepāms 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50 mg/kg (199,6 s± 1,068). 6,838), PSPE 100 mg/kg (213,6s±9,331), salīdzinot ar kontroles pelēm (nesējs (75,8s±4,352)). Tas tika uzskatīts par pierādījumu P. sativum polifenola ekstrakta anksiolītiskajai iedarbībai.

7. attēlā parādītas pāreju skaita izmaiņas starp gaišo un tumšo kameru šī testa laikā. 21 dienas laikā tika konstatēta ievērojama atšķirība starp pelēm, kas ārstētas ar PSPE (50 mg/kg (16±{{10}}.548), 100 mg/ kg (12,4±0,510)) un kontroles peles (nesējs (10±0,837), bromazepāms 1 mg/kg (12±0,949). Šie rezultāti atbilst rezultātiem, kas iegūti par laiku, kas pavadīts apgaismotā kamerā, jo šie divi parametri ir apgriezti proporcionāls pelēm parādītajam trauksmes līmenim.

3. Diskusija

Šajā pētījumā mēs parādījām, ka P. satioum fenola ekstraktam ir antioksidanta aktivitāte in vitro un anksiolītiska un antidepresīva iedarbība in vivo.

Dažos pētījumos ir konstatēts, ka ferulīnskābei un kanēļskābei ir antidepresīva iedarbība [17,18], savukārt kvercetīns un hidroksitirozols uzrādīja apstiprinātu anksiolītisku efektu [19,20]. Šie savienojumi varētu būt aiz novērotā efekta.

Antioksidanta efektivitāte var izpausties dažādos veidos, piemēram, brīvo radikāļu iznīcināšanā, brīvo radikāļu sadalīšanā, kā arī metālu jonu helātu veidošanā [17]. Šo aktivitāti var novērtēt ar FRAP un DPPH testiem, no kuriem pēdējo tā ātruma dēļ bieži izmanto augu ekstraktos esošo molekulu skrīningam [18]. Mūsu rezultāti parādīja antioksidantu aktivitāti pētersīļu fenola ekstraktā. Iepriekšējais Hinneburg et al[21] darbs parādīja, ka pētersīļu ūdens ekstraktam ir vāja DPPH radikāļu inhibējošā aktivitāte ar IC50 aptuveni 12.0±{{8} },10 mg/mL (salīdzinājumā ar polifenola ekstraktu mūsu pētījumā, 0,184 ug/ml). Un otrādi, šī ekstrakta helātu veidojošais efekts bija efektīvāks salīdzinājumā ar citiem tajā pašā pētījumā izmantotajiem ekstraktiem.

Jaunākie pētījumi arī atklāja saikni starp garastāvokļa traucējumiem un oksidatīvo stresu [22, 23] un psiholoģisko stresu [24, 25], tādējādi paverot jaunas iespējas trauksmes un depresijas novēršanai un/vai pārvaldībai saistībā ar iespējamo antioksidantu lietošanu. Desrumaux et al. [26] pamanīja, ka E vitamīna deficīts peļu smadzenēs paaugstināja oksidatīvā stresa un trauksmi izraisošas uzvedības galveno pazīmju līmeni. Tāpat peles, kurām tika dots C vitamīns, nesen atklāja, ka šim savienojumam ir antidepresanta loma, pamatojoties uz astes suspensijas testa rezultātiem [27]. Polifenoli, tostarp flavonoīdi un fenolskābes, ir labi pazīstami ar savu spēcīgo antioksidantu iedarbību [28, 29]. Šo sekundāro fitoķīmisko metabolītu izmantošana kā veids, kā izvairīties no trauksmes un depresijas un pārvaldīt tos, var būt daudzsološa stratēģija [9]. Pētījums, ko veica Akinci et al. [30] pierādīja, ka pētersīļi veiksmīgi samazina stresa izraisītos kuņģa bojājumus, ja tos lieto iekšķīgi, atbalstot šūnu antioksidantu aizsardzības sistēmu, kas atspoguļojas vidējā audu glutationa līmeņa paaugstināšanā (53,31 ± 9,50) un superoksīda dismutāzes aktivitātēs. 15,18±1,05) un katalāze (16,68 ±2,29).

Eksperiments atklātā laukā tiek izmantots, lai novērtētu dzīvnieka emocionālo stāvokli. Dzīvnieki, kuri ir atdalīti no sava mājas būra un ievietoti citā vidē, bieži izrāda trauksmi un trauksmi, izmainot visus vai dažus parametrus, piemēram, ambulatorās aktivitātes samazināšanos, izpēti un imobilizāciju, bet pastiprinot kopšanu. uzvedība [31]. P.sativum ekstrakts devā 100 mg/kg radīja ļoti nozīmīgu anksiolītisku efektu, par ko liecina ievērojams lauka centrā pavadītā laika pieaugums un kopējā ambulatorā aktivitāte. Šis pieaugums bija lielāks nekā pelēm, kas tika ārstētas ar bromazepāmu 1 mg/kg.

Gaismas un tumšas telpas eksperiments ir noderīgs arī, lai prognozētu medikamentu anksiolītisko efektu. Lai izmērītu trauksmes pakāpi pelēm šī testa laikā, tiek atzīmēti divi parametri: (1) mazākā laika procentuālā daļa, ko dzīvnieks pavadīja tumšajā kamerā, ir saistīts ar tā trauksmes līmeni. Citiem vārdiem sakot, ja apgaismotajā nodalījumā pavadītā laika procentuālais daudzums ir minimāls, trauksme tiek uzskatīta par augstu, un (2) pāreju skaits, ti, pāreju skaits starp diviem nodalījumiem, ir apgriezti saistīts ar trauksmes līmeni. (mazāks pāreju skaits nozīmē augstu trauksmes līmeni)[32]. Šī pētījuma rezultāti atklāja, ka P. sativum polifenola ekstrakts 100 mg/kg uzrādīja optimālu anksiolītisku efektu, pamatojoties uz dzīvnieka palielināto laiku, ko dzīvnieks pavadīja apgaismotā kamerā, un pāreju skaitu, salīdzinot ar kontrolēm pētījuma periodā.

Piespiedu peldēšanas eksperiments tika izstrādāts 1970. gados. Tas ir pazīstams arī ar tā izgudrotāja vārdu kā Porsolta tests [33]. Mūsu atklājums liecina, ka ārstēto peļu nekustīguma laiks bija īsāks nekā kontroles pelēm, kas liecina par P. sativum fenola ekstrakta antidepresantu iedarbību. Tomēr šis nekustīguma laika samazinājums varēja būt par labu peldēšanas laika vai kāpšanas laika palielināšanai. Šī atšķirība ir ļoti svarīga no neirofarmakoloģiskā viedokļa, jo teorētiski piespiedu peldēšanas laikā antidepresanti, kas izraisa pārsvarā noradrenerģisku vai dopamīnerģisku pieaugumu, samazina nekustīgumu, palielinot eskalācijas laiku [34], bet tie, kas aktivizē 5HT, tā vietā samazina nekustīgumu, palielinot peldēšanas laiku. [35]. Runājot par CNS darbību, lielākā daļa polifenolu mijiedarbojas tieši ar neirotransmiteru sistēmām [36]. Pētījumi, kas veikti ar pētersīļiem, liecina par flavonoīdu pārsvaru 37]. Tiek ziņots, ka plašajam flavonoīdu klāstam, kas atrodams tradicionālajos tradicionālajos zāļu ekstraktos, ir nomierinoša/anksiolītiska iedarbība, tieši saistoties ar GABA A receptoriem [38].

Pētījums, ko veica Priprem et al. [39] norāda, ka polifenola kvercetīns uzrāda anksiolītisku aktivitāti pēc nedēļas atkārtotas lietošanas 300 mg/kg devā, kas nav tik efektīva kā diazepāms, kura iedarbība izpaužas vienu stundu pēc mazāku devu ievadīšanas. Pereira et al. [40] parādīja, ka rosmarīnskābei ir anksiolītiska iedarbība ļoti mazās devās (no 2 līdz 4 mg/kg). Vēl viens piemērs ir apigenīns, kas demonstrē selektīvu un zemu afinitāti pret benzodiazepīna receptoriem, radot anksiolītisku aktivitāti bez gandrīz bez blakusparādībām[41. Flavonoīdi arī spēlē lomu depresijā, inhibējot monoamīnoksidāzi un tādējādi palielinot 5-HT, DA un norepinefrīna līmeni noteiktos smadzeņu apgabalos [42].

Uzbudinošas aminoskābes, piemēram, aspartāts, glutamāts, homocisteīns un cisteīns, stimulē postsinaptiskās šūnas, savukārt inhibējošās aminoskābes, piemēram, alanīns, glicīns, GABA un taurīns, nomāc postsinaptisko šūnu attīstību 43]. Enzīms, ko sauc par aromātisko L-aminoskābes dekarboksilāzi, ko sauc arī par DOPA dekarboksilāzi, triptofāna dekarboksilāzi, 5-hidroksitriptofāna dekarboksilāzi vai AAAD, kas katalizē attiecīgo L-dopa un 5-hidroksitriptofāna dekarboksilāciju par dopamīnu un {{ 7}}hidroksitriptamīnam arī var būt nozīme. Pētersīļi var izraisīt šī enzīma pārmērīgu ekspresiju, veicinot tā antidepresantu iedarbību. Pētījums ar Centella Asiatica, augu, kas pieder tai pašai Apiaceae dzimtai, parādīja, ka kopējo triterpēnu antidepresantu iedarbība ir saistīta ar hipotalāma-hipofīzes-virsnieru garozas ass funkcijas uzlabošanos un monoamīna neirotransmiteru satura palielināšanos. [44]. Šie pētījumi liecina par P. sativum fenola ekstrakta anksiolītisku un antidepresantu darbību.

4. Materiāli un metodes

4.1. Augu materiāls

Petroselinum sativum Hoffm. Gaisa daļas tika savāktas pirmsziedēšanas fāzē (2018. gada pavasarī) no Tanounate reģiona Ziemeļmarokā (34 grādi 32'9"N 4 grāds 38'24"W). Šī auga klasifikāciju, identifikāciju un botānisko nosaukumu pārbaudīja kvalificēts botāniķis Pr. Bari Amina. Auga paraugs tiek glabāts Zinātņu fakultātes Dhar El Mahrez Fez herbārijā (vaučera paraugs: 18TA5001).

4.2. Ekstrakcija

Ekstrakcija tika veikta, kā aprakstīja Slighoua et al. [11]. Īsumā, 10 g izžāvētu P. sativum smalkā pulvera gaisa daļu sajauc ar metanolu (100 ml) un 3 stundas macerēja 50 grādu temperatūrā. Pēc tam filtrāts tika koncentrēts, izmantojot rotācijas iztvaicētāju, līdz tas bija sauss, lai nodrošinātu pilnīgu šķīdinātāja iztvaikošanu. Iegūtais ekstrakts tika atkārtoti izšķīdināts destilētā ūdenī (200 ml) un izskalots ar trīs heksānu un hloroformu (200 ml trīs reizes), lai atbrīvotos no pigmentiem un citiem piemaisījumiem. Pēdējā ūdens fāze tika ekstrahēta ar etilacetātu (200 ml trīs reizes). Organiskā fāze (etilacetāts) tika koncentrēta, lai iegūtu polifenola ekstraktu. Ekstrakcijas iznākums ir 10,52 procenti.

Mēs iepriekš publicējām darbu pie šī paša ekstrakta, kas, izmantojot HPLC-DAD analīzi, parādīja, ka tas sastāv no šādiem polifenoliem: (1) ferulskābe, (2) kanēļskābe, (3) gallskābe, (4) kvercetīns, (5) miricetīns, (6) naringenīns, (7) hidrokstirozols [11].

4.3. Izpētīt dzīvniekus

Šajā pētījumā peles (Šveices albīnus) nodrošināja Zinātņu fakultātes Dhar el Mahraz Fez dzīvnieku māja. Pirms iesaistīšanas eksperimentos viņi tika ievietoti grupās pa sešiem parastajos būros, un viņiem tika dots divu nedēļu adaptācijas periods ar brīvu piekļuvi pārtikai un ūdenim un kontrolētu temperatūru 22±2 grādi un gaismas/tumsas ciklu. 12 h/12 ​​h.

Eksperimenti tika veikti saskaņā ar starptautiskajiem standartiem par izmēģinājumu dzīvnieku ārstēšanu un izmantošanu [16] un Iekšējo dzīvnieku ētikas komiteju (#09-12/2019/LBEAS).

4.4. Antioksidantu aktivitātes novērtējums

4.4.1.2.,2-difenil-1-pikrilhidrazila (DPPH) tests

DPPH ir viens no visizplatītākajiem ķīmiskajiem savienojumiem, ko izmanto fenola savienojumu antioksidanta aktivitātes novērtēšanai |45. DPPH ir nepāra elektrons uz savienojošā slāpekļa atoma. Šī testa princips ir apkopots ekstrakta spējā samazināt tumši purpursarkano DPPH brīvo radikāļu līdz dzeltenīgas krāsas samazinājumam, kas izmērāms ar spektrofotometriju [28]. Ekstrakta koncentrāciju sērija tika sagatavota metanolā, 100 μL katra no tām tika pievienota 750 μL DPPH šķīduma metanolā (0,004 procenti). Pēc 30 minūšu inkubācijas perioda 25 grādu temperatūrā absorbcija tika mērīta pie 517 nm. Negatīvās kontroles paraugs tika aizstāts ar metanolu. DPPH procentuālo daudzumu noteica ar šādu vienādojumu:

(1) I=[(Tukšs paraugs)/Tukšs] × 100

Antiradikālās aktivitātes procentuālā izteiksmē paraugs ir parauga absorbcija, bet tukšais ir negatīvās kontroles absorbcija.

4.4.2. Dzelzs reducēšanas jaudas (FRAP) tests

Dzelzs (Fe3 plus ) reducējošā jauda pētītajā ekstraktā tika noteikta saskaņā ar Mechchate et al. 【28】. Īsumā, 100 μL ekstrakta dažādās koncentrācijās tika sajaukts ar 500 μL fosfātu buferšķīduma (PBS, 0,2 M, pH 6,6). ) un 500 μL 1 procenta kālija fericianīda K, Fe (CN) šķīduma. Tos inkubēja ūdens vannā 50 grādu temperatūrā 20 minūtes. Pēc tam reakcijas maisījumam pievienoja 500 μL 10% trihloretiķskābes (TCA) ūdens šķīduma, 100 μL 0,1% dzelzs hlorīda FeCl3 šķīduma un 0,5 ml destilēta ūdens. Šī maisījuma absorbcijas nolasījums tika ņemts pie 700 nm pret tukšo paraugu, kurā bija visi barotnes reaģenti, izņemot augu ekstraktu. Rezultāti ir izteikti kā 50 procentu efektīvā koncentrācija (EC50), kas atspoguļo antioksidantu koncentrāciju, kas nepieciešama, lai iegūtu absorbciju 0,5. Absorbcijas palielināšanās atbilst pārbaudītā ekstrakta reducējošās jaudas palielinājumam.

4.5. Antidepresantu aktivitātes piespiedu peldēšanas tests (FST)

Porsolta modelis jeb piespiedu peldēšanas tests ir paredzams antidepresantu tipa aktivitātes tests. Peles ir atsevišķi spiestas peldēt cilindriskā traukā, kas piepildīts ar ūdeni līdz 12 cm augstumam. Pārbaude ilgst 6 minūtes, bet tiek analizētas tikai pēdējās 4 minūtes. Dzīvnieks tiek uzskatīts par nekustīgu, ja tas peld vertikālā stāvoklī un veic tikai dažas kustības, lai saglabātu līdzsvaru ūdenī (nekustīguma laiks).

Šim testam tika izmantotas pavisam četras partijas pa piecām pelēm katrā. Visi augu ekstrakti tika ievadīti ar zondi 21 dienu, un tests tika veikts 1 stundu pēc ekstraktu ievadīšanas 21 dienā. A grupa, negatīvā kontrole, saņēma fizioloģisko šķīdumu kā nesēju. B grupa, pozitīvā kontroles grupa, saņēma paroksetīnu 11 mg/kg. C un D grupa saņēma PSPE attiecīgi 50 un 100 mg/kg.

Vienu stundu pēc augu ekstrakta ievadīšanas nekustīguma laiks tika skaitīts 6 minūtes. Pirmās divas minūtes ļāva pelei pielāgoties stresam, un pēc tam pele ar laiku nogura un imobilizējās. Nekustīguma laiks tika skaitīts sekundēs, un pēc tam tas tika salīdzināts ar nekustīguma laiku pozitīvās kontroles grupā (paroksetīns) pelēm [33].

4.6. An.ksiolītiskā aktivitāte

4.6.1.Atvērts lauks

Atklātā lauka (OF) testu izmanto, lai prognozētu anksiolītisko aktivitāti, jo dzīvnieki ļoti izvairās no centrālās zonas attiecībā pret perifēriju. To izmanto arī kā izpētes un pārvietošanās testu. Laukums sastāvēja no četrām 40 cm augstām koka sienām, kas izkārtotas 50×50 cm platībā, sadalītas 25 vienāda izmēra flīzēs, kas iezīmētas ar melnām līnijām.

Šim testam tika izmantotas pavisam četras partijas pa piecām pelēm katrā. Visi augu ekstrakti tika ievadīti ar zondi 21 dienu. Pēc tam testu veica 1 stundu pēc augu ekstrakta ievadīšanas 1., 7., 14. dienā, un A grupa, negatīvā kontrole, saņēma fizioloģisko šķīdumu kā nesēju B grupa, pozitīvā kontrole, saņēma bromazepāmu 1 mg/kg. . C un D grupa saņēma PSPE attiecīgi 50 un 100 mg/kg.

Pēc 60 minūtēm testu veica, novietojot katru peli centrālajā laukumā, lai izpētītu arēnu, lai izmērītu kopējo peļu ambulatoro aktivitāti (kopējo dakstiņu skaitu, ko peles šķērsoja, ti, perifēro flīžu skaitu un skaitu centrālajām flīzēm, kuras šķērsoja peles ar visām četrām kājām) un laiks, kas pavadīts atklātā lauka centrā [3146].

4.6.2. Gaismas-tumšas telpas tests

Gaismas un tumšas telpas tests tiek izmantots arī anksiolītiskās aktivitātes prognozēšanai, jo tas ļauj viegli novērtēt ar trauksmi saistītu dzīvnieku uzvedību, analizējot dzīvnieka kustības starp diviem dažādu krāsu un apgaismojuma nodalījumiem. Nemierīgāki dzīvnieki mēdz pavadīt mazāk laika apgaismotā telpā. Koka gaiši tumšā kaste ar izmēriem 44 × 21 × 21 cm sastāvēja no diviem melnbaltiem nodalījumiem, kurus savienoja eja (centrā 7 × 7 cm caurums, kas atdala divus nodalījumus un ļauj piekļūt vienam vai otram). no nodalījumiem). Apgaismoto nodalījumu apgaismoja lampa.

Šim testam tika izmantotas pavisam četras partijas pa piecām pelēm katrā. Visi augu ekstrakti tika ievadīti ar zondi 21 dienu. Pārbaude tika veikta 1 stundu pēc augu ekstrakta ievadīšanas 1., 7., 14. un 21. dienā. A grupa, negatīvā kontrole, saņēma fizioloģisko šķīdumu kā nesēju. B grupa, pozitīvā kontrole, saņēma bromazepāmu 1 mg/kg. C un D grupa saņēma PSPE attiecīgi 50 un 100 mg/kg.

Pēc 60 minūtēm tika veikts piecu minūšu tests, novietojot katru peli ar skatu pret atveri, kas savienojas ar tumšo nodalījumu [47]. Pēc katra testa kaste tika iztīrīta ar spirtu. Mērītie parametri bija apgaismotajā kamerā pavadītais laiks un kameras pāreju skaits [48].

5. Secinājumi

Pētersīļi, ikdienā lietojami kulinārijas augi visā pasaulē, sniedz milzīgus ieguvumus veselībai, un šajā pētījumā ir pierādīts, ka tiem piemīt ievērojama antidepresantiem līdzīga un anksiolītiska iedarbība, pat labāka par klasiskajām zālēm, īpaši ar devu 100 mg/kg. Meklējot efektīvas zāles ar mazākām blakusparādībām vai gandrīz bez tām, šis augs varētu būt piemērota alternatīva. Šis darbs veicina tā ikdienas patēriņu, kā arī tās attīstību līdz labi izveidotai fitomedicīnai.

Lai pabeigtu šo darbu, ir nepieciešami turpmāki pētījumi, tostarp citu uzvedības testu veikšana ar to pašu ekstraktu, lai apstiprinātu tā efektivitāti. Tādējādi tiek plānota P. satioum fenola ekstrakta bioloģiski vadīta frakcionēšana, lai identificētu galveno komponentu, kas ir atbildīgs par novērotajām anksiolītiskajām un antidepresantiem līdzīgām aktivitātēm, un noteiktu to precīzu darbības mehānismu.

Atsauces
1. Friedrich, MJ Depresija ir galvenais invaliditātes cēlonis visā pasaulē. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lims, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Džans, MW; Ho, RC Depresijas izplatība Kopienā no 30 valstīm no 1994. līdz 2014. gadam. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Amerikas Psihiatru asociācija. Garīgo traucējumu diagnostikas un statistikas rokasgrāmata (DSM-5®); Amerikas Psihiatru asociācija: Vašingtona, DC, ASV, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltmanis, dīdžejs; Bīkmens, AT; Šoverss, RA; van Hemerts, AM; Peninx, BW; Schmaal, L. Depresijas naturālistiskā kursa prognozēšana, izmantojot plašu klīnisko, psiholoģisko un bioloģisko datu klāstu: mašīnmācīšanās pieeja. Tulk. Psihiatrija 2018, 8, 1.–11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bručas, MR; Mogaddama, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. Neirobioloģiskās saites starp stresu un trauksmi. Neirobiol. Stress 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabrija, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepīni: to lietošana vai nu kā būtiskas zāles, vai kā toksiskas vielas. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kaņekars, S.; Šets, CS; Ombahs, HJ; Olsons, PR; Bogdanova, OV; Petersens, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF Hipobāriskās hipoksijas iedarbība žurkām atšķirīgi maina selektīvo serotonīna atpakaļsaistes inhibitoru fluoksetīna, paroksetīna, escitaloprama un sertralīna antidepresantu efektivitāti. Pharmacol. Biochem. Behav. 2018, 170., 25.–35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mehhats, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andris, A.; Andriy, D. Ārstniecības augi, ko izmanto akūtu gremošanas sistēmas problēmu ārstēšanai Fez-Meknes reģionā Marokā: etnofarmakoloģiskais pētījums. Etnobotānika. Res. Appl. 2020, 20. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mehhats, H.; Es-Safifi, I.; Bouhira, S.; Aliqahtani, AS; Nomans, OM; Nasr, FA; Konte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Origanum Majorana L. polifenolu toksicitātes un antidepresantiem līdzīgās iedarbības subakūts novērtējums Šveices albīno pelēm. Molecules 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appija, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: pārskats. Med. Garšvielas Veg. Afr. 2017, 527.–547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Kristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafovs, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. Pētersīļu hidroetanola ekstrakta un polifenola frakcijas (Petroselinum sativum Hoffm.) estrogēnu un pretiekaisuma darbību novērtējums in vivo. J. Ethnopharmacol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abasabadi, Z.; Ardekāni, MRS; Rahimi, R.; Farzaei, F. Pētersīlis: Pārskats par etnofarmakoloģiju, fitoķīmiju un bioloģiskajām aktivitātēm. J. Tradīts. Zods. Med. 2013, 33, 815–826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafim, M.; de Almeida, AP; Ziņgali, RB; Costa, SS Petroselinum Crispum ekstrakta fenola ķīmiskais sastāvs un tā ietekme uz hemostāzi. Nat. Prod. Commun. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. Coriandru m Sativum prettrauksmes aktivitāte novērtēta, izmantojot dažādus eksperimentālos trauksmes modeļus. Indijas J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Šahamats, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. Pimpinella Anisum augļu ūdens un etanola ekstraktu antidepresantiem līdzīgās iedarbības novērtējums pelēm. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mehhats, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafovs, A.; Bari, A.; Bousta, D. Ieskats Carum carvi L. anksiolītiskajās un antidepresantiem līdzīgās īpašībās un to saistību ar tās antioksidantu aktivitāti. Life 2021, 11., 207. [CrossRef]
17. Džens, X.; Čens, Y.; Čens, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Sja, S.; Li, Y.; Dengs, H.; Džans, Dž.; Cao, Y. Ferulīnskābe uzlabo depresijai līdzīgu uzvedību pirmsdzemdību saspringtām pēcnācēju žurkām, izmantojot pretiekaisuma darbību un HPA asi. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Dinizs, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP kanēļskābju antidepresantu potenciāls: darbības mehānismi un perspektīvas zāļu izstrādē. Molecules 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lī, B.; Yeom, M.; Šim, I.; Lī, H.; Hahm, D.-H. Kvercetīna aizsargājošā iedarbība uz trauksmei līdzīgiem simptomiem un lipopolisaharīda izraisītu neiro iekaisumu žurkām. Evid. Pamatots papildinājums. Altern. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovi´c Markovic, A.; Tori's, J.; Barbariks, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hidroksitirozols, tirozols un atvasinājumi un to iespējamā ietekme uz cilvēka veselību. Molecules 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburga, I.; Dormena, HD; Hiltunen, R. Atsevišķu kulinārijas garšaugu un garšvielu ekstraktu antioksidanta iedarbība. Food Chem. 2006, 97, 122–129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maess, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Andersons, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. Pazemināta dzīves kvalitāte garastāvokļa traucējumu gadījumā ir saistīta ar paaugstinātu neirooksidatīvo stresu un bazālo vairogdziedzeri stimulējošā hormona līmeni un pretkrampju garastāvokļa stabilizatoru lietošanu. J. Eval. Clin. Prakse. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. Paaugstināta nitrooksidatīvā stresa toksicitāte kā galvenais paaugstināta asinsspiediena noteicošais faktors garastāvokļa traucējumu gadījumā. J. Afekts. Traucējumi. 2021., 278., 226.–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eiks, SM; Barets, ES; van 't Erve, TJ; Ngujena, RH; Bušs, NR; Milns, G.; Gulbis, SH; Fergusons, KK Asociācija starp pirmsdzemdību psiholoģisko stresu un oksidatīvo stresu grūtniecības laikā. Paediatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [CrossRef]
25. Makalisters, MJ; Basham, SA; Valdmane, HS; Smits, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ Psiholoģiskā stresa ietekme vingrojumu laikā uz oksidatīvā stresa marķieriem jauniem, veseliem, apmācītiem vīriešiem. Fiziol. Behav. 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risolds, P.-Y.; Šrēders, H.; Dekerts, V.; Masons, D.; Atiass, A.; Lapanšs, H.; Le Gērns, N.; Blašs, D.; Dzjans, X.-C. Fosfolipīdu pārneses proteīna (PLTP) deficīts samazina E vitamīna saturu smadzenēs un palielina trauksmi pelēm. FASEB J. 2005, 19, 1.–16. [CrossRef]