RNA M6 A lasītājs YTHDF2 kontrolē NK šūnu pretaudzēju un pretvīrusu imunitāti, 6. daļa

Metastātiskas melanomas modelis un MCMV izaicinājums

B16F10 šūnas (105) tika injicētas iv pelēm. 14 dienas pēc injekcijas peles tika eitanāzētas pēcnāves analīzei. Metastātiskie mezgliņi plaušās tika analizēti makroskopiski un saskaitīti. Šūnu līniju B16F10 nodrošināja Hua Yu (City of Hope, Losandželosa, Kalifornija). Ythdf2ΔNK un Ythdf2WT peles tika inficētas ar Smita celma MCMV (2,5 × 104 PFU) ip injekciju, kas tika iegādāta no American Type Culture Collection (VR{11}}). Perifēro asiņu paraugi tika iegūti ar submandibulāru punkciju 0., 4. un 7. dienā pēc inficēšanās.

Plaušu metastāžu mezgliņi attiecas uz mezgliņiem, ko veido ļaundabīgo audzēju šūnas no citām vietām, kas migrē uz plaušām caur asinīm vai limfātisko sistēmu. Daudziem pacientiem tā ir izplatīta plaušu vēža izpausme.

Tomēr, lai gan plaušu metastāžu mezgliņi apdraud pacientu fizisko veselību, nav tiešas attiecības starp to un atmiņu. Tāpēc mums aktīvi jāsastopas ar plaušu vēža un plaušu metastāžu mezgliņu izaicinājumiem un nedrīkst ļaut negatīvām emocijām un satraukumam ietekmēt mūsu fizisko un garīgo veselību.

Tajā pašā laikā mēs varam saglabāt un uzlabot atmiņu, izmantojot dažas pozitīvas metodes. Piemēram, veiciet atmiņas treniņus, piemēram, matemātiskos aprēķinus, lasīšanu, mūzikas klausīšanos, spēļu spēlēšanu utt. Turklāt, ievērojot labus dzīves paradumus, piemēram, regulāri vingrot, pietiekami gulēt, ēst veselīgi utt. uzlabot mūsu atmiņu.

Vissvarīgākais ir saglabāt pozitīvu attieksmi. Neatkarīgi no tā, ar kādām grūtībām jūs saskaraties, jums ir jātic saviem spēkiem un nervu sistēmas elastībai, un, veicot pozitīvas korekcijas un atbildes, jūs galu galā veiksmīgi pārvarēsit grūtības.

Īsāk sakot, lai gan metastātiski mezgliņi plaušās apdraud fizisko veselību, tie nav tieši saistīti ar atmiņu. Mums vajadzētu pret to izturēties pozitīvi un saglabāt un uzlabot atmiņu, pielāgojot savu dzīvesveidu un saglabājot labu attieksmi. Var redzēt, ka mums ir jāuzlabo atmiņa, un Cistanche deserticola var ievērojami uzlabot atmiņu, jo Cistanche deserticola var regulēt arī neirotransmiteru līdzsvaru, piemēram, palielināt acetilholīna un augšanas faktoru līmeni. Šīs vielas ir ļoti svarīgas atmiņai un mācībām. Turklāt Cistanche deserticola var arī uzlabot asins plūsmu un veicināt skābekļa piegādi, kas var nodrošināt, ka smadzenes saņem pietiekami daudz barības vielu un enerģijas, tādējādi uzlabojot smadzeņu vitalitāti un izturību. Var redzēt, ka mums ir jāuzlabo atmiņa, un Cistanche deserticola var ievērojami uzlabot atmiņu, jo Cistanche deserticola var regulēt arī neirotransmiteru līdzsvaru, piemēram, palielināt acetilholīna un augšanas faktoru līmeni. Šīs vielas ir ļoti svarīgas atmiņai un mācībām. Turklāt Cistanche deserticola var arī uzlabot asins plūsmu un veicināt skābekļa piegādi, kas var nodrošināt, ka smadzenes saņem pietiekami daudz barības vielu un enerģijas, tādējādi uzlabojot smadzeņu vitalitāti un izturību.

Noklikšķiniet uz zināt papildinājumus, lai uzlabotu atmiņu

Lai izmērītu vīrusu slodzi perifērajās asinīs, liesā un aknās, DNS tika izolēta, izmantojot QIAGEN DNeasy asins un audu komplektu qPCR analīzei. Tika izmantoti šādi primeri: MCMV-IE1, 59-AGCCACCAACATTGACCACGCAC-39 (uz priekšu) un MCMVIE1, ​​59-GCCCCAACCAGGACACACAACTC-39 (reverss).

In vivo peles ārstēšana ar IL-15

In vivo peles ārstēšanai ar IL-15, Ythdf2ΔNK un Ythdf2WTpelēm 5 dienas injicēja 2 µg ip rekombinanto cilvēka IL-15 (kat.nr. 745101; Nacionālais vēža institūts). Pēc tam apstrādātās un kontroles peles tika eitanizētas plūsmas citometriskai analīzei.

Plūsmas citometrija

Vienšūnu suspensijas tika pagatavotas no Ythdf2ΔNK un Ythdf2WT peļu BM, asinīm, liesas, aknām un plaušām, kā aprakstīts iepriekš (Wang et al., 2018b). Plūsmas citometrijas analīze un šūnu šķirošana tika veikta attiecīgi ar LSRFortessa X-20 un FACSAriaFusion plūsmas citometru (BD Biosciences).

Dati tika analizēti, izmantojot programmatūru NovoExpress (Agilent Technologies).

Tika izmantotas šādas ar fluorescences krāsvielu iezīmētās antivielas no BD Biosciences, BioLegend, Invitrogen vai Cell Signaling Technology: CD3ε (145-2C11), CD19 (1D3), Gr-1 (RB6-8C5). ),TER-119 (TER-119), CD11c (N418), CD4 (GK1.5), CD8 (53-6.7), CD122 (5H4), CD132 (TUGm2), NK1.1 (PK136), CD11b (M1/70), CD27 (LG.3A10), CD117 (2B8), CD127 (SB/199), CD135 (A2F10.1), KLRG1 (2F1), CD45 ({{46) }}F11), CD45.1 (A20), CD45.2 (104), IFN- (XMG1.2), 2B4 (m2B4), granzīms B (QA16A02), perforīns (S16009A), Ly49H (3D10), Ly49D ( 4e5), CD69 (H1.2F3), CD226(TX42.1), NKG2D (CX5), NKG2A (16A11), NKp46 (29A1.4), TIGIT(1G9), PD-1 (J43), aneksīns V, Ki67 (b56), Tbet (4b10) un Eomes (WD1928), fosfo-p44/42 Erk1/2 (Thr202/Tyr204, #9101), fosfo-Akt (Ser473, #5315), fosfo-S6 proteīnu ribos ,phospho-Stat3 (Tyr705, #9145) un phospho-Stat5 (Tyr694, #9539).

Lai novērtētu NK šūnu proliferāciju, šūnas tika marķētas ar 5 µM CTV (Invitrogen) saskaņā ar ražotāja protokolu pirms to pārvietošanas uz recipienta pelēm. Ki67, Tbet un Eomes intracelulārā krāsošana tika veikta, fiksējot un caurlaidīgi izmantojot Foxp3/Transcription Factor Staining Kit (eBioscience).

Lai noteiktu fosforilētus proteīnus, attīrītas liesas NK šūnas tika iepriekš apstrādātas ar rekombinanto cilvēka IL-15 (50 ng/ml) 1 stundu un pēc tam fiksētas ar Phosflow Fix Buffer I, kam sekoja caurlaidība ar Phosflow Perm Buffer III (BD Biosciences) un krāsošana ar antivielas.

Adoptīvā šūnu pārnešana

Lai novērtētu Ythdf2 deficīta ietekmi uz NK šūnu nobriešanu, 5 × 106 BM šūnu maisījums attiecībā 1:1 no CD45.1 vai Ythdf2ΔNK CD45.2 pelēm tika pārnestas uz Rag2-/-Il2rg-/-pelēm. Recipientu atjaunošana tika novērtēta ar plūsmas citometriju 8 nedēļas pēc transplantācijas.

Limfopēnijas izraisītas homeostatiskās proliferācijas eksperimentos vienāds skaits attīrītu liesas NK šūnu no CD45.1 vai Ythdf2ΔNK CD45.2 pelēm tika pārnestas uz Rag2−/−Il2rg−/− pelēm, kam sekoja pārnesto WT un Ythdf2ΔNK NKleen NK šūnu relatīvā procentuālā attiecība. Rag2−/−Il2rg−/− saņēmējiem ar plūsmas citometriju norādītajos laika punktos.

Metastātiskajam melanomas modelim Rag2−/−Il2rg−/− pelēm iv tika injicētas 106 IL-2-paplašinātas NK šūnas no Ythdf2ΔNK vai Ythdf2WTpelēm. 1 dienu vēlāk B16F10 šūnas (105) tika injicētas iv pelēm. 14 dienas pēc injekcijas peles tika eitanāzētas pēcnāves analīzei. Dažos eksperimentos šūnas tika marķētas ar CTV (5 µM, Invitrogen), lai pirms pārvietošanas izsekotu šūnu proliferācijai.

In vivo tirdzniecības tests

Lai noteiktu NK šūnu apriti no BM uz perifērajām asinīm, 1 µg iv APC iezīmēta anti-CD45 antiviela tika injicēta C57BL/6 pelēm. Divas minūtes pēc antivielu injekcijas tēmām nekavējoties tika veikta eitanāzija, un pēc tam, kad šūnas tika iekrāsotas ar CD3 un NK1.1 antivielām, BM šūnas tika savāktas plūsmas citometrijai. Parenhīmas NK šūnas tika identificētas ar CD45 krāsošanas trūkumu, savukārt sinusoidālās NK šūnas tika identificētas pēc CD45 marķējuma klātbūtnes. Tāpēc NK šūnu attiecība sinusoīdos (CD45+) un attiecībai parenhīmas reģionos (CD45−) norāda uz NK šūnu apriti no BM toperifērajām asinīm līdzsvara stāvoklī.

Reāllaika RT-qPCR un imūnblotēšana

RNS tika izolēta, izmantojot RNeasy Mini komplektu (QIAGEN), un pēc tam reversā transkribēta uz cDNS ar PrimeScript RT reaģentu komplektu ar gDNA dzēšgumiju (Takara Bio) saskaņā ar ražotāja norādījumiem. mRNS ekspresijas līmeņi tika analizēti, izmantojot SYBRGreen PCR Master Mix un QuantStudio 12K Flex Real-TimePCR sistēmu (abi no Thermo Fisher Scientific). Primeru sekvences ir norādītas S1 tabulā.

Imunoblotēšana tika veikta saskaņā ar standarta procedūrām, kā aprakstīts iepriekš (Denget al., 2015; Yu et al., 2006). Tika izmantotas šādas antivielas: METTL3 (kat.nr. 15073-1-AP; Proteintech), METTL14 (kat.nr.26158-1-AP; Proteintech), YTHDF1 (kat.nr. 17479-1-AP). ; Proteintech), YTHDF2 (kat. Nr. RN123PW; MBL), YTHDF3 (kat. Nr..{11}}AP; Proteintech), ALKBH5 (kat. Nr. ab195377; Abcam), FTO (kat. Nr. ab124892); Abcam), MDM2 (kat. Nr. 33-7100; Invitrogen), TDP-43 (kat. Nr. PA5-29949; Invitrogen) un -aktīns (kat. Nr. {{20) }}Ig; Proteintech).

siRNA notriekšanas tests

IL-2–expanded NK cells were transfected with Accell mouse Tardbp siRNA (cat. no. E-040078-00-0005; Dharmacon) or Mdm2 siRNA (cat. no. E-041098-00-0005; Dharmacon) using Accell delivery media (Dharmacon) according to the manufacturer's instructions in the presence of IL-15 (50 ng/ml). The Accell eGFP control pool was used as siRNA control. The transfection efficiency was >90%, mērot ar plūsmas citometriju. Geneknockdown efektivitāti noteica ar qPCR un imūnblotēšanu. 3 dienas pēc transfekcijas šūnu apoptoze un proliferācija tika analizēta ar plūsmas citometriju, kā aprakstīts iepriekš.

Luciferāzes reportiera tests

Ythdf2 promotora reģions diapazonā no –2,000 bp līdz +100 bpof TSS tika pastiprināts no peles NK šūnām un klonēts apGL4-Basic Luciferase Reporter Vector (Promega), lai ģenerētu apGL{ {5}}Ythdf2 reportiera plazmīda. HEK293T šūnas, kas iegādātas no ATCC, tika kotransfekētas ar pGL4-Ythdf2 reportieru plazmīdām, kā arī STAT5a vai STAT5b pārmērīgas ekspresijas plazmīdām vai tukšo vektoru kopā ar pRL-TK Renilla reportiera plazmīdu (Promega), lai normalizētu transfekcijas efektivitāti. Šūnas tika novāktas līzei 24 stundas pēc transfekcijas, un luciferāzes aktivitāte tika kvantitatīvi noteikta fluorimetriski ar Dual-LuciferaseSystem (Promega). Primeru sekvences Ythdf2 promotora un STAT5a un STAT5b pārmērīgas ekspresijas plazmīdu klonēšanai ir uzskaitītas S1 tabulā.

ChIP testi

ChIP testi tika veikti, izmantojot Pierce Magnetic ChIP komplektu (kat. nr. 26157; Thermo Fisher Scientific) saskaņā ar ražotāja norādījumiem. Īsumā, vienāds daudzums ananti-anti-phospho-Stat5 (Tyr694, kat. Nr. 9351; Cell Signaling Technologies) vai atbilstošas ​​kontroles normālas truša IgG tika atsevišķi izmantots, lai izgulsnētu šķērssaistītos DNS-proteīna kompleksus, kas iegūti no 5 × 106 attīrītas peles primārās NK šūnas, kas iepriekš tika apstrādātas ar IL-15 (50 ng/ml) 1 stundu. Pēc šķērssaistīšanas maiņas DNS, ko imunoprecipitēja ar norādīto antivielu, pārbaudīja ar qPCR. Visu primeru sekvences ir norādītas S1 tabulā.

Ex vivo citotoksicitātes tests

NK šūnu ex vivo citotoksicitāte tika novērtēta ar standarta 51Crrrease testiem. Peles limfomas šūnu līnijas RMA-S (MHC klase Ideficient) un RMA (MHC I klases pietiek) šūnas, Andre'Veillette (McGill University, Monreāla, Kanāda) dāvana, tika izmantotas zvaigžņu šūnas. Peles tika apstrādātas ar ip injekciju poliinozīnskābe: policitidilskābe [poli (I: C); 200 µg/pelēm] 18 stundas. Poli (I: C) aktivētās NK šūnas tika izolētas no liesas, izmantojot EasySepMouse NK šūnu izolācijas komplektu (STEMCELL Technologies). Attīrītas NK šūnas tika kultivētas ar mērķa šūnām attiecībā 5:1, 2,5:1 un 1,25:1 IL-2 (50 V/ml) ​​klātbūtnē.

m6A-seq

Attīrītas liesas NK šūnas tika paplašinātas ar IL-2 (1,000 U/ml, kat. Nr. Bulk Ro 23-6019; Nacionālais vēža institūts) in vitro 7 dienas. Kopējā RNS tika izolēta ar TRIzol reaģentu (Thermo FisherScientific) no 50 miljoniem IL-2 paplašinātu NK šūnu. Poliadenilētā RNS tika tālāk bagātināta no kopējās RNS, izmantojot Dynabeads mRNS attīrīšanas komplektu (Invitrogen). mRNS paraugi tika fragmentēti 100- nt garos fragmentos ar RNS fragmentācijas reaģentiem (Invitrogen).

Fragmentēta mRNS (5 µgmRNS) tika izmantota m6A imunoprecipitācijai, izmantojot m6Aantivielu (202003; Synaptic), ievērojot Magna MeRIP m6A komplekta (Merck Millipore) standarta protokolu. RNS tika bagātināta, izmantojot RNA Clean & Concentrator-5 (Zymo Research), lai izveidotu bibliotēku ar KAPA RNA HyperPrep komplektu (Roche). Sekvencēšana tika veikta Cerības pilsētas genomikas iestādē Illumina HiSeq 2500 mašīnā ar vienas lasīšanas 50-bp režīmu. Sekvences nolasījumi tika kartēti ar peles genomu, izmantojot HISAT2 v101 programmatūru (Kim et al., 2015).

Imunoprecipitācijas un ievades bibliotēku kartētas lasīšanas tika nodrošinātas, izmantojot R pakotni exomePeak (Meng et al., 2014). m6Apeaks tika vizualizēts, izmantojot programmatūru Integrative Genomics Viewer (http://www.igv.org). M6A saistošo motīvu analizēja MEME (https://meme-suite.org) un HOMER (http://homer.ucsd.edu/homer/motif). Izsauktās virsotnes tika anotētas, krustojot ar gēnu arhitektūru, izmantojot Rpackage ChIPseeker (Yu et al., 2015).

StringTie was used to assess expression levels for mRNAs from input libraries by calculating the total exon fragments/mapped reads in millions × exon length in kb (Pertea et al., 2015). The differentially expressed mRNAs were selected with log2(fold change) >1 orlog2 (izmaiņas reizes)<−1 and P < 0.05 using the R package edgeR (Robinson et al., 2010).

YTHDF2 RIP-seq

50 miljoni IL-2-paplašinātu NK šūnu tika novāktas un divas reizes mazgātas ar aukstu PBS, un šūnu granulas tika lizētas ar 2 tilpuma līzes buferšķīdumu (10 mM Hepes, pH 7,6, 150). mM KCl, 2 mM EDTA, 0,5% NP-40, 0,5 mM ditiotreitola, 1:100 proteāzes inhibitoru kokteilis [Thermo Fisher Scientific] un 400 U/ml SUPERāzes-In RNāzes inhibitors [Thermo Fisher Scientific]).

Lizātu inkubēja uz ledus 5 minūtes un centrifugēja 15 minūtes, lai notīrītu telizātu. Viena desmitā daļa šūnu lizāta tilpuma tika saglabāta kā ievade. Pārējais šūnu lizāts tika inkubēts ar 5 µg anti-YTHDF2 (kat.nr. RN123PW; MBL), kas tika savienots ar A proteīna magnētiskajām lodītēm (kat. Nr. 10001D; Invitrogen) 4 grādos 2 stundas ar vieglu rotāciju. Pēc tam lodītes piecas reizes mazgāja ar 1 ml ledusauksta mazgāšanas bufera (50 mM HEPES, pH 7,6, 200 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0,05% NP-40, 0,5 mM ditiotreitolu un 200 U/ml RNāzes inhibitors).

Imunoprecipitētie paraugi tika pakļauti Proteināzes K šķelšanai mazgāšanas buferšķīdumā, kas papildināts ar 1% SDS un 2 mg/ml Proteināzes K (ThermoFisher Scientific), un inkubēja ar kratīšanu ar ātrumu 1200 apgr./min 55 grādu temperatūrā 1 stundu. Kopējā RNS tika ekstrahēta gan no ievades, gan imunoprecipitētās RNS, pievienojot 5 tilpumu TRIzol reaģentu, kam sekoja Direct-zol RNA Miniprep (Zymo Research).

cDNS bibliotēka tika ģenerēta ar KAPA RNA HyperPrep komplektu (Roche) un sekvenēta uz Illumina HiSeq 2500 platformas. Maksimālos izsaukšanas rezultātus ar imunoprecipitāciju un ievades bibliotēkām ģenerēja R pakotne RIPSeeker (Li et al., 2013). HOMER tika izmantots, lai atrastu datu sadalījuma motīvus maksimumu reģionos. Izsauktās virsotnes tika anotētas, krustojot ar gēnu un transkripta arhitektūru, izmantojot ChIPpeakAnno (Zhu et al., 2010).

mRNS stabilitātes tests

Attīrītas liesas NK šūnas no Ythdf2ΔNK un Ythdf2WT pelēm tika kultivētas ar IL-15 (50 ng/ml). 3 dienas pēc kultivēšanas šūnas norādītajā laikā tika apstrādātas ar aktinomicīnu D (5 µg/ml, kat. nr. A9415; Sigma). Šūnas bez apstrādes tika izmantotas 0 h. Šūnas tika savāktas norādītajā laikā, un kopējā RNS tika ekstrahēta no šūnām qPCR. MRNS pusperiods tika aprēķināts, izmantojot metodi, ko iepriekš aprakstīja Weng et al. (2018). Primeru sekvences ir norādītas S1 tabulā.

Tiešsaistes datu bāzes analīze

Mēs izmantojām tiešsaistes resursu BioGPS (//biogps.org), lai analizētu Ythdf2 audu specifisko ekspresiju. RNS-seqdata kopas bija no GEO ar pievienošanās nr. GSE106138, GSE113214 un GSE25672. Normalizētie dati no RNS-seq analīzēm tika eksportēti, un gēnu ekspresijas z-score tika vizualizēts ar Heatmap.2 funkciju gplots bibliotēkā.

Statistika

Nesapārotie Studenta t-testi (divpusēji) tika veikti, izmantojot programmatūru GraphPad Prism. Vienvirziena vai divvirzienu ANOVA tika veikta, ja tika salīdzinātas trīs vai vairākas neatkarīgas grupas. P vērtības tika pielāgotas vairākiem salīdzinājumiem, izmantojot Holm-Sˇ´ıdak procedūru. P < 0.05 tika uzskatīts par nozīmīgu. *, P < {{10}}.05; **, P < 0,01; un ***, P < 0,001.

Tiešsaistes papildmateriāls

S1. attēlā parādīts YTHDF2 proteīna līmenis imūnās šūnās, ieskaitot NK šūnas, reaģējot uz IL-15 stimulāciju, MCMV infekciju un audzēja progresēšanu; peļu ģenerēšana ar NKšūnām specifisku Ythdf2 dzēšanu. Attēlā S2 parādīti vīrusu titri liesā un aknās no pelēm, kas inficētas ar MCMV, un Ly49H+ un/vai Ly49D+ NKšūnu procentuālais un absolūtais skaits pelēm, kas inficētas ar MCMV. S3 parāda proliferāciju, izdzīvošanu, nobriešanu un aktivizējošo un inhibējošo NK šūnu receptoru ekspresiju no Ythdf2WT un Ythdf2ΔNK pelēm. S4. attēlā parādīta YTHDF2 ekspresijas regulēšana ar IL-15-STAT5 signālu palīdzību un IL-15 receptoru komponentu ekspresija, PI3K–AKT ceļš un MEK–ERK ceļš NK šūnās no Ythdf2WT un Ythdf2ΔNK pelēm. S5 parāda transkripta mēroga RNS-seq, m6A-seq un RIP-seq testus NK šūnās. S1 tabulā ir uzskaitīti pētījumā izmantotie primeri.

Datu pieejamība

RNA-seq, m6A-seq un RIP-seq dati tika deponēti Nacionālajā biotehnoloģijas informācijas centrā GEO ar pievienošanās numuru. GSE174027. Pārējie dati, kas apstiprina šī pētījuma secinājumus, pēc pieprasījuma ir pieejami no attiecīgajiem autoriem.

Pateicības

Šo darbu atbalstīja Nacionālie veselības institūti (NS106170, AI129582, CA247550, CA163205, CA223400, CA068458 un CA210087), Leikēmijas un limfomas biedrība (1364-19), Kalifornijas Reģeneratīvās medicīnas institūts ({{DISC2COVID). 9}}), un Breast Cancer Alliance 2021 Exceptional Project Award. Šis darbs tika daļēji atbalstīts arī ar USDA balvu (USDA/NIFA 2020-67017-30843).

Autoru ieguldījums: S. Ma, J. Yu un MA Caligiuri izstrādāja un izstrādāja projektu. S. Ma, J. Yan, J. Džans un Dž. Yu veica eksperimentus un/vai datu analīzi. Z. Chen, L.-S. Wang, JC Sun un J. Chen sniedza reaģentus un materiālu atbalstu. S. Ma, J. Yu, J. Chen un MA Kalidžiuri rakstīja, pārskatīja un/vai pārskatīja darbu. Visi autori apsprieda rezultātus un komentēja manuskriptu.

Informācijas atklāšana: Dž. Čens ziņoja par "citu" no Genovel BiotechCorp. ārpus iesniegtā darba un ir Genovel Biotech Corp. zinātniskais dibinātājs un rases onkoloģijas zinātniskais padomnieks. Netika ziņots par citiem informācijas izpaušanas gadījumiem.

Atsauces

1.Arase, H., ES Mocarski, AE Campbell, AB Hill un LL Lanier. 2002. Tieša citomegalovīrusa atpazīšana, aktivizējot un inhibējot NKšūnu receptorus. Zinātne. 296:1323–1326.

2. Ayala, YM, T. Misteli un FE Baralle. 2008. TDP-43 regulē retinoblastomas proteīna fosforilēšanos, nomācot no ciklīna atkarīgās kināzes 6 ekspresiju. Proc. Natl. Akad. Sci. ASV. 105:3785–3789.

3. Barbieri, I., K. Tzelepis, L. Pandolfini, J. Shi, G. Millan-Zambrano, SC Robson, ´D. Aspris, V. Migliori, AJ Bannister, N. Han u.c. 2017. Ar promotoru saistītais METTL3 uztur mieloīdo leikēmiju ar m6A atkarīgu translācijas kontroli. Daba. 552:126–131.

4. Becknell, B. un MA Kalidžiuri. 2005. Interleikīns-2, interleikīns-15 un to loma cilvēka dabiskajās slepkavas šūnās. Adv. Immunol. 86:209–239.

5.Bertoli, C., JM Skotheim un RA de Bruin. 2013. Šūnu cikla transkripcijas kontrole G1 un S fāzēs. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 14:518–528.

6. Bezmans, NA, CC Kim, JC Sun, G. Min-Oo, DW Hendricks, Y. Kamimura, JA Best, AW Goldrath un LL Lanier. Imunoloģiskā genoma projekta konsorcijs. 2012. Dabisko killer šūnu identitātes un aktivācijas molekulārā definīcija. Nat. Immunol. 13:1000–1009.

7. Carson, WE, JG Giri, MJ Lindemann, ML Linett, M. Ahdieh, R. Pakton, D. Anderson, J. Eizenmans, K. Grabstein un MA Kalidžiuri. 1994. Interleikīns (IL) 15 ir jauns citokīns, kas aktivizē cilvēka dabiskās killeršūnas, izmantojot IL-2 receptoru sastāvdaļas. J. Exp. Med. 180:1395–1403.

8. Carson, WE, TA Fehniger, S. Haldar, K. Eckhert, MJ Lindemann, CF Lai, CM Croce, H. Baumann un MA Caligiuri. 1997. Interleikīna-15 iespējamā loma cilvēka dabisko slepkavas šūnu izdzīvošanas regulēšanā.J. Clin. Invest. 99:937–943.

9. Čans, Kdžejs, MJ Smits un L. Martineta. 2014. Dabisko killer šūnu aktivācijas molekulārie mehānismi, reaģējot uz šūnu stresu. Šūnu nāves atšķirība. 21:5–14.

10.Chen, X., J. Han, J. Chu, L. Zhang, J. Zhang, C. Chen, L. Chen, Y. Wang, H. Wang, L. Yi u.c. 2016. EGFR-CAR NK šūnu un onkolītiskā herpes simplex vīrusa 1 kombinētā terapija krūts vēža smadzeņu metastāzēm.Oncotarget. 7:27764–27777.

For more information:1950477648nn@gmail.com