Antinociceptīva un pretiekaisuma darbība, ko izraisa Cistanche Deserticola grauzējiem

Kontaktpersona:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li-Wei Lin u.c

Abstrakts

Šajā pētījumā sakneņi noCistanchedeserticola(Orobanchaceae, saīsināti kā CD) tika ekstrahēti ar 50% etanola un kārtīgi izolēti ar etilacetātu, n-butanolu un ūdeni. Pretsāpju līdzeklis unanti-iekaisumaCD ekstrakta un trīs slāņu iedarbība tika novērtēta vairākos dzīvnieku modeļos. CD(Cistanchedeserticola)ekstrakti efektīvi inhibēja savilkšanās reakciju, ko izraisīja 1 procents etiķskābes, un divfāzu laizīšanas reakciju, ko izraisīja 1 procents formalīna, kā arī samazināja tūsku, ko izraisīja 1 procents karagināna, bet ne zimozāns. Turklāt CD butāna un ūdens slāņi(Cistanchedeserticola)ekstrakts ne tikai samazināja etiķskābes un formalīna izraisītās sāpes, bet arī mazināja karagināna izraisīto tūsku. CD butāna slāņa ietekme(Cistanchedeserticola)ekstrakts ir labāks nekā ūdens slānis. Turklāt CD butāna slāņa ietekme(Cistanchedeserticola)ekstraktu neatcēla naloksons. Šie rezultāti atklāja, ka ir pretsāpju unanti-iekaisumabutāna un ūdens slāņi galvenokārt ir aktīvās sastāvdaļas. Turklāt pretsāpju līdzeklis unanti-iekaisumaCD butāna slāņa ietekme(Cistanchedeserticola)ekstrakts nebija saistīti ar opioīdu receptoriem un imūnsistēmu.

Atslēgvārdi:Cistanche deserticola; Pretsāpju darbība; Pretiekaisuma darbība

1. Ievads

CistanchedeserticolaMa. (Orobanchaceae, saīsināti kā CD), vietējo augu Ķīnā plaši izmanto tradicionālajā medicīnā dažādām terapeitiskām procedūrām, tostarp nomierinošām, pretsāpju un imunitāti uzlabojošām indikācijām (Lee, 1986). Mūsdienu farmakoloģiskie pētījumi norādīja uz CD(Cistanchedeserticola)ekstraktam bija imūnsistēmas uzlabošana (Chin un Su, 1993), brīvo radikāļu attīrīšanas efekts (Hsu et al., 1995) un SOD aktivitātes palielināšanās (Chang et al., 1995). Nesenā pētījumā brīvo radikāļu reakcijai bija nozīmīga loma iekaisuma procesos (Arrigoni-Martelli, 1985). Tāpēc šajā pētījumā tika mēģināts izpētīt CD iespējamo pretsāpju iedarbību(Cistanchedeserticola)ekstrakts pelēm ar etiķskābes izraisītu raustīšanās testu (Taber et al., 1969) un formalīna izraisītas laizīšanas testu (Shibata et al., 1989). Otrkārt, pētījām arī iespējamoanti-iekaisumaCD aktivitātes(Cistanchedeserticola)ekstrakts par klasisko iekaisuma procesu ar karagināna izraisītas tūskas testu (Winter et al., 1962) un alternatīvu iekaisuma procesu ar zimozāna izraisītu tūskas testu (Tarayre et al., 1989). Visbeidzot, mēs pētījām aktīvos CD ekstrakta slāņus, kas atdalīti ar dažādiem šķīdinātājiem. '

2. Materiāli un metodes

2.1. Augu materiāls un ekstrakti

CD sakneņi(Cistanchedeserticola)tika iegādāti no Taivānas tirgus un apstiprināja profesors MT Hsieh. Kupona paraugs (nr. CMC-ICPS-000626) tika saglabāts Ķīnas Medicīnas koledžas Ķīnas Farmācijas zinātņu institūta herbārijā turpmākai uzziņai. CD ekstrakcija un izolēšana(Cistanchedeserticola)tika ievēroti tāpat kā iepriekšējie ziņojumi (Lu, 1998). CD(Cistanchedeserticola)ekstrakts (iznākums 34,2 procentos) un trīs slāņi*/etilacetāta slānis, butanola slānis un ūdens slānis (to iznākums 3,4, 10,2, 30,6 procenti) (attiecīgi saīsināti kā CDE, CDB un CDW)*/. ekstraktu sagatavošana.

2.2. Ekstraktu un zāļu sagatavošana

CD(Cistanchedeserticola)ekstrakts ({{0}}.1, 0,3, 1 g/kg) un trīs slāņi CD(Cistanchedeserticola)ekstrakti ({{0}}.03, 0,1, 0,3 g/kg) tika izšķīdināti 0,5% karboksimetilcelulozē un ievadīti iekšķīgi 60 minūtes pirms līdz induktora injekcijai. Acetilsalicilskābi (ASA) (100, 300 mg/kg) un indometacīnu (IN DOL) (10 mg/kg) pagatavoja kā suspensiju ar 0,5% karboksimetilcelulozes un ievadīja intraperitoneāli pirms induktora injekcijas. Naloksons (1 mg/kg) tika izšķīdināts ar parasto fizioloģisko šķīdumu.

2.3. Dzīvnieki

Pētījumā tika izmantoti Sprague-Dawley žurku tēviņi (200-250 g).anti-iekaisumaaktivitātes. Pretsāpju iedarbības pārbaudei tika izmantotas ICR peļu tēviņi (20-25 g). Visi dzīvnieki tika izmantoti eksperimentos saskaņā ar Laboratorijas dzīvnieku kopšanas un lietošanas pamatprincipiem. Pirms eksperimenta uzsākšanas tie tika turēti vismaz 1 nedēļu 239/1 8C temperatūras un 60 procentu mitruma regulētā vidē ar brīvu piekļuvi standarta barībai granulās (piegādā un izstrādā Fwusow Industry Co. LTD., Taivāna ) un krāna ūdeni, kurā tika uzturēts 12-12 h gaismas/tumsas cikls (gaismas fāze: 08:00-20:00 h). Pēc tam tika ievadītas zāles un pretsāpju līdzeklis unanti-iekaisumatesti tika veikti ar dubultmaskēto metodi. Pēc uzvedības mērījumiem visi dzīvnieki tika nogalināti ar oglekļa dioksīdu.

2.4. Antinociceptīvs pētījums

2.4.1. Etiķskābes izraisīta vēdera savilkšanās reakcija pelēm

Peles tika nejauši sadalītas vairākās grupās. Katrai pelei intraperitoneāli ievadīja 1% etiķskābes šķīdumu (10 ml/kg ķermeņa svara). Peles tika ievietotas atsevišķās novērošanas kastēs. Etiķskābes izraisītās vēdera savilkšanās simptomi bija līdzīgi tiem, ko aprakstīja Taber et al. (1969). Tajos pašos eksperimentos kontroles dzīvnieki saņēma nesēja šķīdumus. Piecas minūtes pēc etiķskābes injekcijas 10 minūtes tika skaitīts riņķošanas reakciju skaits uz vienu peli etiķskābes izraisītas vēdera izlocīšanās laikā. Visbeidzot, savilkšanas reakciju skaits ļāva mums izteikt aizsardzības procentuālo daudzumu, izmantojot šādu attiecību: (kontroles vidējais apstrādātais vidējais) /100/kontroles vidējais.

2.4.2. Formalīna izraisīta laizīšanas reakcija pelēm

Šī metode ir modifikācija tai, ko aprakstīja Shibata et al. (1989). Katra pele tika ievietota novērošanas kamerā uz akrila caurspīdīgas plāksnes grīdas 5 minūtes pirms formalīna injekcijas. Zem grīdas liels spogulis bija noliekts 458 leņķī, lai varētu skaidri novērot dzīvnieka ķepas. Dzīvniekiem labajā subplantārā tika ievadīti 25 ml 1% formalīna. Pēc tam katrs dzīvnieks tika atgriezts kamerā un tika novēroti divi atšķirīgi intensīvas laizīšanas reakcijas periodi. Pirmais periods (agrīnā fāze) tika reģistrēts 0 /5 min pēc formalīna injekcijas un otrais periods (vēlīnā fāze) tika reģistrēts 10 /35 min pēc injekcijas. Laiks (-i), kas pavadīts injicētās ķepas laizīšanai, tika mērīts kā sāpju reakcijas indikators.

2.5. Pretiekaisuma pētījums ar žurkām

Theanti-iekaisumaaktivitāte tika noteikta žurkām, mērot vidējo pakaļējās ķepas tilpuma palielināšanos pēc tādu iekaisuma līdzekļu kā karagināna (Winter et al., 1962) vai zimozāna (Tarayre et al., 1989) sub plantāras injekcijas. Dzīvniekiem labajā pakaļkājā zem plantāra aponeirozes tika injicēts 0,1 ml 1% karagināna vai 2% zimozāna. Iekaisums tika kvantitatīvi noteikts mililitros, izmantojot pletismometru (7150 Ugo Basile), kas reģistrēja nelielas ūdens līmeņa atšķirības, ko izraisīja tilpuma nobīde. Pirms jebkādas apstrādes tika noteikts katra dzīvnieka aizmugurējo ķepu vidējais tilpums (Vo) ar trīs mērījumiem, kas neatšķīrās no vairāk kā 4 procentiem (aparāta precizitāte). Pēc tam 30, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 min pēc iekaisuma izraisītāju injekcijas tika noteikts katra dzīvnieka aizmugurējo ķepu vidējais tilpums (Vt) ar trīs mērījumiem, kas neatšķīrās no vairāk kā 4 procenti.

Tūskas procentuālais daudzums katrā ierakstā tika aprēķināts, salīdzinot katra dzīvnieka aizmugurējo ķepu vidējo tilpumu (Vt) pēc iekaisuma izraisītāju injekcijas ar katra dzīvnieka aizmugurējo ķepu vidējo tilpumu (Vo) pirms jebkādas ārstēšanas (Palanichami). un Nagarajan, 1990). Inhibīcijas procenti katrai grupai tika iegūti, izmantojot šādu attiecību: [(Vt-Vo)kontrole /(Vt-Vo)apstrādāta]-100/(Vt-Vo)kontrole.

2.6. Statistiskā analīze

Visi dati, kas iegūti pretsāpju unanti-iekaisumaaktivitāte tika izteikta vidējo un standarta kļūdu izteiksmē un tālāk analizēta, izmantojot ANOVA vienvirziena dispersijas analīzi, kam sekoja Šefa tests. Ja varbūtība (P) bija mazāka par 0,05, atšķirība tika uzskatīta par nozīmīgu.

3. Rezultāti un diskusijas

Priekšapstrādes dzīvnieki ar perorālām CD devām(Cistanchedeserticola)ekstrakts (0.1-1 g/kg) izraisīja no devas atkarīgu un nozīmīgu etiķskābes izraisītas savilkšanās reakcijas inhibīciju (1. tabula) un formalīna izraisītas laizīšanas reakcijas divfāzu fāzes pelēm ( 1. att. (A)). CD izraisītā inhibīcija(Cistanchedeserticola)Ekstrakts ar 1 g/kg uz etiķskābes izraisītas raustīšanās reakcijas un formalīna izraisītas laizīšanas reakcijas bija attiecīgi aptuveni 54 un 45 procenti. Pozitīvās kontroles acetilsalicilskābe pie 0.1-0,3 g/kg arī samazināja etiķskābes izraisītu savīšanās reakciju ar inhibīciju par 45-64 procentiem (1. tabula). Tomēr otrs pozitīvās kontroles indometacīns 10 mg/kg inhibēja pelēm tikai formalīna izraisītas laizīšanas reakcijas vēlīnā, bet ne agrīnā fāzē ar maksimālo inhibīciju par 32 procentiem (1. att. (A)). Turklāt starp trim CD slāņiem ir tikai butanola un ūdens slāņi(Cistanchedeserticola)ekstrakts pie 0.1-0.3 g/kg arī radīja nozīmīgu antinocicepciju, un šī butanola slāņa pretsāpju iedarbība bija labāka nekā ūdens slāņa iedarbība (1. tabula un 1. att. (B)). . Otrkārt, mēs novērtējāmanti-iekaisumaCD darbība(Cistanchedeserticola)ekstrakts un trīs slāņi pret klasiskās (karagināna izraisītas) un alternatīvās (zimozāna izraisītas) tūskas veidošanos. Mēs atradām šo kompaktdisku(Cistanchedeserticola)ekstrakts pie 0.1-1g/kg arī ievērojami kavēja karagināna izraisītas tūskas veidošanos atkarībā no devas, un indometacīns 10 mg/kg arī efektīvi inhibēja karagināna izraisītas tūskas veidošanos žurkām (att. 2). Tomēr CD neinhibēja zimozāna izraisītas tūskas veidošanos(Cistanchedeserticola)ekstrakts pie 0.1-1 g/kg žurkām (dati nav parādīti). Turklāt tikai butanola slānis starp trim CD slāņiem(Cistanchedeserticola)ekstrakts pie 0.1-0.3 g/kg arī ievērojami kavēja karagināna izraisītas tūskas veidošanos žurkām (2. att.). Saskaņā ar fitoķīmiskiem ziņojumiem akteozīds un dzintarskābe, kas pieder CD butanola slāņa sastāvdaļām(Cistanchedeserticola)ekstrakts (Hsu et al., 1994, 1995), piederējaanti-iekaisumaaktivitāte pret ķīmisko vielu izraisītu tūsku veidošanos (Murai et al., 1995; Kabachnyi et al., 1987). No mūsu pašreizējiem datiem un citiem iepriekšējiem ziņojumiem mēs ierosinājām kompaktdiska sakneņus(Cistanchedeserticola)piederēja pretsāpju līdzeklis unanti-iekaisumaaktivitāte grauzējiem, un aktīvās sastāvdaļas galvenokārt iziet CD butanola slānī(Cistanchedeserticola)ekstrakts. Vai akteozīds un dzintarskābe ir CD aktīvās sastāvdaļas(Cistanchedeserticola), mēs izolēsim un novērtēsim to pretsāpju unanti-iekaisumadarbība nākotnē.

1. att. CD efekts(Cistanchedeserticola)ekstrakts ({0}},1, 0,3 un 1 g/kg), etilacetāts, butanola un ūdens slāņi CD(Cistanchedeserticola)ekstrakts (CDE, CDB un CDW) ({{0}}.03, 0.1 un 0.3 g/kg) un indometacīns (INDOL, 10 mg/kg) agrīnā (0/5 min) un vēlīnā (10/35 min) formalīna izraisītas laizīšanas reakcijas gadījumā pelēm. Katra vērtība tiek attēlota kā vidējais 9/SE (N / 7). *PB/0,05, *** PB/0,001, salīdzinot ar VEH grupu.

2. att. CD efekts(Cistanchedeserticola)ekstrakts ({0}},1, 0,3 un 1 g/kg), etilacetāts, butanola un ūdens slāņi CD(Cistanchedeserticola)ekstrakts (CDE, CDB un CDW) ({0}}.03, {{10},1 un 0,3 g/kg) un indometacīns (INDOL, 10) mg/kg) uz karagināna izraisītas ķepas tūskas žurkām. Katra vērtība tiek attēlota kā vidējais 9/SE (N /6). *PB/0,05, ** PB/0,01, salīdzinot ar VEH grupu

Turklāt Shibata et al. (1989) norāda, ka formalīna izraisītas laizīšanas reakcijas agrīnā fāze bija saistīta ar bradikinīnu un vielu P, bet vēlīnā fāze bija saistīta ar bradikinīnu, autokrīnu un prostaglandīnu. Mūsu pašreizējie dati norādīja, ka naloksons neatcēlaanti-iekaisumaCD butanola slāņa aktivitāte(Cistanchedeserticola)ekstrakts uz abām formalīna izraisītas laizīšanas reakcijas fāzēm (3. att.) un pretsāpju efekts uz etiķskābes izraisītu savīšanās reakciju (1. tabula). Tāpēc pretsāpju līdzeklis unanti-iekaisumaCD ekstrakta butanola slāņa iedarbība var nebūt saistīta ar opioīdu receptoriem. Turklāt CD(Cistanchedeserticola)ekstrakts un tā butanola slānis tikai kavēja karagināna izraisītu tūsku veidošanos žurkām. Karagināna izraisīta tūska, ko izraisa polimorfonukleāro leikocītu infiltrācija un aktivizēta kinīna sistēma, jo īpaši bradikinīns, atšķiras no zimozāna izraisītas tūskas, ko izraisa monocītu pieplūdums un aktivizēta imūnsistēma (Damas et al., 1990; Dawson et al., 1991). Dzintarskābe, kas ir CD ekstrakta butanola slāņa sastāvdaļa, inhibēja polimorfonukleāro leikocītu funkciju (Rotstein et al., 1985). Šie rezultāti atklāja, ka pretsāpju līdzeklis unanti-iekaisumaCD butanola slāņa ietekme(Cistanchedeserticola)ekstrakts varētu būt saistīts ar kinīna sistēmu, bet ne ar opioīdu receptoriem un imūnsistēmām, lai gan CD(Cistanchedeserticola)piemīt imunitāti pastiprinoša iedarbība (Chin un Su, 1993). Detalizētai pretsāpju unanti-iekaisumaaktivitāti, mēs tālāk pētīsim ar aktīvajiem CD ekstrakta slāņiem vai sastāvdaļām.

Cistanchetubulosair daudz efektu, noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu vairāk

Atsauces

Arrigoni-Martelli, E., 1985. Brīvo radikāļu noņemšanas farmakoloģija iekaisuma gadījumā. International Journal of Tissue Reactions 7, 513/519.
Chang, Y., Wu, H., Wang, SN, Cheng, HC, 1995. Pētījums par spēcīgo ietekmiCistanchedeserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck un Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. Ķīnas ķīniešu materiālu un medicīnas žurnāls 26, 143/146.
Chin, HL, Su, YC, 1993. Pētījums par farmakoloģisko iedarbībuCistanchedeserticolaMa. Ķīnas ķīniešu materiālu un medicīnas žurnāls 19, 143/146.
Damas, J., Bourdon, V., Remacle-Volon, G., Adam, A., 1990. Karragenīna un zimozāna izraisīti kinīni un peritoneālie eksudāti žurkām. British Journal of Pharmacology 101, 418/422.

Dawson, J., Sedgwick, AD, Edwards, JC, Lees, P., 1991. Salīdzinošs pētījums par šūnu, eksudatīvām un histoloģiskām atbildēm uz karaginānu, dekstrānu un zimozānu pelei. International Journal of Tissue Reactions 13, 171/185.

Hsu, WH, Chu, SH, Chao, CH, Hsu, Y., Yuan, KW, Yen, CH, Chi, CY, Chan, C., 1994. Pētījums par ķīmiskajām sastāvdaļāmCistanchedeserticolaMa. Ķīnas ķīniešu materiālu un medicīnas žurnāls 25, 509/513.
Hsu, WH, Chu, SH, Sheng, LC, Yuan, KW, Mao, CN, 1995. Pētījums par ķīmiskajām sastāvdaļām un farmakoloģisko iedarbībuCistanchedeserticolaMa. un Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. Ķīniešu tradicionālās augu izcelsmes zāles 26, 143/146.
Kabachnyi, VI, Chernykh, VP, Drogovoz, SM, Golubenko, Iu.A., Bogutskaia, EE, 1987. Meklētanti-iekaisumapreparāti starp dzintarskābes heterolamīdu atvasinājumiem. Farmakologiia i Toksikologiia 50, 94/97.
Lee, SL, 1986. Pen-Tsao-Kun-Mu. Ķīniešu medicīnas publikāciju Nacionālais pētniecības institūts, Taipeja, lpp. 20.
Lu, MC, 1998. Pētījumi par sedatīvo iedarbībuCistanchedeserticola. Etnofarmakoloģijas žurnāls 59, 161/165.
Murai, M., Tamayama, Y., Nishibe, S., 1995. Phenylethanoids in the herb of Plantago Lanceolata un inhibējošā iedarbība uz arahidonskābes izraisītu peles ausu tūsku. Planta Medica 61, 479/480.
Palanichamy, S., Nagarajan, S., 1990. Cassia alata leat ekstrakta un kemp Eerol 3-0-Sophoroside pretsāpju iedarbība. Etnofarmakoloģijas žurnāls 29, 73/78.
Rotstein, OD, Pruett, TL, Fiegel, VD, Nelson, RD, Simmons, RL, 1985. Dzintarskābe, Bacteroides sugu metabolisma blakusprodukts, kavē polimorfonukleāro leikocītu funkciju. Infekcija un imunitāte 48, 402/408.
Shibata, M., Ohkubo, T., Takahashi, H., Inoki, R., 1989. Modificētais formalīna tests: raksturīga divfāzu sāpju reakcija. Sāpes 38, 347/ 352.
Taber, RI, Greenhouse, DD, Rendell, JK, Irwin, S., 1969. Opioīdu agonistu un antagonistu mijiedarbība ar etiķskābes izraisītu vēdera stiepšanos pelēm. Farmakoloģijas un eksperimentālās terapijas žurnāls 169, 29/38.
Tarayre, JP, Delhon, A., Aliaga, M., Barbara, M., Bruniquel, F., Caillol, V., Puech, L., Consul, N., Tisne-Versailles, J., 1989.
Farmakoloģiskie pētījumi par zimozāna iekaisumu žurkām un pelēm. 1: Zymosan izraisīta ķepu tūska žurkām un pelēm. Farmakoloģiskie pētījumi 21, 375/384.
Winter, CA, Risley, EA, Nuss, GW, 1962. Karagināna izraisīta tūska žurkas pakaļējā ķepā kā testsanti-iekaisumanarkotikas. Proceedings Society of Experimental Biology and Medicine 111, 544/547.