Uz aptameru balstītas stratēģijas imūnterapijas uzlabošanai TNBC 2. daļā

Turklāt aptamēri panes vairākas ķīmiskas modifikācijas, kas uzlabo mērķēšanas efektivitāti, farmakokinētisko profilu un stabilitāti bioloģiskajā vidē, kas nepieciešamas to lietošanai in vivo [47]. Kā plaši apskatīts citur [27,48], visbiežāk lietotās modifikācijas, kas aptamēriem lietotas SELEX laikā vai pēc SELEX, lai palielinātu to rezistenci pret nukleāzēm, ir (3. attēls): 2 0 -OH grupu aizstāšana. riboze ar fluora, metoksi, tiola vai aminogrupām; oligonukleotīdu galu ierobežošana vai ciklizācija; fosfodiestera mugurkaula aizstāšana ar fosforotioāta mugurkaulu; un bloķētu nukleīnskābju ieviešana. Turklāt var radīt L-aptamērus, ko sauc par spiegelmeriem, kurus nukleāzes neatpazīst, jo tie ir dabisko nukleīnskābju enantiomēri. Ķīmiskās modifikācijas tiek izmantotas arī, lai pārvarētu maza izmēra aptamēru ātro nieru filtrāciju, konjugējot tos ar pārāk apjomīgām molekulām, piemēram, polietilēnglikolu (PEG) vai holesterīnu, tādējādi palielinot to cirkulācijas laiku, neietekmējot mērķa pieejamību. Ir izstrādātas arī sarežģītas pieejas, lai ķīmiski konjugētu aptamērus ar sekundāriem terapeitiskiem līdzekļiem kombinētajā terapijā, un interesanti, ka ir izpētītas novatoriskas stratēģijas, lai aptamēra molekulā ieviestu eksotiskas ķīmiskās grupas, lai paplašinātu to funkcionalitāti un pārvarētu ķīmiskās daudzveidības trūkumu nukleīnskābēs [49]. ].

Nukleāzes attiecas uz fermentiem, kas var paātrināt RNS vai DNS hidrolīzes reakciju un kam ir plašs bioloģisko funkciju klāsts. Imūnsistēmā nukleāzes ir svarīgi rīki vīrusu infekciju atpazīšanai un attīrīšanai. Pēc tam, kad vīruss ir inficējis šūnu, tas šūnā atbrīvos RNS vai DNS. Šīs nukleīnskābes molekulas atpazīs un hidrolizēs inficētās šūnas nukleāze, tādējādi novēršot vīrusa replikāciju un infekcijas izplatīšanos.

Turklāt nukleāzes ir iesaistītas arī iedzimto un adaptīvo imūnreakciju regulēšanā. Nukleāzes var regulēt gēnu ekspresijas līmeni, regulējot RNS vai DNS degradāciju un stabilitāti. Imūnās šūnās nukleāzes regulē imūnās atbildes reakcijas, piemēram, apoptozi, antigēnu prezentāciju un T-šūnu diferenciāciju.

Kopumā nukleāzēm ir svarīga loma imūnreakcijā, atpazīstot vīrusu infekciju, modulējot gēnu ekspresiju un modulējot imūnreakciju. Tādējādi pastāv vairāki mehānismi ietekmei uz imunitāti. No šī viedokļa ir jāpievērš uzmanība imunitātes uzlabošanai. Cistanche uzlabo imunitāti. Cistanche ir bagāta ar dažādām antioksidantu vielām, piemēram, C vitamīnu, C vitamīnu, karotinoīdiem uc Šīs sastāvdaļas var noņemt brīvos radikāļus, samazināt oksidatīvo stresu un uzlabot imunitāti. imūnsistēmas pretestība.

Click cistanche tubulosa priekšrocības

Vēl viena stratēģija, lai uzlabotu aptamēru saistīšanās afinitāti, mērķa selektivitāti un in vivo biopieejamību, ir lēna ātruma modificētu aptamēru (SOMAmers) ģenerēšana. Tie ir DNS aptamēri, kuriem ir ķīmiski modificēti nukleotīdi, kas funkcionalizēti uridīna 5-pozīcijā ar daļām, kas var ne tikai piedalīties mijiedarbībā ar mērķa proteīnu, bet arī veido jaunus sekundāros un terciāros strukturālos motīvus, kas ievērojami palielina pieejamo mērķu repertuāru. uz aptameriem [50].

Līdz šim viens plaši ķīmiski modificēts aptamērs (nosaukts Macugen), kura mērķis ir asinsvadu endotēlija augšanas faktora izoforma 165, ir apstiprināts ar vecumu saistītas makulas deģenerācijas ārstēšanai, un vienpadsmit aptamēri ir klīniskajos pētījumos dažādu cilvēku slimību ārstēšanai. [51,52]. Tostarp anti-nukleolīna AS1411 aptamers un anti-stromas šūnu faktora 1 NOX-A12 aptamērs jau ir pabeiguši II fāzes klīniskos pētījumus vēža terapijai. Turklāt anti-proteīna tirozīna kināzes -7 Sgc8 DNS aptamers, kas marķēts ar 68 Ga, ir agrīnā I fāzē, lai novērtētu tā diagnostisko vērtību kolorektāliem pacientiem (ClinicalTrials.gov identifikators: NCT03385148).

3. Uz aptamēriem balstītas imūnās stratēģijas TNBC ārstēšanai

Ģenētiskās un epiģenētiskās mutācijas vēža šūnās izraisa daudzu ar audzēju saistītu antigēnu klātbūtni, kurus IS atpazīst kā nederīgus un tādējādi iznīcina mutācijas šūnas. Tomēr ir labi zināms, ka vēža šūnas attīsta vairākus mehānismus, lai izvairītos no imūnsistēmas iznīcināšanas un mainītu apkārtējo mikro vidi sev par labu, izraisot audzēja augšanu, invāziju un metastāzes (53 55]).

Vēža imūnterapijas mērķis ir uzlabot vai atjaunot IS spēju atklāt un iznīcināt vēža šūnas, pārvarot mehānismus, ar kuriem audzēji izvairās no imūnās atbildes reakcijas un nomāc to. Dažos pēdējos gados ir izstrādātas pārsteidzošas uz aptamēriem balstītas stratēģijas, lai atjaunotu Is pretvēža stāvokli TNBC. Kā minēts tālāk, arvien vairāk pierādījumu liecina par aptamera spēju pastiprināt imūno šūnu citotoksisko aktivitāti, bloķēt imūnās kontrolpunktus vai piesaistīt imūnās šūnas vēža šūnām (4. attēls).

3.1. Audzēju infiltrējošie limfocīti

Galvenie imūno šūnu veidi TNBC mikrovidē ir TIL, un to klātbūtne ir būtiski saistīta ar labākiem izdzīvošanas rezultātiem pacientiem ar agrīnas stadijas neārstētiem audzējiem [56]. TIL ietver visas CD3 plus T šūnas, kas var veicināt audzēja iznīcināšanu (CD8 plus citotoksiskās T šūnas) un pretvēža reakciju (CD4 plus T-palīgs 1) vai ierobežot pretvēža imūnās atbildes (CD4 plus T-palīgs 2, ieskaitot Forkhead box P3 () FOXP3), CD4 plus regulējošās T šūnas).

Nesen Zhao et al. ierosināja oriģinālu stratēģiju, kas izmanto aptamēru mērķēšanas spēju, lai izveidotu "supercitotoksisku T limfocītu", lai uzlabotu pretvēža reakciju vēža imūnterapijā [59]. Viņi radīja skābi noārdāmas metālu un organisku vielu bāzes un uz lizosomām orientētas nanodaļiņas, kas tika ielādētas ar perforīnu un granzīmu B, diviem pretvēža toksīniem, kas atrodas CD8 plus T šūnu lizosomās, un funkcionalizēja ar aptameru, kas vērsts uz CD63 receptoru lizosomā. Ca2 plus tika nogulsnēts uz nano platformas, lai uzlabotu tās bioloģisko saderību un stabilitāti un pastiprinātu toksīnu aktivitāti. Autoriem izdevās izmantot šādu aptamēru vadītu platformu (ar nosaukumu LYS-NP), lai bagātinātu lizosomu citotoksisko saturu CD8 un T šūnās.

Pārbaudot ar TNBC 4T1 peles modeli, T šūnas tika iepriekš aktivizētas ar apstrādātiem 4T1- specifiskiem antigēniem un rekombinētas ar LYS-NP un izdalīja lizosomu saturu imunoloģiskās sinapsēs, izraisot spēcīgu pretvēža reakciju (4. attēls). Ierosinātajai uz aptamēru balstītajai imūnterapijai ir liels potenciāls, lai pārvarētu nozīmīgas problēmas T šūnu imūnterapijā cietiem audzējiem, ko galvenokārt raksturo spēcīgi imūnsupresīvi signāli, kas izraisa zemu T šūnu aktivāciju un samazina citotoksisko proteīnu sintēzi un izdalīšanos [60].

3.2. Imūnās kontrolpunktu ekspresējošās šūnas

Alatrash grupa ziņoja, ka PD-L1 gēna ekspresija pacientiem ar TNBC ir ievērojami augstāka nekā tiem, kas nav TNBC (19]. PD-L1, viens no galvenajiem ar audzēja šūnām saistītajiem imūnās kontroles punktiem, tiek ekspresēts dažādās imūnās šūnās). , piemēram, makrofāgi, dažas aktivētas T šūnas, B šūnas un daudzās cietās audzēja šūnās, tostarp BC šūnās. Tā receptors transmembrānas proteīns PD-1 tiek ekspresēts uz TIL, NK šūnu, makrofāgu membrānas virsmas, dendritiskās šūnas un monocīti [61]. Saistīšanās starp PD-L1 un PD-1 izraisa CD8 plus TIL inhibīciju, pārvēršot tos anerģiskā formā un attiecīgi izvairoties no vēža imūnās sistēmas.

Turklāt PD-1/PD-L1 ass modulē audzēja šūnās dažādus proliferācijas un izdzīvošanas signalizācijas ceļus, piemēram, PI3K/AKT, MAPK un JAK/STAT [62], un, kas ir ļoti svarīgi, TNBC, aktivāciju. Šīs ass veicina epitēlija-mezenhimālo pāreju (EMT), kas ir fenotips, kas saistīts ar ļoti agresīviem un metastātiskiem audzējiem [63].

Pašlaik tiek pētītas dažādas uz aptamēriem balstītas pieejas TNBC, lai atjaunotu PD-1/PD-L1 efektus (5. attēls).

5. attēls. Uz aptamēriem balstītu stratēģiju shematisks attēlojums, lai bloķētu PD-1/PD-L1 asi TNBC. (a) ar TNBC aptamēru dekorētas nanodaļiņas, kas ielādētas ar anti-PD-L1 siRNS; (b) ar anti-CD44 un antiPD-L1 aptameru dekorētas liposomas, kas ir ielādētas gan ar doksorubicīnu, gan anti-IDO1 siRNS; (c) antiPD-L1 aptamērs, kas konjugēts ar paklitakselu; (d) anti-EGFR aptamērs, kas kovalenti saistīts ar anti-PD-L1 vai anti-CTLA-4 mAb (sīkāku informāciju skatiet tekstā). Izveidots ar BioRender.com (piekļuvis 2023. gada 2. martā).

Šajā kontekstā mūsu grupa pirmo reizi pētīja kombināciju starp anti-PD-L1 mAb ar anti-trombocītu izcelsmes augšanas faktora receptoru (PDGFR ) aptameru ar nosaukumu Gint4.T TNBC [64]. Gint4.T ir pret nukleāzēm rezistents 20 -fluorpirimidīnu (20F-Py) RNS aptamērs, kas saistās ar PDGFR un inhibē uz dažādu cilvēka vēža šūnu virsmas, ieskaitot TNBC šūnas [65], un TNBC TME komponentus, t.sk. mezenhimālās cilmes šūnas [66] un T šūnas [64]. Interesanti, ka, intravenozi injicējot TNBC 4T1 singēnu pelēm, aptamers spēcīgi pastiprina antiPD-L1 mAb iedarbību, inhibējot audzēja augšanu un metastāžu veidošanos plaušās, iedarbojoties gan uz audzēja šūnām, gan TME komponentiem [64].

Turklāt kombinētā PDGFR un PD-L1 blokāde izraisa FOXP3 plus Treg šūnu izsīkšanu un CD8 plus T šūnu un granzīma B pieaugumu konsekventāk nekā atsevišķas monoterapijas. Šie rezultāti ir pamats, lai izveidotu bispecifisku imūnkonjugātu, kas sastāv no anti-PD-L1 antivielas, kas kovalenti saistīta ar Gint4.T aptameru, tādējādi optimizējot kombinētās terapijas efektivitāti. Bispecifiskas konstrukcijas, kas iegūtas, kovalenti saistot anti-epidermālā augšanas faktora receptora (EGFR) 20F-Py RNS aptameru ar imūnmodulatoriem anti-PD-L1 (10_12) [67] vai anti-CTLA-4 (ipilimumabu) [68] mAb ģenerēja Passariello et al. un izrādījās, ka tas saglabā abu vecāku daļu bioloģiskās funkcijas, tādējādi radot spēcīgu citotoksisku aktivitāti pret BC šūnām.

Alternatīva stratēģija anti-PD-L1 mAb PD-L1 mērķēšanai ir PD-L1 nomākšana, izmantojot gēnu klusēšanu, kas var pārvarēt dažus atkārtotus uz mAb balstītas ārstēšanas šķēršļus, piemēram, to laiku un izmaksas. - patērējoša ražošana, imunogenitātes potenciāls un zema stabilitāte. Turklāt šī stratēģija ļauj bloķēt citoplazmas PD-L1 [69] raksturīgo audzēju veicinošo lomu, kas tā vietā nav pieejama antivielām. Iespēja sintezēt uz vēža šūnām mērķtiecīgus aptamerus ar funkcionālām grupām to galā, ļaujot konjugēties ar nano vektoriem, ir pārsteidzoša pieeja, lai piegādātu, īpaši audzējam, mazas interferējošas RNS (siRNS) kravas, kas ievietotas nano vektorā. , tādējādi pārvarot siRNS neaizsargātību pret nukleāzēm un to nespēju iekļūt mērķa šūnās. Nesen uz poli(pienskābes-koglikolskābes) bloku-PEG (PLGAb-PEG) bāzes nanodaļiņas tika ielādētas ar anti-PD-L1 siRNS un dekorētas ar 20F-Py RNS aptameru, kas spēj saistīties un internalizēties tieši TNBC šūnās. [70,71].

Iegūtie ar aptameru konjugētie nanovektori pēc 90 minūšu inkubācijas TNBC šūnās efektīvi nogādāja mērķa šūnās siRNS, kas bija kompetenta izraisīt gandrīz pilnīgu PD-L1 ekspresijas nomākšanu [72]. Proti, ar aptamēru dekorēti nanonesēji piedāvā iespēju saistīt dažādus ligandus ar NP virsmu, tādējādi palielinot mērķēšanas specifiku, un NP iekapsulēt vairākas terapijas, tādējādi ļaujot izmantot efektīvas kombinētas terapijas. Piemēram, vienlaicīga cisplatīna [40] un siPD-L1 [72] ievadīšana ar PLGA polimēru nanodaļiņām, kuras mēs aprīkojām ar TNBC aptamēriem, var ne tikai veicināt toksisko blakusparādību samazināšanos, bet arī neitralizēt ziņoto cisplatīna negatīvo ietekmi. ievadīšana, lai bagātinātu PD-L1 plus imūnsistēmas izvairīšanās no TNBC šūnas [73].

Šajā sakarā Kim et al. sagatavoja daudzfunkcionālu nanosistēmu, kurā bija divi DNS aptamēri, kas konjugēti uz liposomu ārējās virsmas, un divi dažādi terapeitiskie līdzekļi nano vektoros sinerģiskai ķīmijimunoterapijai TNBC [74]. Konkrēti, TNBC šūnu mērķēšanai viņi izmantoja iepriekš atlasītos anti-CD44 [75] un anti-PD-L1 [76] DNS aptamērus, katrs ar tiolu modificētu un kovalenti konjugēts ar PEGilētu-DSPE micellu maleimīdu grupām ar tiola-maleimīdu. ķīmija. Nanozētās liposomas tika ielādētas gan ar doksorubicīnu, gan siRNS, kas traucē IDO1 ekspresiju - proteīnu, kas veicina imūnsupresīvu TME un tiek regulēts ar doksorubicīna ārstēšanu. Intravenozi injicējot TNBC 4T1 audzēja ksenotransplantāta pelēm, nanovektori spēcīgi samazināja audzēja augšanu un kavēja metastāžu veidošanos, sinerģiski apvienojot uz vēža šūnām mērķētu imunogēno šūnu nāves indukciju un imūnsupresijas apvēršanu [74].

Nesen tika radīti un pārbaudīti dažādi PD-L1 aptamēri kā atsevišķi antagonisti, bispecifiski konjugāti un terapeitisko līdzekļu ievadīšanas līdzekļi plaušu, aknu un resnās zarnas audzēju peļu modeļos, kas, līdzīgi kā anti-PD-L1 antivielas, traucē PD-1/PD-L1 asi, bloķējot PD-L1 (2. tabula). Viens aptamērs ar nosaukumu XQ-P3 tika ģenerēts ar pozitīvu atlasi uz PD-L1 pārmērīgi ekspresējošām MDA-MB-231 šūnām, izmantojot PD-L1 nokautās šūnas pretatlasei [77]. Pat ja tas vēl nav pārbaudīts in vivo, tas šķiet ļoti efektīvs TNBC MDA-MB-231 šūnu un imūno Jurkat šūnu kopkultūrās, bloķējot mijiedarbību ar PD-1 un atjaunojot T šūnu darbību. Turklāt XP-Q3 aptamēra-paklitaksela konjugāts uzrādīja antiproliferācijas efektivitāti PD-L1 pārmērīgi ekspresētās TNBC šūnās [77].

3.3. Makrofāgi

Ar audzēju saistītie makrofāgi (TAM) ir vienas no visbiežāk sastopamajām imūnšūnām TME daudzu vēža veidu gadījumā un var veicināt vai nomākt pretvēža imūnās atbildes [86,87]. Patiešām, to augstās plastiskuma pakāpes dēļ, reaģējot uz dažādiem mikrovides stimuliem, tie pāriet uz diviem dažādiem fenotipiem: klasiski aktivizētu, proinflammatorisku M1 un alternatīvi aktivētu pretiekaisuma M2, kam ir atšķirīgi ekspresijas profili šūnu virsmas marķieriem un dažāda citokīnu un ķīmokīnu ražošana. M1 makrofāgi parasti veic pretvēža funkcijas, savukārt M2 makrofāgi veicina audzēja progresēšanu. Vairumā agresīvu audzēju, tostarp TNBC, TAM mēdz līdzināties M2-līdzīgam fenotipam, kas lielā mērā ir iemesls tradicionālo terapiju un imūno kontrolpunktu inhibīcijas terapijas neveiksmēm. Šī iemesla dēļ vairākas novatoriskas imūnterapijas pieejas ir vērstas uz M2 makrofāgu mērķēšanu un noplicināšanu vai to pārprogrammēšanu uz vēlamo fenotipu [88, 89].

Lai atlasītu aptamērus, kuru mērķauditorija ir cilvēka M2-līdzīgi makrofāgi, pirmā šūnu SELEX pieeja tika piemērota cilvēka makrofāgiem, kas iegūti no vairāku donoru monocītiem un polarizēti ar M2-līdzīgo fenotipu [90]. Lai gan labākais M2-mērķa DNS aptamers, kas iegūts no atlases, nespēja atšķirt mērķa šūnas no nediferencētām M0-līdzīgām un monocītiem, kā arī mazākā mērā saistījās ar M1-līdzīgiem. makrofāgos, tas ātri internalizējās CD14 plus monocītos, tādējādi saglabājot potenciālu uz monocītiem mērķētai zāļu ievadīšanai.

Vēl viens pārsteidzošs aptamēru pielietojums cieto audzēju imūnterapijai ir M1 makrofāgu specifiskuma pastiprināšana audzēja šūnām, konstruējot tās ar vēža šūnu mērķa aptamēriem. Himērisko antigēnu receptoru T (CAR-T) šūnu imūnterapija, kas pacientiem ievada CAR-T šūnas, ir pierādījusi lielu efektivitāti dažu leikēmiju un limfomu ārstēšanā, bet tikai nelielas sekas ir cietu audzēju gadījumā, jo audzējos ir grūti iekļūt [91]. . Sakarā ar makrofāgu raksturīgo spēju iekļūt audzēja audos, nesen tika ierosinātas vairākas pieejas, kas ģenētiski modificē tos, lai izteiktu himēras CAR (CAR-M), lai mērķētu uz audzēja šūnām un ierosinātu mērķtiecīgu pretvēža reakciju [92]. Lai pārvarētu galvenos trūkumus, kas saistīti ar tradicionālajām CAR-M terapijām, piemēram, inženierijas proteīnu zemo reproducējamību un drošības problēmas, Qian et al. ierosināja jaunu CAR-M pieeju, kuras pamatā ir aptamēru izmantošana [93].

Peles stabilo makrofāgu šūnu līniju RAW 264.7 vispirms inkubēja ar azīdu saturošu metabolisko glikoproteīnu marķēšanas reaģentu un lipopolisaharīdu, lai radītu azido cukurus uz M1 šūnu virsmas. Pēc tam M1 šūnas tika konjugētas ar klikšķu ķīmijas reakciju gan ar AS1411 aptameru, kas saistās ar nukleolīnu, kas ekspresēts uz vairākām vēža šūnām, gan ar PD-L1 aptamēru, lai vienlaikus mērķētu uz audzēju un imūnās kontrolpunkta blokādi. Svarīgi, ka in vivo attēlveidošana pelēm, kurām bija 4T1 TNBC un intravenozi injicētas ar M1 šūnām, kas funkcionalizētas ar fluorescējošiem aptamēriem, uzrādīja lielāku uzkrāšanos audzējos, salīdzinot ar nemodificētām M1 šūnām. Turklāt, pārbaudot pretvēža aktivitāti, ar divu aptamēru izstrādātais M1 izraisīja spēcīgu audzēja augšanas un metastāžu veidošanās samazināšanos, ko pavadīja imūnās TME pārprogrammēšana ar palielinātu T šūnu infiltrāciju audzējā un pastiprinātu T šūnu citotoksicitāti.

Alternatīvi, Chen et al. ierosināja polivalentos sfēriskos aptamērus (PSA) kā makrofāgu inženierijas stratēģiju [94]. PSA tika ģenerēti, funkcionalizējot zelta nanodaļiņas gan ar tiolu modificēto AS1411 aptameru, gan ar DNS saiti, kas brīvajā galā satur funkcionālu grupu, kas reaģē ar azīda tagiem, kas izveidoti uz M0 makrofāgiem, izmantojot iepriekš minēto vielmaiņu. marķēšanas un biortogonālās klikšķu reakcijas (6. attēls). Inženierijas nepolarizēto makrofāgu fenotipiskā transformācija M1 apakštipā tika aktivizēta ar rentgena stariem in vitro un apstiprināta pelēm, kurām bija 4T1 audzēja ksenotransplantāti, izraisot spēcīgu audzējam specifisku nogalināšanu bez sistēmiskas toksicitātes pazīmēm.

3.4. Dabiskās slepkavas šūnas

NK šūnas ir citotoksiski limfocīti, kas pieder pie iedzimtas IS, kas spēj ražot iekaisuma citokīnus un kemokīnus. Tos sauc par "pirmo aizsardzības līniju", jo atšķirībā no T limfocītiem tie neizpauž antigēnam specifiskus T šūnu receptorus, bet iedarbojas pret mutētām šūnām bez iepriekšējas sensibilizācijas vai klonu ekspansijas [95]. NK šūnu adoptējošā imūnterapija neuzrādīja efektivitāti cieto audzēju ārstēšanā, daļēji imūnsupresīvā TME un NK šūnu specifiskuma trūkuma dēļ pret audzēju [96].

Tāpēc starp NK šūnu pretvēža terapeitiskās efektivitātes uzlabošanas pieejām lielas pūles ir vērstas uz vēža specifiskuma piešķiršanu, ekspresējot CAR vai konjugējot uz audzēju vērstus ligandus [97]. Zu un kolēģi pētīja aptamērus kā aktīvus pret vēzi vērstus līdzekļus, saistot aptamēru, kas spēj specifiski atpazīt CD30 receptoru, limfomas šūnās ar NK komerciālas šūnu līnijas virsmu vai NK šūnām, kas iegūtas no trim veseliem donoriem [98]. Šo DNS tipa aptameru iepriekš izvēlējās tā pati grupa, izmantojot hibrīda SELEX pieeju, kurā CD30 plus limfomas šūnu atlases posmi sekoja CD30 rekombinantā proteīna atlases posmiem [99]. Aptamērs tika modificēts 30 galos ar lipofīlām dubultām C18 ogļūdeņraža ķēdēm, lai tās nostiprinātos NK šūnu membrānā, kuras ir īpaši virzītas uz limfomas šūnām, lai tās nogalinātu [98]. Pavisam nesen tie paši autori izmantoja to pašu pieeju TNBC, pievienojot DNS aptameru, kas spēj saistīt vēl nezināmu proteīnu, kas ekspresēts uz TNBC šūnām, uz NK šūnu virsmas. Aptamer inženierijas NK šūnas inhibēja plaušu metastāzes no MDA-MB-231 šūnām, kas intravenozi injicētas pelēm, neradot blakus toksicitāti normāliem audiem [100].

Lai vēl vairāk uzlabotu NK šūnu audzēja specifiku cietos audzējos, ar diviem aptamēriem aprīkotas NK šūnas tika ģenerētas, izmantojot gan aptameru, kura mērķauditorija ir hepatocelulārās karcinomas šūnas, gan AptPD-L1 aptameru [81]. Iegūtās inženierijas NK šūnas bija efektīvākas nekā šūnas, kas nebija konjugētas vai konjugētas tikai ar vienu no diviem aptamēriem, kavējot hepatocelulārās karcinomas augšanu adoptētām pelēm. Vēl viens ierobežojums imūnterapijas ar NK šūnām efektivitātei ir to nepietiekama infiltrācija cietos audzējos. Atkal aptameri ir izrādījušies lieliski instrumenti šīs problēmas pārvarēšanai. Hoka grupa radīja bispecifisku aptameru bāzes konjugātu, kas spēj vienlaicīgi saistīties ar c-Met, receptoru, kas ļoti izteikts vairākās audzēja šūnās, un ar Fcg receptoru III (CD16a), proteīnu, kas ekspresēts uz NK šūnām [101]. Konjugāts sastāv no diviem ļoti specifiskiem c-Met un CD16a DNS aptamēriem, kas tika sapludināti ar dažādiem linkeriem, saglabājot ~ 65 Å-ideālo attālumu, lai vienlaicīgi varētu saistīties ar diviem receptoriem. Konjugāts spēja efektīvi atdarināt no antivielām atkarīgo šūnu citotoksicitāti, piesaistot NK šūnas vēža šūnām. Vēlāk tas pats CD16 aptamers tika sapludināts ar PD-L1 DNS aptamēru, lai radītu konstrukciju, kas spēj gan piesaistīt NK šūnas PD-L1 plus audzēja šūnām, gan bojāt PD-1/PD-L1 imūnsupresīvo asi, atkārtoti aktivizējot TIL. pret audzēja šūnām pelēm, kurām ir audzējs [82]. Šī pieeja ir īpaši indicēta tiem cietajiem audzējiem ar augstu PD-L1 līmeni, piemēram, TNBC.

4. Secinājumi

Šeit apspriestie nesenie pētījumi skaidri parāda oligonukleotīdu aptamēru lielo potenciālu, lai pastiprinātu mūsu IS cīņā pret vēzi. Aptamērus var izmantot kā pretvēža līdzekļus tāpat kā mAb, taču tie ir lētāki, ražoti ātrāk un ar lielāku reproducējamību un mazāk imunogēni nekā antivielas. Tomēr jāatzīst, ka aptamēru ierašanās klīnikā izrādās lēnāka, nekā gaidīts; faktiski, lai gan kopš pirmā SELEX ir pagājuši vairāk nekā 30 gadi [25, 26], tikai trīs aptamēri pašlaik ir vēža ārstēšanas klīniskajos pētījumos [51].

Šis palēninājums galvenokārt ir saistīts ar dažām problēmām, kas ierobežo aptamēru efektivitāti pacientiem, piemēram, to nenoteikto stabilitāti un pussabrukšanas periodu, jo īpaši sarežģītajā un nepārtraukti mainīgajā mikrovidē, kas ieskauj audzēju. Tomēr pārsteidzošās stratēģijas, kas ir izstrādātas dažos pēdējos gados, lai pārvarētu iepriekš minētās ierobežojošās problēmas, un nesenais progress aptamēru atklāšanā un modifikācijās, lai tos pielāgotu jebkuram vēlamam lietojumam, liek pamatoti apgalvot, ka aptamēru praktiskā izmantošana drīzumā jārealizē tādiem vēža veidiem kā TNBC, kam steidzami vajadzīgas jaunas terapijas iespējas.

Autora ieguldījums:

Konceptualizācija, LC; rakstīšana — oriģinālā projekta sagatavošana, LC; rakstīšana — pārskatīšana un rediģēšana LA, Ad, RN, MF, SC un LC Visi autori ir izlasījuši un piekrituši publicētajai manuskripta versijai.

Finansējums:

Šo pētījumu finansēja Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052, LCLA atbalstīja AIRC stipendija Itālijai.

Institucionālās pārbaudes padomes paziņojums:

Nav piemērojams.

Paziņojums par datu pieejamību:

Nav piemērojams.

Pateicības:

Esam pateicīgi A. Caliendo par asprātīgajām diskusijām.

Interešu konflikti:

Autori paziņo, ka nav interešu konflikta.

Atsauces

1. Dents, R.; Trūdo, M.; Pričards, KI; Hanna, WM; Kāns, HK; Savka, Kalifornija; Lickley, LA; Rolinsons, E.; Saule, P.; Narod, SA Trīskārši negatīvs krūts vēzis: atkārtošanās klīniskās pazīmes un modeļi. Clin. Cancer Res. 2007, 13, 4429–4434. [CrossRef]

2. Derakhshan, F.; Reiss-Filho, JS Trīskāršā negatīvā krūts vēža patoģenēze. Annu. Kungs Pathols. 2022, 17, 181–204. [CrossRef]

3. Lu, JY; Alvaress Soto, A.; Anampa, JD Sistēmiskās terapijas ainava agrīnas stadijas trīskārši negatīva krūts vēža ārstēšanai. Ekspertu viedoklis. Pharmacother. 2022, 23, 1291–1303. [CrossRef]

4. Lēmana, BD; Bauers, JA; Čens, X.; Sanders, ME; Čakravartijs, AB; Širs, Y.; Pietenpol, JA Cilvēka trīskārši negatīvu krūts vēža apakštipu identificēšana un preklīniskie modeļi mērķtiecīgas terapijas izvēlei. Dž.Klins. Izpētīt. 2011, 121, 2750–2767. [CrossRef]

5. Lēmana, BD; Jovanovičs, B.; Čens, X.; Estrada, MV; Džonsons, KN; Širs, Y.; Mozus, HL; Sanders, ME; Pietenpol, JA Trīskārši negatīvu krūts vēža molekulāro apakštipu pilnveidošana: ietekme uz neoadjuvantas ķīmijterapijas izvēli. PLoS ONE 2016, 11, e0157368. [CrossRef]

6. Burstein, MD; Cimelzons, A.; Poage, GM; Kovingtona, KR; Contreras, A.; Fuqua, SA; Savage, MI; Osborns, CK; Hilsenbeka, SG; Čangs, JC; un citi. Visaptveroša genoma analīze identificē jaunus trīskārši negatīva krūts vēža apakštipus un mērķus. Clin. Cancer Res. 2015, 21, 1688–1698. [CrossRef]

7. Park, JH; Ahn, JH; Kim, SB Kā mēs ārstēsim agrīnu trīskārši negatīvu krūts vēzi (TNBC): no pašreizējā standarta līdz gaidāmajām imūnmolekulārajām stratēģijām. ESMO Open 2018, 3, e000357. [CrossRef]

8. Li, S.; Bao, C.; Huangs, L.; Wei, JF Pašreizējās terapeitiskās stratēģijas metastātiska trīskārša negatīva krūts vēža ārstēšanai: no farmaceitu viedokļa. Dž.Klins. Med. 2022, 11, 6021. [CrossRef]

9. MROSS, K.; Kratz, F. Parastās vēža ķīmijterapijas robežas. Zāļu piegāde onkoloģijā: no pamata pētījumiem līdz vēža terapijai; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., Eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, ASV, 2011; 1.sējums 1.–31.lpp.

10. Ferrari, P.; Skatena, C.; Džili, M.; Bargagna, I.; Lorenzini, G.; Nicolini, A. Molekulārie mehānismi, biomarķieri un jaunās terapijas ķīmijterapijas rezistentam TNBC. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 1665. [CrossRef]

11. Gonsaless-Angulo, AM; Timms, KM; Liu, S.; Čens, H.; Litons, JK; Poters, J.; Lančberija, JS; Stemke-Hale, K.; Hennessy, BT; Aruns, BK; un citi. BRCA mutāciju biežums un iznākums neatlasītiem pacientiem ar trīskāršu receptoru negatīvu krūts vēzi. Clin. Cancer Res. 2011, 17, 1082–1089. [CrossRef]

12. Robsons, M.; Im, SA; Senkus, E.; Sju, B.; Domčeks, SM; Masuda, N.; Delaloge, S.; Li, V.; Tungs, N.; Ārmstrongs, A.; un citi. Olaparibs metastātiska krūts vēža ārstēšanai pacientiem ar cilmes līnijas BRCA mutāciju. N. Engl. J. Med. 2017, 377., 523.–533. [CrossRef] [PubMed]

13. Eikesdāls, ZS; Yndestad, S.; Elzavarijs, A.; Lopa-Gevara, A.; Gilje, B.; Blikss, ES; Espelid, H.; Lundgrēns, S.; Geislers, J.; Vagstad, G.; un citi. Olapariba monoterapija kā primārā ārstēšana neizvēlēta trīskārši negatīva krūts vēža gadījumā. Ann. Oncol. 2021, 32, 240–249. [CrossRef] [PubMed]

14. Litons, JK; Rugo, HS; Etls, J.; Hurvica, SA; Gonçalves, A.; Lī, KH; Fērenbahers, L.; Jerušalmi, R.; Mina, LA; Mārtiņš, M.; un citi. Talazoparibs pacientiem ar progresējošu krūts vēzi un cilmes līnijas BRCA mutāciju. N. Engl. J. Med. 2018, 379., 753.–763. [CrossRef]

15. Keung, MY; Vu, Y.; Badars, F.; Vadgama, JV Krūts vēža šūnu reakcija uz PARP inhibitoriem ir neatkarīga no BRCA statusa. Dž.Klins. Med. 2020, 9, 940. [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com