Cistanche Herba cistanozīds mazina hipoksijas izraisītos vīriešu reproduktīvos bojājumus, nomācot oksidatīvo stresu – Ⅱ

Cis ietekme uz hipoksijas izraisītu GC-1 šūnu dzīvotspēju in vitro.

Lai noskaidrotu, vai Cis var novērst hipoksijas inhibējošo ietekmi uz GC{{0}} šūnu dzīvotspēju, tika veikts CCK-8 tests. GC-1 šūnas tika apstrādātas ar dažādiem apakštipiem (Cis-A, B, C, H) un koncentrācijas diapazoniem (0.02 μM, 0,2 μM, 2 μM) Cis 72 stundas. Modeļa grupas salīdzinājums ar DMSO grupu parādīja, ka DMSO tieši neveicināja GC{{10}} šūnu dzīvotspēju (2.A attēls). Tomēr šūnu dzīvotspēja tika ievērojami atjaunota (P < 0.05) ar Cis ārstēšanu. Salīdzinot ar modeļu grupu, Cis-A, Cis-B, Cis-C un Cis-H visiem bija noteikta aizsargājoša iedarbība uz hipoksijas izraisītiem GC-1 šūnu dzīvotspējas bojājumiem, un Cis-B bija visnozīmīgākais. efekts (2.A attēls). Cis aizsargājošā iedarbība pie 0,2 μM bija ievērojami augstāka nekā Cis aizsargājošā iedarbība pie 0,02 μM, savukārt atšķirība starp 2 μM un 0,2 μM nebija acīmredzama, norādot, ka atjaunota Cis izraisītā GC-1 šūnu dzīvotspēja uzrādīja no devas atkarīgu koncentrācijas palielināšanos no 0.02-0.2 μM (2.A attēls). Tāpēc saskaņā ar eksperimentālajām vajadzībām turpmākajos in vitro eksperimentos kā optimālā koncentrācija tika izvēlēta 0, 2 μM Cis. Lai vēl vairāk apstiprinātu, vai dzimumšūnas patiešām aizsargā Cis, FCM un Ki-67 krāsošana, lai novērtētu GC-1 šūnu proliferācijas izmaiņas pēc apstrādes ar Cis. Pēc Cis apstrādes GC-1 šūnu īpatsvars G1 fāzē tika samazināts. Turpretī S fāzē nonāca vairāk šūnu, kas liecina, ka Cis apstrāde varētu palielināt dzimumšūnu proliferācijas indeksu (P <0, 01; 2.B attēls). GC-1 šūnu cikla statistika ir parādīta 2Bb attēlā. Ki-67 krāsošanas rezultāti arī parādīja, ka ārstēšana ar Cis-A, Cis-B, Cis-C un Cis-H būtiski uzlaboja Ki{52}}pozitīvo šūnu attiecību hipoksijas izraisītā GC{{54} } šūnas in vitro (2.C attēls).

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA SEKSUĀLĀS FUNKCIJAS UZLABOŠANAI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Cis mehānisms aizsargā dzimumšūnas no hipoksijas in vitro.

Lai noskaidrotu, vai Cis aizsargājošā iedarbība uz GC-1 šūnām ir saistīta ar pārmērīga ROS noņemšanu, ROS līmeņa noteikšanai katrā grupā tika izmantota fluorescējošā krāsviela DCFH-DA. Kā parādīts 3A un 3B attēlā, ārstēšana ar DMSO nemainīja intracelulāro ROS saturu vai LPO līmeni, salīdzinot ar modeļa grupu. Tomēr ROS līmenis GC-1 šūnās bija ievērojami samazināts grupās, kas apstrādātas ar Cis (3.A attēls). Turklāt LPO samazināšanās tika novērota arī GC-1 šūnās, kas pakļautas Cis (3.B attēls).

Lai turpinātu izpētīt mehānismu, ar kuru Cis aizsargā dzimumšūnas no hipoksiskiem bojājumiem, tika veiktas TUNEL krāsošanas un Western blot analīzes, lai novērtētu apoptozi. TUNEL krāsošana (3.C attēls) parādīja ievērojamu apoptozi modeļa un DMSO grupās. Tomēr ar Cis ārstēšanu tika novērots mazāk apoptotisko šūnu, kas liecināja, ka ārstēšana ar Cis samazināja GC-1 šūnu apoptozi. Turklāt tika izmērīta PARP, kaspāzes -3, Bax un Bcl-2 ekspresija, lai apstiprinātu molekulāro mehānismu. Kā parādīts 3D attēlā, kaspaze-3 un PARP tika aktivizētas GC-1 šūnās hipoksijas apstākļos, un šo aktivāciju kavēja Cis apstrāde. Turklāt Bax/Bcl-2 attiecība bija augstāka modeļa grupā nekā kontroles grupā, un ārstēšana ar Cis samazināja Bax/Bcl-2 attiecību (3D attēls). Šie dati liecināja, ka Cis bija potenciāla spēja mazināt hipoksijas izraisītos oksidētāju bojājumus, un šo aizsargājošo efektu var panākt, samazinot ROS uzkrāšanos un inhibējot ar kaspazi saistītās apoptozes ceļa aktivāciju.

Fermentatīvais mehānisms, kas inhibē OS, ietver brīvo radikāļu uztvērējus, piemēram, glutationa reduktāzi (GR), glutationa peroksidāzi (GPx) un superoksīda dismutāzi (SOD) [23]. Enzīmu mehānismam, kas inhibē OS, ir būtiska loma oksidatīvo bojājumu novēršanā šūnās un audos [23]. Lai vēl vairāk apstiprinātu iespējamo Cis inhibīcijas mehānismu hipoksijas izraisītai OS GC-1 šūnās, tika mērītas GR, GPx un SOD aktivitātes. Rezultāti atklāja, ka GR, GPx un SOD aktivitātes būtiski (P < 0.01, 3.E attēls) samazinājās hipoksijas gadījumā, salīdzinot ar kontroles grupām, un ārstēšana ar Cis ievērojami atjaunoja to aktivitātes GC-1 šūnas, kas pakļautas hipoksijai (P < 0,05, 3.E attēls), kas liecina, ka šie savienojumi var aktivizēt spēcīgo endogēno antioksidantu sistēmu.

CISTANCHE TUBULOSA SPERMAS RAŽOŠANAS STIMULĒŠANAI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Cis ietekme uz reprodukciju hipobariskas hipoksijas izraisītām žurkām.

Lai noteiktu hipobariskās hipoksijas ietekmi uz žurku tēviņiem, mēs vispirms pārbaudījām sēklinieku morfoloģiskās izmaiņas hipobariskās hipoksijas izraisītām žurkām. HE krāsošanas rezultāti parādīja, ka kontroles grupā normālas spermatogēnas šūnas dažādos posmos bija sakārtotas no bazālās membrānas līdz lūmenam, un nobrieduši spermatozoīdi bija redzami kanāliņu lūmenos (4.A attēls). Salīdzinot ar kontrolēm, modeļu grupā tika novērotas sēklinieku audu patoloģiskas izmaiņas, sēklinieku epitēlija šūnu bazālā membrāna bija brīvi sakārtota, spermatogēnais epitēlijs bija ārkārtīgi plāns, un dzimumšūnu līmenis un skaits bija ievērojami samazināts (4A attēls). . Tomēr ārstēšana ar Cis ievērojami uzlaboja hipobariskās hipoksijas izraisīto sēklinieku bojājumu histoloģiju in vivo (4.A attēls). Mēs arī izmērījām ķermeņa svaru, sēklinieku svaru, epididīma svaru un sēklas pūslīšu dziedzera svaru, kā rezultātā tika aprēķināts reproduktīvo orgānu indekss (reproduktīvā orgāna / ķermeņa svara attiecība). Kā parādīts 4.B-D attēlā, reproduktīvo orgānu indekss (sēklinieki, epididīms un sēklas pūslīšu dziedzeris) bija ievērojami zemāks modeļu grupā (P < 0,01) nekā kontroles grupā. Tomēr hipobariskās hipoksijas ietekme uz žurku reproduktīvo orgānu indeksu tika mainīta ar Cis ārstēšanu (4B-D attēls).

Pēc tam tika izmērīta arī žurku tēviņu spermas akrosomu enzīmu aktivitāte un dzīvās spermas ātrums, lai noskaidrotu sēklinieku funkcijas bojājumus. Kā parādīts 4E un 4F attēlā, akrosomu enzīmu aktivitāte un spermatozoīdu kustība bija zemāka modeļa grupas žurkām nekā kontroles grupā (P < 0.01). Tomēr, salīdzinot ar žurkām modeļu grupā, akrosomu enzīmu aktivitāte tika atjaunota žurkām, kas tika ārstētas ar 8 mg/kg/d Cis (P < 0,05) (4.D attēls). Turklāt, kā parādīts 4F attēlā, arī ārstēšana ar Cisuzlaboja dzīvās spermas ātrumu; visām žurkām, kas tika ārstētas ar 8 mg/kg/d Cis, bija ievērojami palielināts dzīvu spermatozoīdu skaits (55,83 ± 6.03%, P < 0.05; 69.{101} {8}} ± 2,29%, P < 0,01; 52,33 ± 3,40%, attiecīgi P < 0,05 un 53,67 ± 2,25%, P < 0,05), salīdzinot ar paraugžurkām (43,83 ± 4,01%); .

Kopumā šie rezultāti liecināja, ka hipobariskā hipoksiskā vide izraisīja sēklinieku morfoloģiskas izmaiņas, reproduktīvo orgānu svara zudumu un sēklinieku funkcijas bojājumus žurku tēviņiem, un Cis varēja efektīvi aizsargāt reproduktīvos orgānus no hipoksijas izraisītiem bojājumiem.

Cis ietekme uz OS hipobariskas hipoksijas izraisītu žurku sēkliniekos.

ROS un LPO līmeņi žurku sēkliniekos tika mērīti, lai analizētu Cis ietekmi uz hipobariskās hipoksijas izraisīto OS. ROS analīze atklāja, ka salīdzinājumā ar kontroles grupu ROS līmenis sēkliniekos modeļa grupā bija ievērojami paaugstināts (P < 0.01 5.A attēls). Un otrādi, LPO bija dramatiski paaugstināts sēkliniekos (P < 0,01) hipobariskās hipoksijas apstākļos, salīdzinot ar normoksiskiem apstākļiem (5.B attēls). Tomēr Cis apstrāde mainīja iepriekš minētās izmaiņas (P < 0, 05), kurās Cis-B iedarbojās labāk nekā citas Cis (5.A, 5.B attēls). Šķiet, ka Cis aizsargā sēkliniekus, samazinot OS hipobariskos hipoksijas apstākļos in vivo.

Turklāt tika veiktas apoptozes analīzes, lai tālāk novērtētu mehānismu, ar kuru Cis aizsargā pret hipobariskas hipoksijas izraisītiem sēklinieku funkcijas bojājumiem. TUNEL krāsošanas rezultāti (5.C attēls) parādīja, ka modeļa grupā, salīdzinot ar kontroles grupu, pastāv ievērojama apoptoze. Tomēr pēc apstrādes ar Cis (8 mg/kg/dienā) radās mazāk apoptotisko šūnu (P < 0.05) (5.C attēls). Western blot dati arī parādīja, ka hipoksija un hipobariskā ārstēšana izraisīja kaspāzes -3 un PARP aktivāciju un palielinātu Bax/Bcl-2 attiecību sēklinieku audos, kas liecina par apoptozes palielināšanos (5. D attēls). Turklāt dažāda veidaCis ārstēšanaievērojami samazināja apoptozi sēklinieku audos (5D attēls). Līdzīgi, sēklinieku audu IHC analīze parādīja līdzīgus rezultātus (1. papildu attēls).

Lai pārbaudītu Cis samazinātas OS mehānismu, ko izraisīja hipobariskā hipoksija, mēs tālāk pārbaudījām GR, GPx un SOD aktivitātes sēklinieku audos. Kā parādīts 5. E attēlā, salīdzinot ar kontroles grupu, hipobariskās hipoksijas ārstēšana ievērojami samazināja GR, GPx un SOD aktivitātes (P < 0.01). Tomēr Cis terapija atjaunoja sēklinieku audu enzīmu aktivitātes (GR, GPx un SOD) žurkām, kas tika ārstētas ar hipobarisku hipoksiju (P <0, 05). Visbeidzot, šķiet, ka Cis aizsargā sēkliniekus, aktivizējot spēcīgu endogēno antioksidantu enzīmu aizsardzības mehānismu hipobariskās hipoksijas apstākļos.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA SEKSUĀLĀS FUNKCIJAS UZLABOŠANAI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Diskusija

Ir zināms, ka augstkalnu apgabalos hipobariskā hipoksija ietekmē vairākas cilvēku sistēmas, tostarp vīriešu reproduktīvo sistēmu [4, 20]. Jaunākie eksperimentālie pētījumi ir vērsti uz to, lai izprastu mehānismus, kā hipobariskā hipoksija pasliktina vīriešu reproduktīvo sistēmu. Šajā pētījumā tika pētīta Cis ekstrakta no Cistanches Herba terapeitiskā iedarbība uz hipoksijas izraisītiem reproduktīvajiem bojājumiem. Rezultāti parādīja, ka Cis var aizsargāt vīriešu reproduktīvo sistēmu no hipoksiskiem bojājumiem, samazinot hipoksijas izraisīto ROS uzkrāšanos un OS, uzlabojot endogēno antioksidantu enzīmu aktivitāti.

ROS ir no skābekļa iegūti brīvie radikāļi, kuriem ir būtiska loma cilvēka fizioloģijā un patoloģijā. Zemas ROS devas ir būtiskasspermas kapacitāte, akrosomu reakcija un spermatozoīdu un olšūnu saplūšana [24, 25]. Tomēr pārmērīga ROS uzkrāšanās bieži izraisa dzimumšūnu un stromas šūnu bojājumus, izraisot vīriešu neauglību [26]. ROS var viegli sabojāt šūnu membrānas, nukleīnskābes, olbaltumvielas, fermentus un citas bioloģiskas makromolekulas, izmantojot peroksidāciju. Turklāt tie arī izraisa potenciālus šūnu un DNS bojājumus, ja tie pārsniedz antioksidantu spēju. Uzkrātie pierādījumi apstiprina ROS galveno lomu vīriešu auglības patoģenēzē [27, 28]. ROS ražošanu regulē skābekļa spriegums. Hipoksiskos apstākļos samazinās pieejamais skābeklis vidē un palielinās asins viskozitāte, tādējādi ietekmējot daudzus no skābekļa atkarīgus vielmaiņas procesus organismā [29, 30]. Taču zemāks atmosfēras spiediens lielā augstumā izraisa sliktu venozo atteci un ar asinsriti pārnestā skābekļa daudzuma samazināšanos uz visām organisma šūnām, kas vēl vairāk palielina orgānu un šūnu hipoksiju [29, 30]. Tādējādi pakļaušana lielā augstumā izraisa virkni hipoksisku fizioloģisku reakciju, tostarp ROS veidošanos un uzkrāšanos, kad skābekļa pieprasījums pārsniedz asinsvadu piegādi. Kā minēts iepriekš, ROS uzkrāšanās izraisa dažādas intracelulāras sekas, no kurām viskritiskākā ir izraisīt OS šūnās.

OS attiecas uz nelīdzsvarotību starp oksidācijas un reducēšanas reakcijām, kas izraisa pārmērīgu oksidētāju vai molekulu veidošanos, kas pieņem elektronu no cita reaģenta, kas savukārt rada ROS [31, 32]. Ir labi saprotams, ka OS to var izraisīt virkne endogēnu un eksogēnu faktoru, tostarp lielā augstuma iedarbība. Spermatozoīdi ir šūnas, kas ir īpaši jutīgas pret OS, ņemot vērā to nepietiekamās šūnu atjaunošanas sistēmas un lielo polinepiesātināto taukskābju plazmas membrānas saturu [33]. Sēklinieku un epididimālie audi nav izņēmums, jo žurkām, kas pakļautas hipoksijai, apaļajos spermatīdos ir novērota smaga OS [4]. OS ietekmē DNS stabilitāti, tādējādi apdraudot gametas ģenētiskā materiāla integritāti [34-36]. Tomēr ir apstiprināts, ka augsts DNS bojājumu līmenis vīriešu dzimuma gametās izraisa apoptozes signālu aktivizēšanu, kā rezultātā samazinās epididimālo spermatozoīdu skaits un palielinās bojāto šūnu procentuālais daudzums [28, 37]. Šajā pētījumā hipoksija ievērojami samazināja GC-1 šūnu dzīvotspēju, inducējot apoptozi un apturot šūnu ciklu. Vēl svarīgāk ir tas, ka FCM analīzē pēc hipoksijas stimulācijas tika parādīts ievērojami paaugstināts ROS līmenis ar paaugstinātu apoptozes ātrumu un augstāku kaspāzes-3, PARP un Bax/Bcl-2 attiecību, norādot, ka ROS var aktivizēties. apoptozi, aktivizējot kaspāzes signalizācijas ceļu hipoksijas izraisītu auglības bojājumu laikā. Šie atklājumi parādīja, ka hipoksija izraisīja pārmērīgu ROS uzkrāšanos, izraisot oksidatīvus bojājumus reproduktīvajām šūnām. Tādējādi ir lietderīgi identificēt jaunus antioksidantus, kas var kalpot kā efektīva pieeja hipoksijas izraisītu auglības bojājumu mazināšanai.

Lai aizsargātu pret OS, organismā pastāv sarežģīta antioksidantu sistēma, kas galvenokārt sastāv no fermentatīviem faktoriem. Fizioloģiskos apstākļos ROS saturs un antioksidantu sistēma uztur noteiktu līdzsvaru. Tomēr ROS pārprodukcija noplicina spermas antioksidantu sistēmu, izraisot OS, kas izraisa spermas DNS bojājumus un samazina auglību un grūtniecības līmeni [23]. Tādējādi, lai novērstu ROS pārprodukciju un ar to saistīto kaitīgo ietekmi šūnu līmenī vīriešu reproduktīvajā sistēmā, ir pārbaudītas dažādas antioksidantu stratēģijas [23]. Šobrīd literatūra par savienojumu izmantošanu ar antioksidantu aktivitāti unspermas funkcijas uzlabošanair plaša. Svarīgi, ka lielākā daļa ziņojumu apraksta spermas parametru uzlabošanos pēc perorālas antioksidantu lietošanas, tostarpuzlabojas spermas koncentrācijaun kustīgums vai DNS bojājumu samazināšanās [38]. Tādējādi arvien lielāks skaits urologu izraksta perorālos antioksidantus neauglības ārstēšanai ar OS saistītu problēmu dēļ [39]. Šie antioksidanti galvenokārt ietver karnitīnus, vitamīnus, cinku, melatonīnu un dabiskos savienojumus [23, 40]. Pašlaik, attīstoties zāļu ekstrakcijas tehnoloģijai, tiek uzskatīts, ka arvien vairāk TCM ekstraktu mazina vīriešu neauglību, jo šie antioksidanti var samazināt OS destruktīvo ietekmi [41]. Yüce A. et al. 2013. gadā ziņoja, ka kanēlis labvēlīgi ietekmē oksidatīvo un antioksidantu līdzsvaru sēkliniekos un spermas kvalitāti [42]. Zhang L et al. parādīja, ka kurkumīns ievērojami uzlabo spermas kustīgumu pacientiem un samazina H2O2 [43]. Turklāt ir pierādīts, ka dažādi citi augu ekstrakti, piemēram, melleņu, crocus sativus, granātābolu sēklas un zaļā tēja, aizsargā reproduktīvo sistēmu, izmantojot antioksidantu mehānismus [27, 44-47]. Cistanches Herba ir svarīgs TCM, kam ir labvēlīgs drošības profils un plašas ārstnieciskas funkcijas neauglības ārstēšanai, kā arī citi apstākļi [13]. Mūsdienu farmakoloģiskie pētījumi ir parādījuši, ka Cistanches Herba piemīt dažādas aktivitātes, piemēram, antioksidanta, pretiekaisuma, hepatoprotektīva un pret neirodeģeneratīvu slimību iedarbība [13, 48]. Tāpēc Cistanches Herba ekstraktiem, frakcijām vai savienojumiem var būt potenciālas antioksidanta īpašības neauglības ārstēšanai.

Augu aktīvās vielas, kas uzlabo auglību, ietver dažādas ķīmiskās grupas, piemēram, PhG, saponīnus, skābekli saturošus gaistošus savienojumus un alkaloīdus [41]. PhG farmakoloģiskās aktivitātes pētījumi ir parādījuši, ka PhG piemīt plašs bioaktivitātes klāsts, piemēram, antioksidācija, antiradiācijas neiroaizsardzība un seksuālās funkcijas uzlabošana [49, 50]. Starp šīm darbībām antioksidācija pamazām piesaista uzmanību. Ir ziņots, ka daži atsevišķi PhG komponenti vai frakcijas inhibē dzimumšūnu apoptozi, ko izraisa dažādas ķīmiskas vielas, un to antioksidācijas spējas in vitro ir pierādītas arī in vivo vairākos dzīvnieku modeļos [51, 52]. Šie rezultāti liecina, ka PhG varētu būt pievilcīgs kandidātsvīriešu neauglības ārstēšana. Cis ir aktīvs PhG, ko var izolēt no Cistanches Herba. Šajā pētījumā mēs izpētījām Cis ietekmi uz ar hipoksiju ārstētām šūnām vai žurku modeli un pētījām pamatā esošos molekulāros mehānismus. Cis uzrādīja aizsargājošas aktivitātes pret hipoksijas izraisītas dzīvotspējas samazināšanos un apoptozes palielināšanos GC-1 šūnās, kā arī uzrādīja aizsargājošu iedarbību uz hipoksijas izraisītiem bojājumiem žurku reproduktīvajā sistēmā in vivo. Tika novērots ievērojams GR, GPx un SOD aktivitāšu samazinājums hipoksijas apstākļos, salīdzinot ar normoksiskām grupām, savukārt GR, GPx un SOD specifiskās aktivitātes ievērojami palielinājās sēkliniekos vai GC-1 šūnās, kas apstrādātas ar Cis. Šķiet, ka cis aizsargā sēkliniekus un GC{5}} šūnas hipoksijas apstākļos, pastiprinot antioksidantu enzīmu darbību.

Fermentu antioksidanti darbojas galvenokārt, attīrot superoksīda anjonus, tādējādi novēršot lipīdu peroksidāciju un DNS bojājumus, lai novērstu neauglību. Enzīmu antioksidantu mehānismiem ir izšķiroša nozīme oksidatīvo bojājumu novēršanā [23]. Enzīmu mehānisms pret OS ietver brīvo radikāļu uztvērējus un no glutationa atkarīgus enzīmus, tostarp GR, GPx un SOD [12]. Antioksidantu enzīmi ir labi saprotami kā būtiski vīriešu reproduktīvajai sistēmai. Pašreizējā pētījumā samazināto antioksidantu enzīmu aktivitāšu ietekme hipobariskās hipoksijas gadījumā tika papildināta ar palielinātu ROS un LPO modeļu grupā, kas atbilst iepriekšējiem ziņojumiem [12]. Tomēr Cis ievadīšana izraisīja antioksidantu enzīmu aktivitāšu atjaunošanos GC-1 šūnās un žurku sēkliniekos, ļaujot izstrādāt stratēģijas Cistanches Herba ievadīšanai, lai novērstu hipobariskās hipoksijas izraisītos bojājumus, kā minēts iepriekš. Lai gan pašreizējie rezultāti parādīja, ka ārstēšana ar Cis daļēji samazināja hipoksijas izraisītos dzimumšūnu bojājumus žurkām, ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai atklātu pilnu priekšstatu par tās reproduktīvo aizsargājošo iedarbību. Piemēram, specifiskais Cis mehānisms ietekmē antioksidantu enzīmu aktivitāti. Turklāt pastāv jautājums, vai varētu būt piemēroti arī kādi citi mehānismi, jo Cis tikai daļēji atguvās no hipoksijas izraisītajiem reproduktīvajiem bojājumiem. Visbeidzot, jāapsver arī tas, vai Cis ir tieša augšanu veicinoša ietekme uz dzimumšūnām.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA SPERMAS AKTIVITĀTES UZGLABĀŠANAI PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Secinājumi

Kopumā šī pētījuma rezultāti uzsver Cis kā antioksidanta potenciālu hipoksijas izraisītu vīriešu reproduktīvo bojājumu ārstēšanā. Cis var aizsargāt pret hipoksijas izraisītiem vīriešu reproduktīvajiem bojājumiem, atjaunojot antioksidantu enzīmu aktivitāti, samazinot ROS izraisīto OS, vienlaikus palielinot šūnu dzīvotspēju un samazinot apoptozi. Svarīgi, ka šajā pētījumā pētītie Cis apakštipi (Cis-A, Cis-B, Cis-C un Cis-H) uzrādīja zināmu aizsargājošu iedarbību uz reproduktīvo sistēmu, un Cis-B bija visnozīmīgākā ietekme. Tāpēc mēs domājam, ka Cis varētu būt labs antioksidanta kandidātshipoksijas izraisītu vīriešu reproduktīvo bojājumu ārstēšana, lai gan precīzs pamatā esošais mehānisms prasa turpmāku izmeklēšanu.