Laminaria Japonica un Cistanche Tubulosa ekstraktu kombinētās ārstēšanas efektivitāte matu augšanai
Mar 10, 2022
Kontaktpersona: emily.li@wecistanche.com
Kyungha Shin1# et al
Tā kā pēdējā laikā galvas ādas matu izkrišana ir palielinājusies pat jauniem cilvēkiem, nopietni ietekmējot cilvēku dzīves kvalitāti,matu augšana-Laminaria japonica ekstrakta (LJE) stimulējošā iedarbība unCistanche tubulosaekstrakts (CTE). Pēc skūšanās laikā esošo folikulu anagēnās fāzes apstiprināšanas C57BL/6 peļu tēviņiem dermāli uzklāja 3% minoksidilu vai iekšķīgi kopā ar LJE un CTE kombinācijām （Cistanche tubulosaekstrakts)uz 21 dienu. Minoksidils veicināja matu atjaunošanos un palielināja -glutamiltranspeptidāzes (-GTP) un sārmainās fosfatāzes (ALP) aktivitātes. Turklāt minoksidils paaugstina epidermas augšanas faktora (EGF) un asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) līmeni. LJE un CTE līdzpārvalde（Cistanche tubulosaekstrakts)pie 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg, CTE (Cistanche tubulosaekstrakts)radīja sinerģisku veicinošu iedarbību uz matu atjaunošanos, kas ir salīdzināma ar 3 procentiem minoksidilu. LJE galvenokārt uzlaboja ALP aktivitāti, savukārt CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)palielināja gan -GTP, gan ALP aktivitātes, kā arī EGF un VEGF izpausmes. In vivo gaisa maisiņa iekaisuma modelis, karagināna izraisīta asinsvadu eksudācija un palielināta slāpekļa oksīda un prostaglandīna E2 koncentrācija eksudātos tika sinerģiski nomākta, vienlaikus lietojot LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts). Turklāt kombinētā ārstēšana būtiski kavēja iekaisuma šūnu infiltrāciju. Rezultāti liecina, ka kombinēta perorāla ārstēšana ar LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)Nepiemērotas devas un attiecības novērš matu izkrišanu un uzlabo alopēciju, ko daļēji var izraisīt to pretiekaisuma darbība.
Atslēgvārdi Matu augšana, iekaisums, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, kombinētā ārstēšana
Cistanche tubulosaekstraktam ir daudz funkciju
Pēdējā laikā galvas ādas matu izkrišana pieaug pat jauniem cilvēkiem, nopietni ietekmējot indivīda dzīves kvalitāti. Lai gan plikpaurība nav viena no veselības problēmām, tā var radīt pamatīgu psiholoģiski neērtu sociālo stresu. Tāpēc ir ļoti svarīgi izstrādāt jaunus profilaktiskus un/vai terapeitiskus materiālus matu izkrišanai un ataugšanai. Neskatoties uz miljardu dolāru tirgu, ir pieejami daži pašlaik efektīvi produkti [1].
Matu folikulas pārveidojas augšanas (anagēns), regresijas (katagēns), atpūtas (telogēns) un izkrišanas (eksogēns) periodos [2]. Katagēna laikā daudzām folikulu šūnām tiek veikta ieprogrammēta šūnu nāve (apoptoze) [3], samazinot folikulu izmēru, folikuliem nonākot telogēnā. Reti ciklisku epitēlija cilmes šūnu aktivizēšana, kas atrodas folikulu izliektajā reģionā, nodrošina folikulu atjaunošanos nākamās anagēnas fāzes sākumā [4]. Cilmes šūnu pēcnācēji agrīnā anagēna laikā veido jaunu folikulu matricu, un matu vārpsta un iekšējais saknes apvalks ir iegūti no šīm relatīvi nediferencētajām matricas šūnām [5]. Ir labi zināms, ka matu folikulu izmērs un anagēnas fāzes ilgums nosaka attiecīgi matu stieņa izmēru (diametru) un garumu. Šo ciklisko matu augšanu regulē dažādi augšanas faktori.
Minoksidils, finasterīds un Propecia ir komerciāli pieejami, lai palēninātu matu izkrišanu un atvieglotu matu ataugšanu. Minoksidils ir vazodilatators, kam bija blakusparādība, lai atvieglotumatu augšana[6], kas var būt saistīts ar tā barības vielu piegādes un kālija kanālu atvēršanas aktivitātēm [7,8]. Minoksidils ir efektīvs androgēnas alopēcijas gadījumā, kā arī citas baldness ārstēšanas metodes, lai gan tā efektivitāte izzūd dažu mēnešu laikā pēc ārstēšanas pārtraukšanas. Salīdzinājumam, finasterīds un Propecia, labdabīgas prostatas hiperplāzijas un prostatas vēža ārstniecības līdzekļi, daudzās valstīs ir reģistrēti androģenētiskai alopēcijai (vīriešu tipa baldness). Finasterīds un Propecia ir sintētiski antiandrogēni, kas inhibē II tipa 5- reduktāzi, enzīmu, kas pārvērš testosteronu par dihidrotestosteronu (DHT) papillas šūnās matu folikulu apakšdaļā [9].
Laminaria japonica, Undaria pinnatifida un Cladosiphon okamuranus, kas plaši izplatīti daudzās valstīs, ir izmantoti kā ārstniecības līdzekļi austrumu medicīnā ilgu laiku. Iepriekšējos pētījumos fukoidāns, sulfāta polisaharīdu komplekss, tika ekstrahēts un identificēts no jūraszālēm, un tam ir apstiprināta antioksidatīva, antikoagulatīva, pretvēža un pretiekaisuma iedarbība [10, 11]. Pēc tam tika pierādīta fukoidāna labvēlīgā ietekme uz iekaisuma slimībām, išēmiju, imūnsistēmas disfunkciju un audzējiem [12,13]. No otras puses,Cistanche tubulosaekstrakts (CTE) ir plaši izmantots arī tradicionālajiem medikamentiem Ķīnā. CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)uzlabo asinsriti, pazeminot holesterīna līmeni asinīs [14]. Nesen tika ziņots, ka CTE samazināja audzēja nekrozes faktora (TNF-) un interleikīna -4 (IL-4) veidošanos, kas ir galvenie slāpekļa oksīda (NO) ražošanas faktori iekaisuma ceļā. [15]. Mēs arī parādījām, ka fukoidāns no Laminaria japonica ekstrakta (LJE) un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)sinerģiski mazināja iekaisumu in vitro un in vivo [16]. Konkrēti, ir pierādīts, ka pastāv cieša saistība starp ādas (īpaši asaru dziedzeru) iekaisumu un alopēciju [17]. Tādējādi parādās alopēcijas ārstēšanas pretiekaisuma aspekti [18].
Pamatojoties uz asins plūsmas un iekaisuma uzlabošanas pasākumiem, mēs pētām LJE un CTE kombinēto efektivitāti（Cistanche tubulosa ekstrakts)ieslēgtsmatu augšanaun pamatā esošais(-ie) mehānisms(-i), salīdzinot ar 3 procentiem Minoksidilu (Hyundai Pharmaceutical, Seula, Koreja), labi zināmsmatu augšanapastiprinātājs.
Cistanche tubulosaekstrakts ir labsMatu augšana
Materiāli un metodes
Materiāli
LJE un CTE (Cistanche tubulosaekstrakts)tika iegūti no Misuba RTech Co., Ltd. (Asana, Koreja). Žāvēts Laminaria japonica pulveris tika ekstrahēts attīrītā ūdenī 60oC temperatūrā 24 stundas, filtrēts caur 0,45 μm membrānu, dezinficēts un izsmidzināts.Cistanche tubulosatika ekstrahēts 80 procentu etanolā, dezinficēts, koncentrēts un žāvēts. LJE un CTE (Cistanche tubulosaekstrakts)tika turēti 4oC temperatūrā, sajaukti (1:3) un pirms lietošanas izšķīdināti attīrītā ūdenī un ievadīti iekšķīgi 5 ml/kg tilpumā.
Dzīvnieki
Peļu tēviņi C57BL/6 priekšmatu augšanapētījumā un ICR peļu tēviņi iekaisuma pētījumam tika iegādāti no Daehan Biolink (Eumseong, Koreja) un tika izmitināti telpā ar nemainīgiem vides apstākļiem (23±2ºC; 45-65 procentu relatīvais mitrums; 12-stundu gaisma). -tumšs cikls; 150-300 luksa spilgtums). Granulu barība un attīrīts ūdens bija pieejami ad libitum. Visus eksperimentus ar dzīvniekiem apstiprināja Korejas Čungbukas Nacionālās universitātes (CBNU) Institucionālā dzīvnieku kopšanas un lietošanas komiteja (IACUC), un tie tika veikti saskaņā ar CBNU laboratorijas dzīvnieku pētniecības centra standarta darbības procedūrām (SOP).
Ārstēšana matu augšanai
Pēc anagēnas fāzes apstiprināšanas, novērojot viendabīgi rozā ādas krāsu C57BL/6 peļu muguras ādā (6 nedēļas vecas, n=8/grupa) pēc apgriešanas telogēnā fāzē, mati tika noskūti [1,19 ,20]. No nākamās dienas tika atlasītas peles bez redzamām skrāpējumiem un iekšķīgi
ārstēti ar LJE (18 vai 54 mg/kg), CTE (54 vai 162 mg/kg) vai to maisījumu (18 plus 54 vai 54 plus 162 mg/kg) vienu reizi dienā 21 dienu. Zemās LJE (18 mg/kg) un CTE (54 mg/kg) devas tika iegūtas no aprēķinātajām devām cilvēkam 100 mg/ķermenim (70 kg) un 300 mg/ķermenim pēc ķermeņa masas virsmas laukuma pārvēršanas (Km{14}). } cilvēkam/Km=3 pelei). Lielas LJE un CTE devas（Cistanche tubulosaekstrakts)tika iestatītas 3 reizes, atsevišķi vai kombinācijā, lai novērtētu maksimālo sinerģisko efektu [16]. Minoksidilu (3 procenti, 0,2 ml) lokāli uzklāja vienu reizi dienā uz noskūtas ādas tādā pašā shēmā ar LJE/CTE ārstēšanu.
Aptuvens matu augšanas novērojums
Dienās ar 3-dienu intervālu pēc skūšanās un ārstēšanas laikā peles tika viegli anestēzijas ar dietilēteri, un tika uzņemtas fotogrāfijas no to muguras. Matu ataugšanas attiecība (ataudzētā zona / noskūtā zona) fotogrāfijās tika analizēta, izmantojot datorizētu attēlu analīzes sistēmu (Imageinside, Daejeon, Koreja).
Matu folikulu mikroskopiskā izmeklēšana
14. un 21. dienā peles tika nogalinātas dziļā anestēzijā ar dietilēteri, un tām tika noņemtas muguras ādas [1]. Muguras āda tika sagriezta divās daļās. Formalīnā fiksētas, parafīnā iestrādātas audu sekcijas (5 μm diametrā) no vienas daļas tika iekrāsotas ar hematoksilīna-eozīnu, lai pārbaudītu matu folikulu skaitu un histoloģiskos atradumus. Otra audu daļa tika sasaldēta šķidrā slāpeklī, lai veiktu enzīmu testu un imūntestu.
Enzīmu aktivitātes pārbaude
Ādas audi tika homogenizēti 4 tilpumos fosfāta buferšķīduma (pH 7,4). Homogenātu centrifugēja ar ātrumu 3, 000 apgr./min 20 minūtes, un supernatantu izmantoja -glutamiltranspeptidāzes (-GTP) un sārmainās fosfatāzes (ALP) aktivitāšu noteikšanai, izmantojot p-nitrofenilfosfātu (PNPP)-DEAV. substrāts [1,21].
Cistanche tubulosa
Augšanas faktoru kvantitatīva noteikšana
Epidermas augšanas faktors (EGF) un asinsvadu endotēlija augšanas faktors (VEGF) tika kvantificēti, izmantojot ar enzīmu saistīto imūnsorbcijas testu (ELISA) komplektus (R&D Systems, Mineapolisa, ASV) saskaņā ar ražotāja norādījumiem [1, 22].
Iekaisuma ārstēšana
ICR peles (7 nedēļas vecas, n=8/grupa) tika perorāli ārstētas ar LJE (18 vai 54 mg/kg), CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)(54 vai 162 mg/kg), vai to maisījums (18 plus 54 vai 54 plus 162 mg/kg) vienu reizi dienā 7 dienas [16]. LJE un CTE 1. dienā（Cistanche tubulosaekstrakts)Apstrādājot, pelēm aizmugurē tika subkutāni injicēts 10 ml sterila gaisa, lai izveidotu maisiņu [16, 23, 24]. Pēc 2 un 5 dienām maisiņš tika atkārtoti ievadīts ar 5 ml gaisa. Viena stunda pēc pēdējā LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)Apstrādājot, maisiņā tika ievadīts 1 ml karagināna (1 procents fizioloģiskā šķīdumā; Sigma-Aldrich, Sentluisa, ASV) vai tā nesējs (fizioloģiskais šķīdums).
Eksudātu analīze
Gaisa maisiņš tika mazgāts ar 1 ml auksta fizioloģiskā šķīduma 6 stundas pēc karagināna injekcijas, un tika reģistrēts skalošanas šķidruma neto tilpums [16]. Kopējais iekaisuma šūnu skaits, ieskaitot neitrofilus, monocītus un limfocītus, tika noteikts, izmantojot kolera skaitītāju.
NO un prostaglandīna E2 (PGE2) koncentrācijas tika noteiktas ar Griesa reaģentu (Sigma-Aldrich) un enzīmu imūntestu (EIA), izmantojot attiecīgi Correlate-EIA komplektu (Assay Designs, Ann Arbor, ASV) [16].
Statistiskā analīze
Dati tiek parādīti kā vidējā±standarta kļūda. Statistisko nozīmīgumu noteica ar vienvirziena dispersijas analīzi, kam sekoja posthoc Tukey vairāku salīdzināšanas tests. P vērtības<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">
Rezultāti
Minoksidila (3 procenti), atsauces materiāla, lietošana ievērojami atvieglojamatu augšanaC57BL/6 pelēm, kas gandrīz pilnībā pārklāj (92,4 procentus) no noskūtā laukuma (1., 2.B attēls), salīdzinot ar 29,2 procentiem normālā augšanā (1., 2.A attēls) 21. dienā. Lai gan mazāk efektīva nekā minoksidila lietošana , LJE orālā ārstēšana arī veicinājamatu augšana, kas nodrošina 33,5 un 69,1 procentu pārklājumu attiecīgi 18 un 54 mg/kg (attēls 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)bija arī efektīva, lai uzlabotumatu augšana, sasniedzot 73,6 un 80,4 procentu pārklājumu ar attiecīgi 54 un 162 mg/kg (1., 2. E, 2F attēls). Proti, kombinētā terapija ar lielām LJE devām (54 mg/kg) un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)(162 mg/kg) ievērojami uzlabojamatu augšanano 12. dienas, salīdzināma ar minoksidila iedarbību (1., 2H. attēls), lai gan zemas LJE devas (18 mg/kg) un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)(54 mg/kg) rada sinerģisku efektu tikai agrīnā fāzē (1., 2.G attēls).
1. attēls. Apmatojuma ataugšanas laiks pelēm, kas apstrādātas ar minoksidilu vai Laminaria japonica ekstraktu (LJE) un/vaiCistanche tubulosaekstrakts (CTE). ,
○normāls; ●, Minoksidila (3 procenti ) aplikācija; △, 18 mg/kg LJE; ▼, 54 mg/kg LJE; □, 54 mg/kg CTE; ■, 162 mg/kg CTE; ◇, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; ◆, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrakts).
2. attēls. Reprezentatīvi bruto matu ataugšanas konstatējumi pelēm, kas ārstētas ar minoksidilu vai Laminaria japonica ekstraktu (LJE) un/vaiCistanche tubulosaekstrakts (CTE) 21. dienā.
A, normāls; B, Minoksidila (3 procenti) pielietojums; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrakts); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrakts).
Salīdzinot ar parastajiem matu folikuliem (3.A attēls), Minoksidila lietošana uzlaboja matu folikulu integritāti, parādot lielākus folikulus un biezākas matu stieņus (3.B attēls). Šāda ietekme tika konstatēta arī ar LJE un/vai CTE ārstēto peļu ādām（Cistanche tubulosaekstrakts)(3C-3H attēli). Jo īpaši LJE un CTE kombinētās ārstēšanas matu folikulu stiprinošā efektivitāte (Cistanche tubulosaekstrakts)bija salīdzināms ar minoksidilu.
3. attēls. Reprezentatīvi mikroskopiski konstatējumi par apmatojuma atjaunošanos pelēm, kas ārstētas ar minoksidilu vai Laminaria japonica ekstraktu (LJE) un/vaiCistanche tubulosaekstrakts (CTE) 21. dienā.
A, normāls; B, Minoksidila (3 procenti) pielietojums; C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrakts); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaekstrakts); G, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE
Minoksidila lietošana 14. un 21. dienā palielināja -GTP aktivitāti, kas inducē matu folikulus anagēna fāzē, par 90-120 procentiem, salīdzinot ar normālas ādas līmeni (4. attēls). LJE (54 mg/kg) arī uzlaboja enzīmu aktivitāti, lai gan bija lielas atšķirības. CTE radīja līdzīgu efektu, ievērojami uzlabojot -GTP aktivitāti 14. dienā. Interesanti, ka LJE un CTE kombinēta ārstēšana（Cistanche tubulosaekstrakts)vēl vairāk palielināja enzīmu aktivitāti augstāk nekā tad, ja ekstrakti tika lietoti atsevišķi.
ALP aktivitāte, kas ir kaulu augšanas un angioģenēzes marķieris, ievērojami palielinājās ādā 14. un 21. dienā pēc lokālas minoksidila lietošanas (5. attēls). LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)arī palielināja ALP aktivitāti pēc perorālas lietošanas atkarībā no devas. Proti, fermentu aktivitāte tika sinerģiski uzlabota, kombinējot ārstēšanu ar LJE un CTE.
4. attēls. Minoksidila (MXD, 3 procenti) vai Laminaria japonica ekstrakta (LJE) un/vai iedarbībaCistanche tubulosaekstrakts (CTE) (mg/kg) uz -glutamiltranspeptidāzes (-GTP) aktivitāti 14. (A) un 21. (B) ārstēšanas dienā.
* Būtiski atšķiras no parastās (Nor) kontroles (P<>
5. attēls. Minoksidila (MXD, 3 procenti) vai Laminaria japonica ekstrakta (LJE) un/vai iedarbībaCistanche tubulosaekstrakts (CTE) (mg/kg) uz sārmainās fosfatāzes (ALP) aktivitāti 14. (A) un 21. (B) ārstēšanas dienā.
* Būtiski atšķiras no parastās (Nor) kontroles (P<>
EGF analīzē ir labi zināmsmatu augšanaMinoksidila lietošana uzlaboja EGF līmeni 3,5 reizes salīdzinājumā ar parasto kontroli gan 14., gan 21. dienā (6. attēls). LJE (18 mg/kg) palielināja EGF tikai 21. dienā, savukārt CTE (162 mg/kg) ievērojami palielināja savu ražošanu 14. un 21. dienā. Interesanti atzīmēt, ka LJE un CTE kombinētā ārstēšana（Cistanche tubulosaekstrakts)pat mazās devās uzrādīja izteiktu sinerģisku efektu.
Ārstēšana ar minoksidilu arī palielināja VEGF līmeni par 50-80 procentiem virs kontroles vērtības (7. attēls). Lai gan LJE bija neefektīva, CTE (Cistanche tubulosaekstrakts)radīja ievērojamu uzlabojošu efektu. Turklāt LJE un CTE kombinētā terapija（Cistanche tubulosaekstrakts)uzrādīja sinerģisku aktivitāti agrīnā fāzē 14. dienā.
6. attēls. Minoksidila (MXD, 3 procenti) vai Laminaria japonica ekstrakta (LJE) un/vai iedarbībaCistanche tubulosaekstrakts (CTE) (mg/kg) uz epidermas augšanas faktora (EGF) saturu 14. (A) un 21. (B) ārstēšanas dienā.
* Būtiski atšķiras no parastās (Nor) kontroles (P<>
7. attēls. Minoksidila (MXD, 3 procenti) vai Laminaria japonica ekstrakta (LJE) un/vai iedarbībaCistanche tubulosaekstrakts (CTE) (mg/kg) par asinsvadu endotēlija augšanas faktora (VEGF) saturu 14. (A) un 21. (B) ārstēšanas dienā.
* Būtiski atšķiras no parastās (Nor) kontroles (P<>
Karagināna injekcija ICR peles gaisa maisiņā palielināja eksudāta tilpumu maisiņā 6 reizes par kontroles līmeni (1. tabula). Šādu palielinātu eksudāciju ievērojami mazināja ārstēšana ar LJE (18 un 54 mg/kg) vai CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)(54 un 162 mg/kg). Proti, kombinētā ārstēšana ar LJE un CTE vēl vairāk samazināja eksudāta daudzumu, salīdzinot ar individuālajiem efektiem. Karagināna injekcijas rezultātā krasi palielinājās iekaisuma šūnu skaits: neitrofilu, monocītu un limfocītu kontroles līmenis attiecīgi 34,6, 4,2 un 24,9 reizes (1. tabula). Tomēr LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)ievērojami samazināja iekaisuma šūnas no devas atkarīgā veidā, kurā LJE bija nedaudz pārāka par CTE（Cistanche tubulosaekstrakts). Paredzams, ka sinerģiska iedarbība iekaisuma šūnu infiltrācijā tika sasniegta, vienlaikus lietojot LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts).
Paralēli iekaisuma šūnu infiltrācijai maisiņā NO un PGE2 saturs maisiņā arī krasi palielinājās pēc karagināna injekcijas (1. Salīdzinot ar LJE vieglo iedarbību, CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)ievērojami pazemināja NO koncentrāciju. Kombinēta LJE un CTE ārstēšana（Cistanche tubulosaekstrakts)vēl vairāk samazināja NO līmeni atkarībā no devas. Līdzīgā veidā paaugstināts PGE2 līmenis tika sinerģiski nomākts ar LJE un CTE kombinēto terapiju (1.
Diskusija
Cilvēka galvā ir vidēji 100,{1}} matu folikulu. Dzīves laikā katrs folikuls aug un izkrīt apmēram 20 reizes, katru dienu izkrītot par 100 šķipsnām [25]. Matu izkrišana, tostarp alopēcija un plikpaurība, ir satraucošs stāvoklis vīriešiem un sievietēm, īpaši mūsdienu sabiedrībā. Tāpēc ir ļoti svarīgi izstrādāt jaunas terapijas, kas novērš matu izkrišanu un veicina matu ataugšanu. Šajā ziņā alternatīvā medicīna ir piesaistījusi izmeklētāju interesi.
Ar novecošanu saistītie vīriešu tipa plikpaurības morfoloģiskie, histoķīmiskie un bioķīmiskie aspekti ir atklāti virknē pētījumu par celmu makakiem. Vīriešu tipa plikpaurības gadījumā telogēna fāze bija pagarināta, bet anagēna fāze tika saīsināta. Tādējādi tiek uzskatīts, ka matu izkrišanas uzlabošanai ļoti svarīga ir matu folikulu pagarinājuma saglabāšana, kas notiek no agrīna anagēna līdz vidējam anagēnam [26]. Šajā pētījumā mēs parādījāmmatu augšana- veicinot kombinētās ārstēšanas LJE un CTE darbību（Cistanche tubulosaekstrakts). Vissvarīgākais ir tas, ka kombinētā LJE (54 mg/kg) un CTE (162 mg/kg) recepte uzrādīja izcilu matu ataugšanas aktivitāti, neskatoties uz ekstraktu perorālu ievadīšanu. Konkrēti, kombinētās terapijas efekts bija salīdzināms ar augstas koncentrācijas (3 procenti) attīrīta savienojuma minoksidila uzklāšanu caur ādu, lai gan LJE un CTE aktīvo vielu koncentrācijas.（Cistanche tubulosaekstrakts)ādā pēc perorālas lietošanas netika apstiprināts.
Riteņpeļu ādā -GTP aktivitāte ir izteikta anagēna laikā, bet ievērojami samazināta telogēna laikā [27]. Ādā ferments eksistē tikai matu folikulu ārējā un iekšējā sakņu apvalkā zem tauku dziedzeru līmeņa, kurā nav -GTP [27]. Salīdzinājumam, ALP ir pamanāmi izteikts pilosebaceous vienībās, un aktivitāte palielinās matu ataugšanas zonā. ALP kā angiogēns faktors uzlabo barības vielu piegādi dermas papillām un tādējādi palielina biezumu anagēna laikā [28]. Tomēr tika apstiprināts, ka ALP aktivitāte samazinājās alopēciskā ādā [21]. Mehāniskajā pētījumā atsauces savienojums Minoksidils ievērojami uzlaboja -GTP un ALP aktivitāti, kas nozīmē, ka minoksidils atvieglomatu augšanane tikai izraisot matu folikulu veidošanos
līdz anagēna fāzei, bet arī uzlabojot asins plūsmu ar angioģenēzes palīdzību. Tā kā LJE palielināja ALP aktivitāti, tiek ierosināts, ka LJE ir labvēlīga ietekme uzmatu augšanaar angiogēno potenciālu, kā secināts no iepriekšējā pētījuma, ka fukoidānam, LJE aktīvajai sastāvdaļai, ir asins plūsmu uzlabojoša iedarbība [29]. Salīdzinājumam, CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)uzlaboja gan -GTP, gan ALP aktivitātes, kas liecina par tā ietekmi uz anagēna fāzes indukciju, kā arī asins plūsmas uzlabošanos. Saskaņā ar sinerģisko iedarbību uz -GTP un ALP enzīmiem, tiek uzskatīts, ka, vienlaikus lietojot LJE un CTE, var panākt lielāku matu ataugšanu.（Cistanche tubulosaekstrakts).
Ir labi zināms, ka matu morfoģenēzes un augšanas regulēšanā ir iesaistīti dažādi citokīni un augšanas faktori, tostarp EGF un VEGF [30, 31]. Interesanti atzīmēt, ka no ādas papillas šūnām iegūtiem faktoriem ir ķīmiska iedarbība uz apkārtējām šūnām, kas savukārt veicinamatu augšana[32]. EGF izpaužas saistībā ar matu folikulu attīstību [33,34]. Lai gan gan EGF, gan tā receptoru (EGFR) ekspresija ārējā saknes apvalkā tiek samazināta līdz ar folikulu augšanas pabeigšanu, to ekspresija atjaunojas, kad folikulu šūnas nonāk anagēna fāzē. VEGF ir svarīga loma angioģenēzē iekaisuma reakcijas un audzēja attīstības laikā [35]. Īpaši asinsvadu tīkls ir cieši saistīts ar matu augšanas ciklu [36-38]. Tāpēc tika apstiprināts, ka VEGF gēnu ekspresija mainās atkarībā no cilvēka matu cikla [39].
No šī pētījuma rezultātiem ir paskaidrots, kamatu augšanaMinoksidila veicinošā iedarbība var būt saistīta ar tā potenciāli regulējošo EGF un VEGF, kas veicina folikulu augšanu, kā arī angioģenēzi. Lai gan LJE neietekmēja VEGF ekspresiju, pēc iekšķīgas lietošanas tas palielināja EGF saturu ādā. Salīdzinājumam, CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)bija efektīvs gan EGF, gan VEGF ekspresijā. Jo īpaši LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)radīja aditīvu ietekmi uz augšanas faktoru ekspresiju.
Papildus matu pagarinājumam pēc apstrādes ar minoksidilu, LJE un/vai CTE ievērojami uzlabojās matu folikulu integritāte.（Cistanche tubulosaekstrakts)mikroskopiskajā pārbaudē. Matu izkrišanas un plikpaurības agrīnajā fāzē cilvēkiem un dzīvnieku modeļiem tika traucēta folikulu integritāte un samazināts matu stiebra biezums, savukārt atjaunojošos matiņos atjaunojās folikulu integritāte un stiebra biezums. Interesanti, ka šāda pozitīva ietekme uz matu komponentu integritāti un atjaunošanos tika panākta, iekšķīgi lietojot LJE plus CTE.（Cistanche tubulosaekstrakts), kurā iedarbība bija salīdzināma ar augstas koncentrācijas minoksidila lokālu lietošanu. Tāpēc ir sagaidāms, ka kombinācija iekšķīgai LJE un CTE lietošanai（Cistanche tubulosaekstrakts)Recepšu recepte varētu būt salīdzinoši ērta salīdzinājumā ar minoksidila lietošanu caur ādu.
Peļu alopēcijas modelī bieži sastopama pret steroīdiem jutīga limfocītu infiltrācija ap matu folikulām, kas uzrāda līdzīgu modeli cilvēka alopēcijas imūnterapijai ar asaru dziedzeru iekaisumu [17, 40]. Šajā pētījumā karagināna izraisītu ādas iekaisumu ievērojami mazināja LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)ārstēšana; ti, asinsvadu eksudācija un iekaisuma šūnu infiltrācija tika sinerģiski nomākta. Kvantitatīvā analīzē galvenie iekaisuma mediatori NO un PGE 2 tika būtiski kontrolēti pēc LJE un CTE perorālas lietošanas.Cistanche tubulosaekstrakts). Interesanti, ka, tā kā LJE pretiekaisuma aktivitāte bija augstāka nekā daļēji attīrītam fukoidānam [16], tiek pieņemts, ka LJE papildus fukoidānam var būt arī papildu aktīvā(-ās) viela(-as).
Kopumā rezultāti liecina, ka kombinēta perorāla ārstēšana ar LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)uzlabo matu izkrišanu, regulējot augšanas faktorus un saistītos enzīmu aktivitātes, kā arī daļēji ar pretiekaisuma potenciālu. Tāpēc ir ierosināts apvienot LJE un CTE（Cistanche tubulosaekstrakts)Nepiemērotas klīniskas devas un attiecības varētu būt recepte matu izkrišanas pacientiem.
Cistanche tubulosaekstrakta produkti
Pateicības
Šo pētījumu finansiāli atbalstīja Čunčongas vadošā rūpniecības biroja Ekonomikas reģiona vadošā nozares attīstība, Korejas Tehnoloģiju attīstības institūts (KIAT) un Zināšanu ekonomikas ministrija (MKE), kā arī daļēji Augstas pievienotās vērtības pārtikas tehnoloģiju attīstības programma. , Lauksaimniecības, pārtikas un lauku lietu ministrija (MAFRA; dotācijas numurs 113034-3).
Interešu konflikts
Autori paziņo, ka šo rezultātu publicēšanai nepastāv finansiāls interešu konflikts.
No: "Laminaria japonica un Cistanche tubulosa ekstraktu kombinētās ārstēšanas efektivitāte matu augšanā"Kyungha Shin1# et al
--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24
ATSAUCES
1. Kim JS, Kang BS, Park HJ, Kim DY, Hwang SY, Nam SY, Yun YW, Lee BJ. Augu ekstraktu maisījumu ietekme uz matu atjaunošanos C3H/HeJ pelēm. J Biomed Res 2009; 10(3): 99-108.
2. Paus R, Cotsarelis G. Matu folikulu bioloģija. N Engl J Med 1999; 341(7); 491-497.
3. Cotsarelis G. Matu folikulu: mirst, lai pievērstu uzmanību. Am J Pathol 1997; 151(6): 1505-1509.
4. Cotsarelis G, Sun TT, Lavker RM. Etiķetes saglabājošās šūnas atrodas pilosebaceous vienības izliekuma zonā: ietekme uz folikulu cilmes šūnām, matu ciklu un ādas kanceroģenēzi. Šūna 1990; 61(7): 1329-1337.
5. Oshima H, Rochat A, Kedzia C, Kobayashi K, Barrandon Y. Morfoģenēze un matu folikulu atjaunošana no pieaugušo multipotentām cilmes šūnām. Šūna 2001; 104(2): 233-245.
6. Burton JL, Marshall A. Hipertrichoze minoksidila dēļ. Br J Dermatol 1979; 101(5): 593-595.
7. Meisheri KD, Cipkus LA, Taylor CJ. Minoksidila sulfāta izraisītas vazodilatācijas darbības mehānisms: nozīme palielinātā K plus caurlaidībā. J Pharmacol Exp Ther 1988; 245(3): 751-760.
8. Buhl AE, Waldon DJ, Baker CA, Johnson GA. Minoksidila sulfāts ir aktīvais metabolīts, kas stimulē matu folikulus. J Invest Dermatol 1990; 95(5): 553-557.
9. Kaufman KD, Dawber RP. Finasterīds, 2 5tipa alfa-reduktāzes inhibitors, ārstējot vīriešus ar androģenētisku alopēciju. Ekspertu atzinums par narkotiku izpēti 1999; 8(4): 403-415.
10. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Leathesia difformis fukoidāna frakciju pretvīrusu īpašības. Fitomedicīna 1999; 6(5): 335-340.
11. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Potenciālā antioksidanta un antikoagulantu spēja zemas molekulmasas fukoidāna frakcijām, kas iegūtas no Laminaria japonica. Int J Biol Macromol 2010; 46(1): 6-12.
12. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan uzlabo nieru asinsriti agrīnā nieru išēmijas/reperfūzijas traumas stadijā žurkām. J Physiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
13. Li N, Zhang Q, Song J. No Laminaria japonica Wistar žurkām iegūtā fukoidāna toksikoloģiskais novērtējums. Food Chem Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
14. Šimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH. Ķīniešu tradicionālās neapstrādātas zāles Cistanche tubulosa ekstrakta hipoholesterinēmiskā iedarbība pelēm. Am J Chin Med 2009; 37(6): 1125-1138.
15. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H. No Cistanche tubulosa izolēta akteozīda inhibējošā iedarbība uz ķīmisko mediatoru izdalīšanos un iekaisuma citokīnu ražošanu RBL-2H3 un KU812 šūnās. Planta Med 2010; 76(14): 1512-1518.
16. Kyung J, Kim D, Park D, Yang YH, Choi EK, Lee SP, Kim TS, Lee YB, Kim YB. Laminaria japonica fukoidan un Cistanche tubulosa ekstrakta sinerģiska pretiekaisuma iedarbība. Lab Anim Res 2012; 28(2): 91-97.
17. Chee E, Fong KS, Al Jajeh I, Nassiri N, Rootman J. Asaru dziedzeru iekaisuma saistība ar alopēcija areata. Orbīta 2015; 34(1): 45-50.
18. Brzezinska-Wcislo L, Bergler-Czop B, Wcislo-Dziadecka D, LisSwiety A. Jauni alopēcijas areata ārstēšanas aspekti. Postepy Dermatol Alergol 2014; 31(4): 262-265.
19. Hattori M, Ogawa H. Biochemical analysis ofmatu augšanano novecošanas un enzīmu darbības aspektiem. J Dermatol 1983; 10(1): 45-54.
20. Lee SH, Lee HJ, Baek IJ, Yon JM, Nam SY, Lee BJ, Yun YW, Kim YB, Hwang SY, Hong JT. DREAMMO® galvas ādas losjona iedarbība uzmatu augšanaveicināšana C57BL/6 peļu alopēcijas modelī. Lab Anim Res 2006; 22(1): 91-96.
21. Handjiski BK, Eichmüller S, Hofmann U, Czarnetzki BM, Paus R. Sārmainās fosfatāzes aktivitāte un lokalizācija peles matu cikla laikā. Br J Dermatol 1994; 131(3): 303-310.
22. Cross MJ, Dixelius J, Matsumoto T, Claesson-Welsh L. VEGF receptoru signālu pārraide. Trends Biochem Sci 2003; 28(9): 488-494.
23. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB. Angelica gigas etanola ekstrakta pretiekaisuma iedarbība karagināna-gaisa maisiņa iekaisuma modelī. Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
24. Kim D, Park D, Kyung J, Yang YH, Choi EK, Lee YB, Kim HK, Hwang BY, Kim YB. Houttuynia cordata superkritiskā ekstrakta pretiekaisuma iedarbība karagināna-gaisa maisiņa iekaisuma modelī. Lab Anim Res 2012; 28(2): 137-140.
25. Rebora A. Androģenētiskās alopēcijas patoģenēze. J Am Acad Dermatol 2004; 50(5): 777-779.
26. Shirai A, Ikeda J, Kawashima S, Tamaoki T, Kamiya T. KF19418, jauns savienojums priekšmatu augšanain vitro un in vivo peļu modeļu popularizēšana. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 213-218.
27. Kawabe TT, Kubicek MF, Johnson GA, Buhl AE. Gamma-glutamiltranspeptidāzes aktivitātes izmantošana kā matu cikla un anagēna indukcijas marķiera peles matu folikulās. J Invest Dermatol 1994; 103(1): 122-126.
28. Hamada K, Suzuki K. Bioķīmisko indeksu novērtējums kā matu cikla marķieris C3H pelēm. Exp Anim 1996; 45(3): 251-256.
29. Park SJ, Lee KW, Lim DS, Lee S. Sulfatētais polisaharīds fukoidāns stimulē cilvēka tauku izcelsmes cilmes šūnu osteogēno diferenciāciju. Stem Cells Dev 2012; 21(12): 2204-2211.
30. Danilenko DM, Ring BD, Pierce GF. Augšanas faktori un citokīni matu folikulu attīstībā un riteņbraukšanā: jaunākie ieskati no dzīvnieku modeļiem un klīniskās terapijas iespējas. Mol Med Today 1996; 2(11): 460-467.
31. Ozeki M, Tabata Y. In vivo veicināja peļu matu folikulu augšanu, kontrolējot augšanas faktoru izdalīšanos. Biomateriāli 2003; 24(13): 2387-2394.
32. Fujie T, Katoh S, Oura H, Urano Y, Arase S. Dermas papillas šūnu faktora ķīmiskā iedarbība uz ārējās saknes apvalka šūnām. J Dermatol Sci 2001; 25(3): 206-212.
33. Stenn KS, Paus R. Matu folikulu cikla kontrole. Physiol Rev 2001; 81(1): 449-494.
34. Chapman RE, Hardy MH Intradermāli injicēta un lokāli lietota peles epidermas augšanas faktora ietekme uz merino aitu vilnas augšanu, ādu un vilnas folikulām. Aust J Biol Sci 1988; 41(2): 261-268.
35. Dvoržāks HF, Brauns LF, Detmārs M, Dvoržāks AM. Asinsvadu caurlaidības faktors/asinsvadu endotēlija augšanas faktors, mikrovaskulārā hiperpermeabilitāte un angioģenēze. Am J Pathol 1995; 146(5): 1029-1039.
36. Ellis RA, Moretti G. Asinsvadu modeļi, kas saistīti ar katagenu matu folikulām cilvēka galvas ādā. Ann NY Acad Sci 1959; 83: 448-457.
37. Stenn KS, Fernandez LA, Tirrell SJ. Žurkas vibrisas matu folikulu angiogēnās īpašības ir saistītas ar spuldzi. J Invest Dermatol 1988; 90(3): 409-411.
38. Yano K, Brown LF, Detmar M. Control ofmatu augšanaun folikulu lielumu ar VEGF mediētu angioģenēzi. J Clin Invest 2001; 107(4): 409-417.
39. Lachgar S, Charveron M, Ceruti I. VEGF mRNS vienaldzīgu matu folikulu stadiju sadalījums ar fluorescences in situ hibridizāciju kombinācijā ar konfokālo lāzermikroskopiju. In: Hair Research for the Next Millennium (Van Neste DJJ, ed), Elsevier, Amsterdama, 1996; lpp 407-12.
40. Freyschmidt-Paul P, Sundberg JP, Happle R, McElwee KJ, Metz S, Boggess D, Hoffmann R. Veiksmīga alopēcijai līdzīgu matu izkrišanas ārstēšana ar kontakta sensibilizatoru kvadrātskābes dibutilesteri (SADBE) C3H/HeJ pelēm . J Invest Dermatol 1999; 113(1): 61-68.
