Kontaktpersona: Odrija Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pasts:audrey.hu@wecistanche.com

Yu Lixin Chen Xueqiang Wu Qunfeng Dong Weiqin Guo Songhua Yu Jian Feng Wei Yang Lei Fu Yifeng Li Junjie Luo Cheng

1 Ķīnas Tautas atbrīvošanas armijas 98. slimnīca, Hudžou, Džedzjana, 313000

2 Džedzjanas tradicionālās ķīniešu medicīnas universitāte, Hangdžou, Džedzjana 310053

3 Fuyang tradicionālās ķīniešu medicīnas ortopēdijas slimnīca, Hangdžou pilsēta, Džedzjanas province, Hangdžou 311400, Džedzjana, Ķīna

Abstrakts

Mērķis: novērot ietekmiCistancheūdens ekstraktspar dziedināšanuosteoporotiskslūzumus žurkām un izpētīt tā mehānismu. Metodes: SPF pakāpes SD žurku mātītes tika nejauši sadalītas kontroles grupā, modeļa grupā un ārstēšanas grupā un modelētas saskaņā ar saistītām metodēm. 24 stundas pēc lūzumu modelēšanas kontroles grupai un modeļa grupai tika dota normāla fizioloģiskā šķīduma zonde, bet ārstēšanas grupaiCistancheūdens ekstrakts vienu reizi dienā. Pēc 2 nedēļu un 6 nedēļu iejaukšanās no vēdera aortas tika savāktas asinis, lai noteiktu interleikīnus. TP (IL-1 B) un transformējošā augšanas faktora-B l (TGF-8 1) līmeņi, vienlaikus savākt lūzumu paraugus, veikt mikro-CT skenēšanu pēc fiksācijas, mērīt R0 I callus kaula tilpuma frakcija (BV/TV) un citi saistītie parametri Pēc atkaļķošanas, dehidratācijas un iegulšanas no tā tika izgatavoti vaska bloki lietošanai. Rezultāti: 6 nedēļas pēc osteoporozes modeļa izveides žurkām modeļa grupā un ārstēšanas grupā kaulu minerālais blīvums bija zemāks nekā kontroles grupā (P<0.05), but="" there="" is="" no="" significant="" difference="" between="" the="" treatment="" group="" and="" the="" model="" group.="" although="" the="" bone="" density="" of="" the="" treatment="" group="" is="" still="" lower="" than="" that="" of="" the="" control="" group="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" it="" is="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05). micro-ct="" scan="" shows="" the="" treatment="" group="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" tb.="" n,="" tb.="" th,="" smi="" was="" better="" than="" the="" model="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks="" after="" the="" intervention,="" and="" the="" bv/tv,="" tb.="" sp,="" smi="" parameters="" of="" the="" control="" group="" and="" the="" treatment="" group="" were="" not="" different="" from="" those="" of="" the="" treatment="" group.="" obviously,="" the="" micro-ct="" parameters="" of="" the="" model="" group="" at="" 2-time="" points="" were="" inferior="" to="" the="" control="" group.="" after="" 2="" weeks="" and="" 6="" weeks="" of="" intervention,="" comparing="" the="" serum="" ilt="" b="" and="" tgf-p="" 1="" levels="" of="" the="" 3="" groups,="" it="" was="" found="" that="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" lower="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups="" at="" 2="" weeks.="" at="" 6="" weeks,="" the="" il-1="" p="" levels="" of="" the="" treatment="" group="" were="" higher="" than="" those="" of="" the="" other="" two="" groups.="" the="" control="" group,="" but="" still="" significantly="" lower="" than="" the="" model="" group=""><0.05); in="" terms="" of="" tgf-b="" 1="" level,="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistical="" difference="" between="" the="" control="" group="" and="" the="" control="" group.="" significance.="" conclusion:="" according="" to="" the="" analysis="" of="" bone="" mineral="" density,="" micro-ct="" scan="" parameters,="" and="" serum="" il-1="" b="" and="" tgf-b="" 1="" levels,="" it="" is="" found="" that="" the="" aqueous="" extract="" of="">Cistanchevar veicināt dziedināšanuosteoporotiskslūzumi, un tā mehānisms var būt saistīts ar tā inhibīcijuosteoporotiskslūzumi. Pēc žurku seruma IL-1 B un veicina TGF-8 1 sekrēciju, kas var uzlabot osteoporozi un veicināt lūzumu dzīšanu.

Atslēgvārdi: osteoporotisks lūzums, Cistanche, lūzumu dzīšana, žurka

Osteoporoze ir slimība, kurā samazinās kaulu blīvums, tiek iznīcināta smalkā kaulaudu struktūra un palielinās kaulu trauslums. Ikdienas dzīvē pacienti var izraisīt lūzumus neliela ārēja spēka ietekmē. Tā ir izplatīta klīniska un bieži sastopama slimība. Turklāt šāda veida lūzumi pārsvarā ir gados vecāki pacienti, kas bieži vien ir saistīti ar citām slimībām, un lielākā daļa lūzumu ir sasmalcināti, ar sliktu stabilitāti, un dažreiz notiek lēna vai nesadalāma lūzumu dzīšana, kā arī ir augsts invaliditātes un letalitātes līmenis. Pašlaik to ārstē galvenokārt ar operāciju, manuālu atjaunošanu un pretosteoporozes ārstēšanu. Trūkst mērķtiecīgas ārstēšanas medikamentu pacientiem arosteoporotiskslūzumi. Tradicionālajai ķīniešu medicīnai ir sena vēsture osteoporozes ārstēšanā, un tai ir pozitīva ietekme. Ir pierādīts, ka daudzas tradicionālās ķīniešu zāles uzlabo kaulus. Nabadzība var veicināt arī lūzumu dzīšanu. Rongrong parasti tiek izmantots kā reprezentatīvs līdzeklis nieru yang barošanai, un tam ir aknu un nieru barojoša iedarbība. Tradicionālā ķīniešu medicīna uzskata, ka nieres pārvalda kaulu, un arī lūzumu ārstēšana nav atdalāma no nierēm un būtības. Mūsdienu farmakoloģija ir atklājusi, ka gaļas pelniem ir arī noteikta estrogēna iedarbība. Šajā pētījumā paredzēts izmantot kaulu blīvuma mērījumus, mikro-CT un seruma interleikīna-13 (IL-10), transformējošā augšanas faktora-P KTGF-P 1) līmeņa novērošanu un gaļas trūces pastas ūdens ekstraktu. dziedināšana noosteoporotiskslūzumi žurkām

Cistanche

1 Materiāli un metodes

1.1. Izmēģinājuma dzīvnieki un reaģentu aprīkojums: 52 SPF SD žurku mātītes, kas sver 210~250g, tiek audzētas Džedzjanas tradicionālās ķīniešu medicīnas universitātes dzīvnieku eksperimentu centrā. Komplekss jods, Hangzhou Lonzo Medical Disinfectant Co., Ltd., partijas numurs 20160720; Penicilīns, North China Pharmaceutical Co., Ltd., partijas numurs F3117217; IL-18 komplekts (partijas numurs: 20160715), TGF-8 1 komplekts (partijas numurs: 20160722); Divu enerģiju rentgena kaulu blīvuma skeneris, 0STE0C0RE2; Micro-CT, Skyscan1176O

1.2. IegūšanaCistancheūdens ekstrakts: iemērc zemicistanche(Džedzjanas Universitātes Tradicionālās ķīniešu medicīnas farmaceitiskā fabrika) 10 reizes īpaši tīrs ūdens 0,5 stundas, pannas novārījums 1,5 stundas, ekstrakcija atkārtojas 2 reizes un jauktais ārstnieciskais šķidrais rotācijas tvaicētājs koncentrāts līdz 1,5 g koncentrācijai. /ml un uzglabāt ledusskapī 4 grādu temperatūrā vēlākai lietošanai.

1.3. Modelēšanas sagatavošana: Punkti ir šādi.

1.3. 1 Osteoporozes modelis: žurkas tika adaptīvi audzētas 1 nedēļu pirms modelēšanas un nejauši sadalītas kontroles grupā, modeļa grupā un ārstēšanas grupā ar attiecīgi 16 žurkām, 18 žurkām un 18 žurkām, un katra grupa tika balstīta uz laika punktu 2 nedēļas un 6 nedēļas. Katrs tika sadalīts divās grupās. Gan ārstēšanas grupa, gan modeļa grupa tika anestēzēta ar 1 procentu pentobarbitāla nātrija sāls (0,4 ml/100 g), āda tika anestēzija, dezinficēta, drapēta un āda tika sagriezta. Žurkai tika izņemtas abpusējās olnīcas. Kontroles grupai bija tikai iegriezums. Ne

Olnīcu izņemšana

1.3. 2 Lūzuma modelis: 6 nedēļas pēc osteoporozes modeļa sagatavošanas tiks sagatavots lūzuma modelis. Pēc tam, kad žurkas katrā grupā ir anestēzijas, tiek mērīts vidējā augšstilba kaula minerālais blīvums. , Iegriezums, izveidot vidējā augšstilba kaula šķērseniskā lūzuma modeli, fiksēt to ar 1mm Kiršnera stiepli, sterilizēt un sašūt griezuma ādu

1.4. Zāļu iejaukšanās: pēc modelēšanas tika veikta augšstilba kaula rentgena noteikšana, žurkas, kurām neizdevās sagatavot modeli, tika likvidētas, un pēc modelēšanas intramuskulāri tika ievadītas 80,000 penicilīna vienības, lai novērstu infekciju. 24 stundas pēc operācijas ārstēšanas grupai tika dots gaļas trūces pastas ūdens ekstrakts (koncentrācija 1,5g/ml, lg/kg, reizi dienā). Kontroles grupai un modeļa grupai tika piešķirts vienāds parastā fizioloģiskā šķīduma daudzums.

1.5. Paraugu ņemšana: Žurku paraugi tika savākti 2 un 6 nedēļas pēc iejaukšanās. Pēc 1% pentobarbitāla nātrija anestēzijas no vēdera aortas tika savākti 5-10ml asiņu, lai sagatavotu serumu un uzglabāti -20B ledusskapī. rezerves. Pēc tam žurkas tika nogalinātas un augšstilba kaula lūzumu paraugi tika savākti un ievietoti 10% neitrālā formaldehīdā uz 72 stundām.

1.6 Testēšanas indikatori: Punkti ir šādi.

1.6. 1 Kaulu minerālais blīvums: Visas žurkas pēc osteoporozes modeļa tika anestēzijas pirms lūzuma modeļa, un pēc tam tika mērīts vidējā augšstilba kaula minerālais blīvums. Trīs žurku grupas saņēma paraugus pēc 2 un 6 nedēļu iejaukšanās, un paraugi tika fiksēti 72 stundas, un pēc tam atkal tika mērīts kaulu blīvums.

1.6. 2 Mikro-CT: mikro-CT skenēšana tiek veikta pēc tam, kad paraugs ir fiksēts 72 stundas, ar 200 attēlu virs un zem lūzuma gala kā interesējošo reģionu (R01), skenēšanas leņķis 360 grādi, strāva 555uA, spriegums 42kV, filtrs Al 0. 2mm, izšķirtspēja 8.73um, pēc trīsdimensiju attēla rekonstrukcijas un kallusa analīzes pabeigšanas. Noteikšanas parametri ir šādi: kaulu tilpuma frakcija BV/TV, kaula trabekulārā modeļa faktors (Tb. Pf); strukturālā modeļa indekss (SMI) utt.

1.6.3. Seruma IL-1P un TGF-P1 noteikšana: atkausējiet žurkas serumu no ledusskapja pie -20 grādiem un veiciet noteikšanu soli pa solim saskaņā ar IL-13 un TGF" 1 komplekta instrukcijas.

1.7. Statistikas metodes: apstrādei izmantojiet statistiskās analīzes programmatūru SPSS.19. Eksperimentālie dati ir izteikti kā vidējā ± standarta novirze (G±s) un kaulu minerālais blīvums trīs žurku grupās. Mikro-CT parametri JL-1 P JGF-P 1 līmeņi tiek aprēķināti, izmantojot vienvirziena dispersijas analīzi, un tiek izmantoti pāru salīdzinājumi starp grupām. Pārbaude, pārbaudes līmenis ir P<0.>

2 rezultāti

2.1. Trīs grupu kaulu blīvums: skatīt 1. tabulu.

1. tabula Katras žurku grupas vidējā augšstilba kaulu minerālā blīvuma rezultāti (x±s, g/cm²)

Piezīme: Salīdzinot ar modeļu grupu, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group.△=""><>

2.2. Mikro-CT divdimensiju šķērsgriezums: sagitālais divdimensiju šķērsgriezums atlasa augšstilba kaula gareniskās ass attēlus katrā laika punktā katrā grupā (sk. 1. attēlu) un horizontālo divdimensiju šķērsgriezumu. sadaļā atlasa salīdzināšanai 100. attēlu zem lūzuma līnijas (2. attēls) ), no attēla redzams, ka katras grupas kalluss laika gaitā pakāpeniski palielinājās, bet tas bija plastisks dažādās pakāpēs 6 nedēļas pēc lūzuma; tajā pašā laikā redzams, ka kalluss kontroles grupā bija liels, un kallusa garoza bija bieza un rāpoja pāri lūzuma līnijai pēc 6 nedēļām, savukārt kalluss modeļu grupā Kallusā bija mazāk kaula plkst. 2 nedēļas, un kallusa garoza bija vaļīga pēc 6 nedēļām. Lai gan kallusa apjoms ārstēšanas grupā nebija liels pēc 2 nedēļām, kaula masa bija lielāka nekā modeļa grupā. Kalluss bija labāk veidots pēc 6 nedēļām. Un lūzuma līnija nav acīmredzama.

Kontroles grupa Modeļa grupa Ārstēšanas grupa

1. attēls Katras grupas vidējā augšstilba kaula sagitālais šķērsgriezums

2. attēls Katras grupas vidējā augšstilba kaula horizontālā daļa

2.3. Mikro-CT trīsdimensiju rekonstrukcija: trīsdimensiju kallusa rekonstrukcija augšstilba kaula lūzumā ir parādīta 3. attēlā. No 3. attēla redzams, ka kaluss veidojās gar periostu abos lūzuma galos. līnija 2 nedēļas pēc lūzuma katrā grupā, lūzumu pavedieni katrā grupā joprojām bija skaidri, īpaši modeļa grupā un ārstēšanas grupā, savukārt kontroles grupā kalluss bija biezs un biezs, galvenokārt ar plāksnēm 6 nedēļas pēc lūzuma. . Pārsvarā bija trabekulārie kauli un lūzuma līnija pazuda, savukārt modeļa grupā bija vaļīgi kauli un lūzuma līnija bija izplūdusi, bet ārstēšanas grupā bija vairāk kallusa kaula, regulāra un bieza trabekulāra kaula, un lūzuma līnija nebija acīmredzama.

3. attēls R0I kallusa trīsdimensiju rekonstrukcija lūzuma galā

2.4 Mikro-CT parametri: izmantojiet programmatūru, lai analizētu kallusu lūzuma galā. Saistītos parametrus skatiet 2. tabulā.

2. tabula Katras grupas mikro-CT parametru salīdzinājums (x±s)

Kontroles grupa Modeļa grupa Ārstēšanas grupa

Piezīme: Salīdzinot ar modeļu grupu, *P<0. 05;="" compared="" with="" the="" control="" group.=""><0.>

2.5. Seruma IL-1 P .TGF-P 1 līmenis: skatiet 3. tabulu.

3. tabula IL-1 P JGF-0 1 līmeņu salīdzinājums katrā grupā G±s, n=8)

Piezīme: Salīdzinot ar modeļu grupu, *P<0.05; compared="" with="" the="" control="" group,=""><0.05 0="" 3="">

Pēdējos gados klīniskajā praksē ir pierādīts, ka tradicionālās ķīniešu zāles Yinyangdian, Drynaria fortune un to savienojumi (Qing's Pills, Liuwei Dihuang Pills u.c.) ievērojami uzlabo osteoporozi. Šo ķīniešu medicīnas veidu un savienojumus galvenokārt izmanto aknu un nieru barošanai. Tas atbilst nieres barošanas un muskuļu atjaunošanas principam lūzuma vidējā un vēlīnā stadijā. "Desmit dienas. Mīkstā ekstremitāšu pasta pirmo reizi tika publicēta "Shen Nong's Materia Medica". , Silts raksturs, tai ir nieres barošanas un jaņ stiprināšanas funkcijas, esences un smadzeņu atjaunošana, asiņu barošana un sausuma mitrināšana, kā arī patīkama krāsa un krāsa. dzīves pagarināšana.

Šajā pētījumā ārstēšanas grupas kaulu minerālais blīvums bija augstāks nekā modeļa grupā pēc 2 un 6 nedēļu ilgas iejaukšanās (P<0.05). micro-ct="" scan="" bv/tv="" parameters="" showed="" the="" results="" and="" bone="" mineral="" density="" of="" the="" treatment="" group="" at="" two="" time="" points="" after="" the="" intervention="" the="" measurement="" results="" are="" consistent,="" and="" bv/tv="" is="" an="" important="" indicator="" for="" the="" evaluation="" of="">osteoporotiskslūzumu dzīšana. Tas tieši atspoguļo kallusa kaulu saturu. Tas liecina, ka Rouganrong var veicināt osteoģenēzi. Analīze var būt efektīva gaļas trūces pastā. Sastāvdaļas paaugstina BMP2 regulēšanu, un BMP2 ir viens no TGF-8 saimes locekļiem. Un šo rezultātu apstiprina arī citi Micro-CT skenēšanas parametri (Tb. Spjb. N, Tb. Th. SMI). Tb. Sp un SMI atspoguļo kallusa biomehāniskās īpašības, un vērtības ārstēšanas grupā ir ievērojami labākas nekā modeļa grupā, tas arī liecina, ka Roudongrong uzlabo kaulu zudumu, veicina osteoģenēzi un paātrina lūzumu dzīšanu.

Runājot par seruma IL-1B un JGF-P 1 līmeni, pēc 2 nedēļām un 6 nedēļām ilgas iejaukšanās tika konstatēts, ka ārstēšanas grupas IL-1P līmenis bija zemāks nekā pārējām divām. grupām pēc 2 nedēļām un pēc 6 nedēļām. Lai gan IL-1 B līmenis ārstēšanas grupā bija augstāks nekā kontroles grupā, tomēr ievērojami zemāks nekā modeļa grupā (『<0.05); while="" the="" tgf-p="" 1="" level="" of="" the="" treatment="" group="" was="" higher="" than="" the="" model="" group="" and="" the="" control="" group="" at="" 2="" and="" 6="" weeks,="" and="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" from="" the="" control="" group="" the="" level="" of="" il-1="" p="" directly="" affects="" the="" differentiation="" and="" activity="" of="" osteoclasts.="" an="" increase="" in="" its="" level="" will="" promote="" bone="" resorption="" and="" inhibit="" the="" proliferation="" and="" differentiation="" of="" osteoblasts.="" jhtgf-p="" 1="" is="" closely="" related="" to="" the="" proliferation,="" differentiation,="" and="" migration="" of="" osteoclasts.="" it="" has="" the="" effect="" of="" promoting="" cartilage="" and="" bone="" callus="" formation="" ⑵="" and="" accelerating="" the="" shaping="" of="" bone="" callus.="" this="" suggests="" that="">Cistanchevaruzlabot kaulu zudumu, veicina osteoģenēzi un paātrina lūzumu dzīšanu. Tas var samazināt IL-13 līmeniosteoporotiskslauzt žurkas un kavēt lūzumu. Tiek sasniegta kaulu šūnu aktivitāte; turklāt tas var būt saistīts arī ar to, kaCistanchevar paaugstināt TGF-B 1 līmeni lūzumu žurkām, veicināt osteogēnu diferenciāciju un kalusa nobriešanu un veidošanu.

Kopumā, pamatojoties uz kaulu minerālā blīvuma, mikro-CT skenēšanas parametru un seruma IL-1 P, TGF"1 līmeņa analīzi, tika konstatēts, ka ūdens ekstraktsCistanchevaruzlabot kaulu zudumuunveicināt osteoporozes izraisītu lūzumu dzīšanu. Mehānisms var būt saistīts ar to. Tas var kavēt seruma ILT 8 sekrēciju un veicināt TGF-B 1 sekrēciju žurkām pēcosteoporotiskslūzumus, tādējādi uzlabojot osteoporozi un veicinot lūzumu dzīšanu.

4 Atsauces

[1] Ma Yuanzheng, Wang Yipeng, Liu Qiang u.c. Vadlīnijas osteoporozes diagnosticēšanai un ārstēšanai gados vecākiem cilvēkiem Ķīnā (2018) [J], Chinese Journal of Osteoporosis, 2018, 24(12): 1541-1567.

[2] Zhu Gang, Sun Haibin, Xu Gang u.c. Gaļas trūces spirta ekstrakta terapeitiskā iedarbība un mehānisms žurkām ar osteoporozi ar olnīcu izņemšanu [J]. Jilin University Journal (Medicine Edition), 2018, 44(1): 68-72.

[3] Karvande A, Khedgikar V, Kushwaha P u.c. Dalbergia sissoo serdes ekstrakts veicina lūzumu dzīšanu un tā pielietojumu olnīcu izņemšanas izraisītām osteoporotiskām žurkām [J]. Journal of Pharmacy and Pharmacology, 2017, 69(10): 1381-1397.

[4]Kevins 0Nīls, Kristofers MS, Nikolass AM u.c. Mikrodatortomogrāfijas novērtējums lūzumu dzīšanas progresēšanai pelēm[j]. Bone, 2012, (6): 1357-1367.

[5] Yao Xinmiao, Shi Xiaolin, Wang Jian u.c. Ekspertu vienprātība par primārās osteoporozes pakāpenisku diagnostiku un ārstēšanu ar tradicionālo ķīniešu medicīnu Džedzjanas provincē (2017) [J], Zhejiang Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 53(4): 237- 241.

[6] Ma Meng, Džan Džiguo, Ma Sjaohui. Pētniecības progress osteoporozes profilaksē un ārstēšanā, izmantojot vienu un saliktu ķīniešu medikamentu [J]. Ķīnas medicīnas rokasgrāmata, 2018, 20(8) =477-481.

[7] Zhang Yuequan, Zheng Danhong, Xu Jianfeng u.c. Tuksneša gaļas ģimenes biezeņa ietekme uz BMP-2 proteīna ekspresiju strauji novecojošām osteoporozes pelēm[J]. Ningxia Medical Journal, 2014, 36(12): 1114-1116