HPLC ehinakozīda noteikšana Cistanche Cistanche

HPLC ehinakozīda noteikšana Cistanche Cistanche

Plašāka informācija:ali.ma@wecistanche.com

Mērķis:HPLC noteica daudzumuehinakozīdsiekšāCistanchesasmalcina šķidrā slāpekļa stāvoklī, kā arī dabiski kaltētā stāvoklī, salīdzinot tosavvaļas cistancheunmākslīgi kultivēta Cistanche.

Metodes:tika izmantota lc{{0}}HPLC sistēma (Shimadzu, Japāna). Kolonna bija YMC inertsil ods-sp (4,6 mm × 150 mm, 5 μm; YMC Co Ltd, Japāna); Kustīgā fāze: acetonitrils-metanols -1 procenti skudrskābes (10:15:75); Detekcijas viļņa garums 334 nm; Plūsmas ātrums 0,7 mg · ml-1. Kolonnas temperatūra 30°C.

Rezultāti:dažādiem apstrādes apstākļiem bija ļoti skaidra ietekme uz ehinakozīda saturu, un parasti ehinakozīda līmenis Cistančes zemē šķidrā slāpeklī bija augstāks nekā zemē dabīgos gaisa žāvētos apstākļos; Savvaļas aktīvās sastāvdaļas satursCistanchebija daudz augstāka nekā mākslīgā kultūra.

Noklikšķiniet uz Cistanche ekstrakta pulvera produktiem

Cistanche ir apdraudēta suga, parazitārs augs, kas apdzīvo Clostridium, Salix rubrum saknes. Ķīnā Cistanche galvenokārt tiek izplatīts Iekšējā Mongolijā, Ningsijā, Gansu un Sjiņdzjanā, un tam ir lieliska "tuksneša žeņšeņa" reputācija, kam ir liela ārstnieciska vērtība. Tās galvenās zāļu sastāvdaļas ir feniletanola glikozīdi, kurus atkarībā no to aizvietotājiem var iedalīt ehinakozīdos, lapu kohozīdos, cistančos un citos. Starp tiem ehinakozīdam ir uzlabota seksuālā funkcija, antioksidants un brīvo radikāļu attīrīšanas efekts, taču tam ir arī zināma anti-apoptotiska iedarbība. Kopš 20. gadsimta 80. gadiem dabisko produktu atdalīšanā plaši tiek izmantota HPLC tehnoloģija, kas nodrošina vienkāršu un ātru metodi feniletanola glikozīdu atdalīšanai. Tika izvēlēta HPLC metode, lai analizētu savvaļas un mākslīgi kultivētās Cistanche galvenās aktīvās sastāvdaļas Cistanche saturu dažādos augšanas periodos, nodrošinot zinātnisku pamatojumu Cistanche racionālai attīstībai un izmantošanai un tās kvalitātes efektīvai novērtēšanai.

Instrumenti un reaģenti

Shimadzu, Japāna, lc{0}}HPLC aparāts, lc-20ar tandēma dubultvirzuļa sūkni, cto-20kolonnas krāsns, spda-20UV Viss divu viļņu garuma detektors; Kunshan kq-100 ultraskaņas tīrītājs; Acetonitrils (hromatogrāfiski tīrs, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); Metanols (hromatogrāfiski tīrs, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); skudrskābe (hromatogrāfiski tīra, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); destilēts ūdens

Kontrole: ehineozīds, saturs ir lielāks vai vienāds ar 98,43 procentiem (Shanghai Yuanye Bio Technology Co., Ltd.).

Pieci Cistanche paraugi: mākslīgi stādīti vienu gadu ar šādu Cistanche, mākslīgi stādīti Cistanche, mākslīgi žāvēti Cistanche, savvaļas Cistanche un mākslīgi stādīti vairāk nekā trīs gadus ar Cistanche.

2 metodes un rezultāti

2.1. hromatogrāfisko apstākļu noteikšana

Lai atdalītu izmērītā ehineozīda pīķi LC hromatogrammā no citām vielām, kā arī kontrolētu sūkņa spiedienu un laika grafiku, lai tas būtu piemērotā diapazonā, tika veikta hromatogrāfijas apstākļu eksperimentālā modifikācija, un pēc plkst. optimizācijas eksperimentos ar mobilo fāzi, tika secināts, ka jo augstāka temperatūra, jo īsāks aiztures laiks un mazāka koncentrācija, jo īsāks sūkņa spiediens un mazāks aiztures laiks, bet pīķa augstums kļuva mazāks, kas bija nelabvēlīgi mērīšana. Visbeidzot tika noteikts, ka kustīgā fāze ir acetonitrila-metanola -1 procentu skudrskābe (10:15:75), noteikšanas viļņa garums 334 nm, plūsmas ātrums 0,7 ml/min un kolonnas temperatūra. 30 ° C, atbilstoši objektīviem istabas temperatūras apstākļiem un sūkņa maksimālajam gultņa spiedienam, kā rezultātā tika iegūta bagātīga informācija ar asām pīķu formām un labu sastāvdaļu atdalīšanu.

2.2. kolonnu noteikšana

YMC-Inertsil ODS-SP (4,6 mm × 150 mm, 5 μm; YMC Co Ltd, Japāna).

2.3. eksperimentālā šķīduma sagatavošana

2.3.1. standartšķīdumu sagatavošana

Tika precīzi nosvērts atbilstošs ehineozīda standarta daudzums un pievienots kustīgās fāzes acetonitrila-metanola -1 procentu skudrskābe (10:15:75), lai iegūtu 0.0 6 mg · ML - 1, 0.05 mg · ML {{1{{20}}}}, 0,04 mg · ML - 1 , 0,03 mg · ML - 1, 0,02 mg · ML - 1, 0,01 mg · ML - 1 un 0,005 mg · ML - 1 ehinakozīda standarta šķīdumi.

2.3.2. testa šķīduma sagatavošana

Atbilstošs daudzums mākslīgi iestādītas svaigas Cistanche (līdz viena gada), mākslīgi svaigas Cistanche un savvaļas svaigas Cistanche tika samaltas pulverī, izmantojot javu šķidrā slāpekļa slānī; Tāpat atbilstošs daudzums iepriekšminēto 3 Cistanche tika sagriezts blokos, dabiski žāvēts ēnā, un pēc žāvēšanas tas tika sasmalcināts un samalts pulverī. Mākslīgā sausā cistanche un savvaļas sausā cistanča trīs gadu laikā tika samalta tieši pulverī. Paņēma 0,5 g iepriekš sagatavotā Cistanche pulvera un ievietoja centrifūgas mēģenē, pievienoja 25 ml kustīgās fāzes, nosvēra un mērcē 30 minūtes, 40 minūtes apstrādāja ar ultraskaņu, atdzesē un pēc tam vēlreiz nosvēra, lai kompensētu trūkstošo svaru ar kustīgo fāzi, sakrata un centrifugēja, un supernatants tika ņemts 0,45 μM mikroporainās filtra membrānas filtrēšanai.

2.4 regresijas līkņu diagrammas ehinakozīda standarta paraugam

Sagatavotie ehineozīda standarta paraugi tika ievadīti LC aparātā atsevišķi, un kontroles koncentrācija (mg · L{{0}}) tika izmantota kā abscisa, un atbilstošie pīķu laukumi tika ordinēti, lai attēlotu standarta līkne, iegūstot regresijas vienādojumu: y=66 867 100x-46 360.83, R2=0.98637, kas parādīja ehineozīdu 0,1 ~ 1,2 ug labā lineārā sakarībā.

3 Diskusijas

Ehinakozīds ir viena no galvenajām Cistanche aktīvajām sastāvdaļām, kas var labi atspoguļot Cistanche farmakoloģiskās iedarbības ķīmisko pamatu, padarot ārstnieciskā materiāla kvalitātes novērtējumu un tā farmakoloģisko iedarbību atbilstošu un uzlabojot Cistanche kvalitātes novērtējuma atbilstību.

Atšķirīgie apstrādes apstākļi nepārprotami ietekmēja ehinakozīda saturu, un parasti Ehinakozīda līmenis Cistančes zemē šķidrā slāpeklī bija augstāks nekā zemē, kas tika kaltēts dabiski gaisā. Parastā žāvēšana gaisā samazināja ehineozīda daudzumu, kas varētu būt patērēts gaisa žāvēšanas laikā vai pārveidots. Lai novērstu aktīvās vielas satura samazināšanos un garantētu Cistanche efektivitāti, jāizvēlas atbilstoša ārstēšana.

Konsekventi lielākā daļa uzskatīja, ka Cistanche mākslīgā audzēšanas vide, kā arī augšanas paradumi nav atšķirami no savvaļas, bez kvalitātes atšķirībām, uzsvaru liek tikai uz ražu un neanalizēja kvalitāti. Šis pētījums parādīja, ka mākslīgi kultivētā Cistanche ehinakozīda daudzums bija mazāks nekā savvaļas Cistanche ehinakozīda daudzums. Visaugstākais bija {{0}},3360 procenti savvaļas cistanche un zemākais bija 0.007 0 procenti mākslīgo cistanču. Tāpēc tas joprojām ir jāpēta audzēšanas tehnoloģijā, lai uzlabotu aktīvo vielu saturu.

Cistanche kvalitāte ir atkarīga no tā aktīvās sastāvdaļas ehinakozīda daudzuma, kam savukārt ir cieša saistība ar sezonu, laiku un ražas novākšanas metodi, tāpēc, novācot Cistanche, jāņem vērā aktīvās sastāvdaļas uzkrāšanās statuss un izaugsmes un attīstības posms. Apsveriet gan kvalitāti, gan ražu.

Šajā rakstā minētā metode ehineozīda noteikšanai ir vienkārša, precīza, reproducējama un precīza. Noder Cistanche noteikšanai.