Abstract:Šis pētījums tika veikts, lai noskaidrotu cikloheterofilīna inhibējošo ietekmi uz melanīna sintēzi. Lai noskaidrotu cikloheterofilīna inhibējošo ietekmi uz B16F10 šūnu līniju, tika izmērīta šūnu dzīvotspēja, ribonukleīnskābes (mRNS) ekspresijas, tirozināzes aktivitātes tests un melanīna ražošanas tests. Tika noteikta cikloheterofilīna ietekme uz ar tirozināzi saistītā proteīna 1 (TYRP1)/TYRP2/tirozināzes (TYR)/ar mikroftalmiju saistītā transkripcijas faktora (MITF) mRNS ekspresiju un melanīna saturu. Kvantitatīvā reāllaika RT-PCR parādīja, ka cikloheterofilīns samazināja TYRP1/TYRP2/TYR/MITF gēnu mRNS ekspresijas līmeni un melanīna ražošanas saturu nekā ar -MSH apstrādātās B16F10 šūnas. Tirozināzes aktivitātes tests atklāja, ka cikloheterofilīns samazināja melanīna ražošanu B16F10 šūnās. Šie dati liecina, ka cikloheterofilīns palielina balināšanas efektu B16F10 šūnās; tādējādi cikloheterofilīns ir spēcīga sastāvdaļa ādas balināšanai. Tādējādi būtu jāpēta turpmāki pētījumi par cikloheterofilīna darbības mehānismu funkcionālo materiālu izstrādei.

Saskaņā ar attiecīgiem pētījumiem cistanche ir izplatīts augs, kas pazīstams kā "brīnumaugs, kas pagarina dzīvi". Tās galvenā sastāvdaļa ir cistanozīds, kam ir dažādi efekti, piemēram, antioksidants, pretiekaisuma līdzeklis un imūnsistēmas funkciju veicināšana. Mehānisms starp cistanche un ādas balināšanu slēpjas cistanche glikozīdu antioksidanta iedarbībā. Melanīns cilvēka ādā rodas tirozīna oksidācijas rezultātā, ko katalizē tirozināze, un oksidācijas reakcijā ir nepieciešama skābekļa līdzdalība, tāpēc skābekļa brīvie radikāļi organismā kļūst par svarīgu faktoru, kas ietekmē melanīna veidošanos. Cistanche satur cistanozīdu, kas ir antioksidants un var samazināt brīvo radikāļu veidošanos organismā, tādējādi kavējot melanīna ražošanu.

Noklikšķiniet uz Kā lietot Cistanche

Vairāk informācijas:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

1. Ievads

Ādas krāsu nosaka hemoglobīns asinīs, melanīna pigments epidermas slānī un -karotīns zemādas audos. Tostarp ādas krāsu galvenokārt nosaka melanīna pigmenta daudzums un sadalījums [1]. Melanīns ir pigments, kas sintezēts no melanosomas melanocītos, kas atrodas bazālajā slānī. Tas absorbē vai izkliedē ultravioletos (UV) starus, un tam ir labvēlīga funkcija, lai nomāktu ādas šūnu vai ādas audu bojājumus. Tomēr pārmērīga melanīna uzkrāšanās var izraisīt plankumus, vasaras raibumus un pigmentāciju. Ir zināms, ka tas izraisa hiperpigmentāciju [2,3].

Melanīna pigments ir reprezentatīvs kairinātājs, kas izraisa eksogēnu novecošanos. To ražo melanocītu melanoģenēze, kas ir pakļauti UV stariem, un tam ir labvēlīga funkcija aizsargāt ādu no UV stariem, padarot ādas krāsu tumšāku. Melanīna pigments sastāv no eumelanīna (melns) un feomelanīna (sarkanbrūns) [4,5]. Melanīnu ražo, par substrātu izmantojot L-tirozīnu, aminoskābes veidu, un izmantojot L-DOPA (3,4-dihidroksifenilalanīnu), un tālāk oksidē par DOPA-hinonu ar galveno enzīmu tirozināzi (TYR), ar tirozināzi saistītais proteīns -1 (TYRP1) un TYRP2. Sulfhidrilgrupu klātbūtnē DOPA-hinons tālāk tiek oksidēts par sarkandzeltenu feomelanīnu. Kad sulfhidrilgrupas ir izsmeltas, DOPA-hinons tiek arī dekarboksilēts, oksidēts un katalizēts par eumelanīnu [4,5]. Tirozināzes enzīms ir galvenais enzīms, kas ir atbildīgs par melanīna ražošanu, un ir zināms, ka lakricas ekstrakts, japāņu ozola ekstrakts, arbutīns un kojskābe, kas ir reprezentatīvi balināšanas materiāli, kavē tirozināzes enzīma aktivitāti [6,7]. Jo īpaši arbutīnam ir nozīme tirozināzes aktivitātes inhibēšanā, konkurētspējīgi reaģējot ar L-tirozīnu, kas ir melanīna izejviela, un kojskābi, kas saistīta ar tirozināzes aktīvo vietu ar Cu2 plus . Ir zināms, ka kojskābei un arbutīnam ir spēcīga balinoša iedarbība, taču ir ziņots par drošības problēmu blakusparādībām, piemēram, ādas kairinājumu [8, 9]. Tiek veikti daudzi pētījumi, lai atklātu jaunus efektīvus materiālus, piemēram, dabīgu funkcionālo materiālu izstrādi [8,9].

Cikloheterofilīns (C30H30O7), prenilflavona veids, bagātīgi atrodas Artocarpus heterophyllus, un ir ziņots, ka tam piemīt farmakoloģiskas un bioloģiskas funkcijas, tostarp pretiekaisuma, prettrombocītu aktivitāte un antioksidanta efektivitāte [10–13]. Turklāt ir ziņots, ka tam ir antioksidanta un pretnovecošanās iedarbība uz cilvēka ādas fibroblastiem, ko izraisa UV-A [14,15].

Ir ziņots, ka cikloheterofilīns ir efektīvs dažādās slimībās, taču nav pētījumu par cikloheterofilīna izraisīto melanīna ražošanas ietekmi. Šajā pētījumā es pārbaudīju cikloheterofilīna ietekmi uz marķieru TYRP1, TYRP2, TYR un MITF ekspresiju B16F10 šūnās, melanomas šūnu līnijā, kas iegūta no pelēm un kas saistīta ar melanīna ražošanas mehānismu.

2. Rezultāti un diskusija

Tika veikts CCK{{0}} tests, lai noteiktu cikloheterofilīna citotoksicitāti B16F10 šūnu līnijā. Lai noteiktu šūnu dzīvotspēju, tika pievienotas dažādas cikloheterofilīna koncentrācijas (1. attēls). Apstrādājot ar koncentrāciju 20 µg/ml vai vairāk, tika apstiprināts, ka B16F10 šūnu izdzīvošanas rādītājs ievērojami samazinājās, salīdzinot ar kontroles grupu. Kad tika pievienots cikloheterofilīns ar koncentrāciju 10 µg/ml, B16F10 šūnu izdzīvošanas rādītājs bija līdzīgs kontroles grupas izdzīvošanas rādītājam. Tādējādi papildu eksperimentos tika pievienots cikloheterofilīns 10, 1 un 0,1 µg/ml koncentrācijā.

Tirozināzes enzīms reaģē ar L-tirozīnu, veidojot L-DOPA, un L-DOPA beidzot ražo melanīna pigmentu caur DOPAhinonu ar tirozināzi, kas ir pazīstama kā galvenais enzīms, kas regulē melanoģenēzi [4,5]. Šajā eksperimentā kojskābe tika izmantota kā pozitīva kontrole, lai novērtētu tirozināzes enzīma aktivitātes inhibīcijas pakāpi. Tirozināzes enzīma aktivitātes inhibīcijas pakāpi apstiprināja apstrāde ar cikloheterofilīnu koncentrācijās 10, 1 un 0,1 µg/mL. Tika apstiprināts, ka cikloheterofilīns no koncentrācijas atkarīgā veidā kavē tirozināzes enzīma aktivitāti (2. attēls). Grupās, kas apstrādātas ar cikloheterofilīnu ar koncentrāciju 10, 1 un 0,1 µg/ml, tika apstiprināts, ka enzīma tirozināzes inhibējošā iedarbība bija attiecīgi 58,0, 27,4 un 16,9 procenti.

UV stari stimulē keratinocītus epidermā, lai izraisītu melanocītus stimulējošā hormona (-MSH) ekspresiju, hormonu, kas stimulē melanocītus un tiek izdalīts ārpus šūnas, un izdalītais -MSH stimulē melanocītus. Saistoties ar melanokortīna 1 receptoru (MC1R), tas izraisa signālu pārraidi, kas saistīta ar melanīna sintēzi šūnā, izraisot melanīna pigmenta veidošanos [5]. Šajā eksperimentā, lai izraisītu melanīna ražošanu B16F10 šūnās, 200 nM -MSH tika izmantots, lai izraisītu melanīna ražošanu B16F10 šūnās [16]. Reāllaika RT-PCR TYRP1, TYRP2, TYR un MITF gēnu ekspresijas līmeņiem, kas ir marķieri, kurus palielina ārstēšana ar -MSH, tika noteikta ar cikloheterofilīna apstrādi ar -MSH apstrādātajās B16F10 šūnās. B16F10 šūnas tika apstrādātas ar cikloheterofilīnu, un marķiera ekspresija tika apstiprināta, izmantojot reāllaika RT-PCR. Rezultātā tika apstiprināts, ka TYRP1, TYRP2, TYR un MITF ekspresijas tika ievērojami samazinātas grupā, kas ārstēta ar cikloheterofilīnu, salīdzinot ar grupu, kas ārstēta ar -MSH. Konkrēti, eksperimentālajā grupā, kas tika ārstēta ar 10 µg/ml cikloheterofilīna, TYRP1, TYRP2, TYR un MITF gēnu ekspresija samazinājās attiecīgi par 53,3, 26,6, 58 un 34 procentiem (3. attēls). Eksperimentālajā grupā, kas tika ārstēta ar 1 µg/ml cikloheterofilīna, tika apstiprināts, ka marķieru ekspresija bija ievērojami samazināta, un TYRP1 un TYRP2 gēnu ekspresija bija līdzīgi samazināta grupā, kas tika ārstēta ar cikloheterofilīnu ar 0,1 µg/ml.

Pēc tam, kad tika apstiprināts, ka ārstēšana ar cikloheterofilīnu samazināja ar melanoģenēzi saistītā marķiera mRNS ekspresijas līmeni, tika apstiprināts melanīna pigmenta ražošanas ātrums, lai noteiktu, vai melanīna pigmenta ražošana B16F10 šūnās ir būtiski samazināta (4. attēls). . Tika novāktas B16F10 šūnu līnijas, kas apstrādātas ar cikloheterofilīnu attiecīgi 10, 1 un 0,1 µg/ml koncentrācijā, un tika apstiprināta melanīna ražošanas pakāpe. Rezultātā tika apstiprināts, ka melanīna pigmenta veidošanos ievērojami samazināja cikloheterofilīns koncentrācijās 10 un 1 µg/mL (4.A attēls). Turklāt tika apstiprināts, ka melanīna pigmenta ražošana ar cikloheterofilīnu ārstētā stāvoklī ir samazināta salīdzinājumā ar kontroles grupu (4.B attēls). Kad tika pievienots 10 un 1 µg/ml cikloheterofilīna, melanīna pigmenta ražošanas ātrums samazinājās attiecīgi par 44,6 un 37,8 procentiem, kas bija ievērojami samazināts salīdzinājumā ar kontroles grupu (4.B attēls). Šie rezultāti parasti atbilst reāllaika RT-PCR eksperimentālajiem rezultātiem ar melanoģenēzi saistīto marķieru mRNS ekspresijas līmeņiem.

Ir zināms, ka antioksidanti, piemēram, askorbīnskābe, ir nozīmīgs balināšanas materiāls, kas kavē melanīna pigmentu sintēzi, reducējot DOPAhinonu, kas ir starpprodukts eumelanīna ražošanas procesā, līdz L-DOPA [16,17]. Ir ziņots, ka cikloheterofilīnam ir arī antioksidanta iedarbība [11,12]. Ir pierādīts, ka cikloheterofilīns var efektīvi balināt šo antioksidantu. Apstiprinot antioksidanta iedarbību in vitro, izmantojot šo DPPH radikāļu attīrīšanas testu, tika apstiprināts, ka tam ir antioksidanta iedarbība, kas ir salīdzināma ar askorbīnskābes iedarbību, kas ir pozitīva kontrole augstā cikloheterofilīna koncentrācijā (5. attēls). Nākotnē būtu jāveic turpmāki pētījumi par cikloheterofilīna antioksidatīvo iedarbību melanocītos un antioksidantu enzīmu, piemēram, katalāzes, SOD1, SOD2 un SOD3, ekspresiju.

3. Materiāli un metodes

3.1. Eksperimentālie materiāli un šūnu kultūra

B16F10 šūnu līnija tika iegādāta no Korean Cell Line Bank (Koreja), un šūnu barotne bija 10% liellopu augļa seruma (FBS, SFBU-0500, Equitech-bio, Kerrville, TX, ASV) Dulbecco modificētajā Ērgļa barotnē (DMEM). , LM 001–05, Velgene, Kjonsansi, Koreja) un tika pievienots 1 procents penicilīna/streptomicīna (Gibco, 15140–122, Waltham, MA, ASV). Šūnas tika kultivētas inkubatorā pie 37 ◦C un 5 procentiem CO2 [16]. Šajā eksperimentā izmantotais cikloheterofilīns tika ekstrahēts no Artocarpus heterophyllus, izmantojot DMSO, un iegādāts no ChemFaces Co. (CFN97748, Vuhana, Ķīna, tīrība ir lielāka vai vienāda ar 98 procentiem).

3.2. Šūnu dzīvotspējas pārbaude Šūna

dzīvotspēja tika novērtēta ar CCK{0}} šķīdumu (šūnu skaitīšanas komplekts; EZ−3000, EZ-Cytox, Seula, DoGen). B16F10 šūnu līnijas tika iesētas barotnē ar blīvumu 2 × 104 šūnas / 96 iedobju plāksnēs. Pēc 24 stundām tika pievienots cikloheterofilīns (CFN97748, Chemfaces). B16F10 šūnu līniju, kas apstrādāta ar cikloheterofilīnu, inkubēja 24 stundas un pievienoja CCK-8 šķīdumu 30 minūtes 37 ◦C inkubatorā. Absorbcija tika mērīta pie 450 nm, izmantojot mikroplašu lasītāju (Epoch, Winooski, VT, ASV, BioTek), un šūnu dzīvotspēja tika aprēķināta, pamatojoties uz kontroles grupas absorbciju bez šūnām [16].

3.3. DPPH tests

3.4. In vitro sēņu tirozināzes aktivitāte

3.5. Kvantitatīvā reāllaika reversās transkripcijas-polimerāzes ķēdes reakcija (Q-RT-PCR)

Kopējā RNS tika izolēta, izmantojot Trizol (15596018, Carlsbad, CA, ASV, Thermo Fisher Scientific). RNS koncentrācija tika noteikta spektrofotometriski (BioTek). Četri mikrogrami RNS tika reversi transkribēti cDNS, izmantojot ReverTra Ace® reversās transkripcijas komplektu (Toyobo, FSQ101, Osaka, Japāna). Reversā transkripcija tika apturēta, pievienojot Tris-EDTA buferšķīdumu (pH 8, 0) kopā 200 µL cDNS šķīduma. TaqMan® Gene Expression Assay komplekti tika iegādāti no Applied Biosystems. Q-RT-PCR tika veikta saskaņā ar ražotāja norādījumiem. Īsumā, 20 µL Q-PCR maisījuma saturēja 10 µL 2 × TaqMan Universal Master Mix (Applied Biosystems, Foster City, CA, ASV), 1 µL 20 × Taqman ekspresijas testu (Applied Biosystems) un 50 ng cDNS. Q-PCR maisījums tika reaģēts pie 95 ◦ C 20 s un 40 reizes cikliska reakcija (95 ◦ C 1 s un 60 ◦ C 20 s) ar StepOnePlus sistēmu (Applied Biosystems). Gēnu identifikācijas numuri TaqMan ekspresijas testam, ko izmanto Q-RT-PCR analīzēs, ir parādīti 1. tabulā. Cilvēka GAPDH (Applied Biosystems) tika izmantots, lai normalizētu dažādu paraugu cDNS daudzumu variācijas.

3.6. Melanīna konkursa tests

Lai izmērītu melanīna pigmenta daudzumu, Hosoi metode bija daļēji modilauks [17]. Pavisam 1 × 105 B16F10 šūnas tika inokulētas 60 mm audu kultūras traukā. Pēc šūnu kultivēšanas 24 stundas katrā koncentrācijā 72 stundas pievienoja 200 nM -melanocītu stimulējošā hormona (-MSH; M4135, Sigma-Aldrich) un cikloheterofilīnu (10, 1, 0,1 µg/ml). Pēc barotnes noņemšanas pievienoja 200 µL NaOH (1N; S8045, Sigma-Aldrich) šķīduma un inkubēja 60 ◦C 2 stundas, lai izšķīdinātu melanīnu. Absorbcija tika mērīta ar spektrofotometru (405 nm, Epoch). Kā pozitīvā kontrole tika izmantota 100 µg/ml arbutīna (A4256, Sigma-Aldrich). Melanīna pigmenta ražošanas kavēšana tika izteikta procentos no melanīna daudzuma, kas saražots -MSH apstrādes apstākļos. Tas tika veikts, neatkarīgi veicot trīs neatkarīgus eksperimentus.

3.7. Statistiskā analīze

4. Secinājumi

UV, kas sastopams ikdienā, ir noderīgas funkcijas, piemēram, D vitamīna sintēze un sterilizācija, bet citos aspektos tas izraisa ādas elastības zudumu, grumbu veidošanos, pigmentāciju, eritēmu, iekaisumu utt., ko izraisa reaktīvo skābekļa savienojumu ķēdes reakcija [18, 19]. Turklāt eksogēnā novecošanās, ko izraisa ārēji faktori, piemēram, UV, novērš normālu audu darbību un atjaunošanos, kad audi ir bojāti dzīvā ķermeņa šūnu samazināšanās un bojāšanās dēļ [20,21].

Izmantojot šo pētījumu, bija iespējams apstiprināt atbilstošu cikloheterofilīna koncentrāciju B16F10 šūnu ārstēšanai. Tika apstiprināts, ka koncentrācija 10 µg/mL neietekmē šūnu dzīvotspēju, kā parādīts 1. attēlā. Ar tirozināzes enzīma aktivitāti inhibējošās iedarbības mērījumu rezultātiem tika apstiprināts, ka cikloheterofilīna koncentrācijas 10, 1, un 0,1 µg/mL ievērojami samazināja tirozināzes enzīma aktivitāti (2. attēls). Turklāt tika apstiprināts, ka cikloheterofilīns ievērojami samazināja marķieru (TYRP1, TYRP2, TYR un MITF gēna) ekspresiju, salīdzinot ar -MSH ārstēto stāvokli (3. attēls). Turklāt tika apstiprināts, ka cikloheterofilīns samazināja melanīna sintēzes daudzumu B16F10 šūnās (4. attēls). Pamatojoties uz šiem rezultātiem, cikloheterofilīns ir potenciāls kā jauns balināšanas kandidāts.

Šis pētījums ir pirmais, kas apstiprina cikloheterofilīna inhibējošo iedarbību uz melanīna sintēzi un liecina par iespēju kavēt ādas novecošanos, ko izraisa UV stari. Turklāt šķiet, ka ir nepieciešama padziļināta tā ietekme uz B16F10 šūnu signalizācijas mehānismiem, uz balināšanā iesaistītajām signalizācijas sistēmām un dažādiem antioksidantu enzīmiem, kas atrodas melanocītos.

Atsauces

1. Bonaventure, J.; Domingues, MJ; Larue, L. Šūnu un molekulārie mehānismi, kas kontrolē melanocītu un melanomas šūnu migrāciju. Pigment Cell Melanoma Res. 2013, 26, 316–325. [CrossRef] [PubMed]

2. Gilčresta, BA; Eller, MS DNS fotobojājumi stimulē melanoģenēzi un citas fotoaizsardzības reakcijas. J. Izmeklēt. Dermatol. Symp. Proc. 1999, 4, 35–40. [CrossRef] [PubMed]

3. Sugumaran, M. Eumelanogenesis salīdzinošā bioķīmija un fenoloksidāzes un melanīna aizsargājošās lomas insektos. Pigment Cell Res. 2002, 15, 2–9. [CrossRef] [PubMed]

4. Ito, S.; Wakamatsu, K. Eumelanīna un feomelanīna kvantitatīvā analīze cilvēkiem, pelēm un citiem dzīvniekiem: salīdzinošs pārskats. Pigment Cell Res. 2003, 16, 523–531. [CrossRef]

5. Yoon, YM; Bae, SH; An, SK; Choe, YB; Āns, KJ; Ultravioletā starojuma ietekme uz ādu un ādas šūnu signalizācijas ceļiem. Kor. J. Estets. Kosmetols. 2013, 11, 417–426.

6. Baek, YS; Ryu, YB; Kērtiss Longs, MJ; Ha, TJ; Rengasamijs, R.; Yang, MS; Park, KH Broussonetia Kozinski 1,3- difenilpropāna tirozināzes inhibējošā iedarbība. Bioorg. Med. Chem. 2009, 17, 35–41. [CrossRef]

7. Kima, HJ; SEO, SH; Lī, BG; Lee, YS Glycyrrhiza uralensis tirozināzes inhibitoru identificēšana. Planta Med. 2005, 71, 785–787. [CrossRef]

8. Han, NK; Parks, CM; Kvons, JC; Džonga, MS; Choi, JW Fagopyrum tataricum ekstrakta balinošais efekts. J. Soc. Kosmētika. Sci. Koreja 2014, 40, 179–186.

9. Kima, BY; Parks, SH; Parks, BJ; Kim, JJ Androsace umbellate ekstrakta balinošais efekts. J. Soc. Kosmētika. Sci. Koreja 2015, 41, 21.–26.

10. Lin, CN; Lu, CM; Lin, HC; Fang, SC; Šī, BJ; Hsu, MF Jaunas antitrombocītu sastāvdaļas no Formosan moraceous augiem. J. Nat. Prod. 1996, 59, 834–838. [CrossRef]

11. Vans, Dž.P.; Raung, SL; Tsao, LT; Hsu, MF; Lin, CN Proteīna kināzes C blokāde ir iesaistīta neitrofilu superoksīda anjonu veidošanās inhibēšanā ar ciklometrisfilīnu. Naunyn. Šmīdeberga arka. Pharm. 1997, 355, 551–558. [CrossRef]

12. Ko, FN; Čens, ZJ; Lin, CN; Teng, CM No Artocarpus heterophyllus izolēto prenilflavonu attīrīšanas un antioksidanta īpašības. Brīvais radiks. Biol. Med. 1998, 25, 160–168. [CrossRef]

13. Jantāns, I.; Jasins, YH; Džamils, S.; Sirats, H.; Basar, N. No Artocarpus sugām izolētu prenilēto flavonoīdu un halkonu ietekme uz trombocītu agregāciju cilvēka asinīs. J. Nat. Med. 2010, 64, 365–369. [CrossRef]

14. Huanga, Čārta; Li, HJ; Wu, NL; Hsiao, CY; Lin, CN; Chang, HH; Hung, CF Cikloheterofilīna fotoaizsargājošā iedarbība pret UVA izraisītiem bojājumiem un oksidatīvo stresu cilvēka ādas fibroblastos. PLoS ONE 2016, 11, e0161767. [CrossRef]

15. Shim, JH Cikloheterofilīna pretnovecošanās iedarbība UVA apstarotajos dermas fibroblastos. Kor. J. Pharmacogn. 2019, 50, 285–290.

16. Tomita, Y.; Seiji, M. Tirozināzes inaktivācijas mehānisms peles melanomas gadījumā. J. Dermatol. 1977, 4, 245–249. [CrossRef]

17. Panzela, L.; Ebato, A.; Napolitāno, A.; Koike, K. Melanoģenēzes vēlīnās stadijas: ķīmisko aspektu un pielietošanas iespēju izpēte. Int. J. Mol. Sci. 2018, 19, 1753. [CrossRef]

18. Talwar, HS; Grifits, CE; Fišers, GJ; Hamiltona, TA; Voorhees, JJ Samazināti I un III tipa prokolagēni fotobojātā pieauguša cilvēka ādā. J. Invest. Dermatol. 1995, 105, 285–290. [CrossRef]

19. Kims, Dž.; Lī, CW; Kims, EK; Lī, SJ; Park, NH; Kima, HS; Kima, HK; Čars, K.; Jang, YP; Kim, JW Gynura procumbens ekstrakta inhibējošā iedarbība uz UV-B izraisītu matricas-metalloproteināzes ekspresiju cilvēka dermas fibroblastos. J. Enthnopharmacol. 2011, 137., 427.–433. [CrossRef]

20. Kirkwood, TB Izpratne par dīvaino novecošanas zinātni. Cell 2005, 120, 437–447. [CrossRef]

21. Džounss, DL; Rando, TA Jaunie modeļi un paradigmas cilmes šūnu novecošanai. Nat. Cell Biol. 2011, 13, 506–512. [CrossRef] [PubMed]

Plašāka informācija: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501