Ieskats neirodeģeneratīvo slimību patoģenēzē: koncentrēšanās uz mitohondriju disfunkciju un oksidatīvo stresu 3. daļa

4.3.3. DNS

ROS var izraisīt daudzu veidu DNS bojājumus, piemēram, bāzes modifikācijas, dezoksiribozemodifikācijas, vienas virknes pārtraukumus (SSB) un dubultās virknes pārtraukumus (DSB), DNS šķērssaites vai pamata vietas [235].

Uzzinot vairāk par bioloģiju, mēs atklājam, ka bāzes modifikācijas var ietekmēt cilvēka atmiņu. Šī ideja ir ļoti aizraujoša, jo tā nozīmē, ka mēs varam izmantot šīs modifikācijas, lai uzlabotu un uzlabotu mūsu smadzeņu darbību.

Pētījumi liecina, ka metilēšanas pievienošana eksona DNS var ietekmēt atmiņas veidošanos un telpiskās mācīšanās spējas. Cilvēka smadzeņu audu paraugos ir identificēts DNS bāzes 5-hidroksimetilcitozīns (5hmC), un tā ekspresija pieauguša cilvēka smadzeņu garozas zonā ir palielinājusies.

Turpmākie pētījumi ir parādījuši, ka jaunas informācijas iegūšanai un atmiņu nostiprināšanai nepieciešamas vismaz divas dažādas smadzeņu funkcijas, proti, "reģistrēšana" un "reproducēšana". Ierakstīšanas stadijā holīnerģiskie neironi atbrīvo acetilholīnu, lai pārsūtītu informāciju no īstermiņa atmiņas uz ilgtermiņa atmiņu. Šajā procesā svarīga loma ir metilāzei (DNS metiltransferāzei), jo tai var būt svarīga loma gēnu ekspresijas regulēšanā, kad veidojas jaunas atmiņas.

Nākamajā posmā, reprodukcijas posmā, neironi atkārto iepriekšējo pieredzi. Tas nozīmē, ka konsolidētā atmiņa tiek ievietota ilgtermiņa atmiņā, un daži eksperti uzskata, ka šo gēnu metilēšana tiek pārvērsta formā, kuru ir ļoti viegli mainīt, piemēram, 5-hidroksimetilcitozīnā. Tas nozīmē, ka jutiāna skābei ir galvenā loma ilgtermiņa atmiņas nostiprināšanā.

Tāpēc mēs varam redzēt, ka bāzes modifikācija un atmiņa ir cieši saistītas. Tas dod mums lielas cerības izstrādāt dažas jaunas ārstēšanas metodes, lai uzlabotu smadzeņu efektivitāti, piemēram, kognitīvo uzlabošanu un izvairītos no izziņas deficīta. Lai gan vēl ir daudz darāmā, šis ir viens no izrāviena pētījumiem mūsu izpratnē un vairāku nervu sistēmu izpētē. Var redzēt, ka mums ir jāuzlabo atmiņa, un Cistanche var ievērojami uzlabot atmiņu, jo Cistanche var arī regulēt neirotransmiteru līdzsvaru, piemēram, palielināt acetilholīna un augšanas faktoru līmeni, kas ir ļoti svarīgi atmiņai un mācībām. Turklāt Cistanche var arī uzlabot asins plūsmu un veicināt skābekļa piegādi, kas var nodrošināt, ka smadzenes saņem pietiekamu uzturu un enerģiju, tādējādi uzlabojot smadzeņu vitalitāti un izturību.

Noklikšķiniet uz Zināt palīdzību ar atmiņu

Oksidēta DNS, iespējams, ir visizplatītākie DNS bojājuma neironi [236]. Normālos apstākļos ROS var izraisīt līdz pat 50 000 DNS bojājumu/šūnā dienā [237], un kavēšanās DNS bojājumu labošanā var izraisīt genoma nestabilitāti un izraisīt signālu kaskādes, kas izraisa šūnu nāvi [238].

Šūnām ir dažādi labošanas mehānismi, piemēram, bāzes izgriešanas labošanas (BER), neatbilstības labošanas (MMR), nukleotīdu izgriešanas labošanas (NER) un vienas (SSBR) un dubultās ķēdes pārtraukumu labošanas (DSBR) mehānismi [239].

Oksidētās DNS bāzes tiek noņemtas galvenokārt ar BER/SSBR mehānismu, un tas ietver bojātās bāzes noņemšanu ar specifisku DNS glikozilāzi (DG), abāziskās vietas iegriezumu ar AP-endonukleāzi (APE1), un iegūtās spraugas aizpildīšanu ar DNS polimerāzi. un bojātās DNS virknes aizzīmogošana ar DNS ligāzi [240].

Ir identificēti vairāki DG, piemēram, uracila-DNS glikozilāzes (UDG), timīna DNS glikozilāze (TDG) vai oksidētas bāzes specifiskās DG, piemēram, 8-oksoguanīna (8-oksoG) DNS glikozilāze (OGG1) [ 241 242]. OGG1-1a ir iesaistīts kodola DNS atjaunošanā, savukārt OGG1-2a veicina mitohondriju DNS atjaunošanos [243].

APE1 šķeļ DNS cukura-fosfāta mugurkaulu pamata vietā. Fermenta fosforilēšana, kā tas notiek pēc 1-metil-4-fenilpiridīnija (MPP+) iedarbības, samazina tā enzīmu aktivitāti un izraisa bojātas DNS uzkrāšanos neironos [244].

Mitohondriju DNS ir vēl vairāk pakļauta oksidatīviem bojājumiem, jo ​​mitohondriju genoms atrodas tuvu IMM, mitohondriju ROS veidošanās vietai, un tāpēc, ka tai trūkst aizsargājošu histonu [245]. Tā kā mitohondriju DNS kvalitātes kontrole ir ļoti svarīga saziņai ar kodolu, mitohondriji satur antioksidantus un DNS remonta enzīmus, piemēram, OGG1 un MUTYH (mutY DNS glikozilāze) [246].

Mitohondriju disfunkcija, kā tas notiek pēc mtDNS dzēšanas, var izraisīt NF-κB aktivāciju caur akalcineirīna atkarīgo signalizācijas ceļu [247], un to savukārt var izraisīt dažādas signalizācijas molekulas. Piemēram, PPAR-koaktivators 1 un SIRT1 regulē mitohondriju funkciju, aktivizējot mitohondriju transkripcijas faktora A (TFAM) ekspresiju [248].

Papildus paaugstinātajiem oksidatīvajiem bojājumiem, ko izraisa oksidatīvs stress, neirodeģeneratīvās slimībās, piemēram, AD vai PD, ir aprakstīti defektīvi DNS remonta mehānismi [235].

PD pacientu dopamīnerģiskie neironi uzrādīja mitohondriju OGG1 regulēšanu un augstāku fosforilētā APE1 līmeni [249]. Neironiem no AD pacientiem bija augstāks oksidēto DNS bāzu līmenis kodolā, kā arī mitohondriju DNS [250], uzrādīja OGG1 aktivitātes samazināšanos [251] un zemāku UDG līmeni [252], salīdzinot ar veselu indivīdu neironiem.

4.3.4. RNS un oksidatīvie bojājumi

RNS ir daudz bagātīgāka, veidojot 80–90% no šūnās esošās nukleīnskābes [253], un tā ir neaizsargātāka pret oksidatīviem bojājumiem, pateicoties tās vienpavediena struktūrai, tuvumam tomitohondrijiem, oksidētās RNS remonta mehānismu trūkumam un mazākai aizsardzībai pret. proteīnas, salīdzinot ar DNS [60 254].

RNS molekulu funkcijas šūnā ir daudzveidīgas, ietverot ribosomu RNS (rRNS), kas kopā ar pārneses RNS (tRNS) un ziņojuma RNS (mRNS) ir atbildīgas par proteīnu sintēzi, mikroRNS (miRNS), kas ir pēctranslācijas. gēnu ekspresijas regulatori un mazas kodola un nukleolārās RNS.

Tradicionāli mRNS tika uzskatīta par kodējošo RNS [255]. Nekodētajām RNS ir svarīga loma mRNS splicēšanas regulēšanā un mRNS translācijā [256]. Agresīvākais radikālis ir hidroksilgrupa, kas veidojas Fentona un Hābera-Veisa reakcijās [257].

Tas reaģē ar guanīnu, veidojot 8-hidroksiguanozīnu (8-OHG), kas ir viens no visbiežāk izmantotajiem RNS oksidācijas biomarķieriem [253]. Oksidatīvā uzbrukuma izraisīts RNS bojājums izraisa modificētas bāzes un nukleozīdus, tRNS šķelšanos un fragmentāciju, aminoacilāciju vai kodonu un antikodonu savienojuma defektus [258] un izraisa tiešus RNS virkņu pārtraukumus [259], tRNS bāzes nesakritības, tulkošanas kļūdas. [182], un traucēta proteīnu sintēze [260] ar būtisku ietekmi uz šūnu dzīvotspēju.

Lai gan šūnām ir vairāki mehānismi izmainītu transkriptu noārdīšanai, piemēram, nonsense-mediētā mRNS sabrukšana (NMD) [261], šie mehānismi mēdz būt pārslogoti ar novecošanu. Tādējādi uzkrājas izmainīti nepareizi salocīti proteīni [262].

5. Selektīva neironu ievainojamība neirodeģeneratīvās slimībās

Lai gan daudzi ceļi, kas izraisa palielinātu ROS veidošanos, un to sekas attiecas uz visām šūnām, katra neirodeģeneratīva slimība izraisa noteiktu neironu grupu deģenerāciju, kas lika pētniekiem meklēt skaidrojumus šai neironu populāciju selektīvajai ievainojamībai.

5.1. Selektīva neironu ievainojamība Alcheimera slimībā

AD raksturīgo atmiņas zudumu un izziņas pasliktināšanos izraisa entorinālās garozas (EC), galvenokārt II slāņa neironu (ECII) un hipokampa, īpaši CA1 reģiona, atrofija [72].

Pētījumi liecina, ka neironiem šajās zonās ir augsts enerģētiskais pieprasījums un tie ir ļoti jutīgi pret samazinātu skābekļa un glikozes piegādi [263]. Turklāt CA1 un EC II piramīdveida neironi ir glutamaterģiski un tādējādi ir neaizsargātāki pret NMDA eksitotoksicitāti un paaugstinātas intracelulārās kalcija koncentrācijas kaitīgo ietekmi [264], pretstatā neokortikālajiem inhibējošiem interneuroniem, kuriem ir augsts Ca2+-saistošo proteīnu līmenis [265]. ].

Nesen tika aprakstīta virkne neaizsargāto neironu molekulāro pazīmju. Piemēram, ECII piramīdveida neironiem ir traucēta tau savienojuma regulatora darbība, kas, iespējams, ir saistīta ar traucētu mikrotubulu dinamiku [266], kas var veicināt tau izplatīšanos citos smadzeņu reģionos caur CA1 neironiem [267].

Tika pierādīts, ka selektīvi ievainojamās ierosinošo neironu apakšpopulācijas ekspresē RORB (ar RAR saistīto orphan receptoru B), vienlaikus uzrādot arī atšķirības gēnu ekspresijā, kas kodē sinapses un aksonos lokalizētus proteīnus, kālija kanālu apakšvienības, G-proteīnu signālu molekulas un neirotransmiteru signālu molekulas, [268].

Tomēr joprojām ir jāturpina raksturot saiknes starp RORB ekspresiju, fosforilētā tau uzkrāšanos un neironu deģenerāciju.

5.2. Selektīva neironu ievainojamība Parkinsona slimības gadījumā

PD motoriskos simptomus izraisa nigrālo dopamīnerģisko neironu zudums, kas izraisa dopamīna samazināšanos muguras striatumā [269]. Strukturāli šiem neironiem ir ļoti gari un sazaroti aksoni (līdz 4,5 m), kas ir saistīti ar lielu skaitu neironu (līdz 2,4 miljoniem sinapšu) [270 271], kas prasa lielu aksonalmitohondriju blīvumu un rada izaicinājumu mitohondriju bioenerģētikai [272].

Molekulārā līmenī nigrālajiem dopamīnerģiskajiem neironiem ir zema Ca2+-buferspēja, neskatoties uz lielo no aktivitātes atkarīgo Ca2+ slodzi, kas palielina OXPHOS un ROS veidošanos [273] un var veicināt mtDNS bojājumus [274]. Turklāt pats dopamīna metabolisms izraisa ROS veidošanos un izraisa mtDNS deleciju uzkrāšanos [275].

5.3. Motoro neironu ievainojamība amiotrofiskās laterālās sklerozes gadījumā

ALS patoloģiskā pazīme ir augšējo un apakšējo motoro neironu deģenerācija, kuriem abiem ir ļoti gari aksoni un tādējādi tie ir atkarīgi no pareizas mitohondriju funkcijas un tirdzniecības [72].

Lielais motora vienības izmērs rada augstas enerģētiskās prasības mugurkaula motorajiem neironiem, lai uzturētu neirotransmisiju un muskuļu kontrakciju [276].

Motoro neironu relatīvā saglabāšana okulomotoros, trochleārajos un abducens kodolos var būt saistīta ar nelielo inervēto muskuļu šķiedru skaitu (līdz piecām muskuļu šķiedrām pretstatā vismaz 300 šķiedrām, ko inervē mugurkaula motoriskie neironi) [277], īpaši vīnogu. neiromuskulārā savienojuma līdzīga struktūra [278], kā arī šo neironu augstā Ca2+ buferspēja [279].

6. Oksidatīvais stress neirodeģeneratīvās slimībās

Pētījumi arvien vairāk liecina par oksidatīvā stresa marķieru klātbūtni pacientu ar neirodeģeneratīvām slimībām nervu sistēmā, bet molekulārie ceļi ir tikai sākuši noskaidrot.

Ģenētisko defektu apraksts, kas izraisa AD, PD, HD vai ALS, palīdzēja identificēt mutantu proteīnu pakārtotos efektus, un līdzīgi ceļi pēc tam tika parādīti slimību idiopātiskās formās. Tomēr patofizioloģija joprojām ir nepilnīgi noskaidrota, neskatoties uz uzkrātajām zināšanām, kas jau ir novedušas pie terapeitiskiem mēģinājumiem.

6.1. Oksidatīvais stress Alcheimera slimībā

Ģimenes AD gadījumi ar Presenilīna 1 (PS1) un 2 (PS2) mutācijām ir saistījuši AD patoģenēzi ar traucētu kalcija homeostāzi [280]. PS mijiedarbojas ar rianodīna receptoriem [281] un ietekmē ER-mitohondriju savienojumu [282].

Patiešām, augsts MAM skaits ir aprakstīts AD dzīvnieku modeļos un AD pacientu fibroblastos vai smadzeņu audos [283]. Turklāt A agregāti var veicināt Ca2+ pārnesi no ER uz tomitohondrijiem caur MCU [284], savukārt tau kavē mitohondriju kalcija izplūdi [285].

Turklāt A var veidot kalciju caurlaidīgus kanālus membrānās [286, 287], savukārt tau var veidot neselektīvus jonu kanālus lipīdu divslāņos [288]. Paaugstināta mitohondriju kalcija kaitīgā ietekme uz mitohondriju disfunkcijas un oksidatīvā stresa izraisīšanu ir aprakstīta iepriekšējās sadaļās.

Astrocītos A, mijiedarbojoties ar kalcija sensoriem receptoriem (CaSR), izraisa to pazemināšanos, liekot blakus esošajiem neironiem izdalīt tikko sintezēto A, slāpekļa oksīdu un peroksinitrītu [289].

Mitohondrijās viena no agrākajām izmaiņām, kas saistītas ar AD, ir ATPsintāzes epoksidācija ar sekojošu tās funkcijas samazināšanos, kas EK neironos aprakstīta jau Braak I-II stadijā [290, 291]. Atrodas IMM iekšpusē, ievietots ar PUFA bagātā lipīdu divslānī un tuvu mitohondriju matricai, enzīms ir viegls mērķis brīvajiem radikāļiem, ko rada kompleksi I un III [292].

Papildus enerģētiskajai atteicei ATP sintāzes modifikācijas vēl vairāk palielina ROS veidošanos, kam seko bioloģisko molekulu oksidatīvo modifikāciju pastiprināšanās [293].

Šajā kaskādē lielākā daļa modificēto lipoksidācijas produktu ir iesaistīti enerģijas metabolismā, palielinot enerģijas atteici, kam seko olbaltumvielas, kas saistītas ar neirotransmisiju, antioksidantu aizsardzību un jonu kanāliem, kā parādīts 1.

Komunikāciju starp mitohondrijiem un kodolu un kodolkodētu mitohondriju apakšvienību importu pasliktina bioenerģētiskie defekti un disfunkcionāli mitohondriju proteīni, kā rezultātā mainās regulējošo un strukturālo mitohondriju kompleksu un enzīmu ekspresija [299]. Tiek mainīts arī lipīdu metabolisms, mainoties lipidomiskajiem profiliem, kas aprakstīti AD, īpaši EK [300].

PUFA oksidatīvais bojājums izraisa šo taukskābju samazināšanos lipīdu plostos EK no AD agrīnās stadijas [301], kas ietekmē membrānas biezumu, plūstamību, izliekumu, kā arī ar membrānu saistīto proteīnu aktivitāti, kas veicina amiloidogēno amiloido apstrādi. prekursoru proteīns.

Šķiet, ka mitohondriju oksidatīvais stress, izmainīts lipīdu metabolisms, lipīdu peroksidācija un bioenerģētiskie defekti ir daļa no pašpietiekamas cilpas, kas veicina izmainīto mitohondriju dinamiku, mitohondriju tirdzniecību, traucētu mitofagiju un traucētu ER-mitohondriju mijiedarbību [290].

Beta amiloīda (A ) un fosforilētā tau uzkrāšanās šūnās izraisa daudz izmainītu mitohondriju dinamiku, kas izteikta kā pārmērīga mitohondriju sadrumstalotība, palielinoties mitohondriju skaitam un samazinātam izmēram [302]. Gan A, gan fosforilētais tau palielināja Drp1 GTPāzes aktivitāti, kas izraisa pārmērīgu mitohondriju fragmentāciju [303, 304].

In vitro mutantu APP šūnu līnijās bija augsta mRNS un mitohondriju dalīšanās proteīnu koncentrācija un samazināts mRNS un mitohondriju saplūšanas proteīnu līmenis [305]. Ir arī pierādīts, ka fosforilētais tau samazina Opa1 un paaugstina Mfn1 un Mfn2 [306].

Turklāt A citoplazmas uzkrāšanās noved pie Parkina un PINK1 līmeņa samazināšanās, tādējādi traucējot mitofagijas ceļam. Defektīva mitofagija izraisa autofagisko vakuolu uzkrāšanos neironu somā un disfunkcionālos neirītus [307], kas ir process, ko pastiprina neironu mitofagijas īpatnības, kur nobriedušas lizosomas koncentrējas šūnu ķermenī, bet mitohondriji stiepjas gar neironu aksoniem un dendritiem. mitofagija ir lēnāks process [308].

Turklāt A oligomēri mijiedarbojas ar autofagiskajiem vakuoliem aksonu distālajās daļās, izraisot mitohondriju alaksonālā transporta kavēšanu [309]. Turklāt laboratorijas modeļos mutācijas PS1 gēnā izmainīja lizosomu paskābināšanos [310] un izraisīja ar autofagiju saistīto gēnu ekspresijas samazināšanos, izmantojot ERK/CREB signālu ceļu [311].

Tau proteīnam ir arī nozīmīgs ieguldījums šūnu genoma fizioloģisko apstākļu aizsardzībā, saistot hromatīnu [236]. Tau hiperfosforilētais stāvoklis traucē šo funkciju, radot telpas vairāk oksidatīvo DNS bojājumu radīšanai un ilgākam laikam, kas nepieciešams šo DNS bojājumu novēršanai [236].

Nedrīkst aizmirst mikroglia aktivācijas un hroniska iekaisuma lomu AD patoģenēzē. Mikroglijas, iedzimtas imūnās makrofāgiem līdzīgās nervu sistēmas šūnas, veido aptuveni 10% no šūnu populācijas veselu pieaugušo smadzenēs [312].

AD gadījumā mikroglijām ir palielināta komplementa receptoru ekspresija, kas izraisa NF-κB signālu ceļa regulēšanu, A-aktivētos Fc receptorus (kas izraisa MIP-makrofāgu iekaisuma proteīna-1 ekspresiju) un palielinātu uztvērēju receptoru A{ ekspresiju. {4}} un B (SCARA un SCARB) [313,314]. A saistīšanās ar SCARB-2 aktivizē mikrogliju, veidojot proinflammatoriskus citokīnus, kemokīnus un ROS [315].

Paaugstināts tau līmenis, izraisot nodevām līdzīgu receptoru ekspresiju, izraisa arī pro-iekaisuma citokīnu IL-1, IL-6 un IL-8 izdalīšanos caur NF-κB. signalizācijas ceļš [316]. Lai gan iekaisums aktivizē autofagiju šūnās [108], tā kā autofagijas traucējumi ietekmē arī mikroglia šūnas, hronisks iekaisuma mikroglia fenotips, kas papildina AD neironu bojājumus [317].

6.2. Oksidatīvais stress Parkinsona slimības gadījumā

PD ir otrā visizplatītākā neirodeģeneratīvā slimība, kurai ir gan kognitīvi, gan neiromuskulāri traucējumi.

Lai gan vairums gadījumu ir sporādiski, vairākas mutācijas ir aprakstītas ģimenes un agrīnās PD formās, piemēram, mutācijas PARK1 (kodē PINK1), PARK2 (kodē Parkin), PARK1/4 (-sinukleīns), PARK7 (DJ1), PARK8 (LRRK2), PARK9 (ATP13A2) PARK17 (Vsp35), FBX07, GIGYF2 vai HTRA2, uzsverot ubikvitīna proteīna degradācijas ceļa, oksidatīvā stresa, šūnu izdzīvošanas ceļa, mitohondriju funkcijas un apoptozes iesaistīšanos PD patoģenēzē [1].

PD patoloģiskā pazīme ir nešķīstošu ieslēgumu uzkrāšanās, kas galvenokārt sastāv no sinukleīna (Lūija ķermeņi), galvenokārt nigrālajos dopamīnerģiskajos neironos [61].

Toksīnu izraisītu Parkinsona sindromu izpēte ir palīdzējusi noskaidrot PD patoģenēzi. 20. gadsimtā tika pierādīts, ka 1-metilfenil4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridīna iedarbība izraisa simptomus, kas atgādina smagu parkinsonismu [319], traucējot. ar ETC I kompleksu.

Turklāt eksperimentālā vidē rotenons, kompleksa I inhibitors, izraisīja apoptozi cilvēka neiroblastomas šūnās, un šis atklājums tika paplašināts, lai apspriestu pesticīdu iedarbības iesaistīšanos PD etioloģijā [320].

Pēc tam vairāki pētnieki konsekventi ziņoja par mitohondriju ETC I kompleksa defektu, kas izraisīja tā aktivitātes samazināšanos par 30–40% [48,321], ko izraisīja I kompleksa apakšvienību ražošanas ātruma samazināšanās, tā struktūras iznīcināšana un oksidatīvie bojājumi. 322]. -sinukleīns ir vērsts uz mitohondrijiem un noved pie kompleksās Iaktivitātes samazināšanās [323].

LLRK2 (ar leicīnu bagātās atkārtotās kināzes 2) mutācijas var palielināt -sinukleīna līmeni [324]. PINK1 un Parkins regulē mitofagiju, kā aprakstīts iepriekš. DJ1 ir svarīgs mitohondriju integritātei un dinamikai; Ir pierādīts, ka DJ1 pārmērīga ekspresija samazina rotenona izraisīto mitohondriju fragmentāciju neatkarīgi no PINK1 [325].

Pārliecinoši pierādījumi liecina par palielinātu lipīdu, olbaltumvielu un DNS oksidācijas produktu uzkrāšanos deģenerējošajos neironos PD [326–328] kopā ar antioksidanta GSH [329] samazināšanos, tādējādi iesaistot oksidatīvo stresu PD patoģenēzē.

Sākotnēji ROS, iespējams, rodas no ETC, ārējiem faktoriem un dopamīna autooksidācijas [330], ko vēlāk pastiprina dopamīna monoamīnoksidāzes B metabolisms, iekaisuma reakcijas vai smago metālu ieguldījums [331].

Ir pierādīts, ka ROS izraisa neparastu dzelzs regulējošā proteīna 1 aktivāciju, tādējādi veicinot dzelzs uzkrāšanos dopamīnerģiskajās šūnās [332]. Ūdeņraža peroksīds var viegli izkliedēt blakus esošos neironus, kur tas, mijiedarbojoties ar dzelzi, var radīt hidroksilradikāļus [55].

PINK1 mutācijas mitohondriāli izvietotās molekulas kināzes domēnā arī palielina šūnu jutību pret oksidatīvo stresu [55,333].

For more information:1950477648nn@gmail.com