Zarnu caurlaidība un depresija pacientiem ar iekaisīgu zarnu slimībuⅠ

Kopsavilkums: Depresija ir globāla veselības problēma, kurai nepieciešama agrīna un precīza diagnoze, lai nodrošinātu ātru piekļuvi atbilstošai ārstēšanai. Nesenā uzmanība ir vērsta uz smadzeņu–zarnu–mikrobiotas ass analīzi starp vairākiem psihopatoloģiskiem ceļiem. Zarnu barjerai ir galvenā loma, un disfunkcijas, kas rodas šajā līmenī, ietekmē garīgo veselību. Šī pētījuma mērķis bija izpētīt zarnu caurlaidības biomarķieru, ti, kalprotektīna, zonulīna, lipopolisaharīdus saistošā proteīna (LBP) un zarnu taukskābes saistošā proteīna (I-FAB), lomu depresijā pacientiem ar iekaisīgu zarnu slimību (IBD). ).

Noklikšķiniet uz caurejas līdzeklis

Šis ir pirmais šāda veida pētījums, kas tiek veikts Rumānijā un Austrumeiropā, liekot uzsvaru uz pacientiem ar Krona slimību un čūlaino kolītu. Identificētās korelācijas starp depresiju un kalprotektīnu un depresiju un LBP var izgaismot ātras depresijas diagnostikas procesu ar biomarķieru palīdzību. Tā kā depresija ir saistīta ar IBD stacionāro pacientu dzīves kvalitātes pazemināšanos, steidzami ir nepieciešama piekļuve atbilstošai ārstēšanai.

1. Ievads

Depresija ir individuāla, profesionāla un sociāla invaliditāte, kas saistīta ar somatiskām saslimšanām [1,2] un ar augstu pašnāvības mirstības risku [3]. Tomēr piekļuve speciālistiem, pareiza diagnoze un efektīva ārstēšana ir ierobežota [4]. Lai samazinātu slimības radītās ciešanas un finansiālo slogu [3], ir nepieciešama agrīna un precīza diagnoze [5,6], kā arī personalizēta ārstēšanas izvēle [7]. Saskaņā ar diagnostikas kritērijiem Garīgo traucējumu diagnostikas un statistikas rokasgrāmatā. (DSM V) [8], depresija ir afektīvs traucējums ar neviendabīgu simptomu grupu. Lai diagnosticētu, ir nepieciešami pieci no deviņiem sekojošiem simptomiem: nomākts garastāvoklis, baudas trūkums, miega un apetītes grūtības, zems enerģijas līmenis, kognitīvās izmaiņas, vainas un vainas sajūta un pašnāvības idejas. nav zināmi patofizioloģiskie mehānismi, lai gūtu labumu no efektīvas ārstēšanas. Ir apšaubīti vairāki mehānismi, taču teorijas joprojām attīstās.

Tādējādi ir pētītas disfunkcijas uz hipotalāma-hipofīzes ass, neirotransmiteriem, vagusa nerva, īsās ķēdes taukskābju metabolītiem, triptofāna, iekaisuma faktoriem un smadzeņu-zarnu-mikrobiotas ass [9-12]. Ir pierādīts, ka ne tikai ar stresu saistīti traucējumi izraisa izmaiņas zarnu mikrobiotā caur hipotalāma–hipofīzes–virsnieru asi, bet arī zarnās.

centrālo nervu sistēmu, izmantojot vagālo stimulāciju, zarnu caurlaidību un iekaisuma un pretiekaisuma savienojumu izdalīšanos, kā arī izmaiņas asinīs cirkulējošajos aģentos [13]. Pēdējo divu desmitgažu laikā smadzeņu–zarnu–mikrobiotas ass iesaistīšanās garīgo traucējumu gadījumā ir guvusi impulsu [9,14]. Šajā kontekstā lielāka uzmanība ir pievērsta noplūdes gutsyndrome lomai [15, 16].

Zarnu barjerai ir galvenā loma barības vielu sagremošanā un uzsūkšanā; otrkārt, tā stingri kontrolē antigēnu transportēšanu no lūmena uz submucosa, un tā uztur līdzsvaru starp toleranci un imūnreakciju, kas izraisa iekaisumu. Zarnu barjeras integritāti var ietekmēt diēta, zarnu mikrobiotas disbioze vai citi faktori. Tie var izraisīt imūnaktivāciju, pārvietojot mikrobu antigēnus un metabolītus. Pašlaik seruma zonulīns, zarnu taukskābes saistošais proteīns (IFABP/FABP2) un LBP, kā arī fekāliju albumīns, kalprotektīns un zonulīns ir analizēti kā zarnu caurlaidība. marķieri [17].Kalprotektīns ir proteīns, kas saista kalciju un cinku, sākotnēji izolēts no leikocītiem; tas ir noderīgs, lai diferencētu iekaisīgu zarnu slimību no kairinātu zarnu sindroma. Tam ir liela nozīme iekaisuma laikā, un to uzskata par akūtās fāzes proteīnu [18 ].

Normālās vērtības ir no 10 līdz 50 vai 60 (ug/g). Vērtības virs 200 (ug/g) var norādīt uz iekaisuma slimību, un vērtības virs 500–600 (ug/g) noteikti norāda uz zarnu slimības esamību [19]. Lipopolisaharīdus saistošais proteīns (LBP) ir būtiska ārējās membrānas lipīdu sastāvdaļa. gramnegatīvās baktērijas [20], kas izraisa endotoksēmiju [21]. LBP, ko ražo hepatocīti, taukaudi un zarnu šūnas, darbojas kā akūtās fāzes I proteīns, un tam ir svarīga loma imūnreakcijā [22]. LBP atrodas serumā 5–15 mg/ml koncentrācijā un akūtās fāzes reakcijas laikā palielinās 10 līdz 50 reizes. Barjeras funkciju uztur zonulīns, kas pazīstams kā vienīgais tuvu intracelulāro savienojumu (TJ) fizioloģiskais modulators [15,23, 24]. Zonulīns atgriezeniski atver TJ, iedarbojoties uz proteāzes aktivēto receptoru 2, kas atrodas savienojuma kompleksa intracelulārajā telpā [25]. Zonulīna vidējā vērtība ir 34 ng/ml [26].

Zarnu taukskābes saistošais proteīns (I-FABP/FABP2) ir viens no deviņiem dažādiem FABP identificētajiem, kas pieder proteīnu virsģimenei, kas saistās ar lipīdiem. Galvenā loma ir intracelulārai transportēšanai un taukskābju uzsūkšanās regulēšanai [27]. Kad notiek epitēlija zarnu barjeras bojājumi, I-FABP izdalās asinsritē un palielinās tā koncentrācija plazmā [28]. I-FAPB sliekšņa vērtība tiek uzskatīta par 2 ng/ml. Šajā kontekstā mūsu mērķis bija izpētīt zarnu caurlaidības biomarkerīna depresijas lomu pacientiem ar iekaisīgu zarnu slimību (IBD), (i) pārbaudot saistību starp kalprotektīnu, zonulīnu, LBP. , IFABP/FABP2 un depresija un (ii) novērtējot depresijas ietekmi uz dzīves kvalitāti.

2. Materiāli un metodes

2.1. Studiju grupa

Sākotnējā grupā bija 60 pacienti no Konstancas apgabala klīniskās slimnīcas Gastroenteroloģijas klīnikas laika posmā no 2021. gada aprīļa līdz jūnijam. Iekļaušanas kritēriji bija IBD diagnoze, 18 gadus veci un vecāki, zināšanas lasīt un rakstīt, kā arī piekrišana piedalīties pētījumā. Izslēgšanas kritēriji bija piekrišanas atteikums, smaga depresija vai citi smagi psihiski traucējumi, kuru dēļ viņi tika vērsti uz specializēto psihiatrisko dienestu. Pēc informētas piekrišanas pētnieks sazinājās ar pacientiem pa tālruni, lai piemērotu sociāldemogrāfisko aptauju par depresiju un anketu par psihiatriskās palīdzības kvalitāti. dzīvi.Pētījumā tika iekļauti 30 pacienti, kuri izgāja visus pētījuma posmus.

2.2. Izmantotās anketas

Pacientu veselības anketa-9 (PHQ-9) [29] tika piemērota dalībniekiem, lai novērtētu viņus ietekmētās depresijas līmeni. Šajā standarta anketā ir deviņi jautājumi, uz kuriem jāatbild, pamatojoties uz simptomiem, kas pacientam bija pēdējo 14 dienu laikā. Rezultāti tiek klasificēti šādi: 1–4 minimāla depresija, 5–9 viegla depresija, 10–14 vidēji smaga depresija, 15–19 vidēji smaga depresija un 20–27 smaga depresija Līdzīgi mēs izmantojām anketu par dzīves kvalitāti (EQ{{ 14}}D) [30,31], lai apkopotu datus par dzīves kvalitāti. Šajā rīkā ietvertie elementi ir pacienta mobilitāte, pašapkalpošanās, iesaistīšanās parastās darbībās, sāpes vai diskomforts, kā arī piedzīvota trauksme vai depresija. Uz jautājumiem tiek atbildēts piecu līmeņu skalā.

2.3. Paraugu ņemšana un laboratorijas analīze

Seroloģiskie paraugi zonulīnam, IFABP/FABP2, LBP un ​​fekāliju paraugi kalprotektīnam tika savākti saskaņā ar potenciāli infekciozu bioloģisko paraugu savākšanas un transportēšanas protokolu. Seruma paraugi tika savākti ar venozo punkciju, tukšā dūšā un vakutainerā ar aktivatora audumu. Fekāliju paraugi tika savākti no spontāni izdalītiem izkārnījumiem konteineros bez nesējvides. Serums tika pārbaudīts uz zonulīnu ar MyBioSource Kit, Inc. (Sandjego, CA, ASV). un IFABP/FABP2 un LBP ar Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. komplektu (Uhaņa, Ķīna). Paraugi tika pārbaudīti uz kalprotektīnu ar EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG komplektu. Visi testi tika veikti ar enzīmu imūnsorbcijas testu (ELISA) ar ADALTIS Analyzer GEN-4 un Victor X4 saskaņā ar komplekta ražotāja norādījumiem.

Komplekta ražotājs tikai kalprotektīnam noteica normālo vērtību diapazonu: mazāks par vai vienāds ar 50.0 mcg/g kā parasti, 50.1– 120,0 mkg/g kā robežvērtība un lielāka vai vienāda ar 120,1 mcg/g kā pozitīva zarnu slimības gadījumā. Zonulīnam reakcijas komplekta ražotājs nenorādīja nekādas zemākas noteikšanas robežas. Apakšējā noteikšanas robeža IFABP/FABP2 komplektam bija 0,156 ng/mL, 3,125 ng/mL LBP un ​​3,125 ng/mL kalprotektīnam. Attiecībā uz zonulīnu, I-FABP/FABP2 un LBS/LBP komplekta ražotājs nepaziņoja normālo vērtību diapazonu, un tika izmantotas citu autoru pētījumos izmantotās vērtības. Serums tika ekstrahēts no katra asins parauga, centrifugējot ar ātrumu 3000 × g 30 minūtes, izmantojot Thermo Scientific SL16R centrifūgu.

Visi iegūtie serumi tika turēti sasaldēti -200 ◦C līdz analīžu veikšanai. IFABP/FABP2 un LBP paraugi pirms testēšanas tika atšķaidīti līdz 1/2 ar parauga atšķaidīšanas buferšķīdumu. Izkārnījumu paraugi tika turēti –20 ◦C temperatūrā līdz testēšanas dienai. Izkārnījumu parauga ekstrakcija tika veikta, izmantojot 980 iu ekstrakcijas buferi kopā ar 20 mg izkārnījumiem, maisīja 30 sekundes un pēc tam centrifugēja ar ātrumu 2000 × g 10 minūtes, izmantojot Thermo Scientific SL16R centrifūgu. Pēc tam paraugus atšķaidīja ar 980 sv parauga buferšķīduma un 20 sv ekstrakcijas supernatanta.

Četriem marķieriem tika izmantotas mikroplates ar 96 iedobēm, kas pārklātas ar uztveršanas antivielām: anti-kalprotektīna antivielas, anti-IFABP/FABP2 antivielas, anti-LBP antivielas vai anti-zonulīna antivielas. Testa principi bija tie paši, pamatojoties uz ar enzīmiem saistītās imunoloģiskās testēšanas tehnoloģiju (ELISA). Vēlāk iedobēm tika pievienoti standarta paraugi, testa paraugi un ar biotīnu konjugētas noteikšanas antivielas. TMB substrāti (3,30,5,50-tetrametilbenzidīns) tika izmantoti, lai vizualizētu fermentatīvo reakcijuHRP (mārrutku peroksidāzi). HRP katalizēja TMB, lai iegūtu zilu produktu, kas pēc skābes apturēšanas šķīduma pievienošanas kļuva dzeltens.

Dzeltenās vietas blīvums bija proporcionāls plāksnē uzņemtā parauga daudzumam. Krāsu intensitāte tika mērīta pie 450 nm mikroplašu lasītājā, un pēc tam tika aprēķināta mērķa koncentrācija.

2.4. Statistiskā analīze

Statistiskā analīze tika veikta, izmantojot IBM SPSS statistikas programmatūras versiju 23 (Armonk, NY, ASV: IBM Corp.). Dati tiek parādīti kā mediāna un IQR (interkvartilediapazons P75–P25) nepārtrauktiem mainīgajiem šķībo sadalījumu gadījumā vai procentos kategoriskiem mainīgajiem.

Tā kā Shapiro–Wilk normalitātes tests liecināja, ka analizēto nepārtraukto mainīgo gadījumā testa statistiskās vērtības, kuru varbūtība (p) bija zemāka par nozīmīguma līmeni {{0}}.05, nosacījums Normalitāte netika ievērota, izņemot mainīgos LBP un ​​PHQ 9, kuriem p >=0.05. Mēs uzskatījām, ka piemērotāka ir anonparametriskā pieeja korelācijas izpētei starp attiecīgajiem mainīgajiem, uzrādot Spīrmena rho korelācijas koeficientu (ρ) un ar to saistīto varbūtību (p). Nozīmīguma līmenis tika noteikts 0,05.

Dabiskas augu izcelsmes zāles aizcietējuma mazināšanai - Cistanche

Cistanche ir parazitāro augu ģints, kas pieder Orobanchaceae ģimenei. Šie augi ir pazīstami ar savām ārstnieciskajām īpašībām un ir izmantoti tradicionālajā ķīniešu medicīnā (TCM) gadsimtiem ilgi. Cistanche sugas pārsvarā sastopamas Ķīnas, Mongolijas un citu Vidusāzijas daļu sausajos un tuksnešainajos reģionos. Cistanche augiem raksturīgi to gaļīgie, dzeltenīgie stublāji, un tie ir ļoti novērtēti to potenciālo ieguvumu veselībai dēļ. Tiek uzskatīts, ka TCM gadījumā Cistanche piemīt tonizējošas īpašības, un to parasti izmanto, lai barotu nieres, uzlabotu vitalitāti un atbalstītu seksuālo funkciju. To izmanto arī, lai risinātu problēmas, kas saistītas ar novecošanu, nogurumu un vispārējo labsajūtu. Lai gan Cistanche ir sena lietošanas vēsture tradicionālajā medicīnā, zinātniskie pētījumi par tā efektivitāti un drošību turpinās un ir ierobežoti. Tomēr ir zināms, ka tas satur dažādus bioaktīvus savienojumus, piemēram, feniletanoīdu glikozīdus, iridoīdus, lignānus un polisaharīdus, kas var veicināt tā ārstniecisko iedarbību.

Večistančecistanche pulveris, cistanche tabletes, cistanche kapsulas, un citi produkti tiek izstrādāti, izmantojottuksnesiscistanchekā izejvielas, kas visas labi iedarbojas uz aizcietējumu mazināšanu. Konkrētais mehānisms ir šāds: tiek uzskatīts, ka Cistanche var potenciāli atvieglot aizcietējumus, pamatojoties uz tā tradicionālo lietošanu un noteiktiem savienojumiem, ko tas satur. Lai gan zinātniskie pētījumi par Cistanche ietekmi uz aizcietējumiem ir ierobežoti, tiek uzskatīts, ka tam ir vairāki mehānismi, kas var veicināt tā potenciālu mazināt aizcietējumus. Caureju veicinoša iedarbība:Cistanchejau sen tiek izmantots tradicionālajā ķīniešu medicīnā kā līdzeklis pret aizcietējumiem. Tiek uzskatīts, ka tai ir viegla caureju veicinoša iedarbība, kas var palīdzēt veicināt zarnu kustību un izraisīt aizcietējumus. Šo efektu var attiecināt uz dažādiem Cistanche savienojumiem, piemēram, feniletanoīdu glikozīdiem un polisaharīdiem. Zarnu mitrināšana: Pamatojoties uz tradicionālo lietošanu, tiek uzskatīts, ka Cistanche piemīt mitrinošas īpašības, īpaši vērstas uz zarnām. Zarnu mitrināšanas un eļļošanas veicināšana var palīdzēt mīkstināt instrumentus un atvieglot pārvietošanos, tādējādi mazinot aizcietējumus. Pretiekaisuma iedarbība: aizcietējums dažkārt var būt saistīts ar iekaisumu gremošanas traktā. Cistanche satur noteiktus savienojumus, tostarp feniletanoīdu glikozīdus un lignānus, kuriem tiek uzskatīts, ka tiem piemīt pretiekaisuma īpašības. Samazinot iekaisumu zarnās, tas var palīdzēt uzlabot zarnu kustības regularitāti un mazināt aizcietējumus.