Mikoplazmas Hyopneumoniae specifiskās imunitātes ilgstoša novērošana vakcinētām cūkām

Abstrakts

Mycoplasma hypopnea mobile ir galvenais enzootiskās pneimonijas izraisītājs cūkām. Lai samazinātu šīs slimības radītos ekonomiskos zaudējumus, parasti tiek praktizēta mobilā vakcinācija pret M. hypopnea. Tomēr M. hyopneumoniae vakcīnas izraisītās imunitātes, īpaši šūnu mediētās imunitātes, noturība līdz nokaušanas brīdim vēl nav pētīta. Tāpēc divās komerciālās fermās 25 cūkas (n=50) 16 dienu vecumā intramuskulāri saņēma komerciālu bakterinu. Katru mēnesi tika analizēta M. hyopneumoniae specifisko seruma antivielu klātbūtne un, izmantojot atsaukšanas testus, tika novērtēta TNF-, IFN- un IL-17A ražošana dažādās T šūnu apakšgrupās asinīs. Abās saimniecībās tika pieņemta dabiska M. hyopneumoniae infekcija. Tomēr pētītās cūkas gandrīz visu izmēģinājumu bija M. hyopneumoniae negatīvas. Serokonversija pēc vakcinācijas netika novērota, un visas cūkas kļuva seronegatīvas divu mēnešu vecumā. T šūnu apakškopas frekvenču kinētika abās saimniecībās bija līdzīga. Abu fermu cūku asinīs viena mēneša vecumā tika konstatētas Mycoplasma hypopnea mobilajām specifiskajām citokīnus producējošām CD4+CD8+ T šūnām, taču, palielinoties vecumam, tās ievērojami samazinājās. No otras puses, T šūnu proliferācija pēc in vitro M. hyopneumoniae stimulācijas tika novērota līdz nobarošanas perioda beigām. Turklāt atšķirības humorālajā un šūnu mediētajā imūnreakcijā pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas netika novērotas cūkām ar un bez mātes iegūtām antivielām. Šis pētījums dokumentē ilgtermiņa M. hypopnea mobilās vakcīnas izraisītās imūnās atbildes reakcijas nobarojamām cūkām lauka apstākļos. Ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai izpētītu dabiskas infekcijas ietekmi uz šīm reakcijām.

cistanche priekšrocības vīriešiem - stiprina imūnsistēmu

Noklikšķiniet šeit, lai skatītu Cistanche Enhance Immunity produktus

【Jautājiet vairāk】 E-pasts:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Atslēgvārdi

Mycoplasma hyopneumoniae, cūkas, garengriezuma pētījums, vakcīnas izraisīta imunitāte, šūnu mediēta imunitāte

Ievads

Viens no svarīgākajiem elpceļu patogēniem cūkām ir Mycoplasma hyopneumoniae (M. hyopneumoniae). Tas ir galvenais enzootiskās pneimonijas izraisītājs, kas ir endēmisks lielākajā daļā saimniecību un ir atbildīgs par ievērojamiem ekonomiskiem zaudējumiem cūkkopībā visā pasaulē [1, 2]. Vakcinācija ir visbiežāk izmantotā M. hyopneumoniae kontroles prakse, jo tā var samazināt klīniskās pazīmes un veiktspējas zudumus, kā arī samazināt ārstēšanas izmaksas [3]. M. hyopneumoniae vakcinācijas mērķis ir paaugstināt patogēnam specifiskas imūnās atbildes, kas ātri un efektīvi reaģē uz dabisku M. hyopneumoniae infekciju. Lielākā daļa komerciāli pieejamo M. hyopneumoniae vakcīnu cūkām ir reģistrētas ievadīšanai no vienas līdz trīs nedēļu vecumam [4]. M. hypopnea mobilajām specifiskajām imunitātēm sākas no vienas līdz četrām nedēļām, un tās mērķis ir aizsargāt pret infekcijām visā nobarošanas periodā līdz nokaušanai [4]. Kopumā cūku vakcinācija vai inficēšana izraisa atmiņas B šūnu un CD4+CD8+ T šūnu diferenciāciju, nodrošinot ātru antivielu un šūnu mediētu imūnreakciju pēc otrā kontakta ar patogēnu [5] . Vakcinācija pret M. hyopneumoniae var izraisīt serokonversiju un M. hyopneumoniae specifisko antivielu palielināšanos lokāli elpceļos [6–9]. Vakcinētiem dzīvniekiem pēc M. hyopneumoniae stimulācijas in vitro tika novērots augstāks IFN- -producējošo limfocītu līmenis, kā arī lielāks limfocītu proliferācijas ātrums salīdzinājumā ar nevakcinētiem dzīvniekiem [9–11]. Turklāt pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas tika konstatētas polifunkcionālas CD4+CD8− un CD4−CD8+ T šūnas, kas ražo INF- un TNF- [12]. Tomēr nav pilnībā skaidrs, cik ilgi saglabājas M. hypopnea mobilajām vakcīnām izraisītā imunitāte. Lielākajā daļā M. hyopneumoniae vakcīnas efektivitātes pētījumu cūkas jau ir pakļautas inficēšanās brīdim dažas nedēļas pēc vakcinācijas, lai izmeklētu klepu, imūno parametrus, patogēnu slodzi un plaušu bojājumus [13–16]. Kad tika pētīta ilgtermiņa efektivitāte, galvenokārt lauka izmēģinājumos, bieži vien tika pārbaudīti tikai ražošanas parametri un plaušu bojājumi kaušanas laikā, un imūnsistēmas parametri netika pētīti vai tika pētīti tikai vāji [17–20]. Cik mums zināms, M. hyopneumoniae specifiskā vakcīnas izraisītā šūnu mediētā imunitāte no vakcinācijas brīža līdz nokaušanai lauka apstākļos vēl nav pētīta. Papildus sivēnu vakcinācijai vaislas jauncūku vakcinācija pret M. hyopneumoniae ir plaši izmantota aklimatizācijas prakse [21]. Mycoplasma hyopneumoniae specifiskās citokīnus producējošās CD4+CD8+ un polifunkcionālās CD4−CD8− T šūnas ir sastopamas pēc vaislas dzīvnieku vakcinācijas [22]. Sivēniem, kas zīda jaunpienu no imunizētām sivēnmātēm, asinīs ir augsts M. hyopneumoniae specifisko mātes izcelsmes antivielu (MDA) līmenis un šūnu mediēta imunitāte, kas var saglabāties līdz atšķiršanas brīdim vai pat ilgāk [7, 22, 23]. Ja sivēni tiek vakcinēti pret M. hyopneumoniae MDA (augsta līmeņa) klātbūtnē, serokonversija bieži vien nenotiek [24–26]. Tomēr limfocītu proliferācijas reakcija pēc in vitro stimulācijas bija ievērojami augstāka ar M. hyopneumoniae vakcinētiem sivēniem, salīdzinot ar nevakcinētiem sivēniem, neatkarīgi no MDA līmeņa [26]. Lai gan šie autori parādīja, ka šūnu mediētā imunitāte tika izveidota pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas augsta MDA līmeņa klātbūtnē, ir nepieciešama turpmāka T šūnu apakšgrupu diferenciācija un to citokīnu ražošana, lai gūtu labāku ieskatu šajās šūnu mediētajās imūnreakcijās. un galu galā dabiskas infekcijas ietekme uz šīm reakcijām. Šī pētījuma mērķis bija izpētīt humorālās un šūnu izraisītās imūnās atbildes reakcijas pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas cūkām divās komerciālās fermās. Šim nolūkam tika uzraudzītas seruma antivielas un dažādu T šūnu apakšgrupu proliferācija un citokīnu ražošana no vakcinācijas brīža 16 dienu vecumā līdz kaušanas vecumam. Tika pētīta arī M. hyopneumoniae specifiskās mātes imunitātes iespējamā ietekme uz humorālo un šūnu mediēto vakcīnas reakciju sivēniem.

cistanche piedevas priekšrocības - paaugstina imunitāti

materiāli un metodes

Ganāmpulka apraksts un dzīvnieku izvēle

Two commercial farrow-to-finish farms were included in the study based on the willingness of the farmer to participate. On both farms, circulation of M. hyopneumoniae was assumed based on the presence of the pathogen in tracheobronchial swabs (TBS) taken from fattening pigs in the past. Danbred breeding gilts were reared on farm A and purchased on farm B. On-farm A, the breeding gilts were vaccinated once against M. hyopneumoniae four weeks before first insemination with Ingelvac MycoFLEX® (Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Ingelheim am Rhein, Germany). On-farm B, breeding gilts were vaccinated with Stellamune® Mycoplasma (Elanco, Utrecht, The Netherlands) at six months of age upon arrival at the farm and a second time four weeks later. Furthermore, on-farm B gilts were also booster-vaccinated twice shortly before farrowing. On both farms, sows were not vaccinated against M. hyopneumoniae. Farm A practiced a 5-week batch-farrowing system and piglets were weaned and moved to the nursery unit at approximately 22 days of age. The piglets were vaccinated at 16 days of age against M. hyopneumoniae with an inactivated whole cell J strain-based bacterin (Ingelvac MycoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH, Ingelheim am Rhein, Germany), porcine circovirus type 2 (PCV2) (Ingelvac CircoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) and porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) (UNISTRAIN® PRRS, HIPRA, Amer, Spain). Pigs were moved to the fattening unit at 9 weeks of age. Farm B worked in a 4-week batch-farrowing system and piglets were weaned and moved to the nursery unit at approximately 22 days of age. Tey was vaccinated at 16 days of age against M. hyopneumoniae with the same vaccine as in farm A (Ingelvac MycoFLEX®, Boehringer Ingelheim Vetmedica GmbH) and PRRSV (UNISTRAIN® PRRS, HIPRA). The piglets were moved to the fattening unit at 10 weeks of age. On both farms, five breeding animals (two gilts and three sows of mixed parity) were included in the study. The growing process was monitored by the main investigator and from each litter, five healthy piglets (birth weight>1 kg) tika atlasīti, ausis izrobotas un katru mēnesi no dzimšanas līdz nokaušanai pārbaudītas (n=25 sivēni/saimniecībā). Ausu sivēniem nebija atļauta savstarpēja audzināšana, un cūkas visa izmēģinājuma laikā abās saimniecībās nesaņēma antibiotikas, kas ir aktīvas pret M. hyopneumoniae.

cistanche tubulosa-uzlabo imūnsistēmu

Pētījuma plānošana un paraugu ņemšana

Pētījumu apstiprināja Ģentes universitātes Veterinārmedicīnas fakultātes un Biozinātņu inženieru fakultātes Ētikas komiteja (apstiprinājuma numurs 2020/31). No sivēnmātēm jaunpiens tika savākts atnešanās procesā. 6 stundu laikā pēc atnešanās no sivēnmātēm tika savākts TBS (60 cm sūkšanas katetrs, Medinorm GmbH, Spiesen-Elversberg, Vācija) un asinis sterilā seruma mēģenē (sarecējušas asinis). Divu dienu vecumā no sivēniem paņēma asinis seruma mēģenēs. No viena līdz sešu mēnešu vecumam sivēniem katru mēnesi tika ņemtas asinis sterilā serumā un EDTA (nesarecējušās asinis) mēģenēs un TBS. A saimniecībā cūkas tika nokautas 177 dienu vecumā, tāpēc pēdējais paraugs tika ņemts 5,5 mēnešu vecumā. B fermā cūkas uz kautuvi tika nosūtītas 191 dienas vecumā, tāpēc pēdējais paraugs tika ņemts 6 mēnešu vecumā. Jaunpiena un seruma paraugi tika uzglabāti -20 pakāpē un TBS paraugi -80 grādos līdz turpmākai analīzei. Nesarecējušās asinis nekavējoties tika apstrādātas šūnu mediētas imunitātes analīzei. Digitālā PCR M. hyopneumoniae DNS noteikšanai Lai pārbaudītu M. hyopneumoniae klātbūtni, DNS tika ekstrahēta no TBS paraugiem, izmantojot komerciālu komplektu (DNeasy® Blood & Tissue komplekts, Qiagen, Venlo, Nīderlande) un digitālo PCR (dPCR). ) protokols, kas vērsts uz P102 gēnu, tika veikts saskaņā ar iepriekš aprakstīto protokolu [27]. Mycoplasma hyopneumoniae specifiskās antivielas Mycoplasma hyopneumoniae specifiskās antivielas seruma un jaunpiena paraugos tika analizētas, izmantojot komerciālu netiešo ELISA (M. hyo Ab tests, IDEXX Laboratories Inc., Westbrook, ME, ASV), ievērojot ražotāja norādījumus. Paraugus uzskatīja par pozitīviem, ja parauga un pozitīvā (S/P) attiecība bija lielāka par 0,40, un par negatīvu, ja S/P attiecība bija vienāda ar vai mazāka par 0,40.

T šūnu citokīnu ražošana

No svaigām, nesarecētām asinīm perifēro asiņu mononukleārās šūnas (PBMC) tika izolētas, izmantojot Lym phoprep™ blīvuma gradientu (Stemcell tehnoloģijas, Van - - couver, Kanāda). PBMC izolēšana, stimulēšana un krāsošana tika veikta, kā aprakstīts iepriekš ar dažām nelielām modifikācijām [22]. Šūnas tika stimulētas nakti (20 stundas) ar iekšēji ražotu M. hyopneumoniae J celma bakteriīnu, un katram dzīvniekam tika iekļauta negatīva barotne un pozitīva Concanavalin A (ConA) kontrole. M. hyopneumoniae J celma bakteriīns tika izgatavots, pamatojoties uz M. hyopneumonia F7.2 C bakteriīna ražošanas protokolu [16]. Lai izpētītu citokīnu veidošanos, katrai iedobei pēdējās 4 stimulācijas stundās tika pievienots Brefeldin A (eBioscience™, Sandjego, Kalifornija, ASV), lai kavētu olbaltumvielu sekrēciju. Ekstracelulārai krāsošanai PBMC tika inkubēti ar anti-CD3 (klons PPT3), anti-CD4 (klons 74-12-4) un anti-CD8 (klons 11-295-33) monoklonālajām antivielām. Tālāk atbilstošās sekundārās antivielas pret peles IgG1 APC-Cy7 (Abcam, Kembridža, Apvienotā Karaliste), anti-peles IgG2b FITC (Biolegend, Sandjego, CA, ASV) un anti-peles IgG2a PE-Cy7 (Abcam, Kembridža, UK) tika pievienoti. Pēc tam tika veikts bloķēšanas solis ar peles IgG1 (10 µg / ml). Pēc virsmas krāsošanas šūnas tika fiksētas un caurlaidīgas, un tika veikta intracelulāra krāsošana TNF-, IFN- un IL-17A [22]. Dati tika iegūti ar CytoFLEX plūsmas citometru (Beckman Coulter, Bea, CA, ASV), un rezultāti tika tālāk analizēti ar CytExpert programmatūru (Beckman Coulter). Vārtu hierarhija ir parādīta 1. papildu failā.

T-šūnu proliferācijas tests

Izolēti PBMC tika stimulēti in vitro ar iekšēji ražotu M. hyopneumoniae J celma bakteriīnu, lai novērtētu T šūnu proliferāciju. Izmantotais protokols tika detalizēti aprakstīts iepriekšējā pētījumā [22]. Virsmas krāsošanai šūnas vispirms tika inkubētas ar anti-CD3, anti-CD4 un anti-CD8 monoklonālajām antivielām un pēc tam ar atbilstošām sekundārajām antivielām pret peles IgG1 APC-Cy7 (Abcam, Kembridža, UK), anti-peles IgG2b. FITC (Biolegend, Sandjego, CA, ASV) un pretpeles IgG2a AlexaFluor 647 (Biolegend, Sandjego, CA, ASV) kopā ar propīdija jodīdu. Dati tika iegūti ar CytoFLEX plūsmas citometru, un rezultāti tika tālāk analizēti ar CytExpert programmatūru. Vārtu hierarhija ir parādīta 2. papildu failā.

cistanche tubulosa-uzlabo imūnsistēmu

Datu analīze

Statistical analyses were performed using IBM SPSS® Statistics Version 27 (IBM, Chicago, IL, USA) to compare results within farms. A descriptive analysis was performed for M. hyopneumoniae-specific antibody levels and the frequency of different T cell subsets. Kolmogorov-Smirnov and Shapiro-Wilk tests were used as tests for the normality of the residuals. For normally distributed data, repeated measures analyses of variance were used and post-hoc pairwise comparisons were made with a Bonferroni correction to assess possible differences between successive sampling moments. For not mally distributed data, a non-parametric Friedman test was used together with a Wilcoxon signed rank test with Bonferroni correction to compare the different sampling moments. Descriptive results were given to discuss whether the presence (S/P>MDA {{0}}.40) vai trūkums (S/P Mazāks vai vienāds ar 0,40) ietekmēja humorālo un šūnu mediēto imunitāti pēc sivēnu vakcinācijas.

Rezultāti

Katrā fermā izmēģinājuma laikā tika izslēgtas piecas cūkas nāves vai krotālijas nozaudēšanas dēļ. Šo cūku dati tika iekļauti analīzē līdz pēdējam pareizi dokumentētajam paraugu ņemšanas brīdim.

M. hyopneumoniae dabiskas infekcijas klātbūtne fermās

Saimniecībā A visi TBS paraugi (no sivēnmātēm, sivēniem un nobarojamām cūkām) bija negatīvi attiecībā uz M. hyopneumoniae DNS klātbūtni. B fermā visi TBS paraugi no sivēnmātēm, sivēniem un nobarojamām cūkām bija negatīvi uz M. hyopneumoniae DNS klātbūtni līdz piecu mēnešu vecumam. Sešu mēnešu vecumā četrām nobarojamām cūkām bija pozitīvs M. hyopneumoniae tests ar 300, 7, 22 un 14 M. hyopneumoniae organismiem/µL DNS.

M. hyopneumoniae specifisko antivielu noturība cūkām

Abās saimniecībās četrām no piecām sivēnmātēm atnešanās laikā serumā un jaunpienā bija M. hyopneumoniae specifiskas antivielas (1.A un C. attēls). Divu dienu veciem sivēniem, kas zīda jaunpienu no šīm sivēnmātēm, bija M. hyopneumoniae specifiskas mātes antivielas (MDA), savukārt sivēniem no seronegatīvām sivēnmātēm arī bija seronegatīvas (MDA nebija) (1.B un D attēls). Neskatoties uz vakcināciju 16 dienu vecumā, abās saimniecībās M. hyopneumoniae specifisko antivielu līmenis cūku serumā ievērojami samazinājās no divu dienu vecuma līdz vienam mēnesim, no viena mēneša līdz diviem mēnešiem un no diviem mēnešiem līdz vienam mēnesim. trīs mēnešu vecumā (1. E attēls). Būtiskas atšķirības starp vēlākajiem paraugu ņemšanas brīžiem netika novērotas. Sākot no divu mēnešu vecuma, visas cūkas, izņemot divas fermā A četru mēnešu vecumā, bija M. hyopneumoniae seronegatīvas. M. hyopneumoniae specifisko antivielu līmenis no sivēniem ar MDA laika gaitā samazinājās un divu mēnešu vecumā sasniedza tādus pašus līmeņus kā sivēniem bez MDA (1.F attēls).

T šūnu apakšgrupas frekvenču kinētika cūkām

Cūkas dzīves laikā dažādu T šūnu apakšgrupu biežums asinīs mainās imūnsistēmas nobriešanas un saskares ar mikroorganismiem dēļ [28]. Lai izpētītu dažādu T šūnu apakškopu kinētiku, asins PBMC no nestimulētās barotnes kontroles tika novērtēti ar plūsmas citometriju. Viena mēneša vecumā CD4−CD8+ T šūnu biežums (vidēji %) bija attiecīgi 13,6±2,8% un 10},5±3,4% cūkām no fermas A un B. Šis biežums ievērojami palielinājās divu mēnešu vecumā abās saimniecībās un atkal ievērojami samazinājās trīs mēnešu vecumā saimniecībā A. Sākot no trīs mēnešu vecuma, tas saglabājās stabils saimniecībā A, savukārt saimniecībā B būtisks pieaugums atkal tika novērots sešu mēnešu vecumā. mēnešu vecumā (2.A attēls). Abās fermās CD4+CD8−T šūnu biežums bija visaugstākais viena mēneša vecumā – 37,5±60% (ferma A) un 42,3±5,9% (saimniecība B). Šis biežums ievērojami samazinājās divu mēnešu vecumā. Saimniecībā A biežums stabilizējās, sākot ar diviem mēnešiem, savukārt saimniecībā B samazinājums notika pakāpeniskāk (2.B attēls). Viena mēneša vecumā CD4/CD8 attiecība bija 2,8 (ferma A) un 4.0 (saimniecība B). Attiecība samazinājās divu mēnešu vecumā un palika zem 1.{52}} no trīs mēnešu vecuma abās saimniecībās. CD4−CD8− T šūnu biežums vienu mēnesi vecām cūkām bija attiecīgi 31,1±7,2% un 25,6±5,4% fermās A un B. Abās saimniecībās biežums saglabājās līdzīgs divu mēnešu vecumā, bet pēc tam ievērojami palielinājās, sasniedzot augstāko līmeni piecu mēnešu vecumā (2. C attēls). CD4+CD8+ T šūnu biežums bija viszemākais viena mēneša vecumā – attiecīgi 3,3±1,1% un 4.0±1,0% fermās A un B. Šis biežums ievērojami palielinājās divu mēnešu vecumā. A saimniecībā pēc tam tas saglabājās stabils, savukārt saimniecībā B tas pakāpeniski palielinājās līdz četru mēnešu vecumam, lai piecu mēnešu vecumā atkal ievērojami samazinātos (2.D attēls).

1. attēls. Mycoplasma hyopneumoniae specifisko antivielu klātbūtne sivēnmātēm un cūkām. A, C

2. attēls CD3+ T šūnu apakškopu ikmēneša biežums (%) cūku asinīs. A

3. attēls. Cirkulējošo proliferējošo CD3+ T šūnu noturība cūkām. A, B

T šūnu proliferācija

Tika analizēti M. hypopnea moniae stimulētie PBMC, lai noskaidrotu proliferējošo T šūnu procentuālo daudzumu. Kā parādīts 3.A un B attēlā, proliferējošās CD3+ T šūnas cūku asinīs bija katrā paraugu ņemšanas brīdī abās fermās pēc in vitro stimulācijas ar M. hyopneumoniae bakteriīnu, lai gan dažu dzīvnieku procentuālais daudzums bija lielāks ferma A. A saimniecībā proliferējošo T šūnu procentuālais daudzums ievērojami samazinājās sešu mēnešu vecumā, salīdzinot ar procentuālo daļu piecu mēnešu vecumā, savukārt saimniecībā B nebija iespējams būtiski samazināt vai palielināt proliferējošo T šūnu procentuālo daļu. jāievēro. Te CD4−CD8− T šūnas bija dominējošā CD3+ T šūnu apakškopa, kas proliferējās, reaģējot uz M. hyopneumoniae stimulāciju abās fermās, kam sekoja CD4+CD8− T šūnu apakškopa (3. attēls C un D).

4. attēls. Abu fermu cūku asinīs cirkulē Mycoplasma hyopneumoniae specifiskās citokīnus ražojošās CD4+CD8+ T šūnas. A

T šūnu citokīnu ražošana

Lai gūtu labāku priekšstatu par M. hyopneumoniae specifisko T šūnu klātbūtni un noturību cūkām, TNF-, IFN- un IL-17A produkciju ar asins PBMC, kas in vitro stimulētas ar M. hyopneumoniae bakteriīnu, novērtēja plūsmas citometrija. Kā parādīts 4. attēlā, abās fermās stimulētās CD4+CD8+ T šūnas ražoja citokīnus, kas bija izteiktāk jaunākām cūkām. TNF- + CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums ievērojami samazinājās cūkām fermā A no viena līdz divu mēnešu vecumam un no divu līdz trīs mēnešu vecumam fermā B. A. ievērojams IFN- + CD4+CD8+ T šūnu samazinājums tika novērots no viena līdz divu mēnešu vecumam cūkām abās fermās un no divu līdz trīs mēnešu vecumam fermā B. Te. CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums, kas ražo gan TNF-, gan IFN-, ievērojami samazinājās cūkām no viena līdz divu mēnešu vecumam fermā A un no diviem līdz trim mēnešiem saimniecībā B. Viena mēneša laikā vecuma, IL-17A+ CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums bija lielāks, salīdzinot ar procentuālo attiecību divu mēnešu vecumā, taču šī atšķirība nebija statistiski nozīmīga. Četriem fermas B dzīvniekiem, kuru M. hyopneumoniae pozitīvs rezultāts sešu mēnešu vecumā, CD4+CD8+ T šūnās bija līdzīga citokīnu ražošana, salīdzinot ar M. hyopneumoniae negatīvajiem dzīvniekiem. Papildus CD4+CD8+ T šūnu apakškopai mēs novērojām arī citokīnu ražošanas atšķirības citās T šūnu apakšgrupās fermā B. 5. attēlā parādīti dati par skaidrām atbildēm un būtiskām citokīnu ražošanas atšķirībām pārējās T šūnu apakškopas, kas radās tikai fermā B. Attiecībā uz citiem parametriem un fermā A netika novērotas atšķirības CD4-CD8+, CD4+CD8- vai CD4- citokīnu ražošanā. CD8− T šūnas. TNF- + CD4+CD8− T šūnu procentuālais daudzums ievērojami palielinājās, savukārt IFN- + CD4−CD8+ T šūnu procentuālais daudzums ievērojami samazinājās no viena līdz diviem mēnešiem. vecums. Jāatzīmē, ka cūkai, kas sešu mēnešu vecumā bija pozitīva M. hyopneumoniae ar 7 M. hyopneumoniae organismiem/µL DNS, bija augsts TNF- + CD4+CD8− un IL-17 procents. A+ CD4−CD8+ T šūnas asinīs. Pārējām M. hyopneumoniae pozitīvām cūkām sešu mēnešu vecumā bija līdzīgs citokīnus producējošo T šūnu procentuālais daudzums kā M. hyopneumoniae negatīvajām cūkām.

5. attēls. Cirkulējošās Mycoplasma hyopneumoniae specifiskās citokīnus producējošās T šūnu apakšgrupas cūku asinīs fermā B. A.

Katrā saimniecībā M. hyopneumoniae specifiskā MDA bija 20 divas dienas vecu sivēniņu serumā un nebija piecu sivēniņu serumā, kas iegūta no sivēnmātes bez M. hyopneumoniae specifiskām seruma antivielām. Lai noskaidrotu, vai MDA ir ietekmējusi M. hyopneumoniae specifiskās vakcīnas izraisīto šūnu mediēto imunitāti, tika nošķirti sivēni ar un bez MDA, un tika pētītas atšķirības starp abām grupām T šūnu apakšgrupām, kurām bija nozīmīgas. tika novērotas atšķirības citokīnu ražošanā (6.A–E. attēls). B fermā TNF- + CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums bija lielāks vienu mēnesi vecām cūkām ar MDA, salīdzinot ar vienu mēnesi vecām cūkām. cūkas bez MDA. Citām citokīnus producējošām CD4+CD8+ T šūnām vidējie procenti bija līdzīgi abām cūku grupām viena mēneša vecumā katrā saimniecībā. Laika gaitā bija vērojama citokīnus producējošo CD4+CD8+ T šūnu vidējā procentuālā daudzuma samazināšanās tendence cūku asinīs, un sešu mēnešu vecumā atšķirības starp cūkām ar un bez tām bija nelielas vai vispār nebija. MDA (6.A–C attēls). Tas pats tika novērots IFN- -ražojošām CD8+ T šūnām cūku asinīs fermā B (6. D attēls). Viena un divu mēnešu vecumā vidējais TNF- + CD4+CD8−T šūnu procentuālais daudzums fermā B bija līdzīgs cūkām ar vai bez MDA, savukārt sešu mēnešu vecumā – lielāks procents. TNF- -producējošās CD4+CD8−T šūnas tika novērotas cūku bez MDA asinīs (6. E attēls).

cistanche piedevas priekšrocības - paaugstina imunitāti

Diskusija

Šis ir pirmais pētījums, kas sniedz ieskatu ilgtermiņa M. hyopneumoniae specifiskās vakcīnas izraisītās imūnās atbildes reakcijās cūkām no dzimšanas līdz nokaušanai lauka apstākļos. Humorāla imūnreakcija serumā, kas novērtēta ar IDEXX ELISA, pēc vakcinācijas nebija, bet bija šūnu mediētas imūnās atbildes. T šūnu proliferācija pēc in vitro M. hyopneumoniae stimulācijas tika novērota līdz nobarošanas perioda beigām. Turklāt viena mēneša vecumā pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas bija M. hyopneumoniae specifiskas citokīnus producējošas CD4+CD8+ T šūnas, kas ietver atmiņas T šūnas, bet samazinājās līdz ar vecumu. . Šķiet, ka mātes antivielas cūkas dzīves laikā neietekmēja humorālās un šūnu mediētās vakcīnas izraisītās imūnās atbildes, izņemot TNF- + CD4+CD8+ T šūnu klātbūtni. . Lai novērtētu imūnās atbildes noturību un atšķirības M. hyopneumoniae vakcinētiem sivēniem fermu līmenī, mēs iekļāvām divas komerciālas saimniecības. Lai gan tika pieņemts, ka M. hyopneumoniae cirkulācija abās fermās, pētītās cūkas palika M. hyopneumoniae negatīvas visā izmēģinājuma laikā, izņemot četras cūkas fermā B izmēģinājuma beigās, kas ļāva mums izpētīt vakcīnas izraisītās noturību. imūnās atbildes reakcijas bez dabiskas infekcijas ietekmes. Četrām M. hyopneumoniae PCR pozitīvajām cūkām sešu mēnešu vecumā fermā B nebija augstāks M. hyopneumoniae specifisko antivielu līmenis, salīdzinot ar PCR negatīvajām cūkām. Izņemot vienu cūku, arī pēc in vitro M. hyopneumoniae stimulācijas to asinīs nebija augstāka citokīnus ražojošo T šūnu procentuālā daļa. Tas varētu būt skaidrojams ar to, ka M. hyopneumoniae infekcija, visticamāk, notika īsi pirms paraugu ņemšanas brīža, kas nedeva imūnsistēmai pietiekami daudz laika reaģēt uz infekciju [29–31]. Trijām no četrām M. hyopneumoniae pozitīvajām cūkām patogēna slodze TBS paraugā arī bija diezgan zema.

6. attēls. Mycoplasma hyopneumoniae specifisko citokīnus producējošo T šūnu apakškopu vidējais procents pēc no mātes iegūto antivielu līmeņa. AC

Seruma antivielu līmenis divas dienas vecām cūkām atbilda M. hyopneumoniae specifisko antivielu līmenim serumā un jaunpienā no sivēnmātēm atnešanās laikā, apstiprinot M. hyopneumoniae specifiskās mātes imunitātes pārnešanu caur jaunpienu [22, 23]. Serokonversija netika novērota pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas 16 dienu vecumā. Gluži pretēji, M. hyopneumoniae specifisko antivielu līmenis laika gaitā samazinājās, visiem dzīvniekiem divu mēnešu vecumā kļūstot seronegatīviem. Ir zināms, ka šajā pētījumā izmantotā komerciālā M. hyopneumoniae vakcīna pēc vienas ievadīšanas izraisa ierobežotu serokonversiju, kas tika novērots arī iepriekšējos pētījumos [14, 32, 33]. Eksperimentālā pētījumā, kurā tika vakcinēti sivēni pirms atšķiršanas no mātes, 40% dzīvnieku bija serokonversija 3 nedēļas pēc vakcinācijas, savukārt lauka izmēģinājumā tikai 3 no 40 cūkām serokonversija notika 7 nedēļas pēc vakcinācijas [14, 32]. Tomēr M. hyopneumoniae specifisko seruma antivielu klātbūtne (vai neesamība) pēc vakcinācijas neatbilst aizsardzībai (vai tās trūkumam) pret infekciju [14, 25, 34]. Lai aizsargātu saimniekorganismu pret fakultatīviem intracelulāriem un ekstracelulāriem baktēriju patogēniem, piemēram, M. hyopneumoniae, svarīga loma ir CD4+CD8−T palīgšūnām, galvenokārt T1 un T17 šūnām. T1 šūnas ražo IFN-, kas aktivizē makrofāgus, lai iznīcinātu patogēnu, savukārt T17 šūnas ražo IL-17A, lai stiprinātu gļotādas barjeru [35–38]. Nesen tika pierādīts, ka nelielu M. hyopneumoniae šūnu procentuālo daļu var atrast arī intracelulāri, un, ņemot vērā CD4-CD8+ citotoksisko T šūnu izšķirošo lomu saimnieka aizsardzībā pret intracelulāriem patogēniem, šīs citotoksiskās T šūnas. var būt svarīga arī M. hyopneumoniae infekciju kontrolei [31, 35, 39]. Lai izpētītu dažādu T šūnu apakškopu frekvenču kinētiku un šo T šūnu spēju vairoties pēc in vitro M. hyopneumoniae stimulācijas, abās fermās no sivēniem tika izolēti PBMC. T šūnu apakškopas biežuma modelis šajās divās saimniecībās bija līdzīgs. Saskaņā ar citiem pētījumiem CD4+CD8−T šūnu procentuālais daudzums ir lielāks nekā CD4−CD8+ T šūnu procentuālais daudzums jaunākā vecumā. Pieaugot vecumam, CD4+CD8−T šūnu procentuālais daudzums samazinās, savukārt CD4−CD8+ T šūnu procentuālais daudzums palielinās, kā rezultātā laika gaitā samazinās CD4/CD8 attiecība [40–42]. Sivēni piedzimst gandrīz bez CD4+CD8+ T šūnām. Šo šūnu skaits palielinās līdz ar vecumu, kad cūkas saskaras ar mikroorganismiem, jo ​​dažām no šīm šūnām ir patogēnam specifiska atmiņas funkcija [5, 22, 42–44]. Tomēr saimniecībā A CD4+CD8+ T šūnu biežums saglabājās tādā pašā līmenī, sākot no divu mēnešu vecuma. Kā gaidīts, saimniecībā B pakāpeniski palielinājās līdz četru mēnešu vecumam, lai gan CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums pēc tam atkal samazinājās. T šūnu apakšgrupu salīdzināšana ar citiem pētījumiem joprojām ir sarežģīta, jo šajā pētījumā PBMC netika mērīti tieši pēc asins paraugu ņemšanas, bet vispirms inkubēja 20 stundas pirms T šūnu apakšpopulāciju procentuālās daļas mērīšanas. Mycoplasma hyopneumoniae specifiskā CD3+ T šūnu proliferācija saglabājās līdz nobarošanas perioda beigām, apstiprinot M. hyo pneumoniae specifisko T šūnu klātbūtni 16 dienu vecumā vakcinēto cūku asinīs. M. hyopneumoniae specifisko proliferējošo T šūnu klātbūtne var būt saistīta ar aizsardzību pret enzootisku pneimoniju, jo iepriekšējie pētījumi parādīja, ka PBMC spēja vairoties pēc in vitro stimulācijas ar mitogēnu ConA ir saistīta ar rezistenci pret slimībām cūkām [45] ]. Te CD4−CD8−T šūnas bija galvenā T šūnu apakškopa, kas proliferēja abās fermās, kam sekoja CD4+CD8−T šūnas, un procentuālais daudzums laika gaitā svārstījās. Cūkām lielākajai daļai CD4-CD8- T šūnu ir invarianti δ T šūnu receptori atšķirībā no antigēniem specifiskajām T šūnām [31, 42]. Inficējot cūkas ar citiem patogēniem, piemēram, PRRSV, δ T šūnas bija arī galvenās proliferatīvās atbildes reakcijas pēc PRRSV virēmijas [46]. Šīm T šūnām ir nozīme arī neitralizējošu antivielu veidošanā pēc cūku vakcinācijas pret klasisko cūku mēri [47]. Turklāt bronhoalveolārajā skalošanas šķidrumā no cūkām, kas inficētas ar Actinobacillus pleuropneumoniae, tika novērots CD8− δ T šūnu skaita pieaugums [48]. Ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai izpētītu δ T šūnu lomu M. hyopneumoniae infekciju kontrolē un aizsardzībā. Atsaucības testos tika novērtētas dažādas T šūnu apakšgrupas, lai noteiktu TNF-, IFN- un IL-17A ražošanu. Divu mēnešu vecumā TNF- -, IFN- - un TNF-/IFN- -radošo CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums bija ievērojami samazināts. salīdzinot ar procentiem viena mēneša vecumā. Pēc tam procenti bija mainīgi, tie vai nu vēl vairāk samazinājās, vai arī laika gaitā palika nemainīgi. Tas pats modelis tika novērots IL-17A producējošām CD4+CD8+ T šūnām, lai gan tas nebija statistiski nozīmīgs. Jauncūkām, kas vakcinētas pret PRRSV, PBMC IFN ražošana tika novērota arī līdz 42 dienām pēc primo vakcinācijas, bet pēc tam samazinājās līdz 147 dienām pēc vakcinācijas [49]. Iepriekš ir pierādīts palielināts IFN izdalošo limfocītu skaits pēc M. hyo pneumoniae vakcinācijas [9, 10].

Tuksneša dzīvo cistancheTubulosa

Pēdējā laikā ir uzkrāti pierādījumi, ka polifunkcionālajām T šūnām, kas ražo vairāk nekā vienu citokīnu, ir galvenā loma patogēnu aizsardzībā un klīrensā. Piemēram, cūkām, kas inficētas ar hlamīdiju sugām, polifunkcionālās CD4+CD8−T šūnas ir saistītas ar aizsardzību [50]. Sivēnu vakcinācija pret M. hyo pneumoniae palielināja arī polifunkcionālo CD4+CD8− un CD4−CD8+ T šūnu procentuālo daudzumu [12]. Citā pētījumā cūku vakcinācija pret PCV2 izraisīja augstāku TNF- +/IFN- + CD4+CD8+ T šūnu līmeni 24 dienas pēc vakcinācijas, atkal samazinoties. pētījuma beigās 56 dienas pēc vakcinācijas [51]. Mūsu pētījumā mēs arī novērojām, ka citokīnus ražojošo CD4+CD8+ T šūnu klātbūtne laika gaitā samazinājās. Šajā pētījumā galvenā uzmanība tika pievērsta cirkulējošiem asins limfocītiem, bet vakcinācija izraisa arī lokālas M. hyopneumoniae specifiskas šūnu mediētas imūnās atbildes plaušās un bronhu limfmezglos [8]. Tāpēc turpmākajos pētījumos par M. hyo pneumoniae specifisko vakcīnu izraisīto imunitāti būtu jākoncentrējas arī uz lokālām šūnu mediētām imūnreakcijām. Turklāt, lai imunizētu sivēnus, šajā pētījumā tika izmantota tikai viena komerciāla M. hyopneumoniae vakcīna. Imūnās atbildes reakcijas dažādās vakcīnās var atšķirties, jo tās ietekmē vakcīnas sastāvs (adjuvants un antigēns) un ievadīšanas veids [16, 52, 53]. Piemēram, ir zināms, ka karbopols, adjuvants komerciālajā M. hyopneumoniae vakcīnā, virza imūno reakciju uz T1 reakciju [54]. Katrā saimniecībā pieci sivēni bija M. hyopneumoniae seronegatīvi, un 20 sivēniņu serumā bija M. hyopneu mobilajai specifiskā MDA. Neatkarīgi no to MDA statusa visas cūkas bija M. hyopneumoniae seronegatīvas divu mēnešu vecumā, un vēlākos laika punktos serokonversija netika novērota. Mūsu atklājumi atbilst iepriekšējam pētījumam, kurā septiņas dienas veci sivēni ar un bez MDA tika vakcinēti pret M. hyopneumoniae [25]. Abās grupās serokonversija pēc vakcinācijas netika novērota, un visas cūkas bija seronegatīvas 42 dienas pēc vakcinācijas. No otras puses, citi atklāja, ka M. hyopneumoniae vakcinācija MDA klātbūtnē izraisīja augstāku antivielu līmeni salīdzinājumā ar nevakcinētiem sivēniem, taču, jo augstāks ir MDA titrs, jo zemāka ir atbildes reakcija [24, 26]. Lai gan pēc M. hyopneumoniae vakcinācijas ne vienmēr tiek novērota antivielu reakcija, tiek izraisītas M. hyopneumoniae specifiskas šūnu mediētas imūnās atbildes [26]. No M. hyopneumoniae vakcinētām cūkām izolētu PBMC proliferācijas atšķirības netika novērotas neatkarīgi no MDA līmeņa [26]. Mūsu pētījumā katrā saimniecībā netika novērotas atšķirības citokīnus producējošās T šūnās starp M. hyopneumoniae vakcinētām cūkām ar un bez MDA viena mēneša vecumā. Tikai saimniecībā B sivēniem ar MDA bija augstāks TNF- + CD4+CD8+ T šūnu procentuālais daudzums viena mēneša vecumā, salīdzinot ar sivēniem bez MDA. Šo atradumu atbilstība ir jāturpina pētīt pētījumā, kurā iekļauts lielāks un vienāds daudzums sivēniņu ar un bez M. hyopneumoniae specifiskās MDA. Jāveic arī desmit statistiskā analīze, jo šajā pētījumā tas netika darīts zemā un nevienlīdzīgā dzīvnieku skaita dēļ grupā bez un ar MDA. Noslēgumā jāsaka, ka šis pētījums parādīja, ka, lai gan pēc sivēniem vakcinācijas pret M. hyopneumoniae nebija serokonversijas, tika konstatētas M. hyopneumoniae specifiskas šūnu mediētas imūnās atbildes. Polifunkcionālas citokīnus producējošās CD4+CD8+ T šūnas bija līdz trīs mēnešu vecumam, un proliferējošas T šūnas tika novērotas līdz nobarošanas perioda beigām, kas liecina par patogēnu specifisku šūnu mediētu imunitāti. M. hyopneumoniae vakcinētajām cūkām. Rezultāti veido pamatu turpmākiem pētījumiem, lai novērtētu dabiskas M. hyopneumoniae infekcijas ietekmi uz vakcīnas izraisītu imunitāti lauka apstākļos.

Atsauces

1. Pieters M, Maes D (2019) Mikoplazmoze. In: Zimmermann JJ, Karriker LA, Ramirez A, Schwartz KJ, Stevenson GW, Zhang J (eds) Diseases of swine, 11th ed. Wiley, Ņujorka

2. Rycroft A (2020) Cūku mikoplazmas sugu vispārīgās īpašības un klasifikācija. In: Maes D, Sibila M, Pieters M (eds) Mycoplasmas in Swine. Acco, 26.–46. lpp

3. Maes D, Segalés J, Meyns T, Sibila M, Pieters M, Haesebrouck F (2008) Mycoplasma hyopneumoniae infekciju kontrole cūkām. Vet Microbiol. 126:297–309

4. Garza-Moreno L, Segalés J, Pieters M, Romagosa A, Sibila M (2018) Aklimatizācijas stratēģijas jauncūkām, lai kontrolētu Mycoplasma hyopneumoniae infekciju. Vet Microbiol 219:23–29 5. Saalmüller A, Werner T, Fachinger V (2002) T-palīgu šūnas no naivām līdz apņēmīgām. Vet Immunol Immunopathol 87:137–145

6. Ruiz AR, Utrera V, Pijoan C (2003) Mycoplasma hyopneumoniae sivēnmātes vakcinācijas ietekme uz sivēnu kolonizāciju atšķiršanas laikā. J Swine Health Prod 11:131–135

7. Sibila M, Bernal R, Torrents D, Riera P, Llopart D, Calsamiglia M, Segalés J (2008) Ietekme no sivēnmātes vakcinācijas pret Mycoplasma hyopneumoniae uz sivēnmātes un sivēnu kolonizāciju un serokonversiju, un cūku plaušu bojājumiem kaušanas laikā. Vet Microbiol. 127:165–170

8. Marchioro SB, Maes D, Flahou B, Pasmans F, Del Pozo Sacristán R, Vranckx K, Melkebeek V, Cox E, Wuyts N, Haesebrouck F (2013) Vietējās un sistēmiskās imūnās atbildes cūkām, kas intramuskulāri injicētas ar inaktivētu Mycoplasma hyopne vakcīna. Vakcīna 31:1305–1311

9. Martelli P, Saleri R, Cavalli V, De Angelis E, Ferrari L, Benetti M, Ferrarini G, Merialdi G, Borghetti P (2014) Sistēmiskā un lokālā imūnreakcija cūkām, kas intradermāli un intramuskulāri injicētas ar inaktivētām Mycoplasma hyopneumoniae vakcīnām. Vet Microbiol. 168:357–364

10. Thacker EL, Thacker BJ, Kuhn M, Hawkins PA, Waters WR (2000) Vietējo un sistēmisko imūno reakciju novērtējums, ko izraisa Mycoplasma hyopneumoniae bakteriīna intramuskulāra injekcija cūkām. Am J Vet Res 61:1384–1389

11. Seo HW, Han K, Oh Y, Park C, Choo EJ, Kim SH, Lee BH, Chae C (2013) Šūnu mediētas imunitātes salīdzinājums, ko izraisa trīs komerciāli vienas devas Mycoplasma hyopneumoniae bakterini cūkām. J Vet Med Sci 75:245–247

12. Matthijs AMF, Auray G, Jakob V, Garcia-Nicolas O, Braun RO, Keller I, Bruggman R, Devriendt B, Boyen F, Guzman CA, Michiels A, Haesebrouck F, Collin N, Barnier-Quer C, Maes D , Summerfield A (2019) Mycoplasma hyopneumoniae bakteriniem paredzētu jaunu vakcīnu formulējumu sistēmu emu neoloģijas raksturojums. Front Immunol 10:1087

13. Villarreal I, Meyns T, Dewulf J, Vranckx K, Calus D, Pasmans F, Haesebrouck F, Maes D (2011) Vakcinācijas ietekme uz Mycoplasma hyopneumoniae pārnešanu cūkām lauka apstākļos. Vets J 188:48–52

14. Arsenakis I, Panzavolta L, Michiels A, Del Pozo Sacristán R, Boyen F, Haesebrouck F, Maes D (2016) Mycoplasma hyopneumoniae vakcinācijas efektivitāte pirms un atšķiršanas laikā pret eksperimentālo izaicinājumu infekciju cūkām. BMC Vet Res 12:63

15. Park C, Jeong J, Choi K, Chae C (2016) Jaunas bivalentas vakcīnas efektivitāte pret cūku 2. tipa cirkovīrusu un Mycoplasma hyopneumoniae (Fostera™ PCV MH) eksperimentālos apstākļos. Vakcīna 34:270–275

16. Matthijs AMF, Auray G, Boyen F, Schoos A, Michiels A, García-Nicolás O, Barut GT, Barnier-Quer C, Jakob V, Collin N, Devriendt B, Summerfield A, Haesebrouck F, Maes D (2019) Trīs novatorisku bakterinu vakcīnu efektivitāte pret eksperimentālu infekciju ar Mycoplasma hyopneumoniae. Vet Res 50:91

17. Reynolds SC, St Aubin LB, Sabbadini LG, Kula J, Vogelaar J, Runnels P, Peters AR (2009) Samazināti plaušu bojājumi cūkām, kas inficētas 25 nedēļas pēc vienas Mycoplasma hyopneumo niae vakcīnas devas ievadīšanas aptuveni 1 nedēļā. vecuma. Vet J 181:312–320

18. Wilson S, Van Brussel L, Saunders G, Taylor L, Zimmermann L, Heinritzi K, Ritzmann M, Banholzer E, Eddicks M (2012) Sivēnu vakcinācija 1 nedēļas vecumā ar inaktivētu Mycoplasma hyopneumoniae vakcīnu samazina plaušu bojājumus uzlabotāji vidējais ķermeņa masas pieaugums dienā. Vakcīna 30:7625–7629

19. Del Pozo Sacristán R, Sierens A, Marchioro SB, Vangroenweghe F, Jourquin J, Labarque, Haesebrouck F, Maes D (2014) Agrīnas Mycoplasma hyopneumoniae vakcinācijas efektivitāte pret jauktu elpceļu slimību vecākām nobarojamām cūkām. Vet Rec 174:197

20. Cvjetkovíc V, Sipos S, Szabó I, Sipos W (2018) Divu vakcinācijas stratēģiju klīniskā efektivitāte pret Mycoplasma hyopneumoniae cūku ganāmpulkā, kas cieš no elpceļu slimībām. Porc Health Manag 4:19

21. Garza-Moreno L, Segalés J, Pieters M, Romagosa A, Sibila M (2017) Survey on Mycoplasma hyopneumoniae gilt acclimation practices in Europe. Porc Health Manag 3:21

22. Biebaut E, Beuckelaere L, Boyen F, Haesebrouck F, Gomez-Duran CO, Devriendt B, Maes D (2021) Mycoplasma hyopneumoniae specifiskās šūnu izraisītās imunitātes nodošana jaundzimušo sivēniem. Vet Res 52:96

23. Bandrick M, Ariza-Nieto C, Baidoo SK, Molitor TW (2014) Colostral anti-body mediated un šūnu mediēta imunitāte veicina iedzimtu un antigēnu specifisku imunitāti sivēniem. Dev Comp Immunol 43:114–120

24. Hodgins DC, Shewen PE, Dewey CE (2004) Vecuma un mātes antivielu ietekme uz jaundzimušo sivēniem, kas vakcinēti pret Mycoplasma hyopneumoniae, antivielu reakciju. J Swine Health Prod 12:10–16

25. Martelli P, Terreni M, Guazzetti S, Cavirani S (2006) Antivielu reakcija uz Mycoplasma hyopneumoniae infekciju vakcinētām cūkām ar mātes antivielām vai bez tām, ko izraisa sivēnmātes vakcinācija. J Vet Med 53:229–233

26. Bandrick M, Theis K, Molitor TW (2014) Mātes imunitāte uzlabo Mycoplasma hyopneumoniae vakcinācijas izraisītas šūnu mediētas imūnās atbildes sivēniem. BMC Vet Res 10:124

27. Beuckelaere L, Haspeslagh M, Biebaut E, Boyen F, Haesebrouck F, Krejci R, Meyer E, Gleerup D, De Spiegelaere W, Devriendt B, Maes D (2022) Dažādas lokālas, iedzimtas un adaptīvas imūnās atbildes izraisa divas komerciāliem Mycoplasma hyopneumoniae bakteriīniem un tikai adjuvantu. Front Immunol 13:1015525

28. Gerner W, Mair KH, Schmidt S (2022) Vietējā un sistēmiskā T šūnu imunitāte cīņā pret cūku vīrusu un baktēriju infekcijām. Annu Rev Anim Biosci 10:349–372

29. Calsamiglia M, Pijoan C, Bosch GJ (1999) Profiling Mycoplasma hypopnea mobile fermās, izmantojot seroloģiju un ligzdotu PCR tehniku. J Swine Health Prod 7:263–268

30. Pieters M, Daniels J, Rovira A (2017) Paraugu veidu un diagnostikas metožu salīdzinājums Mycoplasma hyopneumoniae noteikšanai in vivo infekcijas agrīnās stadijās. Vet Microbiol. 203:103–109

31. Tizard IR (2018) Veterinary immunology, 10th edn. Elsevier, Sentluisa, Misūri

32. Arsenakis I, Michiels A, Del Pozo Sacristán R, Boyen F, Haesebrouck F, Maes D (2017) Mycoplasma hyopneumoniae vakcinācija pie vai neilgi pirms atšķiršanas lauka apstākļos: randomizēts efektivitātes pētījums. Vet Rec 181:19

33. Betlach AM, Fano E, Vanderwaal K, Pieters M (2021) Vairāku vakcināciju ietekme uz Mycoplasma hyopneumoniae infekcijas pārnešanu un pakāpi jauncūkām. Vakcīna 39:767–774

34. Martínez-Boixaderas N, Garza-Moreno L, Sibila M, Segalés J (2022) Mātes radītās imunitātes ietekme uz imūnreakcijām, ko izraisa sivēniem agrīna vakcinācija pret visbiežāk sastopamajiem patogēniem, kas iesaistīti cūku elpceļu slimību kompleksā. Porc Health Manag 8:11

35. Schroder K, Hertzog PJ, Ravasi T, Hume DA (2004) Interferon-: pārskats par signāliem, mehānismiem un funkcijām. J Leukoc Biol 75:163–189

36. Dobbs NA, Odeh AN, Sun X, Simecka JW (2009) T šūnu mediētās imunitātes daudzpusīgā loma patoģenēzē un rezistencē pret Mycoplasma elpceļu slimību. Curr Trends Immunol 10:1–19

37. Ge Y, Huang M, Yao Y (2020) Interleikīna bioloģija-17 un tās patofizioloģiskā nozīme sepses gadījumā. Front Immunol 11:1558

38. Summerfeld A (2020) Imūnās atbildes reakcijas pret cūku mikoplazmas infekcijām. In: Maes D, Sibila M, Pieters M (eds) Mycoplasmas in Swine. Acco, 110.–125. lpp

39. Raymond BBA, Turnbull L, Jenkins C, Madhkoor R, Schleicher I, Uphof CC, Whitchurch CB, Rohde M, Djordjevic SP (2018) Mycoplasma hyopneumoniae atrodas intracelulāri cūku epitēlija šūnās. Sci Rep 8:17697

40. Borghetti P, De Angelis E, Saleri R, Cavalli V, Cacchioli A, Corradi A, Mocchegiani E, Martelli P (2006) Perifēro T limfocītu izmaiņas jaundzimušo sivēniem: saistība ar augšanas hormonu (GH), prolaktīnu (PRL) un kortizola izmaiņas. Vet Immunol Immunopathol 110:17–25

41. Brown DC, Maxwell CV, Erf GF, Davis ME, Singh S, Johnson ZB (2006) Ontogeny of T limfocītu un zarnu morfoloģiskās īpašības jaundzimušo cūku dažādos vecumos pēcdzemdību periodā. J Anim Sci 84:567–578

42. Stepanova H, Samankova P, Leva L, Sinkora J, Faldyna M (2007) Agrīna pēcdzemdību imūnsistēmas attīstība sivēniem: T limfocītu apakšgrupu pārdalīšana. Cell Immunol 249:73–79

43. Hernández J, Garfas Y, Nieto A, Mercado C, Montaño LF, Zenteno E (2001) CD4 + CD8 + un CD4 + CD{{5} salīdzinošais novērtējums } limfocīti imūnreakcijā pret cūku rubulavīrusu. Vet Immunol Immunopathol 79:249–259

44. Blanc F, Prévost-Blondel A, Piton G, Bouguyon E, Leplat J, Adréoletti F, Egidy G, Bourneuf E, Bertho N, Vincent-Naulleau S (2020) Cirkulējošos leikocītu sastāvs mainās atkarībā no vecuma un melanomas sākuma MeLiM cūku biomedicīnas modelis. Front Immunol 11:291

45. Jeon RL, Gilbert C, Cheng J, Putz AM, Dyck MK, Plastow GS, Fortin F, Canada P, Dekkers JC, Harding JCS (2021) Perifēro asiņu mononukleāro šūnu proliferācija no veseliem sivēniem pēc mitogēna stimulācijas kā slimības indikatori noturība. J Anim Sci 99:skab084

46. ​​Kick AR, Amaral AF, Cortes LM, Fogle JE, Crisci E, Almond GW, Käser T (2019) T-šūnu reakcija uz 2. tipa cūku reproduktīvā un elpošanas sindroma vīrusu (PRRSV). Vīrusi 11:796

47. Petersen B, Kammerer R, Frenzel A, Hassel P, Dau TH, Becker R, Breithaupt A, Ulrich RG, Lucas-Hahn A, Meyers G (2021) TRDC-knockout cūku, kurām trūkst δT šūnu, izveide un pirmais raksturojums. Sci Rep 11:14965

48. Faldyna M, Nechvatalova K, Sinkora J, Knotigova P, Leva L, Krejci J, Toman M (2005) Experimental Actinobacillus pleuropneumoniae infekcija sivēnos ar dažāda veida un līmeņiem specifisku aizsardzību: imūngenotipiskā analīze limfocītu apakšgrupām in asinsrites un elpceļu gļotādas limfoīdie audi. Vet Immunol Immunopathol 107:143–152

49. Sánchez-Matamoros A, Camprodon A, Maldonado J, Pedrazuela R, Miranda J (2019) Modificētas dzīva vīrusa vakcīnas pret cūku reproduktīvā un respiratorā sindroma vīrusa 1 un inaktivētas vakcīnas kombinētas ievadīšanas drošība un ilgstoša imunitāte pret cūku parvovīrusu un Erysipelothrix rhusiopathiae vaislas jauncūkām. Porc Health Manag 5:11

50. Käser T, Pasternak JA, Delgado-Ortega M, Hamonic G, Lai K, Erickson J, Walker S, Dillon JR, Gerdts V, Mearens F (2017) Chlamydia suis un Chlamydia trachomatis inducē daudzfunkcionālas CD4 T šūnas cūkām. Vakcīna 35:91–100

51. Koinig HC, Talker SC, Stadler M, Ladinig A, Graage R, Ritzmann M, Hennig Pauka I, Gerner W, Saalmüller A (2015) PCV2 vakcinācija inducē IFN-/TNF-kopražojošās T šūnas ar potenciālu lomu aizsardzība. Vet Res 46:20

52. Xiong Q, Wei Y, Xie H, Feng Z, Gan Y, Wang C, Liu M, Bai F, Xie F, Shao G (2014) Dažādu adjuvantu formulējumu ietekme uz dzīvas Mycoplasma hyopneumoniae imunogenitāti un aizsargājošo iedarbību Vakcīna pēc intramuskulāras inokulācijas. Vakcīna 32:3445–3451

53. Maes D, Boyen F, Devriendt B, Kuhnert P, Summerfield A, Haesebrouck F (2021) Perspektīvas Mycoplasma hyopneumoniae vakcīnu uzlabošanai cūkām. Vet Res 52:67

54. Gartlan KH, Krashias G, Wegmann F, Hillson WR, Scherer EM, Greenberg PD, Eisenbarth SC, Moghaddam AE, Sattentau QJ (2016) Karbopola izraisīts sterils iekaisums izraisa spēcīgas adaptīvas imūnās atbildes, ja nav ar patogēniem saistītu molekulāro modeļu. . Vakcīna 34:2188–2196