2. daļa Cistanche Tubulosa feniletanola glikozīdu profilaktiskā iedarbība uz liellopu seruma albumīna izraisītu aknu fibrozi žurkām
Mar 06, 2022
Kontakti: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 e-pasts:audrey.hu@wecistanche.com
NOKLIKŠĶINIET ŠEIT, LAI PAET 1
NF-κB p65 un kolagēna I ekspresija pēc zāļu iejaukšanās HSC-T6 šūnās Lai raksturotu aknu fibrozes signālus, ar RT-PCR testu tika noteikti divi galvenie regulējošie gēni aknās. Dati parādīja, ka tHSC-T6 šūnām no kontroles grupas bija zemāks NF- κB un I tipa kolagēna mRNS līmenis. Un otrādi, TGF-β1 inducēja HSC-T6 šūnas, lai ievērojami regulētu NF-κB (P< 0.01)="" and="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna,="" with="" levels="" higher="" than="" those="" in="" the="" control="" group.="" in="" the="" presence="" of="" different="" concentrations="" of="">fenilethanoīdu glikozīds no cistanche) , NF-κB p65 [P NF-κB = 0,001 100 ug/ml, P NF-κB = 0,002 par 75 ug/ml, P NF-κB = 0,007 attiecīgi 50 ug/ ml un P NF-κB = 0,012 attiecīgi 25 ug/ml] un Col-I [P Col-I = 0,006, P Col-I = 0,009, P Col-I = 0,014, P Col-I = 0,019, attiecīgi] rezultāti uzrādīja šo mRNS izteiksmju samazināšanos (7. att.).
Kolagēna I līmeņa rietumu blot analīze pēc zāļu iejaukšanās HSC-T6 šūnās 8. attēls parāda kolagēna I proteīna ekspresijas līmeni dažādu eksperimentālo grupu HSC-T6 šūnās. Kolagēna I proteīna ekspresijas līmenis bija ievērojami samazināts dažādās CPhGs devu grupās(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)(100 ug/ml, 75 ug/ml, 50 ug/ml un 25 ug/ml), salīdzinot ar TGF-β1 grupu
Diskusija
CPhGs(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)ir fenilethanoīdu glikozīds, kas izolēts un attīrīts no Cistanche sakneņiem, ko izmanto kā tradicionālu ķīniešu augu izcelsmes zāles. Pēdējos gados ir pierādīts, ka CPhG piemīt spēcīga spēja novērst aknu traumas [20]. Tāpēc mūsu mērķis bija izpētīt, vai CPhG ir inhibējoša ietekme uz hepatīta fibrozi, ko izraisa BSA izraisīta aknu fibroze žurkām. BJRG parasti lieto kā terapeitisku līdzekli aknu fibrozes ārstēšanai Ķīnā. Tas ir izgatavots no bruņurupuča čaumalas. Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis u.c. ir Qi un asiņu papildināšanas, noguruma mazināšanas, mīkstināšanas mezglu iedarbības sekas. Turklāt iepriekšējie pētījumi liecina, ka tam ir acīmredzama funkcija bloķēt agrīnu aknu fibrozi, kavēt taukus uzkrājošo šūnu proliferāciju un samazināt kolagēna sintēzi [21]. Tādēļ šajā pētījumā BJRG tika izmantots kā pozitīva narkotika.
Aknu fibrozes patoloģiskās izmaiņas žurkām, ko izraisa ĶVL injekcijas, ir līdzīgas tām, kas ir cilvēka portāla cirozes gadījumā [22]. CPhGs(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)atkarībā no devas atviegloja aknu fibrozes pakāpi un kavēja HSC transformāciju miofibroblastam līdzīgās šūnās, samazināja paaugstinātu seruma ALAT, ASAT, HA, LN, CIV, TGF-β1 un aknu indeksa līmeni un ievērojami nomāca kolagēna I, kolagēna III un TGF-β1 ekspresiju aknu audos. Aknu fibrozes stadijas ir saistītas ar HA, LN un IV-C līmeni serumā, kam kā marķieriem var būt nozīme aknu fibrozes pakāpes noteikšanā [23]. Ir ziņots, ka HA ir galvenais ekstracelulārās matricas resurss. IV-C kā pagraba membrānas būtiskais elements tiks bagātīgi sintezēts un lielā mērā nogulsnēts agrākajās aknu cirozes fāzēs. LN un IV-C līmenis serumā ir pagraba membrānas apgrozījuma ātruma indeksi un parāda fibrozes pakāpi portāla zonā un sinusoidālajos kapilāros [24]. PC III ir marķieris aknu fibrozes un agrīnās cirozes diagnostikā, taču tā jutīgums un specifiskums nav augsts, un daudzās atsaucēs nav būtiskas atšķirības starp dažādiem fibrozes posmiem [24, 25].
Šis pētījums ieguva līdzīgu rezultātu. Turklāt H&E un Masson trihroma iekrāsotās sekcijas novērojumi uzrāda normālus aknu audus ar atšķirīgiem aknu lobuliem un aknu sinusoīdiem. Aknu audu struktūra modeļa grupā bija traucēta, un aknu audi un aknu sinusoīds tika aizstāti ar lielu daudzumu saistaudu. Tomēr, salīdzinot ar parauggrupu, tika novērota ievērojama uzlabošanās ārstēšanas grupās. Svarīgi ir tas, ka I tipa un III tipa kolagēna ekspresijai ir būtiska loma aknu fibrozes attīstībā, kuras bloķēšana var novērst un ārstēt aknu fibrozi. Tāpēc I tipa kolagēna un III tipa kolagēna veidošanās un nogulsnēšanās aknu audos varētu kalpot kā svarīgs pretaknu fibrozes efektivitātes noteicējs. TGF-β1 ir arī svarīgs profibrogēns citokīns aknu bojājumu gadījumā, un tas ir bioloģiski aktīvs ar vairākām farmakoloģiskām darbībām [26]. Lai uzturētu audu homeostāzi, ir nepieciešams līdzsvars starp šīm darbībām. TGF- β1 aberantā izpausme ir saistīta ar aknu slimību patoģenēzi [27, 28]. Ir zināms, ka TGF-β1 ir izšķirošs citokīns, kas ir iesaistīts aknu fibrozes sākumposmā.
Oksidatīvais spriegums izraisa TGF-β1, kā rezultātā pēdējais stimulē ECM ražošanu un nogulsnēšanos [29]. Tāpēc viena no efektīvajām stratēģijām, lai ražotu anti-aknu fibrozes zāles, ir identificēt anti-TGF-β1 līdzekļus. Imūnhistoķīmiskā analīze parādīja, ka I tipa kolagēna, III tipa kolagēna un TGF-β1 ekspresijas var noteikt aknu fibrozes patoloģisko procesu. I tipa kolagēna, III tipa kolagēna un TGF-β1 ekspresijas ārstēšanas grupās ir samazinātas, kas lielās devas CPhG bija ievērojami zemākas(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)jo īpaši ārstēšanas grupa un ierosināja, ka CPhGs ir efektīvs I tipa kolagēna, III tipa kolagēna un TGF-β1 inhibitors. Jādomā, ka CPhGs var uzlabot kolagenāzes aktivitāti, saglabājot ECM sintēzes un degradācijas dinamisko līdzsvaru, tādējādi aizkavējot un novēršot aknu fibrozes veidošanos. CPhGs(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)žurkām var ne tikai uzlabot ĶVL izraisītu aknu fibrozi, bet arī izraisīt HSA aktivācijas inhibīciju in vitro. Tiek uzskatīts, ka HSC aktivācija ir izšķirošais fibrogenēzes solis. Šajā pētījumā rezultāti parādīja, ka CPhGs ievadīšana no 25 līdz 100 ug/ml ievērojami vājināja samazināto NF-κB p65, kolagēna I mRNS ekspresiju un kolagēna I proteīna ekspresiju HSC. NF-κB ir svarīga loma imūnās atbildes modulācijā pret infekciju vai stimuliem [30]. NF-κB uzkrāšanās aknu šūnās var izraisīt iekaisuma citokīnu/mediatoru rekrutēšanu, tādējādi izraisot fibrozes attīstību [31, 32]. Turklāt kolagēns ir arī jutīgs indekss, kas atspoguļo fibrozes līmeni un veido aptuveni 50 % no kopējā olbaltumvielu daudzuma šķiedru aknās [33].
Tā rezultātā mēs postulējām, ka molekulārais mehānisms pret hepato-fibrozi ir saistīts ar CPhGs(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)-NF-κB ekspresijas mediēta inaktivācija, kurā ieguvums veicina sinerģiskas lomas, kas saistītas ar imūntoksicitātes un iekaisuma stresa mazināšanu BSA bojātos aknu audos, vēl vairāk koriģējot dismetabolismu, lai uzlabotu aknu funkcijas.
Secinājumi
Visbeidzot, mūsu pētījumi liecina, ka CPhGs(fenilethanoīdu glikozīds no cistanche)ievērojami vājina ĶVL izraisītās aknu fibrozes apmēru žurkām. Tās mehānisms vismaz daļēji var būt saistīts ar CPhGs inhibējošo iedarbību uz ECM sastāvu un ECM noārdīšanās stimulāciju, un/vai ar tiešu I tipa kolagēna, III tipa kolagēna sintēzes inhibīciju un TGF-β1 ekspresiju. Tāpēc mēs gaidījām, ka CPhG var izmantot veselības aprūpes līdzekļos vai klīniskajos medikamentos cilvēka aknu fibrozes profilaksei. Turpmākie pētījumi ir nepieciešami, lai noteiktu CPhGs kā spēcīgu pretaknu fibrozes zāļu efektivitāti.
Saīsinājumi
CPhGs:Feniletanola glikozīdi no cistanche; ĶVL: liellopu seruma albumīns; HSC-T6: aknu stellātu šūnas; Hyp: Hidroksiprolīns; BJRG: saliktas Biejiarangan tabletes; TGF-β1: pārveidojošais augšanas faktors β1; ALAT: alanīna aminotransferāze; ASAT: aspartātaminotransferāze; HA: hialuronskābe; LN: Laminin; PC III: III tipa prokolhēns; IV-C: IV tipa kolagēns; NF-κB: aktivēto B šūnu kodolfaktors kappa-gaismas ķēdes pastiprinātājs; RT-PCR: reversās transkriptāzes-polimerāzes ķēdes reakcija; SDS-PAGE: Nātrija dodecilsulfāta-poliakrilamīda gēla elektroforēze.
Konkurējošās intereses Autori paziņo, ka viņiem nav konkurējošu interešu. Autoru ieguldījums TL, JZ, SPY, LM, MT un SLZ iecerēja un izstrādāja eksperimentus. SPY, TL un JZ analizēja datus. SPY un JZ uzrakstīja manuskriptu. TL, LM un JZ pārskatīja manuskriptu. Visi autori izlasīja un apstiprināja galīgo manuskriptu. Atzinība Šo pētījumu atbalstīja Ķīnas Nacionālais dabaszinātņu fonds (81260624). Autori vēlas izteikt sirsnīgu pateicību profesoram Tao Liu par viņa ieteiktajiem uzlabojumiem šī darba rakstīšanā. Autora informācija 1 Toksikoloģijas departaments, Sabiedrības veselības skola, Siņdzjanas Medicīnas universitāte, Nr. 393 Xinyi Road, Urumqi 830011Xinjiang Uyghur autonomais
Reģions, Ķīna. 2 Galvenā uiguru medicīnas laboratorija, Materia Medica institūts no Siņdzjanas, Urumqi 830004, Ķīna. 3 Nr. 140 Xinhua South Road, Tianshan rajons, Urumqi 830000Xinjiang Uyghur autonomais reģions, Ķīna. Saņemts: 2015. gada 6. augustā Pieņemts: 2015. gada 24. novembrī
Atsauces
Cohen-Naftaly M, Friedman SL. Jaunu antifibrotisku terapiju pašreizējais statuss pacientiem ar hronisku aknu slimību. Ther Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, Saiman Y, Friedman SL. Aknu stellātu šūnas un aknu fibroze. Compr Physiol. 2013;3(4):1473–92.
Hernandez-Gea V, Friedman SL. Aknu fibrozes patoģenēze. Annu Rev Pathol. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. Pārskata raksts: cirozes atgriezeniskums. Aliment Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. Ķīnas Zinātņu akadēmija. 23. izdevums Ķīna: Ķīnas Floras redakcijas komiteja; 2013. 1.–16. lpp.
Ķīnas Tautas Republikas Sanitārās ministrijas Ķīnas Farmakopejas komisija. Ķīnas farmakopeja, 1. daļa. Ķīna: Ķīmiskās rūpniecības izdevniecība; 2010. 126. lpp.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. Cistanche tubulosa fenilethanoīdu glikozīdu pētniecības progress. Central South Pharm. 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, He L. Rou Cong Rong efekts(Herba Cistanches Deserticola) par reproduktīvo toksicitāti pelēm, ko izraisa Leigongtengas glikozīds (Radix et Rhizoma Tripterygii). J Tradit Chin Med. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H u.c. AKE un trombocītu agregācijas inhibitori no Tamarix Hojnacki Bunge (Herba Cistanches saimniekaugu augs), kas aug Siņdzjanā. Farmakogn Mag. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P utt. Dekstrāna sulfāta nātrija inducētā kolīta meliorācija pelēm ar ehinacīdu bagātinātu Cistanche tubulosa ekstraktu. Phytother Res. 2014;28(1):110–9.