1. daļa. Askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda mijiedarbība dzelzs klātbūtnē un bez tās termiskās apstrādes laikā un ietekme uz antioksidantu darbību

Mar 15, 2022


Sīkākai informācijai sazinietiestina.xiang@wecistanche.com


Abstrakts: Augļos un dārzeņos esošie bioaktīvie savienojumi ietekmē viens otruantioksidantsaktivitāte. Tīri standarti un parasto augu savienojumu maisījumi, protiaskorbīnskābe, {{0}}kafeoilhīnskābe un kvercetīna-3-rutinosīds (summa 0,3 mM) dzelzs klātbūtnē un bez tā tika analizēti pirms un pēc termiskās apstrādes ūdens šķīdumā. Antioksidantu aktivitāte tika noteikta pēc kopējā fenola satura (TPC), 1,1-difenil-2-pikrilhidrazila (DPPH) un 2,2'-azinobis (3-etilbenzotiazolīna{{14}). }sulfonskābes) (TEAC) radikāļu attīrīšanas testi. Jonu dzelzs (Fe2 plus) un dzelzs dzelzs (Fe) daudzums tika mērīts fotometriski. Reakcijas produktu kvalifikācijai un kvantitatīvai noteikšanai tika izmantota HPLC. Rezultāti parādīja, ka termiskā apstrāde ne vienmēr izraisa antioksidanta aktivitātes samazināšanos, pat ja savienojumu koncentrācija samazinās, jo tad pašiem noārdīšanās produktiem ir antioksidanta aktivitāte. Visos izmantotajos antioksidantu testos askorbīnskābes un 5-kofeoilhīnskābes attiecībai 2:1 dzelzs klātbūtnē bija spēcīga sinerģiska iedarbība, savukārt attiecībai 1:2 bija spēcīga antagonistiska iedarbība. Prooksidants dzelzs pozitīvi ietekmēja antioksidanta aktivitāti kombinācijā ar izmantotajiem antioksidantiem, savukārt dzelzs dzelzs pati mijiedarbojās ar parastajiem in vitro testiem kopējās antioksidanta aktivitātes noteikšanai. Šie rezultāti liecina, ka savienojumu antioksidantu aktivitāti ietekmē tādi faktori kā mijiedarbība ar citām molekulām, temperatūra un klātesošie minerāli.

Atslēgvārdi: ABTS; antagonisms;askorbīnskābe;bioaktīvi savienojumi;5-kofeoilhīnskābe; helātus veidojošie kompleksi; melnais dzelzs; dzelzs dzelzs;HPLC; kvercetīna-3-rutinosīda sinerģisms; TPC

Noklikšķiniet šeit, lai iegūtu vairāk informācijas

flavonoids antioxidant

1. Ievads

Cilvēka uzturā visas dienas garumā, pat vienas ēdienreizes laikā, tiek patērēts daudz dažādu augu izcelsmes produktu. Augļi un dārzeņi ir saistīti ar dažādiem ieguvumiem veselībai, jo tajos ir dažādi bioaktīvie savienojumi, ti, vitamīni, minerālvielas un sekundārie augu metabolīti |1]. Salīdzinot ar vitamīniem un minerālvielām, sekundārie augu metabolīti, piemēram, fenoli, mūsdienu zināšanām netiek uzskatīti par būtiskiem cilvēka veselībai[2]. Tomēr daudzi sekundārie augu metabolīti ir spēcīgi antioksidanti, kas palīdz aizsargāt bioloģiskās sistēmas no reaktīvajām skābekļa sugām (ROS) un reaktīvām slāpekļa sugām (RNS)[3]. Šie bioaktīvie savienojumi var mijiedarboties viens ar otru pirms lietošanas, radot daudzus turpmākus reakcijas produktus vai kompleksus. Līdz ar to var mainīties to ietekme uz patērētāju veselību un antioksidanta aktivitāte (AOA) 4| vai pazaudēta pirms ēšanas. Dažādas savienojumu molekulārās struktūras un to dažādās kombinācijas mijiedarbības rezultātā var radīt papildu, sinerģiskus vai pat antagonistiskus efektus. Augu komponentu mijiedarbības ietekme uz to radikāļu attīrīšanas spēju vēl nav pilnībā izprasta, jo īpaši tāpēc, ka ir daudz dažādu oksidācijas stadiju un to spēja veidot kompleksus. Galvenais bioaktīvais savienojums, kas atrodams daudzās augu sugās, ir 5-kofeoilhinskābe (hlorogēnskābe), kofeīnskābes un hinskābes hidroksikanēļskābes esteris. Tas var veidot dzelzs dzelzs kompleksus, kas parasti ir saistīti ar samazinātu nehēma dzelzs uzsūkšanos cilvēkiem[5,6]. Dzelzs kā hemoglobīna sastāvdaļa ir cilvēka organismam būtisks minerāls, savukārt dzelzs pārpalikums var izraisīt šūnu oksidatīvo stresu [7]. Mijiedarbība ar citām uzturvielām var palielināt vai samazināt dzelzs uzsūkšanos, piemēram, veidojot kompleksus. Turklāt dzelzs spēj viegli pieņemt un nodot elektronus.

Vēl viens interesants bioaktīvs savienojums augos irkvercetīns-3-rutinosīds(rutīns), aflavonoīdu glikozīds, ko galvenokārt sintezē augi, lai pasargātu sevi no UV starojuma [8,9]. Tam ir zema šķīdība ūdenī [10], un tā nevar tieši iekļūt cilvēka asinsritē, tāpēc tā bioaktīvā aktivitāte sākas tikai sešas līdz deviņas stundas pēc patērēšanas, kad tas iziet cauri zarnu mikrobiomam. Uztura bagātinātājos kvercetīna-3-rutinosīdu bieži kombinē ar askorbīnskābi [11].Askorbīnskābeir cilvēka organismam būtisks vitamīns un nepieciešams daudzos vielmaiņas procesos. Tas ir arī spēcīgs ūdenī šķīstošs antioksidants, bet var darboties arī kā prooksidants, kas ir saistīts ar spēju samazināt dzelzs dzelzs saturu, veidojot helātu kompleksu, kam seko dzelzs dzelzs un askorbīna radikāļa pārveide[12]. Palielināta bioaktīvo savienojumu kvercetīna-3-rutinosīda, 5-kofeoilhīnskābes vai dzelzs uzsūkšanās cilvēka organismā tika konstatēta, pievienojot askorbīnskābi [12], savukārt 5-kofeoilhīnskābe samazināja dzelzs uzsūkšanos. pēc kompleksēšanas [6]. Lai prognozētu dažādu produktu ieguvumus veselībai attiecībā uz bioaktīviem savienojumiem, parasti tiek izmantoti in vitro antioksidantu testi. Šī ietekmes uz veselību prognoze ir ierobežota savienojumu mainīgās biopieejamības, metabolizācijas un dažādu antioksidantu mehānismu dēļ|13]. Tomēr šie testi joprojām ir noderīgi, lai pārbaudītu bioaktīvos savienojumus, piemēram, polifenolus, vai, kā šajā pētījumā, lai novērtētu atsevišķu savienojumu AOA un to mijiedarbību. Augļi un dārzeņi satur daudzveidīgu bioaktīvo savienojumu kopumu, kas var veidot kompleksus ar citiem savienojumiem un olbaltumvielām, kas var mijiedarboties ar tiem. Šīs mijiedarbības var ietekmēt savienojumu uzvedību un iegūto AOA. Tomēr šis darbs ir paredzēts, lai veicinātu zināšanas par to, kā bioaktīvie savienojumi mijiedarbojas viens ar otru un to ietekmi uz AOA. Šī pētījuma jaunums ir parasto fenola savienojumu, proti, askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes, kvercetīna-3-rutinoīda, mijiedarbība savā starpā un minerālu dzelzs pirms un pēc termiskās apstrādes. Pirms šī pētījuma šie faktori tika novērtēti atsevišķi, nevis kopā. Uzmanība tika likta uz AOA un tās spēju veidot kompleksus. Hipotēzes bija šādas: (1) termiskā apstrāde negatīvi ietekmē AOA antioksidantu noārdīšanās dēļ, (2) maisījumi dažādās attiecībās ar askorbīnskābes, 5-kafeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīdu rada sinerģisku. ietekme uz AOA, un (3) minerālvielas un prooksidanta dzelzs pievienošana samazinās antioksidantu antioksidantu aktivitāti atsevišķi vai maisījumos.

flavonoids clear free radicals

2. Rezultāti

2.1. Termiskās apstrādes ietekme uz askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda standartiem un minerāldzelzs antioksidantu aktivitāti

Nevienā no tīrajiem askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes vaikvercetīns-3-rutinosīds(1. attēls) vai to maisījumi (2. un 3. attēls) bija gatavošanas laika no 0 līdz 40 minūtēm ietekme uz novēroto AOA, izņemot askorbīnskābes un dzelzs kombināciju. AOA bija zemāks TEAC un DPPH testos pēc 40 minūšu vārīšanas, salīdzinot ar termiski neapstrādātiem paraugiem (1. attēls). Paraugiem, kas satur askorbīnskābi, AOA ir tendence samazināties, savukārt paraugiem, kas satur kvercetīna-3-rutinoīdu, AOA palielinās, ja gatavošanas laiks ir ilgāks (attēli 1-3).

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red),  quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with  and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked  with a triangle ▲. Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and  are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.  In binary mixtures, detected by the TEAC assay (Figure 2a–c), iron led to a significant  or trending increase in AOA. Among samples without iron, no differences between AOA  of mixtures or ratios were found. In the presence of iron at a cooking time of 0 min, the  ratios 1:1 and 1:2 of ascorbic acid and 5-caffeylquinic acid, and a 2:1 ratio of the 5- caffeylquinic acid and queretin-3-rutinoside mixture, were higher in their AOA than their  iron-free counterparts. In the DPPH assay (Figure 2d–f), the combination of ascorbic acid  with 5-caffeoylquinic acid, as well as with quercetin-3-rutinoside, showed in the presence  of iron in all ratios a higher AOA than the AOA of pure ascorbic acid. However, ascorbic  acid combined with quercetin-3-rutinoside showed a higher AOA in the absence of iron,  being comparable to pure quercetin-3-rutinoside. In the TPC assay (Figure 2g–i), the AOA  of all three binary mixtures showed identical patterns. There was no influence of iron or  cooking time on AOA. These results correspond with previous findings in pure substances (Figure 1): the lowest AOA was detected in ascorbic acid and 5-caffeoylquinic acid  mixtures, followed by ascorbic acid with quercetin-3-rutinoside, and the highest AOA was  found in the combination of 5-caffeoylquinic acid and quercetin-3-rutinoside.  Figure 1. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ascorbic acid (AsA; yellow), 5-caffeoylquinic acid (CQA; red), quercetin-3-rutinoside (Rutin; blue) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples were tested using (a) TEAC, (b) DPPH, and (c) TPC assays. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a triangle N . Letters indicate differences between the three substances as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 2 and 3.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid  (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA);  standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate  the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences  (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and  without iron are marked with an asterisk *. Differences to 0 min cooked samples of the same substance are marked with a  triangle ▲. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times  and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.  In all ternary mixtures, no differences between ratios, regardless of the presence of  iron, in TEAC and DPPH assays were found (Figure 3a–f). Higher AOAs were found in  the TEAC assay (Figure 3a–c) in the presence of iron. At 0 min cooking time the AOAs of  the equimolar mixture and the 1:2:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside were higher in the presence of iron. The DPPH assay revealed higher  Figure 2. Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on binary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on antioxidant activity (AOA); standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate the different mixing ratios: equimolar mixtures are yellow, 1:2 ratios are red, and 2:1 ratios are blue. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) within different cooking times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 3.

2.2. Dzelzs un dažādu askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda standartu ietekme uz antioksidantu aktivitāti

Analīzes ar TEAC testu (attēls la) parādīja, ka tīras askorbīnskābes AOA bija zemāka nekā kvercetīna{{0}}rutinosīda AOA. Dzelzs klātbūtnē askorbīnskābes AOA bija pat zemāka nekā kvercetīna-3-rutinosīda un 5-kofeoilhīnskābes AOA. Dzelzs pievienošana palielināja kvercetīna-3-rutinosīda un 5-kofeoilhīnskābes AOA. Gatavošanas laikā 0min, tikai 5-kafeoilhīnskābes AOA bija augstāka gan dzelzs klātbūtnē, gan bez tā. DPPH tests (1.b attēls) atklāja augstāku kvercetīna-3-rutinosīda AOA bez dzelzs, salīdzinot ar 5-kafeoilhīnskābi un askorbīnskābi. Dzelzs klātbūtne izraisīja AOA pieaugumu 5-kofeoilhīnskābes un AOA samazināšanos kvercetīna-3-rutinosīda paraugos. Gatavošanas laikā 0 minūtē tikai kvercetīna-3-rutinosīds bija augstāks, ja nebija dzelzs, nekā tad, ja bija dzelzs. Tikai TPC testā (lc attēls) dzelzs neietekmēja AOA, un trīs vielu secība palika tāda pati.

Bināros maisījumos, kas konstatēti ar TEAC testu (2.a–c attēls), dzelzs izraisīja ievērojamu vai tendenciozu AOA pieaugumu. Starp paraugiem bez dzelzs netika konstatētas atšķirības starp AOA maisījumiem vai attiecībām. Dzelzs klātbūtnē, gatavošanas laikā 0 min, askorbīnskābes un 5-kofeoilhīnskābes attiecība 1:1 un 1:2 un {{10} }kafeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda maisījuma AOA līmenis bija augstāks nekā tiem, kas nesatur dzelzi. DPPH testā (2.d-f attēls) askorbīnskābes kombinācija ar 5-kofeoilhīnskābi, kā arī ar kvercetīna-3-rutinosīdu dzelzs klātbūtnē visās attiecībās uzrādīja augstāku AOA nekā tīras askorbīnskābes AOA. Tomēr askorbīnskābe kopā ar kvercetīna-3-rutinosīdu uzrādīja augstāku AOA bez dzelzs, kas ir salīdzināma ar tīru kvercetīna-3-rutinoīdu. TPC testā (2g-i attēls) visu trīs bināro maisījumu AOA uzrādīja identiskus modeļus. Dzelzs vai gatavošanas laiks neietekmēja AOA. Šie rezultāti atbilst iepriekšējiem atklājumiem par tīrām vielām (1. attēls): zemākais AOA tika konstatēts askorbīnskābes un 5-kofeoilhīnskābes maisījumos, kam sekoja askorbīnskābe ar kvercetīna-3-rutinosīdu, un augstākais AOA bija atrodams 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda kombinācijā.

Visos trīskāršos maisījumos TEAC un DPPH testos netika konstatētas atšķirības starp attiecībām neatkarīgi no dzelzs klātbūtnes (3.a–f attēls). Augstāki AOA tika konstatēti TEAC testā (3.a-c attēls) dzelzs klātbūtnē. 0minūtē gatavošanas laikā ekvimolārā maisījuma AOA un askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinoīda attiecība 1:2:1 bija augstāka dzelzs klātbūtnē. . DPPH tests atklāja augstāku AOA paraugos ar dzelzi attiecībā 1:2:1 (3.e attēls). Saskaņā ar binārajiem maisījumiem TPC testu neietekmēja ne dzelzs, ne gatavošanas laiks (3.g-i. attēls). Turklāt ekvimolārajam maisījumam bez dzelzs bija zemāks AOA nekā attiecība 1: 2: 2. Neekvimolāros maisījumos ar vienu dubultotu savienojumu AOA attiecība 1:1:2 bija augstāka, salīdzinot ar attiecību 2:1:1 (3.h attēls), un neekvimolāros ar diviem dubultotiem savienojumiem, 1:2: 2 attiecība bija augstāka AOA, salīdzinot ar attiecību 2:1:2 un 2:2:1 (3.i attēls) dzelzs klātbūtnē un bez tā.

Influence of cooking time (0, 10, 20, and 40 min) on ternary mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic acid (CQA), quercetin-3-rutinoside (Rutin) with (solid lines) and without (dashed lines) iron (Fe) on AOA; standard deviation not shown. All samples tested using (a–c) TEAC, (d–f) DPPH, and (g–i) TPC assays. Colors indicate different mixing ratios. Significant differences (p ≤ 0.05 by Tukey's HSD test (n = 3)) with different exposure times of the same substance and between samples with and without iron are marked with an asterisk *. Letters indicate differences between substance mixtures and ratios as mean values over all measured times and are comparable to results of the same test assay in Figures 1 and 2.

1flavonoids antioxidant

2.3. Antioksidantu aktivitātes sinerģiskā un antagonistiskā iedarbība

Visās testa pārbaudēs galvenokārt tika konstatēta vāja sinerģiska un antagonistiska iedarbība ar mijiedarbību zem 10 procentiem (4. attēls). Jāatzīmē, ka starp visiem izmantotajiem testa testiem askorbīnskābes un 5-kofeoilhīnskābes attiecībai 2:1 dzelzs klātbūtnē bija spēcīga sinerģiska iedarbība, savukārt askorbīnskābes un 5-kofeoilhīnskābes attiecībai 1:2. skābei bija spēcīga antagonistiska iedarbība. TPC testā šīs parādības parādījās arī maisījumos bez dzelzs. DPPH testā tika atklāts vēl viens spēcīgs antagonistisks efekts visās bināro maisījumu attiecībās bez dzelzi saturošas 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda (4.b attēls). Trīskāršajām askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīdu maisījumiem TEAC tests uzrādīja spēcīgu antagonistisku iedarbību attiecībā uz 2:2:1 attiecībām ar dzelzi (4.a attēls). Trīskāršos maisījumos ar dzelzi DPPH tests atklāja spēcīgu antagonistisku iedarbību vārītos paraugos attiecībās 1:2:1, 1:1:2, 2:1:1 un 2:2:1, kā arī maisījumos bez dzelzs. attiecībās 1:1:2, 1:2:2 un 2:1:1 (4.b attēls). TPC tests uzrādīja spēcīgu sinerģisku efektu maisījumos bez dzelzs proporcijā 1:2:1 (4.c attēls).

demostraction as the chart

2.4.Totālais un loģikas dzelzis

Jonu dzelzs tika pievienots kā ekvimolārs maisījums no 50 procentiem dzelzs dzelzs (Fe3 plus ) un 50% dzelzs dzelzs (Fe2 plus ) iepriekš minētajiem tīrajiem, binārajiem un trīskāršajiem maisījumiem. Visos paraugos dzelzs dzelzs attiecība novirzījās uz dzelzs dzelzi, salīdzinot ar sākotnēji pievienoto ekvimolāro attiecību. Ikreiz, kad paraugos bija askorbīnskābe, saistītā dzelzs daudzums gatavošanas laikā samazinājās un pēc tam pazuda vai stabilizējās (1. Pīrsona korelācija ar TEAC testa datiem atklāja spēcīgu negatīvu korelāciju (-0.641,p mazāka vai vienāda ar 2,2*10-16) starp AOA un dzelzs dzelzs joniem un pozitīvu korelāciju starp AOA. un dzelzs dzelzs (0,377, lpp<4.1*10-)over all="" samples.="" furthermore,="" the="" dpph="" assay="" showed="" a="" negative="" correlation="" (-0.429,p≤1.3*10-1l)="" between="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions.="" meanwhile,="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" only="" weakly=""><0.0006).in the="" tpcassay,="" aoa="" and="" ferrous="" iron="" ions="" were="" strongly="" negatively="" correlated="" (-0.772,="" p=""><2.2*10-16), and="" aoa="" and="" ferric="" iron="" ions="" were="" strongly="" positively="" correlated="" (0.685,=""><>

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside, and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%

Tīrās askorbīnskābes paraugos bija konstatējamas tikai dzelzs dzelzs pēdas neatkarīgi no to gatavošanas laika. Turklāt visos askorbīnskābes paraugos pēc vārīšanas palielinājās melnā dzelzs daudzums, savukārt saistītā dzelzs samazinājās. 5-kofeoilhīnskābes paraugos dzelzs dzelzs samazinājās par 13,3 procentiem pēc 40 minūšu termiskās apstrādes, bet tajā pašā laikā dzelzs dzelzs nedaudz palielinājās. Kvercetīna-3-rutinosīda paraugi ar dzelzi radīja gandrīz stabilu daudzumu melnais dzelzs. Saistītā dzelzs daudzums palielinājās, pagarinot gatavošanas laiku, savukārt dzelzs dzelzs samazinājās par 20,49 procentiem pēc 40 minūšu vārīšanas (1. tabula).

Askorbīnskābes klātbūtnē 0 min termiski apstrādāti bināri paraugi saturēja no 18,9% līdz 28,9% saistītās dzelzs, kas tika izdalīta vārīšanas laikā. Saistīta dzelzs tika konstatēta bināros maisījumos pēc 20 un 40 minūšu vārīšanas tikai tad, ja nebija askorbīnskābes. Askorbīnskābes un 5-kafeoilhīnskābes maisījumos bija lielāks dzelzs dzelzs daudzums nekā askorbīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda maisījumos. 5-Kafeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinosīda kombinācija visās attiecībās uzrādīja līdzīgus modeļus, dzelzs dzelzs daudzums nedaudz palielinājās un dzelzs dzelzs daudzums samazinājās, pagarinot gatavošanas laiku. Saistītā dzelzs šajā maisījumā tika konstatēta tikai pēc 20 un 40 minūšu vārīšanas (2. tabula).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the double standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5%.

Trīskāršajos maisījumos dzelzs dzelzs daudzums bija lielāks un dzelzs dzelzs daudzums bija mazāks nekā sākotnēji katra ekvimolārā koncentrācija. Kopējais augstākais melnā dzelzs saturs tika konstatēts paraugos, kad askorbīnskābes koncentrācija tika dubultota (attiecības 2:1:1, 2:1:1, 2:2:1). Gatavošanas process vēl vairāk palielināja dzelzs un dzelzs daudzumu, bet saistītā dzelzs samazinājās (3. tabula).

Measured ionic iron species, ferric iron (Fe3+) and ferrous iron (Fe2+), and calculated bound iron after mixing with the ternary standard mixtures of ascorbic acid (AsA), 5-caffeoylquinic (CQA), and quercetin-3-rutinoside (Rutin), and cooking for 0, 10, 20, and 40 min with equimolar concentrations of ferrous and ferric iron in percent; traces ≤ 5 %

2.5. Vielu maisījumu kvalitatīvā un kvantitatīvā analīze ar HPLC

HPLC dati liecināja, ka visos 0 min vārītajos paraugos gan dzelzs klātbūtnē, gan bez tā bija tikai sākotnēji ievietotās askorbīnskābes, 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinoīda vielas. (dati nav parādīti). Pēc 40 minūšu ilgas vārīšanas no askorbīnskābes tika iegūti divi papildu maksimumi (3. un 4. maksimums) neatkarīgi no dzelzs klātbūtnes (5. attēls). Dzelzs klātbūtnē tika iegūti divi jauni 5-kafeoilhīnskābes produkti (pīķi). 6. un 7.) un viens no kvercetīna-3-rutinosīda (8. maksimums) (5.b attēls).

Ja nebija dzelzs, askorbīnskābes koncentrācija samazinājās visos maisījumos devas un reakcijas attiecībā no sākotnējās koncentrācijas 0,3 mM pēc 40 min vārīšanas līdz 26,79 procentiem no sākotnējās koncentrācijas un ar sākotnējo 0,2 mM no 44.08 procenti līdz 51,67 procentiem, ar sākotnējo 0,15 mM no 60,49 procentiem līdz 65,47 procentiem, ar sākotnējo 0,1 mM 77,84 procenti. un 86,41 procenti un palielinās līdz 90,05 procentiem ar sākotnējo 0,06 mM (S1 tabula).

Dzelzs klātbūtnē tikai tīras askorbīnskābes paraugos koncentrācijas samazināšanās tika konstatēta pēc 40 min vārīšanas, kas ir augstāka salīdzinājumā ar askorbīnskābes paraugu bez dzelzs (S1 tabula). Pretēji askorbīnskābes paraugiem bez dzelzs, augstākas askorbīnskābes koncentrācijas izraisīja lielāku noārdīšanās pakāpi (S1 tabula). Visos binārajos maisījumos tikai askorbīnskābes koncentrācija samazinājās 0 min vārītos paraugos. Pēc 40 minūšu vārīšanas tika konstatēta 5-kofeoilhīnskābes vai kvercetīna-3-rutinosīda koncentrācijas samazināšanās, ja to kombinēja ar askorbīnskābi. Abas vielas samazina askorbīnskābes koncentrācijas samazināšanos. Augstākas 5-kofeoilhīnskābes koncentrācijas samazināja askorbīnskābes noārdīšanos. Bināros 5-kofeoilhīnskābes un kvercetīna-3-rutinoīda maisījumos 5-kofeoilhīnskābes koncentrācija samazinājās, bet kvercetīna-3-rutinosīda koncentrācija saglabājās stabila pēc 40 minūšu vārīšanas. Trīskāršos maisījumos kvercetīna-3-rutinosīds saglabājās stabils pēc 40 minūšu vārīšanas, savukārt askorbīnskābes un 5-kofeoilhīnskābes koncentrācija samazinājās.

HPLC-DAD chromatograms of the 1:1:1 ratio of ascorbic acid, 5-caffeoylquinic acid, and quercetin-3-rutinoside (a) after 40 min cooking in the absence of iron, and (b) after 40 min cooking in the presence of iron. 1: ascorbic acid, 2: insert peak, 3: ascorbic acid derivate, 4: ascorbic acid derivate, 5: 5-caffeoylquinic acid, 6: caffeic acid; 7: 5-caffeoylquinic acid derivate, 8: quercetin-3-rutinoside derivate, 9: quercetin-3-rutinoside, 10: impurity of the quercetin-3-rutinoside standard

Cistanche extract


Lai iegūtu papildinformāciju, noklikšķiniet uz tālāk esošās saites 2. daļai:
https://www.xjcistanche.com/news/part2-interactions-of-ascorbic-acid-5-caffeo-54918073.html



Jums varētu patikt arī