SLC37A2, ar fosforu saistīta molekula, kas palielina gludo muskuļu šūnu daudzumu kalcificētajā aortā Ⅱ

Rezultāti

Meklējiet kandidātmolekulasfosfātu izraisīta pārkaļķošanāsAoSMC. Lai meklētu molekulas, kuru ekspresija palielinās pārkaļķotā AoSMC, tika veikta aptuveni 26,000 gēnu DNS mikromasīva analīze, izmantojot pārkaļķotu AoSMC un nepārkaļķotu AoSMC mRNS. 1. attēlā parādīta dažādu gēnu siltuma karte, kas izteikta starp AoSMC, kas nav kultivētas ar 2,6 mM, un tiem, kas 12 dienas tika kultivēti ar 2,6 mM P. Kopā 3066 gēni palielinājās vairāk nekā divas reizes uz kultivētu un nekultivētu AoSMC. Gēni ar paaugstinātu ekspresiju bija molekulas, kas saistītas ar osteoblastu veidošanos, piemēram, osteopontīns, periostīna osteoblastam specifiskais faktors (POSTN), Wnt3, interleikīns-6 (IL-6), unfibroblastu augšanas faktors23 (FGF23), kā arī vairākas SLC superģimenes molekulas (1. tabula). Starp šīm molekulām mēs koncentrējāmies uz SLC37A2, kuras mRNS palielinājās apmēram 3,1 reizi uz AoSMC, kas kultivēta ar 2,6 mM P 12 dienas, salīdzinot ar AoSMCnot, kas kultivēta ar 2,6 mM P. Ir ziņots, ka SLC37A2 ir saistīta ar P regulēšanu, taču tā detalizētā funkcija nav zināma. iekaisuma gadījumā SLC37A2 ekspresijā.Asinsvadu pārkaļķošanāsziņots, ka to veicina iekaisums, tāpēc mēs pārbaudījām, vai SLC37A2 mRNS ietekmē iekaisuma reakcija. 24 stundas pēc ārstēšanas ar LPS IL-6 ievērojami palielinājās, salīdzinot ar AoSMC, kas nebija ārstēts ar LPS (2.A att.). Šie rezultāti tika novēroti arī 72 stundas pēc ārstēšanas ar LPS. SLC37A2mRNS ekspresijā starp grupām nebija būtisku atšķirību (2.B att.).

KLIKŠĶINIET ŠEIT, LAI IEGŪTU DABĪGU ORGANISKO CISTANŠES EKSTRAKTU AR 25% EHINAKOZĪDU UN 9% AKTEOZĪDU NIERU FUNKCIJAI

Wecistanche atbalsta dienests - lielākā cistanche eksportētāja Ķīnā:

E-pasts:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel.:+86 15292862950

Iegādājieties sīkāku informāciju par specifikācijām:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

SLC37A2 ekspresija fosfātu izraisītā pārkaļķotā AoSMC. Lai noteiktu, vai SLC37A2 ir iesaistīts pārkaļķošanā, mēs pārbaudījām SLC37A2 mRNS ekspresiju uz nepārkaļķota un pārkaļķota AoSMC (3. att.). Pārkaļķošanās tika novērota AoSMC, kas tika kultivēta ar 2,6 mM P 6 dienas, un progresīvāka pārkaļķošanās tika novērota AoSMC, kas tika kultivēta ar 2,6 mM P 12 dienas (3.A attēls). Runx2 mRNS ievērojami palielinājās uz pārkaļķota AoSMC, salīdzinot ar nepārkaļķotu AoSMC (3.B att.). SLC37A2 mRNS ievērojami sāka palielināties 3. dienā pārkaļķotā AoSMC, un 9. dienā pārkaļķots AoSMC ievērojami palielinājās apmēram divas reizes, salīdzinot ar nepārkaļķotu AoSMC (Fig). 3C). SLC37A2 proteīna ekspresija 6. dienā ievērojami palielinājās apmēram divas reizes pārkaļķotā AoSMC, salīdzinot ar nepārkaļķotu AoSMC (3. att.).

SLC37A2 ekspresija CKD modeļa žurkām.

Lai atklātu, vai SLC37A2 ir iesaistīts asinsvadu kalcifikācijā in vivo, mēs pārbaudījām SLC37A2 mRNS ekspresiju adenīna izraisītu CKD žurku traukos. Adenīna izraisītas CKD žurkas tika izveidotas saskaņā ar protokolu, kas parādīts 4.A attēlā. 2. tabulā parādīts ķermeņa svars un bioķīmiskie dati upurēšanas dienā. Ķermeņa svarsadenīna izraisīta CKDžurkām bija ievērojami zemāks, salīdzinot ar žurkām, kurām nav HNS. Salīdzinot ar ne-HNS grupu, HNS grupām bija augstāks P un Cr līmenis plazmā, zemāks Calīmenis un 24-stundu P, Ca un Cr izdalīšanās ar urīnu. Turklāt šie rezultāti bija pamanāmāki CKD-HP grupā, kā tas bija redzams iepriekšējos pētījumos.37,39) Tādējādi nieru funkcija samazinājās HNS grupā, īpaši HNS-HP grupā. Mēs pārbaudījām mRNS ekspresiju CKD žurku aortas traukos (4. att.). Lai gan nebija būtisku atšķirību Runx2 mRNS, transkripcijas faktora, kas pārvietojas asinsvadu pārkaļķošanās mehānisma agrīnā stadijā, ekspresijā, starp grupām (4.B att.) osteopontīna mRNS ekspresija ievērojami palielinājās CKD-HP grupā, salīdzinot ar citām grupām. CKD grupa unCKD-LP grupa(4. att. C). SLC37A2 mRNS ekspresija tika ievērojami palielināta arī CK D-HP grupā, salīdzinot ar ne-CKD grupu un CKD-LP grupu (4. D. attēls). Tā kā šīm žurkām bija lielas individuālas atšķirības, mēs pārbaudījām korelāciju starp osteopontīnu un SLC37A2 mRNS un konstatējām nozīmīgu korelāciju starp šīm molekulām (4. E attēls). Torakoabdominālās aortas histoloģiskā izmeklēšana atklāja mediālu kalcifikāciju tikai CKD-HP grupas aortā (5.A att.). Lai pārbaudītu SLC37A2 ekspresijas vietu aortā, mēs veicām CKD-HPrats aortas imūnkrāsošanu. SLC37A2 bija spēcīgi izteikts apgabalā, kurasinsvadu kalcifikācijanotika (5.B att.).

1. att. Dažādi izteiktu gēnu siltuma karte starp AoSMCnon-kultivētu ar 2,6 mM P un AoSMC, kas kultivēts ar 2,6 mM P. Sarkans apzīmē gēnus ar augstu signāla līmeni, un zaļais apzīmē gēnus ar zemu signāla līmeni. AOSMC aortas gludās muskulatūras šūnas. Skatiet attēlu tiešsaistes versijā.

Diskusija

Mēs pētījām ar P saistītās molekulas, kas iesaistītas asinsvadu kalcifikācijā. Mūsu rezultāti parādīja, ka SLC37A2 ir viena no molekulām, kas palielinās līdz arasinsvadu kalcifikācijain vitro un in vivo.

SLC37 saime pieder pie SLC virsdzimtas un ietver olbaltumvielas: SLC37A 1-440) SLC37 saime satur transmembrānu proteīnus endoplazmatiskā tīkla membrānā, un tās secība ir homologa baktēriju organofosfāta fosfāta antiporteram.(41) SLC37A4 ir labāk pazīstams kāglikozes{0}}fosfāta transportētājs.(2-44 Tomēr ir maz ziņojumu par SLC37A2, un sīkāka informācija par tā darbību nav pilnībā izprotama. SLC37A2, kas pazīstams arī kā SPX2, ir bagātīgi ekspresēts peļu makrofāgos, liesā, aizkrūts dziedzerī un baltajos taukaudos (WAT). ). SLC37A2 ar dzīvnieku slimību. (47-49) SLC37A2 defekts izraisakraniomandibulāra osteopātija(CMO), pašlimitējoša proliferatīva kaulu slimība terjeru šķirnēm. (47) Piena liellopiem SLC37A2 homozigota mutācija ir atbildīga par embriju nāvi. (8.9) Turklāt. SLC37A2 ir uzskatīts par D vitamīna mērķa gēnu mērķi. (tātad) Ir ņemts vērā arī fosfora-Ser294 progesterona receptora mērķa gēna potenciāls krūts vēža progresēšanā (1) Ir ziņots, ka iekaisums var gan izraisīt, gan saasināt asinsvadu pārkaļķošanos. (2s26) Turklāt. SLC37A2 ir bagātīgi izteikts makrofāgos un WAT, kurus ietekmē makrofāgu infiltrācija. (s) Tāpēc. mēs uzskatījām, ka SLC37A2 varētu būt molekula, kas izteikta iekaisuma laikā. Tomēr mūsu atklājumi neuzrādīja SLC37A2 ekspresijas palielināšanos AoSMC, kas pakļauts iekaisuma reakcijai, šķiet, ka šo molekulu tieši neietekmē iekaisuma stimulācija. SLC37A2 var būt iesaistīts asinsvadu kalcifikācijā, izmantojot citu mehānismu, nevis iekaisumu.

Ir ziņots, ka SLC37A2 darbojas kā P-saistītspretporteris. (41) Turklāt tika ziņots, ka SLC37A2 ir D vitamīna mērķa gēns, un SLC37A2 gēns satur galveno vitamīna Dreceptoru saistīšanas vietu (ss2). Sistemātiski korelētas izmaiņas SLC37A2 gēnu ekspresijā un cirkulējošās D vitamīna formas. ir novērota cilvēka perifēro asiņu mononukleārajās šūnās. (50)D vitamīna receptori saistās ar 1a, 25-dihidroksi D vitamīnu, kas ir D vitamīna metabolīts, un regulē gēnu ekspresiju. lo, 25-dihidroksivitamīns D, darbojas Ca un P absorbcijā zarnās, Ca mobilizēšanā kaulos un Cain reabsorbcijā nierēs. (3) Ir ziņots, ka ar adenīnu inducētām HNS modeļa žurkām seruma la, 25-dihidroksivitamīns D bija ievērojami augstāks žurkām, kuras lietoja augstu p uzturu, ar progresējošu asinsvadu pārkaļķošanos, salīdzinot ar žurkām ar zemu līmeni. -p uztura uzņemšana.39) SLC37A2 var būt saistīts ar P regulēšanu caur D vitamīnu. Ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai noskaidrotu, ka D vitamīns ietekmē SLC37A2 ekspresiju in vitro un vivo.

Ir pierādīts, ka asinsvadu kalcifikācijas mehānisms ir līdzīgs kaulu veidošanās mehānismam. CMO izraisītais SLC37A2 deficīts ir klīniski salīdzināms ar cilvēka infantilu garozas hiperostozi, kas pazīstama arī kā Kafi slimība.7 Turklāt ir ziņojumi, ka SLC37A2 izpaužas kaulu smadzenēs un osteoklastos. o Hytone et al. (7 izvirzīja hipotēzi, ka SLC37A2 izraisītu osteoblastisko un osteoklastisko kaulu veidošanās funkciju nelīdzsvarotību un rezultātā izraisītu hiperostozi.

Runx2 ir būtisks asinsvadu kalcifikācijas transkripcijas faktors. Tiek arī ziņots, ka Runx2 ir osteoblastu diferenciācijas transkripcijas faktors, kas izteikts jaunattīstības krūšu epitēlija šūnās. (s435) Runx2, šķiet, ir nepieciešams fosfora-Ser294 progesterona mērķa gēnu regulēšanai, kas ir saistīti ar krūts vēža progresēšanu. SLC37A2 tiek uzskatīts par fosfora-Ser294 progesterona receptoru mērķa gēnu. (s1) Tāpēc tiek uzskatīts, ka Runx2 var regulēt SLC37A2 Šajā pētījumā SLC37A2 mRNS ekspresija CkD žurku aortā tika korelēta ar osteopontīna mRNS, kuras mērķis ir Runx2 gēns.