Spontāna granulocītiskā leikēmija NOD/Shi-scid IL-2R nulles gadījumā

Abstract:Šeit mēs ziņojam par spontānas granulocītu leikēmijas gadījumu 51-nedēļu vecam vīrietim NOD/Shi-scidIL-2R nulles (NOG) pele. Pele parādījaprogresējoša anēmijaunrupja elpošanas kustība. Makroskopiski liesa mainīja krāsu un palielinājās. Histoloģiski kaulu smadzenes nokrūšu kaulsun augšstilba kauls bija ļoti šūnu un gandrīz tikai piepildīts arneoplastiskās šūnas. Neoplastisko šūnu kodoli bija lieli, ovāli vai nedaudz neregulāras formas, un nelielam skaitam šūnu bijanieres- vai gredzenveida kodoli.Neoplastiskās šūnasplaši iefiltrējās orgānos, un liesa un aknas bija skaidri iesaistītas. Imūnhistoķīmiski liela neoplastisko šūnu populācija liesas sarkanajā pulpā un aknu sinusoīdā bija pozitīvamieloperoksidāze. Pamatojoties uz histoloģiskām pazīmēm, šis gadījums tika diagnosticētsgranulocītu leikēmija. Šī romāna informācija parspontāni audzējivar būt noderīgi šī peles celma atbilstošai izmantošanai turpmākajos pētījumos. (DOI: 10.1293/tox.2020-0092; J Toxicol Pathol 2021; 34: 241–244)

Atslēgvārdi: granulocītu leikēmija, NOG pele, spontāns audzējs

KLIKŠĶINIET ŠEIT, LAI IEGŪTU DABĪGU ORGANISKO CISTANŠES EKSTRAKTU AR 25% EHINAKOZĪDU UN 9% AKTEOZĪDU NIERU FUNKCIJAI

Wecistanche atbalsta dienests - lielākā cistanche eksportētāja Ķīnā:

E-pasts:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel.:+86 15292862950

Iegādājieties sīkāku informāciju par specifikācijām:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Spontāna granulocītu leikēmijair reti ziņots par vairākiem peļu celmiem, lai gan ķīmiskās vielas un jonizējošais starojums var palielināt dažu peļu celmu sastopamību1, 2. NOD/Shi-scid IL-2R nulles (NOG) peles ir smagi slimas.dzīvnieki ar imūndeficītu, un uzrāda defektus T-, B- un dabiskās killer šūnās, kā arī slikti funkcionējošās makrofāgos un dendrītiskās šūnas, izsitot IL-2 receptoru ķēdi (IL2R c) NOD-scid celmā3. Šo peles celmu izmanto neklīniskiem testiem, piemēram, audzēja ģenēzes testam, lai novērtētu reģeneratīvās medicīnas bioloģisko produktu kvalitāti un drošību, izmantojot no cilvēka iegūtas šūnas/audus, jo ievērojami labākas ksenogēno šūnu transplantācijas4–6. Lai gan imūndeficīta stāvoklis un tā ietekme uz ksenotransplantātiem ir labi pētīta, ir maz informācijas par spontāniem audzējiem, kas rodas šajā peles celmā, piemēram, aizkrūts dziedzera limfomu,piena dziedzerisdziedzeris adenoma/adenokarcinoma, bronhioloalveolāra karcinoma, rabdomiosarkoma, un teratoma7. Šeit mēs ziņojam par granulocītu leikēmijas gadījumu 51-nedēļu vecam NOG peles tēviņam.

Dzīvnieks tika iegūts no In-Vivo Science Inc. (Kanagawa, Japāna) 6 nedēļu vecumā un tika turēts neārstēts. Dzīvnieks tika atsevišķi izmitināts plastmasas būrī ar individuāli ventilējamu būru sistēmu (Maxi Miser Caging System; Oriental Giken Inc., Tokija, Japāna) videi kontrolētā barjeru sistēmas telpā, kuras temperatūra tika uzturēta 22 ± 2 grādu temperatūrā. mitrums 50 ± 20% un 12-h gaismas/tumsas cikls. Pele tika barota ar autoklāvu granulētu diētu (CRF-1; Charles River Japan, Inc., Tokija, Japāna) ar autoklāvētu krāna ūdeni un libitum. Dzīvnieks tika apstrādāts saskaņā ar protokolu, ko apstiprinājusi CMIC Pharma Science Co., Ltd. Institucionālā dzīvnieku kopšanas un lietošanas komiteja, ko akreditējusi AAALAC International.

Šai pelei bija klīniskas pavājināšanās pazīmes, piemēram, anēmija, rupjas elpošanas kustības un ķermeņa masas samazināšanās no 49 līdz 51 nedēļas vecumam. Dzīvnieks tika eitanāzēts 51 nedēļas vecumā. Autopsijas laikā liesa mainīja krāsu un palielinājās. Citos orgānos netika novēroti acīmredzami patoloģiski atklājumi. Aizkrūts dziedzeris un limfmezgli bija atrofiski, līdzīgi kā normālām NOG pelēm.

Visi orgānu un audu paraugi tika regulāri savākti, fiksēti 10% neitrālā buferētā formalīnā, iestrādāti parafīnā un sadalīti aptuveni 3 μm. Viņa patoloģiskai izmeklēšanai sekcijas tika iekrāsotas ar hematoksilīnu un eozīnu (HE). Liesas un aknu sekcijas tika imūnhistoķīmiski iekrāsotas pret truša anti-cilvēka mieloperoksidāzes (MPO) poliklonālo antivielu (Dako Japāna, Tokija, Japāna) kā mieloīdo šūnu marķieri, truša anti-cilvēka CD3 monoklonālo antivielu (Nichirei Biosciences Inc., Tokija, Japāna). ) kā T šūnu marķieri un truša anti-human Pax-5 monoklonālo antivielu (Abcam Inc., Kembridža, Apvienotā Karaliste) kā B šūnu marķieri8. Sekcijas tika inkubētas ar antivielām istabas temperatūrā 1 stundu, un imūndetekcija tika veikta, izmantojot Histofine® MOUSESTAIN KIT (Nichirei Biosciences Inc.) ar 3,3′-diaminobenzidīnu/H2O2 kā hromogēnu. Imūnkrāsotas sekcijas toreiz bijapretkrāso ar hematoksilīnu.

Histopatoloģiski krūšu kaula un augšstilba kaula smadzenes bija ļoti šūnveida un gandrīz tikai piepildītas ar neoplastiskām šūnām (1.A att.). Taukaudi tika pilnībā pārvietoti. Smadzenēs ik pa laikam parādījās šūnu perēkļi, kas sastāv no eritroīdiem un megakariocītiskiem elementiem, kas tika uzskatīti par šūnu paliekām.normāla hematopoēze. Lielākajai daļai neoplastisko šūnu bija blastisks izskats, ko raksturo lieli, ovāli vai nedaudz neregulāras formas kodoli un retikulārs hromatīns, kas satur vienu vai vairākus izcilus nukleolus. Bija neliels skaits šūnu ar nieres vai gredzenveida kodoliem, un bija arī dažas šūnas ar daivu kodoliem (1. B att.). Granulas neoplastisko šūnu citoplazmā nebija acīmredzamas sekcijās, kas iekrāsotas ar HE. Smadzenēs tika atrastas daudzas mitotiskas figūras, un neregulāri tika novēroti arī apoptotiski ķermeņi. Neoplastiskās šūnas ievērojami iebruka periostē un apkārtējos skeleta muskuļos. Notika plaša neoplastisko šūnu infiltrācija citos orgānos un audos, un tika skaidri iesaistīta liesa un aknas. Liesā neoplastiskas šūnas tika novērotas visā sarkanajā pulpā (2. att.). Bija acīmredzama neoplastisko šūnu kapsulāra infiltrācija. Tika novērotas dažas jaunattīstības eritroīdu sērijas un megakariocīti. Reizēm tika novēroti megakariocīti, kas satur vienu vai dažas mieloīdas šūnas citoplazmā, kas liecina par emperipolēzi. Aknās neoplastiskas šūnas difūzi iefiltrējās Glisona kapsulā un aknu sinusoīdos (3. att.). Dažos asinsvados bija redzamas arī neoplastiskas šūnas ar nieres vai gredzenveida kodoliem. Daži hepatocīti periportālajā zonā ar izteiktu neoplastisku šūnu infiltrāciju uzrādīja deģenerāciju vai nekrozi, savukārt aknu daivas normālā struktūra palika neskarta. Neoplastisko šūnu infiltrācija tika konstatēta arī citos orgānos, tostarp plaušu alveolārajā sienā un perivaskulārajā reģionā, starp nierēm, sinusoīdā virsnieru dziedzeros un gļotādā un submucosa kuņģa traktā (kuņģī un zarnās). Imūnhistoķīmiski liela neoplastisko šūnu populācija liesas sarkanajā pulpā (4. att.) un aknu sinusoīdā bija pozitīva attiecībā uz MPO. CD3 un Pax-5 pozitīvas šūnas netika atklātas. CD3 un Pax-5 imūnkrāsošanas rezultāti bija līdzīgi normālu NOG peļu liesai, kas bija histoloģiski hipoplastiska un neuzrādīja CD3 vai Pax-5 pozitīvu šūnu.

Imūnhistoķīmiskā izmeklēšana atklāja, ka neoplastiskās šūnas cēlušās no mieloīdo šūnu līnijām. Dažās iesaistītajās zonās, īpaši liesā un aknās, nelielam skaitam šūnu bija nieru, gredzena vai daivu formas, kas liecina par diferencējošām mieloīdu sērijām. Šie atklājumi liecina, ka neoplastiskās šūnas ir iegūtas no nenobriedušiem granulocītiem. Smagas mielopoēzes gadījums var būt acīmredzams, ja ir visu veidu attīstošās mieloīdu sērijas, atšķirībā no nenobriedušu šūnu dominēšanas leikēmijas gadījumā. Turklāt progresējoša anēmija ir izplatīta granulocītu leikēmijas klīniskā pazīme, un eritroīdo un megakariocītu šūnu skaita pieaugums ir vājš1. Neliela granulocītu populācija ar lobētiem kodoliem skartajā zonā bez acīmredzama iekaisuma liecina, ka šī gadījuma konstatējumi ir neoplastiska un nav reaktīva mielopoēze.

Granulocītiskās leikēmijas gadījumā kaulu smadzenes var aizstāt ar nenobriedušām un nobriedušām mieloīdām šūnām. Iepriekšējā ziņojumā par citiem peļu celmiem šīs neoplastiskās šūnas pilnībā iefiltrējās aknās, liesā, limfmezglos utt.2, un šīs šūnas liesā un aknās galvenokārt atradās sarkanajā mīkstumā un ap Glisona kapsulu1. Tādējādi leikēmisko šūnu sadalījums šajā gadījumā bija identisks iepriekšējā gadījumā. Pamatojoties uz šūnu morfoloģiju, granulocītu leikēmija pelēm ir iedalīta divos veidos: juvenīlā tipa, kas ir salīdzināma ar cilvēka akūtu mieloleikozi, un nobriedušā tipa ar cilvēka hronisko mieloleikēmiju1. Juvenīlajā gadījumā neoplastiskajās šūnās kaulu smadzenēs, liesā un aknās dominēja vāji diferencētas šūnas, turpretim var redzēt mieloīdus elementus, kas pārstāv dažādas nobriešanas pakāpes, un mieloblastu procentuālais daudzums dažos nobriedušos gadījumos bija zems2, 9. Šajā gadījumā leikēmijas šūnās dominēja nenobriedusi forma ar lieliem, ovāliem vai nedaudz neregulāras formas kodoliem. Turklāt, ņemot vērā klīniskos atklājumus, ka akūti attīstījās vispārēja veselības pasliktināšanās, tostarp progresējoša anēmija un rupjas respiratorās kustības; tādēļ tiek pieņemts, ka šī lieta ir nepilngadīga.

1. att. Ciskas kaula kaulu smadzeņu histoloģiskie attēli. A: Neoplastiskās šūnas difūzi vairojas, tādējādi aizstājot kaulu smadzenes. B: Kodoli ir lieli, ovāli vai nedaudz neregulāras formas. Nelielam skaitam šūnu ir nieres (dzeltenās bultiņas), gredzenveida (zaļās bultiņas) vai daivas (baltās bultiņas) formas kodoli. Mitotiskā figūra ir norādīta ar baltu bultiņu. VIŅŠ traipus. Melna josla=50 μm (A), 10 μm (B).

Iepriekšējā publikācijā par NOG pelēm neoplastiski bojājumi parasti bija retāk sastopami; tomēr ziņots par aizkrūts dziedzera limfomu 0.82% vecuma grupā no 16 līdz 40 nedēļām7, 10. Cik mums ir zināms, NOG pelēm iepriekš nav ziņots par spontānu granulocītu leikēmiju. Vairākos peļu celmos, tostarp B6C3F1 un BALB/c, granulocītu leikēmija radās reti2, 11, un par to nav ziņots par šīm pelēm 12 mēnešu vecumā vai jaunākām. Šajā gadījumā granulocītu leikēmija attīstījās 51 nedēļas vecumā, kas bija salīdzinoši jauns vecums. Šī jaunā informācija par spontāniem audzējiem var būt noderīga šīs peles celma atbilstošai lietošanai turpmākajos pētījumos.