Pētījums par kalcitriola pretnovecošanās ietekmi uz cilvēka dabiskajām killer šūnām in vitro Ⅱ

3. Rezultāti

Šajā pētījumā galvenā uzmanība tika pievērsta kalcitriola pretnovecošanās iedarbībai uz NK šūnām. Rezultāti parādīja, ka Calcitriolsamazināja ar novecošanos saistīto biomarķieru, tostarp CD16, ekspresiju, TIM3, PD-1, KIR unpalielināja NK šūnu NKG2A ekspresiju. tas arīkavē NK šūnu proliferācijuunarestēt tos G1 fāzē. Kalcitriolssamazina iekaisuma faktoru izdalīšanospiemēram, IL-5, IL-13, IFN- un TNF-, un tiem bija noteiktiantioksidējoša iedarbība, kas varētu veicināt toanti-novecošanās iedarbība.

Noklikšķiniet šeit, lai uzzinātu Cistanche antioksidācijas efektus un iegūtu paraugu

3.1 Kalcitriols mainīja virsmas novecošanās marķieru ekspresiju, palēnināja NK šūnu amplifikāciju un uzturēja NK šūnas G1 fāzē.

Novecojošās NK šūnas uzrādīja augstu ar novecošanos saistīto biomarķieru, piemēram, CD16, PD-1, TIM3 un KIR, ekspresiju un zemu NKG2A ekspresiju. Mēs noskaidrojām, ka ar novecošanos saistīto biomarķieru NKG2A (1.a attēls) (*P < 0.05) ekspresijas līmeņi palielinājās, bet CD16 (1.b attēls), TIM3 (1.c attēls) ekspresija. ), PD-1 (1.d attēls) un KIR (1.e attēls) (*P < 0,05) samazinājās pēc 72 stundu ilgas apstrādes ar kalcitriolu. Reversie efekti bija pozitīvi korelēti ar kalcitriola koncentrāciju (1. papildu attēls).

Mēs paplašinājām šūnas no cilvēka perifēro asiņu paraugiem in vitro. Pēc tam mēs izolējām NK šūnas (CD{{0}}CD56 plus) ar magnētisko lodīšu šķirošanu (1.f attēls). Pēc tam šķirotās NK šūnas tika kultivētas ar dažādām kalcitriola vai rapamicīna koncentrācijām 72 stundas. CCK8 krāsošanas rezultāti parādīja, ka ar kalcitriolu apstrādāto augstas koncentrācijas NK šūnu augšanas ātrums (10− [7] M) bija lēnāks nekā negatīvās kontroles grupā (NC) (*P < {{17). }}.{25}}5) (1.g attēls). Turklāt kalcitriols regulēja NK šūnu ciklu. Pēc 48 stundu ilgas apstrādes ar kalcitriolu NK šūnām bija liela no kalcitriola koncentrācijas atkarīga nobīde uz G1 fāzi (* P < 0, 05), savukārt šūnu īpatsvars G2 fāzē (# P < 0, 05) samazinājās. Ar kalcitriolu apstrādāto NK šūnu īpatsvars S fāzē nemainījās neatkarīgi no kalcitriola koncentrācijas (1.h attēls, 2. papildu attēls). Pēc tam mēs pārbaudījām, vai šī no kalcitriola atvasinātā G1 fāzes apstāšanās izraisīja NK šūnu apoptozi, un konstatējām, ka NK šūnu apoptotiskais biomarķieris, T šūnu imūnglobulīns un imūnreceptoru tirozīna bāzes inhibējošais motīvs (ITIM) domēns (TIGIT) neuzrādīja būtiskas izmaiņas (P > 0,05). , NS) (1.i attēls). Šie rezultāti nozīmēja, ka kalcitriola pievienošana samazināja NK šūnu augšanas ātrumu, samazināja to proliferāciju un izraisīja NK šūnu G1 fāzes apstāšanos, nevis izraisīja apoptozi.

3.2 Kalcitriols samazināja iekaisuma citokīnu izdalīšanos NK šūnās un inhibēja NK šūnu citotoksicitāti

Iekaisums ir hronisks zemas pakāpes iekaisums. Tas paātrina NK šūnu novecošanos, jo NK šūnas piedalās šajā hroniskajā iekaisumā. 2.a attēlā parādīts, ka IL-5, IL-13, IFN- un TNF- līmenis ievērojami samazinājās visās grupās nekā negatīvajā kontrolē (*P < 0.05). IFN un TNF ir labi zināmi pro-iekaisuma citokīni, taču daži pētījumi ir parādījuši arī IL-5 pro-iekaisuma īpašības. Ir ziņots, ka IL-13 veicina dažāda veida gļotādas iekaisumus, piemēram, alerģisku astmu, čūlaino kolītu, eozinofīlo ezofagītu un vairākas ar fibrozi saistītas slimības.

Tomēr NK šūnu citotoksicitāte galvenokārt ietver iekaisuma citokīnu izdalīšanos un šūnu degranulāciju. Mēs marķējām K562 šūnas ar DIO un 4 stundas kopā kultivējām DIO-K562 šūnas ar kalcitriolu apstrādātām NK šūnām. DIO plus PI plus šūnu procentuālais daudzums bija mazāks visās efektora (E)/mērķa (T) attiecības grupās nekā negatīvajā kontrolē (*P < 0.{11}}5) (2.b attēls, c). Secinātā diferenciācijas klastera 107 (CD107) izteiksme norādīja uz zemāku degranulāciju (*P < 0,05) (2.d attēls). Šie rezultāti liecina, ka kalcitriols kavē NK nogalināšanas funkciju.

3.3. Kalcitriols aktivizēja SIRT1- ∆Exon8 ekspresiju un ar pretnovecošanos saistīto SIRT1/pERK ceļu

Lai izpētītu kalcitriola pretnovecošanās ietekmi uz NK šūnām, mēs atklājām ar novecošanos saistītos signalizācijas ceļus, izmantojot imūnblotēšanu. Tika veikta Western blot analīze, lai novērtētu VDR, SIRT1-∆Exon8, SIRT1 un PERK ekspresijas līmeņus ar kalcitriolu apstrādātajās NK šūnās. Statistiskā analīze parādīja, ka kalci triols aktivizēja VDR/SIRT1/pERK asi augstās koncentrācijās. Tikmēr kalcitriols aktivizēja SIRT1-∆Exon8 ekspresiju (*P < 0.05). (3.a attēls).

1. attēls. Ar novecošanu saistītais fenotips, šūnu ekspansija un NK šūnu šūnu cikla analīze. (ae) Cilvēka NK šūnām, kas tika apstrādātas ar kalcitriolu vai rapamicīnu 72 stundas, bija šādi šūnu biomarķieri: dabiskās slepkavas grupas 2 loceklis A (NKG2A), diferenciācijas kopa 16 (CD16), T šūnu imūnglobulīns un mucīna domēnu saturošs proteīns 3 ( TIM3) ieprogrammēta šūnu nāve-1 (PD-1) un killer imūnglobulīniem līdzīgs receptors (KIR), kas bija saistīti ar novecošanos. Kā pozitīvā kontrole tika izmantota 50 nM rapamicīna (RAPA). n=3 katrai grupai. *P < 0.05 un **P < 0.01 tika salīdzināti ar negatīvās kontroles (NC) grupu. f) NK šūnas (pa labi), kas izolētas no cilvēka perifēro asiņu mononukleārajām šūnām (PBMC, pa kreisi), šķirojot magnētiskās lodītes. g) šūnu proliferācijas analīze, ko mēra ar šūnu skaitīšanas komplektu 8 (CCK8). (h) Kalcitriola vai rapamicīna ietekme uz šūnu ciklu šķirotās nk šūnās pēc apstrādes 72 h, wp 0.0, 0.05 un fp < 0,05 norādīja uz nozīmīgu atšķirības attiecīgi G1, S un G2 fāzēs. Visas grupas tika salīdzinātas attiecīgi ar NC. n=3. ) T šūnu imūnglobulīna un imūnreceptoru tirozīna bāzes inhibējošā motīva (M) domēna (TGI) pozitīvo NK šūnu procentuālais daudzums pēc apstrādes ar kalcitriolu vai rapamicīnu 72 stundas.*p < 0,05 un **p < 0,01 tika salīdzināts ar NC. n=3.

3.4 Kalcitriols izturēja oksidatīvā stresa izraisīto NK šūnu novecošanos in vitro

Ir plaši atzīts, ka novecošanu izraisa oksidatīvo bojājumu uzkrāšanās, jo gadu gaitā ir atrasts liels pierādījumu kopums [31]. Mēs kultivējām NK šūnas ar dažādām H2O2 koncentrācijām 24 stundas un atklājām, ka 1{{1{{20}}}0 μM bija tuvākā koncentrācija vidējai letālajai devai (LD50) (3.b attēls). . TIM3 ekspresija NK šūnu populācijā palielinājās, pievienojot H2O2, savukārt ekspresija samazinājās pēc apstrādes ar kalcitriolu (* P < 0,05) (3.c attēls). Turklāt novecojošās NK šūnas tika iekrāsotas zilā krāsā -galaktozidāzes klātbūtnē. Šī šūnu zilā krāsa ir īpaša novecojošo šūnu pazīme. Statistiskā analīze parādīja, ka neapstrādātām NK šūnām ir mazāka šūnu galaktozidāzes aktivitāte, savukārt NK šūnām, kas pakļautas H2O2, bija paaugstināta galaktozidāzes aktivitāte. Kalcitriols samazināja - galaktozidāzes pozitīvo populāciju, norādot uz mazāku novecojošu šūnu klātbūtni (*P < 0,05) (3.d attēls). Samazināts mitohondriju membrānas potenciāls ir novērots arī dažādās novecojošās šūnās no vairākām zīdītāju sugām. Šajā pētījumā mēs novērtējām NK šūnu mitohondriju membrānas potenciālu. Statistikas rezultāti parādīja, ka H2O2 būtiski samazināja NK šūnu aktivitāti, salīdzinot ar neapstrādāto šūnu aktivitāti, bet kalcitriols palielināja H2O2 radītos bojājumus (*P < 0,05) (3.e attēls).

2. attēls. Kalcitriola ietekme uz NK šūnu funkcijām. a ) Citokīna analīze, ko 48 stundu laikā izdala ar kalcitriolu apstrādātās NK šūnas. b) Fluorescences aktivētās šūnu šķirošanas (FACS) rezultāti uzrādīja atmirušās K562 šūnas, kas iezīmētas ar 3,3 -oktadeciloksakarbocianīnuDlO) un propīdija jodīdu (P).K562 šūnas tika kultivētas kopā ar dažādām ar kalcitriolu apstrādātām Nk šūnām. uz 4h. (C) Mirušo K562 šūnu FACS analīze nonāvēšanas testos. (d) apstrādāto Nk šūnu degranulācijas ietekme nogalināšanas testos. n=3 eaciyroup. *p < 0.05 un **p < 0,01 tika salīdzināti ar NC

3.5 Kalcitriols izturēja oksidatīvā stresa izraisīto NK šūnu apoptozi in vitro

Pēc tam mēs izmērījām apoptotisko šūnu skaitu. Plūsmas citometrijas rezultāti parādīja, ka apstrāde ar 100 μM H2O2 24 stundas izraisīja nozīmīgu NK šūnu apoptozi. Tomēr ārstēšana ar kalcitriolu samazināja apoptotisko attiecību (* P < 0, 05) (4.a attēls). Visi iepriekš minētie rezultāti parādīja kalcitriola izturību pret oksidatīvo stresu, ko izraisa H2O2. Tomēr oksidatīvā stresa apstākļos mēs atklājām apoptotiskus proteīnus NK šūnās. Pirms apstrādes ar H2O2 NK šūnām 24 stundas pievienoja 10− [7] M kalcitriolu. Ar apoptozi saistīto proteīnu, kaspāzes-3 p17 un kaspāzes-3 p20, līmenis ievērojami palielinājās pēc apstrādes ar H2O2. Kalcitriols samazināja H2O2-atvasināto apoptozi un samazināja kaspāzes-3, p17 un kaspāzes-3 p20 ekspresiju (*P < 0,05) (4.b attēls). Šie rezultāti liecināja, ka kalcitriols izturēja H2O2 izraisītu apoptozi.

3. attēlsanti-novecošanās iedarbībakalcitriola uz NK šūnām. (a) D vitamīna receptora (VDR), sirtuīna 1 (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8 un proteīnkināzei R līdzīgās endoplazmatiskās retikuluma kināzes (pERK) ekspresija NK šūnās tika noteikta ar Western blot analīzi. pēc apstrādes ar kalcitriolu 48 stundas. Kā slodzes kontrole tika izmantota gliceraldehīda-3-fosfāta dehidrogenāze (GAPDH). Joslu diagramma, kas ilustrē Western blot rezultātus (n=3). *P < 0.{{10}}5 un **P < 0.01 tika salīdzināti ar NC (n=3). (b) NK šūnu devu mirstības līkne pēc apstrādes ar ūdeņraža peroksīdu (H2O2) 24 stundas. c ) TIM3 šūnu procentuālais daudzums, kam ir augsta ekspresija pēc apstrādes ar 100 μM H2O2 24 stundas. d) ar novecošanos saistītās -galaktozidāzes krāsošanas un analīzes rezultāti. Novecojošās šūnas tika iekrāsotas zilā krāsā un norādītas ar sarkanām bultiņām. Mēroga josla, 50 μm. (e) NK šūnas tika iekrāsotas ar Hoechst un hlormetil-X-Rosamine (CMXRos), lai noteiktu šūnu atrašanās vietu un mitohondriju membrānas potenciālu. Novecojošās un apoptotiskās šūnas bija Hoechst plus CMXRos− un norādītas ar baltām bultiņām. Mēroga josla, 50 μm. Statistiskā analīze parādīja relatīvo fluorescences intensitāti. *P < 0,05 un **P < 0,01 tika salīdzināti ar H2O2 grupu attēlos C, D un E (n=3).

4. attēls. Kalcitriola antiapoptotiskā iedarbība uz NK šūnām. (a) Kalcitriola anti-apoptotiskā iedarbība H2O2- izraisītos ievainojumos. FACS analīze parādīja apoptotisko NK šūnu procentuālo daudzumu pēc apstrādes ar 100 μM H2O2 24 stundas. (b) Kaspāzes -3 p20 un kaspāzes-3 p17 ekspresijas līmeņi NK šūnās tika noteikti ar Western blot analīzi pēc apstrādes ar 100 μM H2O2 24 stundas. GAPDH tika izmantots kā iekraušanas kontrole. Joslu diagramma, kas ilustrē Western blotēšanas rezultātus (n=3). *P < 0,05 tika salīdzināts ar H2O2 grupu.

4. Diskusija

Ilgtermiņa mijiedarbība starp iekaisumu un oksidatīvo stresu ir svarīgs novecošanas faktors. Turklāt iekaisums un oksidatīvais stress ir sinerģiski [32]. Oksidatīvā stresa radītais ROS pārpalikums uzbrūk ķermeņa šūnām. Šī procesa laikā aktivizētā imūnsistēma atbrīvo iekaisuma faktorus, lai iznīcinātu patoloģiskas šūnas, kas izraisa turpmāku ROS veidošanos. Kalcitriola trūkums var izraisīt autoimūnas slimības, hroniskas vielmaiņas slimības un audzējus. Tomēr maz ir zināms par kalcitriola pretnovecošanās ietekmi uz imūnsistēmu, īpaši uz NK šūnām.

Šajā pētījumā mēs pētījām kalcitriola pretnovecošanās ietekmi uz NK šūnām. Mēs noskaidrojām, ka kalcitriols palielināja NKG2A ekspresiju, vienlaikus samazinot KIR ekspresiju in vitro. NK šūnu CD56−CD16 plus apakšpopulācija, kas, kā zināms, ir saistīta ar hronisku iekaisumu, gados vecākiem cilvēkiem ir ievērojami palielināta [33]. Tāpēc kalcitriola izraisītā CD16 ekspresijas samazināšanās var būt saistīta ar tā pretiekaisuma iedarbību. Ir ziņots, ka TIM-3 un PD-1 ir NK šūnu inhibējošie un izsīkšanas receptori. Mūsu pētījums parādīja, ka kalcitriols pazemināja TIM-3 un PD-1 ekspresijas līmeni un novērsa NK šūnu apoptozi.

Turklāt kalcitriols inhibēja NK šūnu paplašināšanos un uzturēja NK šūnu populāciju G1 fāzē in vitro. Tomēr S-fāzes šūnas netika ietekmētas. TIGIT, kas pazīstams kā NK šūnu kontrolpunkta faktors, palika nemainīgs. Šie rezultāti liecināja, ka 4. attēls. Kalcitriola antiapoptotiskā iedarbība uz NK šūnām. (a) Kalcitriola anti-apoptotiskā iedarbība H2O2-izraisītā ievainojumā. FACS analīze parādīja apoptotisko NK šūnu procentuālo daudzumu pēc apstrādes ar 100 μM H2O2 24 stundas. (b) Kaspāzes-3 p20 un kaspāzes-3 p17 ekspresijas līmeņi NK šūnās tika noteikti ar Western blot analīzi pēc apstrādes ar 100 μM H2O2 24 stundas. GAPDH tika izmantots kā iekraušanas kontrole. Joslu diagramma, kas ilustrē Western blotēšanas rezultātus (n=3). *P < 0,05 tika salīdzināts ar H2O2 grupu. BIOENGINEERED 6851 kalcitriols neizraisīja NK šūnu nāvi, bet tikai palēnināja NK šūnu paplašināšanās ātrumu.

Ir labi zināms, ka iekaisums izraisa imūnsistēmas novecošanos [34, 35]. Turklāt mēs atklājām, ka kalcitriols samazināja IL-5, IL-13, IFN- un TNF- līmeni NK šūnās. NK šūnu citotoksicitāti daļēji veicina iekaisuma faktoru izdalīšanās [36]. Turklāt samazinājās K562 audzēja šūnu mirstība un NK šūnu degranulācija. Šie rezultāti atbilda mūsu cerībām. Rapamicīns ir labi pazīstams medikaments, kas samazina vielmaiņas ātrumu, lai novērstu novecošanos[37], ko šajā pētījumā izmanto kā pozitīvo kontroli. Tas izraisa imūnsupresiju un palielina iespējamo audzēja un audzēja slodzes risku. Šis slogs ir apstiprināts krūts vēža peļu modeļos [38]. Nav zināms, vai kalcitriolam ir līdzīga iedarbība kā rapamicīnam. Būtu jāveic vairāk dzīvnieku un klīnisku pētījumu, lai pārbaudītu to ietekmi uz cilvēka ķermeni.

Visbeidzot, mēs pētījām kalcitriola ietekmi uz antioksidantu novecošanos. Resveratrols, labi zināms pretnovecošanās līdzeklis, var pazemināt NF-κB ceļu, aktivizējot SIRT1/PERK asi. Ir pierādīts, ka šī pazemināšana ir labvēlīga arī neirodeģeneratīvo traucējumu un sirds un asinsvadu slimību gadījumā [39]. SIRT1 deacetilēšana ir saistīta ar vielmaiņas kontroli un mitohondriju bioģenēzi. Šāda veida regulēšanā paaugstināts SIRT1 līmenis var veicināt peroksisomu proliferatora aktivētā receptoru gamma koaktivatora-1 alfa (PGC-1) uzkrāšanos kodolā, kā rezultātā notiek gēnu transkripcija, kas ir nepieciešami mitohondriju funkcija [40]. Turklāt SIRT1 nomāc rapamicīna (mTOR) signalizācijas ceļa zīdītāju mērķi, kas var aizsargāt nervus un pretoties smadzeņu novecošanai pelēm [41]. Šajā pētījumā mēs noteicām līdzīgu kalcitriola regulēšanas ceļu. Kalcitriols aktivizēja SIRT1, izmantojot VDR, un paaugstināja SIRT1/pERK asi.

Turklāt mēs atklājām, ka kalcitriols pārregulēja SIRT1-∆Exon8 ekspresiju. Stress ir pazīstams kā SIRT1-∆Exon8 augšupregulējošs faktors. Lai gan SIRT1-∆Exon8 pats par sevi uzrāda samazinātu p53 dezacetilēšanas aktivitāti, tas iedarbojas uz p53, ja tiek izteikts kopā ar pilna garuma SIRT1 [42]. Šis efekts norādīja uz kalcitriola anti-apoptotisko funkciju uz NK šūnām. Tomēr joprojām ir labāk jāizprot SIRT1-∆Exon8 loma ar vecumu saistītajos ceļos. Tā kā SIRT1 samazināšanās varētu būt saistīta ar oksidatīviem bojājumiem [43], mēs in vitro izveidojām akūti novecojošu NK šūnu modeli, izmantojot H2O2. H2O2 izraisītā oksidatīvā novecošanās palielināja TIM3 ekspresiju, kā arī -galaktozidāzes aktivitāti NK šūnās. Mēs noskaidrojām, ka kalcitriols izturēja oksidatīvos bojājumus un saglabāja NK šūnu mitohondriju aktivitāti un šūnu dzīvotspēju, vienlaikus novēršot šūnu apoptozi. Tomēr kalcitriols klīniskajā medicīnā vēl nav identificēts kā pretnovecošanās līdzeklis, jo ir vajadzīgi vairāk pierādījumu par šo zāļu pretnovecošanās iedarbību in vivo. Rezumējot, mēs sniedzām provizoriskus pierādījumus par kalcitriola pretnovecošanās iedarbību uz NK šūnām in vitro. Mēs uzskatām, ka šo zāļu iedarbība ir jāturpina pētīt turpmākajos pētījumos ar dzīvniekiem un klīniskajos pētījumos.

5. Secinājums

Šajā pētījumā mēs parādījāmanti-novecošanās iedarbībakalcitriola uz NK šūnām. Kalcitriols mainīja izteiksminovecojoši biomarķieriuz NK šūnām. Tas palēnināja NK pastiprināšanu un saglabāja tos G1 fāzē. Turklāt kalcitriols inhibēja iekaisuma citokīnu izdalīšanos un samazinātu NK šūnu degranulāciju. Pamatojoties uz visu iepriekš minēto, SIRT1-∆Exon8 un VDR/SIRT1/pERK ass aktivizēšana ar kalcitriolu varētu būt galvenais kalcitriola pretnovecošanās efekta mehānisms. Visbeidzot, kalcitriols izturēja NK šūnu oksidatīvo novecošanos in vitro. Turpmākajos pētījumos galvenā uzmanība jāpievērš dzīvnieku un klīniskiem pētījumiem.

Izceļ

(1) Kalcitriols samazināja ar vecumu saistīto biomarķieru, tostarp CD16, TIM3, PD-1, KIR, ekspresiju un palielināja NK šūnu NKG2A ekspresiju. (2) Kalcitriols spēja inhibēt NK šūnu proliferāciju un apturēt tās G1 fāzē. (3) Kalcitriols samazināja galveno iekaisuma faktoru, piemēram, IL-5, IL-13, IFN- un TNF- izdalīšanos no NK šūnām. (4) Kalcitriola pretnovecošanās iedarbība uz NK šūnām var sasniegt, izmantojot Sirt1- pERK signāla ceļu.

Pateicības Mēs vēlamies pateikties visiem mūsu grupas darbiniekiem par atbalstu un Šenženas Zinātnes un tehnoloģiju inovāciju komitejai par finansiālo atbalstu šim pētījumam.

Finansējums Šo darbu finansiāli atbalstīja Šeņdžeņas Zinātnes un tehnoloģiju inovāciju komiteja (JCYJ20170412155231633), Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund (Nr. SZXK062), Chengdu Wecistanche Biotech un Sanming Project of Medicine in Shenzhen (Nr. SZSM202011010); Šenženas Zinātnes un tehnoloģiju inovāciju komiteja [JCYJ20170412155231633]; Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund [Nr. SZXK062]; Sanmingas medicīnas projekts Šenžeņā [Nr. SZSM202011010].

Ētikas apstiprinājums Visas procedūras apstiprināja Šeņdžeņas Luohu Tautas slimnīcas ētikas komiteja (ZLNK 12/2019, Shenzhen, Ķīna). Eksperimentiem ar cilvēku paraugiem tika iegūta informēta piekrišana.

Atklāšanas paziņojums Visi autori apstiprināja šī manuskripta iesniegšanu. Autori paziņo, ka viņiem nav zināmu konkurējošu finanšu interešu vai personisku attiecību, kas varētu ietekmēt šajā dokumentā aprakstīto darbu.

Atsauces

[1] Ovadya Y, Landsberger T, Leins H, et al. Vājināta imūnsistēmas uzraudzība paātrina novecojošu šūnu uzkrāšanos un novecošanos. Nat Commun. 2018; 9 (1): 5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L u.c. Novecošanās pazīmes. Šūna. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM u.c. Killers 2.0: NK šūnu terapija vēža kontroles priekšgalā. J Clin Invest. 2019;129(9):3499–3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R u.c. Pluripotentas no cilmes šūnām iegūtas NK šūnas ar augstas afinitātes nešķeļamu CD16a mediē uzlabotu pretvēža aktivitāti. Asinis. 2020;135(6):399–410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Dabiskās killer šūnas: veselībā un slimībās. Hematol Oncol Stem Cell Ther. 2015;8(2):47–55.

[6] Le Garff-Tavernier M, et al. Cilvēka NK šūnām dzīves laikā ir lielas fenotipiskas un funkcionālas izmaiņas. Novecojoša šūna. 2010;9(4):527–535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J u.c. NKG2A, KIR un CD57 ekspresijas modeļi nosaka CD56dim NK-šūnu diferenciācijas procesu, kas nav saistīts no NK-šūnu izglītības. Asinis. 2010; 116 (19): 3853–3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. Ar vecumu saistītas izmaiņas dabisko killer šūnu repertuāros: ietekme uz NK šūnu funkciju un imūno uzraudzību. Vēzis Immunol Immunother. 2016; 65(4): 417–426. [9] Bi J, Tian Z. NK šūnu izsīkums. Front Immunol. 2017;8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E u.c. Hronisks iekaisums slimības etioloģijā visā dzīves laikā. Nat Med. 2019;25(12):1822–1832.

[11] Liu Y, et al. Citomegalovīrusa peptīdiem specifiska antiviela maina dabisko slepkavas šūnu homeostāzi un ir kopīga vairākām autoimūnām slimībām. Šūnu saimnieka mikrobs. 2016;19(3):400–408.

[12] Campus X, Pera A, Solana R u.c. NK šūnas veselīgā novecošanā un ar vecumu saistītās slimībās. J Biomed Biotechnol. 2012;2012:195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP u.c. Novecošanās ietekme uz nk šūnu populāciju un to proliferāciju ex vivo kultūras apstākļos. Anālo šūnu patols (Amst). 2018;2018:7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A u.c. D vitamīna un tā analogu farmakoloģiskā iedarbība: jaunākie notikumi. Narkotiku disks šodien. 2014; 19 (11): 1769–1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J u.c. Konstitutīvā DNS bojājuma signalizācijas vājināšanās ar

Jautājiet vairāk:

E-pasts:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plus 86 15292862950