Pētījums par Cistanche Deserticola ķīmiskajām sastāvdaļām, ķīniešu augu izcelsmes zāles nieru barošanai un jaņu stiprināšanai
Mar 09, 2022
Kontaktpersona: Odrija Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com
Ievads
Cistanche deserticolakas pieder Orobanchaceae ģimenei, ir Cistanche deserticola sausais, gaļīgais stublājs, kas ir salds, sāļš un silts. Tas tonizē nieres, stiprina jangu, mitrina zarnas un atslābina zarnas. To galvenokārt lieto, lai ārstētu impotenci, aukstumu un sāpes viduklī un ceļos, neauglību, zarnu sausumu un aizcietējumus. Ir ziņots arī par Cistanche deserticola farmakoloģisko iedarbību.
Ķīnas tradicionālās ķīniešu medicīnas akadēmijas Tradicionālās ķīniešu medicīnas institūts ir veicis ķīmiskos un farmakoloģiskos pētījumus parCistanche deserticola. Ir pierādīts, ka tā etanola ekstrakts ietekmē imūnsistēmu. Deviņi savienojumi tika atdalīti un identificēti kā D-mannīts — Sitosterīns, daukosterīns, dzintarskābe, triakontanols, 8-epibrucīna glikozīds, betaīns, kofeīnskābes glikolipīds un polisaharīdu savienojumi. Papildus mannītam un 8-epibrucīna glikozīdam no Cistanche deserticola pirmo reizi tika iegūtas citas sastāvdaļas. Kofeīnskābes glikolipīdam, betaīnam, mannītam, dzintarskābei un citiem savienojumiem ir dažādas fizioloģiskas aktivitātes. Tiem ir ietekme uz imūnsistēmu, seksuālo funkciju, sirds un asinsvadu sistēmu, aknām, novērš novecošanos utt.
Eksperimentālā daļa
Kušanas temperatūra tika mērīta ar Boetius PHMK mikroskopu, un termometrs netika noregulēts; Masas spektrometriju (EI) noteica ar MMH 70-70 instrumentu (Apvienotā Karaliste), un FD noteica ar M-80 gāzu hromatogrāfijas-masas spektrometru (Japāna); Kodolmagnētiskā rezonanse (ūdeņraža spektrs) noteikta ar JEOL FX 90Q tipa instrumentu (Japāna); ultravioletais spektrs tika noteikts ar tipa UV-3000 instrumentu; infrasarkanais spektrs tika mērīts ar Hitachi tipa 260-50 instrumentu, KBr tabletēšana un silikageli tika izgatavoti no Qingdao jūras ķīmiskās rūpnīcas, gēls LH-20 tika ražots Zviedrijā. Žāvēti Cistanche deserticola gaļas stublāji tika iegādāti no Pekinas ārstniecisko materiālu uzņēmuma, un tos identificēja Zhang Yanzhen.
1. Ekstrakcija un atdalīšana
Cistanche deserticola tiek sasmalcināta, perkolēta ar 95 procentu etanolu, šķīdinātāju atgūst, izšķīdina nelielā ūdens daudzumā, ekstrahē ar ēteri, silikagela kolonnas hromatogrāfiju, eluē ar petrolēteri-ēteri (6:4), lai iegūtu balto kristālu ( I). Ar ēteri ekstrahēto ūdens slāni iztvaicē, karsē un izšķīdina ar etanolu, atdzesē, lai iegūtu flokulentas nogulsnes (II). Cistanche deserticola ir perkolēta ar 50 procentiem etanola. Ekstrahēts ar etilacetātu, silikagela kolonnas hromatogrāfijā, eluējot ar etilacetātu, katrs pa 20ml (tas pats zemāk). Kopā tika savākti 37 paraugi un pārbaudīti ar plānslāņa hromatogrāfiju. Daļa, kas satur sākotnēji izplūdušo kristālu (III), tika apvienota. 24 ~ 37 paraugi tika izfiltrēti no baltā floka (II) un iztvaicēti līdz sausumam. Atlikumu apstrādāja ar silikagela kolonnas hromatogrāfiju un eluēja ar butanona-etilacetāta-benzola-ūdens (4:3:2:0,2). Tika savākti 12 paraugi, no kuriem 8 ~ 11 paraugi tika atdalīti no oranžiem kristāliem; ūdens slānis, kas ekstrahēts ar etilacetātu, tika ekstrahēts ar n-butanolu, silikagela kolonnas hromatogrāfiju un eluēts ar hloroformu-metanolu-ūdeni (6:4:1). Piektajā paraugā tika izšķīdināta plānas šķēles kristalizācija (IV), otra plānslāņa hromatogrāfijas daļa apvienota ar zilās fluorescences daļu, pēc tam tika izmantota silikagēla kolonnas hromatogrāfija, eluējot ar hloroformu-metanolu-ūdeni (7:3:2,5). ), izmantoja to pašu metodi apvienojumā ar zilās fluorescences daļu, šķērsoja gēla LH-20 kolonnu, eluēja ar metanolu-ūdeni (1:1). Astotais paraugs izšķīdināja nedaudz dzeltena pulvera (V), turpina eluēt. līdz 37 daļām, apvienojot ar nepieciešamo daļu iepriekš, silikagela kolonnas hromatogrāfiju, izkliedējot ar butanona-etilacetāta-benzola-ūdeni (4:3:2:0,2), nogriež zilo fluorescējošo segmentu un eluē ar metanolu, lai iegūtu gaismu. brūns pulveris (VI).
95% etanola ekstrakts, atdalot petrolēteri un dihlormetānu, izšķīdinot metanolā, zemspiediena silikagela kolonnas hromatogrāfiju, eluējot ar metanolu-hloroformu (9:l), katra pa 20 ml, 18. ~ 28. daļa izšķīdināja dažus bezkrāsainus kristālus (VII) ; ekstrahēja ar ūdeni Cistanche deserticola atlikumu pēc ekstrakcijas ar etanolu, pēc tam atlikumu koncentrēja, atdzesē, izšķīdināja lielu skaitu balto kristālu (VIII), noņem kristalizētā ūdens šķīdumu un pēc tam apstrādāja ar 4 reizes lielāku etanola daudzumu, lai iegūtu vairāk nokrišņu (IX).
2. Identifikācija
Savienojums I: balti adatu kristāli tika iegūti, pārkristalizējot ar acetonu, mp136 ~ 137 grādi. Etiķskābes anhidrīdā koncentrēts sērskābes reaģents uzrādīja pozitīvu reakciju (zaļš). EIMS m/z: 414 (M plus ). Plānslāņu hromatogrāfijas Rf vērtība un infrasarkanais spektrs atbilda - Sitosterola standartam, tāpēc tas tiek apstiprināts kā - Sitosterols.
Savienojums II tika pārkristalizēts, karsējot un divas reizes uzkarsējot ar etanolu, lai iegūtu baltas flokulējošas nogulsnes, mp290 ~ 291 grādi. Etiķskābes anhidrīda koncentrēts sērskābes reaģents uzrādīja pozitīvu reakciju (zaļš), - Naftola reaģents uzrādīja pozitīvu reakciju. EIMS m/z: 396 (bāzes maksimums), 382, 255, 213, 81, 57, 43. Plānslāņa hromatogrāfija atbilda zināmajam daukosterīna produktam, un maisījuma kušanas temperatūra nekritās. Tas tika apstiprināts kā daukosterols.
III savienojums metanols pārkristalizējās dažos iegarenos kristālos, mpl87 ~ 189 grādi, pH 2. EIMS m/z: 119 (M plus 1), 118 (M plus ), 101, 100, 74, 73, 55 (bāzes maksimums), 45, 28, 27. IR (KBr) cm-1: 3100 ~ 2500 (platums, OH), 1690 (C=O), 1420, 1310, 1200, 920, 800. RF vērtība plānslāņa hromatogrāfijā ir tāds pats kā dzintarskābes standartam. Turklāt tas atbilst dzintarskābes standarta masas spektram un standarta infrasarkanajam spektram, un maisījuma kušanas temperatūra nesamazinās. Tas ir apstiprināts kā dzintarskābe
Savienojumu IV pārkristalizē etanolā kā baltu spīdīgu cietu vielu, mp83 ~ 84 grādi. EIMS m/z: 420 (M plus -H2O), 57 (bāzes maksimums). Plānslāņu hromatogrāfijas Rf vērtība ir tāda pati kā zināmajam triakontanolam, un maisījuma kušanas temperatūra nesamazinās. Iepriekš minētie dati saskan ar literatūrā aprakstīto triakontanolu.
Savienojums VI: pēc izšķīdināšanas acetonā tika veikta silikagela kolonnas hromatogrāfija un eluēšana ar 60% metanola, lai iegūtu gaiši dzeltenus plānus amorfus kristālus, kas viegli šķīst ūdenī un šķīst metanolā, etanolā un acetonā, - naftola reaģents uzrādīja pozitīvu reakciju. . IR (KBr) cm-1: 3700 ~ 3000 (OH), 2900 (CH2, CH3), 1690 (C=O), 1600520 (C=C), 1440, 1350 , 1280, 1260 (COC), 1156, 1110, 1050 (CO), 807. UV λ nm (log ε): 218 (sh, 4,30), 249 (3,91), 291 (4,08), 330 (4,1). H-NMR (CD3COD3) δ ppm: 1,18 (3H, D, J=6, CH3 uz ramnozes), 2,75 (2h, t, J=7.2, 2H pozīcijā C), 4,75 ( 1H, D, J=8, C1-H uz glikozes), 5,17 (1H, D, J=1,8, C1-H uz ramnozes), 4,20 ~ 3,30 (12H, m, 2H pozīcijā C, 6H uz glikozes, 4H uz ramnozes), 6,27 (1H, D, J=16, 1H pozīcijā C), 7,52 (1H, a, J {{76} } pozīcija C (1H), 6,60 (1H, a, J=8, C5 "'-H), 6,90 (1H, DD, J=8 / 2, C6"' - H), 7,10 (1H, D, J=2, C2"'-H), 6,70 (1H, D, J 2-, C{101}}H), 6,65 (1H, D, J {{ 105}}, C{106}}H), 6,52 (1H, DD, J=8/2, C6-H), H-NMR (DMOS) 8 ppm: 7,43 (1H. s, OH), 8,07 (1H, s, OH), 850 (2H, s, 2 * OH), pazuda pēc pastiprinātas ūdens apmaiņas. [a] 22D: - 68,37 grādi (C {{126} }.67MeOH). FDMS m/z: 647 (M plus plus Na), 625 (M plus plus 1), 624 (M plus ), 479 (M plus 1-ramnosils), 478 (M plus -ramnosils ), kas atbilst molekulārajai formulai C29H36O15. Pēc savienojuma VI skābes hidrolīzes uz papīra hromāta parādās divi brūni plankumi grāfiju. Rf vērtība pilnībā atbilst ramnozei un glikozei, un kušanas temperatūra nesamazinās, sajaucot ar zināmo akteozīdu. Iepriekš minētie dati atbilst literatūrā aprakstītajai 3,4-dihidroksi grupai — fenetoksi-o- - L-ramnosil (1 → 3) - 4-o-kofeīnskābes grupa-D- glikopiranozīds būtībā ir kancerogēns.
Savienojums VII ir balts kristāls, kas iegūts, pārkristalizējot acetonu metanolu, virs mp299 grādiem (sadalīšanās), ļoti labi šķīst ūdenī, viegli atšķaidās un šķīst etanolā un metanolā. Alkaloīdu reaģents uzrāda pozitīvu reakciju. Elementu analīzes eksperimentālās vērtības ( procenti ): C47.29,H9.16,N10.54; teorētiskās vērtības ( procenti ): C47.54,H9.52,N11.11. Tas atbilst molekulārajai formulai C5H11NO2.1/2H2O. IR (KBr) cm-1: 3360 (saistīts NH, OH), 2940, 1620 (C=O), 1470, 1390, 1330, 1240, 1125, 980, 930, 890. H- KMR (D2O) 8 ppm: 3,28 (9H,s, 3*CH3), 3,88 (2H,s,CH2), 4,68 (D2O). EIMS m/z: 117 (M plus ), 100, 85, 73, 59, 58 (bāzes maksimums), 44, 42. Plānslāņa hromatogrāfija pilnībā atbilst betaīna standarta Rf vērtībai un kušanas temperatūrai. maisījums nekrīt. Kodolmagnētiskās rezonanses spektrs, infrasarkanais spektrs un masas spektrs atbilst betaīna standarta spektram, tāpēc betaīns tiek atpazīts.
Savienojums IX: izšķīdināts ūdenī, ekstrahēts ar n-butanolu-hloroformu (l:4), un piemaisījumi tika noņemti. Ūdens slāni apstrādāja ar 4 reizes lielāku etanola daudzumu, nogulsnes izšķīdināja ūdenī, atkrāsoja ar ūdeņraža peroksīdu, un mazmolekulārie savienojumi tika noņemti ar dialīzi. Membrānu apstrādāja ar 5 reizes lielāku etanola daudzumu, lai iegūtu gaiši dzeltenas nogulsnes. Fēlinga reakcija bija negatīva pirms nogulšņu hidrolīzes, un pēc hidrolīzes izveidojās brūngani sarkanas nogulsnes. Pēc skābes hidrolīzes hidrolizāts tika pakļauts papīra hromatogrāfijai. Salīdzinot ar standarta cukuru, tika konstatēta tikai glikoze, tāpēc tika apstiprināts, ka tika konstatēti polisaharīdi, kas galvenokārt sastāv no glikozes.
