Taizemes augi ar augstu antioksidantu līmeni, brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitāti, antitirozināzes un antikolagenāzes aktivitāti

Kontaktpersona:

Kontaktpersona:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Moragot Chatatikun1 un Anchalee Chiabšalard2

Abstrakts

Fons:Saules gaismas ultravioletais starojums izraisa reaktīvo skābekļa sugu (ROS) pārprodukciju, izraisot ādas fotonovecošanos un hiperpigmentācijas traucējumus. Pēdējā laikā arvien lielāka interese ir par jauniem balinošiem un pretgrumbu savienojumiem no dabīgiem produktiem. Šī pētījuma mērķis bija atrast produktus, kas samazina ROS 14 Taizemes augu ekstraktos.

Metodes:Lai noteiktu kopējo fenola unflavonoīdssaturs,antioksidantsaktivitāte,anti-tirozināzeaktivitāti un antikolagenāzes aktivitāti, mēs salīdzinājām 14 Taizemes augu ekstraktus, kas sagatavoti, izmantojot dažādus šķīdinātājus (petrolēteri, dihlormetānu un etanolu).Antioksidantsaktivitātes tika noteiktas ar DPPH un ABTS testiem.

Rezultāti:Kopējais fenola saturs 14 Taizemes augu ekstraktos tika konstatēts visaugstākajā līmenī etanolā, kam seko attiecīgi dihlormetāna un petrolētera ekstrakti.flavonoīdssaturs parasti tika konstatēts dihlormetāna frakcijā. Attīrīšanas aktivitāte svārstījās no 7 līdz 99 procentiem, novērtējot ar DPPH un ABTS testiem. Ardisia elliptica Thunb etanola lapu ekstrakts. bija visaugstākais fenola saturs, antioksidanta aktivitāte un kolagēna inhibīcija, savukārt Cassia alata (L.) Roxb. ekstrakts bija bagātākaisflavonoīdssaturu. Interesanti, ka trīs augu ekstrakti, kas bija Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb, etanola frakcijas. un Senna alata (L.) Roxb. bija augstsantioksidantssaturu un aktivitāti un ievērojami kavēja abustirozināzeun kolagāze.

Secinājums:Mūsu atklājumi liecina, ka Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb etanola frakcijas. un Senna alata(L.) Roxb. ir daudzsološs kā potenciāls kosmētikas līdzekļu, piemēram, pretgrumbu līdzekļu un ādas balināšanas līdzekļu, sastāvdaļas.

Atslēgvārdi:Ardisia elliptica Thunb.,Antioksidantssaturs, attīrīšanas darbība,Antitirozināzeaktivitāte, antikolagēna aktivitāte

Flavonoīds ir viens no elementiemcistanche

Fons

Saules gaismas ultravioletais starojums (UVR) ir nozīmīgākais nemelanomas un melanomaskinas vēža riska faktors [1]. Pārmērīga saules gaismas iedarbība, jo īpaši UVA un UVB, izraisa reaktīvo skābekļa sugu (ROS) pārmērīgu ekspresiju, kas bojā lipīdus, olbaltumvielas un dezoksiribonukleīnskābes. Kolagēns ir galvenais ārpusšūnu matricas pamats ādas dermas slānī. Pārmērīgs ROS daudzums palielina kolagēna ekspresiju, proteāzi, kas noārda kolagēnu, kas var izraisīt ādas novecošanos un grumbu veidošanos [2]. Turklāt UV iedarbība izraisa melanīna veidošanos, izraisot hiperpigmentāciju.Tirozināzeir galvenais enzīms, kas ierosina ādas pigmentāciju. Pirmkārt, tirozināze hidroksilē L-tirozīnu, veidojot 3,4-dihidroksifenilalanīnu (L-DOPA). Pēc tam tirozināze L-DOPA oksidē par DOPA hinonu. DOPA hinons tālāk tiek pārveidots par DOPAhromu, ko var pārveidot par 5,6-dihidroksiindolu (DHI) vai 5,6-dihidroksiindola-2-karbonskābi (DHICA)[3]. Pašreizējās ādas novecošanas ārstēšanas metodes ietver hidroksilskābi, lai nolobītu epidermas slāni, retinoīdus, lai samazinātu raupju ādu, un ādas pildvielu, ko ievada, injicējot ādā kolagēnu. Tomēr šīm ārstēšanas metodēm ir nelabvēlīga ietekme, piemēram, hiperpigmentācija, iekaisums, citotoksicitāte, kairinājums un bakteriāla infekcija [4]. Populārākais ādas balināšanas līdzeklis ir hidrohinons, kas inhibētirozināze, bet tā blakusparādības ir dermatīts, tūska, alerģiskas reakcijas un okronoze [5]. Nesen pētnieki ir koncentrējušies uz dabīgiem produktiem, kas inhibē UV izraisītu ROS, nomāc enzīmus un samazina melanīna veidošanos kā alternatīvu pašreizējai ārstēšanai. Piemēram, aktīvie fito savienojumi, piemēram, arbutīns, aloezīns, gentizīnskābe,flavonoīdi, hesperidīns, lakrica, niacinamīds, rauga atvasinājumi un polifenoli, inhibē melanoģenēzi bez citotoksicitātes tomelanocītiem [6]. Tādējādi augi var samazināt grumbu veidošanos un hiperpigmentāciju, ko izraisa saules gaismas iedarbība.

Šī pētījuma mērķis bija analizēt 14 Taizemes augus, kas ekstrahēti ar trim dažādiem šķīdinātājiem, lai noteiktu to potenciālu kā pretgrumbu un ādu balinošas sastāvdaļas. Skaitsantioksidantsfenoli unflavonoīdiTika novērtēta korelācija ar brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitātēm un antikolagenāzi unantitirozināzeaktivitātes. Ekstraktiem bijaantioksidantikas aiztur brīvos radikāļus un inhibēja enzīmus, kas ir iesaistīti grumbu un pigmenta veidošanā. Mēs identificējam Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. un Senna alata (L.) Roxb ir ļoti daudzsološs kandidāts izmantošanai kosmētikas produktos.

cistanche kultūrisms

Metodes

Ķīmiskās vielas un reaģenti

Folin Ciocalteu fenola reaģents, nātrija karbonāts (Na2CO3), gallskābe, kvercetīns, 10% alumīnija hlorīds, etanols, 2, 2-difenil-1-pikrilhidrazils (DPPH), askorbīnskābe, 2,2′-azino- bis(3-etilbenztiazolīns-6-sulfonskābe)(ABTS), kālija persulfāts, kojskābe, sēņu tirozināze (EC 1.14.18.1), 3,4-dihidroksi-L-fenilalanīns (L- DOPA), N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA), kolagenāze no Clostridium histolyticum (EC3.4.24.3), epigallokatehīna gallāts (EGCG) , nātrija hlorīds, kalcija hlorīds un dimetilsulfoksīds (DMSO) tika iegādāti no Sigma-Aldrich Chemical Co. (St. Louis, MO, ASV). Naftas ēteris, dihlormetāns, absolūtais etanols, metanols, dinātrija hidrogēnfosfāts un nātrija dihidrogēnfosfāts tika iegādāti no Merck (Darmštate, Vācija). Visas ķīmiskās vielas un reaģenti bija analītiskas kvalitātes.

Augu materiāli un ieguve

Trīspadsmit taju lapu sugas tika savāktas no HRH Princess Sirindhorn Herb Garden, Rayong province, Taizeme. Mangostāni tika iegūti no Chanthaburi provinces Taizemē. Šie augi tika autentificēti un deponēti Taizemes Čulalongkornas universitātes Zinātņu fakultātes Botānikas departamenta herbārijā. Zinātniskie nosaukumi, kuponu numuri un augu daļas ir parādīti 1. tabulā. Augi tika ekstrahēti, izmantojot Soksleta aparātu. Īsumā, 10 g žāvētā auga tika ekstrahēti atsevišķi ar petrolēteri, dihlormetānu un etanolu. Šķīdinātāji tika noņemti, izmantojot vakuuma rotācijas iztvaicētāju pazeminātā spiedienā, izmantojot MiVac Quattro koncentratoru. Koncentrētie paraugi tika izšķīdināti DMSO ar 100 mg/ml un uzglabāti -20 grādu temperatūrā līdz izmantošanai. Sauso ekstraktu raža ir norādīta 1. tabulā kā sauso augu materiālu masas procenti.

Kopējā fenola satura noteikšana

Kopējais fenola saturs augu ekstraktos tika novērtēts pēc Folina-Čokaltē metodes [7]. Īsumā, 50 ul ekstraktu 1 mg/ml destilētā ūdenī tika sajaukti ar 50 ul 10 procentu Folin-Ciocalteu reaģenta un 50 ul 0,1 M Na2CO3. Reakcijas maisījumu inkubēja 1 stundu istabas temperatūrā tumsā. Absorbcija pie 750 nm tika mērīta ar mikroplašu lasītāju (Biotek, ASV). Kā standarts tika izmantota gallskābe no 1,56 līdz 100 ug/ml. Kopējo fenola saturu ekstraktos izsaka kā gallskābes ekvivalentu (GAE) mg uz g sausā auga materiāla. Visi paraugi tika analizēti trīs eksemplāros.

Flavonoīdu satura noteikšana

Kopāflavonoīdssaturs (TFC) tika noteikts, izmantojot alumīnija hlorīda (AlCl3) kolorimetrisko testu [7]. Īsumā, 50 ul ekstraktu ar 1 mg/ml 80 procentu etanolā sajauca ar 50 ul 2 procentu AlCl3 šķīduma 96 sienas plāksnes iedobē. Plāksni inkubēja 15 minūtes istabas temperatūrā. Absorbcija pie 435 nm tika mērīta, izmantojot mikroplašu lasītāju. Kā standarts kalpoja kvercetīns no 1,56 līdz 100 ug/ml. Kopējais flavonoīdu saturs ir izteikts kā kvercetīna ekvivalentu (QE) mg uz g sausā auga materiāla. Paraugi tika analizēti trīs eksemplāros.

DPPH attīrīšanas darbība

DPPH attīrīšanas aktivitātes tests tika veikts, kā aprakstījis Yamasaki et al. [8]. DPPH šķīdums tika svaigi sagatavots katram testam. Īsumā, 100 ug/ml ekstrakti vai 1,56 līdz 100 ug/ml askorbīnskābes standarta absolūtā metanolā tika sajaukti ar 180 ul DPPH reaģenta 96 iedobju plāksnē. Reakcijas maisījumu inkubēja 30 minūtes istabas temperatūrā tumsā. Pēc tam ar mikroplašu lasītāju tika mērīta absorbcija pie 517 nm. Eksperimenti tika veikti trīs eksemplāros. DPPH absorbcija pie 517 nm bija 0,70 ± 0,02, un samazināta absorbcija izmērīja attīrīšanas aktivitāti. Attīrīšanas spēja tika aprēķināta kā attīrīšanas aktivitāte (procenti)=100 procenti × [(kontroles A517 — parauga A517)/kontroles A517. Ekstraktu DPPH attīrīšanas aktivitātes procentuālā daļa tika salīdzināta ar askorbīnskābes aktivitāti un izteikta kā mg C vitamīna ekvivalenta.antioksidantsjauda (VCEAC) uz vienu sauso augu materiālu. IC50 tika noteikts, izmantojot procentuālās inhibīcijas un koncentrācijas diagrammas (no 0,78–100 ug/ml katra ekstrakta).

ABTS tīrīšanas darbība

ABTS brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitāte tika veikta, kā aprakstīts iepriekš [9]. ABTS• plus darba reaģents tika sagatavots, sajaucot 7 mM ABTS• un 2,45 mM kālija persulfātu ar tilpuma/tilpuma attiecību 8:12. Darba šķīdumu 16 līdz 18 stundas turēja istabas temperatūrā tumsā. ABTS• plus šķīdums tika atšķaidīts ar absolūto etanolu, lai iegūtu absorbciju pie 734 nm 0,70 ± 0,02. Pēc tam 100 ug/ml ekstraktus vai 1,56 līdz 100 ug/ml askorbīnskābes standartu absolūtā etanolā pievienoja 180 ul ABTS• plus darba reaģenta 96 iedobju plāksnes iedobēs. Plāksni inkubēja 45 minūtes istabas temperatūrā, un absorbcija tika mērīta pie 734 nm. Eksperimenti tika veikti trīs eksemplāros. Attīrīšanas spēja tika aprēķināta kā attīrīšanas aktivitāte (procentos)=100 × [(kontroles A734 - parauga 훥A734)/kontroles A734]. Ekstraktu ABTS attīrīšanas aktivitātes procentuālais daudzums tika salīdzināts ar askorbīnskābes līmeni, un tas ir norādīts kā C vitamīna ekvivalentsantioksidantsjauda (VCEAC) uz g sausa augu materiāla. IC50 tika noteikts, izmantojot procentuālo inhibīcijas grafiku pret koncentrāciju (no 15,62 līdz 1000 ug/ml katra ekstrakta).

Sēņu tirozināzes inhibīcijas noteikšana

Dopahroma metode tika veikta ar nelielu modifikāciju [10]. Īsumā, 20 ul augu ekstraktu vai DMSO (kā kontrole), 20 ul 203,3 vienības/ml sēņu tirozināzes un 140 ul 20 mM fosfāta buferšķīduma ar pH 6,8 tika iepriekš inkubēti 10 minūtes 25 grādu temperatūrā. Pēc iepriekšējas inkubācijas pievienoja 20 ul 2, 5 mM L-DOPA un pēc tam paraugus inkubēja vēl 20 minūtes 25 grādu temperatūrā. Dopahroma daudzums tika mērīts pie 492 nm ar mikroplašu lasītāju. Kojskābe (KA) kalpoja kā pozitīva inhibīcijas kontrole. Tirozināzes aktivitātes procentuālā inhibīcija (procenti) tika izteikta procentostirozināzeinhibīcija {{0}} × [(kontroles 훥A492 – parauga 훥A492)/kontroles 훥A492]. Ekstraktu un kojskābes galīgās koncentrācijas bija attiecīgi 1 un 0,1 mg/ml. IC50 tika noteikts no procentu grafikatirozināzekoncentrācijas kavēšana (no 15,62–1000 ug/ml katra ekstrakta).

cistanche kultūrisms

Kolagenāzes inhibīcijas noteikšana

Kolagenāzes inhibīcija tika noteikta ar iepriekš aprakstīto metodi [11]. Īsumā, 40 ul kolagenāzes no Clostridium histolyticum pie 0,25 vienības/ml 50 mM Tricine buferšķīdumā, kas satur 10 mM CaCl2 un 400 mM NaCl, un 10 ul 50 mM Tricine buferšķīduma tika sajaukti ar 10 ekstraktu vai DMSO (kā kontrole). Kā pozitīvā kontrole tika izmantots epigallokatehīna gallāts (EGCG). Pēc 15-minūtes inkubācijas istabas temperatūrā tika pievienoti 50 ul N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA). Absorbcija tika mērīta pie 340 nm nekavējoties un nepārtraukti 20 minūtes. Fermentu aktivitāte tika novērtēta ar samazinātu absorbciju laika intervālā. Kolagenāzes aktivitātes inhibīcijas procentuālais daudzums tika aprēķināts kā 100 × [(kontroles aktivitāte – parauga aktivitāte)/kontroles aktivitāte]. Ekstraktu un epigallokatehīna gallāta galīgā koncentrācija bija attiecīgi 1 un 0,1 mg/ml. IC50 tika noteikts, izmantojot procentuālo kolagenāzes inhibīcijas grafiku pret koncentrāciju (no 15,62 līdz 1000 ug/ml katra ekstrakta).

Statistiskās analīzes

Visi eksperimenti tika veikti trīs eksemplāros, un rezultāti ir izteikti kā vidējā ± standarta kļūda. Korelācijas koeficients (R2) starpantioksidantssaturs un antioksidantu aktivitātes tika noteiktas, izmantojot SigmaPlotversion 12.2 programmatūru. Atšķirība starp abiem vidējiem tika novērtēta, izmantojot Stjudenta t-testu. Atšķirības tika uzskatītas par būtiskām, ja P vērtība bija mazāka par 0.05.

Rezultāti

Ekstrakcijas raža

1. tabulā ir parādīti šajā pētījumā izmantoto 14 Taizemes augu zinātniskie nosaukumi, kuponu numuri un augu daļas. Ekstraktu procentuālā raža bija no 0,73 procentiem līdz 31,11 svara procentiem (1. tabula). Ardisia elliptica Thunb. bija vislielākā peļņa petrolētera (19,89 procenti) un etanola ekstraktos (31,11 procenti), savukārt Garcinia mangostanaL. bija visaugstākā procentuālā raža no dihlormetāna ekstrakcijas (11,07 procenti).

Fenola saturs 14 Taizemes augos

Tāpēc kopējais fenola saturs augos tika noteikts ar Folin-Ciocalteu metodi. Ekstraktos bija plašs fenolu skaita diapazons, kā parādīts 2. tabulā, un ekstraktu vērtības mainījās 33- reizes. Ardisiaelliptica Thunb. bija augstākais fenola saturs visos trīs ekstraktu veidos, savukārt zemākais fenola saturs bija Stemona curtissi Hook. f. petrolētera ekstrakts.

Flavonoīdu saturs 14 Taizemes augos

Līdzīgi fenoliem, kopāflavonoīdssaturs starp augu sugām būtiski atšķīrās, sākot no 2.04 ± 0,16 līdz 31,38 ± 0,81 mg QE uz g sausas vielas (2. tabula). Kopumā dihlormetāna ekstrakcija deva visaugstākoflavonoīdslīmeni salīdzinājumā ar citiem šķīdinātājiem. No visiem ekstraktiem lielākais flavonoīdu daudzums tika konstatēts Senna alata (L.) Roxb lapu etanola ekstraktā (31,38 ± 0,81 mg QE perg sausā materiāla). No otras puses, Ardisia elliptica Thunb. (23,14 ± 1,10 mg QE uz g sausa materiāla). bija visbagātākais flavonoīdu saturs dihlormetāna frakcijā. Turklāt Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. bija augstākais flavonoīdu saturs starp petrolētera ekstraktiem (27,48 ± 2,59 mg QE uz g sausas vielas). Zemākais nosakāmais flavonoīdu līmenis bija Daturametel L etanola ekstraktā.flavonoīdinetika atrasti naftas ētera un dihlormetāna ekstraktos no Stemona curtisii Hook.f. un petrolētera ekstraktos no Streblus asper Lour. un Phyllanthus acidus (L.) Skeels.Kopējais flavonoīdu saturs nekorelēja ar kopējo fenola saturu (R2=0.0284, 1.a att.).

DPPH radikāļu attīrīšanas aktivitāte dažādos ekstraktos no 14 Taizemes augiem

Brīvo radikāļu attīrīšanas darbība, izmantojot DPPH kā indikatoru, ir pamatsantioksidantstests [12]. Kā parādīts 3. tabulā, ekstraktu attīrīšanas aktivitātes bija ļoti dažādas, sākot no 7,11 ± 0,59 procentiem līdz 96,17 ± 0,05 procentiem. Ardisia ellipticaThunb etanola ekstraktam bija visaugstākā attīrīšanas aktivitāte - 96 procenti. Turklāt nākamais spēcīgākaisantioksidants activities (>90 procenti ) tika novēroti etanola frakcijās no Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels. un Garcinia mangostana Linn. Runājot par citiem šķīdinātājiem, Ardisia elliptica Thunb bija arī visbagātākā attīrīšanas aktivitāte starp petrolētera frakcijām, un Garcinia mangostana L. bija visaugstākā antioksidanta aktivitāte dihlormetāna frakcijās. Viszemākā attīrīšanas spēja tika konstatēta Croton sublyratus Kurz petrolētera frakcijā. 7 petrolētera ekstraktos un 2 dihlormetāna ekstraktos netika konstatēta attīrīšanas aktivitāte.

ABTS radikālas attīrīšanas aktivitāte dažādos ekstraktos no 14 Taizemes augiem

Antioksidantsūdens un lipīdu fāžu aktivitāte augos ir novērtēta arī ar atkrāsošanas testu, izmantojot ABTS [13]. Atkal askorbīnskābe kalpoja kā standartsantioksidants. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90 procenti , un attīrītāja aktivitāte tika konstatēta visos dihlormetāna ekstraktos un petrolētera ekstraktos no Annona squamosa L. un Ipomoea pes-caprae(L.) R.br. kas netika atklāts ar DPPH testu.

Tirozināzes aktivitātes kavēšana ar augu ekstraktiem

Taizemes augu savienojumu spēja kavēt sēņu veidošanostirozināzeaktivitāte tika novērtēta, izmantojot invitro testu ar L-DOPA kā substrātu. Kojic skābe kalpoja kā zināms inhibitors un izraisīja maksimālu 93,38 ± 1,63 procentu inhibīciju. Kā parādīts 5. tabulā, tikai etanola ekstrakti ievērojami inhibēja tirozināzes aktivitāti ar Ardisia elliptica Thunb. preparāti ir izņēmums. Ardisia elliptica Thunb petrolētera un dihlormetāna frakcijas. inhibēja tirozināzes aktivitāti par aptuveni 20 procentiem. Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz etanola frakcija (IC 50 vērtība 271,50 ug/ml) bija visspēcīgākais tirozināzes inhibitors, kam sekoja Ardisia ellipticaThunb etanola ekstrakti. un Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Citas etanola frakcijas ievērojami samazināja fermentatīvo aktivitāti par vairāk nekā 20 procentiem (5. tabula), savukārt pārējiem ekstraktiem nebija nosakāmas inhibējošas aktivitātes (dati nav parādīti).

Kolagenāzes aktivitātes kavēšana ar 14 augiem

Ekstraktos tika pārbaudīta antikolagenāzes aktivitāte, izmantojot Clostridium histolyticum kolagenāzi un N-[3-(2-furil)akriloil]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) kā substrātu. zināms kolagenāzes inhibitors un samazināta fermentatīvā aktivitāte par 90,51 ± 2,79 procentiem. Kā parādīts 5. tabulā, tikai 4 etanola ekstrakti saturēja nosakāmu kolagenāzes inhibitoru aktivitāti. No tiem, kas izraisa inhibīciju, Ardisia elliptica Thunb. (IC 50 vērtība 157,78 ug/ml) uzrādīja visaugstāko kolagēna inhibīcijas līmeni, kam sekoja Annona squamosa L. (IC 50 vērtība 426,67 ug/ml), Senna alata (L.) Roxb. un Croton sublyratusKurz. pasūtījums. Citi augu ekstrakti šajā pētījumā izmantotajos reakcijas apstākļos būtiski neinhibēja kolagenāzes aktivitāti (dati nav parādīti).

Diskusija

Saules starojums ir nozīmīgs vides faktors ādas bojājumu gadījumā un var izraisīt ādas vēzi [14]. UV starojums izraisa pro-iekaisuma reakciju, ekstracelulārās matricas degradāciju unantioksidantsizsīkums [15, 16]. UV izraisa reaktīvo skābekļa sugu (ROS) veidošanos, kas izraisa hiperpigmentāciju un kolagenāzes ekspresiju [17, 18]. Mūsu pētījumā tika pētītas 14 Taizemes augus, kas ekstrahēti ar trīs dažādiem šķīdinātājiem, lai noskaidrotu to potenciālu kā pretgrumbu un ādu balinošas sastāvdaļas. Šajā pētījumā mēs izmantojām petrolēteri, dihlormetānu un etanolu augu ekstrakcijai, izmantojot Soksleta aparātu. Ardisia elliptica Thunb. bija vislielākā peļņa petrolētera un etanola ekstraktos, savukārt Garcinia mangostana L. bija vislielākā procentuālā raža no dihlormetāna ekstrakcijas. Šie šķīdinātāji ir organisko šķīdinātāju sērija ar pieaugošu polaritāti. Procentuālās ražas atšķirības bija atkarīgas no augu sugas un, iespējams, atspoguļoja augu ķīmiskā sastāva atšķirības.

Fenoli ir lielākā augos sastopamo fitoķīmisko vielu grupa, un tiem ir dažādas bioloģiskas aktivitātes dzīvniekiem, tostarp cilvēkiem [19]. Kopējais fenola saturs augos tika noteikts ar Folin Ciocalteu metodi. Kopumā etanola frakcijā bija visbagātākais fenola saturs, kam sekoja dihlormetāns, savukārt petrolēterim ar zemu polaritāti bija zemākais fenola saturs salīdzinājumā ar citiem šķīdinātājiem. Šajā pētījumā Ardisia elliptica Thunb. bija visaugstākais fenola saturs visos trīs ekstraktu veidos. Iepriekšējos pētījumos Ardisia elliptica Thunb. dihlormetāna lapu ekstraktos fenola saturs ir 101 ± 1,3 mg GAE uz g sausā auga materiāla, kas ir vairāk nekā saturs zaru ekstraktā [20]. Turklāt gatavu Ardisia augļu metanola ekstrakts saturēja 5,64 ± 0,37 g GAE uz 100 g ekstrakta [21]. Tādējādi Ardisia ellipticaThunb lapas un augļi. ir augsts fenola saturs, ko var viegli ekstrahēt ar metanolu, dihlormetānu un etanolu.

Flavonoīdiir pigmenti ziedos, lapās, augļos un sēklās. Šie savienojumi ir sekundāri augu metabolīti un ir plaši izplatīti starp augu sugām [22]. Pēc tam flavonoīdu saturs Taizemes augos tika novērtēts, izmantojot alumīnija hlorīda kolorimetrisko testu. Mūsu rezultāti parādīja, ka lielākais flavonoīdu daudzums tika konstatēts Senna alata (L.) Roxbleaves etanola ekstraktā. Iepriekšējā pētījumā Senna alata (L.) Roxb ūdenī (4,25 mg QE uz 100 g) un metanola frakcijās (3,97 mg QE uz 100 g) tika konstatēts augsts flavonoīdu saturs.[23] Tādējādi Senna alata (L.) Roxb preparātos ir augsts flavonoīdu saturs, ja tos ekstrahē ar augstas polaritātes šķīdinātājiem, tostarp etanolu, metanolu un ūdeni. Ardisiaelliptica Thunb. bija visbagātākais flavonoīdu saturs dihlormetāna frakcijā. Šī auga augļos ir arī augsts flavonoīdu saturs — 36,91 ± 2,37 mg QE uz g ekstrakta [24]. Līdz ar to Ardisia elliptica Thunb augļi un lapas. ir bagāti flavonoīdi. Kopējais flavonoīdu saturs nekorelēja ar kopējo fenola saturu. tomērflavonoīdipiemīt daudzas bioloģiskas aktivitātes, piemēram, UVB aizsardzība [25], pretiekaisuma [26], prethepatotoksicitāte [27] un pretvēža iedarbība [28].

Brīvo radikāļu attīrīšanas darbība, izmantojot DPPH un ABTSassay. DPPH testā DPPH saņem hidrogenatomu no anantioksidants[29]. Mēs noskaidrojām, ka Ardisiaelliptica Thunb etanola ekstraktam bija visaugstākā tīrīšanas aktivitāte. Citi pētnieki ir ziņojuši arī par Ardisia elliptica Thunb dihlormetāna frakcijām. Lapās un kātos ir augstsantioksidantsaktivitāti, kas noteikta ar DPPH testu, un līdz ar to šo augu ir ļoti interesanti izpētīt tālāk kā augu ārstēšanu [20]. Ekstrakti no etanola frakcijas ar augstu polaritāti nepārprotami uzrādīja labākus rezultātusantioksidantsaktivitāte nekā frakcijām ar zemāku polaritāti, kas satur dihlormetānu un petrolēteri. Etanola ekstrakti saturēja augstāko brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitātes līmeni, salīdzinot ar citiem ekstraktiem, un visi etanola ekstrakti bija aktīvi. ABTS testā ABTS tiek pārveidots par radikalizāciju, pievienojot kālija persulfātu. Antioksidanta klātbūtnē reaktīvais ABTS katjons (vai ABTS• plus ) tiek pārvērsts bezkrāsainā dabiskajā formā [9]. Saskaņā ar DPPH testu etanola ekstrakti satur visaugstāko tīrīšanas aktivitātes līmeni, salīdzinot ar citiem ekstraktiem. Atkal, augstākās attīrīšanas aktivitātes inetanola, dihlormetāna un petrolētera ekstrakti bija no tiem pašiem augiem, kā parādīts DPPH testā. DPPH un ABTS testu rezultāti bija ļoti korelēti, kā gaidīts (1.f attēls).

Tomēr kopējaisflavonoīdsaugu ekstraktu saturs nekorelēja ar brīvo radikāļu savācēju aktivitāti, kas noteikta ar DPPH testu (1.c att.) vai ar ABTS testu (1.e att.). Mūsu konstatējumi, ka starp tām nav būtisku saistībuflavonoīdssaturs un savācēju aktivitāte, izmantojot ABTS testu, atbilst citu pētnieku rezultātiem [30]. Turpretim kopējais fenola saturs augu preparātā pozitīvi korelēja ar savācēju aktivitāti, ko mēra abos testos (1.b un d. attēls), kas nesaskan ar iepriekšējo pētījumu [31]. Ievērojami, ka attīrīšanas aktivitāte bija atkarīga no kopējā fenola satura un šķīdinātājiem ar augstu polaritāti, piemēram, etanolu un dihlormetānu. Šie rezultāti liecina, ka fenola saturs ir galvenā sastāvdaļaantioksidantsdarbība 14 Taizemes augos.

Melanīnu, galveno ādas un matu krāsas pigmentu, sintezē melanocīti melanosomās. Melanīna pārprodukcija un uzkrāšanās ādā var izraisīt topigmentārus traucējumus un estētiskas problēmas. Hiperpigmentācija notiek saules iedarbībai pakļautās ādas vietās [32]. Melanoģenēzē,tirozināzeir galvenais enzīms ātruma ierobežošanas posmā, kurā L-tirozīns tiek hidroksilēts līdz L-DOPA, kas tālāk tiek oksidēts par DOPAhinonu. Pēc tam tas tiek pārveidots par DOPAhromu, kas ir melanīna sintēzes substrāts [3]. pazemināta regulēšanatirozināzeTiek ierosināts, ka aktivitāte ir atbildīga par melanīna ražošanas samazināšanos. Jaunu balinošu fitoķīmisko savienojumu izstrāde no dabīgiem produktiem pēdējā laikā ir kļuvusi par pieaugošu tendenci. Mūsu atklājums parādīja, ka Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz etanola frakcija bija visspēcīgākais tirozināzes inhibitors, kam sekoja etanola ekstrakti no Ardisia elliptica Thunb. un Phyllanthus acidus (L.) Skeels. Acīmredzot 7 augiem no 14 augiem bija augsts fenola saturs, īpaši Ardisiaelliptica Thunb. un Annona squamosa L. Turklāt Senna alata (L.) Roxb. bija bagātākaisflavonoīdssaturs, kas var kavēt tirozināzes aktivitāti. Augu aktīvie savienojumi, piemēram, arbutīns, aloēzīns, gentizīnskābe, flavonoīdi, hesperidīns, lakrica, niacinamīds, rauga atvasinājumi un polifenoli, var kavēt melanoģenēzi bez citotoksicitātes pret melanocītiem [6].

Kolagenāze ir transmembrāna cinka peptidāze, kas atdala kolagēna X-Gly saiti. Kolagēns ir bagātīgs strukturāls proteīns un ārpusšūnu matricas sastāvdaļa [33]. Kolagēna un elastīna šķiedru samazināšanās palielinās līdz ar vecumu un UV starojuma radītie bojājumi, kas izraisa grumbu veidošanos[34]. Kolagenāzes inhibīcija ir ierosināta, lai novērstu ādas novecošanos. No tiem, kas mūsu pētījumā izraisa inhibīciju, Ardisiaelliptica Thunb. uzrādīja augstāko kolagēna inhibīcijas līmeni, kam sekoja Annona squamosa L., Senna alata(L.) Roxb. un Croton sublyratus Kurz rangu secībā. Iepriekšējā pētījumā kakao pākstīm bija fenolskābe unflavonoīdikas inhibēja elastāzes un kolagenāzes aktivitāti [35]. Proti, trīs etanola ekstrakti (Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. un Senna alata (L.) Roxb. inhibēja abustirozināzeun kolagāze. Šiem augiem bija arī augsts fenola un flavonoīdu līmenis, unantioksidantsaktivitāte.Interesanti, ka šos ekstraktus var izmantot kā kosmētikas līdzekļu sastāvdaļas.

Secinājums

Mūsu rezultāti liecina, ka 14 Taizemes augu ekstraktos ir dažādas pakāpes kopējā fenola unflavonoīdssaturs, kā arī brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitātes atkarībā no ekstrakcijas šķīdinātājiem. Bija augsta korelācija starp kopējo fenola saturu un brīvo radikāļu attīrīšanas aktivitāti, kas novērtēta ar DPPH un ABTS testiem. Ardisia ellipticaThunb etanola frakcija. bija augstākais fenola saturs, kam sekoja Annona squamosa L. Abi augi būtiski inhibēja tirozināzes un kolagenāzes aktivitātes, savukārt Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz uzrādīja visaugstāko tirozināzes inhibīciju. Turklāt Senna alata (L.) Roxb. bija ar flavonoīdu saturu bagātākais, un arī tika izstādītstirozināzeun kolagenāzes inhibējošā uzvedība. Trīs augu etanola frakcija, proti, Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb un Senna alata (L.) Roxb., var būt sastāvdaļa kosmētikas līdzekļos pretgrumbu veidošanās, kā arī ādas balināšanai. Ir nepieciešami turpmāki pētījumi, lai izpētītu šo ekstraktu aktīvās sastāvdaļas un drošību.

cistanche kultūrisms

Atsauces

1. Moehrle M. Brīvdabas sports un ādas vēzis. Clin Dermatol. 2008;26(1):12–5.

2. Lopez-Camarillo C, Ocampo EA, Casamichana ML, Perez-Plasencia C, Alvarez-Sanchez E, Marchat LA. Proteīnkināžu un transkripcijas faktoru aktivācija, reaģējot uz ādas UV starojumu: ietekme uz kancerogenitāti.Int J Mol Sci. 2012;13(1):142–72.

3. Iwata M, Corn T, Iwata S, Everett MA, Fuller BB. Saistība starp tirozināzes aktivitāti un ādas krāsu cilvēka priekšādiņās. J Investig Dermatol.1990;95(1):9–15.

4. Stern RS. Fotonovecošanās ārstēšana. N Engl J Med. 2004;350(15):1526–34.

5. Levins CY, Maibahs H. Eksogēnā ohronoze. Atjauninājums par klīniskajām pazīmēm, izraisītājiem un ārstēšanas iespējām. Esmu J Clin Dermatol. 2001;2(4):213–7.

6. Zhu W, Gao J. Botānisko ekstraktu izmantošana kā lokāli ādas balināšanas līdzekļi ādas pigmentācijas traucējumu uzlabošanai. J Investig DermatolSymp Proc. 2008;13(1):20–4.

7. Zongo C, Savadogo A, Ouattara L, Bassole IHN, Ouattara CAT, Ouattara AS, Barro N, Koudou J, TraoreI AS. Ampelocissus grantii (maiznieks) Planch polifenolu saturs, antioksidanti un pretmikrobu aktivitātes. (Vitaceae): ārstniecības augs no Burkinafaso. Int J Pharmacol. 2010; 6 (880–887)

8. Yamasaki K, Hashimoto A, Kokusenya Y, Miyamoto T, Sato T. Elektroķīmiskā metode neapstrādātu zāļu metanola ekstraktu antioksidatīvajai iedarbībai. Chem Pharm Bull (Tokija). 1994;42(8):1663–5.

9. Re R, Pellegrini N, Proteggente A, Pannala A, Yang M, Rice-Evans C. Antioksidantu aktivitāte, izmantojot uzlabotu ABTS radikāļu katjonu atkrāsošanas testu. Bezmaksas Radic Biol Med. 1999;26(9–10):1231–7.

10. Nithitanakool S, Pithayanukul P, Bavovada R, Saparpakorn P. Moleculardoccking pētījumi un taju mango sēklu kodola ekstrakta anti-tirozīnas aktivitāte. Molekulas. 2009;14(1):257–65.

11. Bonvicini F, Antognoni F, Iannello C, Maxia A, Poli F, Gentilomi GA. Pancratium Illyricum L. atbilstošā un selektīvā aktivitāte pret Candida Albicansclinical izolātiem: kombinēta ietekme uz rauga augšanu un virulenci. BMCComplement Altern Med. 2014;14(1):409.

12. Sharma OP, Bhat TK. Pārskatīts DPPH antioksidantu tests. Food Chem. 2009;113(4):1202–5.

13. MacDonald-Wicks LK, Wood LG, Garg ML. Metodika bioloģisko antioksidantu kapacitātes noteikšanai in vitro: pārskats. J Sci Food Agric. 2006;86(13):2046–56.

14. Armstrong BK, Kricker A. The epidemiology of UV-induced ādas vēzi. JPhotochem Photobiol B Biol. 2001;63(1–3):8–18.

15. Bashir MM, Sharma MR, Werth viceprezidents. UVB un pro-iekaisuma citokinēzija sinerģiski aktivizē TNF ražošanu keratinocītos, izmantojot pastiprinātu transkripciju. J Investig Dermatol. 2009;129(4):994–1001.

16. Watson RE, Gibbs NK, Griffiths CE, Sherratt MJ. Ādas ekstracelulārās matricas bojājumi, ko izraisa UV iedarbība. Antioksīda redoksa signāls. 2014;21(7):1063–77.

17. D'Orazio J, Jarrett S, Amaro-Ortiz A, Scott T. UV starojums un āda. Int JMol Sci. 2013;14(6):12222–48.

18. Pittayapruek P, Meephansan J, Prapapan O, Komine M, Ohtsuki M. Role ofmatrix Metalloproteinases in Photoaging and Photocarcinogenesis. Int J MolSci. 2016;17(6):868.

19. Sulaiman CT, Balachandran I. Kopējais fenolu saturs un kopējais flavonoīdu daudzums Indijas ārstniecības augos. Indijas J Pharm Sci. 2012;74(3):258–60.

20. Mamat N, Jamal JA, Jantan I, Husain K. Xanthine Oxidase inhibitory andDPPH radikāļu attīrīšanas aktivitātes dažās Primulaceae sugās. SainsMalaysiana. 2014;43(12):1827–33.

21. Wetwitayaklung P, Charoenteeraboon J, Limmatvapirat C, Phaechamud T.Antioxidant activity of some Thai and exotic fruits cultivated in Thailand.Res J Pharm, Biol Chem Sci. 2012;3(1):12–21.

22. Falcone Ferreyra ML, Rius SP, Casati P. Flavonoīdi: biosintēze, bioloģiskās funkcijas un biotehnoloģijas pielietojumi. Front Plant Sci. 2012; 3:222.

23. Devendra K, Kiran D, Ritesh V, Satyendra B, Abhishek K. To assessment of Total Phenolics and Flavonoids in different Plant of Chhattisgarh. JPharmacognosy Phytochem. 2013;2(4):116–8.

24. Siti-Azima AM, Northam A, Nurhuda M. SyzygiumCumini un ArdisiaElliptica antioksidantu aktivitātes saistībā ar to aplēsto fenola sastāvu un hromatiskajām īpašībām. Int J Biosci Biochem Bioinform. 2013;3(4):314–7.

25. Solovčenko A, Schmitz-Eiberger M. Ādas flavonoīdu nozīme UV-B aizsardzībā ābolu augļos. J Exp Bot. 2003;54(389):1977–84.

26. Gonzalez-Gallego J, Sanchez-Campos S, Tunon MJ. Uztura flavonoīdu pretiekaisuma īpašības. Nutr Hosp. 2007;22(3):287–93.

27. Sudha A, Sumathi K, Manikandaselvi S, Prabhu NM, Srinivasan P. Anti hepatotoksiskā aktivitāte jēlnaftas flavonoīdu frakcijas Lippia Nodiflora L. onethanol-induced aknu traumas in žurku. Āzijas J Anim Sci. 2013;7(1):1–13.

28. Sak K. Diētisko flavonoīdu citotoksicitāte dažādiem cilvēka vēža veidiem.Pharmacogn Rev. 2014;8(16):122–46.

29. Kedare SB, Singh RP. Antioksidantu testa DPPH metodes ģenēze un attīstība. J Food Sci Technol. 2011;48(4):412–22.

30. Boo HO, Kim TS, Koshio K, Shin JH, Chon SU. Kopējais fenola līmenis un antioksidanta īpašības metanola ekstraktos no vairākiem Vjetnamas savvaļas augiem. Korejas J Plant Res. 2011;24(6):659–65.

31. Dudonne S, Vitrac X, Coutiere P, Woillez M, Merillon JM. Salīdzinošs pētījums par antioksidantu īpašībām un kopējo fenola saturu 30 rūpnieciski nozīmīgos augu ekstraktos, izmantojot DPPH, ABTS, FRAP, SOD un ORAC testus. J AgricFood Chem. 2009;57(5):1768–74.

32. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmentation inmammalian skin and its hormonalregulation. Physiol Rev. 2004;84(4):1155–228.

33. Pleci MD, Raines RT. Kolagēna struktūra un stabilitāte. Annu RevBiochem. 2009; 78:929–58.

34. Cua AB, Wilhelm KP, Maibach HI. Cilvēka ādas elastīgās īpašības: saistība ar vecumu, dzimumu un anatomisko reģionu. Arch Dermatol Res. 1990;282(5):283–8.

35. Karim AA, Azlan A, Ismail A, Hashim P, Gani SSA, Zainudin BH, Abdullah NA. Kakao pāksts ekstrakta fenola sastāvs, antioksidants, pretgrumbu un tirozināzes inhibitori. BMC Complement Altern Med. 2014;14(381):1–13.