Diabētisko nieru slimību diagnostikas biomarķieris: mikroRNS ekspresija

Kontaktpersona:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Ⅰ DAĻA: MikroRNS ekspresijas profilēšana diabētiskās nieru slimībās

HIROKIISHII, SHOHEI KANEKO, KATSUNORI YANAl, AKINORI AOMATSU, KEIJ HIRAL, SUSUMU OOKAWARA un YOSHIYUKI MORISHITA

IEVADS

Diabētiskās nieru slimības (DKD) izplatība visā pasaulē strauji pieaug un ir saistīta ar ievērojamu ekonomisko un sociālo slogu, jo tā ir galvenais nieru slimības beigu stadijas cēlonis un ir saistīta ar dažādu asinsvadu komplikāciju attīstību.¹. Lai uzlabotu DKD prognozi(diabētiskā nieru slimība), nepieciešama tās agrīna diagnostika un specifiski ārstēšanas līdzekļi. Tomēr abi nav noskaidroti.

Lai noteiktu DKD (diabētiskās nieru slimības) galīgo diagnozi, nepieciešama nieru biopsiju histoloģiska analīze. Tomēr nieru biopsija ir invazīva, ir grūti iegūt diagnostiskos paraugus, un tā nav piemērota atkārtotām procedūrām. Tādējādi vairākas seruma vai urīna molekulas, piemēram, kolagēns IV, kolagēna VI COOH-terminālais propeptīds un audzēja nekrozes faktora receptors 1 no 2, ir novērtētas izmantošanai kā DKD diagnostikas marķieri.(diabētiskā nieru slimība),^2-4 bet neviens vēl nav kļuvis klīniskai lietošanai.^5-7

Par DKD ārstēšanu(diabētiskā nieru slimība), ir pierādīts, ka vairākām zālēm, piemēram, renīna-angiotenzīna sistēmas blokatoriem, nātrija-glikozes kotransportera 2 inhibitoriem un glikagonam līdzīgo peptīdu -1 analogiem, ir aizsargājoša iedarbība DKD gadījumā.(diabētiskā nieru slimība),^8-10 bet neviens nav ideāls. Tādējādi ir steidzami nepieciešams identificēt DKD diagnostiskos biomarķierus un terapeitiskos līdzekļus(diabētiskā nieru slimība).

pūķa garšaugi cistanche

MikroRNS(miRNS) ir piesaistījuši uzmanību kā slimībai specifiski biomarķieri un terapeitiskie mērķi dažādām slimībām, piemēram, vēzim un vairākām iekaisuma slimībām.^11,12miRNS (MikroRNS) ir mazas, nekodējošas RNS, kuru garums ir aptuveni 22 nukleotīdi, kas darbojas kā mērķa gēnu un to atvasināto proteīnu pēctranskripcijas regulatori, izraisot ziņotāja RNAmiR degradāciju un/vai translācijas represijas.^13,14 NAs are thought to be responsible for the regulation of >60 procenti no visiem proteīnu ekspresijas līmeņiem, tādējādi spēlējot galveno un daudzveidīgu lomu patofizioloģiskajos procesos dažādu slimību gadījumos¹⁵.

Iepriekšējie pētījumi liecina, ka vairākas miRNS(MikroRNS)ir iesaistīti DKD patoģenēzē(diabētiskā nieru slimība), un līdz ar to tie var būt noderīgi DKD biomarķieri vai terapeitiskie mērķi(diabētiskā nieru slimība).^16.17 Tomēr turpmāki pētījumi, lai izpētītu miRNS regulējošās lomas(MikroRNS)DKD valodā(diabētiskā nieru slimība)ir nepieciešami un šīs miRNS(MikroRNS)var izstrādāt kā DKD diagnostiskos biomarķierus un terapeitiskos līdzekļus(diabētiskā nieru slimība). Tāpēc šajā pētījumā mēs pētījām miRNS(MikroRNS)iesaistīts DKD(diabētiskā nieru slimība)un noteica to potenciālu kā specifiskus biomarķierus vai terapeitiskos līdzekļus DKD(diabētiskā nieru slimība).

cistanche kāta priekšrocības

MATERIĀLS UN METODES

Dzīvnieku modelis.Peles tika izmitinātas telpā ar kontrolētu temperatūru un mitrumu pretvīrusu un bez antivielām mikroizolatora apstākļos. Peļu tēviņi db/db (C57BLKS/J lar - plus Leprdb/ plus Leprdb) un to parastie metiena biedri m/m peles (C57BLKS/J Iar-m plus /m plus ) tika iegādāti no Dzīvnieku reprodukcijas institūta (Ibaraki, Japāna) . AKITA peles tēviņi (C57BL/6-Ins2Akita/J peles) un to parastie metiena biedri (C57BL/6J) tika iegūti no Japan SLC, Inc. (Tokija, Japāna).

Nieru išēmija un reperfūzija tika veikta, kā aprakstīts iepriekš.¹⁸ Īsumā, vīriešu dzimuma C57BL / 6J peles (Tokyo Laboratory Animals Science, Tokija, Japāna) tika anestēzētas ar izoflurānu, un tika identificēts labais nieres kāts, ligatēts un veikta labā nefrektomija. Pēc tam tika identificēts kreisais nieres pedikuls un 45 minūtes nostiprināts ar netraumatisku mikrovaskulāru klipsi. Skavas tika noņemtas pēc išēmijas perioda beigām un veiksmīga reperfūzija tika apstiprināta vizuāli. Ar viltus operētām pelēm tika veikta tā pati ķirurģiskā procedūra, nesaspiežot nieres kātiņu. Dzīvnieki tika nogalināti 24 stundas pēc reperfūzijas.

Tika veikta vienpusēja urētera obstrukcija, kā ziņots iepriekš.¹⁹Īsumā, C57BL/6J peļu tēviņi (Tokyo Laboratory Animals Science) tika anestēzēti, izmantojot izoflurānu, un pēc tam kreisais urīnvads tika atklāts caur vēdera griezumu viduslīnijā, divos punktos pilnībā sasiets ar 4-0 zīdu un sadalīts starp tiem. Fiktīvi operētā grupa netika pakļauta nosiešanai. Peles tika nogalinātas, un to kreisās nieres tika savāktas 7 dienas pēc operācijas.

Peļu tēviņi ar paātrinātu novecošanos (SAMP1 / YitFcsJ) un kontroles peles (SAMR / YitFcsJ) tika iegādātas no SLC Japānas.²⁰Šīs peles tika nogalinātas 48 nedēļu vecumā. HIGA peles (HIGA/NscSlc) un BALB/cCrSlc peles, kuras tika izvēlētas kā kontroles celms, jo tām bija zema IgA koncentrācija serumā, tika iegūtas no Japānas SLC.

Tika savāktas nieres un asinis, iegūts serums, un lielākā daļa audu tika uzglabāti -80 grādu temperatūrā. Kreisās nieres tika izmantotas histoloģiskai analīzei, bet labās nieres tika izmantotas mRNS un miRNS(MikroRNS)kvantitatīvā noteikšana. Bioķīmisko analīžu veikšanai peles tika pārvietotas uz atsevišķiem vielmaiņas būriem, lai savāktu 24-h urīna paraugus. Albumīna un kreatinīna koncentrācija urīnā tika mērīta, izmantojot attiecīgi LBIS peles urīna albumīna testa komplektu (S-veida) (Fujifilm Wako, Shibayagi, Gunma, Japāna) un Lab-Assay kreatinīna komplektu (Fujifilm Wako, Osaka, Japāna).

Pacienti un veseli subjekti.Mēs piesaistījām pacientus ar hronisku nieru slimību, kuriem Saitama Jichi Medicīnas universitātē no 2016. gada maija līdz 2019. gada maijam tika veikta nieru biopsija. Divdesmit pieci pacienti tika pieņemti darbā DKD.(diabētiskā nieru slimība)grupā un tika salīdzināti ar pacientiem, kuriem bija citas nieru slimības, nevis DKD (n=50 pacienti; IgA nefropātija 17, membranoza nefropātija 9, minimālu izmaiņu nefrotiskais sindroms 6, nefroskleroze 4, intersticiāls nefrīts 3, IgG{6}}saistīts nefropātija 3, vilkēde nefrīts 2 un citas nieru slimības 6) un tika saskaņoti pēc to sākotnējām īpašībām. Katru gadījumu izskatīja vairāki pieredzējuši patologi, lai pārliecinātos, ka biopsijas paraugos ir slimības kategorijai atbilstošas ​​patoloģiskas izmaiņas un nav konstatētas būtiskas izmaiņas, kas raksturīgas citām slimībām. DKD(diabētiskā nieru slimība)tika diagnosticēts, izmantojot raksturīgos atradumus par mezangiālās matricas palielināšanos, mezglu glomerulosklerozi, difūzu glomerulārās bazālās membrānas sabiezēšanu un vienlaicīgu aferento un eferento arteriolu hialinozi.²¹ Cukura diabēts tika diagnosticēts, izmantojot Amerikas Diabēta asociācijas kritēriju. GFR tika novērtēts, izmantojot diētu nieru ria.²² Slimību (MDRD) metode, modificēta japāņiem (ml/min/seko: populācija, eGFR,as; 1x seruma kreatinīns1,73m²）=0.881×186.3×vecums-0.2{{9 }}3×(×0,742 sievietēm).^23,24

Mikromasīvu analīze.MiRNS analīze(MikroRNS)izteiksmi veica Hokaido System Science (Hokaido, Japāna). Sīkāka informācija par mikromasīvu analīzi ir aprakstīta citur.²⁵Īsumā RNS tika defosforilēta un pēc tam ligēta ar Cy3-pCp, izmantojot miRNS.(MikroRNS)Pilnīgs marķēšanas reaģents un hib komplekts (Agilent Technologies, CA, ASV) un miRNS(MikroRNS)Spike-in komplekts (Agilent Technologies). miRNS(MikroRNS)CRNS hibridizēšanai tika izmantots pilns marķēšanas reaģents un Hyb komplekts. Pēc hibridizācijas mikrostari tika mazgāti, izmantojot Gene Expression Wash Pack (Agilent Technologies), un skenēti ar Agilent Microarray Scanner. Signāla intensitātes tika novērtētas ar Agilent Feature Extraction ver.12.0.3.1.mRNS ekspresijas analīzi veica arī Hokkaido System Science. RNS tika apzīmēta ar Cy{5}}, izmantojot zemas ievades ātrās pastiprinātāja marķēšanas komplektu, vienkrāsains (Agilent Technologies). Marķētie cRNS paraugi tika hibridizēti ar peles miRNS(MikroRNS)Microarray 8×60K rel.21.0(Agilent Technologies) 65 grādu temperatūrā 17h, izmantojot Gēnu ekspresijas hibridizācijas komplektu (Agilent Technologies). Pēc hibridizācijas mikromasīvi tika mazgāti ar Gene Expression Wash Buffers Pack (Agilent Technologies) komponentiem un skenēti ar Agilent Microarray Scanner. Signāla intensitātes tika novērtētas, izmantojot Agilent Feature Extraction versiju 12.0.3.1. Normalizācija tika panākta, izmantojot 90. procentiles nobīdes metodi, kas parasti tiek izmantota mikromasīvam, kā aprakstīts iepriekš.²⁶ The results were analyzed using GeneSpring software v12.1(Agilent Technologies). Statistical analysis was carried out using one-way ANOVA with a post hoc Tukey honestly significant difference test. Fold changes with a cut-off value>4 un P vērtība<0.05 were="" considered="" to="" indicate="" statistically="" significant="" differences.="" the="" genespring="" single="" experiment="" analysis="" (sea)bioinformatics="" tool="" was="" used="" for="" computational="" analysis="" to="" identify="" potential="" curated="" canonical="" pathways="" that="" were="" enriched="" in="" the="" transcript="" list="" showing="" a="" significant="" gene="" expression="" difference="" between="" the="" control="" mice,db/db="" mice,db/db="">(MikroRNS)-181b-5p-mimic-PEI-NP un db/db peles un kontroles-miRNS(MikroRNS)-PEI-NP grupas, izmantojot WikiPathways datubāzi Paredzētais mērķis. MiRNS FmRNS tika meklētas, izmantojot Target Scan programmatūru.

I tabula.MiRNS saraksts(MikroRNS)diferencēti izteikts AKITA peļu nierēs ar mikroarray analīzi

Kvantitatīvā reāllaika reversā transkripcija-PCR.Sīkāka informācija par kvantitatīviem reālā laika reversās transkripcijas-PCR (qRT-PCR) testiem, lai izmērītu mRNS un miRNS(MikroRNS)ekspresija peļu nierēs ir aprakstīta iepriekš.²⁷Lai izmērītu miRNS(MikroRNS)ekspresiju, nieru paraugi tika homogenizēti, izmantojot stikla homogenizatoru un filtra kolonnas smalcinātāju (QIA smalcinātāja kolonna; Qiagen, Hilden, Vācija), pēc tam RNS ekstrahēja, izmantojot miRNeasy Mini Kit (Qiagen). Viens mikrograms no katra RNS parauga tika reversi transkribēts cDNS, izmantojot miRScript PCR sistēmu (Qiagen). Pēc tam tika veikta qRT-PCR, izmantojot miScript SYBR Green PCR komplektu un īpašus miRNA-20a-5p, miRNA-34a-5p,miRNA{{6} praimerus. }b-5p,miRNA-129-1-3p, miRNA-129b-5p,miRNA-142a-3p,miRNA{{13} }a-5p, miRNA-181b-5p, miRNA-223-3p,miRNA-146a-5p, rmiRNA{{20} }p,miRNA-652-3p,miRNA-342-3p,rmiRNA-6401 un miRNA-6980-5p(miScript Primer Assays; Qiagen) saskaņā ar ražotāja norādījumiem. Ekspresijas līmeņi tika normalizēti līdz U6-snuRNA līmenim un tika aprēķināti kā kārtu atšķirības (2-△ACT) no normāliem kontroles ekspresijas līmeņiem. Šajā pētījumā U6 ekspresijas līmeņi statistiski neatšķīrās visās grupās.

Lai izmērītu miRNS(MikroRNS)līmeni cilvēka un peles serumā, RNS tika sagatavota no 300 μL seruma paraugiem, izmantojot NucleoSpin miRNA Plasma kolonnu (Macherey-Nagel, Duren, Vācija) un miRNeasy Serum/Plasma Kit (Qiagen). Pēc tam izolētā RNS tika reversā transkribēta, izmantojot miScript I RT komplektu (Qiagen).qRT-PCR tika veikta, izmantojot miScript SYBR Green PCR Kit (Qiagen). Primers for miRNA-20a-5p ,miRNA-34a-5p,miRNA-125b-5p,miRNA-129-1-3p,

miRNS(MikroRNS)-142a-3p,miRNA-1129b-5p,miRNA-142a-5p,miRNA-146a{{ 7}}p,miRNA-181b-5p,miRNA-455-5p,miRNA-342-3p,n miRNA-223-3p, miRNA-652-3 p,miRNA-6401 un miRNA-6980-5p tika iegādāti no Qiagen. Katras miRNS līmenis tika normalizēts līdz miRNS-16 līmenim kā endogēnai kontrolei. MiRNS-16a-5p ekspresijas līmenis serumā statistiski neatšķīrās visās šī pētījuma grupās.

Lai izmērītu mRNS ekspresiju, nieru paraugi tika homogenizēti, izmantojot stikla homogenizatoru un filtra kolonnas smalcinātāju (QIA smalcinātāja kolonna; Qiagen). RNS tika izolēta, izmantojot RNeasy Total RNA Isolation komplektu (Qiagen), un 1 ug katra RNS parauga tika reversi transkribēta. izmantojot SuperscriptII First Strand sintēzes sistēmu (Life Technologies, MA, ASV).qRT-PCR tika veikta, izmantojot SYBR GreenER qPCR SuperMix (Life Technologies). Tika izmantoti peļu kolagēna I tipa alfa 1 ķēdes, kolagēna IV tipa alfa 1 ķēdes primeri. iegādāts no Takara Bio (Šiga, Japāna). Katras mērķa mRNS ekspresija tika normalizēta līdz beta-aktīnam kā atsauces gēnam.

1. att.Diferencēti izteikto miRNS siltuma karte(MikroRNS)AKITA peļu nierēs. Siltuma karte parāda hierarhisko klasterizāciju un sistēmiskās variācijas miRNS ekspresijā(MikroRNS)katras grupas peļu nierēs (n{0}} katrā grupā). Sarkanā krāsā parādītās miRNS uzrādīja augstu ekspresiju, un tām, kas parādītas zaļā krāsā, bija salīdzinoši zema ekspresija. (Fifigure krāsainā versija ir pieejama tiešsaistē.)

MiRNS sagatavošana(MikroRNS)-181b-5p imitācija.miRNS(MikroRNS)-181b-5p un kodēto mazo RNS (kontroles miRNS) sintezēja uzņēmums Ajinomoto Bio-Pharma Services (Osaka, Japāna). MiRNS secība-181b{{5} }p imitācija bija 5'-AACAUUCAUUGCUGUCGGUGG-GUU-3' un kontroles-miRNS.(MikroRNS)bija 5'-GGUUCGUACGUACACUCGUUCA-3'.

miRNS piegāde(MikroRNS)-181b-5p-PEI-NP nonāk nierēs.Izpētīt miRNS ietekmi(MikroRNS)Kā aprakstīts iepriekš, tika izmantota -181b-5p imitējoša ārstēšana, lineāri uz PEI balstīti NP (in vivo strūklas PEI; Polyplus-transfection, llkirch-graffenstaden, Francija).²⁷Īsumā, miRNA(MikroRNS)-PEI-NP (miRNS∶ 50 ug, slāpekļa (N) attiecība polimērā pret fosfātu (P) nukleīnskābēs=6) tika izšķīdināti 200 μl 5% glikozes šķīduma un ievadīti db/db pelēm. astes vēna, saskaņā ar ražotāja protokolu. Par kontroli kalpoja šādas grupas: (1) normāli metiena biedri (m/m), (2) neārstētas db/db peles un (3) db/db peles, kurām injicēta kontroles miRNS(MikroRNS)-PEI-NP, izmantojot to pašu protokolu. Novērtēt miRNA-181b-5p terapeitisko potenciālu DKD gadījumā(diabētiskā nieru slimība), mēs injicējām miRNS-181b-5p-PEI-NP vai kontroles-miRNS-PEI-NP 10-nedēļu vecām db/db pelēm ik nedēļu 10 nedēļas.

2. att.Diferencēti izteikto miRNS siltuma karte(MikroRNS)db/db peļu nierēs. Siltuma karte parāda hierarhisko klasterizāciju un sistēmiskās variācijas miRNS ekspresijā katras grupas nierēs (n =4 katrā grupā). Sarkana, augstāka izteiksme; zila, zemāka izteiksme. (Fifigure krāsainā versija ir pieejama tiešsaistē.)

histoloģija,Fluorescence un Iimūnhistoķīmija.Pēc nieru sadalīšanas katras nieres reprezentatīva daļa tika nekavējoties fiksēta ar PBS buferētā 4% paraformaldehīdā un iestrādāta parafīnā. Sekcijas (5 μm) tika izmantotas imūnkrāsošanai un periodiskai skābes-Šifa (PAS) krāsošanai. Mezangiālā izplešanās tika novērtēta PAS iekrāsotajās sekcijās, aprēķinot mezangiālo indeksu (M) saskaņā ar Diabētisko komplikāciju dzīvnieku modeļa (AMDCC) protokolu: PAS krāsojuma laukums (pikseļu skaits)/kopējais laukums (pikseļu skaits) glomerulos. MI tika aprēķināts vismaz 20 glomeruliem katrā grupā (3-4 glomeruliem uz vienu peli un sešām pelēm divpavedienu e katrā grupā).Cy3-marķēti oligonukleotīdi (Cy3-miRNS(MikroRNS)Takara Bio) tika izmantoti, lai novērtētu intravenozi injicētas miRNS sadalījumu caur nierēm(MikroRNS)-PEI-NP, kā aprakstīts iepriekš.²⁷Īsumā, Cy{0}}miRNA(MikroRNS)tika kompleksā ar PEI-NP un intravenozi injicēts db / db pelēm, pēc tam nieres tika izņemtas 1 stundu vēlāk. Sekcijas (5-μm biezas) 2 stundas inkubēja istabas temperatūrā ar fluoresceīnu iezīmētu Lotus tetragonolobus lektīnu (Vector Laboratories, CA, ASV), un kā pretkrāsojumu izmantoja DAPI. Pēc tam fluorescences līmenis tika novērtēts ar fluorescences mikroskopiju (BZ-X710; Keyence, Osaka, Japāna) un BZ-X_analizatora programmatūru (Keyence). Imunoķīmiskajam pētījumam peles mAb pret kolagēnu I (NB{{) 10}}, Novus Biologicals, CO, ASV) un IV(NB120-6586, Novus Biologicals), un kazu poliklonālās sekundārās antivielas pret peles un truša HRP(PI-1000, Vector Laboratories). . Audu paraugi tika iegulti Tissue-Tek OCT Compound (Sakura Finetek Japan, Tokija, Japāna) un sasaldēti šķidrā slāpeklī. Kriostata sekcijas (5-μm biezas) tika uzstādītas uz stikla priekšmetstikliņiem, kas pārklāti ar silānu (Matsunami Glass Ind, Osaka, Japāna).

In situ hibridizācija.ISH par miRNA(MikroRNS)-125b-5p un miRNS-181b-5p tika veikti, izmantojot dubultās digoksigenīna marķētas miRCURY LNA noteikšanas zondes (Qiagen). Sašifrēta zonde kalpoja kā negatīva kontrole, un U6 kalpoja kā pozitīva kontrole. Procedūra tika veikta saskaņā ar ražotāja protokolu.²⁸Īsumā parafīnā iestrādātas peles nieru sekcijas (5-μm) tika deparafinētas, mazgātas PBS un apstrādātas ar proteināzi K 10 minūtes 37 °C temperatūrā. Pēc tam priekšmetstikliņus inkubēja ar LNS digoksigenīna iezīmētu zondi (40). nM) mitrā kamerā nakti 60 grādu temperatūrā. Pēc mazgāšanas sekcijas nakti inkubēja ar antidigoksigenīna antivielu, kas konjugēta ar sārmaino fosfatāzi 4 grādu temperatūrā. Pēc tam priekšmetstikliņus izstrādāja, izmantojot nitrozilo tetrazolija hlorīdu/5-bromu{{9. }}hloro-3'-indolifosfatāzes ptoluidīna sāls šķīdums (Life Tech-nologies) nakti tumsā istabas temperatūrā. Pēc tam gaismas mikroskopā (BZ-X710; Keyence) tika iegūti mikrofotogrāfi.

II tabula.MiRNS saraksts(MikroRNS)diferencēti izteikts db / db peļu nierēs ar mikroarray analīzi

Studiju apstiprināšana.Pētījums tika veikts saskaņā ar Helsinku deklarācijas principiem, un to apstiprināja Jichi Medicīnas universitātes Ētikas komiteja (apstiprinājuma numurs 17-023, 2017. gada 11. oktobris). No visiem dalībniekiem tika iegūta rakstiska informēta piekrišana. Eksperimentus ar dzīvniekiem apstiprināja Jichi Medicīnas universitātes Dzīvnieku ētikas komiteja, un tie tika veikti saskaņā ar Jichi Medicīnas universitātes rokasgrāmatas laboratorijas dzīvniekiem vadlīnijām par eksperimentālo dzīvnieku izmantošanu un kopšanu.

Statistika.Dati tika analizēti, izmantojot JMP programmatūru (versija 13.0.0; SAS Institute Inc, Cary, NC, USA). Rezultāti ir izteikti kā vidējie ± SD. Vidēji tika salīdzināti, izmantojot vienvirziena dispersijas analīzi, un, ja bija statistiski nozīmīgas atšķirības, pēc tam tika veikts Tukey tests, lai salīdzinātu divu dažādu grupu vidējos rādītājus. Kategoriskiem mainīgajiem atšķirības tika analizētas, izmantojot hī kvadrāta testu. Tika veikta loģistiskā regresija un aprēķināti AUC.P<0.05 was="" considered="" to="" represent="" statistical="">

KLIKŠĶINIET ŠEIT, LAI DALĪTIES Ⅱ & Ⅲ

Saīsinājumi:ĶMI{0}} ķermeņa masas indekss; DAPI=4, 6-diamidino-2-fenilindols; FITC= fluoresceīna izotiocianāts; DKD=diabētiskā nieru slimība; eGFR= aprēķinātais glomerulu fltrācijas ātrums;ABL augsta blīvuma lipoproteīns; HIGA= augsts imūnglobulīna A līmenis; IRI= išēmijas-reperfūzijas bojājums;ZBL= zema blīvuma lipoproteīns; ns= nav nozīmīgs; PEI-NPs= polietilēnimīna nanodaļiņas;RNU6=U6 Small Nuclear 1; SAMP{13}}novecošanās paātrināta pele; SAMR=kontrole pelei ar paātrinātu novecošanos; UACR= urīna albumīna un kreatinīna attiecība; UUO=vienpusēja urētera obstrukcija

cistanche augs

Piezīme: Tradicionālais ķīniešu ārstniecības augs cistanche (pazīstams arī kā "pūķa zāle" un "tuksneša žeņšeņs") aug tikai sausos un siltos tuksnešos. Kā viens no deviņiem nemirstīgajiem augiem Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) satur bagātīgas efektīvas sastāvdaļas, piemēram, ehinakozīdu, akteozīdu, kopējos feniletanoīdu glikozīdus, flavonoīdus, šos dārgakmeņu polisaharīdus utt. barojošs ārstniecības augs un pārtikas materiāls cilvēku imunitātei, iekšējiem orgāniem un smadzeņu šūnām un neironiem utt. Mūsdienu farmakoloģiskie pētījumi ir apstiprinājuši šādu cistanche iedarbību (cistanche priekšrocības): uzlabo imunitāti; uzlabot seksuālo funkciju un nieru darbību; pret nogurumu; pretnovecošanas; uzlabot atmiņu; pret Parkinsona slimību; anti-Alcheimera slimība; antioksidācija; vieglums-aizcietējums; pretiekaisuma līdzeklis; veicināt kaulu augšanu, balinot ādu; aizsargāt aknas; utt.

kas ir cistanche