Ķīmisko komponentu un bioloģisko aktivitāšu atšķirības izejvielu šķēlēs un vīna tvaikos pārstrādātā produkta Cistanche Deserticola

Kontaktpersona: Odrija Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-pasts:audrey.hu@wecistanche.com

Ying Zhang, Yuewu Wang, Song Yang, Yunfeng Xiao, Haibin Guan, Xin Yue, Xiaoqin Wang un Xiangri Li

Abstract

Kā labi pazīstama ķīniešu ārstniecības augu medicīna,Cistanche deserticolair izmantots ārstēšanainieru deficīta sindroms (noklikšķiniet uz saistītajiem produktiem)Ķīnā tūkstošiem gadu. Gan neapstrādāts produktsCistanche deserticolašķēles (RCD) un tā vīna ar tvaiku apstrādāts produkts (WSCD) tiek klīniski izmantoti dažādiem efektiem. Šajā pētījumā tvaicēšanas procesa ietekme ar vīnu (SPW) noCistanche deserticolatika pētīti ķīmiskie sastāvi un bioloģiskie efekti. Lai pētītu ķīmisko sastāvu atšķirības, tika izmantota galveno komponentu analīze (PCA) un kvantitatīvā analīze. Tika pētīta arī barojošu nieru ietekme, lai salīdzinātu atšķirības starp RCD un WSCD. PCA rezultāti norādīja, ka acīmredzama atdalīšana tika panākta RCD un WSCD. Kvantitatīvās analīzes rezultāti parādīja, ka WSCD ir lielāks kopējo polisaharīdu, kopējo PhG, izoakteozīda un osmantusīda B daudzums nekā RCD, savukārt 2? -acetilakteozīds un akteozīds pēc SPW samazinājās. RCD un WSCD salīdzinājums ar bioloģiskajām aktivitātēm parādīja, ka abi var atjaunot dzimumhormona līmeni nieru-jaņ deficīta modelī un uzlabot antioksidanta efektu. Te WSCD bija daudz labāks, palielinot nieru un sēklas pūslīšu iekšējo svaru. Rezultāti liecināja, ka SPW mainīja ķīmiskās sastāvdaļas un uzlaboja bioloģisko aktivitāti.

AKA: Cistancas karalis--Dr.You

Ievads

Cistanche deserticolair izplatīta tradicionālā ķīniešu medicīna, un to jau daudzus gadus izmanto kā toniku Ķīnā un Japānā, ko parasti sauc par "Tuksneša žeņšeņu".Cistanche deserticolapirmo reizi tika reģistrēta kā augstākā pakāpe "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" apmēram 100. gadā pirms mūsu ēras, un to izmantoja dažādu slimību, tostarp nieru mazspējas, impotences, sieviešu neauglības, slimīgas leikorejas, bagātīgas metrorāģijas (balto) ārstēšanai. , aukstuma sajūta gurnos un ceļgalos un hronisks aizcietējums gados vecākiem cilvēkiem [1]. Līdz šim ir izolētas vairākas galvenās sastāvdaļas, piemēram, polisaharīdi [2, 3], feniletanoīdu glikozīdi (PhG) [1, 4], iridoīdi [1] un lignanoīdi [1, 5]. Starp tiem PhG un polisaharīdi ir galvenie bioloģiski aktīvās sastāvdaļasCistanche deserticola[6–9]. Mūsdienu farmakoloģiskie eksperimenti to ir pierādījušiCistanche deserticolavar uzlabot testosterona ražošanu un aizsargāt spermu, stimulēt šūnu proliferāciju un palielināt šūnu izdzīvošanas rādītājus, demonstrējot izteiktas aktivitātes seksuālās potences uzlabošanai, atmiņas uzlabošanai, pretnovecošanās, brīvo radikāļu attīrīšanas un neiroprotekcijas veicināšanai [10–13].

Lai samazinātu toksicitāti un/vai pastiprinātu iedarbību, lielākā daļa tradicionālo ķīniešu augu pirms receptes ir jāapstrādā. Tradicionālie procesa posmi ietver tīrīšanu, ūdens apstrādi (sasmalcināšana ūdenī, tvaicēšana un grauzdēšana) un brīvo procesu (karsēšana maisījumā ar vīnu, etiķi, sāli vai medu) [14]. Procesa laikā var mainīties ķīmiskās sastāvdaļas: var mainīties atsevišķu komponentu relatīvais saturs vai veidoties jaunas sastāvdaļas [15]. Te processCistanche deserticolair sena vēsture unCistanche deserticolajāapstrādā, mērcējot rīsu vīnā, tvaicējot, kā aprakstīts Ķīnas farmakopejā (2015. gada izdevums) [16]. Ir pierādīts, ka SPW ietekmē to ietekmi uz nieru meridiānu saskaņā ar tradicionālās ķīniešu medicīnas (TCM) teoriju [17]. WSCD pirmo reizi ir dokumentēts "Lei Gongs traktātā par Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun) sagatavošanu un vārīšanu" Ķīnas Ziemeļu un Dienvidu dinastijās. WSCD ir labāk izmantot, lai ārstētu nieru darbības traucējumus un aizsargātu spermu, kā ierakstīts "Taiping Shenghui Fang" Ķīnas Song dinastijas laikā. Tomēr līdz šim nav veikti salīdzinoši pētījumi par ķīmiskajām sastāvdaļām starp RCD un WSCD.

Mūsdienu farmakoloģiskie pētījumi liecina, ka WSCD var tonizēt nieres, lai nodrošinātu būtību, dažādās pakāpēs stimulējot hipotalāmu-hipofīzes-gonādu asi, un to izmanto nieru mazspējas, piemēram, nieres-yang deficīta, ārstēšanai [18]. Tomēr līdz šim atšķirības bioloģiskajās aktivitātēs starp RCD un WSCD nav pētītas. Nesen, lai atvieglotu eksperimentālo izpēti, nieru-jaņ deficīta dzīvnieku modelis tika dublēts, injicējot žurkām lielu hidrokortizona devu, kurā žurkām būs simptomi, kas ļoti līdzinās tiem, kas aprakstīti TCM nieru-jaņ deficīta gadījumā [19, 20]. . Žurkām ar nieru-jaņ deficītu vienmēr ir daži simptomi, piemēram, svara zudums, pārtikas patēriņa samazināšanās, vājums, palielināts ūdens patēriņš un samazināta aktivitāte. Pamatojoties uz šo dzīvnieku modeli, tika atklātas atšķirības barojošās nierēs starp RCD un WSCD un pat atklāja tradicionālā ķīniešu procesa zinātnisko būtību.

Cistanche deserticola

2. Materiāli un metodes

2.1. Materiāli un ķīmiskās vielas

Standarta vielas, piemēram, akteozīds, izoakteozīds, ehinakozīds, cistanozīds A un 2? - acetilakteozīds tika iegādāts no Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Šanhaja, Ķīna). Cistanosīds F, cistanozīds C, osmantusīds B un tubulozīds B tika iegādāti no Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Chengdu, Ķīna). Visu standartu tīrība bija ne mazāka par 98 procentiem. HPLC kvalitātes metanols un acetonitrils tika iegādāti no Aladdin Chemistry Inc. (Šanhaja, Ķīna). Dejonizēts ūdens tika iegūts, izmantojot MilliQ50 SP Reagent Water System (Bedforda, MA, ASV) paraugu un mobilo šķīdumu sagatavošanai. Visi pārējie šajā pētījumā izmantotie organiskie šķīdinātāji bija analītiskas kvalitātes un tika iegādāti no Shanghai Chemical Co. Ltd (Šanhaja, Ķīna).

2.2. Paraugu vākšana

Viss neapstrādātsCistanche deserticola(7 paraugu partijas) savāca Iekšējās Mongolijas Medicīnas universitāte no Iekšējās Mongolijas un Ningsijas provincēm. Visi tika identificēti kācistanchedeserticolaYC MaSjao Cjins Vans, Iekšējās Mongolijas Medicīnas universitātes Farmakognozijas nodaļas profesors. Vaučera paraugs tika deponēts Iekšējās Mongolijas Medicīnas universitātes Farmācijas skolā. Pēc savākšanas ziedkopas noCistanche deserticolatika noņemti, kāti tika sagriezti šķēlēs un žāvēti istabas temperatūrā ar gaisu, un pēc tam šķēles tika nejauši sadalītas divās grupās katrā partijā: viena ir RCD, bet otra tiek izmantota WSCD pagatavošanai.

WSCD tika sagatavoti laboratorijā saskaņā ar Ķīnas farmakopeju (2015. gada izdevums) [16], kas nozīmē, ka sagrieztie RCD tika mērcēti rīsu vīnā slēgtā traukā 6 stundas, līdz tie kļuva mīksti, tvaicēti ūdens vannā vēl 12 h, līdz virsma kļūst melna un žāvē istabas temperatūrā ar gaisu.

2.3. Galveno komponentu analīze (PCA)

Galveno komponentu analīze (PCA) ir sarežģīta metode, ko plaši izmanto daudzfaktoru problēmu dimensiju samazināšanai. Tas samazina sākotnējās datu kopas dimensiju, izskaidrojot korelāciju starp lielu skaitu mainīgo ar mazāku pamatā esošo faktoru skaitu, nezaudējot būtisku informāciju. Šajā pētījumā atšķirības starp RCD un WSCD tika noteiktas ar neuzraudzītu PCA, izmantojot SIMCA 13.0 programmatūru, pamatojoties uz relatīvajiem pīķu laukumiem HPLC hromatogrāfijā. Ar PCA palīdzību tika noskaidrota ķīmisko vielu galvenā ietekme uz klasifikāciju starp dažādiem paraugiem.

2.4. Parauga sagatavošana

2.4.1. Ekstrakta sagatavošana dzīvniekiem

RCD un WSCD tika atlasīti no savāktajiem paraugiem un sagatavoti, kā aprakstīts 2.2. sadaļā.

Gaisa žāvēts un sagriezts RCD tika pulverizēts ar pulverizatoru (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.), precīzi nosvērts 10 kg un iemērc 50% etanolā 30 minūtes, kā arī augu proporcijas. / izmantotais etanols bija 1/10 (w/w). Un pēc tam to ekstrahēja ar atteci divas reizes 1 stundu katru reizi. Abus ekstraktus apvienoja un filtrēja, un etanolu reģenerēja pazeminātā spiedienā pie 60°C. Kopējie PhG neapstrādātie ekstrakti tika žāvēti vakuumā 60°C un attīrīti ar makroporainiem sveķiem. Visbeidzot, tika iegūts un precīzi nosvērts RCD PhG ekstrakts. WSCD PhGs ekstrakts tika iegūts, ievērojot to pašu iepriekš minēto procedūru.

PhG ekstrakcijas nogulsnes tika žāvētas gaisā un divas reizes 1, 5 stundas novārītas ar 20 reizes ūdeni. Abi ekstrakti tika apvienoti un centrifugēti ar ātrumu 4000 apgr./min 10 minūtes, un supernatants tika koncentrēts un izgulsnēts ar 95% etanolu. Pēc centrifugēšanas nogulsnes žāvēja vakuumā pie 60°C. Visbeidzot tika iegūts un precīzi nosvērts RCD polisaharīda ekstrakts.

WSCD polisaharīda ekstrakts tika iegūts, ievērojot to pašu iepriekš minēto procedūru.

RCD un WSCD PhG un polisaharīdu ekstrakti tika sajaukti attiecīgi ūdenī, kad žurkas tika ārstētas iekšķīgi.

2.4.2. Parauga sagatavošana PhG noteikšanai

PhGs ekstrakti 2.4.1. sadaļā tika precīzi nosvērti kā 0,15 g un ekstrahēti ar ultraskaņu ar 50mL 50% metanola ūdens šķīdumu 40 minūtes. Pēc atdzesēšanas svara zudums tika papildināts ar 50 procentiem metanola. Visi paraugi un šķīdinātāji pirms analīzes tika filtrēti caur 0,45 μm membrānu. Četru PhG saturs RCD un WSCD tika noteikts, izmantojot HPLC, un kopējais PhG tika noteikts, izmantojot UV spektrofotometriju.

2.5. HPLC hromatogrāfiskais stāvoklis un četru PhG noteikšana.

Hromatogrāfiskā atdalīšana tika veikta UltiMate 3000 HPLC sistēmā (Thermo Fisher Scientific, ASV), kas aprīkota ar divu gradientu sūkni, kolonnas nodalījumu un DAD detektoru. . Dati tika vākti un apstrādāti, izmantojot ChromeLeon hromatogrāfijas datu sistēmu. Paraugi tika atdalīti uz Agilent Zorbax SB-C18 (250mm × 4,6 mm, 5 μm) ar C18 aizsargkolonnu (4,6 mm × 12,5 mm, 5 m). Kustīgā fāze sastāvēja no acetonitrila (A) un 0,1 procenta fosforskābes šķīduma (B) ar plūsmas ātrumu 1 ml/min. Gradienta eluēšana ir šāda: sākotnējā 0–13 min. , lineāras izmaiņas no AB (5:95, v/v) uz AB (15:85, v/v); 13–25 min, lineāra maiņa uz AB (20:80, v/v); 25–43 min, lineāra maiņa uz AB (25:75, v/v). Detektora viļņa garums tika uzraudzīts pie 330 nm. Kolonnas temperatūra tika iestatīta uz 30 ∘ C, un ievadītā parauga tilpums bija 10 l [21]. Izejas šķīdums, kas satur četrus standartstandartus, tika sagatavots, izšķīdinot atsauces standartus 50% metanolā līdz galīgajai koncentrācijai 0,20 mg/ml 2-acetilakteozīdam, 0,20 mg/ml akteozīdam, 0,05 mg/ml osmantusīdam B, un 0,10 mg/ml izoakteozīdam. Pēc tam šķīdumu atšķaidīja līdz piecām dažādām koncentrācijām ar trīs atkārtojumiem, lai izveidotu kalibrēšanas līknes. Parauga saturu izteica g/kg neapstrādāta svara.

2.6. Kopējā PhG noteikšana.

Kopējais PhG tika noteikts, izmantojot UV spektrofotometrijas metodi pie viļņa garuma 330 nm UV1000 spektrofotometrā (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.). Izejas šķīdums tika sagatavots, izšķīdinot ehinakozīda standartus 50% metanolā līdz galīgajai koncentrācijai 0,10 mg / ml, un pēc tam atšķaidīja līdz piecām dažādām koncentrācijām ar trim atkārtojumiem, lai izveidotu kalibrēšanas līknes.

2.7. Polisaharīdu noteikšana.

Polisaharīdu noteikšana tika veikta, izmantojot fenola sērskābes metodi. 1 ml parauga šķīduma tika ievietots 20 ml mēģenē ar stikla aizbāzni, pievienoja 1 ml 6 procentu fenola šķīduma un 5 ml koncentrētas sērskābes un krata 5 minūtes. Maisījums tika pārnests uz verdoša ūdens vannu 10 minūtes un atdzesēts līdz istabas temperatūrai ultravioletā starojuma noteikšanai. Ultravioletā starojuma absorbcija tika uzraudzīta pie 480 nm UV1000 spektrofotometrā. Bezūdens D-glikozes atsauces standarts tika precīzi nosvērts un izšķīdināts destilētā ūdenī līdz galīgajai koncentrācijai 0, 10 mg / ml. Pēc tam šķīdumu atšķaidīja līdz piecām dažādām koncentrācijām ar trim atkārtojumiem, lai izveidotu kalibrēšanas līknes.

2.8. Eksperimenti ar dzīvniekiem

2.8.1. Dzīvnieki un mājokļi.

Dzimumbriedu SD žurku tēviņi (180-200 g) tika iegādāti no Xinglong (Pekina) Eksperimentālās dzīvnieku fermas (vecums: 6 nedēļas), un laboratorijas dzīvnieka licence bija SCXK (Jing):2016-0003. Visas procedūras ar dzīvniekiem apstiprināja Iekšējās Mongolijas Medicīnas universitātes Dzīvnieku pētniecības komiteja, un tās tika veiktas saskaņā ar Nacionālā veselības institūta vadlīnijām par dzīvnieku aprūpes principiem (2004). Visi dzīvnieki tika turēti barjeru sistēmā ar regulētu temperatūru 21–23 grādi un relatīvo mitrumu 40–65 procenti un 12 stundu tumšā/gaismas ciklā. Žurkām tika dota ad libitum barība un ūdens, un tās nedēļu aklimatizēja iepriekš minētajā vidē.

2.8.2. Devas un paraugu ņemšana.

Žurkas tika pārvietotas uz atsevišķiem vielmaiņas būriem un nejauši sadalītas 6 grupās (?=10 katrā grupā). Viņiem 2 nedēļas intramuskulāri tika ievadīts 15 mg/kg hidrokortizona nātrija sukcināts (iegādāts no Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tjandzjiņa, Ķīna), izņemot 1. grupu, kas tika injicēta ar vienādu tilpumu fizioloģiskā šķīduma. 14. dienā tika apkopots ķermeņa svars, pārtikas patēriņš, uzņemtā ūdens, urīna daudzums un spontānā aktivitāte 5 minūšu laikā, lai pārliecinātos, vai nieru jaņ deficīta modelis ir veiksmīgi izveidots. No 15. dienas 6 grupas tika apstrādātas šādi: 1. grupa un 2. grupa (modeļa grupa, M) tika apstrādāta ar vienādu tilpumu destilēta ūdens, 3. grupa (RCD grupas PhGs ekstrakts, PR) tika apstrādāta ar {{12. }},42 g/kg RCD PhGs ekstrakts, kas bija vienāds ar aptuveni 1,8 g/kg neapstrādātaCistanche deserticolaun pārējās grupas bija tādas pašas, 4. grupa (WSCD grupas PhGs ekstrakts, PW) tika ārstēta ar devu 0,49 g/kg WSCD PhGs ekstrakta, 5. grupa (RCD grupas polisaharīdu ekstrakts, SR). RCD polisaharīda ekstrakts apstrādāts ar 0,18 g/kg, un 6. grupa (WSCD grupas polisaharīda ekstrakts, SW) tika apstrādāta ar devu 0,22 g/kg polisaharīda ekstrakta WSCD. Visas žurkas tika ārstētas ar kuņģa perfūziju dienā. Pēc mēneša ārstēšanas žurkām tika liegta barība 12 stundas pirms asins savākšanas. Nākamajā dienā visas žurkas tika anestēzētas un nonāvētas. Pārbaudes laikā žurkas tika nosvērtas reizi nedēļā, lai pielāgotu devu, un vēlreiz nosvērtas pirms nogalināšanas. Asins paraugi tika savākti Eppendorf mēģenē ar 10% EDTA-2Na šķīdumu. Serums tika atdalīts, centrifugējot ar ātrumu 2000 apgr./min 15 minūtes, un uzglabāts -80 grādu temperatūrā. Turpmākai lietošanai. Turklāt tika izņemtas un ātri nosvērtas nieres, sēklinieki, epididīms, prostatas dziedzeris un sēklas pūslīši. Pēc svēršanas sēklinieki tika sasaldēti šķidrā slāpeklī, lai noteiktu SOD un MDA.

2.9. Hormonu un antioksidantu iedarbības analīze.

Testosterona (T) un estradiola (E2) līmenis tika noteikts Qingdao Kechuang kvalitātes inspekcijas centrā ar radioimunitātes un kolorimetrisko metodi. Saldēti sēklinieki tika nosvērti un sajaukti ar 20 reizes aukstu fizioloģisko fizioloģisko šķīdumu (W/W). Sēklinieku homogenātu, kas iegūts ar audu homogenātu ledus vannā, centrifugēja, lai iegūtu supernatantu. Sēklinieku SOD un MDA saturs tika noteikts ar SOD un MDA komplektiem, ievērojot norādījumus.

2.10. Statistiskā analīze.

Grupu atšķirību nozīmīgums tika salīdzināts, izmantojot vienvirziena ANOVA testu, kam sekoja Šēfa tests ar nozīmīguma robežu 0.05, izmantojot SPSS programmatūru 25.0. Visi dati tika izteikti kā vidējā ± standarta novirze (SD)

(n=3).

Cistanche deserticolaekstrakts

3. Rezultāti

3.1. PhG izmaiņu analīze pēc SPW, izmantojot PCA.

Lai salīdzinātu PhG izmaiņas pēc SPW, kā raksturīgās virsotnes tika atlasītas un identificētas 9 hromatogrāfijas pīķi. To struktūras parādītas 1. attēlā, kura relatīvie pīķu laukumi tika aprēķināti kvantitatīvai izteiksmei. HPLC hromatogramma, kā parādīts 2. attēlā, liecināja, ka SPW laikā mainījās galveno PhG relatīvais saturs. Lai izšķirtu dažādus paraugus, tika iegūta PCA analīze par 9 komponentu relatīvajiem pīķu laukumiem. RCD un WSCD bija tālu viens no otra punktu diagrammā (3. attēls (a)), kas norādīja, ka paraugi tika klasificēti divās kopās. Tāpēc tiek uzskatīts, ka ķīmisko sastāvdaļu saturs bija atšķirīgs. Lai vēl vairāk atrastu iespējamos ķīmiskos marķierus diskriminācijai, tika veikta paplašināta statistiskā analīze, lai ģenerētu iekraušanas biplotu (3. b) attēls. 2., 3., 4., 6. un 7. maksimumi samazināsies pēc SPW, savukārt 5., 8. un 9. maksimumi palielināsies, un tie visi bija vissvarīgākie komponenti, lai atšķirtu RCD un WSCD. 1. pīķa relatīvais saturs pēc SPW daudz nav mainījies.

3.2. Kopējo polisaharīdu un PhG saturs mainīts pēc SPW.

Kā parādīts 3. (b) attēlā, 8 komponenti (5, 8 un 9 palielinājās un 2, 3, 4, 6 un 7 samazinājās) bija būtiski mainījušies, un tiem bija liela ietekme uz paraugu klasterizāciju. No tiem visvairāk palielinājās izoakteozīds un osmantusīds B, savukārt 2? -Visvairāk samazinājās acetilakteozīds un akteozīds. Tātad, izoakteozīda saturs, Osmanthuside B, 2? -acetilakteozīds un akteozīds tika noteikti ar HPLC. Kā parādīts 1. attēlā, 4. maksimums bija akteozīds, 5. pīķis bija izoakteozīds, 7. pīķis bija 2? -acetilakteozīds un maksimums 8 bija osmantusīds B. Kopējie PhG RCD un WSCD tika noteikti ar UV metodi, un kopējais polisaharīdu daudzums tika veikts ar fenola sērskābes metodi, rezultāti parādīti 1. tabulā, izoakteozīds, osmantusīds B , kopējais polisaharīdu un PhG skaits WSCD bija ievērojami palielinājies, salīdzinot ar RCD. 2? -acetilakteozīds un akteozīds bija ievērojami samazinājušies.

3.3. Tika izveidots hidrokortizona izraisīta nieru-jaņ deficīta modelis.

Salīdzinot ar parasto grupu, pēc 2 nedēļu intramuskulāras 15 mg/kg hidrokortizona nātrija sukcināta injekcijas ķermeņa masa, pārtikas patēriņš un spontānā aktivitāte tika ievērojami samazināta (P<0.05), and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.te="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

3.4. Ekstraktu ietekme uz iekšējo iekšējo orgānu vidējo svaru un indeksu.

Visas žurkas un to iekšējie orgāni tika nosvērti un pēc tam aprēķināts vidējais iekšējo orgānu indekss. Salīdzinot ar N grupu, M grupa uzreiz samazināja nieres, sēklas pūslīšu, epididimijas un sēklinieku iekšējo orgānu svaru, kas arī norādīja, ka hidrokortizona izraisītais nieru-jaņ deficīta modelis tika veiksmīgi izveidots. Salīdzinot ar M grupu, PW un SR grupā bija palielinājies visu novēroto iekšējo orgānu svars, PR grupā bija palielināts sēklinieku, epididimijas, sēklas pūslīšu un prostatas dziedzera svars, un SW grupā bija palielināts nieru, sēklinieku, epididimijas svars, un sēklas pūslīši. Salīdzinot ar PR grupām, PW grupa bija labāka nierēs, sēklas pūslīšos un prostatas dziedzeros. Starp SR un SW grupām nebija būtiskas atšķirības sēklinieku, epididimijas, sēklas pūslīšu un prostatas dziedzera svarā. Rezultāti tika parādīti 3. tabulā.

Salīdzinot ar N grupu, M grupā bija samazināti nieru, sēklinieku, epididimijas un sēklas pūslīšu iekšējo orgānu rādītāji. Salīdzinot ar M grupu, PW un SR grupā bija palielinājies nieru, sēklinieku, prostatas dziedzera un sēklas pūslīšu indekss, PR grupām bija palielinājies sēklinieku, prostatas dziedzera un sēklas pūslīšu indekss, un SW grupā bija palielinājies sēklinieku, prostatas dziedzera un sēklas pūslīšu indekss. palielināja nieru, sēklinieku un sēklas pūslīšu indeksu. Salīdzinot ar PR grupām, PW grupa bija labāka nierēs, sēklas pūslīšos un prostatas dziedzeros. SW un SR grupai bija līdzīgs nieru, sēklinieku, sēklas pūslīšu un epididimijas indekss. Rezultāti tika parādīti 4. tabulā.

3.5. Ekstrakta ietekme uz hormonu līmeni (T un E₂)

Kā parādīts 4. attēlā, salīdzinot ar M grupu, T un E2 līmenis visās ārstēšanas grupās (PW, PR, SW un SR grupā) bija ievērojami palielinājies (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" pr="" group="" in="" the="" level="" t="" and="" e2.="" te="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Ekstraktu ietekme uz antioksidantu iedarbību.

SOD ir svarīgs antioksidantu enzīms. MDA ir lipīdu peroksidācijas produkts, kas ir indikators, kas norāda uz oksidētāju bojājumu pakāpi. SOD un MDA saturs atspoguļo oksidantu un antioksidantu spēju apjomu. Kā parādīts 5. attēlā, salīdzinot ar M grupu, antioksidanta iedarbība visās ārstēšanas grupās (PW, PR, SW un SR) bija uzlabota. SW grupai bija vislielākā antioksidanta iedarbība.

Cistanche deserticola

4. Diskusija

Pirms klīniskās lietošanas neapstrādātie materiāli jāpakļauj tradicionālajām ķīniešu procesa metodēm. Tvaicēšana ir viena no tradicionālajām ķīniešu ārstniecības augu apstrādes metodēm, kas Maillard reakcijas rezultātā iegūst melnu krāsu [22], palielinot dažu bioaktīvo komponentu daudzumu [23] un farmakoloģiskās aktivitātes. WSCD kā viens no procesa produktiem ir labāks nieru barošanas ziņā, salīdzinot ar RCD, kā dokumentēts Ķīnas farmakopejas 2015. gada izdevumā. Šajā pētījumā PCA rezultāti norādīja, ka SPW bija jāmaina RCD ķīmiskais profils. Turklāt 8 komponenti PhG bija būtiski mainījušies. Visvairāk palielinājās kopējais PhG, kopējais polisaharīdu daudzums, izoakteozīds un osmantusīds B, savukārt 2? -acetilakteozīds un akteozīds pēc SPW samazinājās. Rezultāti liecināja, ka SPW var mainīt RCD ķīmiskās sastāvdaļas. PhG ar 1,3,4- triaizvietotām glikopiranozilgrupām (piemēram, akteozīds, 2?-acetilakteozīds un cistanozīds C) saturs WSCD samazinājās, tomēr to izomēru koncentrācija ar 1,3,{{13 }} palielinājās triaizvietotā glikopiranozila daļa (piemēram, izoakteozīds un tubulozīds B), kas liecināja, ka SPW laikā var notikt ķīmisko sastāvdaļu transformācija, un hidrolīzes reakcija būs viens no iemesliem. Ierosinātie transformācijas ceļi ir parādīti 6. attēlā. Polisaharīdu pieaugums pēc SPW tika ziņots arī žeņšeņā [24].

Cistanche deserticolatika dokumentēts, ka tas uzmundrina nieres un novērš testosterona līmeņa pazemināšanos, un tam piemīt antioksidanta iedarbība un pretiekaisuma iedarbība [25], un PhG un polisaharīdi bija divi galvenie bioloģiski aktīvās sastāvdaļas.Cistanche deserticola. Izoakteozīdam un osmantusīdam B kā PhG bija antioksidācijas un pretiekaisuma defekti [26, 27]. Tātad tika pētīts RCD un WSCD farmakoloģiskās iedarbības testosterona līmeņa un antioksidanta iedarbības salīdzinājums. Hidrokortizona izraisīta nieru-jaņ deficīta modelī tika traucēta endokrīnā sistēma un ievērojami pazeminājās dzimumhormona līmenis asinīs. Šajā pētījumā dzimumhormonu analīzes rezultāti parādīja, ka gan RCD, gan WSCD var ievērojami paaugstināt T un E2 līmeni, un gan PhG, gan polisaharīdi parādīja dzimumhormonu uzlabošanos. Te WSCD bija labāks par RCD, īpaši PhGs ekstraktu grupās. Iekšējo orgānu indeksu rezultāti parādīja, ka gan PhG, gan polisaharīdi var uzlabot iekšējo orgānu svaru un to svara indeksus. PhGs ekstraktu grupās WSCD ir labāks par RCD, palielinot nieru un sēklas pūslīšu svaru un indeksus. Papildus,Cistanche deserticolapiemīt ievērojama antioksidanta iedarbība, īpaši polisaharīdu ekstraktu grupām ar WSCD. Kā minēts iepriekš, gan RCD, gan WSCD varētu uzlabot nieru-jaņ deficīta sindromu; tomēr WSCD ir labāks par RCD, palielinot T, E2 līmeni, epididimijas un sēklinieku svaru un indeksus. Farmakoloģiskās iedarbības pētījuma rezultāti liecināja, ka SPW ir mainījis PhG ķīmiskos komponentus un palielinājis polisaharīdu saturu, kas savukārt paaugstināja dzimumhormonu līmeni un pastiprināja antioksidantu iedarbību.

5. Secinājums

Pētījuma mērķis bija atklāt PhG, kopējo polisaharīdu izmaiņas un farmakoloģisko ietekmi uz RCD un WSCD uz nieru-yang deficīta žurkām, īpaši uz hormonu līmeni un antioksidantu iedarbību. Šis pētījums ir parādījis, ka tradicionālo ķīniešu garšaugu process var mainīt to ķīmiskās sastāvdaļas un ietekmēt to bioaktivitāti. Tāpat tiek atbalstīts, ka klīnikā jēlprodukti un pārstrādes produkti tika izrakstīti atšķirīgi.

cistanche kapsulas

Atsauces

[1] Y. Jiang un P.-F. Tu, "Ķīmisko sastāvdaļu analīzeCistanchesugas," Journal of Chromatography A, 1216. sēj., Nr. 11, 1970.–1979. lpp., 2009. gads.

[2] W. Zhao, H. Yan, Z.-Y. Liang, Y.-J. Džans un X.-Q. Jiao, "Ūdenī šķīstošā polisaharīda SPA strukturālā analīze, kas izolēts no cilmes kātaCistanchedeserticolaMa," Ķīnas universitāšu ķīmiskais žurnāls, 26. sēj., 3. sēj., 461.–463. lpp., 2005. gads.

[3] K. Dongs, J. Jao, J.-N. Fangs un K. Dings, "Divu aukstā ūdenī ekstrahējamu polisaharīdu strukturālais raksturojums un imunoloģiskā aktivitāte noCistanchedeserticolaYC Ma”, Carbohydrate Research, 342. sēj., Nr. 10, 1343.–1349. lpp., 2007. gads.

[4] X.-M. Vū un P.-F. Tu, "?- (1?→6)-glikānu izolēšana un raksturojums noCistanchedeserticola”, Journal of Asian Natural Products Research, 7. sēj., Nr. 6, 823.–828. lpp., 2005. gads.

[5] B. Koˇs´ıkov´a, A. Ebringerov´a un R. Naran, "No koksnes parazīta izolētu lignīna ogļhidrātu frakciju raksturojumsCistanche deserticola YC Ma.," Holzforschung, 53. sēj., Nr. 1, 33.–38. lpp., 1999.

[6] G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu un C. Li, "Tubuloside B fromCistanchesalsa izglābj PC12 neironu šūnas no 1-metil-4- fenilpiridīnija jonu izraisītas apoptozes un oksidatīvā stresa," Planta Medica, 68. sēj., 11. sēj., 966.–970. lpp., 2002.

[7] M. Dengs, J.-Y. Džao, X.-D. Ju, P.-F. Tu, Y. Jiang un Z.-B. Li, "Tubulozīda B aizsargājošā iedarbība uz TNF alfa izraisītu apoptozi neironu šūnās", Acta Pharmacologica Sinica, sēj. 25, Nr. 10, 1276.–1284. lpp., 2004. gads.

[8] X. Geng, L. Song, X. Pu un P. Tu, "Feniletanoīdu glikozīdu neiroprotektīvā iedarbība noCistancassalsa pret 1- metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridīna (MPTP) izraisītu dopamīnerģisko toksicitāti C57 pelēm," Biological & Pharmaceutical Bulletin, 27. sēj. , 6. nr., 797.–801. lpp., 2004. gads.

[9] H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng un ZH Wang, "Ehinakozīds novērš monoamīna neirotransmiteru striatālo ekstracelulāro līmeņu samazināšanos 6- hidroksidopamīna bojājuma žurkām", Journal of Ethnopharmacology, sēj. 114, Nr. 3, 285.–289. lpp., 2007. gads.

[10] J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia un R. Zheng, "Dabisko fenilpropanoīdu glikozīdu farmakoloģiskās aktivitātes un mehānismi", Die Pharmazie, sēj. 58, Nr. 11, 767.–775. lpp., 2003. gads.

[11] G. Fu, H. Pang un YH Wong, "Dabiski sastopami feniletanoīdu glikozīdi: potenciālie jauni terapeitiskie līdzekļi", Current Medicinal Chemistry, sēj. 15, Nr. 25, 2592.–2613. lpp., 2008. gads.

[12] X.-W. Vangs, X.-F. Van un L.-Y. Wu, "Peļu feniletanoīdu glikozīdu atmiņas uzlabošanaCistanchedeserticola," Ķīniešu farmakoloģiskais biļetens, Nr. 19, 41-42. lpp., 2002.

[13] J.-X. Xie un C.-F. Wu, "Etanola ekstrakta efektsCistanchedeserticolapar monoamīna neirotransmiteru saturu žurku smadzenēs," Ķīnas tradicionālās un augu izcelsmes zāles, Nr. 24, 417.–419. lpp., 1993.

[14] H. Wu un C.-J. Hu, Ķīniešu medicīnas procesa disciplīna, Tautas medicīnas izdevniecība, Pekina, Ķīna, 2012. gads.

[15] ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et al., "Unikāls jautājums ķīniešu materia medica standartizācijā: apstrāde", Planta Medica, sēj. 76, Nr. 17, 1975.–1986., 2010. lpp.

[16] Ķīnas Farmakopejas komisija, Ķīnas Tautas Republikas farmakopeja, 2015. gads, sēj. IV, Ķīnas Tautas Republikas farmakopeja, Pekina, Ķīna, 2015.

[17] J.-M. Čens, Materia Medical izglītojošais gruntējums, tradicionālā ķīniešu medicīna Ancient Books Press, Pekina, Ķīna, 2009.

[18] B.-R. Li un Y.-C. Viņa, "Nieru tonizējošu zāļu ietekme uz hipotalāmu-hipofīzes-gonādu (HPG) asi", Tradicionālās ķīniešu medicīnas žurnāls, Nr. 7, 63.–65. lpp., 1984. gads.

[19] M. Chen, L. Zhao un W. Jia, "Metabonomisks pētījums par hidrokortizona izraisīta dzīvnieku modeļa bioķīmiskajiem profiliem", Journal of Proteome Research, sēj. 4, nē. 6, 2391.–2396. lpp., 2005. gads.

[20] Q. Chen un N.-Y. Yi, "Te dzīvnieku modeļi un zāles Yindefciency and Yang-deficiency" izdevumā "Farmakoloģisko pētījumu eksperimentālā metodoloģija tradicionālajā ķīniešu medicīnā", People's Health Publishing House, Pekina, Ķīna, 1993.

[21] Z.-G. Ma, Z.-L. Yang, P. Li un C.-H. Li, "Astoņu feniletanoīdu glikozīdu vienlaicīga noteikšana dažādās ģints sugāsCistanchear augstas izšķirtspējas šķidruma hromatogrāfiju", Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 31. sēj., nr. 18, 2838.–2850. lpp., 2008. gads.

[22] Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song un A. Lu, "Maillard reakcija, kas iesaistīta Polygonum multiform saknes tvaicēšanas procesā", Planta Medica, sēj. 75, Nr. 1, 2009. gada 84.–88. lpp.

[23] W.-T. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et al., "Tradicionālā apstrāde spēcīgi ietekmē metabolītu sastāvu hidrolīzes ceļā Rehmannia glutinosa saknēs", Chemical & Pharmaceutical Bulletin, sēj. 59, Nr. 5, 546.–552. lpp., 2011. gads.

[24] Y. Jin, Y.-J. Kims, Dž. N. Jeon et al., "Baltā, sarkanā un melnā žeņšeņa ietekme uz fizikāli ķīmiskajām īpašībām un ginsenosīdiem", Plant Foods for Human Nutrition, sēj. 70, Nr. 2, 2015. gada 141.–145. lpp.

[25] T. Vangs, X.-Y. Džans un W.-Y. Sji, "CistanchedeserticolaYC Ma, 'tuksneša žeņšeņs': pārskats," American Journal of Chinese Medicine, 40. sēj., Nr. 6, 1123.–1141. lpp., 2012. gads.

[26] S.-Y. Nam, H.-Y. Kima, M.-S. Yoou et al., "Abeliophyllum distichum izoakteozīda pretiekaisuma iedarbība", Immunopharmacology and Immunotoxicology, sēj. 37, Nr. 3, 258.–264. lpp., 2015. gads.

[27] S. Chae, JS Kim, KA Kang u.c., "Clerodendron trichotomum izoakteozīda antioksidanta aktivitāte", Journal of Toxicology and Environmental Health, A daļa. Aktuālie jautājumi, sēj. 68, Nr. 5, 389.–400. lpp., 2005. gads.