1. tipa dendrītiskās šūnas (DC) nieru slimībās

lai iegūtu plašāku informāciju:ali.ma@wecistanche.com

Parastās 1. tipa dendrītiskās šūnas (cDC1) cilvēka nieru slimībās: klīniski patoloģiskās korelācijas

Titi Chen, Qi Cao un citi.

KOPSAVILKUMS

Fons: 1. tipa dendrītiskās šūnas(cDC1) ir parasto DC apakškopa, kuras atpazīstamākā funkcija ir savstarpēja prezentācija CD8 plus T šūnām. Mēs veicām šo pētījumu, lai noskaidrotu to skaitu un atrašanās vietu1. tipa dendrītiskās šūnas(cDC1) dažādiem cilvēkiemnieru slimībaskā arī to korelācija ar klīniski patoloģiskajām pazīmēm un CD8 T šūnām.

Metodes: mēs analizējām 135nieresbiopsijas paraugi.Nieru slimībasiekļauta: akūta tubulārā nekroze (ATN), akūts intersticiāls nefrīts (AIN), proliferatīvs glomerulonefrīts (GN) (IgA nefropātija, lupus nefrīts, pauci-imūna GN, anti-GBM slimība), neproliferatīvs GN (minimālu izmaiņu slimība, membrānas nefropātija ), un diabētiskā nefropātija. Netiešā imūnfluorescences krāsošana tika izmantota, lai kvantitatīvi noteiktu cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas), CD1ct DC un CD8 plus T šūnas.

Rezultāti:1. tipa dendrītiskās šūnas(cDC1) normālā stāvoklī bija retinieres. To skaits ievērojami palielinājās ATN un proliferatīvajā GN, proporcionāli daudz vairāk nekā CD1ct DC. cDC1s (1. tipa dendrītiskās šūnas)galvenokārt tika konstatēti intersticicijā, izņemot lupus nefrītu, pauci-imūno GN un anti-GBM slimību, kur tie bija pamanāmi glomerulos un periglomerulārajos reģionos. cDC1 skaits (1. tipa dendrītiskās šūnas)korelē ar slimības smagumu ATN, pusmēness skaitu pauci-imūnā GN, intersticiālu fibrozi lgA nefropātijā un lupus nefrītu, kā arī IgA nefropātijas prognozi. CD8 plus T šūnu skaits arī ievērojami palielinājās šajos apstākļos un cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits korelēja ar CD8 plus Tšūnu skaitu lupus nefrīta un pauci-imūnā GN gadījumā, un daudzi no tiem ir cieši lokalizēti. Secinājumi: cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits korelē ar dažādām klīniski patoloģiskām pazīmēm un prognozēm, kas atspoguļo iespējamo lomu šajos apstākļos. To saistība ar CD8 plus T šūnām liecina par kombinētu mehānismu, kas atbilst rezultātiem dzīvnieku modeļos.

IEVADS

Dendrītiskās šūnas(DC) ir efektīvas imunitātes centrālie organizatori. Šīs šūnas ir neviendabīgas, un tās var iedalīt atsevišķās apakšgrupās, pamatojoties uz to fenotipu un funkciju. Dendritiskās šūnas var plaši iedalīt plazmacitoīdās DC (Dendritiskās šūnas)(pDC) un parastajiem DC (Dendritiskās šūnas)(cDC).cDC sastāv no divām galvenajām apakškopām: cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)(CD141* līdzstrāvas ierīces (Dendritiskās šūnas) cilvēkiem un CD103t vai CD8ot DC grauzējiem) un cDC2 (CD1c DC cilvēkiem un CD1 lbt DCs grauzējiem) (1).cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)vispirms tika atklāti pelēm un pēc tam cilvēkiem, un tiem ir raksturīga to izcilā spēja fagocitēt nekrotiskās šūnas, izmantojot ar bojājumu saistīto molekulārā modeļa (DAMP) receptoru Clec9A, un krusteniski parādīties CD8 plus T šūnām. Turpretim cDC2 ir efektīvi CD4* T šūnu aktivatori, bet sliktāki CD8t T šūnu aktivācijā (2).

DC (Dendritiskās šūnas)ir pētīti cilvēkiemnieru slimībaun tika konstatēts, ka to skaits ir palielināts glomerulonefrīta (GN) gadījumā (3, 4). Pēc cDCl atklāšanas uzkrājošie pētījumi ar dzīvniekiem ir parādījuši, ka tiem ir galvenā lomanieru slimības, piemēram, adriamicīna nefropātijas un pusmēness GN gadījumā, mijiedarbojoties ar T šūnām (5-8). Tomēr cilvēkiem šādu pētījumu trūkstnieru slimība, tikai viens pētījums parādīja palielinātu CDC skaitu (VispārpieņemtaisDendritiskās šūnas)GN (9). Mēs veicām šo pētījumu, lai sniegtu galveno cDC apakškopu, cDC1, analīzi (1. tipa dendrītiskās šūnas), un cDC2, plašā cilvēku diapazonānieru slimībastostarp neglomerulāras slimības [akūta tubulārā nekroze (ATN), akūts intersticiāls nefrīts (AIN)], proliferatīvs GN (IgA nefropātija, lupus nefrīts, pauci-imūna GN, anti-GBM slimība), neproliferatīva GN (minimālu pārmaiņu slimība MCD), membrānas nefropātija) un diabētiskā nefropātija. Mēs atklājām, ka cDC ir būtiski korelē ar patoloģiskām pazīmēm, tostarp ar ATN smagumu, pusmēness veidošanos pauci-imūnā GN un intersticiālu fibrozi imūnmediētā GN. Turklāt saskaņā ar to specializēto spēju aktivizēt CD8 plus T šūnas dzīvniekos. modeļiem, mēs arī parādījām to korelāciju ar CD8t T šūnām šajos paraugos. Šie atklājumi dod stimulu izpētīt jaunus terapeitiskos mērķus, kas manipulē ar šīm šūnām, lai ārstētunieresslimības.

Noklikšķiniet uz Cistanche stumbra nieru slimībai

MATERIĀLS UN METODES

Pacienti un audu paraugi

Pētījums tika veikts saskaņā ar Helsinku deklarācijas principiem, un to apstiprināja Rietumsidnejas vietējā veselības rajona Cilvēka pētījumu ētikas komiteja. Tika saņemta informēta pacienta piekrišana. Mēs analizējām 176 iesaldētas diagnostikasnieresbiopsy samples taken from non-pregnant adult patients(>18 gadus vecs) laikā no 2016. gada 18. jūnija līdz 2017. gada 30. * jūnijam Vestmīdas slimnīcā, Sidnejā, Austrālijā.Nieresaudi tika ātri sasaldēti OCTcomound (Tissue-Tek Sakura, ASV) un uzglabāti -80 grādu temperatūrā. Četrdesmit vienam (41) paraugam bija slikta audu kvalitāte, un tie tika izslēgti no pētījuma. Sākotnējie dati par pacientiem, tostarp vecums, dzimums, aptuvenais glomerulārās filtrācijas ātrums (eGFR) un proteīnūrijas pakāpe, tika savākti pētījuma laikā.nieresbiopsija.eGFR tika aprēķināts, izmantojot CKD-EPI formulu. Diagnozi veica nieru patologs, pamatojoties uz gaismu, imunofluorescenci (IF) un elektronu mikroskopiju, kā arī klīnisko vēsturi.

Tika analizētas dažādas slimības, tostarp neglomerulārās slimības (ATN, AIN), proliferatīvās GN (IgA nefropātija, lupus nefrīts, pauci-imūnā GN, anti-GBM slimība), neproliferatīvā GN (MCD, membrānas nefropātija) un diabētiskās slimības. nefropātija. Attiecībā uz ATN mēs iekļāvām tikai neseptiskus gadījumus, jo septiskajam ATN ir atšķirīga patofizioloģija. ATN tika tālāk klasificēts vieglas vai vidēji smagas slimības kategorijā (definēts kā<50%cortical tubules="" showing="" injury)and="" severe="" disease="" (="">=50 procenti garozas kanāliņu, kuros redzami bojājumi). IgA nefropātija tika klasificēta saskaņā ar Oksfordas MEST punktu skaitu (M mezangiālā hipercelularitāte, E endokapilārā hipercelularitāte, S segmentālā glomeruloskleroze, T tubulārā atrofija/intersticiāla fibroze). Mēs arī analizējām korelāciju starp cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas) number and prognosis (defined a priori as >20% reduction in eGFR on or before 31t December 2019)in IgA nephropathy by dividing patients into 2 groups according to cDC number with a cut-off point at the upper quartile(>=15). Lupus nefrīts tika iedalīts 2 grupās atkarībā no intersticiālās fibrozes līmeņa.<25%,>=25 procenti kortikālās intersticiālās iesaistes). Pauci-imūnais GN tika klasificēts 2 grupās pēc glomerulu ar pusmēness procentiem (<40%,>=40 procenti).

Kā parastiniereskontrolēm, mēs izmantojām 5 normālas nieru garozas no nefrektomijas paraugiem, kā arī 2 donorusnieresnav piemērots transplantācijai. Audzēja nefrektomijas gadījumā paraugi tika ņemti no pola, kas bija pretī audzējam un vismaz 5 cm attālumā no audzēja malas. Šiem audiem bija normāls makroskopisks izskats. Mikroskopiski neviens no tiemnieresparaugos bija pierādījumi par nozīmīgu glomerulāru vai tubulointersticiālu iekaisumu vai ievainojumu. Mēs izmantojām normālus pieaugušo donoru liesas audus kā pozitīvu kontroli antivielu testēšanai.

Imunofluorescences krāsošana

Sērijveida kriostata sekcijas tika sagrieztas 5 μm garumā un novietotas uz Superfrost Ultra Plus stikla priekšmetstikliņiem (Thermo Scientific, ASV). Slaidi tika saglabāti -80 grādos. Audu sekcijas tika fiksētas ar 100% metanolu -20 grādu temperatūrā 10 minūtes un pēc tam žāvētas gaisā. Netiešā imunofluorescences krāsošana tika veikta, izmantojot šādu metodi: audu sekcijas tika mazgātas DPBS (Lonza, ASV) un bloķētas ar 2% liellopu seruma albumīnu (Sigma-Aldrich, ASV) 15 minūtes; tad tās tika iekrāsotas ar primāro antivielu 4 grādu temperatūrā nakti, kam sekoja sekundārās antivielas 40 minūtes istabas temperatūrā. 1. tabulā ir izmantoto primāro un sekundāro antivielu un to atšķaidījumu saraksts. Kodoli tika iekrāsoti ar DAPI (1:250, 000, ThermoFisher, ASV), pirms paraugi tika uzstādīti uz pārklājuma stikliem ar fluorescences montāžas vidi (Dako, ASV). Tika pārbaudīta un izslēgta nespecifiskā krāsošana un krusteniskā reaktivitāte starp dažādām primārajām un sekundārajām antivielām.

1. TABULA|Pētījumā izmantotās primārās un sekundārās antivielas

cDCl tika identificēti, krāsojot marķieri Clec9A. Cilvēkiem Clec9A ekspresija ir ļoti ierobežota ar cDCl asinīs un audos (10, 11). Lai to apstiprinātunieres, mēs veicām dubultu Clec9A un HLA-DRB1, kā arī Clec9A un CD1lc krāsošanu atsevišķos normālos un slimos apstākļos. Lielākā daļa, ja ne viss Clec9A pārklājās ar HLA-DRB1 (1. papildu attēls) un CD1lc (2. papildu attēls).

1. ATTĒLS|Normālas nieres cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas), cDC2 un CD8 plus T šūnas.

DC (Dendritiskās šūnas)normālā stāvoklī bija retinieresun cDC2 skaits bija aptuveni 7 reizes lielāks par cDC1 skaitu (1. tipa dendrītiskās šūnas). (Stienis=100 mm).

REZULTĀTI

Pacienta sākotnējās īpašības.Kontroles un slimību kohortu pacientu sākotnējās īpašības ir apkopotas 2. tabulā. Kopumā pētījumā tika iekļauti 135 pacienti.nieresslimībastika analizētas, tostarp neglomerulārās slimības [ATN (22), AIN (10)], proliferatīvā GN[gA nefropātija (44), lupus nefrīts (12), pauciimūnā GN (12), anti-GBM slimība (4)] , neproliferatīvā GN[MCD(5), membrānas nefropātija(5)] un diabētiskā nefropātija (21). Lupus nefrīta grupā bija vairāk sieviešu, un viņu vecums bija jaunāks, salīdzinot ar citāmnieresslimības, kas atbilst literatūrai(12). Pacientiem ar pauciimūno GN un anti-GBM slimību bija viszemākais eGFR. Proteīnūrijas līmenis bija visaugstākais MCD un membrānas nefropātijā.

2. TABULA|Pamata raksturlielumi.

DC skaits un atrašanās vieta (Dendritiskās šūnas)sadaļā Kontrole un slimības.cDCl normālā stāvoklī bija retinieres(1. attēls) un cDC2 skaitļi bija aptuveni 7 reizes lielāki par cDC1 skaitu (1. tipa dendrītiskās šūnas).CDC1 numurs (1. tipa dendrītiskās šūnas)ievērojami palielinājās ATN un proliferatīvajā GN (2.A attēls), savukārt to skaits nemainījās, salīdzinot ar kontroli AIN, membrānas nefropātijas, MCD un diabētiskās nefropātijas gadījumā (3. papildu attēls). cDC2 skaits ievērojami palielinājās arī ATN un proliferatīvajā GN (attēls 2B). Notika cDC2 samazināšanās (2. tipa dendritiskās šūnas)/cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)attiecība, kas norāda cDCl (1. tipa dendrītiskās šūnas)palielinājās proporcionāli vairāk nekā cDC2 (2.C attēls).

2. ATTĒLS|cDC1 numurs (1. tipa dendrītiskās šūnas)un cDC2, cDC2/cDC1 attiecība un CD8 plus T šūnu kontroles un izvēlētās slimības.

P vērtība tiek aprēķināta katrai slimībai salīdzinājumā ar kontroli. Abi cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)un cDC2 ievērojami palielinājās ATN, IgA, lupus nefrīta, pauci-imūnās GN un anti-GBM slimības gadījumā (A, B)

ar cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)palielinājās proporcionāli vairāk nekā cDC2 ATN, lupus nefrīta, pauci-imūnās GN un anti-GBM slimības (C) gadījumā.

CD8 plus T šūnas ievērojami palielinājās ATN, IgA, lupus nefrīta, pauci-imūnās GN un anti-GBM slimības (D) gadījumā.

Lielākā daļa cDCl atradās intersticijā, izņemot lupus nefrītu, pauci-imūno GN un anti-GBM slimību, kur tie tika konstatēti arī periglomerulārajos un intraglomerulārajos reģionos (3.A attēls). Turklāt mēs atklājām arī nozīmīgu CD8t T šūnu skaits periglomerulārajos un intraglomerulārajos reģionos (3.A attēls), un daudzas no tām lokalizējās kopā ar cDCl (3.B attēls). No otras puses, cDC2 reti tika konstatēti intraglomerulārajos reģionos, un bija minimāla līdzlokalizācija ar CD8 plus T šūnām.

3. ATTĒLS|(A) cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)un CD8 plus T šūnas intraglomerulārajos reģionos. (B) cDC1 lokalizācija ar CD8 plus T šūnām. (Stienis=100 mm). * P < 0.05,="" **="" p=""><>

Asociācija starp cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)Ar klīniski patoloģiskām iezīmēm un CD8 plus T šūnām Mēs analizējām korelāciju starp cDCl (1. tipa dendrītiskās šūnas)un klīniski patoloģiskās pazīmes, kā arī CD8 plus T šūnas. Bija 22 ATN (vieglas modifikācijas slimība n=12, smaga slimība n=10) gadījumi. Smagāka slimība bija saistīta ar lielāku cDC1 skaitu (1. tipa dendrītiskās šūnas)(p=0.032), bet ne cDC2(4.A attēls).cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)palielinājās proporcionāli vairāk nekā cDC2 (cDC2/cDC1 attiecība 2,5, p=0.019). CD8 plus T šūnu skaits ievērojami palielinājās arī ATN (p=0.005) (3. tabula, 2.D attēls). cDC1 numurs (1. tipa dendrītiskās šūnas)nekorelēja ar CD8* T šūnu skaitu ATN.

3. TABULA|CD8 plus T šūnu skaits un korelācijas koeficients starp cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)un CD8 plus T šūnu skaits kontroles un slimajās nierēs.

Tika analizēti četrdesmit četri IgA nefropātijas gadījumi. Izmantojot Oksfordas klasifikāciju MEST punktu skaitu (M mezangiālā hipercelularitāte, E endokapilārā hipercelularitāte, S segmentālā glomeruloskleroze, T tubulārā atrofija/intersticiāla fibroze), lielāks cDC1 skaits. (1. tipa dendrītiskās šūnas)bija saistīta ar augstāku T rezultātu (p{0}}.008), bet ne MES rādītājiem (4.B attēls). Bija 7 gadījumi ar pusmēness, un cCD1 skaits nebija saistīts ar pusmēness skaitu. SkaitsnieresCD8* T šūnu skaits IgA nefropātijā bija ievērojami augstāks nekā kontroles grupā (6. lpp.).<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d).="" there="" was="" no="" correlation="" between=""> (1. tipa dendrītiskās šūnas) and CD8+ T cell numbers. Thirty-five(35)patients had follow-up data on or before 31sf December 2019, of whom9experienced>eGFR samazinājums par 20 procentiem. Pacientu sadalīšana 2 grupās pēc cDCl (1. tipa dendrītiskās šūnas) number with a cut-off point at the upper quartile(>=15), jo augstāks cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)numuru grupa bija saistīta ar sliktākiem rezultātiem (4.E attēls).

4. ATTĒLS|Korelācija starp cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas), cDC2 un CD8 plus T šūnu skaits un slimības smagums (A–D).

IgA nefropātijas izdzīvošanas Kaplana Meiera līkne (E). T rādītājs 0 attiecas uz apgabala procentuālo daļu, kurā ir tubulāra atrofija/intersticiāla fibroze <=25>

T rādītājs 1 attiecas uz apgabala procentuālo daļu, kurā ir tubulāra atrofija/intersticiāla fibroze 26 - 50 procenti, T rādītājs 2 attiecas uz apgabala procentuālo daļu, kurā redzama tubulāra atrofija/intersticiāla fibroze > 50 procenti.

Izdzīvošana tika definēta kā eGFR samazinājums par > 20 procentiem 2019. gada 31. decembrī vai pirms šī datuma. NS, nav nozīmīga.

Bija 12 lupus nefrīta gadījumi. Tāpat kā IgA nefropātijā, lielāks cDCl skaits bija saistīts ar smagāku fibrozi (p=0.020) (4.C attēls). Turklāt CD8 plus T šūnu skaits arī ievērojami palielinājās (P<0.001) (table="" 3,="" figure="" 2d)="" and="" this="" correlated="" with="" the="" number="" of="" cdcl="" cells="" (r="0.614," p="0.034)" (table="" 3).a="" significant="" number="" of=""> (1. tipa dendrītiskās šūnas)un CD8t T šūnas tika atrastas periglomerulāros, kā arī intraglomerulāros, norādot, ka tām var būt nozīme šajā stāvoklī. Otrkārt, ar intersticiālu fibrozi saistītā imūnsistēmas izraisītā slimībā (IgA nefropātija un lupus nefrīts), mēs atklājām, ka cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits korelēja ar fibrozes smagumu, kā arī IgA nefropātijas prognozi, savukārt ar imūnsistēmu nesaistītu fibrotisko slimību (diabētiskā nefropātija) šāda korelācija netika konstatēta. Treškārt, pastāvēja spēcīga korelācija starp cDCl skaitu un pusmēness veidošanos pauci imūnā GN, un cDCl lielā skaitā bija periglomerulārajos un intraglomerulārajos reģionos, norādot uz to iespējamo lomu pusmēness veidošanā. Ceturtkārt, cDC1 skaits korelēja ar CD8 plus T šūnu skaitu lupus nefrīta un pauci imūnās GN gadījumā, un daudzi cDCl ir lokalizēti ar CD8 plus T šūnām, kas liecina par to iespējamo mijiedarbību. Tas atbilst mūsu atklājumiem dzīvnieku modeļosnieresslimībakas parāda cDC1 peļu homologus (1. tipa dendrītiskās šūnas)šūnas galvenokārt aktivizē CD8t T šūnas. Kopumā šie atklājumi liecina, ka cDCl ir svarīga loma dažādās jomāsnieresslimībasieskaitot ATN, intersticiālu fibrozi imūnsistēmas izraisītas slimības gadījumā un pusmēness veidošanos, un ka tie potenciāli var darboties, aktivizējot CD8t T šūnas.

cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)Skaitlis, kas saistīts ar slimības smagumu ATN. Neseptiskā ATN pirmo reizi mēs parādījām ievērojami palielinātu DC skaitu (Dendritiskās šūnas), jo īpaši cDCl, salīdzinot ar cDC2. Svarīgi, ka cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits korelē ar slimības smagumu. Turklāt tika palielināts arī CD8 plus T šūnu skaits. ATN parasti izraisa išēmijas-reperfūzijas bojājums (IRI), nefrotoksīni vai sepse. Tradicionāli IRI un toksīni izraisa sterilu iekaisumu, un tika uzskatīts, ka iedzimtajai imunitātei, kur DC un T-šūnas ir mazāk svarīgas, ir dominējošā loma. Tomēr pieaugošie pierādījumi no pētījumiem ar dzīvniekiem liecina, ka gan cDCl, gan CD8 plus T šūnas ir svarīgi dalībnieki. Iepriekšējos pētījumos ar dzīvnieku IRI un cisplatīna nefrotoksicitāti tika konstatēts, ka kopējais DC un T šūnu skaits ir palielinājies (13-17). Mūsu iepriekšējie pētījumi parādīja, ka adriamicīna nefropātijā cDCl skaits ievērojami palielinājās (5). IRI gadījumā aktivēto dendritisko šūnu apakškopa uzrāda palielinātu spēju krusteniski prezentēt antigēnu CD8t T šūnām (18). Adriamicīna nefropātijā mēs arī atklājām, ka cDCls izraisīja CD8 plus T šūnu reakciju, kas izraisīja ievainojumus (5). Korelācijas trūkums starp cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)un CD8* T šūna cilvēka ATN atšķirībā no atklājumiem dzīvnieku modeļos var atspoguļot atšķirīgus neimunoloģiskos ievainojumu ceļus cilvēka ATN, salīdzinot ar IRI peles modeļos, kur cDCl ir nozīmīga loma caur CD8* T šūnām. Turklāt grauzējiem ir pierādīts, ka cDCl audos piesaista ķīmiski atraktants XCLl, ko ražo dabiskās killer šūnas (19). Tāpēc, iespējams, ir vērts to izpētīt sīkāknieresslimība.

cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)Skaitlis korelē ar imūnsistēmas izraisītu intersticiālu fibrozi. Otrs nozīmīgais atklājums šajā pētījumā ir tāds, ka cDCl skaits korelē ar intersticiālas fibrozes smagumu, kas saistīta ar imūnsistēmu izraisītu slimību (IgA nefropātija un lupus nefrīts), bet ne ar imūnsistēmu nesaistītu fibrotisko slimību (diabētiskā nefropātija), liecina Iepriekšējais pētījums. palielināts cDCl un cDC2 skaits intersticiālās fibrozes gadījumā (9). Mēs pirmo reizi parādījām, ka tas attiecas tikai uz imūnsistēmas izraisītām slimībām un cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits palielinājās proporcionāli vairāk nekā cDC2. Turklāt mēs arī parādījām cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits korelēja ar prognozi, un CD8* T šūnu skaits arī ievērojami palielinājās IgA nefropātijā. To apstiprina pētījumi ar dzīvniekiem, kas parāda DC (Dendritiskās šūnas)tiešā veidā veicina fibrozi. Piemēram, no DC iegūtais amfiregulīns veicināja fibrozi (20). Ir arī iespējams, ka cDCls veicināja fibrozi, izmantojot CD8 plus T šūnas, kas, kā zināms, veicina fibrozi citos orgānos (21-23). Tā kā intersticiālā fibroze ir saistīta ar hroniskas slimības progresēšanunieresslimība, nav pārsteidzoši, ka mēs atradām cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits ir labs prognostiskais marķieris IgA nefropātijas gadījumā. Citi pētījumi ir parādījuši, ka CD8t T šūnas korelē ar IgA nefropātijas prognozi (24), kas var būt cDCl savstarpējas prezentācijas rezultāts. Lupus nefrīta gadījumā mēs parādījām korelāciju starp cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits un intersticiāla fibroze, kā arī CD8t T šūnu skaits. Iepriekšējie pētījumi liecina arī par pieaugumunierescDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits lupus nefrīta (25), īpaši III un VI klases lupus nefrīta gadījumā, attiecīgi samazinot to cirkulācijas skaitu (26). Mēs paplašinājām šos atklājumus, parādot, ka tie arī korelē ar hroniskām izmaiņām. Ir vispāratzīts, ka intersticiālam iekaisumam, kas sastāv no T šūnām, B šūnām, dendritiskajām šūnām un makrofāgiem, ir dominējoša loma lupus nefrīta progresēšanā (27). cDCls var veicināt lupus nefrīta progresēšanu dažādos gadījumos. no veidiem. Pirmkārt, interferona aktivācijai ir galvenā loma lupus nefrīta (28-30) patoģenēzē, un cDCl ir ievērojams IFN-入 ražotājs. (31) Otrkārt, cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)var veicināt lupus nefrīta progresēšanu caur CD8t T šūnām (32-37), un mūsu atklājums par korelāciju starp cDCl un CD8 plus T vēl vairāk atbalsta to iespējamo mijiedarbību. Iepriekš ir pierādīta CD8 plus T šūnu loma lupus nefrīta gadījumā. CD8 plus T šūnas kontrolē autoreaktīvo imunitāti, atbrīvojot citotoksiskas molekulas. Tika konstatēts, ka CD8 plus T šūnām lupus nefrīta gadījumā ir pavājināta citotoksiskā funkcija, kas var izraisīt autoimunitāti (38). Turklāt šīs šūnas var radīt arī lupus autoantigēnus (39). Ir daudz pierādījumu tam, ka CD8 * T šūnas abāsnieres(32,33) un urīns (34-36) korelē ar slimības aktivitāti un histoloģiskiem bojājumiem lupus nefrīta gadījumā. Turklāt tika pierādīts, ka CD8* T-šūnu izsīkums paredz labvēlīgu prognozi (37).

cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)Skaitlis korelēts ar pusmēness skaitu Pauci-Immune GN. Pauci-imūnajā GN mēs atradām cDCls, kas agregēti periglomerulārajos un intraglomerulārajos reģionos, un to skaits korelēja ar pusmēness un CD8 plus T šūnu skaitu. Iepriekšējie pētījumi parādīja, ka DC (Dendritiskās šūnas)reti sastopamas glomerulos (3, 4, 9) vai tikai ļoti nelielā skaitā (40). No otras puses, T šūnas bija pamanāmas interstitijā, periglomerulārajos un intraglomerulārajos reģionos ({{6} }). Mēs noskaidrojām, ka gan cDCl, gan CD8 * T šūnas ir pamanāmas periglomerulārajos un intraglomerulārajos reģionos, un daudzas no tām ir lokalizētas. Turklāt cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)skaits korelē ar pusmēness un CD8 plus T šūnu skaitu. Visi šie atklājumi liecina par cDCl lomu pusmēness veidošanā, mijiedarbojoties ar CD8 * T šūnām. CD8t T šūnu patogēnā loma pauci-imūnā GN un pusmēness veidošanā jau ir pierādīta dzīvnieku modeļos (45, 46). Saskaņā ar mūsu atklājumiem cilvēkiem, dzīvnieku pusmēness GN, cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)un CD8* T šūnas tika konstatētas īpaši periglomerulārajā reģionā (47,48). Ir pierādīts, ka Bowman kapsula nodrošina aizsargātu imunoloģisku nišu, novēršot DC un citotoksisko CD8 plus T šūnu piekļuvi Bowman telpai un tādējādi podocītiem (45, 47). Tomēr, kad Boumena kapsula tika uzlauzta, šīs iekaisuma šūnas ieguva piekļuvi un iznīcināja podocītus, kā rezultātā strauji progresēja GN (47).

Viens no šī pētījuma ierobežojumiem ir tāds, ka IF krāsošanas tehnika ļauj izmantot tikai ierobežotu skaitu marķieru. Būtu lietderīgi paplašināt mūsu atklājumus, izmantojot tādas tehnoloģijas kā plūsmas citometrija, kas var apvienot vairākus marķierus, lai turpinātu analizēt šo DC fenotipu. (Dendritiskās šūnas)un to attiecīgie citokīnu un ķemokīnu profili. Tomēr atrašanās vietas informācija tiks zaudēta. Turpmākajos pētījumos var apsvērt arī citas metodes, piemēram, multiplekso imūnhistoķīmiju un nanostringu, lai turpinātu pētīt šīs šūnasnieresslimība. Turklāt, krāsojot cDC2, izmantojot CD1c, HLA-DRB1 un CD1lc, var būt neliels procents B šūnu, kas arī ekspresē šos marķierus, kas nav izslēgts.

SECINĀJUMI

Pat ja cDC1 (1. tipa dendrītiskās šūnas)ietver nelielu DC apakškopu (Dendritiskās šūnas)homeostatiskos apstākļos šis pētījums parāda būtisku korelāciju starp šo šūnu populāciju un cilvēka klīniski patoloģiskajām iezīmēmnieresslimība. Tas atspoguļo to iespējamo nozīmi slimības procesos, piemēram, ATN, pusmēness veidošanā proliferatīvā GN un intersticiālā fibrozē imūnsistēmas izraisītā GN. Turklāt to līdzās lokalizācija un korelācija ar CD8t T šūnām var sniegt skaidrojumu to darbības mehānismam, apstiprinot datus no dzīvnieku modeļiem. Šie atklājumi dod stimulu izpētīt jaunus terapeitiskos mērķus, kas manipulē ar šīm šūnām, lai ārstētunieresslimības, kā mēs esam darījuši pētījumos ar dzīvniekiem (6), un izpētīt to izmantošanu kā prognostisku marķieri. Lai noskaidrotu cDC1 lomu, ir nepieciešami turpmāki pētījumi gan cilvēkiem, gan dzīvniekiem (1. tipa dendrītiskās šūnas), to darbības mehānisms un vislabākais terapeitiskais mērķis.

ATSAUCES

1. Pakalniskyte D, Schraml BU. Konvencionālo dendritisko šūnu audu specifiskā daudzveidība un funkcijas. Adv Immunol(2017)134:89-135.doi:10.1016/bs.ai.2017.01.003

2. Merad M, Sathe P, Helft J, Miller J, Mortha A. Dendritic Cell Lineage: ontogeny and Function of Dendritic Cells and to subsets in Steady State and the Inflamed Setting. Annu Rev Immunol (2013) 31:563-604.doi:10.1146/gada imūnols-020711-074950

3. Segerer S, Heller F, Lindenmeyer MT, Schmid H, Cohen CD, Draganovici D u.c. Dendritisko šūnu marķieru specifiskā ekspresija cilvēka glomerulonefrīta gadījumā.NieresInt (2008)74(1):37-46.doi:10.1038/ki.2008.99

4. Woltman AM, de Fiter JW, Zuidwijk K, Vlug AG, Bajema IM, van der Kooij SW u.c. Dendritisko šūnu apakškopu kvantitatīva noteikšana cilvēka nieru audos normālos un patoloģiskos apstākļos.NieresInt (2007) 71(10):1001-8. doi: 10.1038/sj.ki.5002187

5. Cao Q, Lu J, LiQ, Wang C Wang XM, Lee VW u.c. Cd103 plus dendrītiskās šūnas izraisa Cd8 plus T šūnu reakcijas, lai paātrinātuNieresTraumasAdriamicīna nefropātijas gadījumā. J Am Soc Nephrol (2016) 27(5):1344-60.doi: 10.1681/ASN.2015030229

6. Wang R, Chen T, Wang C, Zhang Z, Wang XM, Li Q et al. Flt3 inhibīcijas atviegloHronisksNieresSlimībanomācot CD103 plus dendritisko šūnu mediēto T šūnu aktivāciju. Nephrol Dial Transplant(2019)34(11):1853-63. DOI: 10.1093/gfy385

7. Evers BD, Engel DR, Bohner AM, Tittel AP, Krause TA, Heuser C un citi Cd103 plusNieresDendritiskās šūnas aizsargā pret pusmēness GN, uzturot Il{0}}regulatīvās T šūnas. J Am Soc Nephrol (2016) 27(11):3368-82. DOI: 10.1681/ASN.2015080873

8. Kitching AR, Ooi JD. Nieru dendrītiskās šūnas: garš un līkumots ceļš. J Am Soc Nephrol (2018) 29(1):4-7.doi: 10.1681/ASN.2017101145

9. Kassianos AJ, Wang X, Sampangi S, Muczynski K, Healy H, Wilkinson R. Palielināta cilvēka CD141(hi)CLEC9A( plus ) un CD1c( plus ) mieloīdo dendritisko šūnu apakšgrupu skaita palielināšanās nieru fibrozes un B gadījumāNieresB. Am J Physiol Renal Physiol (2013) 305(10): F1391-401. doi:10.1152/virsnieru.00318.2013

10. Guilliams M, Dutertre CA, Scott CL, McGovern N, Sichien D, Chakaro S u.c. Neuzraudzīta augstas dimensijas analīze izlīdzina dendrītiskās šūnas audos un sugās. Imunitāte (2016) 45(3):669-84.doi: 10.1016/j.immuni.2016.08.015

11. Villani AC, Satija R, Reynolds G, Sarkizova S, Shekhar K, Fletcher J u.c. Vienšūnu RNS-seq atklāj jaunus cilvēka asins dendritisko šūnu, monocītu un priekšteču veidus. Zinātne(2017) 356(6335):4-6. DOI: 10.1126/science.aah4573

12. Almaani S, Māra A, Rovins, BH. Atjauninājums par lupus nefrītu. Clin I Am Soc Nephrol (2017) 12(5):825-35.doi: 10.2215/CJIN.05780616

Piezīme:iepriekš minētais nav pilns atsauces saraksts