Interleikīna-6 un interleikīna-6 receptoru donoru ģenētiskie varianti ir saistīti ar biopsijā pierādītu atgrūšanu pēc nieres transplantācijas
Feb 26, 2022
Kopš pirmās veiksmīgāsnieru transplantācija1954. gadā,nieres transplantācijair kļuvusi par izvēlētu ārstēšanu pacientiem ar beigu stadijunieru slimība(ESKD) 1 . Papildus ķirurģijas sasniegumiem izpildēnierestransplantācijas, imūnsupresīvu zāļu pievienošana pēc transplantācijas uzlaboja dzīvildzinieru allotransplantātino mēnešiem līdz gadiem. Tomēr transplantācijas saņēmēji vienmēr kļūst jutīgi pret transplantātu, izraisot sliktu ilgtermiņa izdzīvošanu.nieru allotransplantāti2,3. Lai gan parastie imūnsupresanti ir efektīvi akūtu imūnreakciju likvidēšanā, tie tikai daļēji novērš alosensibilizāciju, tādējādi ļaujot humorālajai imunitātei veidoties un izraisīt ilgtermiņa alotransplantāta mazspēju. Lai novērstu noraidīšanunieru transplantācijastādēļ ir jāizstrādā jaunas terapijas, kas var kavēt alosensibilizācijas veidošanos 4 . Pēdējo piecdesmit gadu laikā veikto zinātnisko darbu rezultātā ir konstatēts, ka akūtu un hronisku allotransplantāta atgrūšanu izraisa sarežģīts un dinamisks alloimūno reakciju kopums. Imūnmodulējošās olbaltumvielas, kas pazīstamas kā citokīni, ir īpaši svarīgas gan imunitātes pro-, gan pretiekaisuma roku regulēšanā. No visām citokīnu superģimenēm interleikīns 6 (IL-6) un tā ģimenes locekļi neapšaubāmi uzrāda vislielāko citokīnu funkcionālās pleiotropijas (vairākas bioloģiskas darbības) un citokīnu redundances (kopīgas bioloģiskās darbības) pakāpi ar fizioloģiskām un patoloģiskām lomām, sākot no B. un T šūnu diferenciāciju un akūtās fāzes imunitāti, hematopoēzi un onkoģenēzi, audu un kaulu remodelāciju un reģenerāciju, un pat neironu un sirds un asinsvadu sistēmu agrīnu attīstību5–8. Kā tāda aberrantā IL-6 aktivitāte ir saistīta ar slimībām, tostarp sistēmisku iekaisuma reakcijas sindromu, hroniskiem imūnsistēmas traucējumiem, piemēram, pusmēness glomerulonefrītu, transplantāta atgrūšanu un transplantāta pret saimniekorganismu slimību, reimatiskām slimībām, tostarp reimatoīdo artrītu un juvenīlo idiopātisko artrītu, un limfoproliferatīvie stāvokļi, piemēram, Kāslmena slimība 4,
CISTANCHE UZLABOS NIeru/NIeru FUNKCIJU
Jaunie dati ir identificējuši galveno lomu IL-6 noraidīšanā pēcnieru transplantācija4 . Lai novērtētu IL-6 signālu nozīminieru allotransplantātsnoraidīšanu, ir vērtīgi vispirms kontekstualizēt signalizācijas kaskādi, jo IL-6 var signalizēt pa trīs atsevišķiem ceļiem un vadīt dažādus efektus atkarībā no konteksta un spēlējamā ceļa (1. att.) 5,6,10. Pirmais signalizācijas veids ir pazīstams kā klasiskā signalizācija (1.A att.), kurā IL-6 saistās ar membrānu saistītu IL-6 receptoru (mIL-6R), kam seko kompleksa veidošanās ar ar membrānu saistīts glikoproteīns 130 (gp130), lai aktivizētu pakārtoto signāla transdukciju un gēnu ekspresiju. Transsignalizācija (1.B att.) tā vietā notiek, kad IL-6R tiek atdalīts no šūnas membrānas 10 un atbrīvotais šķīstošais IL-6R (sIL-6R) uztver IL{{ 18}}, veido kompleksu ar membrānu saistītu gp130 un fosforilē intracelulāros signālu devējus. Tā kā ar membrānu saistītais gp130 ir visuresošs, bet mIL-6R nav, transsignalizācija var veicināt IL-6 reakciju šūnās, kuras parasti nereaģē uz IL-6 caur IL{{26} }/sIL-6R kompleksi, paplašinot IL-6 7 fizioloģiskās un patoloģiskās funkcijas. Svarīgi ir tas, ka gp130 šķīstošā forma dabiski pastāv apritē ar līdzīgu afinitāti pret IL-6/sIL-6R kompleksu kā ar membrānu saistītais gp130 un var darboties kā specifisks transsignalizācijas ceļa inhibitors ( 1.B att.) 11 . Trešā un pēdējā IL-6 signalizācijas forma ir transprezentācija, kur mIL-6R vienā šūnā uztver IL-6 un saistās ar membrānas gp130 citā šūnā (1. att. C). Visos šajos signalizācijas režīmos sekundāro vēstnešu, īpaši Janus kināzes (JAK) un signāla pārveidotāja un transkripcijas aktivatora (STAT) saimes fosforilēšana ir ļoti svarīga, lai panāktu IL-6-atkarīgos efektus 9,1.
Šeit mēs izmantojām cilvēka ģenētiku, lai noskaidrotu, vai IL-6/IL-6R mijiedarbības bloķēšana var sniegt terapeitisku labumunieru transplantācija. Šeit pētītie ar IL-6- saistītie viena nukleotīda polimorfismi (SNP) ir A > C polimorfisms IL6R (rs2228145; 1. D attēls) un G > C polimorfisms IL6 (rs1800795; 1. att.). IL6R SNP izraisa nepareizu polimorfismu, kā rezultātā palielinās sIL-6R koncentrācija cirkulācijā (inhibē transsignalizācijas ceļu), savukārt IL6 SNP izraisa paaugstinātu IL-6 ekspresijas līmeni, jo tas atrodas promotora reģions (veicina IL-6 signālu pārraidi pa visiem trim ceļiem) 12 . Citi pētījumi iepriekš ir novērtējuši šo IL6 variantu lomunieru transplantācija,asociāciju atrašana starp IL6 variantiem un transplantācijas iznākumu 13,14. Tomēr šie pētījumi lielākoties ir retrospektīvi, to statistiskās metodes ir ierobežotas, tie ir nepietiekami un tāpēc nepārliecinoši, jo analīzēs iekļauts ierobežots pacientu paraugu skaits. Šajā pētījumā mēs sniedzam izšķirošu atbildi par šo SNP ietekmi uz nieru transplantāciju.
Atslēgvārdi:nieru transplantācija; nieru slimība; nieru allotransplantāti; nieru; nieru slimība
Rezultāti
Biopsija pierādītas atgrūšanas noteicošie faktori pēc nieru transplantācijas.Kopā 1271nieru transplantācijadonoru un saņēmēju pāri tika iekļauti šajā pētījumā ar donora un saņēmēja īpašībām, kas norādītas tabulā. Vidējais novērošanas ilgums pēc transplantācijas bija 5,2 gadi ± 5.0 ar maksimālo novērošanas periodu 16,7 gadi. Novērošanas laikā 33,8 procentiem saņēmēju attīstījās ar biopsiju pierādīta atgrūšana. Pirmajā gadā 390 saņēmējiem attīstījās akūta biopsija pierādīta atgrūšana, savukārt 40 saņēmējiem pēc tam tika konstatēta biopsija pierādīta atgrūšana. No visiem novērtētajiem raksturlielumiem, ar biopsiju pierādītu noraidīšanu bija nozīmīgi saistītas šādas pazīmes (1. tabula); saņēmēja vecums, saņēmēja dzimums, siltais išēmijas laiks, kopējais HLA neatbilstību skaits un aizkavētas transplantāta funkcijas (DGF) rašanās.
Kopējais interleikīna-6 receptoru ģenētiskais variants aizsargā pret nieru alotransplantāta atgrūšanu.Lai identificētu attiecīgos ģenētiskos biomarķierus noraidīšanas kontekstā, mēs izpētījām, vai Asp358Ala variants IL6R (rs2228145 A > C, iepriekš rs8192284) ir saistīts ar biopsijā pierādītu noraidīšanu. Novērotā genotipa biežums recipientiem (n=1270; AA, 34,3 procenti; AC, 51,4 procenti; CC, 14,2 procenti) un donoriem (n=1269; AA, 35,6 procenti; AC, 5{{23) }},6 procenti ; CC, 13,6 procenti ) bija salīdzināmi (P=0,75). Tomēr IL6R polimorfisma biežums gan recipientiem, gan donoriem bija ievērojami augstāks, nekā ziņots 1000 genomu projektā (P < 0,0001),="" bet="" ne="" salīdzinājumā="" ar="" viņu="" pašu.="" eiropas="" kohorta="" (p="0.09)" 15.="" kaplan-meier="" izdzīvošanas="" analīzes="" parādīja,="" ka="" il6r="" polimorfisms="" donoram="" bija="" nozīmīgi="" saistīts="" ar="" samazinātu="" akūtas="" atgrūšanas="" risku="" novērošanas="" laikā="" (2.a="" att.;="" log-rank="" p="0.003)." pēc="" pilnīgas="" novērošanas="" ar="" biopsiju="" pierādītas="" atgrūšanas="" biežums="" bija="" attiecīgi="" 38,9="" procenti="" atsauces="" aa="" genotipa="" grupā,="" 32,8="" procenti="" heterozigotā="" ac="" genotipa="" grupā="" un="" 24,9="" procenti="" homozigota="" cc="" genotipa="" grupā.="" viendimensiju="" analīzē="" donora="" il6r="" snp="" bija="" saistīts="" ar="" riska="" attiecību="" 0,78="" uz="" c-alēli="" (95="" procenti="" -ti="" 0,67–0,90;="" p="0,001)" biopsijā="" pierādītai="" atgrūšanai.="" kaplan-meier="" izdzīvošanas="" analīzes="" attiecībā="" uz="" il6r="" polimorfismu="" donorā="" tika="" atkārtoti="" novērtētas="" pacientiem,="" kuri="" tika="" transplantēti="" 1990.="" un="" 2000.="" gados,="" jo="" imūnsupresija="" laika="" gaitā="" ir="" attīstījusies="" un="" tas="" varētu="" ietekmēt="" atgrūšanas="" risku.="" šajās="" apakšgrupās="" nozīmīgums="" saglabājās="" pacientiem,="" kas="" transplantēti="" 90. gados="" (s1="" attēls;="" p="0.016)," savukārt="">
1. attēls. IL-6 signalizācijas ceļu un pārbaudīto IL-6-saistīto SNP ilustrācija. IL-6 signalizācija var notikt trīs dažādos veidos. (Shematiskiem nolūkiem ir parādīts tikai viens no katra IL-6 receptora un gp130 molekulas.) (A) Klasiskā IL-6 signalizācija notiek, kad IL-6 tieši mijiedarbojas ar membrānu saistīto IL -6R (mIL-6R) un ar membrānu saistītais gp130 (mgp130), lai fosforilētu intracitoplazmas, gp130-specifiskus sekundāros vēstnešus. (B) IL-6 trans signalizācija tā vietā notiek, kad izšķīdinātais IL-6R (sIL-6R) uztver IL-6 un veido kompleksu ar mgp130, lai izgulsnētu intracitoplazmas sekundāros signālus. Proti, šo signālu pārraides veidu var kavēt izšķīdināts gp130 (sgp130), kam ir afinitāte tikai pret IL-6/sIL-6R kompleksu un kas to neitralizē, novēršot tā saistīšanos ar mgp130. (C) Visbeidzot, IL-6 trans prezentācija notiek, kad sekundārā šūna, kas satur mIL-6R, uztver IL-6 un nodod to mgp130 mērķa šūnā, lai stimulētu intracitoplazmas sekundāros signālus mērķa šūna. Lai novērtētu ar IL-6-saistīto SNP iespējamo lomunieru transplantācijarecipientu un donoru transplantācijanieres,mēs novērtējām saistību starp transplantāta izdzīvošanas rezultātiem un (D) attiecīgi IL6R SNP rs2228145 A > C un (E) IL6 SNP rs1800795 G > C. IL6R SNP izraisa missense mutāciju IL-6R, savukārt IL6 SNP atrodas promotora reģionā un izraisa intronisko variantu.
tendence tika novērota pacientiem, kas transplantēti 2000. gados (S1 attēls; P=0.067). Tomēr saskaņā ar mūsu iepriekšējiem rezultātiem IL6R SNP C-alēle donorā saglabāja aizsardzību pret biopsiju pierādītu atgrūšanu. Saņēmējiem Kaplan-Meier izdzīvošanas analīze neatklāja nekādas saistības starp IL6R SNP un noraidīšanu novērošanas laikā (2.B att.; log-rank P=0.15). Apakšgrupu analīze saņēmēja dzimumam vai donora tipam šos rezultātus nemainīja. Lai novērtētu, vai donora un saņēmēja neatbilstība IL6R SNP palielina ar biopsiju pierādītas noraidīšanas risku,nieru transplantācijapāri tika sadalīti četrās grupās atkarībā no C-alēles esamības vai neesamības donorā un saņēmējā. Lai gan Kaplan-Meier izdzīvošanas analīze atklāja ievērojamas transplantāta dzīvildzes atšķirības starp četrām grupām, donora IL6R SNP C-alēle joprojām ir saistīta ar zemāku BPAR risku (S2 attēls, P=0.004). . Tomēr C-alēles ietekme uz donoru bija lielāka saņēmējiem, kuriem pašiem nebija šīs alēles.
Tika veikta daudzfaktoru analīze, lai pielāgotos iespējamiem neskaidrības faktoriem (2. tabula), ieskaitot donora raksturlielumus (2. modelis), saņēmēja īpašības (3. modelis) un transplantācijas mainīgos (4. modelis). Koksa regresijas analīzē donora IL6R SNP joprojām bija nozīmīgi saistīts ar biopsijā pierādītu noraidīšanu neatkarīgi no iespējamiem traucēkļiem. Visbeidzot, mēs veicām daudzfaktoru analīzi ar pakāpenisku atlases procedūru, izmantojot visus mainīgos, kas saistīti ar noraidīšanu vienmainīgo analīzē (3. tabula). Galīgajā modelī tika iekļauts IL6R SNP donorā, saņēmēja vecums un dzimums, kopējais HLA neatbilstību skaits un DGF. Pēc korekcijas donora IL6R SNP bija saistīts ar atgrūšanu ar riska attiecību 0,73 uz C-alēli (95 procenti -CI 0.62–0). 17}}, P < 0.001).="" tādējādi="" šie="" rezultāti="" kopumā="" parāda,="" ka="" kopīgs="" funkcionālais="" variants="" il6r="" gēnā="" donorā="" ir="" saistīts="" ar="" mazāku="" biopsiju="" pierādītas="" akūtas="" atgrūšanas="" biežumu="">nieres transplantācija.
Bieži sastopams interleikīna-6 ģenētiskais variants ir nieru alotransplantāta atgrūšanas riska faktors.Tālāk mēs izpētījām, vai IL6 SNP pozīcijā -174 promotorā (rs1800795 G > C) ietekmē biopsijas biežumu.
3. attēls. Kaplan-Meier līknes izdzīvošanai bez noraidīšanasnieru allotransplantātiatkarībā no interleikīna-6 ģenētiskā varianta klātbūtnes donorā vai recipientā. Kumulatīvā izdzīvošana bez noraidīšanasnieru allotransplantātiatbilstoši interleikīna -6 polimorfisma (IL6) klātbūtnei promotora pozīcijā-174 (rs1800795 G > C) (A) donorā un (B) recipientā. Tika veikta apakšgrupu analīze donora dzimumam, un kumulatīvā dzīvildze bez atgrūšanas tika parādīta atbilstoši IL6 SNP klātbūtnei (C) vīriešu donoriem un (D) sieviešu donoriem. Log-rank tests tika izmantots, lai salīdzinātu ar biopsiju pierādītas noraidīšanas biežumu starp grupām.
4. attēls. Venna diagramma par donora, saņēmēja un pāru IL6 un IL6R ģenētisko statusu. 1271 donors- saņēmējsnieru transplantācijapāri tika analizēti, lai noteiktu interleikīna -6 (IL6) polimorfismu plkst.pozīcija -174 promotorā (rs1800795 G > C) un Asp358Ala variants IL-6 receptorā (IL6R, rs2228145 A > C, iepriekš rs8192284). Venna diagramma attēlo skaitunieru transplantācijapāri, pamatojoties uz to (A) IL6R genotipu vai (B) IL6 genotipu. Turklāt kombinētais IL6 un IL6R genotips ir attēlots (C) donorā un (D) saņēmējā.pierādīts noraidījums. Novērotās genotipa biežums recipientiem (n {{0}}: GG, 37,8 procenti; GC, 47,0 procenti; CC, 14,9 procenti) un donoriem (n=1260: GG, 33,1 procenti; AC , 49,3 procenti; CC, 16,8 procenti ) būtiski atšķīrās (P=0.049). Precīzāk, IL6 SNP C-alēle šķita vairāk izplatītanieresdonoriem. IL6 SNP frekvences gan saņēmējiem, gan donoriem būtiski neatšķīrās no tām, par kurām ziņoja 1000 genomu projekta Eiropas kohorta (attiecīgi P=0.09 un P=0.19) 15 . Kaplan-Meier analīze parādīja, ka ne donora IL6 SNP neietekmēja atgrūšanas risku (3.A att., P=0.58), ne IL6 SNP recipientā (3.B att., P=0). .70). Papildu analīzē arī IL6 SNP recipientā nebija saistīts ar biopsiju pierādītas atgrūšanas risku pirmajā gadā (P=0.19). Turklāt mēs novērtējām, vai donora un saņēmēja neatbilstība IL6 polimorfismam ietekmēja BPAR risku.Nieru transplantācijapāri tika sadalīti četrās grupās atkarībā no IL6 SNP C-alēles klātbūtnes vai trūkuma donorā un saņēmējā. Kaplana – Meiera dzīvildzes analīzes neatklāja būtiskas atšķirības dzīvilzē bez atgrūšanasnieru allotransplantātistarp četrām grupām (S2 attēls; P=0.24). Pēc tam mēs veicām dzimuma apakšgrupu analīzi, jo ir zināms, ka sekss ietekmē imunitāti,nieru slimībakā arī transplantācijas iznākums 16,17 . Kaplan-Meier līknes atklāja būtisku saistību starp IL6 SNP un atgrūšanu vīriešu donoriem (3.C att., P=0.015). Pēc pilnīgas novērošanas ar biopsiju pierādītas noraidīšanas biežums bija attiecīgi 27,1 procenti atsauces GG genotipa grupā, 37,3 procenti heterozigota GC genotipa grupā un 40,7 procenti homozigota CC genotipa grupā. Netika novērota saistība starp IL6 SNP un atgrūšanu sievietēm donorēm (3.D att., P=0.33).Vienfaktoru analīze atklāja, ka IL6 SNP vīriešu donoriem bija saistīts ar riska attiecību 1,31 uz C-alēli (95 procenti -TI 1,08–1,58; P=0,006) biopsijā pierādītai atgrūšanai. Tika veikta daudzfaktoru analīze, lai pielāgotos iespējamiem traucēkļiem (2. tabula), ieskaitot donora īpašības (2. modelis), saņēmēja īpašības.
5. attēls. Riska attiecības IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītājam apakšgrupās. IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītāja apakšanalīžu meža grafiks, kas parāda, ka biopsijā pierādītās noraidīšanas riska koeficienti bijakonsekventi dažādās apakšgrupās. Vienīgais izņēmums bija donoru izcelsmenieru allotransplantāti.Saistība starp IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītāju un noraidījumu netika novērotanieru transplantācijasno dzīviem donoriem. Netika novērota nozīmīga mijiedarbība starp IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītāju un dažādiem apakšgrupu klīniskajiem mainīgajiem. (3. modelis) un transplantācijas mainīgie (4. modelis). Koksa regresijas analīzē IL6 SNP vīriešu donoriem joprojām bija nozīmīgi saistīts ar biopsijā pierādītu noraidīšanu neatkarīgi no iespējamiem sajauktājiem. Tādējādi šķiet, ka IL6 funkcionālais variants vīriešu donoriem ir saistīts ar lielāku biopsijā pierādītas atgrūšanas biežumu pēcnieres transplantācija.
Ar biopsiju pierādītas noraidīšanas prognozēšana.Kopējā IL6 un IL6R SNP klātbūtne bija izplatīta (4.A, B att.), kā arī viena un tā paša SNP klātbūtne donorā un transplantāta pāra saņēmējā (4.C, D att.). Tāpēc mēs spekulējām, ka, novērtējot vairāku polimorfismu kombinēto klātbūtni ģenētiskā riska rādītājā donoru un saņēmēju pāros, varētu iegūt vairāk informācijas nekā polimorfismu pārbaude atsevišķi. Lai izpētītu IL6 un IL6R SNP kombināciju kā biopsiju pierādītas noraidīšanas prognozes, mēs izveidojām abu variantu ģenētiskā riska rādītāju gan donoriem, gan saņēmējiem. Katram SNP tika pievienots svars atbilstoši to bīstamības attiecībai, radot negatīvu rezultātu aizsargājošiem polimorfismiem un pozitīvu rezultātu bīstamiem. Kopumā ģenētiskā riska rādītājs, kas pārsniedz nulli, norāda uz bīstamāku SNP klātbūtni donorā-recipientā.
pāra un ģenētiskā riska rādītāji zem nulles norāda uz vairāk aizsargājošu SNP klātbūtni donora un saņēmēja pārī. Lai novērtētu IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītāja klīnisko pielietojumu, mēs sīkāk pētījām šīs ģenētiskās profilēšanas paredzamo vērtību. Ģenētiskā riska rādītājs bija nozīmīgi saistīts ar biopsiju pierādītu noraidījumu gan neapstrādātajā modelī (HR, 1,24; 95 procenti -TI 1,12–1,36; P < 0,001="" uz="" sd="" pieaugumu),="" gan="" pēc="" donora="" raksturlielumu="" pielāgošanas,="" recipienta="" īpašības="" un="" transplantācijas="" mainīgie="" lielumi="" (4.="">
Turklāt IL{{0}}/IL-6R ģenētiskā riska rādītāja riska attiecība apakšgrupu analīzēs bija konsekventa un saglabājās nozīmīga (5. att.), izņemot dzīviem donoriem pēc donora stratifikācijas. veids (P=0.22). Visu apakšgrupu ticamības intervāli uzrādīja būtisku pārklāšanos ar kopējo riska attiecību augšpusē, parādot konstatējumu konsekvenci apakšgrupās. Pēc tam mēs pārbaudījām, vai IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītājs bija labāks noraidīšanas prognozētājs nekā IL6R SNP donoram, izmantojot daudzfaktoru regresiju ar pakāpenisku atlasi uz priekšu (tabula). 5). Galīgajā modelī tika iekļauts IL{{10}}/IL-6R ģenētiskā riska rādītājs, bet donora IL6R SNP netika iekļauts. Pēc korekcijas donora ģenētiskā riska rādītājs bija saistīts ar biopsiju pierādītu atgrūšanu ar riska attiecību 1,27 uz SD pieaugumu (6. attēls, 95 procenti -CI 1,14–1,42; P < 0).{34="" }}01).="" tika="" novērtēta="" arī="" il-6/il-6r="" ģenētiskā="" riska="" rādītāja="" veiktspēja,="" lai="" prognozētu="" atgrūšanu="" (6.="" tabula).="" ģenētiskā="" riska="" rādītājam="" vien="" harela="" c="" bija="" 0,57="" (95="" procenti="" -ci="" 0,54–0,60).="" turklāt,="" pievienojot="" donora="" il6r="" snp="" modelim="" (c-statistika,="" 0.51;="" 95="" procenti="" -ci="" 0,488–0,539),="" il-6/il-6="" r="" ģenētiskā="" riska="" rādītājs="" ievērojami="" palielināja="" harela="" c="" vērtības="" (c-statistikas="" pieaugums,="" 0,054;="" 95="" procenti="" -ci="" 0,023–0,086;="" p="0,001)." pēc="" tam="" tika="" iekļauti="" papildu="" mainīgie,="" un="" uzlabojās="" diskriminējošā="" precizitāte,="" lai="" prognozētu="" modeļa="" transplantāta="" zudumu.="" modeļu="" harela="" c="" ar="" donora="" īpašībām="" un="" transplantācijas="" mainīgajiem="" ievērojami="" uzlabojās,="" pievienojot="" ģenētiskā="" riska="" rādītāju,="" savukārt="" modelī="" ar="" saņēmēja="" īpašībām="" tika="" novērota="" tikai="" tendence.="" turklāt="" il-6/il-6r="" ģenētiskā="" riska="" rādītājs="" būtiski="" uzlaboja="" modeļu="" paredzamo="" vērtību="" saskaņā="" ar="" integrēto="" diskriminācijas="" uzlabošanas="" indeksu="" (idi).="" pat="" pilnībā="" pielāgotajos="" modeļos="" idi="" vērtība="" bija=""> 1 procents, kas norāda, ka IL-6/IL-6R ievērojami uzlaboja noraidīšanas riska prognozi, ievērojami pārsniedzot pašlaik izmantotos klīniskos marķierus.
Diskusija
Noraidījums pēcnieres transplantācijajoprojām ir svarīgs allotransplantāta mazspējas cēlonis, kas lielā mērā ietekmē saslimstību 18–20 . Jaunu terapiju izmantošana, lai samazinātu alosensibilizāciju, ir ļoti svarīga, bet jaunu zāļu izstrādenierestransplantācija ir ierobežota 21 , tādēļ ir nepieciešams atkārtoti izmantot esošos pretiekaisuma līdzekļus, kas apstiprināti citām indikācijām. To vidū ir IL-6-bloķējošās terapijas, kas jau ir apstiprinātas autoimūno slimību ārstēšanai 22 . Cilvēka ģenētika piedāvā mērķa validācijas iespēju. Turklāt zāļu mērķi, kas iegūti, pamatojoties uz cilvēka ģenētiskajiem pierādījumiem, ir vairāk nekā divas reizes lielāka iespējamība, ka tiks iegūti apstiprināti terapeitiskie līdzekļi 23,24. Mūsu pētījuma galvenais atklājums ir būtiska saistība starp kopīgiem funkcionāliem IL6 un IL6R polimorfismiem donorā un biopsijā pierādītas atgrūšanas risku pēc tam.nieres transplantācija.Paplašinot šos atklājumus, tika pierādīts, ka ģenētiskā riska rādītājs, kas balstīts gan uz donora, gan saņēmēja SNP, ir galvenais biopsijā pierādītās noraidīšanas noteicošais faktors. Turklāt šis IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītājs ievērojami uzlaboja atgrūšanas riska prognozi, pārsniedzot pašlaik izmantotos klīniskos riska faktorus. Noslēgumā jāsaka, ka mūsu pētījums sniedz ģenētiskus pierādījumus par iespējamo efektivitāti, mērķējot uz IL-6 ceļunieru transplantācijaun mudina pētīt IL{0}} receptoru inhibitorusnieresdonoriem randomizētos kontrolētos pētījumos.
Cik mums zināms, mūsu pētījums ir pirmais, kas parāda, ka IL6R polimorfismi donorā ietekmē atgrūšanas risku pēcnieres transplantācija. Rezumējot, mēs noskaidrojām, ka katrai donora C-alēles kopijai relatīvais ar biopsiju pierādītas akūtas atgrūšanas risks samazinājās par 27 procentiem (90 procenti -TI 14–38 procenti). Saskaņā ar mūsu rezultātiem viena un tā pati alēle (rs2228145-C) ir saistīta ar samazinātu reimatoīdā artrīta un koronārās sirds slimības risku25,26. Nesenā Bovijna un kolēģu pētījumā konstatēts, ka šis IL6R variants bija saistīts arī ar mazāku SARS-CoV-2 infekcijas risku, kā arī mazāku hospitalizācijas risku COVID-19 27 dēļ. Pētījumi par šī varianta funkcionālajām sekām ir palīdzējuši izprast molekulāros mehānismus, ar kuru palīdzību šis IL6R genotips aizsargā pret plašu slimību spektru28–30. Šis nesinonīmais polimorfisms veido vairāk nekā 50 procentus no kopējās sIL-6R līmeņa variācijas, un katra C-alēles kopija palielina sIL- 6R līmeni plazmā. Lai gan šī šī IL6R varianta ietekme uz sIL-6R līmeni var šķist pretrunīga, turpmāka izpēte atklāja, ka C-alēle vienlaikus samazina ar membrānu saistīto IL-6R uz monocītiem un CD4 plus T šūnām (līdz 28 procentu samazinājums uz C-alēli) 30 . Svarīgi ir tas, ka samazināta IL-6R virsmas ekspresija uz leikocītiem izraisīja IL-6 uztveres samazināšanos, ko novēroja galveno transkripcijas faktoru STAT1 un STAT3 fosforilēšanās samazināšanās pēc stimulācijas ar IL-6 30 . Papildu in vivo pierādījumi par šī IL6R varianta pretiekaisuma iedarbību ir pierādīti saistībā ar zemāku C-reaktīvā proteīna, fibrinogēna, IL-8 un TNF- līmeni dažādos pētījumos26–28,31. Mūsu analīze pārliecinoši parāda, ka IL6R variants ir saistīts ar zemāku riskunieru allotransplantātsnoraidījums. Mēs domājam, ka šis atgrūšanas ātruma samazinājums ir saistīts ar sIL-6R pastiprināšanos kopā ar cirkulējošo, endogēno, šķīstošo gp130, kas darbojas kā buferis, lai neitralizētu IL-6 (1.B attēls), tādējādi nomācot iekaisumu. kā arī samazina allosensibilizāciju, nemainīgi samazinot alotransplantāta atgrūšanas risku.
CISTANČE UZLABOS NIeru/NIeru mazspēju
IL6 ~ 174G/C polimorfisma (rs1800795) ietekme uz transplantācijas pacientu atgrūšanas risku iepriekš ir pētīta vairākos pētījumos13,32–36. Nesen veiktā septiņu pētījumu, tostarp 369 gadījumu un 679 kontroles, metanalīzē secināts, ka saņēmēja IL6 genotips nebija būtiski saistīts ar atgrūšanu, turpretim donora IL6 genotipiem tika novērota tendence 14 . Mūsu transplantācijas grupā, kurā bija 1271 pacients, mēs arī neatradām šādu saistību ar saņēmēja IL6 genotipu. Tomēr, veicot donora dzimuma apakšgrupas analīzi, mēs novērojām nozīmīgu saistību starp IL6 SNP un vīriešu donoru atgrūšanu. Šī ar dzimumu saistītā atšķirība varētu izskaidrot arī iepriekšējo pētījumu pretrunīgos rezultātus. Līdzīgi kā mūsu novērojumos, citi ir ziņojuši par skaidru dzimuma dimorfismu saistībā ar šo IL6 polimorfismu ar neaizsargātību pret slimībām37–39. Kopumā asociācijas ar šo IL6 variantu bija spēcīgākas un pārsvarā tika konstatētas vīriešiem. Tāpēc mūsu pētījums uzsver, ka dzimums ir jāņem vērā transplantācijā, kā arī citokīnu terapijā. Turklāt saskaņā ar mūsu rezultātiem šī IL6 SNP C-alēle ir saistīta arī ar paaugstinātu reimatoīdā artrīta un sirds un asinsvadu slimību risku jaunākajās metaanalīzēs 40–42 . Sākotnēji tika teikts, ka rs1800795 G-alēle paaugstina IL-6 līmeni, tomēr nesenais darbs atklāja, ka šī SNP C-alēle izraisa augstāku IL-6 ekspresiju fibroblastos, bet ne leikocītos. . Brulle al. konstatēja dažādus kinētiskus profilus IL-6 pieaugumam pēc operācijas, pamatojoties uz IL6 genotipiem, kas varētu izskaidrot iepriekšējos pretrunīgos rezultātus44. Tomēr kopējais IL-6 pieaugums bija izteiktāks CC homozigotiem. Papildu in vivo pierādījumus par C-alēles pro-iekaisuma iedarbību liecina saistība ar augstāku IL-6, C-reaktīvā proteīna un fibrinogēna līmeni serumā vairākos pētījumos 45–47. Kopumā mūsu pētījums papildina arvien vairāk pierādījumu, kas saista vietējo IL-6 ražošanu ar saņēmēju alosensibilizācijunieru allotransplantāti48,49
Tocilizumabs, humanizēta monoklonāla antiviela, kas vērsta uz IL-6R, ir novērtēta akūtas tremes, hroniskas ABMR un transplantāta glomerulopātijas ārstēšanai pēcnieru transplantācija50–52 . Sākotnēji I/II fāzes pētījums tika veikts 10 pacientiem pirmsnieres transplantācijakas nereaģēja uz desensibilizāciju ar intravenozu Ig un rituksimabu 50 . Tocilizumabs kombinācijā ar intravenozo Ig izraisīja ievērojamu DSA līmeņa pazemināšanos un šķita drošs. Pieci pacienti tika transplantēti, un sešu mēnešu protokola biopsijas neuzrādīja akūtu atgrūšanu vai transplantācijas glomerulopātijas. Pēc tam tika veikts atklāts viena centra pētījums, kurā piedalījās 36 pacienti ar hronisku ABMR, kas nereaģēja uz intravenozo Ig un rituksimabu51. Pacients unnieru allotransplantātsizdzīvošana bija attiecīgi 91 procenti un 80 procenti pēc 6 gadiem, un tika konstatēts, ka tas ir labāks par vēsturisko kontroli. Turklāt stabilizācijanieru funkcijabija redzams pēc 2 gadiem. Visbeidzot, tocilizumabs tika pētīts akūtas atgrūšanas ārstēšanai novērošanas pētījumā, kurā piedalījās 7nieru transplantācijasaņēmēji 52 .Nieru darbībastabilizējās vai uzlabojās visiem pacientiem, bet vienam pacientam bija iespējama paaugstinātas jutības reakcija, bet citam pacientam attīstījās citomegalovīrusa ezofagīts. Pašlaik tiek veikts daudzcentru randomizēts kontroles pētījums53. Ņemot vērā, ka IL-6 inhibitori jau tiek pārbaudīti klīniskajos pētījumos, kāda tad ir ģenētisko pētījumu nozīme? Mūsu pētījuma rezultāti sniedz svarīgus apsvērumus šo klīnisko pētījumu izstrādē, identificējot šādas galvenās problēmas saistībā ar mērķauditorijas atlasi pēc IL-6nierutransplantācija: (1) darbības vieta; 2) dzimumu atšķirības; un (3) pacienta atlase. Mēs noskaidrojām, ka IL-6 signalizācijas ceļa ģenētiskie polimorfismi donoriem, bet ne saņēmējiem, bija saistīti ar biopsijā pierādītas atgrūšanas risku pēcnieres transplantācija. Šie rezultāti liecina, ka saņēmējā necirkulē IL-6, bet gan donora vietējā IL-6R izteiksme un IL-6.nieresir galvenie nieres transplantācijas aloimunitātes virzītāji. Tas, iespējams, liek domāt, ka terapijai, kuras mērķis ir bloķēt IL-6/IL-6R mijiedarbību, jākoncentrējas uz donoru.niereskā darbības vietu. Visbeidzot, šajā pētījumā mēs izveidojām IL-6/IL-6R ģenētiskā riska rādītāju, pamatojoties uz diviem donora un saņēmēja SNP. No prognostiskā viedokļa ģenētiskā riska rādītājs varētu būt interesants, lai identificētu pacientus, kuriem ir allografta atgrūšanas risks. Turklāt ģenētiskā riska rādītājs varētu būt interesants, lai identificētunieru transplantācijapāriem, kuriem noderētu anti-IL-6 ārstēšana. Tomēr, ņemot vērā mūsu prognozēšanas modeļa diskriminējošo veiktspēju, pirms to izmantošanas klīniskajā praksē jāpievieno papildu faktori (piemēram, IL6 un IL6R haplotipi), lai palielinātu prognozēšanas veiktspēju.
CISTANČE UZLABOS NIERU/NIeru SLIMĪBU
Ir jāņem vērā vairāki mūsu pētījuma ierobežojumi. Pirmkārt, sagaidāms, ka šajā pētījumā konstatētās asociācijas būs cēloņsakarības. Tomēr, tā kā mūsu pētījums ir perspektīvs, bet novērojams, to nevar pierādīt ar mūsu rezultātiem. Otrkārt, mēs veicām tikai atsevišķu funkcionālo SNP analīzi, nevis IL6 un IL6R haplotipus. Treškārt, IL-6 un sIL-6R mērījumi mūsu grupā netika veikti seruma paraugu trūkuma dēļ, un tāpēc genotipus nevarēja saistīt ar sistēmiskiem līmeņiem. Ceturtkārt, mēs nevarējām izpētīt, vai saistība starp IL6 un IL6R variantiem TCR vai ABMR atšķīrās, jo gadu gaitā DSA noteikšanai trūka standartizēta testa. Visbeidzot, histopatoloģiskajām diagnozēm tika izmantota Banff 2007 klasifikācija, kas ir vecāka versija. Kopš 2007. gada Banfa klasifikācija ir vairākkārt pārskatīta, galvenokārt saistībā ar ABMR kritērijiem. C4d negatīvā ABMR ieviešana Banff 2013 klasifikācijā ir būtiski ietekmējusi ABMR diagnožu skaitu kopumā54. Attiecīgi mūsu kohortā trūkst C4d negatīvu ABMR gadījumu. No otras puses, mūsu pētījuma galvenās priekšrocības ir lielais izlases lielums, robustā statistiskā analīze (ieskaitot apakšgrupu analīzi) un stingrs un klīniski nozīmīgs galapunkts, proti, biopsija pierādīta noraidīšana. Noslēgumā mēs noskaidrojām, ka IL6 un IL6R varianti donorā ir saistīti ar biopsiju pierādītas atgrūšanas risku pēcnieru transplantācija.Šie atklājumi norāda uz iespējamo IL-6 signālu mērķauditorijas atlases efektivitātinieru transplantācija. Ir nepieciešami pastāvīgi, randomizēti kontrolēti pētījumi ar IL-6 vai IL-6R inhibitoriem, lai noteiktu labākos iestatījumus, tostarp intervences laiku un pacientu atlasi, kuros šie līdzekļi varētu būt efektīvi.